D-乳酸高产菌株的选育和发酵培养基的优化
目录
D-乳酸高产菌株的选育和发酵培养基的优化 (5)
ABSTRACT (6)
第一章综述 (11)
1 乳酸的结构与性质 (11)
2 D-乳酸的应用 (13)
1.2.1 D-乳酸在农业领域应用 (13)
1.2.2 乳酸在工业领域的应用 (14)
1.2.3 聚乳酸的应用 (14)
3 工业化生产D-乳酸的方法 (15)
1.3.1 发酵法 (15)
1.3.2 化学合成法 (16)
4 D-乳酸菌株对营养的要求 (16)
1.4.1 碳源 (16)
1.4.2 氮源及生长因子 (17)
5 D-乳酸菌对培养条件的要求 (18)
1.5.1 发酵温度 (18)
1.5.2 pH调节剂 (19)
1.5.3 接种量 (19)
1.5.4玉米浆干粉 (20)
1.5.5 D-乳酸商业生产状况 (20)
6 应用于生物过程优化的统计学方法 (21)
1.6.1 Plackett-Burman 实验设计法 (21)
1.6.2最陡爬坡法（Steepest Ascent） (22)
1.6.3响应面法（Response Surface Methodology，RSM） (22)
7 本论文的工作意义及主要研究内容 (22)
第二章D-乳酸高产菌株的筛选、鉴定 (24)
1 实验材料 (24)
1.1 培养基 (24)
1.2主要试剂及仪器 (24)
1.3 试验主要仪器设备 (26)
2 实验方法 (26)
2.1 D-乳酸菌株的筛选 (26)
2.2 培养方法 (27)
3 菌种鉴定 (27)
3.1 菌体形态及单菌落形态 (28)
3.2 菌株HKM-1 16SrDNA序列及系统进化树 (28)
4 分析方法 (36)
4.1 总还原糖的测定 (36)
4.2 pH值的测定 (36)
4.3 L-乳酸的测定 (36)
4.4 D-乳酸的测定 (36)
4.5 计算方法 (39)
第三章培养基及培养条件优化 (40)
1 实验材料 (40)
1.1 菌种 (40)
1.2 主要仪器 (40)
1.3 主要试剂 (41)
1.4 培养基 (42)
2 菌种发酵及保藏方法 (43)
3 分析方法 (43)
4 计算方法 (43)
5 出发菌株生长曲线的绘制 (43)
6 发酵培养基的优化 (45)
6.1 不同碳源的使用对菌株HKM-1 D-乳酸发酵终产量的影响 (45)
6.2 不同葡萄糖初糖浓度的使用对菌株HKM-1 D-乳酸发酵终产量的影
响 (45)
6.3 不同装液量的使用对菌株HKM-1 D-乳酸发酵终产量的影响 (45)
6.4 不同接种量的使用对菌株HKM-1 D-乳酸发酵终产量的影响 (46)
6.5 不同培养温度温度对菌株HKM-1 D-乳酸发酵终产量的影响 (46)
6.6 氮源对菌株HKM-1 D-乳酸发酵终产量的影响 (47)
6.7 碳酸钙浓度对菌株HKM-1 D-乳酸发酵终产量的影响 (47)
6.8 5 L发酵罐验证实验 (48)
7 响应面分析发酵培养基 (48)
7.1 Plackett-Burman 实验法选取关键的影响因素 (49)
7.2 最陡爬坡实验 (49)
7.3 Central Composite实验设计 (49)
7.4 响应面模型的验证 (50)
7.5 响应面培养基5 L发酵罐验证 (50)
8 结果与讨论 (50)
8.1 不同碳源对菌株HKM-1 D-乳酸发酵终产量的影响 (50)
8.3装液量对菌株HKM-1 D-乳酸发酵终产量的影响 (53)
8.4 接种量对菌株HKM-1 D-乳酸发酵终产量的影响 (54)
8.5 温度对菌株HKM-1 D-乳酸发酵终产量的影响 (55)
8.6 氮源对菌株HKM-1 D-乳酸发酵终产量的影响 (56)
8.7 玉米浆干粉的浓度对菌株HKM-1 D-乳酸发酵终产量的影响 (58)
8.8 中和剂对D-乳酸产酸能力的影响 (59)
8.9 最优发酵培养基5 L发酵罐发酵验证实验 (60)
9 响应面分析发酵培养基 (61)
9.1 Plackett-Burman实验设计 (62)
9.2 最陡爬坡实验 (64)
9.3 响应面分析实验设计优化培养基 (65)
10 三角瓶静置培养验证实验 (70)
11 经济型培养基5 L发酵罐验证实验 (70)
第四章结论及展望 (72)
论文发表 (74)
参考文献 (75)
致谢 (79)
第一章综述
1 乳酸的结构与性质
乳酸是自然界最小的手性分子，化学名为2-羟基丙酸，英文名Lactic acid，