临床分子生物学检验试题
临床分子生物学检验试题一填空题
1.核酸的最大紫外吸收波长在，蛋白
质的最大吸收波长在。
2.双链DNA中的碱基对
有，。
3.根据分子和结构不同，RNA可以分
为，，，。
4.核酸变性过程中,紫外光吸收达到最大值
50%时温度称为,其主要与核酸
的最终
含量有关.
5.DNA水解后主要产物
是,,。
6.核酸（DNA和RNA）分子除含
有，，，四种元素外，
还含有大量的元素。
7.PCR技术是当今分子生物学使用最多的
技术之一，它一般都有，，三
个基本反应步骤构成。
8.核酸水解后首先得到核苷酸，核苷酸可以
继续水解得到和。
9.通用遗传密码中代表终止密码的三种密码
是UAA、和。
10.PCR方法扩增DNA片段是，在反应中除
了用该DNA片段作为模板外，尚需加
入、
和。
11.在DNA分子中还有大量的磷（P），P的
含量大约为。
二．判断题
1.核酸变性时,碱基对之间的氢键断开,堆积
力也受到破坏,共价键断裂.（）
2.核酸杂交原理就是根据核酸分子间互
补.()
3.在中性或碱性溶液中,核酸主要带正电
xx.()
4.核酸分子质量很大,因此核酸溶液具有很
大粘性.()5.分子杂交可以发生在任何只有互补核苷酸顺序两条单股核酸单链之间,如DNA/DNA、DNA/RNA、RNA/RNA等.（）
6.核酸水解后首先得到核苷酸，核苷酸可以继续水解得到核苷和磷酸（）
7.在高分子溶液中一般球形分子比线形分子的具有较大的粘度。（）
8.核酸的最大吸收波长在280nm，而蛋白质的最大吸收波长在260nm。
（）
9.酚—氯仿提取法是我们在提取DNA时所用的经典方法，现在仍然被许多实验室所采用。（）
10.组成RNA的四种碱基是腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）、胞嘧啶（C）、胸腺嘧啶（T）。（）
11.PCR技术是以DNA或RNA为模板进行核酸的体外扩增技术。（）
12.PCR技术是现在常用的一种扩增技术，它的基本步骤的顺序是退火、变性、延伸。
（）
13.免疫印漬技术及SouthernBlotting是一种印漬技术和抗原抗体反应结合的技术（）
14.在临床基因扩增检验诊断实验室工作的实验操作人员必须经过业务培训并取得上岗证书（）
15.无论是DNA还是RNA，在多核苷酸链内既有酸性的磷酸基又有碱性的含氮杂环碱，因此核酸是两性电解质。（）
16.在PCR实验中，退火是指在极端的PH和受热条件下，核酸分子中的氢键断裂，DNA双螺旋解开的一个过程。（）
17.临床基因扩增诊断实验室的设置必须遵循一定的原则，而这些基本原则制定的主要依据就是使建立的基因扩增诊断实验室结果的准确性能够得到保证，能忠实的反映被检的临床样本的真实情况。（）二选择题
1.核酸在波长为260nm光吸收强度大小排列正确的是（）
A.
G>A>T>CB.A>T>G>CC.C>G>T>A
D.G>C>A>T
2．鉴别RNA靶分子的杂交是（）
ASouthernBlotBNorthernBlotCWestern
Blot D斑点杂交3.在做RNA检测时，我们对全血抗凝最好用下列哪种抗凝剂（）
A.肝素
B.EDTA-K2
C.EDTA-Na2
D.草酸钾
4.一般DNA分子中的碱基数组成规律，下列哪一项是错的（）
A.A=C,G=T
B.A+G=C+T
C.不同DNA中碱基组成不相同
D.同一个不同组织细胞中DNA碱基组成相同
5.核酸分子储存和传递遗传信息是通过（）来进行的
A.核苷的结构
B.磷酸二酯键
C.碱基顺序
D.核苷酸的结构
6.分子生物学对医学的发展已经起到越来越大的作用，许多分子生物学的发现对分子生物学的发展都起到里程碑的作用，基因就是由转化功能的DNA所组成，最早是由谁发现的（）A.Friderick Griffith B.Alfred Hershey C.Martha ChaseD.Oswald Avery
7.基因扩增检测方法也有检测的灵敏度，一般适时荧光定量PCR的检测下限是（）A.103拷贝/mlB.104拷贝/mlC.102拷贝/mlD.105拷贝/ml
8.RNA和DNA彻底水解后的产物为（）
A.核糖相同，部分碱基不同
B.核糖不同，碱基相同
C.核糖相同，碱基相同
D.核糖不同，部分碱基不同
9.下列哪种碱基仅存在于RNA中而不存在于DNA中（）
A.鸟嘌呤
B.尿嘧啶
C.胸腺嘧啶
D.腺嘌呤
三讨论题
1.简述核酸探针及其应用。
2.简述PCR技术的基本原理及基本反应步骤。
3.什么叫人类基因组计划，它对医学上的研究具有哪些意义？
4.简述核酸分子杂交的基本原理、类别和应用。
5.简述基因诊断检测的临床应用
6.核酸产物主要用哪些方法检测，他们分别用在哪些情况下？
7.简述DNA芯片技术的应用。分子生物学参考答案：
一．填空题：
1.260nm280nm
2.A=TG=C
3.tRNAmRNArRNAhnRNA
4.解链温度G+C
5.磷酸脱氧核糖碱基
6.CHONP
7.变性退火延伸
8.戊糖含氮碱基
9.UAAUAGUGA10.耐热Taq酶引物dNTP 11.9%～10%二．判断题：
1.×
2.√
3.×
4.√
5.√
6.√
7.×
8.×
9.√10.×11.√12.×13.×
14.√15.√16.×17.√
三．选择题：
1.B
2.B
3.C
4.A
5.C
6.D
7.A
8.D
9.B
四．讨论题
1.（1）一小段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素、和荧光染料标记它的末端或者全链，我们就把这一段多聚核苷酸序列称为探针。（2）可以用于检测特异DNA或RNA序列片段，可以用于遗传病的基因诊断，用于限制性片段长度多态性作疾病的相关分析，法医学上的性别分析和性别鉴定。
2.（1）PCR的基本原理是以需要扩增的DNA为模板，以一对分别与模板的5,和3，末端相互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半
保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成，重复这一过程，即可使目的DNA片段得到扩增。
