3-1-现场检测或样品采集操作-1(1)

现场检测

(一)噪声测定仪（dB，分贝）（主要用于测定公共场所和环境噪声）

1.现场测定所需设备：

1)数字声级计

2)现场采样原始记录单

2.现场测定：

1)仪器校准：首先安装好电池，将仪器测定声级计按钮设定为A声级，将电源开

关打开，用标准声校准器校准仪器。

2)按相关标准设置采样点和采样高度，待稳定后读数。（大于100 m2的公共场所，

据声源中心（或一侧墙壁）画一直线至对侧墙壁中心，在此直线上均匀分布3

点为监测点；小于100 m2的公共场所在中央区一点作为监测点）

3)测量完毕将开关推至OFF档；

3.注意事项：外界环境比较恶劣时可以使用风罩保护传声器

4.读数方法：

1)稳态与似稳态噪声用快档（FAST）读取指示值或平均值；

2)周期性变化噪声用慢档（SLOW）读取最大值并同时记录仪器时间变化特性；

3)无规则变化用慢档（SLOW）：每隔5秒度一个A声级，每个测量点要连续读

取100个数据代表该测点的噪声分布。

5.现场记录单的填写：

将读数填在现场记录单上，记录单上还应记录采样地点、采样时间、所用仪器型号

和编号等，测定结束后将仪器收好。

6.FAST—瞬间噪声值—稳态噪声值

SLOW—平均噪声值—周期性噪声值

HOLD—最大噪声值—最大噪声值

(二)风速仪（m/s，米/秒）（主要用于测定公共场所、通风管道、通风口、通风过道及室

内外风速）

1.现场测定所需设备：

1)热球式电风速计；

2)数显式风速计；

3)现场记录单。

2.现场测定：

1)测点选择：按相关标准设置采样点和采样高度。

2)用前装好1号干电池，注意电池的正负极；

3)使用前观察电表的指针是否指于零点，如有偏移可轻度调整电表上的机械电螺

丝，使指针回到零点；

4)校正开关置于“断”的位置；

5)将测杆插在插座上，测杆垂直向上放置，螺丝压紧，使探头密封，校正开关至

于“满度”的位置，慢慢调整满度粗调和满度细调两个旋钮，使指针指在满刻

度的位置；

6)校正开关至于“零”位，慢慢调整零位粗调、零位细调两个旋钮，使电表指于

零刻度的位置；

7)测定时轻轻拉动螺塞，使测杆探头露出，探头的摆点面对风向，从电表上读出

风速的大小；

8)测定完毕后校正开关至于“断”的位置。

3.注意事项：在进行调零或调满时，测杆必须垂直放置；测定时感应器位于呼吸带位

置，如在室内环境监测时，避开风口。

4.现场记录单的填写：将读数填在现场记录单上，记录单上还应填写采样地点、采样

时间、所用仪器型号和编号等，测定结束后将仪器收好。

(三)照度仪（lx，勒克斯）（主要用于测定公共场所、教室等人工照明照度和昼夜照度）

1.现场测定所需设备：

1)数字式照度计；

2)现场记录单。

2.现场测定：

1)照度计：两成下限不大于1lx。上限不小于5000lx。公共场所室内照度仪器示

值误差不超过±8%，室内招募测定仪器示值不超过±4%。

2)测点选择：按相关标准设置采样点和采样高度。（测定高度为地面以上

80-90cm；一般大小的房间在房间的对角线或呈梅花式均匀分布取5个点，影

剧院、商场等大面积场所的测量可用等距离布点法，每100m2布10个点为宜）

3)测定时间要求：测定前白炽灯至少开5min，气体放电灯至少开30min。

4)首先安装好电池；

5)将测光探头连接线插进输入IN的插孔，光敏盖应处于盖严状态，打开开关检查

示值零点；

6)打开光敏盖，将测光探头的光敏面至于待测位置，将保持HOLD键至于右侧；

7)当量程自动选位稳定后，即可直接读数，此时液晶显示片上的数值乘于100即

为照度值，单位为lx，如欲保持该测量值可将保持键拨向左侧位置，读数完毕

将HOLD键拨回右侧；

8)盖上光敏盖，关闭开关，拔掉插头。

3.现场记录单的填写：将读数填在现场记录单上，记录单上还应填写采样地点、采样

时间、所用仪器型号和编号等，测定结束后将仪器收好。

