药理学实验的基本知识与技术

药理学实验的基本知识与技术
药理学实验的基本知识与技术

药理学实验指导

江苏建康职业学院

2010年1月

目录

1、实验一药理学实验的基本知识与技术 (1)

2、实验二药物剂量对药物作用的影响 (5)

3、实验三药物剂型对药物作用的影响 (6)

4、实验四肾功能损害对药物作用影响 (7)

5、实验五给药途径对药物作用的影响 (8)

6、实验六溶媒对乳糖酸红霉素溶解度的影响 (8)

7、实验七药物血浆半衰期的测定 (9)

8、实验八传出神经系统药物对血压的影响 (11)

9、实验九传出神经药物对肠肌的作用 (12)

10、实验十去甲肾上腺素的缩血管作用 (14)

11、实验十一有机磷酸酯类中毒及解救 (14)

12、实验十二普鲁卡因的传导麻醉作用 (15)

13、实验十三苯巴比妥的抗惊厥作用 (16)

14、实验十四氯丙嗪的镇静和降温作用 (17)

15、实验十五药物的镇痛作用 (18)

16、实验十六尼可刹米对抗吗啡中毒的呼吸抑制 (19)

17、实验十七药物的抗心律失常作用 (20)

18、实验十八普萘洛尔的抗缺氧作用 (20)

19、实验十九理化因素及药物对离体蛙心的影响 (21)

20、实验二十枸椽酸钠的抗凝血作用 (23)

21、实验二十一糖皮质激素对细胞膜的保护作用

22、实验二十二链霉素毒性反应及钙剂的对抗作用 (23)

23、实验二十三磺胺类药物的溶解性 (24)

24、常用仪器简介 (25)

25、附录一:几种常用注射麻醉剂的参考剂量 (31)

26、附录二:常用生理溶液的成分和配制 (32)

27、附录三:常用实验动物的一些生理常数 (33)

28附录四:动物与人体的每千克体重剂量折算系数表 (33)

实验一药理学实验的基本知识与技术

一、实验的目的

药理学实验是培养学生了解药理学实验方法,掌握药理学实验操作,提高专业素质的重要手段,是药理学教学的重要组成部分。通过实验,训练学生动手操作的能力,比较和分析客观事物的能力,独立思考和解决问题的能力。同时,通过实验培养学生对科学工作的严谨态度、严密的方法和实事求是的工作作风,为今后的工作实践打下坚实的基础。

二、实验要求

1、实验前

认真仔细地阅读《药理学实验指导》,了解实验的目的,理解实验原理,熟悉实验方法和操作步骤;结合实验内容,复习与本次实验有关的理论知识;对于使用的仪器要了解其基本结构和功能、操作方法和使用注意事项。

2、实验时

做好小组内部分工,各尽其责,做好原始记录,注意培养自己的动手能力与独立解决问题的能力,正确调试仪器,严格按操作程序进行实验。

3、实验后

认真整理实验原始记录,对实验结果进行分析讨论,书写实验报告。

三、实验结果的整理和实验报告的书写

1、实验结果的处理

实验结束后应及时地对原始记录进行整理和分析,整理时需要科学认真的态度,无论实验是预期的结果或意外,都要实事求是地整理表达。

药理实验结果有测量资料(如血压值、心率值、体温值等)和记数资料(如死亡率、阳性反应率等)两大类。我们在记录和整理这些资料时均应以正确的单位和数值定量表示。一般来说,应尽量将获得的资料组成图或表,使结果有重点地表达出来,以便分析、比较。做表格时,一般将观察项目列在表内左侧,由上而下逐项填写,实验中的变化过程则由左向右按顺序填写。绘图时,应在纵轴和横轴上列出数值刻度,标明单位,并在图下方注明实验条件。如果不是连续性变化,也可用直方图表示。总之,图表的制作原则应体现直观性。有关图表的详细制作要求可参考有关文献。

2、实验报告的书写

书写实验报告是对实验的总结,是培养学生文字表达能力和综合分析能力的重要训练方式。完整的实验报告应包括以下内容:

(1)实验题目一般将实验题目放在实验报告纸的第一行正中并在右边注明实验时间、条件等。

(2)实验目的实验目的相当于论文的引言,主要说明本实验要解决的问题及其意义。尽可能简洁、清楚。

(3)实验材料包括实验仪器、试剂与药品、实验动物等内容。

(4)实验方法是对实验动物的分组、实验条件、给药方法、操作步骤及观察指标等简要地表述。

(5)实验结果实验结果的记录应是经过整理的数据或图表,与实验结果有关的重要情况也应加以说明。

(6)讨论讨论是根据已知的理论知识针对实验中观察到的现象与结果进行解释和分析,逐步推出结论。讨论应避免离开实验结果去空谈理论。如果属于非预期的实验结果,则应分析可能的原因。

(7)结论结论是对实验结果进行分析后所得到的概括性判断。结论应与实验目的相呼应,文字要精炼。本次实验中未能得到充分证据的理论分析,不应写入结论。

四、实验动物

1、实验动物的选择

在药理学实验中,药物的作用大多数是通过动物用药后的反应而表现出来的。一般根据实验的需要选用动物,最常用的有小白鼠、大白鼠、家兔、豚鼠、青蛙、狗、猫等。选用动物的原则是:

(1)该种动物的某一系统或器官能反映实验药物的选择作用,达到实验目的。例如青蛙和蟾蜍的心脏,在离体情况下仍能有节奏的搏动,所以常用来研究药物对心脏的作用;豚鼠因对组织胺敏感,易于致敏,所以在对平喘药和抗组织胺药的研究中常用。

(2)动物来源充分,符合精简节约的原则。例如小白鼠是实验最常用的一种动物,因其便于大量繁殖,所以适合于需要大量动物的实验,如药物筛选、半数致死量测定等的研究。

(3)操作方便,有利于实验进行。例如家兔在实验中应用也很多,易得到且易驯服,便于静脉注射和灌胃,常用于观察药物对中枢神经系统、心血管系统的作用,由于家兔体温变化灵敏,也常用于体温实验、热原检查等。

(4)选用的实验动物需身体健康,除特殊实验规定外,均应发育成熟。

2、实验动物的性别鉴定

兔将兔呈仰卧位,自尾部向前观察,肛门位于尾基部之前。肛门前有泄殖孔,成年雄兔的泄殖孔附近可见阴囊。雌兔肛门前有两个相距很近的孔,分别为尿道和阴道孔。此外,雌兔腹部有5对乳头。

小鼠和大鼠雄性阴囊明显可见,性器官与肛门距离较远,二者间有毛。雌性者性器官与肛门距离近,界限不清,腹部有乳头。

蟾蜍用拇指及食指挟皮肤提起时,雄性通常会发出叫声,而雌性不会叫。另外,前趾蹼上棕黑色小突起(常分布在拇指和食指蹼上)有助于辨认,如有则为雄。另提起动物时,前肢作环抱状则为雄性,前肢呈伸直状则为雌性。

3、实验动物的编号

犬、兔等较大动物可用特制号码牌固定于耳上。小白鼠、大白鼠及白色家兔等可用黄色苦味酸涂于毛上标号,如给小鼠标记1-10号,可将小鼠背部的肩、腰、臀部按左、中、右分化为九个区,从右到左标记1-9号,第10号不作标记。