（2）PCR的基本步骤包括：①变性：将反应系统加热至95℃，使模板DNA全部变性变成单链DNA。②退火：将温度下降至适当温度，使引物与模板DNA退火结合。③延伸：将温度升至72℃，DNA聚合酶以dNTP底物催化DNA 的合成反应。上述三
个步骤称为一个循环，这样的循环重复
25-30次，就可以得到大量的目的DNA。
3.（1）1991年，由美国众院批准的一个15
年的人类基因组研究计划，花费金额约为30
亿美元，该项目很快得到各国科学家和各国
政府的所重视，1994年，我国也加入到其中
的相关研究项目，人类基因组分析的主要内
容包括：遗传图分析，物理图分析，转录图
分析，基因组序列测定等。（2）人类基因组
计划的实施大大促进了医学的发展，DNA
的遗传作图和物理作图对于认识疾病相关
基因具有巨大的推动作用。遗传性疾病的基
因定位，尤其是对多基因位点将可以进行全
基因组的定位扫描，使得确定致病基因的工
作更为容易。
4.（1）单链的核酸分子在合适的温度和离子
强度下，通过碱基互补形成双链杂交体的一
类技术。（2）核酸分子杂交分为液相杂交，
固相杂交，原位杂交，基因芯片技术。（3）
主要应用SOUTHERNBLOTTING用于未
知DNA的检测，NORTHERN BLOTTING
用于检测未知RNA，原位杂交用于组织和
细胞中的基因定位。
5．主要应用于感染病原的检测、遗传病的
诊断、组织配型及肿瘤的早期诊断等。
6.主要的检测方法有：（1）凝胶电泳分析法：主要用于PCR产物的检测。（2）微孔板夹
心杂交法（PCR-ELISA）本法可避免电泳和
杂交的繁杂步骤，适于常规的ELISA计数仪
检测PCR反应的产物。（3）荧光探针标记
法：这种方法在PCR的反应过程中对PCR
产物中荧光强度的检测，从而对PCR产物
进行定量。（4）分支DNA（dDNA):可以用
于一些计算机程序中自动计算标本病毒
RNA的含量。
7.主要应用于（1）基因诊断；（2）DNA序
列测定；（3）临床药物筛选；（4）其他领域：
法医学鉴定、食品工业、环境监测。（此文档部分内容来源于网络，如有侵权请告知删除，文档可自行编辑修改内容，供参考，感谢您的配合和支
持）
临床医学检验技术(中级)-临床免疫学和免疫学检验(B1型题)_1
临床医学检验技术（中级)-临床免疫学和免疫学检验 (B1型题) 1、既具有抗原吞噬能力又有抗原提呈能力的细胞是 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞 E.单核细胞 2、既不表达HLA-Ⅰ类抗原又不表达HLA-Ⅱ类抗原的细胞是 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞 E.单核细胞 3、应用CDC方法检测HLA-DR抗原所使用的待测细胞为 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞
E.单核细胞 4、PHA刺激法可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 5、免疫比浊法可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 6、流式细胞仪可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验
7、细胞毒试验可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 8、测定抗体生成细胞数 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 9、测定T细胞数量 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验
10、测定NK细胞的杀伤活性 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 11、测定非特异性细胞免疫功能 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 12、白血病儿童从骨髓库中得到别人捐献的骨髓，属 A.自体移植 B.同种移植 C.异种移植 D.同系移植 E.胚胎组织移植 13、试验性将猪心移植给猴，属
临床血液学检验第五版考试重点
1.造血：造血器官生成各种血细胞的过程。能够生成并支持造血细胞分化、发育、成熟的组织器官称为造血器官。 2.胚胎期造血分为：中胚叶造血、肝脏造血和骨髓造血；出生后的造血分为:骨髓造血和淋巴造血。 3.髓外造血（EH）：正常情况下，胎儿出生2个月后骨髓以外的组织如肝、脾、淋巴结等不再制造红细胞、粒细胞和血小板，但在某些病理情况下，如骨髓纤维化、骨髓增生性疾病及某些恶性贫血时，这些组织又可重新恢复其造血功能，称为髓外造血。 4.造血微环境（HIM）：由骨髓基质细胞、微血管、神经和基质细胞分泌的细胞因子构成，是造血干细胞生存的场所。 5.造血干细胞（HSC）：由胚胎干细胞发育而来，具有高度自我更新能力和多向分化能力，在造血组织中含量极少，形态难以辨认的类似小淋巴细胞样的一群异质性的细胞群体。 6.CFU-S：能形成脾结节的干细胞称脾集落形成单位。 7.造血祖细胞（HPC）：是指一类由造血干细胞分化而来，但部分或全部失去了自我更新能力的过渡性、增殖性细胞群。也称为造血定向干细胞。 8.骨髓间质干细胞（MSC）：是一种成体干细胞，具有多向分化潜能和高度自我更新能力等干细胞的共性，可在不同环境中分化成不同种类的细胞，如成骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞和血管内皮细胞。 9.细胞凋亡：是细胞死亡的一种生理形式，是调控机体发育、维护内环境稳定、由基因控制的细胞自主的有序死亡，又称为程序性细胞死亡。 10.无效造血：幼红细胞在骨髓内分裂成熟过程中发生的“原位溶血”，或红细胞进入循环后很快被破坏，称无效造血。 11.原始粒细胞：胞体直径10-20微米，圆形或类圆形，胞核较大，圆形或类圆形，居中或略偏位，约占细胞的2/3，核染色质呈细粒状染淡紫红色，排列均匀，平坦如一层薄纱，
临床分子生物学检验 总
