改良Lillie-Mayer苏木素染色液使用说明及染色结果

改良Lillie-Mayer苏木素染色液使用说明及染色结果
改良Lillie-Mayer苏木素染色液使用说明及染色结果

改良Lillie-Mayer苏木素染色液使用说明及染色结果

货号:G1081

规格:100ml/500ml

保存:室温避光储存,有效期至少12个月。

产品说明:

苏木素是组织化学和免疫组织化学中最常用的染料之一,可以广泛用于组织切片或培养细胞的染色。改良Lillie-Mayer苏木素染色液无毒,无氧化膜,不着染胞质和纤维成分,属进行性染色,细胞核染色质着色深而细微,临床上常替代Harris苏木素染色液,染色后可以不用盐酸乙醇分化,染色时间一般3~5min。常用于常规组织切片HE染色。

使用说明:

1、样品处理

a)对于石蜡切片:

二甲苯中脱蜡5-10min。换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10min。无水乙醇5min,90%乙醇2min,70%乙醇2min,蒸馏水2min;

b)对于冰冻切片:

蒸馏水2min;

c)对于培养细胞:

用4%多聚甲醛固定10分钟以上,蒸馏水洗涤2min,换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2min。

2、苏木素(H-E)染色

1)对于上述处理好的样品,用苏木素染色3-5min(根据染色结果和要求调整时间)。

2)蒸馏水洗。酸性分化液分化(可省略)。

3)用自来水洗去残留的染色液,约10min(也可使用促蓝液返蓝)。蒸馏水再洗涤一

遍(数秒钟)。

4)伊红染色20s-2min。

5)脱水、透明、封片

95%乙醇脱水2min,换用新鲜的95%乙醇再脱水2min;二甲苯透明5min,换用新鲜的二甲苯,再透明5min,用中性树胶或其它封片剂封片。

染色结果:

细胞核呈蓝色,细胞质、纤维等呈深浅不一的红色。

注意事项:

1、切片脱蜡应尽量干净。

2、95%的乙醇应经常更换新液。

3、酸性乙醇分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和分化液的新旧而定,另外分化

后自来水冲洗时间应该足够。

4、冰冻切片的染色时间尽量要短。

5、促蓝液常使用0.2~1%氨水水溶液或Scoot促蓝液或0.1~1%碳酸锂水溶液。

6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

7、使用场所应通风,并远离火源。

PH1237 标准革兰氏染色液实验与操作方法

PH1237|标准革兰氏染色液 Standard Gramˊs Stain Catalog No:PH1237Size:?4×100mL|?4×250mL Store at RT 简介 革兰氏染色法是丹麦医生Christain Gram于1884年所发明,是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,亦是一种复染法。未经染色的细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,用以分类鉴定。通过此法染色可将细菌鉴别为革兰阳性菌(G+)和革兰阴性菌(G-)两大类。 细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异,主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物,乙醇能使它脱色。在革兰阴性细胞染色中,乙醇或丙酮破坏了胞壁外膜、损伤肽聚糖层和细胞质膜,结晶紫和碘复合物从细胞中渗漏出来,当再用其他染色液复染时,显现红色。 红色染料虽然也能进入已染成紫色的G+细胞,但被紫色盖没,所以红色显示不出来。在革兰阳性细胞染色中,乙醇还能使厚的肽聚糖层脱水,导致孔隙变小,由于结晶紫和碘复合物分子太大,不能通过细胞壁,不易脱色,所以保持着紫色。 Standard Gramˊs Stain采用最经典的革兰染色配方,临床标本直接涂片,背景干净,胞核胞质对比强烈,胞内吞噬体清晰易辨认,细菌染色特征典型。 组份 名称4×100ml4×250ml Storage 试剂(A):结晶紫染色液100ml250ml RT避光 试剂(B):Gram碘液100ml250ml RT避光 试剂(C):脱色液100ml250ml RT 试剂(D):沙黄染色液100ml250ml RT避光 自备材料 1、接种环或挑取细菌的其他工具 2、酒精灯 3、载玻片 4、光学显微镜 操作步骤 (仅供参考): 1、涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者或在载玻片上滴加少许无菌水,混合均匀,涂成一薄层。 2、干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。 3、固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动3~5次,每次1s,温度不宜过高,防止菌体蛋白变性,放置待凉后染色。也可以用甲醇或乙醇固定。 4、初染:滴加结晶紫染色液染色1~2min,清水冲洗去染色液。 5、媒染:滴加Gram碘液,并覆盖载玻片,室温放置1~2min,水洗。 6、脱色:滴加脱色液,摇动10~30s,直至流下的脱色液不出现紫色时为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。