4、实验动物的捉拿方法

蛙和蟾蜍通常以左手握持动物,以中指和食指夹住左前肢,以拇指压住右前肢,将两下肢拉直固定于无名指和小指之间。毁脑和脊髓时,左手食指和中指夹持动物的头部。右手将探针经枕骨大孔向前刺入颅腔摆动探针毁脑组织。毁脑后,退回探针向后刺入椎骨破坏脊髓。

小白鼠捉拿方法有两种:一种是用右手提起尾部,放在鼠笼盖或其它粗糙面上,向后上方轻拉,此时小鼠前肢紧紧抓住粗糙表面迅速用左手拇指和食指捏住小鼠颈背部皮肤并以小指和手掌尺侧夹住其尾根部固定于手中。另一种抓法是只用左手,先用食指和拇指抓住尾部,再用手掌尺侧及小指夹住尾根,然后用拇指及食指捏住其颈部皮肤。前一方法简单易学,后一方法稍难,但便于快速捉拿给药。

大鼠捉拿及固定方法基本同小鼠。捉拿时,右手抓住鼠尾,将大鼠放在粗糙面上,左手戴上保护手套或用厚布盖上大鼠,握住整个身体并固定其头部以防咬伤。

豚鼠捉拿时以拇指和中指从豚鼠背部绕到腋下,另一只手托住其臀部。体重小者可用一只手捉拿,体重大者捉拿时宜用双手。

兔用左手抓住颈背部皮肤,轻轻将兔捉起,以右手托住其臀部,使兔呈坐姿势。

5、实验动物的给药途径与方法

蛙和蟾蜍蛙及蟾蜍皮下有数个淋巴囊,注入药物易吸收。一般以腹,胸或股淋巴囊作为给药途径。注射方法:一手抓住蛙,固定四肢,将其腹部朝上,另一手持注射器,将

药理学实验设计第六组

氯丙嗪的镇吐、降温作用及对电刺激小鼠激怒反应的影响一、目的 1.观察氯丙嗪对电刺激小鼠激怒反应的影响 2.了解催吐作用的试验方法,观察氯丙嗪的镇吐作用。 3.观察氯丙嗪对小鼠的降温作用及其特点 二、作用机制 1.氯丙嗪的镇静作用是通过阻断中脑-边缘叶及中脑-皮质通路中的多巴胺 受体。(镇静) 2.氯丙嗪可以阻断了延脑第四脑室底部的催吐化学感受区的D2受体,大剂 量的氯丙嗪直接抑制呕吐中枢。(镇吐) 3.氯丙嗪对下丘脑的调节中枢的抑制。(降温) 三、实验材料 动物:小白鼠,体重18~22g,雌雄不拘。 药品:0.08%氯丙嗪,生理盐水,0.4%氯丙嗪,0.4%酒石酸锑钾,生理盐水,0.03%氯丙嗪,生理盐水,液体石蜡。 器材:药理生理多用仪及附件激怒盒、万用电表、小动物电子秤、鼠笼、1ml 注射器、5号针头,小铁丝笼、小动物电子秤(或天平)、5ml注射器,口腔温度计、1ml注射器、小铁丝笼。 四、实验步骤 将小鼠编号0——11 (一)电刺激激怒实验 实验装置的连接和调置:将药理生理多用仪后板上的开关拔向“激怒”一边,交流电输出电压的电位调节旋钮逆时针旋转至最小,交流电输出接线一端插入“交流输出”插座,另一端分别夹在附件激怒盒的红、黑柱上,即与刺激盒的导电铜丝板相联。交流输入线一端插入“交流输入”插座,另一端接实验室电源。刺激方式拨到“连续B”,“B时间”置于1s,“A频率”置于4Hz,然后用万用表测其阈电压。 诱发小白鼠激怒反应:取异笼喂养的小白鼠各1只,称重后将2只小白鼠放入附件激怒盒的导电铜丝板上,把盖子盖上后,将电源打开,顺时针调节交流电压输出旋钮,直至引起小白鼠激怒反应,刺激电压一般为30V左右。激怒现象表现为:两鼠对应、前肢离地、对峙、互相撕咬等。若刺激1min以上仍未出现者弃之不用。以上法挑选有激怒反应的合格小白鼠两对,并记录其刺激电压。 给药及观察:取一对小白鼠腹腔注射0.08%氯丙嗪 0.1ml/10g,另一对腹腔注射生理盐水0.1ml/10g。给药后20min,先用万用电表调节刺激输出电压至给

药理学实验(一)

(一)剂量对药物作用的影响 目的:观察不同剂量尼可刹米对小鼠作用的差异 原理:影响药物的因素有药物的给药剂量,当药物的剂量增加,药物的效应也随之增加。但这一效应的增加不是无限制的,当增加到一定的程度时,药物的效应恒定在一定的水平,而当药物剂量过大时,可致中毒或死亡。 材料:器材:电子天平、1ml注射器 药品:2.5%尼可刹米溶液 动物:小白鼠3只 方法:取小鼠3只,标记,称重,随机分为3组,各鼠均腹腔注射不同剂量的尼可刹米溶液(1#:2.5%尼可刹米溶液0.15ml/10g;2#:2.5%尼可刹米溶液0.1ml/10g;3#:2.5%

尼可刹米溶液0.05ml/10g),观察潜伏期、给药前后的表现,并仔细记录观察结果,完成实验报告。 注意:1、小鼠对尼可刹米可能出现的反应,按由轻到重程度有:活动增加,呼吸急促,反射亢进,震颤,惊厥,死亡等。 2、比较各鼠表现出来的药物反应的严重程度和发生快慢。 思考:本实验结果对药理实验和临床用药有何启示? (二)安定抗尼可刹米惊厥的作用 目的:观察安定对尼可刹米中毒动物的解救作用 原理:安定具有镇静、催眠、抗惊厥的作用,可清除病理性中枢兴奋状态。 材料:器材:电子天平、0.5ml注射器、1ml

注射器、大烧杯 药品:2.5%尼可刹米溶液、0.5%安定溶液、生理盐水 动物:小白鼠2只 方法:取小鼠2只,标记,称重,随机分为2组。1#腹腔注射0.5%安定溶液0.05ml/10g,2#腹腔注射等量生理盐水,然后各鼠均腹腔注射 2.5%尼可刹米溶液0.1ml/10g,观察两鼠给药前后的表现,并仔细记录观察结果,完成实验报告。 注意:使用剂量的准确性 思考:安定为什么能解救尼可刹米所致的惊厥? (三)不同给药途径对药物作用的影响 目的:观察不同给药途径对硫酸镁作用的影响

