balb.c小鼠
Balb/c小鼠
BALB/c 是白变种实验室老鼠，与众多常用亚系一样，起源于小家鼠Mus musculus。从1920年它们在纽约诞生至今，BALB/c小鼠在全球研究机构繁衍了超过200代，广泛用于免疫学、生理学的动物实验。
BALB/c(巴比赛)的外表与“ICR”和“NIH”小鼠很难分辨，都长着一对红宝石般的眼睛，一身光润洁白的皮毛。只是BALB/c鼠的遗传背景为近交系，由亲兄弟姐妹遗传繁殖，因而它们之间的个体差异就小，遗传基因更纯，整体素质更好
BALB/c小鼠乳腺癌发病率低，但随着年龄增长，患其他癌症（如肺癌和肾癌）的几率大为增加。乳腺肿瘤发生率约为10%~20%。有一定数量的卵巢、肾上腺和肺部肿瘤、白血病的发生。肺癌发病率雌性26%，雄性29%。白血病发病率雌性12%，雄性10%。血压与其他近交系小鼠相比为最高，有自发高血压症。老年小鼠心脏有某些病变，雌雄小鼠常有动脉硬化。几乎全部20月龄的雄性小鼠均有淀粉样变。对鼠伤寒沙门氏菌C`5敏感，对麻疹病毒中度敏感，易患慢性肺炎，对放射线极度敏感。富于网状内皮细胞的器官（如肝、脾）与体重相比，所占比值很大。常用于单克隆抗体和免疫学研究。BALB/c小鼠生产性能好，繁殖期长，一般无相互侵袭习性，比较容易群养。平均寿命：有的记载雄鼠为509天，雌鼠为561天；有的记载雄鼠为648天，雌鼠为816天。平均体重252日龄雄鼠为30 g，雌鼠为28g。
一种免疫缺陷的小鼠，是免疫学实验中常用的小鼠种类
常用于单克隆抗体和免疫学研究。BALB/c小鼠生产性能好，繁殖期长，一般无相互侵袭习性，比较容易群养。平均寿命：有的记载雄鼠为509天，雌鼠为561天；有的记载雄鼠为648天，雌鼠为816天。平均体重252日龄雄鼠为30 g，雌鼠为28g。
这种小鼠是天生免疫缺陷没有免疫系统不会攻击你打进去的肿瘤细胞成瘤率高~ 缺点就是比一般的老鼠贵好多。
c57bl 6小鼠
1921年立特(Little)用艾比?拉特洛坡(AbbyLathrop)的小鼠株，雌鼠57号与雄鼠52号交配而得C57BL1937年从C57BL分离出C57BL/6和C57BL/10两个亚系。1985年从Olac引到中国医学科学院实验动物研究所。
主要特性：①乳腺肿瘤自然发生率低，化学物质难以诱发乳腺和卵巢肿瘤。②12%有眼睛缺损;雌仔鼠16.8%，雄仔鼠3%为小眼或无眼。用可的松可诱发腭裂，其发生率达20%。③对放射物质耐受力中等;补体活性高;较易诱发免疫耐受性。④对结核杆菌敏感。对鼠痘病毒有一定抵抗力。⑤干扰素产量较高。⑥嗜酒精性高，肾上腺素类脂质浓度低。对百日咳组织胺易感因子敏感。⑦常被认作"标准"的近交系，为许多突变基因提供遗传背景。
其主要特点为近交系小鼠，试验结果精度高，可比性好，应激反映均一。主要用途：是肿瘤学、生理学、免疫学、遗传学研究中常用的品系。
-实验报告-小鼠
姓名：薛桂凤学号：132015200300 实验报告（一） 一、实验目的： 1.掌握小鼠的抓取和固定。 2.掌握小鼠的编号与标记方法。 3.掌握小鼠的常用实验方法。 4.掌握小鼠的常用麻醉方法。 5.掌握小鼠的安死术。 6.掌握小鼠的釆血方法。 7.了解小鼠的采尿、粪的方法。 8.了解小鼠各种脏器标本的采集方法。 二、实验器材：ICR小鼠、电子称、手套、实验托盘、固定板、固定器、烧杯、注射器 （2支）、剪刀、镊子、灌胃针头、毛细管、酒精棉球、5%水合氯醛、生理盐水 三、实验内容 1.抓取：单手固定、双手固定、固定器、固定板。 2.称重：小鼠放在烧杯中称重（去除烧杯重量），记录小鼠体重20g。 3.编号：包括染色法及穿耳孔法。 4.给药：包括尾静脉给药（小鼠放入固定器，露出尾巴、准备好注射器；左手食指托 住尾巴，拇指配合，右手持注射器针尖轻轻抬起与血管平行刺入，轻推给药；血管由红变白后拔针、棉球按压）、皮下注射（俯卧固定，左手拇指和食指捏住皮肤提起，右手持针沿纵轴方向刺入皮肤，阻力消失后回抽无血注入药物，拔针）、皮内注射（俯卧固定，与皮肤平行刺入捏起的皮肤，阻力大，注射药物局部有皮丘后停留片刻后拔针）、腹腔注射（仰面固定，在腹正中线两侧腹股沟平行的位置30-45°进针，挑起皮肤和肌肉，回抽无血，注药）、灌胃（小鼠固定身体呈一条直线，灌胃枕头顺着上颚插入咽部，先少量注药证明未入气管后继续给药）、肌肉注射（）注射针刺入肌肉回抽无血给药。 5.釆血：尾尖釆血法、眼眶静脉丛釆血法、心脏釆血法。 6.麻醉：根据小鼠体重计算麻醉药物用量，水合氯醛0.16ml，通过腹腔注射给药途径 麻醉小鼠，观察小鼠麻醉期。 7.安死术：颈椎脱臼法、过量麻醉法、空气栓塞法 8.解剖：观察小鼠的脏器解剖结构 四、总结 1.小鼠性情比较温顺，个体小，比较容易抓取固定。但是小鼠尾静脉血管较细，尾静 脉注射有一点难度，可以先酒精擦拭使血管扩张，遵循先远后近的原则会提高尾静脉注射的成功率。 2.通过此次试验，学习了关于实验动物小鼠的一些基本操作技术，对以后的科研实验 做了基本的准备。但还需克服心理的恐惧，多加练习，增加熟练程度。
敲除小鼠常见问题与回答
敲除小鼠常见问题与回答 一、什么是ES细胞显微注射？ 答：胚胎干细胞显微注射是制作基因敲除小鼠的一个最常用的方法。主要过程是将携带目的基因的胚胎干细胞注射到小鼠的囊胚腔中获得嵌合体小鼠。所得嵌合体小鼠的组织，将同时含有来源于囊胚的细胞和胚胎干细胞。嵌合体小鼠必须和野生型小鼠配种以决定遗传改变的生殖系能否传递，这样可能获得转基因或打靶基因（来源于胚胎干细胞）稳定的生殖系传递的小鼠。一般情况下，大约能获得50%继承了目的基因的后代。 二、嵌合体 遗传学上用以指不同遗传性状嵌合或混杂表现的个体。免疫学上的涵义则指一个机体身上有两种或两种以上染色体组成不同的细胞系同时存在,彼此能够耐受,不产生排斥反应,相互间处在嵌合 状态。在基因敲除鼠中指通过向囊胚注射被外源基因转化了的胚胎干细胞，使得发育成为的个体中含有不同基因型的细胞，产生的个体也叫嵌合体，即该生物体中嵌合了两种不同遗传结构的细胞（一种是基因型被改变了的细胞，另一种是原来的基因型的细胞）。 三、条件性敲除的原理？ 