分子生物学模拟考试题
第一章绪论
一简答题
1. 21世纪是生命科学的世纪。20世纪后叶分子生物学的突破性成
就，使生命科学在自然科学中的位置起了革命性的变化。试阐述分子生物学研究领域的三大基本原则，三大支撑学科和研究的三大主要领域？
答案：（1）研究领域的三大基本原则：构成生物大分子的单体是相同的；生物遗传信息表达的中心法则相同；生物大分子单体的排列（核苷酸，氨基酸）导致了生物的特异性。
（2）三大支撑学科：细胞学，遗传学和生物化学。
（3）研究的三大主要领域：主要研究生物大分子结构与功能的相互关系，其中包括DNA和蛋白质之间的相互作用；激素和受体之间的相互作用；酶和底物之间的相互作用。
2. 分子生物学的概念是什么？
答案：有人把它定义得很广：从分子的形式来研究生物现象的学科。但是这个定义使分子生物学难以和生物化学区分开来。
另一个定义要严格一些，因此更加有用：从分子水平来研究基因结构和功能。从分子角度来解释基因的结构和活性是本书的主要内容。
3 二十一世纪生物学的新热点及领域是什么？
答案：结构生物学是当前分子生物学中的一个重要前沿学科，它是在分子层次上从结构角度特别是从三维结构的角度来研究和阐明当前生物学中各个前沿领域的重要学科问题，是一个包括生物学、物理学、化学和计算数学等多学科交叉的，以结构（特别是三维结构）测定为手段，以结构与功能关系研究为内容，以阐明生物学功能机制为目的的前沿学科。这门学科的核心内容是蛋白质及其复合物、组装体和由此形成的细胞各类组分的三维结构、运动和相互作用，以及它们与正常生物学功能和异常病理现象的关系。
分子发育生物学也是当前分子生物学中的一个重要前沿学科。
第2，3章核酸及基因的结构和功能习题
一选择题
1.一分子DNA核苷酸可能有下列哪一项组成:B
A?核糖, 磷酸基团, 和腺嘌呤. B?磷酸基团, 脱氧核糖, 和
胞嘧啶.
C?尿嘧啶, 磷酸基团和脱氧核糖. D?胸腺嘧啶, 脱氧核糖,和羟基
2. 下列哪一项最准确地代表了细胞中遗传信息的组织水平 D
A?基因?核苷酸?染色体?基因组B?基因组?基因?核苷酸?染色体.
C?染色体?基因?核苷酸?基因组D?核苷酸?基因?染色体?基因组
3. 真核细胞和原核细胞的差别在于只有前者含有D
A?核糖体B?细胞质C?DNA. D?细胞核
4. 下面那种原核生物是多种遗传学研究的研究对象? C
A?酿酒酵母B?粗糙脉孢菌C?大肠杆菌D?果蝇
5.下列哪一元素不会在DNA分子中发现？B
A?C. B?S. C?N. D? O.
6.下列哪一项只在RNA中存在，而不会在DNA分子中出现？C
A?P. B?腺嘌呤. C?核糖. D?胞嘧啶.
7. DNA分子中的两条多核苷酸链是依赖于哪一种类型的化学键结
合在一起的？ D
A?磷酸二酯键. B?磷酸盐. C?肽键. D?氢键.
8. 组成细菌染色体的DNA形态是 B
A?单链. B?环状和超螺旋. C?和组蛋白组合在一起.
D?上面全是.
9. 下面哪一种是DNA分子碱基对? A
A?A-T. B?T-C. C?A-U. D? G-T.
10. 下面哪一种是RNA分子碱基对? D
A?A-T. B?A-C. C?U-C. D?U-A.
11.在真核生物的染色体中，DNA和组蛋白组成的结构称为 B
A?proteosomes.蛋白体B?nucleosomes.核小体C?telomeres.端粒D?centromeres.着丝粒
12.在转化试验过程中，弗雷德里克?格里菲斯观察到致病的肺炎荚
膜链球菌菌株形成__A_菌落
A?光滑,有光泽的B?粗燥, 干燥C?异常大的D?不寻常的颜色
13. 病毒基因组的可能组成是 C
A?仅由RNA组成. B?仅由DNA组成. C?RNA 或DNA. D?RNA和DNA.