药理学实验设计第六组(完整资料).doc

【最新整理,下载后即可编辑】 氯丙嗪的镇吐、降温作用及对电刺激小鼠激怒反应的影响一、目的 1.观察氯丙嗪对电刺激小鼠激怒反应的影响 2.了解催吐作用的试验方法,观察氯丙嗪的镇吐作用。 3.观察氯丙嗪对小鼠的降温作用及其特点 二、作用机制 1.氯丙嗪的镇静作用是通过阻断中脑-边缘叶及中脑-皮质通 路中的多巴胺受体。(镇静) 2.氯丙嗪可以阻断了延脑第四脑室底部的催吐化学感受区的 D2受体,大剂量的氯丙嗪直接抑制呕吐中枢。(镇吐) 3.氯丙嗪对下丘脑的调节中枢的抑制。(降温) 三、实验材料 动物:小白鼠,体重18~22g,雌雄不拘。 药品:0.08%氯丙嗪,生理盐水,0.4%氯丙嗪,0.4%酒石酸锑钾,生理盐水,0.03%氯丙嗪,生理盐水,液体石蜡。 器材:药理生理多用仪及附件激怒盒、万用电表、小动物电子秤、鼠笼、1ml注射器、5号针头,小铁丝笼、小动物电子秤(或天平)、5ml注射器,口腔温度计、1ml注射器、小铁丝笼。 四、实验步骤 将小鼠编号0——11 (一)电刺激激怒实验 实验装置的连接和调置:将药理生理多用仪后板上的开关拔向“激怒”一边,交流电输出电压的电位调节旋钮逆时针旋转至最小,交流电输出接线一端插入“交流输出”插座,另一端分别夹在附件激怒盒的红、黑柱上,即与刺激盒的导电铜丝板相联。

交流输入线一端插入“交流输入”插座,另一端接实验室电源。刺激方式拨到“连续B”,“B时间”置于1s,“A频率”置于4Hz,然后用万用表测其阈电压。 诱发小白鼠激怒反应:取异笼喂养的小白鼠各1只,称重后将2只小白鼠放入附件激怒盒的导电铜丝板上,把盖子盖上后,将电源打开,顺时针调节交流电压输出旋钮,直至引起小白鼠激怒反应,刺激电压一般为30V左右。激怒现象表现为:两鼠对应、前肢离地、对峙、互相撕咬等。若刺激1min以上仍未出现者弃之不用。以上法挑选有激怒反应的合格小白鼠两对,并记录其刺激电压。 给药及观察:取一对小白鼠腹腔注射0.08%氯丙嗪0.1ml/10g,另一对腹腔注射生理盐水0.1ml/10g。给药后20min,先用万用电表调节刺激输出电压至给药前引起激怒反应的阈电压,然后断开电源,将该对小白鼠置于导电铜丝板上,再打开电源,刺激1min。观察给药前后反应的差异。 (二)镇吐作用 取小白鼠4只,称重,随机分为两组,并观察动物活动情况及有无呕吐现象。给甲组小白鼠腹腔注射0.4%氯丙嗪0.8mg/10g (0.2ml/10g),1min后灌服0.4%酒石酸锑钾1.2ml/10g (0.3ml/10g)。给药后将小白鼠分别置于小铁笼中,记录给药时间,密切观察小白鼠出现何种反应,比较二组反应有何不同。 (三)降温作用 挑选合格动物:取小白鼠置小铁笼上,用左手拇指盒食指捏住其后头颈部之皮肤,翻转使之腹向上,以左手无名指将鼠尾压再拇指基部,右手拿口腔温度计,将水银柱甩到35oC以下,末

药理实验方法学

第一章现代药理学实验方法与技术简介 第一节分子生物学试验方法与技术分子生物技术在药理学实验中应用较为广泛,包括核酸分子探针的标记、核酸分子杂交、多聚酶链反应、蛋白印迹杂交技术、cDNA文库、随机分子库技术、外核基因在真核细胞中的表达、转基因动物、人类基因治疗等。现将更为常用的技术介绍如下: 一、核酸分子探针的标记标记核酸分子探针(nucleic acid probe)是进行核杂交的基础,根据核酸分子探针的来源及性质进行选择,选择的基本原则是具有高度的特异性,探针选择直接影响杂交结果的分析。根据检测对象和目的不同,,可选择不同的探针种类及标记方法。 ㈠探针种类 1.基因组DNA探针是克隆化的各种基因片断,也是最常用的核酸探针,探针应尽可能选用基因编码(外显子),避免使用内含子及其它非编码序列。 2.cDNA探针与mRNA互补的DNA链称cDNA,是一种较为理想的核酸探针,特异性较高。 3.RNA探针RNA与RNA或DNA杂交体的探针稳定性,特异性高。 4.寡核苷酸探针人工合成寡核苷酸片段做探针,可根据需要合成相应序列。 ㈡标记物 常用的探针标记物有两类:放射性同位素和非放射性同位素。标记物的检测具有高度灵敏性和特异性。标记和探针结合不影响杂交的特异性和稳定性。其中放射性同位素是应用最多的探针标记物,但易造成放射性污染,多数同位素的半衰期短,不能长期存放。常用的放射性同位素有32P?3P?35S,有时也用14C,125I或131I。 二、核酸分子杂交(nucleic acid hybridiazation )是指具有一定同源序列的两条核酸单链在一定的条件下,按碱基互补配对原则形成异质双链的过程。核酸分子杂交是分子生物学领域应用最广泛的技术,灵敏度高、特异性强,主要用于特异DNA或RNA的定性定量检测。 三、聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种体外酶促扩增特异DNA片段的方法。传统的DNA扩增法是分子克隆法,需经过DNA 酶切、链接、转化等步骤构建含有目的基因的载体。然后导入细胞中进行扩增,再用同位素标记的探针进行筛选,操作复杂,耗时。PCR技术灵敏度

(完整版)兽医药理学实验

兽医药理学实验 1.兽医处方的书写(讲授) 2.实验动物的种类、捉拿及给药途径(讲授结合实验) 实验材料:小鼠5-10(22人拟分成4-5组)只,1ml注射器20支,12-16#小鼠灌胃针5个,生理盐水 3.实验动物的采血及处死方法(讲授结合实验) 实验材料:小鼠5-10只(22人拟分成4-5组),1ml注射器20支 4.水合氯醛的全身麻醉作用及氯丙嗪的增强麻醉作用(实验) 实验材料:药物——7%水合氯醛、2.5%氯丙嗪;器械——10ml注射器、酒精棉;动物——家兔3只 5.利尿药对兔的利尿作用观察(实验) 实验材料:药物——1%呋塞米注射液,7%水合三氯乙醛;器械——兔固定器,外科刀、剪刀、棉花、丝线、绷带、输尿管导管、烧杯、镊子、血管钳子;动物——家兔1只。 6.盐类泻药机理分析(实验) 实验材料:药物——10%硫酸钠、常水、生理盐水、7%水合氯醛;器械——兔手术台、剪刀、手术刀、缝线、注射器、针头;动物——家兔1只。 7.试管二倍稀释法测定MIC(讲授) 8.药物的配伍禁忌(讲授) 一. 实验动物的捉拿和固定方法 实验目的:了解常用实验动物的保定及固定方法,掌握实验小鼠的固定方法 实验内容: 1. 狗的捆绑与固定至少由2~3人进行。捆绑前实验者应先对其轻柔抚摸,避免使其惊恐或激怒;用一条粗棉绳兜住上、下颌,在上颌处打一结(勿太紧),再绕回下颌打第二个结,然后将绳引向头后部,在颈项上打第三个结且在其上打一活结(图3.3-4)。切记住兜绳时,要注意观察狗的动向,以防被其咬伤。如狗不能合作,须用长柄狗头钳夹持其颈部,并按倒在地,以限制其头部活动,再按上述方法捆绑其嘴。捆嘴后使其侧卧,一人固定其肢体,另一人注射麻醉药。此时,应注意狗可能出现挣扎,甚至大小便俱下,以及由于这种捆绑动作往往致使狗呼吸急促,甚至屏气等问题。待动物进入到麻醉状态后,立即松捆,以防窒息。 将麻醉好的狗仰卧置于实验台上,用特制的狗头夹固定狗头(图3.3-3)。固定前将狗舌拽出口外,避免堵塞气道。将狗嘴伸入铁圈,再将直铁杆插入上、下颌之间,再下旋铁杆,使弯形铁条紧压犬的下颌(仰卧固定)或压在鼻梁上(俯卧固定)。再将狗头夹固定在手术台上。 固定好狗头后,取绳索用其一端分别绑在前肢的腕关节上部和后肢的踝关节上部,绳索的另一端分别固定在实验台同侧的固定钩上。固定两前肢时,亦可将两根绳索交叉从犬的背后穿过并将对侧前肢压在绳索下,分别绑在实验台两例的固定钩上。若采取俯卧位固定时,绑前肢的绳索可不交叉,直接绑在同侧的固定钩上。