答：Cre-LoxP系统是源于P1噬菌体的一个DNA重组体系,由Cre酶和相应的LoxP位点组成,它能导致重组发生在特定的DNA序列处(LoxP位点),该系统可以将外源基因定点整合到染色体上或将特定DNA片段删除。基于Cre-LoxP的基因打靶要分两步来进行。首先要在胚胎干细胞的基因组中引入LoxP序列，这一步可以通过打靶载体的设计和对同源重组子的筛选来实现。下一步通过Cre介导的重组来实现靶基因的遗传修饰或改变。Cre-LoxP系统既可以在细胞水平上用Cre重组酶表达质粒转染中靶细胞，通过识别LoxP位点将抗性标记基因切除，又可以在个体水平上将重组杂合子小鼠与Cre转基因小鼠杂交，筛选子代小鼠就可得到删除外源标记基因的条件性敲除小鼠。 四、如何鉴定和挑选嵌合体？ 答：动物只有部分组织细胞整合有外源基因，则称为嵌合体动物。它的鉴定主要根据毛色去鉴定。注射的ES和囊胚来源不同的小鼠品系。它们的毛色不同。因此可以根据毛色的嵌合率来鉴定和挑选嵌合体。
肾阳虚机理研究进展
肾阳虚机理研究进展 叶东东1康永2 1.山西省中医药研究院硕士研究生2013级（太原030012）； 2.山西省中医药研究院（太原 030012） 摘要：目前对肾阳虚机理没有统一的认识，神经-内分泌-免疫调节网络组学，代谢组学，转录组学，基因组学，蛋白质组学等学说众说不一。本文从不同角度对肾阳虚的机理进行全面系统的阐释。 Abstract: Currently, the scientific community have no unified understand on declination of kidney yang, the theory of neuro-endocrine-immunoregulatory network, Metabonomics, Transcriptomics, Genomics, Proteome, ect have different points, In this paper, we are from different angles to conduct declination of kidney yang. 关键词：肾阳虚；神经内分泌免疫调节网络；系统生物学 Keywords：declination of kidney yang；neuro-endocrine-immunoregulatory network；systems biology 肾阳虚，即肾脏阳气虚衰，是肾脏阳气衰竭表现的征候。临床表现症状多见腰膝酸软，四肢不温，面色朓白，腹中冷痛，小便清长，舌淡苔薄白，脉沉迟。中医认为阳虚多因年老肾亏，久病伤肾，以及房劳过度等因素引起的。现在对肾阳虚的本质还没有统一的认识，通过神经-内分泌-免疫调节网络组学，代谢组学，转录组学，基因组学，蛋白质组学等学说多年的研究，从人体系统到基因分子水平，取得了不同层次研究成果。 1.肾阳虚与神经内分泌免疫调节组学 1.1肾阳虚与神经内分泌系统 下丘脑垂体靶腺轴(肾上腺轴、甲状腺轴、性腺轴)的功能障碍和功能低下是肾阳虚证的物质基础。甲状腺激素与肾上腺素在体温调节方面起协同作用。甲状腺激素与性腺激素在生长发育方面起到协同作用，阳虚患者常多伴有性腺功能低下。从1959年,邝安堃等用糖皮质激素造成了肾阳虚小鼠模型开始，到沈自尹等发现不同病种的肾阳虚证病人有靶器官损伤，钟历勇等研究了补肾中药能对下丘脑垂体靶腺轴起到保护作用。还有很多的药理实验，临床实验都可以证明肾阳虚证与神经内分泌功能紊乱有关。 1.1.1下丘脑-垂体-肾上腺轴 肾阳虚患者整体表现出代谢低下的趋势。肾上腺素可促进糖原和脂肪分解，增加组织耗氧量及产热量，如果肾上腺素水平低下就不能很好的促进糖原和脂肪分解，影响机体产热。
病机分析
辨证要点：病久体弱，以畏寒肢冷、小便清长、面晄白、舌淡胖。 病机分析： 畏冷，肢凉，面色晄白，神疲，乏力，气短，脉沉迟无力：阳气亏虚，温养推动无力。 口淡不渴，或喜热饮，小便清长或尿少不利，大便稀薄：阳气亏虚，蒸腾、气化无力。 辨证要点：病久体弱，以五心烦热、尿黄便结、颧红、舌红少津、脉细数。 病机分析： 两颧潮红，五心烦热，潮热，盗汗：阴液亏少，阴不制阳，虚阳内扰形体消瘦，口燥咽干，小便短黄，大便干结：阴液亏少，失其滋润、濡养 辨证要点：神疲、乏力、气短、脉虚、动则加重。 病机分析：气的推动、温煦、固摄、防御、气化作用减退，或脏器功能减退气短声低，少气懒言，神疲乏力：元气不足，脏腑机能衰退 头晕目眩：气虚不能上荣 自汗：卫气虚弱，不能固护肌表 动则诸症加重：劳则耗气，所以活动劳累时诸症加重。 舌质淡嫩：营气虚不能上荣于舌 脉虚/弱/无力：气能行血，气虚血行无力 辨证要点：病体虚弱，面部、口唇、爪甲、肌肤粘膜的颜色淡白，脉细。 病机分析： 头晕眼花，唇、舌色淡，面色淡白或萎黄：血液亏虚，血不荣于上，头面官窍失养。 心悸，多梦，健忘：血液亏虚，血不养心/养神。 手足发麻、肤涩、指甲色淡：血液亏虚，肌肤失养。 妇女月经量少、色淡、经迟或经闭：血液亏虚，冲任失养。 脉细：血液亏虚，脉道失充。 三、表里寒热： 辨证要点：主症：恶寒发热，舌苔薄白，脉浮。 兼症：头身疼痛，鼻塞流涕，咽喉痒痛，咳嗽气喘。 病机分析： 恶寒发热：外邪侵袭肌表，卫气奋而抵抗，正邪相争 鼻塞流涕：肺开窍于鼻，肺气失宣