软骨染色液(番红O法)步骤及注意事项

软骨染色液(番红O法)步骤及注意事项 货号:G2540 规格:100ml 有效期:12个月有效 产品简介: 软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成,软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种,例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。 番红0软骨染色的原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色。番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料,其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团(硫酸软骨素或硫酸角质素)结合。 自备材料: 10%福尔马林固定液、脱钙液、蒸馏水、Weigert铁苏木素、系列乙醇等。 操作步骤(仅供参考): 1.标本的处理:10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。 2.常规脱蜡至水。 3.入新鲜配制的Weigert染液染色3-5min。 4.酸性乙醇分化液分化15s。 5.蒸馏水洗10min。 6.(可选)在固绿染色液内浸染5min,蒸馏水洗1min。 7.入Safranin O stain内浸染1-2min,蒸馏水洗1min。 8.分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。

9.二甲苯透明,光学树脂封固。 染色结果: 软骨基质深红色 软骨细胞核蓝色 软骨细胞浆红色 细胞核灰黑色 注意事项: 1.需要显示细胞核时,尽量采用铁苏木素染色,其着色力强色调浓,一般的苏木素着色力不强。 2.Weigert苏木素染液不可预先配制后放置,配制好后一般24h失去染色能力。 3.切片在Safranin O stain中染色不宜过长,否则易导致背景的深红色不易分化掉。 4.Safranin O stain染色后,不宜在低浓度乙醇脱水,否则易褪色。 5.95%乙醇脱水时间不宜过长。 6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

苏木素-伊红染色液 (混合型)

苏木素-伊红染色液(H-E)说明书 【产品名称】 苏木素-伊红染色液(H-E) 【型号】 混合型 【包装规格】 货号:DH0003 单瓶包装规格分别为:50ml、100ml、250ml、500ml、5000ml。 【预期用途】 主要用于对细胞组织进行染色。 【检验原理】 苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色,简称HE染色,是病理学常规制片中最基本的染色方法,应用极其广泛,苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法,在病理诊断、教学与科研中广泛应用,具有重要价值,细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强;细胞浆则相反,它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后,细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色,细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色,红细胞则呈橙红色,本染色液系将苏木素和伊红混合成一种溶液,染色后可不分化即可达到常规HE染色效果。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 苏木素-伊红染色液(H-E)混合型苏木色精伊红 【储存条件及有效期】 5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为18个月,在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完,每次用后及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。 【样本要求】 涂片和切片必须充分固定,石蜡切片要充分脱蜡。 【检验方法】 l、石蜡切片于二甲苯I、II中各脱蜡若干分钟; 2、经无水乙醇和95%乙醇各约若干分钟,经80%乙醇若干分钟,自来水冲洗若干分钟; 3、苏木素-伊红染色液(H-E)(混合型)染色若干分钟; 4、自来水冲洗返蓝若干分钟;亦可用碳酸锂水溶液返蓝若干分钟,自来水洗若干分钟; 5、95%乙醇I、II中各调色约若干分钟,时间不宜过长; 6、无水乙醇I、II中各脱水若干分钟,二甲苯I、II中各透明I、II中各透明若干分钟; 7、封片胶封片,镜检。 【检验结果的解释】 细胞核呈蓝紫色,细胞质、间质、各种纤维呈不同程度的红色。 【检验方法的局限性】 仅供细胞和组织形态学观察染色使用。 【产品性能指标】 pH值(25℃±1℃)应为2.4±0.5。 【注意事项】 1、温度较低时染色液不易着色,可适当延长染色时间。

抗酸染色——标准操作

抗酸染色 一、原理 本试剂盒采用WHO推荐的Ziehl-Neelsen法分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质,包围在肽聚糖的外面,所以分枝杆菌一般不易着色,要经过加热和延长染色时间来促使其着色。但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后,就很难被酸性脱色剂脱色。齐-尼氏抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物,用盐酸酒精处理也不脱色。当再加碱性美兰复染后,分枝杆菌仍然为红色,而其他细菌及背景中的物质为蓝色。 二、试剂 石碳酸复红染液、酸性酒精溶液、亚甲蓝溶液 三、方法 1.涂片:参见各标本操作程序涂片,涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥,但勿靠近火焰

2.固定:常用高温进行固定。即手持载玻片一端,标本面朝上,在灯的火焰外侧快速来回移动3~4次,共约3~4秒。要求玻片温度不超过60℃,以玻片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜,放置待冷后染色 3.染色 3.1 滴加石碳酸复红染液盖满玻片,染色10分钟或更久,无需加温 3.2 流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去染色液,沥去标本上剩余的水 3.3 滴加酸性酒精溶液盖满玻片,脱色1-2分钟,如有必要,需流水冲去溶液后,再次脱色至痰膜无可视红色为止 3.4 流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去染色液,沥去标本上剩余的水 3.5 滴加亚甲蓝溶液,染色30秒钟 3.6 流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去染色液,沥去标本上剩余的水,待玻片干燥后镜检 3.7 一张染色合格的玻片,痰膜肉眼观察为亮蓝色,无红色斑块 四、结果判定 1.干燥后油镜观察300个视野(观察时间不少于4min),抗酸性细菌呈红色,其它细菌或细胞呈蓝色