药理学实验方案

药理学实验方案

元胡止痛片对小鼠镇痛抗炎镇痛活性研究 ——药理实验设计 设计人:级药学一班 张礼杰 515010 信盼 515024 陈茂琴 515026 何朵朵 515028 药学四班 杨森 515101 冯禹 515110 王同月 515102

元胡止痛片中抗炎和镇痛作用研究 1.实验目的:探讨元胡止痛片的镇痛和抗炎作用 2.实验原理:(1)元胡止痛片收载于《元胡止痛片收载于《中国药典》是由元胡、白芷两味药组成的中药复方制剂为行气活血止痛剂临床用于治疗气滞血瘀胃痛、胁痛、头痛及月经痛等症疗效确切。本实验是为验证元胡止痛片的镇痛和抗炎作用进行验证。实验对四川禾邦阳光制药厂家生产元胡止痛片不同剂量进行了药效学研究采用小鼠醋酸扭体法、小鼠热板法和耳肿胀法实验分别测定小鼠扭体反应抑制率、小鼠痛阂值提高率和肿胀率从而确定不同剂量的镇痛和抗炎作用效果。 在基础医学研究中筛选镇痛药的常见致痛方法概括有物理法(热、电、机械)和化学法。动物的疼痛反应常表现出嘶叫、舔足、翘尾、蹦跳及皮肤、肌肉抽搐。化学法,即将某些化学物质,如强酸、强碱、钾离子、缓激肽等,涂布于动物的的某些敏感部位或腹腔注射。腹腔注射损伤物质引起受试动物腹痛,动物表现出“扭体反应”(即腹部内凹、躯干与后肢伸张、臀部高起)。 3.实验方法 :使用小鼠热板法、醋酸扭体法、耳肿胀法 ,并分别建立小鼠疼痛和炎症模型 ,灌胃给予不同剂量元胡止痛片配成的溶液,观察对动物的镇痛和抗炎作用。 4.实验过程: 1.内容

4.1 药品与试剂 元胡止痛片:四川禾邦阳光制药股份有限公司,国药准字z51021658,规格:片芯重0.25g,12片 阿司匹林: 浙江金华市第三制药厂, 国药准字: H13023716, 临用前用蒸馏水配制为适当浓度的混悬液。 4.2动物:健康昆明种小白鼠,雌性,32只 4.3 器材:数控超级恒温槽,烧杯、1ml 注射器、电子秤 4.4分组: 空白对照组 (灌胃0.9%生理盐水 10 mL/kg) 元胡止痛片高、低剂量组 (0.2,0.4mg /10g) 阳性药阿司匹林对照组 (灌胃阿司匹林 0. 4 g/kg) 4.5人和动物剂量换算公式 小白鼠=20 0026 .0?人/g 2 方法 (1)热板法 1.动物筛选:致痛潜伏期 (痛阈值)为 5~30s 之间的合格雌性小鼠。32只,热板法镇痛试验筛选痛阈值合格的小鼠,取♀小鼠于给药前先用热板仪于55 ± 0. 5 ℃分别测定每只小鼠的正常痛阈值[将小鼠放于智能热板仪上至出现舔后足的所需时间作为痛阈值( s) ,连续 2 次,间隔30 s ,测定平均值即为正常痛阈值]。将舔后足时间< 5 s 或>30 s ,或跳跃者不用于此实验

7药理学实验技术-王逸平

药理学实验技术 一.药理学及实验技术概述 药物(drugs):是指影响机体器官功能及代谢活动并用于治疗、诊断和预防疾病的化学物质。 主要包括,天然药物(中草药、植物药)、化学药品(植物中分离、提取活性成分,如罂粟—吗啡;麻黄—麻黄碱;化学全合成或半合成的化合物)、生物制品(促红细胞生成素;干扰素)。 神经氨酸酶存在于甲型及乙型流感病毒的表面,在病毒的生命周期中起着极其重要的作用。一旦病毒侵入宿主细胞并开始复制,新生病毒颗粒就会呈芽状突出于细胞表面,但仍与细胞相连。流感病毒中神经氨酸酶的作用就是将病毒和细胞连接的血凝素—唾液酸结合键断裂。一旦与细胞表面脱离,新生的病毒颗粒就会自由扩散,感染其他宿主细胞。 药理学(pharmacology)是研究药物与机体相互作用及其规律的学科。包括药物效应动力学(pharmacodynamic,简称药效学)和药物代谢动力学(pharmacokinetics,简称药动学)。药理学研究的目的: (1)阐明药物作用、作用机制 (2)为临床合理用药提供理论依据(提高疗效,减少不良反应) (3)新药的开发研制 (4)探索细胞生理、生化、病理过程 药效学主要研究药物对机体的作用,包括药物的药理效应、作用机制及临床应用等。靶点:药物与受体、药物与酶 药效:药物的治疗作用 构效关系(structure activity relationship,SAR):药物化学结构与效应关系(或药物的结构与药理活性或毒性之间的关系) 量效关系(Dose-response relationship):药物剂量与效应关系(或药物的药理效应与其剂量或血药浓度呈一定关系) 阈剂量:是指能引起效应的最小药物剂量或最小药物浓度。 效能:药物药理效应的最大值 效价:反应药物效应与药物剂量的关系,为药理效应相同的药物之间等效剂量的比较。 半数有效量(ED50):引起50%最大反应强度的药物剂量或引起50%实验对象出现有效(或阳性)反应的药物剂量。 半数致死量(LD50):引起50%实验对象死亡的药物剂量。反应药物的急性毒性大小。 治疗指数(TI):LD50/ED50,表示药物的安全性。治疗指数越大越安全。 安全范围:有人用LD5~ED95之间的距离表示药物的安全性,称为安全范围。 药动学主要研究机体对药物的作用,即药物的体内过程,包括药物的吸收、分布、代谢及排泄过程,特别是研究血药浓度随时间变化的规律,影响药物疗效的因素。 峰值(Cmax):药物在体内达到的最大血药浓度,一般当药物吸 收与消除的速度相等时达到峰值。 达峰时间(Tpeak):血药浓度达到峰值所需的时间。 时量关系曲线:给药后随着时间的改变血药浓度随之不断变