(四)紫外辐照计（μW/cm2，微瓦/厘米2）

1.现场测定所需设备：

1)紫外辐照计；

2)现场记录单。

2.现场测定：

1)测点选择：普通30W直管紫外线灯在开灯5min后，距离灯管1m处测定，

显示值即为辐照强度，试用中的紫外线灯的辐照强度不得低于70μW/cm2。

2)安装电池；将探头和仪器正确连接；

3)打开电源，或按下“开关”按钮，液晶显示屏显出数字；根据仪器是否要调零；

4)检查换挡开关事都在×1档；

5)取下探头保护盖，选择合适的量程（选×1档时，显示“1”即超量程，）；

6)待显示值稳定后读数（可按下HOLD键）；

7)关闭电源，盖上探头盖。

3.现场记录单的填写：将读数填在现场记录单上，记录单上还应填写采样地点、采样

时间、所用仪器型号和编号等，测定结束后将仪器收好。

样品采集

环境样品

(一)水样品采集

根据所需测的水的指标不同选择以下不同的采样方式。

1.用于测定一般理化指标的水样采集：

?水温、臭和味、色度、浑浊度、电导率和溶解性总固体、pH值、总硬度、酸度与碱度

1)备好采样容器（胶水壶）、工具（试剂瓶及试剂，酒精灯，洗耳球，吸管）和冷

藏箱等；

2)打开水龙头，放水约15min；

3)用龙头水洗涤采样容器和盖3次以上；

4)采集需要体积的水样（约3-5L），加盖，填写采样记录，挂上或贴上样品标签

置于冷藏箱中。

2.用于测定挥发性酚类和氰化物的水样采集：

1)备好采样容器（玻璃瓶）、工具（试剂瓶及试剂，酒精灯，洗耳球，吸管）、冷

藏箱等；

2)打开水龙头，放水约15min；

3)用龙头水洗涤采样容器和盖3次以上；

4)采集0.5-1L水样，加入0.5-1g氢氧化钠（NaOH），使pH值≥12，加盖混

匀；（如有游离余氯，加亚砷酸钠）

5)填写采样记录，挂上或贴上样品标签。

3.用于测定金属的水样采集：

1)备好采样容器（胶水壶）、工具（试剂瓶及试剂，酒精灯，洗耳球，吸管）和冷

藏箱等；

2)打开水龙头，放水约15min；

3)用龙头水洗涤采样容器和盖3次以上；

4)采集0.5-1L水样，加入比重为1.42g/ml硝酸（HNO3），约1-1.5ml，使pH

值≤2，加盖混匀；（加硝酸是为了保证溶液呈酸性，防止水中金属沉淀或吸附

在容器表面）

5)填写采样记录，挂上或贴上样品标签。

4.用于测定耗氧量的水样采集：

1)备好采样容器（玻璃瓶）、工具（试剂瓶及试剂，酒精灯，洗耳球，吸管）、冷

藏箱等；

2)打开水龙头，放水约15min；

3)用龙头水洗涤采样容器和盖3次以上；

4)采集0.5-1L水样，按照每升水样加入0.8ml比重为1.84g/ml浓硫酸

（H2SO4），加盖混匀；

5)填写采样记录，挂上或贴上样品标签，冷藏。

5.用于测定有机物的水样采集：

1)备好采样容器（棕色玻璃瓶）、工具（试剂瓶及试剂，酒精灯，洗耳球，吸管）、

冷藏箱等；

2)打开水龙头，放水约15min；

3)用龙头水洗涤采样容器和盖3次以上；

4)采集水样充满容器，加盖密封；

5)填写采样记录，挂上或贴上样本标签置于冷藏箱中。

6.用于测定微生物的水样采集：

1)备好采样容器（灭菌玻璃瓶，瓶中加入适量（每125ml水样加入0.1mg）的

硫代硫酸钠）、工具（试剂瓶及试剂，酒精灯，洗耳球，吸管）、冷藏箱等；

2)打开水龙头，放水约15min；（加入硫代硫酸钠是为了去除残留余氯）

3)将酒精灯置于龙头旁制造无菌环境；

4)采集水样充满容器2/3，加盖密封；

5)填写采样记录，挂上或贴上样品标签，冷藏。

(二)空气样品采集

采集空气样品是测定空气中污染物的第一步，直接关系到测定结果的可靠性。

空气中污染物采集方法包括：

①直接取样法；②液体吸收法和固体吸附法；③滤膜采样法；④自然沉淀法

●采样点数量：小于50cm2的房间1-3个点，50-100 cm2的房间3-5个点，100 cm2