Masson 三色染色液染色步骤及注意事项

Masson三色染色液染色步骤及注意事项 号:G1340 规格:7×50ml/7×100ml 有效期:12个月有效 产品简介: 结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维:胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而,淡绿或苯胺蓝的分子量很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色或蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 Masson试剂盒的特点:◆染色稳定;◆分化时间短,1-2秒;◆色彩清楚鲜艳;◆使用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;◆所染切片保存时间长且不易褪色。 产品组成: 规格 名称 7×50ml7×100ml Storage 试剂(A):Weigert 铁苏木素染色液A1:Weigert染液A25ml50ml RT避光A2:Weigert染液B25ml50ml RT 临用时,取A1、A2等量混合,成为Weigert铁苏木素染色液,不可预先配制后放置。试剂(B):酸性乙醇分化液50ml100ml RT 试剂(C):Masson蓝化液50ml100ml RT 试剂(D):丽春红品红染色液50ml100ml RT避光

试剂(E):弱酸溶液50ml100ml RT 试剂(F):磷钼酸溶液50ml100ml RT避光 试剂(G):苯胺蓝染色液50ml100ml RT避光 使用说明书1份 自备材料: 固定液:选用甲醛升汞或甲醛盐溶液、蒸馏水、系列乙醇、二甲苯、染缸 操作步骤(仅供参考): 1、切片常规脱蜡至水。 2、用配制好的Weigert铁苏木素染色液染色5min-10min。 3、酸性乙醇分化液分化5-15s,水洗。 4、Masson蓝化液返蓝3-5min,水洗。 5、蒸馏水洗1min。 6、丽春红品红染色液染色5-10min。 7、在上述操作过程中按蒸馏水:弱酸溶液=2:1比例配置弱酸工作液,用弱酸工 作液洗1min。 8、磷钼酸溶液洗1-2min 9、用配置好的弱酸工作液洗1min。 10、直接放入苯胺蓝染色液中染色1-2min。 11、用配置好的弱酸工作液洗1min。 12、95%乙醇快速脱水。 13、无水乙醇脱水3次,每次5-10s。 14、二甲苯透明3次,每次1-2min。

改良Lillie-Mayer苏木素染色液

仅供科研版本号:070505 改良Lillie-Mayer苏木素染色液 【产品组成】 【保存条件】 室温,避光,12个月 【产品概述】 苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易不带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。 改良Lillie-Mayer苏木素染色液无毒,无氧化膜,细胞核染色质着色深而细微,临床上常替代Harris 苏木素染色液。对细胞核染色很清晰,不着染胞质和纤维成分,属进行性染色,故染色后可以不用盐酸乙醇分化,染色时间约5~8min,如果是充分氧化后可染色3~5min。常用于糖原等特染、酶组化和免疫组化等染色后复染细胞核作对照染色,尤其适用于经过特殊染色后不能经酸处理时对细胞核的复染。在特殊染色中,常不天青石蓝B液联合染色,使细胞核染色后不被后续的酸性染料所褪色。 【染色原理】 1、细胞核染色的原理: 苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易不带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 2、细胞浆染色的原理: 伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色不染液的pH值密切相关。当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,不胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。 3、分化作用: 染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织不色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核不细胞浆染色的分明。 4、返蓝作用: 分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏

革兰氏染色液配制

革兰氏染色液 保质期:2-8度一年. 革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,媒染剂碘液进入菌体后与结晶紫结合,革兰氏阳性菌对碘与结晶紫摄取量多且牢固,不易被酒精脱色。革兰氏阴性菌对碘与结晶紫摄取量少,不牢固,易被酒精脱色。为观察方便,脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红进行复染。阳性菌仍带紫色,阴性菌则被染上红色。 操作步骤: 1、标本处理: (1).有菌部位的标本,如痰液、粪便、各种拭子、创面等可直接涂片。(2).无菌部位的标本,如脑脊液、胸水、腹水、胆汁、尿液、关节液等,应取适量标本(最高可达5-7ml),经3000rpm 离心10min.,取沉渣涂片染色。 2、涂片制作:菌液涂片时,用接种环沾取菌液点在载玻片上,标本可直接在玻片上涂布;菌落涂片时,先取生理盐水一滴,置玻片上,用接种针挑取菌落在盐水中涂布。制作的涂片应自然干燥,并经火焰固定,固定的温度不宜过高,以玻片背面接触手背不烫为准,否则可能使细菌形态改变。将固定后的涂片进行染色。 3、染色方法: 革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精脱色程度,如脱色过度,则阳性菌可被误染为阴性菌;而脱色不够时,阴性菌可被误染为阳性菌。此外,菌龄也影响染色结果,如阳性菌培养时间过长,或已死亡及部分菌自行溶解了,都可能会呈阴性反应。 (1).加上结晶紫后,染色1分钟,水洗。 (2).加上碘液后染色1分钟,水洗。 (3).加上95%酒精,摇动玻片,根据涂片厚度,脱色约30-60秒,水洗,吸去水分。