14. Hershey 和Chase利用混合实验得出的主要结论是 B
A?单基因指导单个多肽的合成. B?DNA 是遗传物质
C?DNA是双螺旋链. D?遗传物质定位在细胞核内
15. 在活细胞中最普遍存在的DNA构型是 B
A?A. B?B. C?C. D?Z
16. 基因位于真核生物染色体__C_ 区域时最有可能被转录?
A?着丝粒. B?端粒. C?常染色质D?异染色质
17. 核苷的基本组成是 A
A?戊糖和含N碱基. B?磷酸基团和含N碱基.
C?戊糖和磷酸基团. D?戊糖, 磷酸基团和含N碱基
18. 原核生物染色体大多包含 A
A?只有DNA单一序列. B?只有DNA重复序列
C?DNA单一序列或DNA重复序列D?DNA单一序列或DNA重复序列
19. 制备某生物染色体组, _C__ 时期的染色体被铺在载玻片上并染色.
A?间期. B?末期. C?分裂中期D?后期
20 研究发现一条从一未知微生物中发现的染色体中只含有单一
序列DNA, 那么这一未知生物最有可能是 B
A?病毒B?细菌. C?真菌D?原生动物. 21. 在真核生物中,遗传物质存在于什么细胞器? B
A?核糖体B?细胞核C?内质网. D?细胞质
22.格里菲斯通过实验将死细菌与活细菌提取物混合后注射到老鼠
体内是为了证明 C
A?DNA是双螺旋连B?真核生物的mRNA和原核生物不同
C?某种因子可以将一种细菌类型转变为另外一种
D?如果帮助细胞存在, 细菌可以从热处理中复苏
23. 罗莎琳德?富兰克林获得的X射线衍射图像的数据表明（选择正
确的答案）A
A?DNA是双螺旋结构,每3.4nm重复一次.
B?嘌呤通过氢键和嘧啶连接Purines are hydrogen bonded to pyrimidines
C?DNA左手螺旋结构
D?DNA被组装成核小体
24.格里菲斯将不同类型的细菌注射到老鼠体内，请根据注射的细
菌类型，判断老鼠是存活还是死亡？C
a. type ⅡR
b. type ⅢS
c. heat-killed ⅢS
d. type ⅡR + heat-killed ⅢS
A?活活死死
B?死活死活
C?活死活死
D?死死活活
二填空题
1．基因敲除（Gene knock-out）即是（将特定基因失活的过程），它是研究（基因功能）的一种反向遗传学方法。
2．（假基因‘pseudogene’）是与有功能的基因在基因结构的组成上非常相似，却不具表达功能的基因。
3．在原核生物的基因表达调控中，因为没有核膜，（转录）和（转录）是耦联的。
4．一个核小体由两拷贝的（H2A），（H2B），（H3），（H4）组蛋白，一拷贝组蛋白（H1），and （200）bp of DNA.