咳嗽气喘：肺肃降不利，肺气上逆 头身疼痛：邪气郁滞体表经脉，气血不畅 辨证要点：恶寒喜暖，面色苍白，四肢厥冷，口淡不渴，安静少言，痰涕清稀，小便清长，大便稀溏，舌淡苔白而润滑，脉迟或紧。 病机分析：感受阴寒之邪，或内伤体弱，阳气不足，阴寒内盛所致。 辨证特点：冷-凉-白-稀-润-静-喜暖 辨证要点：恶热喜冷，面红目赤，四肢温热，口渴饮冷，烦躁多言，痰涕黄稠，小便短赤，大便燥结，舌红苔黄而干燥，脉数。 病机分析：感受阳热之邪，或脏腑功能亢进，阴津暗耗，阴虚阳亢所致。 辨证特点：热-黄-赤-稠-燥-动-喜凉 四、五脏的辨证（脏腑症状表现的内在生理病机）： 心主血脉：心痛，心悸，怔忡，脉结代。 心主神明：失眠多梦，健忘，心烦，狂躁昏谵谵语，神昏。 心开窍于舌：口舌生疮，舌尖红。 心火下移小肠：小便赤涩 肺主气司呼吸：喘息、胸闷；气短，乏力，声低。 肺宣发卫气于皮毛肌腠：自汗，畏风，易感冒，恶寒发热表证。 主宣发、肃降，通调水道：咳嗽、浮肿（阳水）、咯痰、咯血。 肺开窍于鼻：鼻塞、流涕、音哑（发音的咽喉归于肺系）。 脾主运化：纳呆少食，腹泻或便溏，便秘，腹胀，腹痛；浮肿（脾气虚、脾阳虚） 脾主统血：各类出血（脾不统血/气不摄血证） 脾气主升：内脏下垂（脾虚气陷证，脾的升举作用），头晕目眩（脾的升清作用）脾喜燥恶湿：便溏、身重、女子带下（湿邪内生） 胃主降：嗳气，呃逆，呕吐（胃气上逆） 肝经循行部位：颠顶，胁肋，乳房，少腹，腋下颈侧瘰疬，偏疝坠痛，睾丸肿痛等肝主疏泄，调畅气机：胀闷痛（尤其是肝经循行部位）（肝郁气滞） 肝主疏泄，调畅情志：喜叹息（太息），忧郁寡欢（肝郁气滞） 急躁、易怒（肝在志为怒） 肝主疏泄，调节生殖系统：女子月经不调，痛经，经闭，不孕，男子排精异常等。
病机学说
病机学 一、概述 （一）病机概念 病机，即疾病发生、发展和变化的机理，又称病理机制，它揭示了疾病发生、发展、变化以及转归的本质特点和基本规律 （二）病机发展史 病机之名，首见于《素问?至真要大论》的“审查病机，无失气宜”和“谨守病机，各司其属” 1.先秦两汉时期—病机学说雏形已成 《黄帝内经》奠定了病机理论的基础 《素问?至真要大论》将临床常见的一些病证，从五脏和六淫致病，归纳总结了十九条病机，曰：“诸风掉眩，皆属于肝”；“诸病水液，澄澈清冷，皆属于寒”等，从心、肝、脾、肺、肾五脏，上下二焦，以及风、寒、湿、火、热等方面加以概括，起着执简驭繁的作用，其为病机理论的形成奠定了基础 同时还要求医者“谨守病机，各司其属，有者求之，无者求之，盛者责之，虚者责之，必先五胜，疏其血气，令其调达，而致和平” 《素问?通评虚实论》：“邪气盛则实，精气夺则虚”，为邪正盛衰的病机列出了大纲《素问?阴阳应象大论》：“阴盛则阳病，阳胜则阴病。阳盛制热，阴胜则寒。”成为阴阳失调病机的纲领 《素问?调经论》：“血气不和，百病乃变化而生”，则是气血病机的概括展示 汉代《伤寒杂病论》，精辟地阐述外感伤寒病证六经病机变化与其传变、转归规律，补充了《素问》六经病机之不足，并对脏腑、经络、气血、痰饮等病机有很大发挥，凸显了病机学说与临床应用之结合 《金匮要略》，是以脏腑病机理论进行分证的，使脏腑病机在临床医学中得到进一步的发展与运用 华佗所著的《中藏经》，则详论脏腑虚实寒热和生死顺逆的变化，对后事脏腑辨证学说有深远的影响 2.晋隋唐时期—病机学说系统发展 隋代《诸病源候论》，为最早的中医病因病机学专著 王冰在注释《内经》时所提出的“寒之不寒，责其无水；热之不热，责其无火”，以 及“益火之源，以消阴翳；壮水之主，以制阳光”等论点，即使依据阴阳水火之虚实以分
用小鼠做实验的基本知识
用小鼠做实验的基本知识 1．实验动物环境可分为： 外环境。是指实验动物设施或动物实验设施以外的周边环境。如气候或其他自然因素、邻近的民居或厂矿单位、交通和水电资源等。 内环境。指实验动物设施或动物实验设施内部的环境。内环境又细分为大环境和小环境。前者是指实验动物的饲养间或实验间的整体环境状况;后者是指在动物笼具内，包围着每个动物个体的环境状况，如，温、湿度，气流速度，氨及其他气体的浓度，光照，噪音等等。实验动物环境条件,对动物的健康和质量,以及对动物实验结果有直接的影响，尤其是高等级的实验动物，环境条件要求严格和恒定。因而，对环境条件人工控制程度越高，并符合标准化的要求，生活这样环境中的动物，就越具有质量上的保证，一致性的程度就越高，动物实验结果就有更好的可靠性和可重复性，也使同类型的实验数据具有可比较的意义。 影响实验动物环境的因素及其控制： 气候因素。包括有温度、湿度、气流和风速等。在普通级动物的开放式环境中，主要是自然因素在起作用，仅可通过动物房舍的建筑座向和结构、动物放置的位置和空间密度等方面来作有限的调控。在隔离系统或屏障、亚屏障系统中的动物，主要是通过各种设备，对上述的因素予以人工控制。在国家制定的实验动物标准中，对各质量等级动物的环境气候因素控制，都有明确的要求。 理化因素。包括有光照、噪音、粉尘、有害气体、杀虫剂和消毒剂等。这些因素可影响动物各生理系统的功能及生殖机能，需要严格控制，并实施经常性的监测。普通级动物要在适当的范围内，采取有效的措施，对此予以监控;尤其是清洁级以上等级的动物，应通过实验动物设施内的各种设备，按国家颁布的各个等级标准，严格予以控制。 生物因素。是指实验动物饲育环境中，特别是动物个体周边的生物状况。包括有动物的社群状况、饲养密度、空气中微生物的状况等。例如，在实验动物中许多种类，都有能自然形成具有一定社会关系群体的特性。对动物进行小群组合时，就必须考虑到这些因素。不同种之间或同种的个体之间，都应有间隔或适合的距离。对实验动物设施内空气中的微生物有明确的要求，动物等级越高要求越为严格。国家标准规定，亚屏障系统设施内空气落下的菌数少于或等于12.2个/皿时，屏障系统2.45个/皿时，隔离系统0.49个/皿时。 2．对实验动物设施的环境条件，国家有标准化的规定，检测项目包括温度、相对湿度、气六速度、梯度压差、空气洁净度、空气落菌数、氨浓度、噪声、照度和换气量等。 环境检测的项目 空气洁净度的指标包括有：空气落菌数，是检测空气生物洁净度的指标，用血琼脂培养基，置于被检房舍的空间，暴露30分钟后，计算培养基上的落菌数;尘埃粒子测定，是空气洁净级别的指标，10-20平米的房间布点3-5个，用专用仪器测定，数据作统计分析。 此外还有下列七项指标的测定：温度、湿度测定，包括日温差、温湿度的均匀性等;气流速度测定，使动物处在合理的风速区域;换气次数，测定送风口或出风口的风速，然后参照风口面积和房间容积计算;静压差测定，用压差计测定设施内各区域的压差，分析设施内气流走向的合理性;噪声测定，用噪声计，选离墙壁1米，距地面1.2-1.5米的测点测定;照度测定，常用仪器是照度计，采用多测点测定，检测光照的均匀性;氨浓度测定，该检测项目通
制备小鼠骨髓来源巨噬细胞