(4).加上蕃红后,染色1分钟,水洗。 (5).吸干或在空气中凉干后,油镜镜检。 4.结果观察:紫色为革兰氏阳性,红色为革兰氏阴性。 注意事项: 1.标本涂片不能太厚,严格按操作要求进行。 2.玻片通过火焰温度不能太高。 3.若涂片较厚,应延长脱色时间,直至不再出现紫色为止。 4.碘液变透明,则不能使用。 5.水洗时动作要轻柔,沿载玻片对角线方向用洗瓶冲洗,以免把菌体冲掉。 革兰氏染色液如果用量少,买现成的比较话算,如果用量大,自己配起来也溶液,就是试剂种类多了点。其配制方法如下: (1)结晶紫(crystal violet)液:结晶紫乙醇饱和液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸铵水溶液80mL 将两液混匀置24h后过滤即成。 (2)卢戈(Lugol)氏碘液:碘0.33g,碘化钾0.66g,蒸馏水100mL。先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,然后加入碘使之完全溶解,再加蒸馏水至100mL即成。配成后贮于棕色瓶内备用,如变为黄色即不能使用。 (3)95%乙醇:用于脱色,脱色后可选用以下(4)或(5)的其中一项复染即可。 (4)番红溶液:番红O(safranine,又称沙黄O)2.5g, 95%乙醇100mL,溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中,用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。

马松三色染色液

马松三色染色液 【产品名称】 Masson三色染色液 【包装规格】 货号:DC0032 套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒 【预期用途】 主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。 【检验原理】 马松染色又称,Masson三色染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、Weigert铁苏木素A液苏木素 2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁 3、酸性乙醇分化液乙醇 4、蓝化液碳酸盐 5、丽春红品红染色液丽春红、品红 6、乙酸溶液乙酸 7、磷钼酸溶液磷钼酸 8、苯胺蓝染色液苯胺蓝 【储存条件及有效期】 5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。 【样本要求】 组织片充分固定和脱蜡。 【检验方法】 1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋; 2、切片常规脱蜡至水; 3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗; 4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟; 5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟; 6、丽春红品红染色液染色,流水稍冲洗; 7、按蒸馏水和乙酸溶液按比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片; 8、磷钼酸溶液处理,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗); 9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗); 10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制); 11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水3次,二甲苯透明,中性树胶封固。

Ehrlich苏木素染色液

北京吉美生物技术有限公司 Ehrlich苏木素染色液 产品简介: 苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素成熟的方法有自然氧化法、化学氧化法。自然氧化是指暴露于光和空气中,这个过程比较缓慢,约需3~6个月不等,但生成物染色能力可维持很长时间。EhrlichE和Delafield苏木素就属于这种。Ehrlich苏木素作为一种良好的核染色液,也可用于黏蛋白染色如软骨的黏液多糖,骨和软骨的染色也推荐使用Ehrlich苏木素染液。 Jimei Ehrlich苏木素染液非常稳定,成熟后密封可保存2年。对核染色质染得很清晰细致,染色时间也稍长,约15~20min。适用于教学和科研上的制片染色,用此染色液对冷冻切片染色则不理想。 染色原理 1、细胞核染色的原理: 苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA 双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 2、细胞浆染色的原理: 伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH值密切相关。当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。 3、分化作用: 染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。 4、返蓝作用: 分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来不浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。

标准革兰氏染色液

标准革兰氏染色液 简介: 革兰氏染色法是丹麦医生Christain Gram 于1884年所发明,是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,亦是一种复染法。未经染色的细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,用以分类鉴定。通过此法染色可将细菌鉴别为革兰阳性菌(G +)和革兰阴性菌(G -)两大类。细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异,主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物,乙醇能使它脱色。在革兰阴性细胞染色中,乙醇或丙酮破坏了胞壁外膜、损伤肽聚糖层和细胞质膜,结晶紫和碘复合物从细胞中渗漏出来,当再用其他染色液复染时,显现红色。红色染料虽然也能进入已染成紫色的G+细胞,但被紫色盖没,所以红色显示不出来。在革兰阳性细胞染色中,乙醇还能使厚的肽聚糖层脱水,导致孔隙变小,由于结晶紫和碘复合物分子太大,不能通过细胞壁,不易脱色,所以保持着紫色。 Leagene Standard Gram ˊs Stain 采用最经典的革兰染色配方, 临床标本直接涂片,背景干净,胞核胞质对比强烈,胞内吞噬体清晰易辨认,细菌染色特征典型。 组成: 自备材料: 1、 接种环或挑取细菌的其他工具 2、 酒精灯 3、 载玻片 4、 光学显微镜 操作步骤(仅供参考): 1、 涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者或在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与 的水混合均匀,涂成一薄层。 编号 名称 DM0015 4×10ml DM0015 4×100ml DM0015 4×250ml DM0015 4×500ml Storage 试剂(A): 结晶紫染色液 10ml 100ml 250ml 500ml RT 避光 试剂(B): Gram 碘液 10ml 100ml 250ml 500ml RT 避光 试剂(C): 脱色液 10ml 100ml 250ml 500ml RT 试剂(D): 沙黄染色液 10ml 100ml 250ml 500ml RT 避光 使用说明书 1份