以上的房间至少5个点。

●采样高度：呼吸带高度，相对高度0.5-1.5cm。

1.直接取样法：用于采集空气中的一氧化碳和二氧化碳。

1)采样所需设备：

a)聚乙烯薄膜采气袋或铝箔复合薄膜采气袋，

均应进行密闭性检查，采集二氧化碳样品时需使用铝箔复合薄膜采气袋，

一氧化碳样品采集时两种采集袋均可使用；

b)二联球；

c)标签纸、记号笔；

d)采样记录单。

2)气袋密闭性检查方法：以检查铝箔复合薄膜采气袋为例，聚乙烯薄膜采气袋密

闭性检查方法与此相同：

a)用二联球将采气袋充足气后夹紧进气口；

b)将充足气后的采气袋置于水中，进气口管应在水面外观察水面；

c)检查结果，盆中的水面不应冒气泡；

3)样品采集：以采集空气中二氧化碳为例演示整个采集过程：

a)样品采集前应用现场空气冲洗采气袋；

b)冲洗采气袋的方法：在选定的地点将橡胶二联球的接口一端朝外，另一端

与采气袋连接，在呼吸带高度处反复捏挤二联球至采气袋充足气，双手轻

揉气袋至气体混均，然后从采气袋进气口对角方向折叠采气袋放掉空气，

由此反复冲洗3-5次即可；

c)冲洗完毕用二联球再次采集现场空气至气袋膨胀后密封进样口；

4)样品编号：采集样品后取标签纸贴在采气袋明显处编号。

5)采样记录单的填写：

a)采样记录单应在现场进行填写，记录单上的样品编号应与采气袋上编号相

同，写明采样地点和时间；

b)采样结束后，将采好样品的气袋放入采样箱或大的口袋中，以免刮破，尽

快送回实验室分析。

2.液体吸收法和固体吸附法

液体吸收法用于采集空气中的甲醛、氨、臭氧、二氧化硫、二氧化氮。

固体吸附法用于采集空气中苯系物和挥发性有机化合物（TVOC）。

1)采样所需设备：

a)大气采样器；

b)三脚架；

c)液体吸收管（包括大泡吸收管，多孔波板吸收管）；

d)固体吸附管（包括活性炭管和Tenax采样管）；

e)缓冲瓶；

f)温湿度计；

g)空盒气压表；

h)采样记录单、记号笔。

液体吸收法

以采集空气中甲醛为例演示整个采样过程，其他污染物采集中的不同点在整个

演示流程结束后说明。

2)采集样品前的准备：

a)分别将大气采样器和吸收管从采样箱取出；

b)检查大泡吸收管中吸收液有无遗洒；

c)将大气采样器开关拨至直流，打开电源，按下采样键，检查电池电量，如

显示红灯表明欠压，仪器需要充电；

d)三脚架放置预先选好的采样点位置，调至呼吸带高度，将大气采样器固定

在三脚架上；

e)将两个采样器支架分别插在大气采样器侧面，放好两支采样管，取下橡胶

管；

f)用胶管将缓冲瓶侧方口与大气采样器连接，大泡吸收管侧方口与缓冲瓶上

方口相接，大气采样器与采样管连接时不要与进气口连接，否则开机后吸

收液倒吸采样器内造成腐蚀，采样时尽量将缓冲瓶垂直放置。

3)样品采集：

a)采样时打开电源开关，时间显示60min，根据需要设定采样时间，分别用

+1和—1键进行调整，按住这两个键可快速进行；

b)时间设定后按下采样键，仪器开始工作，立即按要求调节到所需采样流量，

时间到后自动停止，时间显示为0，蜂鸣器发出报警声，按复位键蜂鸣器

停止发声；

c)用橡胶管将采样管的两个接口密封，取下采样管；

d)将采样管编号放入采样箱内；

e)关闭采样器电源开关，收好连线等设备，将仪器放入采样箱内。

4)采样记录单的填写：现场填写采样记录单，内容包括采样地点、采样时温度、

大气压、采样时间和采样器流量，采样管编号，采样结束后尽快送回实验室分

析。

其他污染物的采集：采集空气中氨时与甲醛采集方法相同；采集空气中二氧化硫时用单支透明多孔波板吸收管采样；采集空气中二氧化氮时用单支棕色多孔波板吸收管采样；采集空气中臭氧时用串联好的两只棕色多孔波板吸收管采样。

注意：1、多孔波板吸收管与大气连接时吸收管球形上方出口应与缓冲瓶上方口相接，不要与进气口连接，否则开机后吸收液倒吸采样器内造成腐蚀；2、采样时尽量将缓冲瓶垂直放置。