《药理学实验》教学大纲

西南科技大学本科实践教学大纲 《药理学实验》教学大纲 【课程编号】17315272 【英文名称】Experiments of Pharmacology 【课程学时】16 【适用专业】制药工程 一、本实验课程的教学目的和要求 药理学实验是与药理学理论教学密切的重要实践环节。以药理学实验的基本知识、技术和方法为基础,结合不同作用类别的药物,使学生掌握药理学实验的基本知识,掌握药理学实验的基本技能,验证药理学中的基本理论,牢固掌握药理学的基本概念;了解在药物发现和评价过程中,药理学研究的内容和必要性。通过药理学实验,使学生了解获得药理学知识的科学途径,同时培养学生实践操作、互助协作、独立思考、综合分析和解决问题能力,体验科学研究的基本程序,全面提高学生的综合素质。 二、本实验课程与其它课程的关系 药理学实验是对《药理学》和《生理学》理论课程教学的补充和完善,同时有利于《生物化学》的理论知识中的有关部分的理解。 三、实验课程理论教学内容安排 本实验课程不安排理论教学内容 四、实验内容安排 实验一、药理学实验的基本知识和基本技术

生命科学与工程学院 【目的要求】熟悉药理学实验的基本技术;能掌握药理学实验的基本知识和基本技术 【内容】药理学实验基本知识;实验动物的捉拿和固定方法;实验动物标记方法;实验动物给药方法。实验动物取血方法;实验动物处死方法。 【方法】理论讲授结合实际操作 实验二、不同途径、不同剂型、不同剂量的阿托品对药物作用的影响 【目的要求】学习不同途径、不同剂型、不同剂量对药物作用的影响;了解不同给药途径及同一药物不同剂型对药物吸收的影响及特点。通过实验比较不同途径给予阿托品的药效学有何不同。通过实验比较不同剂型、不同剂量的阿托品的作用。 实验动物为健康昆明种小鼠(雌雄不拘)。 【内容】1 介绍静脉注射及静脉滴注、肌肉注射、皮下注射、动脉注射、锥管注射、腹腔注射、胃肠道给药、舌下给药及黏膜给药、直肠给药、吸入给药、透皮给药等途径的药物吸收特点。 2 介绍药物制剂对药物作用影响 3 结合理论进行实验观察 4 根据结果讨论剂型及途径与药物效应的关系。 【方法】静脉注射、胃肠道给药等方法 实验三、水杨酸钠血药浓度及血浆半衰期测定 【目的要求】了解药物血浆半衰期的意义。掌握分光光度法测定水杨酸钠血药浓度,并根据血药浓度计算半衰期的方法。 【内容】1 讲授分光光度法测定药物浓度的原理和半衰期计算方法。 2 分组进行家兔取血、给药、测定等实验过程。 3 根据实测结果计算半衰期。 4 讨论半衰期的临床意义。 【方法】家兔灌胃给药、家兔静脉取血、分光光度法测定水杨酸钠血药浓度 实验四、传出神经系统药物对家兔血压的影响 【目的要求】学习家兔固定、麻醉、气管插管、动脉插管、血压记录; 【内容】1 分组完成家兔固定、麻醉、气管插管、动脉插管、血压记录等过程。 2 根据实验讲义依次给药、观察结果。 3 总结 【方法】动脉插管法 实验五、镇痛药实验及统计学分析 【目的要求】学习镇痛药的实验方法;掌握实验性疼痛的诱导方法,观察各类镇痛药的作用。根据实验结果,运用统计学原理进行结果分析,从而理解各类镇痛药的作用特点并初步掌握统计学在药理学实验中的应用。 【内容】1 介绍统计学基本概念及实验注意事项。 2 分组进行实验操作和观察。 3 以班为单位统计各组实验结果,在教师指导下进行统计学处理分析。 4 根据统计学结果得出结论并理解不同类型镇痛药的镇痛效果。 【方法】光电法 实验六、子宫兴奋药及实验 【目的要求】学习掌握子宫兴奋药的作用特点和临床应用 【内容】介绍平滑肌实验装置、分组进行实验、总结实验结果

药理学设计性实验

药理学设计性实验 药理学实验设计 1( 实验项目名称:奥美拉唑对抗利血平引起的胃溃疡作用 2.国外研究现状:胃溃疡是临床常见病,为研究其发病和治疗机制,国内外业已建立起多种胃溃疡小鼠动物模型,有的模型在中医药研究中亦被广泛引用。但研究中存在的突出。奥美拉唑对小鼠水浸应激性溃疡的形成具有很强的抑制作用,表现为溃疡数和溃疡发生率下降,且呈量效关系。 国外临床研究表明,奥美拉唑钠对胃溃疡的疗效明显优于H+受体拮抗剂,表现为起效快,症状消失迅速,用H+受体拮抗剂无效的患者改用本药可得到满意的疗效。 3.实验原理 :利血平是肾上腺素能神经元阻断性抗高血压药。用药后交感神经系统的功能受到遏制,副交感神经系统的功能相对占优势,结果出现利血平的副作用,引发溃疡,因此在本实验中引用利血平制作小白鼠的胃溃疡模型。 奥美拉唑选择性性地作用于胃粘膜壁细胞,抑制处于胃壁细胞顶端膜构成的分泌性微管和胞浆内的管状泡上的H+-K+-ATP酶的活性,从而有效地抑制胃酸的分泌,起效迅速,适用于胃及十二指肠溃疡,返流性食管炎和胃泌素瘤。由于H+、K+-ATP酶是壁细胞泌酸的最后一个过程,故本品抑酸能力强大,有强而持久的抑制基础胃酸及食物、五肽胃酸泌素所致的胃酸分泌的作用。它不仅能非竞争性抑制促胃液素、组胺、胆碱及食物、刺激迷走神经等引起的胃酸分泌,而且能抑制不受胆碱或H2受体阻断剂影响的部分基础胃酸分泌,对H2受体拮抗剂不能抑制的由二丁基环腺苷酸(DcAMP)刺激引起的胃酸分泌也有强而持久的抑制作用。显效快,可逆,且无H2受体拮抗剂诱发精神方面的副作用。本品对胃蛋白酶分泌也有抑制作用,对胃黏膜血流量改变不明显,也不影响体温、胃腔温度、动脉血压、静脉血

2014《药理学》实验

《药理学》实验讲义

实验一药理学实验的基本知识和基本技术 一、目的 1. 掌握基本操作,锻炼动手、动脑能力; 2. 更好地掌握药理学基本理论知识; 3. 培养科学思维 二、基本要求 1. 实验前:预习实验内容并复习相关理论知识; 2. 实验时 ⑴实验器材要妥善保管; ⑵实验操作按步骤进行,仔细观察实验中出现的现象,实事求是地做好记录; ⑶注意节约实验药品; ⑷维持良好的课堂纪律。 3. 实验后 ⑴各组同学将实验动物处死,实验台擦干净,将实验方盘送回准备室; ⑵值日生搞好实验室卫生,将死亡动物送至指定场所; ⑶书写实验报告。 三、实验报告的书写 1. 题目 2. 目的 3. 原理 4. 材料:实验动物,器材,药品 5. 方法:用自己的语言简单扼要描述出来; 6. 结果:要求真实、清楚; 7. 讨论:将实验结果进行比较、分析;实验中有哪些不足之处;结果异常或失败的原因; 8. 结论:将实验结果进行归纳总结,应带有提示性质。 四、药理学实验实验设计原则 1.随机原则 按照机遇均等的原则进行分组。其目的是使一切干扰因素造成的实验误差减少,而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。 2.对照原则 空白对照(指在不加任何处理的条件下进行观察对照);阴性对照也称假处理对照(给予生理盐水或不含药物的溶媒);阳性对照也称标准对照(指以已知经典药物在标准条件下与实验药进行对照)。 3.重复原则 能在类似的条件下,把实验结果重复出来,才能算是可靠的实验,重复实验除增加可靠性外,也可以了解实验变异情况。 五、实验动物