常用染色剂及配制

常用染色剂及配制 供组织学诊断用的优秀常规染色剂,不仅须使细胞核和细胞浆有选择性着染,也要使结缔组织着色。苏木素-伊红染色的切片适当分色,可使这些结构得以区分,胞核表现为蓝色,胞浆和结缔组织纤维呈各种色调的粉红,因此这是一种最常用的常规染色剂。 一、苏木素-伊红染色的基本原理 苏木素是最早用于生物学上的天然染色剂之一,百余年来,一直是生物学实验室最常用的组织学中细胞核的染料,它是从苏木树的树心中提炼出来的,为浅褐色结晶或淡黄褐色的粉末状物。易溶于乙醇、甘油,也可溶于热水。苏木素本身没有染色能力,它经过氧化后,能产生具有染色能力的苏木红,苏木红又称为氧化苏木素或苏木因。 苏木素变成苏木红的过程叫作“成熟”。成熟的方法一般有两种:一种是把配制好的苏木素液在开口瓶中放置两个月以上,让其在日光和空气中的氧的作用下使之氧化。故一般地盛苏木素的瓶子放在向阳处,时间愈长,染色的效果愈好。常配制一大瓶,备长期使用。另一种方法是在苏木素液中加入氧化剂,如磺酸钠,过锰酸钾,氧化汞,双氧水等。用这种方法成熟与用第一种方法者不同的是,它放置时间愈长,染色的效果愈低。这是因为苏木红被继续氧化可生成无色的化合物,故一次不宜配制过多,还应放置40C冰箱内避光保存以延长使用时间。它的优点是配制后即可使用。 成熟的苏木素对组织并无亲和力,须加入含金属离子的媒染剂,才能达到染色的目的。一般用于明矾苏木素的媒染剂为钾明矾或氨明矾。主要是利用明矾中的铝离子和苏木红结合形成的铝沉淀色素为紫蓝色,对染色质有很大的亲和力,水和酒精都不能使其褪色。用于铁苏木素的媒染剂是三价铁离子,苏木红的铁沉淀色素为黑蓝色,不溶于水,因此,故不能配制大量含媒染剂的混合液,一般用时现配,或在染色过程中,先用铁明矾媒染,然后再染苏木素,如磷钨酸苏木素染色即是。 常规苏木素染色的对比染色是用伊红,也有采用焰红,因为焰红比伊红色泽更鲜明,此外还有采用橘黄G,比布里希猩红,波尔多红等作为对比染色。 苏木素-伊红染色,在组织病理学中,是一种日常使用最为广泛的常规染色方法。一张优质的染色切片,可以清晰地观察到各种不同的组织结构以此作为病理诊断的确切依据。再根据此染色切片所见,分别进行不同的特殊染色。 二、染液的配制 在实验室内常用的苏木素染液有以下几种,不同的仅是染色时间以及比较每种染色方法彼此的优缺点,不过各有优劣。 (一)苏木素染液的配制方法如下 1.Harris氏苏木素液 甲液:苏木素1g 无水酒精10ml 乙液:硫酸铝钾20g 蒸馏水200ml 丙液:一氧化汞0.5g 经典的配制方法是,先将甲液加热溶解后,密封待用,再将乙液加热溶解至沸,去火,待溶液仍处于小沸腾状态时再将甲液徐徐倾入其中,全部混合后,再使溶液在短时间内加热至沸腾,去火,最后,将氧化汞缓慢倾入溶液中(氧化汞一定要慢慢少量分次加入,切忌急躁。因氧化汞倒入后,溶液会迅速膨胀易沸出容器外而发生危险。)此时液体变为深紫色,待氧化汞全部放入后,再将溶液加温至沸腾片刻,立即将溶液放入流动的冷水中,并缓缓地连续摇晃至溶液完全冷却为止。隔夜后过滤,加入冰醋酸(按5%比例)混匀,再过滤后保存于