制备小鼠骨髓来源巨噬细胞 一、材料 1.6-9周小鼠（GFP+小鼠、野生型小鼠） 2.配制培养液：RPMI 1640培养液+1×GlutaMax（Gibco）+10%FBS（热失活） 3.盐溶液：0.9%氯化钠溶液（无菌），储存于4度。 4.纯化的重组M-CSF（CSF-1）：到货后灭菌PCR管分装。 5.消毒后的手术器械。 6.70%乙醇溶液。 7.27G针头 8.20ml注射器 9.低绒纸巾 10.100mm培养皿 11.3个50ml离心管 二、方法 1.复温培养液（预添加M-CSF）至37摄氏度。 2.处死小鼠，喷洒70%乙醇溶液消毒。拉扯双侧后腿直至听到清脆响声（提示股骨从 髋骨脱臼）。 3.使用干净的剪刀、镊子沿一侧大腿环形剪开皮肤，向爪子方向剥离皮肤。 4.用镊子将腿部肌肉分开，露出股骨和胫骨（注意不要损伤骨头）。 5.切断股骨与髋骨间的韧带，切下膝关节以下的骨头。将股骨和胫骨至于冰冷的盐溶 液中。 6.同法处理另一只腿。 7.用低绒纸巾小心剥除骨骼上附着的组织，将骨头置入70%乙醇溶液中。 8.20ml无菌注射器吸满预热的培养液（无添加M-CSF），装上27G针头。并准备好50ml 离心管。 9.从膝关节处分离股骨和胫骨，丢弃膝盖骨。一个无菌镊夹住股骨，用一把无菌剪刀 剪掉股骨上端。将针头插入骨髓腔，用培养液反复冲洗，将骨髓冲入50ml离心管。 冲洗过程中，上下移动针头刮扫骨髓腔。每根骨头使用大约5ml培养液。丢弃骨头。 10.同法处理胫骨（剪掉上下两端）。 11.将细胞悬液离心（150g，5分钟）。丢弃上清，加入培养液（添加M-CSF）。混匀细 胞悬液。 12.每根骨头准备两个100mm培养皿。将细胞悬液打入培养皿，添加预热培养液（添 加M-CSF）至10ml。 13.置于37摄氏度、5%二氧化碳培养箱内培养5天。 14.第5天，使用室温盐溶液5ml冲洗培养皿（巨噬细胞为贴壁生长）。使用细胞刮刀 刮下贴壁细胞，转移入离心管，150g离心5分钟。分离的细胞建议2天内使用。 关于M-CSF的工作浓度：介于1ng/ml到1ug/ml之间。 设定浓度梯度培养：如1ng/ml 10ng/ml 100ng/ml 1ug/ml，或倍比稀释。按上述方法培养5日后，细胞计数5×107/培养皿为最合适M-CSF工作浓度。
实验小鼠
实验小鼠（laboratory mouse)学名(Mus muscculus)，实验小鼠来自于野生小鼠，经人们长期选择培育而成。18世纪就被用做动物试验，是目前应用最广泛、被研究的最清楚、最深入的实验动物。已育成的小鼠品种品系有500多种。 一、生物学特性 （一）、动物学分类位置 小鼠属于脊椎动物门，哺乳纲、啮齿目、鼠科、鼷鼠属、小家鼠种。 （二）、一般特性 1、外观：小鼠面部尖突，头呈锥体形，嘴脸前部两侧有19根触须，耳耸立呈半圆形，眼睛大。尾长约与身长相等，尾部覆有短毛和环状角质鳞片。健康小鼠皮毛光滑紧贴皮肤，四肢匀称，眼睛亮而有神。小鼠有多种毛色。 2、体形小，生命周期短，易于饲养管理。出生体重仅1.5克左右，一月龄体重约18--22克。成年小鼠每日食量5--8克，饮水4--7毫升，排粪1.4--2.8克/天，排尿1--3毫升/天。 3、性情温顺，胆小怕惊。 4、成熟早，繁殖力强。雌35--50日龄，雄45-60日龄就可性成熟，雌65--75日龄，雄70--80日龄可达体成熟。性周期4--5天，妊娠期19--21天，哺乳期20--21天，年产6--9胎。属全年多发情动物，产后即发情。 5、反应敏感，适应性差。对多种病原体、毒素及致癌物都很敏感，外界环境光照、噪音、营养、温度、空气质量等多种因素均可对小鼠造成影响。 6、昼伏夜动，喜欢啃咬。喜光线较暗的安静环境，进食、分娩都常发生在夜间，傍晚和黎明前是小鼠活动的两个高峰。 7、喜群居。 8、小鼠有20对染色体，推测有3万多个结构基因，已查明的已有648个。 9、寿命为2--3年。 （三）、解剖生理特点： 1、小鼠上、下颌各有两个门齿，六个臼齿，门齿终生不断生长，需经常磨损来维持齿端的长短，保持恒定。 2、小鼠下颌骨形态有品系特征，可用下颌骨形态分析技术进行近交系小鼠遗传监测。 3、内部脏器：食道细长约2cm，胃分前胃和腺胃，胃容量小（1--1.5ml),胃功能较差，不耐饥饿；有胆囊；胰腺分散在十二指肠、胃底及脾门处；无汗腺；淋巴系统发达；脾脏有明显造血功能；无腭或咽部扁桃体；左肺单叶，右肺四叶；骨髓为红骨髓而无黄骨髓，终生造血；雌鼠为双子宫型，呈Y字型，卵巢有系膜包绕，不与腹腔相通；乳腺发达，共有五对乳头，胸部3对，鼠蹊部2对；雄鼠睾丸大，幼鼠时藏于腹腔内，性成熟后下降到阴囊；前列腺分背、腹两叶。 二、在生物医学中的应用 （一）、药物研究 1、药物安全性评价 小鼠常用于药物的急性、亚急性、慢性毒性试验以及最大耐药量的测定等，“三致”试验也常用小鼠进行。 2、生物制品的检定 3、药物筛选 4、药效学评价试验
实验动物学实验报告大鼠小鼠小鼠的基本实验操作大鼠的基本实验操作.docx
实验一小鼠的基本实验操作 一、实验目的:通过实际操作，掌握小鼠的一般操作方法，包括小鼠的抓拿、标记、给药（灌 胃、腹腔注射、皮下、肌肉、尾静脉注射）、取血（眶后静脉丛，摘眼球）、脊椎脱臼法处死、大体解剖。 二、实验动物：昆明小鼠2只（1雌1雄） 三、实验步骤 1、抓取和固定，标记 2、去毛 3、给药：消化道、腹腔注射、尾静脉注射 4、取血：眼眶后静脉丛、尾静脉、眼球摘除法、断头法 5、麻醉：氯胺酮腹腔麻醉 6、处死：脊椎脱臼法 7、解剖： 雄性：睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺（在膀胱下方，胶质状，透明） 雌性：双角子宫、卵巢 肾上腺、胆囊、甲状腺、胃、肝脏、脾、肺、肾、心脏、甲状腺 四、实验结果 1、抓取和固定标记： 抓取：抓小鼠的尾根部 固定：抓住小鼠的尾根部，让小鼠在粗糙平面上爬行，后拉尾跟部，右手的拇 指和食指抓住小鼠两耳及其间的颈部皮肤，小指和无名指将尾巴固定在手掌面。并标记：2、灌胃法：左手抓取小鼠固定后，右手持特制灌胃针，沿一侧口角进针，紧贴咽后壁，头后仰以便伸直消化道，进针2/3后灌生理盐水0.5ml 3、注射给药： 腹腔注射： 从下腹部的两侧进针，进针时针与腹部成45°。