1. 动物的选择 (1)小白鼠:适用于需大量动物的实验,如某些药物的筛选,半数致死量的测定。也较适用于避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤药及抗衰老药实验等。 (2)大白鼠:比较适用于抗炎药物实验,血压测定、利胆、利尿药实验,也可用于进行亚急性和慢性毒性实验。 (3)豚鼠:因其对组胺敏感,并易于致敏,故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。也常用于离体心脏、心房、肠管实验。又因它对结核敏感,常用于抗结核病药的实验。 (4)家兔:常用于观察研究脑电生理作用,药物对小肠的作用。由于家兔体温变化敏感,也常用于体温实验,用于热原检查。 (5)狗:狗是记录血压,呼吸最常用的大动物。还可利用狗做成胃瘘、肠瘘,以观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响。在进行慢性毒性实验时,也常采用狗。2. 实验动物的编号 狗、兔等较大的动物可用特制的铝质号码牌固定在颈部或耳上。大鼠、小鼠如为白色可用黄色苦味酸在不同的体表标志上标记。 3. 动物固定及给药 (1)小鼠捉拿 小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中,如进行尾静脉注射时,可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或专用小鼠固定筒。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。 (2)小鼠灌胃 用左手固定鼠,右手持灌胃器,将灌胃针从鼠的口腔插入,压迫鼠的头部,使口腔与食道成一直线,将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食道,可感到轻微的阻力,此时可略改变一下灌胃针方向,以刺激引起吞咽动作,顺势将药液注入。一般灌胃针插入小鼠深度为3~4cm,大鼠或豚鼠为4~6cm。常用灌胃量小鼠为0.2~1ml,大鼠1~4ml,豚鼠1~5ml。 (3)小鼠腹腔注射 先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒,然后在左或右侧腹部将针头刺入皮下,沿皮下向前推进约0.5 厘米,再使针头与皮肤呈45 度角方向穿过腹肌刺入腹腔,此时有落空感,回抽无肠液、尿液后,缓缓推入药液。此法大小鼠用的较多。 (4)皮下注射 注射时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤,右手持注射器将针头刺入,固定后

最新《药理学》实验讲义汇总

2014《药理学》实验 讲义

《药理学》实验讲义

实验一药理学实验的基本知识和基本技术 一、目的 1. 掌握基本操作,锻炼动手、动脑能力; 2. 更好地掌握药理学基本理论知识; 3. 培养科学思维 二、基本要求 1. 实验前:预习实验内容并复习相关理论知识; 2. 实验时 ⑴实验器材要妥善保管; ⑵实验操作按步骤进行,仔细观察实验中出现的现象,实事求是地做好记录; ⑶注意节约实验药品; ⑷维持良好的课堂纪律。 3. 实验后 ⑴各组同学将实验动物处死,实验台擦干净,将实验方盘送回准备室; ⑵值日生搞好实验室卫生,将死亡动物送至指定场所; ⑶书写实验报告。 三、实验报告的书写 1. 题目 2. 目的 3. 原理 4. 材料:实验动物,器材,药品 5. 方法:用自己的语言简单扼要描述出来; 6. 结果:要求真实、清楚; 7. 讨论:将实验结果进行比较、分析;实验中有哪些不足之处;结果异常或失败的原因; 8. 结论:将实验结果进行归纳总结,应带有提示性质。 四、药理学实验实验设计原则 1.随机原则 按照机遇均等的原则进行分组。其目的是使一切干扰因素造成的实验误差减少,而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。 2.对照原则 空白对照(指在不加任何处理的条件下进行观察对照);阴性对照也称假处理对照(给予生理盐水或不含药物的溶媒);阳性对照也称标准对照(指以已知经典药物在标准条件下与实验药进行对照)。 3.重复原则 能在类似的条件下,把实验结果重复出来,才能算是可靠的实验,重复实验除增加可靠性外,也可以了解实验变异情况。

五、实验动物 1. 动物的选择 (1)小白鼠:适用于需大量动物的实验,如某些药物的筛选,半数致死量的测定。也较适用于避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤药及抗衰老药实验等。 (2)大白鼠:比较适用于抗炎药物实验,血压测定、利胆、利尿药实验,也可用于进行亚急性和慢性毒性实验。 (3)豚鼠:因其对组胺敏感,并易于致敏,故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。也常用于离体心脏、心房、肠管实验。又因它对结核敏感,常用于抗结核病药的实验。 (4)家兔:常用于观察研究脑电生理作用,药物对小肠的作用。由于家兔体温变化敏感,也常用于体温实验,用于热原检查。 (5)狗:狗是记录血压,呼吸最常用的大动物。还可利用狗做成胃瘘、肠瘘,以观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响。在进行慢性毒性实验时,也常采用狗。 2. 实验动物的编号 狗、兔等较大的动物可用特制的铝质号码牌固定在颈部或耳上。大鼠、小鼠如为白色可用黄色苦味酸在不同的体表标志上标记。 3. 动物固定及给药 (1)小鼠捉拿 小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中,如进行尾静脉注射时,可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或专用小鼠固定筒。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。 (2)小鼠灌胃 用左手固定鼠,右手持灌胃器,将灌胃针从鼠的口腔插入,压迫鼠的头部,使口腔与食道成一直线,将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食道,可感到轻微的阻力,此时可略改变一下灌胃针方向,以刺激引起吞咽动作,顺势将药液注入。一般灌胃针插入小鼠深度为3~4cm,大鼠或豚鼠为4~6cm。常用灌胃量小鼠为0.2~1ml,大鼠1~4ml,豚鼠1~5ml。 (3)小鼠腹腔注射 先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒,然后在左或右侧腹部将针头刺入皮下,沿皮下向前推进约0.5 厘米,再使针头与皮肤呈45 度角方向穿过腹肌刺入腹腔,此时有落空感,回抽无肠液、尿液后,缓缓推入药液。此法大小鼠用的较多。