苏木素染色原理

苏木素(Hematoxylin)和伊红( Eosin)染色,简称HE 染色,是病理学常规制片中最基本的染色方法,应用机器广泛。苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶,是一种碱性染色剂,它在被氧化后生成苏木素,同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用,能够使细胞核染色。在病理诊断、教学和科研工作中,常用HE 染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。对于确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE 染色组织切片的基础上进行的。在HE 染色的组织切片中,细胞核呈蓝色,细胞浆呈红色,二者形成鲜明的对比,易于观察分析。苏木素伊红染色试剂盒中,苏木素染色液采用进口的高纯度苏木精、硫酸铝钾、甘油等组成,不含氧.化.汞、甲醇等有害物质,对细胞核染色效果好。其特点:长期保存,不易产生沉淀和金属; 应用范围广,可以用于人、动物、畜牧、水产等领域,可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等;苏木素染色液可以重复使用。 染色原理: 1、细胞核染色的原理: 苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA 双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷

的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 2、细胞浆染色的原理: 伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH 值密切相关。当染液的pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。 3、分化作用: 染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE 染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。 4、返蓝作用: 分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后

7细菌的革兰氏染色 (1)

微生物实验报告 细菌的革兰氏染色及形态观察 一、目的要求: 1、熟悉光学显微镜的使用方法。 2、掌握革兰氏染色法。 3、掌握大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的染色结果和形态特征 二、器材和器皿: 1、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌 2、革兰氏染色液、香柏油、二甲苯 3、显微镜、擦镜纸、酒精灯、载玻片、盖玻片、接种环等 三、实验原理: 革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram 创立。未经染色的细菌,由于其与周围环境折光率差别很小,在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。革兰氏染色属复染法。 该染色法所以能将细菌分为G+菌和G-菌,是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。 G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质,而且肽聚糖层较薄、交联度低,故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质,增加了细胞壁的通透性,使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出,结果细菌就被脱色,再经蕃红复染后就成红色。 G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高,类脂质含量少,经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小,通透性降低,因此细菌仍保留初染时的颜色,呈现蓝紫色。 四、实验步骤: 1、取载玻片用纱布擦干,涂菌的部位在火焰上烤一下,除去油脂。 2、涂片: 液体培养基:左手持菌液试管,在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖;右手持接种环在火焰中烧灼灭菌,等冷却后从试管中沾取菌液一环,在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜,最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。 固体培养基:先在载玻片上滴一滴无菌水,再用接种环取少量菌体,涂在载玻片上,使其薄而均匀。 3、晾干:让涂片在空气中自然干燥。 4、固定:让菌膜朝上,通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜)。 5、染色:在菌膜上滴加草酸铵结晶紫液,染1min。 6、水洗:用蒸馏水轻轻冲洗涂片上的染色液,用吸水纸吸干。简单染色结束可观察细胞形态。 7、媒染:滴加1滴碘液,染1min,水洗。 8、脱色:吸去残留水,连续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色,立即水洗。 9、复染:滴加蕃红复染约2min,水洗。至此,革兰氏染色结束。

Weil铁明矾苏木素染色液使用说明

Weil铁明矾苏木素染色液使用说明 货号:G3272 规格:2×50ml/2×100ml 保存:RT避光,有效期12个月。 产品内容: 规格 2×50ml2×100ml Storage 名称 试剂A:Weil苏木素A50ml100ml RT避光 试剂B:Weil苏木素B50ml100ml RT 取A、B等量混合即为Weil苏木素染色液,不宜提前配制。 产品说明: 髓鞘(Myelin Sheath)是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜,即髓鞘由髓鞘细胞和细胞膜组成,是神经膜细胞的质膜沿着轴索的轴心螺旋缠绕形成的多层脂双层结构,髓鞘上有郎飞氏结,可使神经冲动跳跃传递。 Weil铁明矾苏木素染色液可以显示病理情况下髓鞘是否完整、变性、坏死程度及修复情况,对神经组织的病理诊断和研究均有意义,例如神经纤维受损时,髓鞘可出现膨胀、曲折成球形、断裂或脱鞘完全消失等改变。 操作步骤(仅供参考): 1、石蜡切片,脱蜡至水洗。 2、蒸馏水冲洗。 3、入配制好的Weil苏木素染色液,置于温箱或水浴锅染色20min。

4、蒸馏水冲洗。 5、用明矾溶液分化,并镜下控制区分正常髓鞘与灰质或变性区域。 6、蒸馏水冲洗。 7、Weil分化液中完成分色(清除背景)。 8、蒸馏水冲洗。 9、滴加Weil蓝化液处理,充分水洗。 10、常规脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。 染色结果: 髓鞘黑色 背景无色 注意事项: 1、此试剂盒简便快速,明矾分化这一步很关键,需在镜下观察分化程度。 2、固定液以10%的福尔马林为佳。 3、置于温箱或水浴锅染色时,应注意防止染色液挥发。 4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作