四个阶段： 一、以导致遗传病的基因突变位点为靶标，以DNA分子杂交为核心 二、以PCR技术为核心 三、以生物芯片为核心 四、以DNA测序技术为核心 广义：分子标志物包括基因组DNA、各种RNA、蛋白质和各种代谢物 临床分子生物学检验靶标主要以核酸（DNA和RNA）为主 基因组DNA是临床分子生物学检验中最常用的分子靶标 病原生物基因1.菌种鉴定：PCR-测序和PCR-DNA探针杂交;缩短检测时间 2.确定病毒感染和病毒载量：明确感染源，判断病情，监测疗效 3.病毒分析：基因型变异产生不同临床症状 4.细菌耐药监测和分子流行病学调查：随机扩增多态性DNA；指导选择 治疗方案，控制病原菌的感染传播 基因变异1.致病基因的分子缺陷 2.线粒体基因突 3.肿瘤相关基因 单基因病1.致病基因结构发生了改变，影响了编码产物量和质的改变，如血红蛋白病、血友病、Duchenne肌营养不良等。 2.致病基因中核苷酸三联体重复序列发生高度扩展，如脆性X综合征、亨廷 顿病、强直性肌营养不良等。 基因多态性用于：1.基因定位和疾病相关性分析2.疾病诊断和遗传咨询3.多基因病的研究4.器官移植配型和个体识别 循环游离核酸检测（包括游离DNA和游离RNA）用于：产前诊断、恶性肿瘤早期诊断、病例检测 临床分子生物学检验技术以分子杂交技术、PCR技术和DNA测序技术、芯片技术、双向电泳技术、生物信息学技术为主要技术 分子生物学检验技术可用于微生物感染的确诊、感染性病原体的分型、耐药监测。 分子生物学检验技术有利于临床上对遗传性疾病的早期预防、早期诊断、早期治疗。 重要国际生物信息中心：1.美国国立生物技术信息中心（NCBI）2.欧洲生物信息学研究所(EBI) 3.日本国立遗传研究所（DDBJ） 一级核酸数据库有GenBank、EMBL和DDBJ； 蛋白质序列数据库有SWISS-PROT、PIR、UNIPRO T等。蛋白质X射线晶体三维结构数据库有PDB等。
分子生物学试题及答案
分子生物学试题及答案
分子生物学试题及答案一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。
除了5’ 3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（ IF-2 ）和（IF-3 ）。4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。 5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（ DNA重组技术）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（ hnRNA在转变为mRNA 的过程中经过剪接，）、
临床医学检验(临床免疫学)高级职称试题及答案
临床医学检验（临床免疫学）高级职称试题及答案 所含题型：单选题、多选题、案例分析题 一、单选题 1.CH50试验中，一个CH50U是指( ) A.引起50%溶血所需要的最小补体量 B.引起100%溶血所需要的最小补体量 C.引起50%溶血所需补体的最高稀释倍数 D.引起100%溶血所需补体的最高稀释倍数 E.以上均不对 答案：A 2.下列关于补体活化的MBL途径的描述，错误的是( ) A.激活起始于急性期蛋白产生前 B.MASP具有与活化的C1q同样的生物学活性 C.C3转化酶是C4b2b D.参与非特异性免疫，在感染的早期发挥作用 E.C反应蛋白可激活C1q 答案：A 3.B细胞膜表面主要Ig是( ) A.IgG和IgA B.IgA和IgM C.IgD和IgM D.IgD和IgE E.IgG和IgM 答案：C 4.下列哪项为非抗原特异性循环免疫复合物的抗球蛋白检测技术( ) A.PEG比浊法 B.C1q固相法 C.mRF凝胶扩散试验 D.Raji细胞法 E.超速离心法 答案：C 5.3～6个月婴儿易患呼吸道感染主要是因为哪类Ig不足( ) A.IgG B.IgM C.SIgA D.IgD E.IgE 答案：C 6.识别抗原抗体复合物的补体是( ) A.C1q B.C1r C.C1s D.C2
E.C1qrs 答案：E 7.补体蛋白约占人体血清总蛋白的( ) A.2% B.5% C.10% D.15% E.25% 答案：C 8.具有刺激肥大细胞脱颗粒、释放组胺的补体裂解片段是( ) A.C3a B.C3b C.C5b D.C4b E.C2a 答案：A 9.下列CH50不降低的疾病是( ) A.急性炎症 B.SLE活动期 C.RA D.严重肝病 E.亚急性细菌性心内膜炎 答案：A 10.Raji细胞是( ) A.由淋巴瘤患者分离建立的K细胞株 B.由淋巴瘤患者分离建立的B细胞株 C.由宫颈癌患者分离建立的B细胞株 D.由淋巴瘤患者分离建立的NK细胞株 E.由淋巴瘤患者分离建立的T细胞株 答案：B 11.能抑制C1r和C1s酶活性的物质是( ) A.C8bp B.DAF C.C1INH D.S蛋白 E.C4bp 答案：C 12.IgA、IgD和IgE不能与C1q结合的原因是( ) A.分子结构简单 B.Fc段无补体结合点 C.Fab段结构与补体相差甚远 D.VH无补体结合点 E.VL无补体结合点 答案：B
临床血液学检验考试重点总结
临床血液学检验 1.骨髓造血:骨髓的造血细胞大部分来源于肝脏，部分来源于脾脏。骨髓是产生红细胞，粒细胞和巨核细胞的主要场所，骨髓也产生淋巴细胞和单核细胞，因此骨髓不仅是造血器官，同时也是一个中枢淋巴器官。 2.髓外造血:正常情况下，胎儿出生2个月后，骨髓以外的组织如肝、脾、淋巴结等不再制造红细胞、粒和血小板，但是在某些病理情况下，这些组织又可从头恢复其造血功能，称为髓外造血。 3.血细胞的分化是指分裂后产生新的子细胞在生物学性状上产生了新的特点，即通过特定基因的表达合成了特定的蛋白质，与原来的细胞有了质的例外。这种分化过程是不可逆的，是血细胞失去某些潜能同时又获得新功能的过程。 4.血象和骨髓象检验是诊断血液系统疾病、观察疗效及病情的严重手段之一。 5.粒细胞系统包括原始粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞、晚幼粒细胞、杆状粒细胞和分叶核粒细胞，粒细胞是由于胞质中常有许多颗粒而得名的。