三简答题
1．从化学（键）的角度，说明双链DNA比较稳定的原因答案：碱基之间的氢键以及疏水的碱基堆积力。2．Chargaff规则的内容是什么？
答案：在双螺旋DNA结构中,A%=T% 和G%=C%.腺嘌呤和胸腺嘧啶的摩尔数相等，即A=T；鸟嘌呤和胞嘧啶的摩尔数相等，即G=C；含氨基的碱基（A和C）总数等于含酮基的碱基（G 和T）总数，即A+C=G+T；嘌呤的总数等于嘧啶的总数，即A+G=C+T。
3．使DNA超螺旋化需要能量，并可使生物学事件有序进行。超螺旋中的能量的主要用于哪两种生化作用？
答案:超螺旋中的能量可以使双链分开,用于以下DNA复制和DNA转录两种反应
4．You have isolated a plasmid DNA that is a closed circular molecular 1050 bp in length with 5 negative supercoils. What are the linking number, helical turns, writhe, and superhelical density? 你分离出的质粒DNA为1050 bp长度的共价闭合环状分子，具5个负超螺旋。请问这个DNA分子的连接数（L）、螺旋数（缠绕数T）、扭曲数（W）、以及超螺旋密度是多少？
答案：Writhe = W = -5；helical turns = T = 1050/10.5 = 100；
L = T + W = 100 +（-5）= 95
Superhelical density = σ = W/T = -5/100 = -0.05
5．什么是假基因？你如何识别出假基因？
答案：假基因是指与正常基因结构相似，但丧失正常功能的DNA序列，即不能翻译出有功能蛋白质的基因。can be recognized by the occurrence of one or more mutations that obviously render them non-functional.可以利用补偿其功能的突变体而区分出假基因。
6. 在真核细胞中，DNA被包装成染色质，其重复单元为核小体。（1）每个核小体单元是由什么组成的？（2）DNA被包装后，对转录会产生怎样的影响后果？
答案：（1）每个核小体单元由146 bp核心DNA和各两分子的组蛋白H2A、H2B、H3、H4组成的八聚体构成。
（2）DNA被包装成染色质结构后，会抑制转录。因为这一结构能够阻止转录机构及转录因子与DNA之间的相互接近。7．在核小体中，每个组蛋白二聚体分别由哪几种组蛋白组成？
答案：H 组蛋白H3 和H4 形成一个二聚体；组蛋白H2A 和H2B形成另一个二聚体。
8．通过对DNA晶体的X-射线衍射分析，鉴定出了DNA的不同形式。DNA分子的二级结构存在三种不同的构型即A-DNA、B-DNA、Z-DNA，每一种构型各有其独特的分子特征。
（1）在活的生物细胞中，普遍存在的分子构型是哪一种？
（2）Z-DNA与B-DNA相比，每圈螺旋含有较多的碱基对数，请进一步说明Z-DNA的结构特点，在活的生物细胞中，Z-DNA 具有怎样的功能？
（3）在活的生物细胞中，哪一种构型没被发现。
答案：（1）B-DNA是活细胞中DNA的普遍存在形式。
（2）与B-DNA相比，双螺旋链Z-DNA比较长而且细,并且是左手螺旋结构。轴贯穿小沟，每个螺旋有12个碱基，和轴的垂直平面呈8.8°夹角；相比较，B-DNA 的轴贯穿碱基，每个螺旋只有10个碱基，和轴的垂直平面呈2°夹角. Z-DNA的大沟不太明显，因为沟很细而且和较平，但B-DNA 的大沟很宽而且较深(介于A-DNA和Z-DNA之间)。Z-DNA 的小沟及其窄且深，B-DNA 的小沟较窄且深度中等。推测含有Z-DNA 的区域将提供左手螺旋的伸展，可以参与到DNA的复制，重组和转录。左手螺旋的伸张将帮助在这些过程中B-DNA区域解螺旋。Z-DNA 在极端的环境条件下能够更加稳定。
A-DNA只在DNA处于脱水状态下才被发现。所以在活细胞
中不会被发现。
9．Benzer用一般遗传学方法测出T4噬菌体rⅡ突变型的一个cistron中含有许多个突变子（或重组子）并且指出一个突变子的大小是1-3个核苷酸，后来证明这是科学上的一个惊人的预见。请回答：
（1）他的工作对基因概念的发展有何意义?