增强革兰氏染色液

增强革兰氏染色液 简介: 在革兰阴性细胞染色中,乙醇或丙酮破坏了胞壁外膜、损伤肽聚糖层和细胞质膜,结晶紫和碘复合物从细胞中渗漏出来,当再用其他染色液复染时,显现红色。红色染料虽然也能进入已染成紫色的G+细胞,但被紫色盖没,所以红色显示不出来。在革兰阳性细胞染色中,乙醇还能使厚的肽聚糖层脱水,导致孔隙变小,由于结晶紫和碘复合物分子太大,不能通过细胞壁,不易脱色,所以保持着紫色。 Leagene Enhanced Gram ˊs stain 采用最经典的革兰染色配方进一步改进,使用复红复染液替代沙黄染色液,增强了染色效率,用于极难染色的细菌。临床标本直接涂片,背景干净,胞核胞质对比强烈,胞内吞噬体清晰易辨认,细菌染色特征典型。 组成: 操作步骤(仅供参考): 1、 涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者或在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与 的水混合均匀,涂成一薄层。 2、 干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。 3、 固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动3~5次,每 次1s ,温度不宜过高,防止菌体蛋白变性,放置待凉后染色。也可以用甲醇或乙醇固定。 4、 初染:滴加结晶紫染色液染色,清水冲洗去染色液。 5、 媒染:滴加Gram 碘液,并覆盖载玻片,室温放置,水洗。 6、 脱色:滴加脱色液,摇动,直至流下的脱色液不出现紫色时为止,立即用水冲去脱色液, 终止反应。 7、 复染:滴加复红复染液染色,水洗。 8、 干燥。镜检:置油镜观察。 编号 名称 DM0016 4×10ml DM0016 4×100ml DM0016 4×250ml Storage 试剂(A): 结晶紫染色液 10ml 100ml 250ml RT 避光 试剂(B): Gram 碘液 10ml 100ml 250ml RT 避光 试剂(C): 脱色液 10ml 100ml 250ml RT 试剂(D): 复红复染液 10ml 100ml 250ml RT 避光 使用说明书 1份

马松染色液

Masson三色染色液说明书 【产品名称】 Masson三色染色液 【包装规格】 货号:DC0032 套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒 【预期用途】 主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。 【检验原理】 Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、Weigert铁苏木素A液苏木素 2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁 3、酸性乙醇分化液乙醇 4、蓝化液碳酸盐 5、丽春红品红染色液丽春红、品红 6、乙酸溶液乙酸 7、磷钼酸溶液磷钼酸 8、苯胺蓝染色液苯胺蓝 【储存条件及有效期】 5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。 【样本要求】 组织片充分固定和脱蜡。 【检验方法】 1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋; 2、切片常规脱蜡至水; 3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗; 4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟; 5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟; 6、丽春红品红染色液染色数分钟,流水稍冲洗; 7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片; 8、磷钼酸溶液处理后,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗); 9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗); 10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制); 11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水数次后,二甲苯透明,中性树胶封固。 【检验结果的解释】

Cole氏苏木素染色液(常规染色)使用介绍

Cole氏苏木素染色液(常规染色) 产品说明: 苏木素是组织化学和免疫组织化学中最常用的染料之一,可以广泛用于组织切片或培养细胞的染色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色等配合使用。可以在苏木素染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色,也可以在免疫组化染色后再进行苏木素复染。染色步骤简单,操作时间短。苏木素染色后细胞核呈现蓝色。 使?说明: 1、样品处理 a)对于石蜡切片:二甲苯中脱蜡5-10 分钟。换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10 分钟。无水乙醇5 分钟。90% 乙醇2 分钟。70%乙醇 2 分钟,蒸馏水2 分钟, b)对于冰冻切片:蒸馏水2 分钟, c)对于培养细胞:用4%多聚甲醛固定10 分钟以上,蒸馏水洗涤2 分钟,换用新鲜的蒸馏水,再洗涤 2 分钟。 2、苏木素(HE)染色对于上述处理好的样品,用苏木素染色5-10 分钟(可以根据染色结果和要求调整时间),用自来水洗去残留的染色液,约10 分钟。蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。 3、脱水、透明、封片或进行其它染色 a)脱水、透明、封片:95%乙醇脱水2 分钟,换用新鲜的95%乙醇再脱水2 分钟;二甲苯透明 5 分钟,换用新鲜的二甲苯,再透明 5 分钟,用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察,细胞核呈蓝色。 b)进行其它染色:如果进行免疫荧光染色或荧光染料染色,在苏木素染色后,70%乙醇洗涤2 次,每次 2 分钟。再用PBS 或生理盐水或TBS 或TBST 等用