进针后稍微晃动针，如无粘滞感则可注射药物 尾静脉注射：一人固定小鼠，另一人用左手中指和拇指将尾拉直，食指托住尾部，在尾动脉位置进针注射0.5ml生理盐水。注射完毕拔出针头，用无菌棉球压迫止血。 4、采血 从眼角内侧0.5cm处进针 眼球摘除法：左手抓取用固定小鼠，右手持弯头镊在眼球根部将眼球摘除，头朝下，眼眶内血迅速流出。 5、麻醉： 0.5%氯胺酮腹腔麻醉：本小鼠重22g，按100mg/kg的药量给药，2分钟麻醉成功 6、处死： 脊椎脱臼法：按住头部，将尾根部向后上方以短促的力量拉即可致死 7、解剖： 雄性：寻找到睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺 雌性：双角子宫、卵巢3.7.2肾上腺：米粒大小 胰腺：位于胃下方，类似于脂肪组织，浑浊状3.7.4，胆囊：芝麻大小，浅绿色，
五脏病机(内容清晰)
五脏病机 在疾病发生发展和变化中，五脏生理功能失常的机理 心的病机-----心的阴阳气血不足，心火亢盛，心血瘀阻 肺的病机-----肺的宣发肃降失常，肺气虚，肺阴虚 脾的病机-----脾气虚，脾阳虚，脾为湿困 肝的病机-----肝气郁结，肝火上炎，肝阴虚，肝阳上亢，肝血虚 肾的病机-----肾精亏虚，肾气不足，肾阳虚，肾阴虚 一、心的病机 1、心气虚 心气不足，鼓动无力，血脉不充，血行无力。临床常见，面色白，舌质偏淡，动辄心悸，脉象虚弱等症。 心气不足，心神失养，心神功能减退，而见精神不振，思睡但睡眠不深。 2、心血虚 一血虚不足，血脉空虚，濡养之力减弱，故见全身血虚征象，如经常头昏，疲乏无力，面色淡而无华，舌色、唇色淡白，脉细或数而无力等。 二是心神失养，由于血虚，神失所养，则精神不振，思想难以集中，且思考不能持久，甚至神思恍惚。 3、心阴虚 阴不制阳，则心阳偏亢，全身出现虚热；由于心阴不足，宁静功能减退，加上虚热内扰而心神不安 虚热内生----潮热，口干咽燥等 心神不宁----心烦不得眠 4、心阳虚 是心的推动、兴奋与温煦等功能减退，导致中血行无力，甚至瘀滞，心神不振；同时全身出现寒象 心神不振-----精神萎靡，表情困倦 5、心火亢盛 火盛心中，扰动心神；使血行加快，脉道扩张；同时，火热可上炎于舌，下移于小肠，并出理明显的热象。 火扰心神------心烦、失眠、躁动，重者出现谵语、狂躁，甚至昏迷不醒。 心火上炎于舌-----舌红糜烂，舌尖碎痛； 心火沿经脉下移于小肠----- 尿道中灼热疼痛，尿黄赤，或见尿血等症。 6、心血瘀阻 心气虚或心阳虚，血液运行无力，加上阳虚则寒，寒性凝滞，更易使心脉中之血瘀滞； 痰浊凝聚，阻于心脉之中，亦导致心血瘀阻。 心脉瘀阻不通，血瘀气滞----心前区憋闷、疼痛。 7、痰迷心窍 痰浊阻碍心神与外界的沟通， 轻者------精神失常，答非所问； 较重者----神识模糊，呈朦胧状态；
敲基因小鼠鼠尾基因鉴定实验报告
碱法提取小鼠总DNA及基因鉴定： 一、实验器材：加样枪（1ml、200ul、20ul、10ul）、枪头（大中小一套）、EP管（20ul、1.5ml、 10ml）、试管架、浮标、温度计、胶布、手套、记号笔、锥形瓶、称量匙、冰盒 二、实验试剂：A液、B液、引物、mix、双蒸水、三蒸水、琼脂糖、TBE（5x、1x、回收液）、 核苷酸染料、Marker 三、母液配置： 1.10M NaOH:NaOH 40g加双蒸水至90ml，待NaOH完全溶解冷却后定容至100ml 2.0.5M EDTA：EDTA.Na2盐18.61g, NaOH 1.5g, 加双蒸水至80ml,逐滴加入10M NaOH 至EDTA完全溶解后加双蒸水定容至100ml 3.1M TrisHCl（pH8.0）：Tris碱12.1g，加水至70ml，边搅拌边加入浓盐酸4ml，然后 边逐滴加入1M HCl边测PH值，直至PH升至8.0（+\-0.05），定容至100ml（pH=8.8 的TrisHCl中边加入浓盐酸边测PH值至PH=8.0（+\-0.05）为止） 四、实验步骤： 1.剪取鼠尾（约芝麻大小）储存于-20度冰箱（-20度冰箱，主要是防止DNA降解，4度不 行） 2.提取DNA： 1)配置工作液——20ml体系液：50ul 10M NaOH 加双蒸水至20ml 8ul 0.5M EDTA B液：800ul 1M TrisHCl（pH8.0）加双蒸水至20ml 2)加150ulA液（液体应完全浸没标本），95度水浴锅煮1.5h（将EP管插入浮标 中后用胶布缠好防止EP管在加热过程中爆开） 3)加150ulB液，混匀（上下颠倒3-5下） 4)12000r/min 4度离心5分钟（可储存于-20度冰箱） 3.PCR（冰上操作）：P1 0.5ul（P为AC3I，G为AAA） 1)配置PCR体系——15ul体系P2 0.5ul Mix 7.5ul 三蒸水4.5ul DNA 2ul 2)加2ul上述离心后的上清液至PCR体系，瞬离 3)PCR仪扩增，参数设定：预变性：94度——3min 变性：94度——30s 退火：55度——30s 30个循环 延伸：72度——24s 72度——5min 4度——∞ 4.琼脂糖凝胶电泳： 1)制胶——2%琼脂糖凝胶配方： 总体积（ml）20 30 40 50 60 120 琼脂糖（g）0.4 0.6 0.8 1 1.2 2.4 TBE 1x（ml）20 30 40 50 60 120 Tris-base 13.6g TBE 5x配方：硼酸 6.56g EDTA 0.73g
理中汤古今不同用量对脾阳虚小鼠脏器系数影响-袁琛皓,董广通,孙伟越,等