固体吸附法

（以采集空气中苯系物为例，演示整个采样过程，挥发性有机物的采集不同点

在整个演示流程结束后说明）

2)采集样品前的准备：

a)将大气采样器的开关拨至直流，打开电源，按下采样键，检查电池电量，

如显示红灯表明欠压，仪器需要充电；

b)三脚架放置预先选好的采样点位置，调至呼吸带高度，将大气采样器固定

在三脚架上；

c)取出活性炭管，如管的两端处于密封状态，则用砂轮将管的两端割断；

d)将两只活性炭管分别与采样器相连，与地面垂直放置，如采样管上已标明

箭头，则将箭头指向的一端与采样器相连，采样管上未标明箭头，采样后

应标明进气方向；

3)样品采集与采样记录单的填写同液体吸收法。

4)采集空气中挥发性有机化合物时用Tenax采样管，应标明进气方向，采样结束

后尽快送回实验室分析。

3.滤膜采样法

空气中粉尘样品的采集往往采用滤膜法采样，本方法主要用于职业环境空气中

粉尘样品的采集。

1)采样所需设备：

a)粉尘采样器；

b)三脚架；

c)滤膜；

d)温湿度计；

e)空盒气压表；

f)记号笔；

g)采样记录单。

2)采集样品前的准备：

a)分别将粉尘采样器和滤膜从采样箱中取出，将采样器开关拨至直流，打开

电源，按下采样键，检查电池电量，如显示红灯表明欠压，仪器需要充电；

b)将三脚架放至预先选好的采样点位置，调至呼吸带高度，将采样器放在三

脚采用架上；

c)打开采样夹，用镊子将称好重量的滤膜取出，放至采样夹中，拧紧，固定

于采样头中，安装至采样器侧面，注意滤膜毛面应朝外；

3)样品采集：

a)采样时打开电源开关，根据需要设定采样时间，分别用+1和—1键进行调

整，按住这两个键可快速进行；

b)时间设定后按下采样键，仪器开始工作，立即按要求调节到所需采样流量，

时间到后自动停止，时间显示为0，蜂鸣器发出报警声，按复位键蜂鸣器

停止发声；

c)待采样停止后取下滤膜，放入干净的密封袋中，编号，放入采样箱内；

d)关闭大气采样器电源，收好连线等设备，将仪器放入采样箱内。

4)采样记录单的填写：现场填写采样记录单，内容包括采样地点、采样时温度、

大气压、采样时间和采样器流量，滤膜编号，采样结束后尽快送回实验室分析。

4.自然沉淀法

室内空气中菌落总数的采集目前使用最多的为自然沉降法。（手术室、新生儿病

房）

1)采样所需设备：

a)平皿；

b)记号笔；

c)采样记录单

2)采样方法：按相关标准设置采样点和采样高度，将营养琼脂平板至于采样点处，

打开皿盖暴露5min，盖上皿盖，翻转平板，写上编号，放回平皿筒。

3)采样记录单的填写：填写采样记录单，还应记录采样地点、采样时间、采样编

号等，采样结束后尽快送回实验室分析。

(三)公共用品样品采集

涂抹是公共用品微生物样品采集的常用方法之一，公共卫生执业医师考核的样品包括：茶具、餐具；毛巾和枕巾、枕套；床单和被罩等卧具；脸盆、脚盆和浴盆；拖鞋；理发用具六类不同公共卫生用品的采样。