颗粒从II型原始粒细胞开始出现，称为非特异性颗粒（又称为A颗粒、嗜天青颗粒、嗜苯胺蓝颗粒），从中幼粒细胞开始出现特异性颗粒（即S颗粒），S可以有三种:中性颗粒、嗜酸性颗粒及嗜碱性颗粒。 6.早幼粒细胞其胞体直径12～25um,较原始粒细胞大。 7.骨髓穿刺:最为理想的穿刺部位是髂骨上棘（包括髂骨前、髂骨后上棘） 8.骨髓取材情况判断:（1）取材满意:a.抽吸骨髓液时，患者感到有瞬间的酸痛感（有的患者无这种感觉）；b.抽出的骨髓液中有较多的黄色小粒（多为骨髓小粒，有的是脂肪）；c.显微镜下涂片中可见较多骨髓特有细胞:稚童粒细胞、有核红细胞、巨核细胞、浆细胞、造骨细胞、破骨细胞、脂肪细胞、肥大细胞、组织细胞、吞噬细胞等；d.中性杆状核粒细胞/分叶核粒细胞比值大于外周血中性杆状核粒细胞/分叶核粒细胞比值，有核细胞数大于外周血有核细胞数。（2）取材失败（即骨髓稀释）:如抽吸骨髓液时混进血液，称为骨髓部分稀释；
分子生物学检验完整版word精品
1病原生物基因组在医学上有何应用？详见书P3 a菌种鉴定b确定病毒感染和病毒载量c病毒分析d细菌耐药监测和分子流行病学调查 2什么是原癌基因，原癌基因有什么特性，原癌基因可以分为哪些种类以及原癌基因常见的 激活机制有哪些？ 原癌基因是指人类或其他动物细胞（以及致癌病毒）固有的一类基因，能诱导细胞正常转化并使之获得新生物特征的基因总称。 特性：进化上高度保守，负责调控正常细胞生命活动，可以转化为癌基因。 功能分类：生长因子，生长因子受体，信号转导蛋白，核调节蛋白，细胞周期调节蛋白，抑制凋亡蛋白 激活机制：插入激活，基因重排，基因点突变，基因扩增，基因转录改变 3试述Down综合征（21三体综合征）的主要临床特征及核型。 临床特征：生长发育障碍，智力低。呆滞面容，又称伸舌样痴呆。40%患者有先天性心脏畸形。肌张力 低，50%患者有贯通手，男患者无生育能力，女患者少数有生育能力，遗传风险高。 核型：92.5%患者游离型：核型为47，XX（XY）,+21 2.5%患者为嵌合型：46，XX（XY）/47，XX（XY）,+21 5%患者为易位型：46，XX（XY）,-14，+t（14q21q） 4简述淋球菌感染的主要传统实验室诊断方法及其主要特点，对比分析分子生物学方法的优 势 1直接涂片染镜检：敏感度和特异性差，不能用于确诊。 2分离培养法：诊断NG感染的金标准，但是其对标本和培养及营养要求高，培养周期长，出报告慢，难以满足临床要求。 3免疫学法：分泌物标本中的非特异性反应严重以及抗体法间的稳定性和条件限制，推广受限。分子生物学的优点：敏感，特异，可直接从了临床标本中检出含量很低的病原菌，适应于快速检测 5、在单基因遗传病的分子生物学检验中，点突变检测常用方法有哪些？ 1异源双链分析法（HA）2突变体富集PCR法3变性梯度凝胶电泳法4化学切割错配法5等位基因特异性寡核苷酸分析法6DNA芯片技术7连接酶链反应8等位基因特异性扩增法9RNA酶A切割法10染色体原位杂交11荧光原位杂交技术 6、简述白假丝酵母菌的分子生物学检验方法 白假丝酵母菌分子生物学检验主要包括白假丝酵母菌特异性核酸（DNA RNA ）的检测、基因分型和耐 药基因分析等。 1PCR技术：选择高度特异性的天冬氨酸蛋白酶基因设计引物 PCR—斑点杂交技术：正向杂交和反向杂交，后者可一次检测多种真菌 DNA指纹技术：RFLPRAPD电泳核型分析 AP —PCR技术：定义方法简便，快速，特别适合临床应用 DNA序列分析：可测定rDNA序列也适用于基因突变引起的耐药 基因芯片技术：适用于病原体的耐药研究 7、F WII基因倒位导致血友病A，DMD基因外显子缺失导致与杜氏肌营养不良，珠蛋白基因突变导致与珠蛋白合成障碍性贫血。 （第11章，P197，P203，P207。窝觉得大家把题目读三遍就可以了） 答：F VIII基因倒位是导致的血友病A的主要原因（占50%）其它基因突变，如点突变，缺失，插入也会导致血友病A。 同理DMD基因外显子缺失是迪谢内肌营养不良（杜氏肌营养不良）发生的主要原因（60%-70%）。
临床免疫学检验习题2
71.高滴度的抗RNP抗体为下列何种疾病所特有 正确答案是：( ) A.干燥综合征（SS） B.MCTD C.风湿性关节炎（RA） D.SLE 72.抗RO(SS-A)抗体和抗La(SS-B)抗体主要见于 正确答案是：( ) A.SS B.MCTD C.RA D.重症肌无力 73.类风湿因子（RF）是最先在下列何种疾病中发现的 正确答案是：( ) A.SS B.MCTD C.RA D.SLE 74.在下列何种疾病病人血清中可检出抗乙酰胆碱受体（AchR）,其效价基本上与病情严重程度相关 正确答案是：( ) A.MCTD B.RA C.SLE D.重症肌无力 75.多发性骨髓瘤是属于下列何种细胞的恶性免疫增殖病 正确答案是：( ) A.T细胞 B.B细胞 C.裸细胞 D.单核细胞 76.甲说：“单克隆丙球蛋白病是一组以浆细胞过度增殖为特征的免疫增殖病,患者血清中常出现大量单克隆免疫球蛋白（M蛋白）。""乙说：“这种异常的Ig理化性质十分均一,为研究Ig分子结构和功能,为制备Ig类和亚类抗血清提供了良好的天然材料。""谁对 正确答案是：( ) A.甲对乙不对
C.甲乙都对 D.甲乙都不对 77.甲说：“单克隆丙球蛋白病又称M蛋白血症。""乙说:“单克隆丙球蛋白病也称副蛋白血症。""谁对 正确答案是：( ) A.甲乙都对 B.甲乙都不对 C.甲对乙不对 D.甲不对乙对 78.甲说：“多发性骨髓瘤患者常见临床表现为贫血、溶骨性骨质损害、反复感染和肾损害等。""乙说：“多发性骨髓瘤患者主要免疫学特征为血清及尿中常发现副蛋白,血清中非骨髓瘤蛋白的Ig含量明显降低及骨髓中不成熟浆细胞比例明显升高""。谁对 正确答案是：( ) A.甲对乙不对 B.甲不对乙对 C.甲乙都不对 D.甲乙都对 79.甲说：“凝溶蛋白只能在轻链病患者血及尿中出现。""乙说:“凝溶蛋白在骨髓瘤患者中也较常见""。谁对 正确答案是：( ) A.甲对乙不对 B.乙对甲不对 C.甲乙都对 D.甲乙都不对 80.甲说：“多发性骨髓瘤是一种浆细胞恶性肿瘤,恶性浆细胞可在骨髓中查见。""乙说：“浆细胞白血病是多发性骨髓瘤的一个变异型,恶性浆细胞不仅见于骨髓中,而且可在血液中出现""。谁对 正确答案是：( ) A.甲对乙不对 B.乙对甲不对 C.甲乙都对 D.甲乙都不对 81.甲说：“Waldenstr?m巨球蛋白血症患者骨质损害不常见,但血中存在大量单克隆IgG。""乙说：“大多数比病患者临床症状与血液的高粘度有关""。谁对 正确答案是：( ) A.乙对甲不对 B.甲对乙不对