45 第16卷 第6期 2014?年?6?月 辽宁中医药大学学报 JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM Vol. 16 No. 6 Jun .，2014 理中汤首见于医圣张仲景所著的《伤寒论》，功 善健脾益气、温阳散寒，由干姜、人参、白术、炙甘草组成，是临床常用的方剂之一。原书记载该方用于治疗自利不渴、畏寒肢冷、倦怠乏力、腹痛呕吐等。然其成书距今已有1700余年，对于方中药物的具体用量，自古以来就有争议。根据出土的汉代文物及现代有关学者考证，认为东汉时期的1两应为现在 的15.625 g [1] 。尽管如此，从古至今流传已久的1两为3 g 的说法依然影响甚远。为此，本文通过观察古今不同用量对脾阳虚小鼠脏器系数的影响，为探究伤寒方剂用量换算提供实验依据。 1 材料与方法1.1?实验动物 SPF 级昆明种小鼠，雌雄各半，体质量 25~30 g，购自山东中医药大学动物中心。 1.2?药物 实验中所需的党参、干姜、白术、炙甘草均购自山东中医药大学中鲁医院。药材经山东中医药大学中药鉴定教研室老师鉴定，符合《中华人民共和国药典》（一部）2000年版相关规定。理中汤古方用量按照《伤寒论》原著为党参45 g，干姜45 g，白术45 g，炙甘草45 g，按照人与小鼠体表面积换算公 理中汤古今不同用量对脾阳虚小鼠脏器系数影响 袁琛皓，董广通，孙伟越，高永贵，张文婧，王欣，郭炜 （山东中医药大学，山东?济南?250355） 摘 要： 目的：探讨理中汤古今不同用量对脾阳虚小鼠脏器系数的影响。方法：将40只SPF 级昆明种小鼠，雌雄各半，随机分为空白组、模型组、古方组、今方组，每组10只。除空白组外，其余各组采用注射利血平注射液的方法制备小鼠脾阳虚模型。造模成功后，古方组、今方组分别灌胃相应的药液，空白组、模型组灌胃等容积的蒸馏水，每日1次，连续给药5?d。给药结束后，称取小鼠体质量，处死小鼠，摘取肝、脾、肾、胸腺，称重并按照公式计算脏器系数。结果：连续给药5?d 后，与模型组相比，古方组小鼠的肝脏系数显著降低（P <0.01）；古方组与今方组的肝脏系数无显著性差异。结论：理中汤古方组可以显著降低脾阳虚小鼠的肝脏系数，而理中汤今方组效果不明显；理中汤古今不同用量对脾阳虚小鼠脾、肾、胸腺的脏器系数无明显影响。 关键词：理中汤；古今用量；脏器系数 中图分类号：R256.3 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2014) 06- 0045- 02 收稿日期：2013-12-27 基金项目：山东省名老中医药专家刘持年教授传承工作室建设项目；国家级大学生创新创业训练计划项目（201310441090）；山东中医药 大学大学生创新创业训练平台立项资助项目（2013-56）作者简介：袁琛皓（1992-），男，山东淄博人，2010级本科学生，研究方向：方剂临床应用及疗效客观化研究。通讯作者：郭炜（1979-），男，山西阳泉人，讲师，博士，研究方向：方剂临床应用及疗效客观化研究。E-mail：gw1946@https://www.360docs.net/doc/7615255680.html,。 Effect of Lizhong Decoction with Different Dosages in Ancient and Modern Times on Organ Coefficients of Spleen Yang Deficiency Mice YUAN Chenhao，DONG Guangtong，SUN Weiyue，GAO Yonggui，ZhANG Wenjing，WANG Xin，GUO Wei （Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Ji'nan 250355，Shandong，China）Abstract：Objective ：To investigate how the organ coefficients of the spleen Yang deficiency mice were affected by Lizhong Decoction with different dosages in ancient and modern times. Method ：40 SPF Kunming mice，half male and half female，were divided into 4 groups（the ancient dosage group，the modern dosage group，the blank group，the model group）randomly. The mice model of spleen Yang deficiency was established by injecting Reserpine except the blank group. The ancient dosage group and the modern dosage group were treated with Lizhong Decoction of ancient dosage and modern dosage respectively once a day. The model group and the blank group were treated with the same dose distilled water once a day. After 5 days treatment，all the mice were killed and the organ coefficients of liver，spleen，kidney and thymus were analyzed. Results ：After 5 days treatment，the liver coefficients in the ancient dosage group were significantly decreased compared with that in the model group.