1.采样所需设备：

1)灭菌试管（内装10ml生理盐水）；

2)100ml无菌烧瓶（内装50ml生理盐水）；

3)250ml无菌烧瓶（内装125ml生理盐水）；

4)无菌棉拭子；

5)灭菌剪刀；

6)灭菌5cm*5cm规格板；

7)酒精灯；

8)酒精棉球；

9)工作服（白大衣、帽子、口罩）；

10)记号笔；

11)灭菌镊子；

12)采样记录单。

2.采集样品前的准备：

1)穿好白大衣、戴好帽子及口罩；

2)点燃酒精灯；

3)手消毒；

3.茶具、餐具微生物的采样方法：

1)打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口；

2)随机抽取清洗消毒后准备使用的茶具或餐具，用灭菌生理盐水湿润棉拭子，在

茶具或餐具与口唇接触处1-1.5cm高度的内外缘涂抹一周；

3)用灭菌剪刀剪去棉签手接触部分，将棉拭子放入10ml生理盐水中；

4)用酒精灯烧灼试管口盖好试管盖；

5)试管上标明样品编号，填写采样记录单。

4.毛巾、枕巾（套）微生物的采样方法：

1)打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口；

2)随机抽取清洗消毒后准备使用的毛巾、枕巾（套），用灭菌生理盐水湿润棉拭子，

在毛巾或枕巾（套）对折后两面的中央各25 cm2面积上在灭菌规格板里用力

均匀涂抹5次；

3)用灭菌剪刀剪去棉签手接触部分，将棉拭子放入10ml生理盐水里；

4)用酒精灯烧灼试管口盖好试管盖；

5)试管上标明样品编号，填写采样记录单。

5.床单、被罩等卧具微生物的采样方法：

1)打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口；

2)随机抽取清洗消毒后准备使用的床单或被罩等物品，用灭菌生理盐水湿润棉拭

子，分别在床单或被罩两端的中间25 cm2处以及床单或被罩中央部位25cm2

面积上在灭菌规格板里用力均匀涂抹5次；

3)用灭菌剪刀剪去棉签手接触部分，将棉拭子放入10ml生理盐水里；

4)用酒精灯烧灼试管口盖好试管盖；

5)试管上标明样品编号，填写采样记录单；

6)注意浴巾或浴衣裤采样时可随机选择某部位25cm2面积上用力均匀涂抹5次。

6.脸（脚）盆、浴盆微生物的采样方法：

1)打开100ml无菌烧瓶的烧瓶盖，用酒精灯烧灼瓶口；

2)选择在脸（脚）盆的内壁1/2-1/3高度相对两侧壁采样，采样时用两支浸有无

菌生理盐水的棉拭子分别在两个采样点的规格板25cm2内来回涂满整个方格，

并随之转动棉拭子；

3)用灭菌剪刀剪去棉签手接触部分，将涂抹脸（脚）盆的两个棉拭子一并放入50ml

生理盐水中；

4)用酒精灯烧灼瓶口盖好瓶盖；

5)瓶壁上标明样品编号，填写采样记录单。；

6)注意浴盆采样时应在盆内四壁及盆底梅花状布点，用5支浸有无菌生理盐水的

棉拭子分别在5个采样点的规格板25cm2内来回均匀涂满整个方格，并随之转

动棉拭子，用灭菌剪刀剪去棉签手接触的部位后，将涂抹浴盆的五个棉拭子一

并放入装125ml生理盐水的烧瓶中。

7.拖鞋中微生物的采样方法：

1)打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口；

2)将无菌棉拭子蘸取生理盐水，在每只拖鞋鞋面与脚趾接触处25cm2面积上有顺

序均匀涂抹3次，一双拖鞋为一份样品；

3)用灭菌剪刀剪去棉签手接触部分，将棉拭子放入10ml生理盐水里；

4)用酒精灯烧灼试管口盖好试管盖；

5)试管上标明样品编号，填写采样记录单。；

8.理发用具微生物的采样方法：

1)打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口；

2)将蘸有无菌生理盐水的棉拭子在理发刀（剪）、修脚工具的两个侧面各涂抹一次，