药理学综合设计性实验汇编

药理学综合设计性实验 实验一氯丙嗪的降温作用(设计性实验,4学时) 实验简介:本实验使学生掌握实验设计的基础理论和方法(包括动物选择、实验分组、对照原则、处理因素的标准化等多方面知识),并通过观察氯丙嗪的降温作用,掌握其降温特点,联系临床应用。 实验辅导:至少双人辅导 【实验目的】掌握实验设计的基础理论,通过观察氯丙嗪的降温作用,掌握其降温特点,联系临床应用。 【实验器材】小鼠、注射器、体温计、冰箱、氯丙嗪等。 【实验过程】 一、首先介绍实验设计的基础理论 (一)实验设计是科学研究计划中关于研究方法与步骤的一项内容,是实验研究所涉及的各项基本问题的合理安排。严密合理的实验设计是顺利进行研究工作的保证,同时也能最大限度地减少实验误差以获得精确可靠的实验结论,甚至可以使研究工作事半功倍。 药理学实验设计的三大要素,即处理因素、实验对象与实验效应。 1.处理因素 (1)处理因素实验中根据研究目的确定的由实验者人为施加给受试对象的因素称为处理因素,如药物、某种手术等。 一次实验涉及的因素不宜过多,否则会使分组增多,受试对象的例数增多,在实际工作中难以控制。但处理因素过少,又难以提高实验的广度和深度。 (2)明确非处理因素:非处理因素虽然不是我们的研究因素,但其中有些因素可能会影响实验结果,产生混杂效应,所以这些非处理因素又称混杂因素。设计时明确了这些非处理因素,才能设法消除它们的干扰作用。 (3)处理因素的标准化:处理因素在整个实验过程中应做到标准化,即保持不变,否则会影响实验结果的评价。如实验设计中处理因素是药物时,则药物的剂型、给药途径、质量(成分、出厂批号等)必须保持不变。 2.实验对象 实验对象的选择十分重要,对实验结果有着极为重要的影响。药理学实验主要实验对象包括整体动物(正常动物、麻醉动物和病理模型)、离体器官、组织及细胞等。 3.实验效应 实验效应是指受试对象在处理因素作用后呈现的反应或受到的影响,其具体表现形式是指标。这些指标包括计数指标(或定性指标)和计量指标(或定量指标)等。指标的选定需符合特异性、客观性、重复性、灵敏性、精确性、可行性等原则。 (二)药理学实验设计的基本原则 为了提高研究效率,控制误差和偏倚,药理学实验设计同其它科学研究一样必须遵循三大基本原则,即对照、随机和重复原则。 1.对照原则 对照是比较的前提。在生物学实验中存在许多影响因素,为消除无关因素对实验结果的

药学实验技能大赛方案

广州医科大学药学院第一届药学实验技能大赛方案 一、活动目的: 为了促进我院学生树立崇尚科学,勇于创新,敢于实践的精神风貌,加强学生实验操作技能、综合设计与创新能力的培养,促进我院本科实验教学改革,共同推进高水平大学建设,现决定面向药学专业2013级、2014级本科生举办药学院第一届药学专业学生实验技能竞赛。 二、竞赛时间 2016年9月——10月 三、竞赛地点 番禺校区A3教学楼、A1实验楼 四、参赛人员 药学院2013级、2014级本科学生 五、竞赛组委会 组长:余细勇张超 成员:李悦山宜全徐兰琴陶移文张依罗亦萍张建业 吴爱平刘波涛陈璐 六、具体安排 1.药学实验技能理论笔试(初赛): (1)时间:2016 年9 月11 日19: 00-21:00 (已定) (2)地点:A3教学楼课室(待定) (3)规则:题型全部为选择题(共100道)。考察范围主要是药学实验的基本知识,包括实验数据处理、误差理论、实验室基本知

识、实验室安全、重要常规化学品的安全使用、基本的实验操作 规范、常规实验仪器和中大型仪器的使用、各门课程实验理论 等。笔试时间为2小时,13级、14级分别按卷面成绩高低评出进入决赛人员名单。(13 级取前6名,14级取前18名) 2.药学实验技能操作竞赛(决赛): (1)时间:2016年10月14日(初定) (2)地点:A1实验楼(待定) (3)规则:每队4人(其中1人13级,3人14级)。考察范围为生物(生理、药理学与生物化学)与化学(天然产物化学、药物化学、药物分析)两部分通用技术和操作。以一或两个药物相关实验,涵盖生物与化学相关内容。要求:选手按照试卷给定的实验过程和 要求,进行实验,获得相应结果。最后评出一等奖1名,二等奖2名,三等奖3名。 七、考试大纲与评分标准 见附件1、附件2。 八、其他事项 1?学生办负责组织学生参赛及其他赛事组织工作。 2.实验中心负责竞赛操作实验的准备工作,对实验感兴趣的同学 可报名参加决赛实验助理,帮助老师进行实验仪器、试剂的装配工作。 3.组委会负责邀请老师出题、阅卷及担任评委 附件1:考试大纲 附件2 :评分标准

实验一药理学实验的基本技能

实验一药理学实验的基本技能 一、实验动物的基本技能和实验技术基础 1.实验动物的标记 大、小鼠和白色家兔的标记常用3~5%黄色苦味酸溶液涂于皮毛上标号。常用的方法:1号---左前腿 2号---左腰部 3号---左后腿 4号---头部 5号---正中 6号---尾根部 7号---右前腿 8号---右腰部 9号---右后腿 10号---不标记 2.实验动物的捉持(大、小鼠) (1)小鼠的捉持用右手提起鼠尾,放在粗糙物(如鼠笼盖)上面,向后轻拉鼠尾;用左手拇指和食指捏住其两耳颈背部皮肤,将小鼠固定在掌中,使其腹部朝上,然后以无名指和小指夹住鼠尾或小鼠的左后肢。 (2)大鼠的捉持捉持和固定方法基本同小鼠,无经验者可戴上防护手套,并应动作轻柔。用右手捉住鼠尾,放在鼠笼盖上,向后轻拉鼠尾;左手掌面向鼠背,食指和中指压住鼠的头顶,拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入,将鼠的两前肢卡住;或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。 图1 小白鼠捉持法 3、实验动物的给药方法(大、小鼠) (1)小鼠的给药方法 灌胃(ig):将小鼠固定后,使颈部拉直,右手持装有灌胃针头的注射器,自口角插入口腔,压其头部,使口腔与食道成一直线,沿上腭壁向鼠口腔的后下方轻轻插入食道。如遇阻力,可将针头抽出再插,以免刺破食管或误入气管。一般给药量为0.1~0.3ml/10g(体重)。

图2 小白鼠灌胃法实验图3 小白鼠腹腔注射法 皮下注射(H或sc):常在背部皮下。轻轻捏起背部皮肤,将注射针头刺入皮下,稍稍摆动针头,若容易摆动则表明针尖位于皮下。然后注入药液。一般给药量为0.1~0.20ml/10g (体重)。 图4 小白鼠皮下注射法 腹腔注射(ip):左手固定动物,右手持注射器,从下腹部外侧,呈45度角刺入腹腔,进针约3~5mm,一般给药量为0.1~0.3ml/10g(体重)。 肌内注射(im):多注射于后肢股部肌肉,一般每侧不超过0.1ml。 尾静脉注射(iv):将小鼠置于固定筒内,使尾部露在外面,用70%~75%的乙醇棉球擦尾部,或将鼠尾浸入45~59oC温水中,待尾部左右侧静脉扩张后,左手拉尾,右手进针。一般给药量为0.1~0.2ml/10g (2)大鼠的给药方法 均同小鼠。一般情况下,灌胃剂量为1~2ml/100g,皮下注射、尾静脉注射<1ml /只,腹腔注射为1.5ml /只,肌内注射为0.1~0.2ml/只。此外大鼠尚有舌下静脉给药的方法。