临床血液学与检验课程教学大纲
《临床血液学与检验》课程教学大纲 课程编号： 课程名称：临床血液学与检验 英文名称：clinical hematology and inspection 课程类型：专业课必修考试 总学时：122 学分：6.5 理论课学时：58 实验课学时：64 适用对象：医学检验专业本科学生 一、课程的性质和地位 临床血液学检验是临床医学中不可缺少的实验性学科，随着分子生物学、物理学、电子学等科学技术的迅速发展，新的检验技术促进了预防医学及临床医学不断前进。临床血液学检验是应用血细胞生理学、血液生化学、血液免疫学、遗传血液学、血液流变学、实验血液学等学科的科学方法，检查造血微环境、造血细胞、骨髓细胞及血栓与止血的各种凝血因子等。因此，临床血液学与检验是以血液学的理论为基础、以检验学的实验方法为手段、以临床血液病为工作对象，创造了一个理论－检验－疾病相互结合、紧密联系的新体系。是医学科学中不可缺少的应用学科，是医学检验专业学生的专业课之一。 通过临床血液学检验的学习，要求学生在理论上弄清实验原理，掌握基本理论和基本技能，以及各类造血细胞的生理、病理形态与各类常见血液病的临床基础及检验技术，能够理论联系实际。结合临床培养有解决问题和分析问题能力及具有初步科研工作能力的医学检验医师。 在临床血液学检验教学中重点讲授造血检验、细胞形态学、细胞组织化学染色、各类贫血、白血病、出凝血疾病等疾病的检查原理、操作方法、评价注意事项及临床意义等。 二、教学环节和教学方法 血液学检验的教学环节包括课堂讲授、实验、考试等。其中课堂是通过教师对指定教材部分章节的讲解，结合多媒体课件及细胞形态的图示以启发式方法教学。实验是教师在实验室里通过指导学生观察实验标本、挂图、图谱等，并结合电化教学、多媒体实验教学、要求学生细胞绘图等手段，强化记忆，并在教学过程中让学生尽早到医学检验室轮流进行实习，更好地配合理论教学。 三、教学内容及要求 第一篇绪论
《分子生物学检验技术》实验指导
《分子生物学检验技术》实验指导 【实验目的】 把握动物组织DNA提取的方法； 把握紫外分光光度法检测、鉴定DNA浓度和纯度的方法。 【实验原理】 获得相当纯度和完整性的基因组DNA，可用于DNA酶切图谱、多态性分析、基因诊断、构建基因组文库等。因此，DNA样品质量的好坏将直截了当关系到实验的成败。较理想的DNA样品应达到以下三点要求：①不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；②最大程度地降低蛋白质、多糖和脂类分子的污染；③排除RNA分子的污染和干扰。 DNA以核蛋白形式存在于细胞中，提取DNA的原则是即要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等成分分离，又要保持DNA分子的完整。本实验中，用阴离子去垢剂十二烷基磺酸钠（SDS）消化破裂细胞膜、核膜，并使组织蛋白变性沉淀，DNA从核蛋白中游离分开；为操纵组织中脱氧核糖核酸酶（DNase）对DNA的降解，加入柠檬酸钠或乙二胺四乙酸二钠（EDTA－Na2）以除去兴奋该酶的金属离子，SDS也能使DNase变性失活；蛋白酶K可水解蛋白质，消化D NA酶；分离后的DNA用饱和酚/氯仿抽提除去蛋白质，接着用氯仿抽提以除去DNA溶液中微量酚的污染；最后用无水乙醇沉淀DNA，得到欲提取的基因组DNA。
260nm处DNA有最大吸取峰，测DNA的A260，可运算其浓度。而蛋白质在280nm处有最大吸取峰，可测定A260nm/A280nm比值，检测DNA的纯度，该比值介于1.8~2.0之间。 【实验器材和试剂】 1、动物 小白鼠 2、设备 移液器、台式离心机、水浴箱、陶瓷研钵等；751紫外分光光度计、石英比色皿、洗瓶、滤纸等。 3、试剂 （1）基因组DNA提取试剂盒（北京康为世纪生物科技公司）：包括Buffer CL、Buffer PP、Buffer GE、RNase A、Proteinase K （7）生理盐水，4℃贮存 （8）无水乙醇、70%乙醇 【操作步骤】 1、制备肝匀浆 迅速处死小白鼠，称取新奇肝脏组织50 mg，用预冷生理盐水洗去血液，滤纸吸干后剪碎组织，将剪碎组织放于组织匀浆器或研钵中研磨，同时加入300 μl Buffer CL。将肝匀浆液放入EP管，加入1.5 μl蛋白酶K，漩涡震荡10 s，55℃孵育直到组织溶解（约1小时）。 2、提取DNA （1）加入1.5 μl RNase A，颠倒混匀，37℃孵育15-60 min。
(完整版)分子生物学试题及答案(整理版)
分子生物学试题及答案 一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。 3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36 个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。 9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸（ppGpp）和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10 区的TATA、-35 区的TGACA 及增强子，弱化子等。 12．DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13．SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。 14．单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15．考斯质粒：是经过人工构建的一种外源D NA载体，保留噬菌体两端的COS区，与质粒连接构成。