两个刀或两个剪为一份样品；

3)用灭菌剪刀剪去棉签手接触部分，将棉拭子放入10ml生理盐水里；

4)用酒精灯烧灼试管口盖好试管盖；

5)试管上标明样品编号，填写采样记录单。

6)注意：推子采样时，在其前部上下均匀各涂抹三次，一个推子为一份样品。

9.采样原始记录的填写：填写现场采样单，内容包括采样单位、样品名称、样品编号、

采样位置、采样时间。采样结束后4h内送回实验室分析。

食品样品（散装食品（固态、液态）的微生物样品采集）

主要包括：现场采样所需物品的准备；样品种类；采样方法；采样数量；采样标签；送检。

1.现场采样所需物品的准备：在进入采样样品现场前，应准备好食品采样所需物品，

主要包括：

1)采样工具（酒精灯、酒精棉球、灭菌棉拭子、消毒纱布、镊子、长柄勺、吸管、

洗耳球、剪刀、火柴、皮筋、记号笔、标签纸等）；

2)样品容器（盛装食品的样品容器有无菌塑料袋、广口瓶、运送培养基试管、灭

菌平皿、一次性小试管、样品冷藏设施等）；

3)防护用品（白色工作服或隔离衣、医用手套、口罩、帽子等）；

4)取证工具（照相机、摄像机、录音机、采样前需要查阅的其他相关参考资料）。

2.样品的种类：食品样品依包装形式的不同可分为预包装食品和散包装食品：

1)预包装食品：经预先定量包装或装入、灌入容器中向消费者直接提供的食品；

2)散装食品：凉菜（含沙拉、果盘、糕点、热加工、冷加工、裱花蛋糕、生食半

生食海产品、冷冻饮品、鲜榨果蔬汁饮料、盒饭等）。

3.采集方法：在食品样品采集的全过程中应当按照国家标准规定中的规范方法和要求

进行，其内容详见：GB/T4789.1-2003(食品卫生微生物学检验)；

GB/T5009.1-2003(食品卫生检验方法理化部分)；GB14934-94(食<饮>具消毒

卫生标准)。采样要无菌操作，以防止外界微生物的污染和病原菌扩散。

无菌采样操作步骤：

1)工作人员采样前应对手进行消毒，然后对采样样品开口处及周围消毒后方可将

容器打开；

2)使用灭菌工具和无菌的采样容器采样；（散装食品：一般采集5倍或以上，即固

体样品不少于250g，液体样品不少于250ml）

?固体样品：用已消毒灭菌的合适的取样工具，取适量样品放入灭菌容器或灭菌袋中。

?散装液体样品：在采样前先用灭菌玻璃棒搅拌均匀或摇匀，有活塞的应用75%酒精面就将活塞及出口处表面抹擦消毒，然后打开活塞，待样品通过出口流

出一些后，再用灭菌样品瓶接取样品，或用灭菌吸管吸取样品。

3)盛有样品的采样容器在火焰下燃烧瓶口加盖封口。

4.采集的数量：采集的数量应能反映该食品的卫生质量和满足检验项目对样品量的需

要，兼顾考虑理化检验和微生物检验两个方面，所采样品应一式三份，分别供检验、复查、备查和仲裁使用，每份样品不少于检验需要量的两倍，以供检验、留样备查

之用。散装食品：一般采集5倍或以上，即固体样品不少于250g，液体样品不少

于250ml。

5.样品标签：采样后每件样品必须贴上标签，明确表明品名、来源、数量、采样地点、

采样人及采样时间等内容。

6.样品送检：采样结束，应按规定合理保存和运送样品，样品送到微生物检验室应越

快越好，一般要求4h内送到实验室，如果路途遥远，可将不需冷冻的样品保持在

1-5℃环境中，如冰壶，如需保持冷冻状态，则需保存在泡沫塑料隔热箱内，箱内有干冰，可维持在0℃以下，送检时必须认真填写申请单以供检验人员参考。

医院消毒效果监测（空气、手、物体表面、医疗用品、消毒剂的样品采集）主要包括空气、手、物体表面、医疗用品、消毒剂的样品采集。

致病菌包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、溶血性链球菌（产房、新生儿科、母婴同室加测沙门氏菌）。细菌总数（cfu/cm2）=（平板上菌落数×稀释倍数）/采样面积（cm2）