药理学实验的基本知识和基本技术

药理学实验的基本知识和基本技术 一、实验动物的种类选择 药理学实验常用的动物有小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、猫、犬、蛙、蟾蜍等。常根据实验目的和要求选用不同的实验动物。由于不同的动物具有不同的特点,故所选用的动物应能较好地反映试验药物的选择性作用,并符合节约的原则。 小白鼠:系实验室最常用的一种动物。易于大量繁殖,且价廉,适用需要大量动物的实验,如药物筛选、半数致死量测定、药物效价比较、抗感染、抗肿瘤药物及避孕药物的研究等。 大白鼠:与小白鼠相似。一些在小白鼠身上不便进行的实验可选用大白鼠,如药物抗炎作用的实验常选用大白鼠踝关节制备关节炎的模型。此外也可用大白鼠直接记录血压、作胆管插管,或用大白鼠观察药物的亚急性或慢性毒性。大白鼠的血压和人相近,且稳定,现常用于抗高血压药物实验。 豚鼠:是实验室常用动物之一。对组织胺很敏感,容易致敏,常用于平喘药和抗组胺药的实验。对结核菌亦敏感,故也用于抗结核药的研究。此外还用于离体心脏及平滑肌实验,其乳头肌和心房常用于电生理特性及心肌细胞动作电位实验,研究抗心律失常药物的机理。 家兔:温顺、易饲养,常用于观察药物对心脏、呼吸的影响及农药中毒和解救的实验。亦用于研究药物对中枢神经系统的作用、体温实验、热原检查及避孕药实验。 猫:与家兔比较,猫对外科手术的耐受性强,血压较稳定,故常用于血压实验。但价格较贵。此外,猫也常用于心血管药物及中枢神经系统药物的研究。 犬:药理实验需大动物时常用犬。常用于观察药物对心脏泵功能和血流动力学的影响,心肌细胞电生理研究,降压药及抗休克药的研究等。犬还可以通过训练,用于慢性实验研究,如条件反射、高血压的实验治疗、胃肠蠕动和分泌实验、慢性毒性实验。 蛙和蟾蜍离体心脏能较持久地有节律地搏动,常用于观察药物对心脏的作用;坐骨神经和腓肠肌标本可用来观察药物对周围神经、神经肌肉或横纹肌的作用;蛙的腹直肌还可以用于鉴定胆碱能药物的作用。 须注意:由于动物对外界刺激的反应存在个体差异,在选择实验动物时,还应注意动物的年龄、体重、性别、生理状态、健康状况及其品系、等级等因素对实验的影响。 二、实验动物的编号

【精华】华西-新药药理学实验设计文稿

新药药理学 ——支气管哮喘病特效药研究方案及临床前筛选和实验方法概述 四川大学华西药学院 2012级 8班 周鹏翔 2012141661009

一、研究背景概述 1.选题及意义 支气管哮喘是由多种细胞(如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等)和细胞组分参与气道慢性炎症性疾患。这种慢性炎症导致气道高反应性的产生,通常出现广泛多变的可逆性气流受限,并引起反复发作的喘息、气急、胸闷或咳嗽等症状,常在夜间和(或)凌晨发作、多数患者可自行缓解或经治疗缓解[1]。而有关支气管哮喘,众多细胞因子参与其发作,其中白介素23(IL23)水平和哮喘发作密切相关。IL-23是2000年发现的细胞因子,具有多种生物学功能,并在多种疾病中发挥重要作用。近年来,IL-23 在支气管哮喘中的作用得到了关注。因此,以IL-23为作用靶点的药物可能对支气管哮喘产生积极的疗效。 2.作用因子及靶点 IL-23由p19和IL-12中的p40 两个亚基组成,它们之间以二硫键相联结。人和鼠的p19 相应蛋白质中均含有5个半胱氨酸残基,无N-糖基化位点,两者有70%同源,其蛋白质组成大部分与IL-12p35、IL-6和G-CSF相近,因而在小鼠体内的药理学实验结果对人有一定的借鉴意义。IL-23的受体由IL-12R中的一个亚基IL-12Rβ1和IL-23R两个亚基组成。人IL-23R的基因定位于人1号染色体距离IL-12Rβ2大约150 kb的地方。人T细胞、自然杀伤细胞(NK)包括NK白血病细胞均可以表达IL-23R[2]。因此,本“新药X”(下称X药)选择以肺组织细胞中IL-23R为作用靶点,特异性竞争性地抑制IL-23和其受体结合,减少其表达蛋白产物的生成,从而缓解支气管哮喘。 3.靶点选择的文献依据 通过构建动物模型,分为正常组、哮喘组,应用ELISA 法检测两组小鼠外周血IL-23 水平、RT-PCR 法检测肺组织中IL-23p19mRNA 表达、免疫组化法检测肺组织中IL-23 表达;分离小鼠脾脏T淋巴细胞进行体外培养,应用RT-PCR 法检测小鼠脾脏T淋巴细胞IL-23p19mRNA 表达水平、Western blot检测IL-23p19蛋白表达情况[3](图片以及表格数据均引用于该文章)。结果表明哮喘小鼠中,IL-23 在血清、肺组织、脾脏T淋巴细胞中表达均较正常小鼠明显增高(P<0.01)。另一篇文献也做了类似的研究,将45只雌性C57/6J小鼠随机分为哮喘组、肥胖哮喘组(肥哮组)和对照组各15只。卵白蛋白激发致敏和高脂饮食制作肥胖哮喘模型,计 [1]引自百度百科“支气管哮喘”词条 [2]李艳春,鲁继荣.白介素-23的生物学功能.临床儿科杂志。2010.3:295-299 [3]李艳春,孙萌,赵丽娜,鲁继荣.白细胞介素23在哮喘小鼠动物模型中表达的研究.中国免疫学杂

药理学实验方法

word 药理学实验方法 第-讲实验动物的选择 在药理学实验中,要根据实验目的,选择不同动物,常用动物有: 1、青蛙和蟾蜍 心脏(离体、在体)实验, 制备坐骨N-腓肠标本等。 2、小白鼠: 药物初筛:镇痛、耐缺氧、抗肿瘤药物、LD50测定、避孕药实验等。 3、大白鼠: 抗炎作用,大白鼠踝关节肿胀实验,血压测量,胆管插管等。 长期性毒性试验。 4、豚鼠: 对组胺敏感,并易于致敏,常用抗过敏药(平喘药、抗组胺药)实验。离体心房、心脏、肠管实验等。 豚鼠对结核菌也敏感,也用于抗结核病药物实验。 5、兔: 家兔易得,驯服,便于静脉注射和灌胃,常用于观察药物对心脏的作用和对CNS 的作用。 又由于其体温变化较敏感,也常用于体温实验及热原检查。 家兔也常用于避孕药实验。 6、猫: 猫的血压比较稳定,具有咳咳嗽反射和呕吐动作。因而常用于心血管药物实验和镇咳药、镇吐药实验。 7、狗: 狗的血压比较稳定,常用于降压药、升压药和抗休克药实验。 狗比较容易驯服,最适用于慢性实验。手术造瘘(胃、肠)以便观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响。 此外,长期毒性实验也常用狗来进行。 * 附:给药途径及剂量限制 1. 小白鼠 (1)灌畏法:0.1~0.25ml/10g体重。 (2)皮下注射:0.1~0.3ml/10g体重。 (3)肌肉注射:0.2ml/每侧。 (4)腔注射:0.1~0.25ml/10g体重。 (5)静脉注射:0.05~0.1ml/10g体重。 1.大白鼠 (1)灌畏法:2.0ml/10og体重。<3.0ml/只。 (2)腔注射:0.1~0.25ml/10g体重。 第二讲实验动物的麻醉和处死 一、各种实验动物的麻醉药物和麻醉方法

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