16．蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal（5- 溴-4-氯-3- 吲哚-β-D- 半乳糖苷）产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ 基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛 选重组细菌。称之为蓝- 白斑筛选。 17．顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。 18．Klenow 酶：DNA聚合酶I 大片段，只是从DNA聚合酶I 全酶中去除了5' → 3'外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用 多聚dC 和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1．DNA 的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2．RNA 酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1 ）、（IF-2 ）和（IF-3 ）。 4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（DNA重组技术）三部分。7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（T2 噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接，）、 （mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA′3 末端多了一个多聚腺苷酸（polyA）尾巴）。9．蛋白质多亚基形式的优点是（亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法）、（可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响）、（活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭）。 10．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11．半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP 的启动子S2 进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于
临床免疫学检验试题
临床免疫学检验试题 一、选择（每题1分） 1、下列疾病中临床的诊断与治疗需要免疫学检验：（） A. SLE B. 哮喘 D. 类风湿性关节炎 C. 肿瘤 E. 以上都是 2、目前临床检测M蛋白的最有效免疫学检测方法是：（） A．ELISA法 B．免疫固定电泳 C．补体结合试验 D．混合淋巴细胞培养 E．以上都可以 3、下列与血清M蛋白增加的疾病是：（） A．多发性骨髓瘤 B．重链病 C．轻链病 D．恶性淋巴瘤 E．以上都是 4、下列选择的肿瘤相关抗原标志中针对前列腺增生或肿瘤的是：（） A．AFP B．CEA C．PSA D．NEC E．上述都不是 5、下列疾病中其发病机制属Ⅰ型超敏反应的是：（） A．结核病 B．ABO溶血 C．肾小球肾炎 D．花粉症 E．以上都是 二、填空（每空格1分） 1、临床选择肿瘤标志物监测的两项主要原则是，相关性的指标（）应用，针对出现的阳性指标可以（）观察。
2、目前临床免疫学检测的主要自身抗体有（），（）和（）等。 3、机体的免疫学功能主要包括两大部分，即（）和（）。 三、名词解释（第1题2分，第二题3分） 1、肿瘤标志物 2、M蛋白 参考答案： 一、选择题：1. E 2. B 3. E 4. C 5. D 二、填空题：1、联合，动态/跟踪2、抗细胞核抗体，抗细胞浆成分抗体，类风湿因子或抗组织细胞抗体二、名词解释：1、肿瘤标志物是指肿瘤细胞所产生或分泌的某种蛋白质，它们的出现与肿瘤的存在和发 展有密切的关系。 2、M蛋白是一种异常的免疫球蛋白。由一种单克隆B淋巴细胞异常增殖而产生的，它们 的结构或分子特性等与相应的免疫球蛋白相似，但不具有抗体活性功能。 1. 沉淀反应第一阶段：抗原抗体特异性结合、几秒钟至几分钟内即完成、可用散射比浊测定反应结果； 2. 采用试管凝集试验方法的实验有：肥达氏试验、外斐试验、输血交叉配血试验； 3. 正向间接凝集试验是用已知抗原检测相应抗体、临床是主要用于检测自身免疫病患者抗体； 4. 循环免疫复合物的检测是诊断自身免疫性疾病的辅助指标； 5. 待测孔最后显示的颜色深浅与标本中的待测抗原或抗体呈正相关的是：双抗体夹心法、双位点一步法、间接法测抗体； 6. 凝集反应是颗粒性抗原与相应抗体在适当电解质存在下形成肉眼可见的凝集现象； 7. 用已知抗体检测抗原的方法有：ELISA（夹心法）、免疫荧光技术（直接法和间接法）； 8. 外斐试验原理：变形杆菌属中的某些特殊菌株如X19、X2、XK的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原成分，可代替立克次体作为抗原与某些立克次体病串者血清作凝集反应，以辅助诊
临床血液学检验考试题