于荧光染色的溶液浸泡 5 分钟。然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。 注意事项: 1、第一次使用本试剂时建议先取1-2 个样品做预实验。样品数量很多时,可使用染色架和染色缸,以便于操作。 2、本产品亦可反复使用多次,但染色效果会逐渐降低。 3、染色过程推荐浅染,通常只需能够分辨细胞核即可,颜色过深有可能影响细胞质颜色。 4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 产地:国产 提示:本品仅用于科研实验,不能用作医疗及临床诊断。 保存:室温避光储存,有效期至少12 个月。 关键词:Mayer'苏木素染液(免疫组化) Mayer'苏木素染液(免疫组化)相关染色产品:

革兰氏染色

普通光学显微镜的使用及微生物形态观察与革兰氏染色法 胡雪芳 201300261033 【实验目的】 1.学习显微镜的结构、各部分功能和使用方法 2.学习细菌制片方法 3.学习细菌染色原理和方法 4.巩固无菌操作技术 5.学习图像结果的规范表示 【实验原理】 1.显微镜的结构和各部分功能 现代普通光学显微镜 利用目镜和物镜两组透 镜系统来放大成像,故又 常被称为复式显微镜。它 们由机械装置和光学系 统两大部分组成。在显微 镜的光学系统中,物镜的 性能最为关键,它直接影 响着显微镜的分辨率。而 在普通光学显微镜常配 置的几种物镜中,油镜的图1. 显微镜的构造放大倍数最大,对微生

物的研究最为重要,与其他物镜相比,油镜的使用方法比较特殊,需要在载玻片和镜头之间加滴镜油,这主要有如下两方面的原因:1.1增加照明亮度 油镜的放大倍数可达100x,放大倍数这样大的镜头,焦距很短,直径很小,但所需要的光照度却很大。而从显微镜的结构看,从承载标本的玻片透过来的光线,因介质密度不同(从玻片进入空气,再进入镜头)有些光线会因折射或全反射,不能进入镜头,致使在使用油镜时,会因为射入的光线较少,物像显现不清。所以为了不使通过的光线有所损失,在使用油镜时须在油镜与玻片之间加入与玻璃的折射率(n=1.55)相仿的镜油(通常用香柏油,其折射率为1.52)。 1.2增加显微镜的分辨率 显微镜的分辨率和分辨力是指显微镜能辨别两点之间最小距离的能力。最小可分辨距离越小,分辨率越高。从物理学角度来看,光学显微镜的最小可分辨距离受光的干涉现象及所用物镜性能的限制,可表示为: 最小可分辨距离= λ2NA 式中:λ为光源光波长,NA为物镜的数值孔径值。 光学显微镜的光源不可能超出可见光的波长范围(0.4~0.7μm),而数值孔径值取决于物镜的镜口角和玻片与物镜间介质的折射率,可表示为: NA=n*sin? 式中:?为物镜镜口角的半数,它取决于物镜的直径和工作距

Weil铁明矾苏木素染色液使用说明书

Weil铁明矾苏木素染色液使用说明书 货号:G3272 规格:2×50ml/2×100ml 保存:RT避光,有效期12个月。 产品内容: 名称 2×50ml2×100ml Storage 规格 试剂A:Weil苏木素A50ml100ml RT避光 试剂B:Weil苏木素B50ml100ml RT 取A、B等量混合即为Weil苏木素染色液,不宜提前配制。 产品说明: 髓鞘(Myelin Sheath)是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜,即髓鞘由髓鞘细胞和细胞膜组成,是神经膜细胞的质膜沿着轴索的轴心螺旋缠绕形成的多层脂双层结构,髓鞘上有郎飞氏结,可使神经冲动跳跃传递。 Weil铁明矾苏木素染色液可以显示病理情况下髓鞘是否完整、变性、坏死程度及修复情况,对神经组织的病理诊断和研究均有意义,例如神经纤维受损时,髓鞘可出现膨胀、曲折成球形、断裂或脱鞘完全消失等改变。 注意: 明矾溶液、分化液、蓝化液均需自备,初次操作我们更推荐G3270试剂盒,该试剂盒已配备所有染色用试剂,节省您的时间。 操作步骤(仅供参考): 1、石蜡切片,脱蜡至水洗。 2、蒸馏水冲洗。 3、入配制好的Weil苏木素染色液,置于温箱或水浴锅染色20min。 4、蒸馏水冲洗。 第1页,共2页

5、用明矾溶液分化,并镜下控制区分正常髓鞘与灰质或变性区域。 6、蒸馏水冲洗。 7、Weil分化液中完成分色(清除背景)。 8、蒸馏水冲洗。 9、滴加Weil蓝化液处理,充分水洗。 10、常规脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。 染色结果: 髓鞘黑色 背景无色 注意事项: 1、此试剂盒简便快速,明矾分化这一步很关键,需在镜下观察分化程度。 2、固定液以10%的福尔马林为佳。 3、置于温箱或水浴锅染色时,应注意防止染色液挥发。 4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作 第2页,共2页

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