（P <0.01）. There was no marked difference between the ancient dosage group and the modern dosage group in the liver coefficients. Conclusion ：The ancient dosage group could reduce the liver coefficients significantly，while the modern dosage group has a little effect. Lizhong Decoction with different dosages in ancient and modern times makes no significant influence on the organ coefficients of spleen，kidney and thymus. Key words：Lizhong Decoction；different dosages in ancient and modern times；organ coefficients DOI：10.13194/j.issn.1673-842x.2014.06.016
阳虚证之病机与症状总结
《阳虚证之病机与症状总结》 一、阳乃温煦之气，阳虚则寒。故畏寒乃阳虚证之第一主证。 阳虚者，畏冷怯风：稍遇凉风，则易外感，常鼻塞、流涕、喷嚏。虽夏季，亦不敢迎风贪凉(怕电扇空调)，衣着每多于常人。 阳虚者，形寒肢冷：因四肢为诸阳之末，故手足冰冷较为明显； 就人身部位而言，前为阴，腹为至阴之地；后为阳，背为至阳之地，故阳虚者多腹冷、背凉； 又：上为阳，下为阴。肾为阴阳之根，其经脉达于足底，阳虚者，多足冷。 另：天人相应，合于四时。昼为阳、夜为阴；夏为阳、冬为阴；故阳虚者，症状常在夜晚加重，冬季犹甚。 阳虚者，需保暖，故常关门闭户，厚衣重被，卷屈俯卧。 阳虚者，喜热资助，故饮食喜温热燥辣，恶生冷清稀；喜睛天、白昼、阳光，恶阴天、夜晚、寒冷。 二、“有诸内，必形于诸外”。赤色主火，白色主寒。气色苍白乃阳虚证之第二主证，望诊时，察颜观色不可忽视。 阳虚者，唇淡、面白、小便清。舌淡、苔白、爪甲暗。 三、阳主动，阴主静。观其动静，以别阴阳。上工守神，精力之强弱，寓阴阳之盛衰。
阳虚者，多嗜卧懒动，神疲乏力，语声低怯。阴虚者，多亢奋不宁，烦躁易怒，声音清亮。 阳虚之证，根据其不同程度及不同阶段的症状表现，可分为四大类，即：阳气亏虚、阴阳两虚、虚阳上浮、元阳外脱。 阳气亏虚者，症状表现最为典型：唇淡面白、形寒肢冷、神疲嗜卧、大便稀溏、夜尿频多、舌淡苔白、脉沉迟紧等。以上症状虽不一定齐备，但总有二三个症状表现明显，较易分辨。然而，凡事有常数，亦有变数；知常易，达变难。阳气亏虚证仅是阳虚证之常态而已！ 阴阳两虚者，因阴阳互为其根，阴损及阳，阳损及阴，最终导致阴阳俱损。此证阴症阳症混为一体，似是而非，模棱两可，犹难识辩！若单补其阴，则阳不运化，徒生痰湿；其单补其阳，则火上浇油，灼伤津液；必须阴阳双补，才能阴阳互生。辩证要点有三：1、既有阳虚之神疲懒动，又有阴虚之咽干口渴等症。2、阳虚者多冬天怕冷而夏天耐热，阴虚者夏天怕热而冬天耐寒，相对于常驻人，阴阳两虚者既冬天怕冷又夏天怕热。3、阳虚者，但欲寐；阴虚者，易失眠；阴阳两虚者往往神疲思睡，时时欲睡，但又难以入睡，即使用权睡着，也多梦易醒。 虚阳上浮者，寒邪盛而真阳衰也！肾为阴阳之根，元阳本下藏于命门。若真阳衰，寒邪沉降趋下，直入坎宫，雀巢鸠占，逼迫真阳，真阳难
条件性敲除小鼠
条件性敲除小鼠 定义： 条件性基因敲除小鼠（也叫Flox小鼠）是指在目的基因中含有成对的loxp位点的小鼠，与Cre工具小鼠交配后可在特定的组织或细胞中敲除目的基因。 ●CKO如何实现？ 重组酶系统（如：Cre-loxP）介导的位点特异性重组技术。 Cre是重组酶（38kDa），可识别34bp 长的DNA 序列loxP。loxP 两侧各13bp 构成回文结构，中间8bp为非回文结构，因此loxp具有方向性。 （当DNA 分子上存在两个同向loxP 序列时，Cre可将两个loxP 序列之间的DNA 片段切出并环化，同时将loxP 两侧的序列进行连接；当DNA 分子上存在两个方向相反的loxP 序列时，Cre 可导致loxP 之间的序列发生反转。） ●CKO敲除的是什么？ 条件性基因敲除的靶基因中必须带有可以被Cre 重组酶识别的loxP 序列，这种基因称为floxed gene。 带有floxed 靶基因的小鼠称为flox 小鼠。在这种小鼠中，通常采用DNA 同源重组方法，在拟敲除基因片段的两侧分别放置一个同向的loxP 位点。 loxP 位点的存在应不影响该基因的功能，故选择对照为flox/flox小鼠 ●CKO敲除何时何地发生？ 除了flox 小鼠以外，重组酶系统介导的条件性基因敲除还需要另一类重要的基因工程小鼠的参与——Cre 工具鼠。 Cre 工具鼠中，将Cre 重组酶的编码序列置于特定的基因启动子下，Cre 的表达特性决定了靶基因何时何地发生敲除。 Cre 在哪一种组织细胞中表达，靶基因的敲除就发生在哪种组织细胞；Cre 的表达水平将影响靶基因在此种组织细胞中进行修饰的效率；使用诱导型Cre 重组酶可以通过给予诱导剂，决定在特定的发育时期或疾病发生阶段，定时地进行基因敲除。 （范衡宇老师课件） 实验时，将flox 小鼠和Cre 工具鼠进行交配，最后获得flox 纯合且Cre 杂合的小鼠。在这类小鼠中，凡是表达Cre 的细胞，两个loxP 之间的序列被切
课题-基因敲除小鼠的pcr鉴定
课题-基因敲除小鼠的pcr鉴定
一、技术介绍与研究进展 转基因、基因敲入/敲除动物技术已经成为现代生命科学基础研究和药物研发领域不可或缺的重要技术，该技术从上世纪七八十年代诞生以来，至今已有近四十年的历史，经典技术如DNA原核显微注射、胚胎干细胞显微注射技术一直以来经久不衰，在小鼠模型构建方面日趋完善，并且如同剪切酶和抗体等常规分子生物学试剂的制备技术一样，逐渐从基础研究实验室转向商业模式，成为一项高度标准化的新兴产业，催生了数以百计的创新药物和数以千计的优秀文章。尽管如此，传统技术仍然存在一些难以克服的缺陷，如步骤繁琐、周期漫长、成功率低、费用高昂等，而ZFN和TALEN 等新技术的出现，或有可能将这一局面彻底改变。 二、同源重组技术原理 基因敲除鼠技术是上世纪80年代中后期基于DNA同源重组的原理发展起来的，Capecchi和Smithies在1987年根据同源重组（homologous recombination）的原理，首次实现了ES的外源基因的定点整合（targeted integration），这一技术称为"基因打靶"（gene targeting）或"基因敲除"