临床血液学检验考试题 姓名：学号：班级： 一、单项选择题 A型题（每题1分，共10分） 1、带3蛋白是红细胞膜中含量最多的一种（D） A、锚蛋白 B、收缩蛋白 C、肌动蛋白 D、跨膜糖蛋白E肌球蛋白 2、影响DNA合成的常见因素（ E ） A、丙酮酸激酶缺乏 B 、铁缺乏 C 、维生素C缺乏 D 、微量元素缺乏E、叶酸和维生素B12(vitamin B12)缺乏 3、早期诊断缺铁性贫血的主要指标是（ A ） ` A、血清铁蛋白降低 B 、血清铁降低 C 、转铁蛋白饱和度降低 D 、总铁结合力升高 E 、铁粒幼细胞增多 4、PAS染色对下列哪项最有意义: （A） A、巨贫与红血病的鉴别 B、急淋与急非淋的鉴别 C、PNH与再障的鉴别 D、外周血象检查 E、以上均不正确 5、活化蛋白C可灭活下列哪些因子（C） A、因子Ⅹa、Ⅺa B、因子Ⅶa、Ⅹa C、因子Ⅴa、Ⅷa D、因子Ⅹa、Ⅸa E、AT、HCⅡ 6、关于NAP的临床意义，哪项是错误的（ C ） A、慢性粒细胞白血病时NAP活性降低，而类白血病反应时则增强 B、{ C、化脓性感染时NAP活性增加，而病毒感染时则无变化 D、急性淋巴细胞白血病时NAP活性降低，而急性粒细胞白血病时则增强 E、慢性粒细胞白血病患者急性变时NAP活性增强 F、再生障碍性贫血患者NAP活性增强，PNH时则降低 7、下列哪项符合血管外溶血的实验室指标（ B ） A、血浆中出现高铁血红素 B、血浆血红素结合蛋白下降 C、尿中含铁血黄素试验阴性 D、尿中出现游离血红蛋白 E、血浆游离血红蛋白增高 8、急性粒细胞白血病与急性淋巴细胞白血病的鉴别依据是（D） A、巨核细胞受抑、血小板减少 B、原始细胞形态差别显著 C、骨髓增生明显活跃 [ D、POX染色 E、胞质中可见Auer小体 9、由可溶性纤维蛋白单体形成交联性纤维蛋白的过程中，参与的凝血因子有（ C ） A、因子ⅩⅢ B、因子ⅩⅢa C、因子ⅩⅢa 、Ca2+ D、因子Ⅹ E、因子Ⅹa、Ca2+ 10、下列检查哪项改变与溶血无关（ B ）
分子生物学检验技术
1、分子生物学检验技术：是以核酸或蛋白质为分析材料，通过分析基因的结构、表达的变化和由此而导致的基因功能的改变，为疾病的研究和诊断提供更准确、更科学的信息和依据的一门学科。 2、请说明分子生物学检验技术在临床试验诊断中的应用。（1）感染性微生物的检测。如：用PCR技术进行甲型肝炎病毒的检测、乙型肝炎病毒的检测和解脲脲原体的检测等。（2）基因突变的检测。如：用PCR一限制性片段长度多态性（RFLP)技术检测地中海贫血基因突变。 （3）法医学检测。如：用PCR微卫星检测技术进行亲子关系的鉴定和个体识别。 （4）基因异常表达的检测。如：用cDNA表达的芯片技术进行基因异常表达的检测。 （5）基因定位。如：用原位杂交技术进行组织与细胞中基因表达的定位。 3、基因组：是一个细胞或一种生物体的整套遗传物质。 4、基因：是基因组中一个功能单位，是贮存有功能的蛋白质多肽链信息或RNA序列信息及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列。 5、原核生物：是细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体、放线菌和蓝绿藻等原始生物的总称，是最简单的细胞生物体。
6、操纵子结构：是原核生物基因组的功能单位。 7、质粒：是指细菌细胞染色体外，能独立复制并稳定遗传的共价闭合环状分子。 8、转座因子：又称为转座元件，是一类在细菌染色体、质粒和噬菌体之间自行移动并具有转位特性的独立的DNA序列。 9、原核生物基因组的结构特征： （1）原核生物基因组通常仅由一个DNA分子构成，基因组中只有一个复制起点，具有类核结构。 （2）具有操纵子结构，模板mRNA为多顺反子mRNA。编码区远远大于真核生物基因组，但又远远小于病毒基因组。在基因组中存在多功能的识别区域，如复制起始区、转录启动区和终止区等，这些区域常常含有反向重复序列。 （3）结构基因通常为单拷贝基因，编码顺序一般不重叠。（4）具有编码同工酶的基因。 （5)含有可移动的DNA序列。 10、病毒基因组的结构特点： （1）与细菌和真核生物基因组相比，病毒基因组结构简单，基因数少，所含信息量也少。 （2）病毒基因组的核酸类型较多，有双链DNA、单链DNA、双链RNA和单链RNA；有环状分子，也有线性分子。但无论是哪种核酸类型，一种病毒颗粒中核酸成分只能为一种，或
《分子生物学检验技术》期末样卷标准答案
温州医学院医学检验专业《分子生物学检验技术》期末考试 卷样卷一标准答案 （卷面100分，占总成绩70%） 考试日期：2008年6月1日 考试时间：13：30-15：00 考试方式：闭卷 1.基因组 单倍体细胞中的全套染色体为一个基因组 2.蛋白质组 指由一个基因组，或一个细胞、组织表达的所有蛋白质 3.回文结构 一种旋转对称结构，在轴的两侧序列相同而反向。短的回文结构可能是一种特别的信号，如限制性内切酶的识别位点。较长的回文结构容易转化成发夹结构。 4.肽质量指纹图谱 蛋白质被识别特异酶切位点的蛋白酶水解后得到的肽片段的质量图谱。由于每种蛋白的氨基酸序列（一级结构）都不同，当蛋白被水解后，产生的肽片段序列也各不相同，因此其肽质量指纹图也具有特征性 5.生物芯片 指将大量探针分子固定于支持物上后与标记的样品分子进行杂交，通过检测每个探针分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。 6.分子生物学 从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学。其主要研究领域包括蛋白质、蛋白质-核酸和蛋白质-脂质（即生物膜）。 7.PCR 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)，简称PCR，是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。 8.BLAST 是一个用来比对生物序列的一级结构的算法。 9.ddNTP