●采样前做好个人防护：

a)穿戴好白大褂、口罩、帽子（到手术室、供应室、新生儿病房、ICU病房、

烧伤病房、血液透析室等采样，要戴鞋套或更换鞋子）。

b)用流动水、洗手液清洗双手，然后（或）用75%酒精棉球或快速消毒剂消毒

双手。

●现场采样所需物品的准备：

a)5cm×5cm标准规格板

b)棉签（2支/包）、棉球

c)剪刀、镊子

d)直径9cm平皿

e)15mm×150 mm试管

f)无菌袋（清洁、污染物品要分开存放）

g)酒精灯、打火机

h)试管架

●标签纸、记录表样品送检：采样结束，应按规定在6小时内将样品送至实验室检测，

若样品保存与0-4℃条件时，送检时间不得超过24小时。

1.空气采样

1)现场采样所需物品的准备：普通营养琼脂平板（90mm），笔或标签纸，采样记录

单。

2)采样时段：Ⅰ类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境

在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。

3)采样高度：距离地面80cm-150cm。

4)采样方法：室内面积≤30cm2，设内、中、外对角线3点，内、外点应距离墙壁

1m处；室内面积>30 cm2，设4角及中央5点，4角的布点部位应距墙壁1m左

右处。

5)采样时间：Ⅰ类环境暴露30min，Ⅱ类环境暴露15min，Ⅲ、Ⅳ类环境暴露5min。

6)空气采样操作步骤：

a)平皿的摆放应从里到外，将平皿放在采样架或其他相应高度的物品上，将平皿

盖朝上；

b)轻轻移开平皿盖，并将平皿盖平移扣放于平皿底上边边缘；

c)暴露规定时间后，将平皿盖从扣放侧轻轻盖上；

d)在平板底上编采样号。

e)填写采样记录单，明确表明品名、来源、数量、采样地点、采样人及采样时间

等内容。

7)注意事项：

a)采样前，关好门窗，在无人走动的情况下，静止10min后进进行采样。

b)采样高度选择与地面垂直高度80-150cm。

c)先布点（放平板），后开盖。

d)同一房间的空气与物品采样，均由一人操作。

e)行动时动作要轻，且尽可能少在室内走动。

2.医护人员手采样

1)现场采样所需物品的准备：酒精灯、火柴、棉签、采样管（磷酸盐缓冲液、生理盐

水）、试管架、剪刀、笔/标签纸、采样记录单。

2)采样时段：医院工作人员清洗消毒双手后，接触病人或从事医疗活动前采样。

3)采样步骤：

a)点燃酒精灯；

b)在酒精灯附近取出无菌棉签；

c)选取含与消毒液相对应的中和剂10ml磷酸盐缓冲液采样管（浸有无菌

0.03mol/L磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的1支棉签）；

d)采样管在酒精灯上烧，边转动采样管边烧；

e)拔出采样管塞子，烧采样管管口；

f)无菌棉签伸进采样管内沾上采用液后取出；（或将塞子塞入采样管内置试管架

上）。

g)被采样者手心朝上，五指并拢，将沾上采用液无菌棉签在每个手指上，从指根

到指端来回涂擦2次，并随之转动采样的棉签(一只手涂擦面积约30cm2)，

另一只手，同样方法采样；

h)取出采样管，拔出采样管塞子，烧采样管管口，棉签剪去手接触部位，将棉签

放进采样管内；

i)将采样管管口放在酒精灯上烧，塞上采样管塞子置试管架上；

j)熄灭酒精灯，将采样垃圾放入黄色塑料袋中；

k)在采样管上编样品编号，填写采样记录单，明确表明品名、来源、数量、采样地点、采样人及采样时间等内容。

4)检测方法：细菌总数（Ⅰ和Ⅱ区≤5cfu/cm2、Ⅲ≤10cfu/cm2、Ⅳ≤15cfu/cm2）

和致病菌（未检出）。

5)注意事项：采样必须在工作人员手清洗消毒后，进行医疗活动前，采取两只手为一

个样品。

3.物体表面采样

1)现场采样所需物品的准备：酒精灯、火柴、棉签、采样管（磷酸盐缓冲液、生理盐

水）、试管架、剪刀、笔/标签纸、采样记录单。

2)采样时段：潜在污染区、污染区消毒后采样。清洁区根据现场情况确定。

3)采样面积：物体被采表面<100cm2，取全部表面；被采表面>100cm2，取100 cm2。

4)采样步骤：

a)点燃酒精灯；

b)用无菌镊子（或普通镊子放在酒精灯烧）取出5cm×5cm灭菌规格板放在被

检物体表面；

c)在酒精灯附近取出无菌棉签；

d)选取含与消毒液相对应的中和剂10ml磷酸盐缓冲液采样管（浸有无菌

0.03mol/L磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的1支棉签）；

e)采样管在酒精灯上烧，边转动采样管边烧；

f)拔出采样管塞子，烧采样管管口；

g)无菌棉签伸进采样管内沾上采用液后取出；（或将塞子塞入采样管内置试管架

上）。

h)将沾上采用液无菌棉签在规格板内横竖往返均匀涂擦5次，并随之转动棉拭

子，连续采样4个规格板（被采样表面<100cm2，全部采样）；