（gene knockout），利用这种ES的显微注射就可以制作出基因敲出小鼠（KO Mice: knockout mice）;由于这一工作，Capecchi和Smithies于2007年与Evans分享了诺贝尔医学奖。 同源重组（homologous recombination）定义：是指发生在姐妹染色单体（sister chromatin) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。在基因敲除小鼠制作过程中，需要针对目的基因两端特异性片段设计带有相同片段的重组载体，将重组载体导入到胚胎干细胞后外源的重组载体与胚胎干细胞中相同的片段会发生同源重组，如图1所示： 图1.基因敲除鼠制作同源重组原理示意图 三、制作流程
覆盆子及其不同炮制品对肾阳虚小鼠的影响
覆盆子及其不同炮制品对肾阳虚小鼠的影响 发表时间：2015-03-06T15:58:33.180Z 来源：《医药前沿》2014年第29期供稿作者：陈秀瑷杨鑫赵华 [导读] 本文报道了覆盆子上述不同炮制品对肾阳虚小鼠体重及脏器指数的影响。 陈秀瑷杨鑫赵华 （辽宁医药职业学院辽宁沈阳 110101） 【摘要】目的探讨覆盆子及其不同炮制品对肾阳虚小鼠的影响。方法肌肉注射氢化可的松造成肾阳虚动物模型，观察覆盆子不同炮制品提取物对肾阳虚小鼠的体重、胸腺、脾脏、肾上腺、睾丸重量的影响。结果覆盆子不同炮制品均能提高肾阳虚小鼠的体重、肾上腺、脾脏的重量，其中在肾上腺、脾脏增重方面，黑豆炙品＞盐炙品＞生品＞酒炙品；生品和黑豆炙品能提高肾阳虚小鼠的胸腺重量；生品及其它三种炮制品对睾丸增重情况无明显影响。结论覆盆子及其不同炮制品对肾阳虚小鼠均有补肾壮阳作用。 【关键词】覆盆子炮制品肾阳虚脏器指数 【中图分类号】R283 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2014）29-0303-02 覆盆子为蔷薇科植物华东覆盆子Rubus chingii Hu.的干燥果实，始载于《名医别录》，具有益肾固精缩尿，养肝明目的功效，用于遗精滑精、遗尿尿频、阳瘘早泄、目暗昏花等证[1]。现代药理研究表明，覆盆子具有显著的抗肿瘤、抗氧化、降低血脂血糖、抗衰老和抗炎等药理作用[2]。此外，覆盆子还有抗诱变作用，改善学习记忆力的同时，增强免疫作用[3]。目前关于覆盆子炮制品的研究较少，炮制品主要为生覆盆子、酒覆盆子和盐覆盆子[4]，文中的黑豆汁炙覆盆子为笔者新研究品种，本文报道了覆盆子上述不同炮制品对肾阳虚小鼠体重及脏器指数的影响。 1.实验材料 1.1覆盆子（Rubus chingii Hu.）来源由金草药材公司提供，经本院中药教研室刘颖老师鉴定为蔷薇科植物华东覆盆子干燥果实。 1.2炮制品的制备盐炙覆盆子：取净覆盆子，用2%食盐水拌匀，润闷，待盐水被吸尽后，蒸2小时，取出干燥备用。 酒炙品：取净覆盆子，用15%黄酒拌匀，润闷，待酒被吸尽后，置炒制容器内，100℃炒至10分钟，取出放凉。 黑豆炙品：取净覆盆子，用10%黑豆汁拌匀，润闷，待黑豆汁被吸尽后，蒸2小时，取出干燥备用。 1.3药物提取取生品、盐炙品、酒炙品和黑豆炙品四种药物分别用70%乙醇提取2次，合并提取液，减压浓缩，得醇提取物，将覆盆子醇提取物分别用0.5%的CMC-Na溶液制得每ml溶液相当于0.5g药材的混悬液。 1.4实验动物 SPF级昆明种小鼠，体重27±3g，雄性，由辽宁省动物资源中心提供，饲料为小鼠常规饲料。 2.方法与结果 2.1实验方法取雄性小鼠随机分为六组，每组12只，分别为空白对照组、阳虚证模型组、生品组、酒炙品组、盐炙品组、黑豆汁炙品组，在实验条件下，常规饲养3天，3天后除空白对照组外，其余五组均采用连续3天肌肉注射氢化可的松造成肾阳虚模型[5]，用量为 0.25mg/10g，造模的同时连续给药，给药量为5ml/Kg，给药第10天记录各组动物的体重，然后断颈处死，摘取小鼠的胸腺、脾脏、肾上腺、睾丸进行称重，计算脏器指数，脏器指数=脏器重量（mg）/体重(g)×10，并且进行组间t检验。 2.2实验结果 2.2.1各组造模及给药前后小鼠状态观察所有实验动物在造模前精神状态均良好，动作灵活，毛发光泽洁白，皮肤及粘膜红润，体重每天均有所增长，饮食及饮水均正常。肌肉注射氢化可的松后，除空白对照组体重继续增加，状态正常外，其它各组体重均不同程度下降，且精神萎靡，倦怠，活动减少，闭目纳食减少，毛发疏松无光泽且颜色发黄，其中阳虚模型组表现最为明显，其它给药组状态强于阳虚模型组，但仍逊于空白对照组。 2.2.2各组实验动物给药前后体重变化及脏器指数变化比较 连续3d肌肉注射氢化可的松后，各给药组小鼠均出现体重减轻，自主活动减少，脾脏、肾上腺、睾丸重量均减轻现象，胸腺变化不明显，具体情况见下表。 注：与正常组比较△p＜0.05，△△p＜0.01，与阳虚模型组比较*p＜0.05，**p＜0.01 通过表中数据可看出： 生覆盆子及三种制品对氢化可的松所致的肾阳虚小鼠的体重、脾脏、肾上腺均有增加作用，其中对体重的增加：黑豆汁炙品组＞盐炙品组＞酒炙品组＞生品组；对脾脏的增加：黑豆汁炙品组＞盐炙品组＞生品组＞酒炙品组；对肾上腺的增加：黑豆汁炙品组＞盐炙品组＞生品组＞酒炙品组。 生覆盆子和黑豆汁制品能增加胸腺重量，酒炙品和盐炙品未见明显差异；生品组和三个制品组对肾阳虚小鼠睾丸的重量影响不显著。 3.讨论 3.1肌注或口服氢化可的松是一种经典的肾阳虚造模方法，造模的成功率较高。本实验采用肌注氢化可的松进行阳虚造模，实验动物于给药后呈现出的状态与肾阳虚症状也较为一致。