双脱氧核苷三磷酸，与dNTP 的区别在于脱氧核糖的C3 位置缺少-OH，ddNTP可以在聚合酶的作用下可与多核苷酸链的3’－OH之间形成磷酸二酯键，但不能与下一个核苷酸缩合，使多核苷酸链的延伸终止。 10.基因病 遗传物质（基因）发生改变导致的疾病 1.试述真核生物基因组特点； 答：（1）真核生物基因组DNA与蛋白质结合形成染色体，储存于细胞核内，除配子细胞外，体细胞内的基因的基因组是双份的，即有两份同源的基因组。 （2）真核细胞基因转录产物为单顺反子。一个结构基因经过转录和翻译生成一个mRNA 分子和一条多肽链。 （3）存在重复序列，重复次数可达百万次以上。 （4）基因组中不编码的区域多于编码区域。 （5）大部分基因含有内含子，因此，基因是不连续的。 （6）基因组远远大于原核生物的基因组，3*109 。 （错一点扣1.5分） 2.试述重组子结构特征的筛选的方法； 答：（1）重组子大小鉴别筛选：获得外源DNA后，分子量较原来载体大得多，可利用限制性核酸内切酶法鉴别。 （2）直接酶切鉴定：结合琼脂糖凝胶电泳 （3）PCR筛选法：提取重组子DNA，以外源基因两端的互补序列为引物，进行PCR扩增外源DNA. （4）核酸杂交技术筛选：将DNA的克隆片段转移至硝酸纤维素薄膜上，应用特异的核酸探针进行原位杂交检测。 （每点2分） 3.试述酵母双杂交技术原理； 答、酵母的细胞内检测蛋白间相互作用的遗传系统 真核生物的位点特异转录激活因子通常具有两个可分割开的结构域:DNA特异结合域（BD）与转录激活域（AD）。这两个结构域各具功能，互不影响。但一个完整的激活特定基因表达的激活因子必须同时含有这两个结构域,否则无法完成激活功能。不同来源激活因子的区BD与AD结合后则特异地激活被BD结合的基因表达。（4分） 将两个待测蛋白分别与这两个结构域建成融合蛋白，并共表达于同一个酵母细胞内。如果两个待测蛋白间能发生相互作用，就会通过待测蛋白的桥梁作用使AD与BD形成一个完整的转录激活因子并激活相应的报告基因表达。通过对报告基因表型的测定可以很容易地知道待测蛋白分子间是否发生了相互作用。（4分） 4.试述TaqMan技术原理； 答、（1）Taqman技术主要用于荧光定量PCR法，TaqMan 探针是一种寡核苷酸探针，它的荧光与目的序列的扩增相关。（2分） （2）探针设计为与目标序列上游引物和下游引物之间的序列配对，带有一个荧光发光分子 和一个荧光淬灭分子。荧光基团连接在探针的5’端，而淬灭剂则在3’末端。（2分）
临床免疫学检验分章节练习试题及答案 (2)
【职称考试】临床免疫学检验【一】分章节试题（60题） 第一章概论 一、A1 1、IgM的结构为（）。 A、单体 B、二聚体 C、三聚体 D、四聚体 E、五聚体 2、某部位黏膜受抗原刺激后，无抗原诱导的其他粘膜部位是否同样产生抗原活化细胞（）。 A、同样产生 B、不产生 C、不一定 D、微量产生 E、部分产生，部分不产生 3、乳汁中富含抗体，初乳中含量最高的抗体是（）。 A、IgA B、IgE C、IgM D、IgG E、IgD 4、正常人血清中含量最低的免疫球蛋白是（）。 A、IgM B、IgA C、IgD D、IgE E、IgG 5、下列关于NK细胞的叙述正确的是（）。
A、NK细胞形态具有异质性，所有的LGL细胞均为NK细胞 B、NK细胞发源于骨髓干细胞，其发育、成熟依赖胸腺微环境 C、具有非特异杀伤作用，无MHC限制性 D、对所有肿瘤细胞均有作用 E、NK细胞不具有细胞介导的细胞毒作用 6、BCR基因表达区别于TCR最大的特点是（）。 A、同种异型排斥 B、共显性 C、同种型排斥 D、具有更多的N-插入 E、高频率体细胞突变 7、关于初次免疫应答的显著特点错误的是（）。 A、诱导潜伏期长 B、最先产生IgM C、抗体滴度低 D、维持时间短 E、抗体滴度高 8、补体系统的激活必须有下列哪种成分参与（）。 A、C1q B、B因子 C、C3 D、C4 E、C567 9、人类T细胞不具备的受体是（）。 A、E受体 B、IgGFc受体 C、C3b受体 D、DHA受体 E、IL-2受体
10、胸腺发育不全的患者可表现为（）。 A、细胞免疫功能缺陷 B、细胞及体液免疫功能低下 C、体液免疫功能低下 D、巨噬细胞缺陷 E、NK细胞活性低下 答案部分 一、A1 1、 【正确答案】 E 【答案解析】 IgM为五聚体，主要存在于血液中，是Ig中分子量最大者。 2、 【正确答案】 A 【答案解析】某部位黏膜受抗原刺激后，与无抗原诱导的部位可以分布数目相似的抗原活化细胞，说明这种免疫共享不是由抗原分散刺激引起，而是由淋巴细胞迁移引起的。 3、 【正确答案】 A 【答案解析】乳汁中富含抗体，初乳中含量最高的抗体是IgA。分泌型IgA（SIgA）性能稳定，主要存在于胃肠道、支气管分泌液、初乳、唾液、泪液中，局部浓度大。 4、 【正确答案】 D 【答案解析】 IgE为单体结构，正常人血清中IgE水平在5类Ig中最低，仅为0.1～0.9mg/L。IgE为亲细胞抗体，介异Ⅰ型超敏反应，与变态反应关系密切，在特异性变态反应和寄生虫早期感染患者血清中可升高。 5、
医学检验本科班分子生物学检验技术试卷
医学检验本班《分子生物学检验技术》试卷 一. 选择题（在备选答案中选择一个最佳答案,每题2分,共20分）: 1. 在核酸提取时,常需要使用氯化钠,醋酸钠等盐溶液,真正的目的是（） A. 中和核酸的负离子,使其易于沉淀 B. 调节PH值 C. 保持核算的完整性 D. 提高核酸的浓度 E. 无特定目的 2. 在一个DNA分子中,如G所占摩尔比为17.2%,则A所占摩尔比为（） A. 82.8% B. 32.8% C. 17.2% D. 65.6% E. 无法计算 3.下列那项不是扩增反应所必需的?（） A. 引物和模板 B. dNTP C. Mg++ D .DNase E. 缓冲液 4. 下列那项是分子生物学技术形成的理论基础?（） A. 基因结构与功能的关系 B. 基因结构变异与疾病的关系 C. 病原微生物的基因结构特征 D. 基因的表达.调控与疾病的关系 E. 以上皆是 5. 分子生物学检验技术主要包括那些技术?（） A. 核酸分子杂交技术 B. DNA测序技术 C. PCR技术 D. DNA重组技术 E. 以上全是 6. 下列哪项检测需应用分子生物学检验技术?（） A. 肝功能检测 B.乙肝两对半检测 C. 乙肝病毒DNA(HBV-DNA)检测 D. 肿瘤细胞培养 E. 病原微生物培养 7. 在核酸的分离纯化过程中,为保证其一级结构的完整性,应采取（） A. 尽量简化分离步骤,缩短提取时间 B. 适当延长提取时间 C. 在37摄氏度条件下进行 D. 加入Mg++,Ca++等二价金属离子 E. 以上全是 8. 有一核酸样品,测得A260/A280=2.0,请问该样品属于哪类核酸样品?（） A. DNA B. RNA C. 是DNA,但有蛋白质污染 D. 是RNA,但有蛋白质污染 E. DNA和RNA 9. 在RNA提取和纯化过程中,为避免Rnase污染而导致RNA的降解,应采取（）