i)取出采样管，拔出采样管塞子，烧采样管管口，棉签剪去手接触部位，将棉签

放进采样管内；

j)将采样管管口放在酒精灯上烧，塞上采样管塞子置试管架上；

k)熄灭酒精灯，将采样垃圾放入黄色塑料袋中；

l)在采样管上编样品编号，填写采样记录单，明确表明品名、来源、数量、采样地点、采样人及采样时间等内容。

5)检测方法：细菌总数（Ⅰ和Ⅱ区≤5cfu/cm2、Ⅲ≤10cfu/cm2、Ⅳ≤15cfu/cm2）

和致病菌（未检出）。

6)注意事项：

a)门把手等不规则物体表面用棉拭子涂擦采用，菌落总数用“CFU/件”表示。

b)同一房间空气、物体表面的采样，应先采空气，后采物体表面，最好同一人操

作。

c)物体表面采样应由近及远，兼顾上下中左右。

d)采样棉签在现场要做空白对照。

4.使用中消毒液采样

1)现场采样所需物品的准备：

2)采样时段：采取更换前使用中消毒液与无菌器械保存液。消毒剂分为库存消毒剂和

使用中消毒液。

3)采样步骤：

a)点燃酒精灯；

b)拆开无菌注射器包装，取出一次性使用无菌注射器；

c)打开消毒液盖子，用一次性使用无菌注射器（5ml）吸使用中的消毒液1 ml，

盖上盖子；

d)选取含与消毒液对应的9ml中和剂的磷酸缓冲液采样管；

e)采样管在酒精灯上烧，边转动采样管边烧；

f)拔出采样管塞子，烧采样管管口；

g)将消毒液注进采样管内；

h)将采样管管口放在酒精灯上烧，塞上采样管塞子置试管架上；

（分别取0.5ml放入2只灭菌平皿内，加入已溶化的45℃～48℃的营养琼

脂15ml～18 ml，

观察霉菌生长情况；另一个平板置

同时按3.17.15

i)熄灭酒精灯，将针头放入锐器盒中，其他采样垃圾放入黄色塑料袋中；

j)在采样管上编样品编号，填写采样记录单，明确表明品名、来源、数量、采样地点、采样人及采样时间等内容。

4)检测方法：使用中消毒液或无菌器械保存液染菌量（cfu/ml）=每个平板上的菌落

数×20。消毒液染菌量≤100cfu/ml，并未检出致病菌为合格。

5)注意事项：

a)采集消毒液样品时，在消毒液内没有物品，或放入物品消毒作用到规定时间之

后，进行采样。

b)采样后1h内检测，实际工作中由于各种原因做不到，（1是采5ml样品放在

灭菌试管中（试管中不放中和剂）），（2是加入9ml与所采消毒剂相对应的中

和剂，中和其消毒作用），带回实验室。

5.医疗用品采样

1)现场采样所需物品的准备：

2)采样时段：在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。

3)采样步骤：

a)点燃酒精灯；

b)打开器械盒盖子、盖子斜搭于器械盒边缘；

c)选取含5ml无菌洗脱液采样管；

d)采样管在酒精灯上烧，边转动采样管边烧；

e)拔出采样管塞子，烧采样管管口；

f)用无菌镊子（或普通镊子放在酒精灯烧）摄取不能破坏的医疗用品放进采样管

内，同样方法摄取5份医疗用品；

g)将采样管管口放在酒精灯上烧，塞上采样管塞子置试管架上；

h)盖上器械盒盖子；

i)熄灭酒精灯；

j)在采样管上编样品编号，填写采样记录单，明确表明品名、来源、数量、采样

?缝合针、针头、手术刀片等医疗器械各5件，投入5ml的无菌洗脱液中。注射器取5副在5ml的无菌肉汤中分别吸取5次。手术钳、镊子等大的医疗

器械取2件，用棉拭子涂擦采样，将棉拭子投入5ml无菌洗脱液。

?不能用破坏性方法采取的，应在100级洁净实验室，用无菌生理盐水采样液的棉拭子在物体表面涂抹，全部表面或不少于100 cm2，然后除去手接触部

30s以上，取洗脱液1ml接种于灭菌的平板，将冷至40-45℃的融化营养琼脂培养基，每个平板

倾注15-20ml营养琼脂培养基，冷至室温将平板翻过来，置36±1℃恒温

箱培养48小时，计数菌落数。

?可用破坏性方法采取的，应在100级超净工作台称取1-10g样品，放入10ml 采样液试管内进行洗脱，取洗脱液1ml接种灭菌平板，计数菌落数。不能

用破坏性方法采取的，在100级超净工作台，用无菌生理盐水采样液的棉

拭子在物体表面涂抹，全部表面或不少于100 cm2，然后除去手接触部分的

棉拭子。）

4)注意事项：应采用有效期内的样品。

6.消毒剂的中和剂选择

1)醇类与酚类消毒剂，不需要加中和剂；

2)含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，加0.1%硫代硫酸钠；

3)洗必泰、季铵盐消毒剂，加3%（W/V）吐温80和0.3%卵磷脂；

4)醛类消毒剂，加0.3%甘氨酸；

5)含表面活性剂的各种复方消毒剂，加3%（W/V）吐温80。

6)

7.结尾阶段

1)填写采样单：

样品名称、单位名称、采样时间、采样地点、样品编号、采样人、检测项目、监

测依据、样品数量等；

2)整理采样器材及时送检；

3)脱掉个人防护用品；

4)用流动水、洗手液（或肥皂）清洗双手，然后（或）用75%酒精棉球或快速洗手

消毒剂消毒双手。