（2）你能说出在当时的条件下（没有DNA序列分析技术，遗传密码还没发现）用什么样的研究方案能得出一个突变子是1~3个核苷酸的结论。
答案：基因是DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，是遗传物质的最小功能单位。基因内可以较低频率发生基因内的重组，交换。
通过大量的成对突变型的杂交，测得其最小的重组频率为0.02%，即0.02个遗传图距。已知T4噬菌体的基因组是1.8×105bp，其长度为1500个图距单位。因此可求算出0.02个遗传图距相当于多少核苷酸：
1.8×105÷1500×0.02 =
2.4 bp
因此指出一个突变子是1-3个核苷酸，暗示了三联体密码的存在。
10．比较基因组的大小和基因组复杂性的不同：
一个基因组有两个序列，一个是A，另一个是B，各有2000 bp 长。其中一个是由400 bp 的序列重复5次而组成，另一个则由50 bp 的序列重复40次而组成，请问：（1）这个基因组的大小怎样？（2）这个基因组的复杂性如何？
答案：基因组的大小是指在基因组中DNA的总量。复杂性是指基因组中所有单一序列的总长度。
（1）这个基因组的大小为4000bp；（2）这个基因组的复杂性为450bp
11．我们有什么证据表明在DNA分子的螺旋构型中，在每一个碱基对中都含有一个嘌呤碱基和一个嘧啶碱基？
答案：. 有两方面的证据支持在DNA分子的螺旋构型中，每一个碱基对中都含有一个嘌呤碱基和一个嘧啶碱基
（1）化学成分分析：当Chargaff对多种有机体的双螺旋DNA 链的化学成分进行定量分析时发现，嘌呤碱和嘧啶键的含量相同；进一步分析发现腺嘌呤和胸腺嘧啶的含量相等；鸟嘌呤和胞嘧啶的含量相等。解释这一发现的最简单的假说是互补碱基配对的存在，即一条链上的A 和另一条链上的T 配对, G和C配对.
（2）X-衍射分析：更直接的证据来自于X-衍射分析。通过
分析建立了DNA双螺旋结构的外形尺寸，可以来分析已知大小碱基的配对关系。双螺旋结构的直径是2 nm ，刚好容纳一个嘧啶和一个嘌呤配对, 而对于嘌呤-嘌呤配对则太小，对嘧啶-嘧啶配对则太大。
12．Watson 和Crick在其他研究者成果的基础上提出了DNA 双螺旋模型，这些研究成果可以划分为两类即DNA的化学组成与DNA的物理结构。请详细阐述这两类研究成果的具体结论。
答案：化学组成即DNA碱基组成的Chargaff规则：腺嘌呤和胸腺嘧啶的摩尔数相等，即A=T；鸟嘌呤和胞嘧啶的摩尔数相等，即G=C；含氨基的碱基（A和C）总数等于含酮基的碱基（G和T）总数，即A+C=G+T；嘌呤的总数等于嘧啶的总数，即A+G=C+T。DNA的碱基组成具有生物种的特异性。
物理结构：DNA分子是由核苷酸组成，核苷酸有含氮的碱基、戊糖、磷酸构成。根据富兰克林和威尔金斯的x射线衍射图像表明：DNA分子是一个十分有序的双螺旋结构，每两个相邻碱基平面的垂直距离是3.4?，每个螺旋包含10个碱基对。
13．Hershey-Chase所做的噬菌体转染实验中，为什么32 P只标记在DNA分子中，而35S只标记在蛋白质的外壳上？如果用35S标记的噬菌体去感染细菌，那么在子代病毒中是否会出现带35S标记的病毒？如果是用32 P标记的噬菌体重复实验，那么在子代病毒中是否可以找到带32 P标记的病毒？
答案：因为DNA分子中含大量磷酸基团，不含硫；而蛋白质中部分氨基酸含硫，但都不含磷，所以32 P只标记在DNA分子中，而35S只标记在蛋白质的外壳上。
如果用35S标记的噬菌体去感染细菌，那么在子代病毒中不会出现带35S标记的病毒。因为噬菌体感染细菌时其蛋白质外壳并不进入细菌体内，子代噬菌体的蛋白质外壳是在细菌体内新合成的，因此不带标记。
如果用32 P标记的噬菌体去感染细菌，那么在子代病毒中会出现带35P标记的病毒。因为噬菌体感染细菌时其核酸部分进入细菌体内，并作为遗传物质传给子代噬菌体，因此在子代噬菌体可以找到带35P标记的病毒。
第4章DNA复制习题
一选择题
1.以大肠杆菌DNA为研究对象，Meselson和Stahl通过实验证明
DNA复制是B
A?全保留. B?半保留. C?加倍D?分散.
2.已知DNA的复制方式，那么组成DNA双螺旋的两条链分别是A
A?一条母链和一条子链.B?两条母链和两条子链.
C?新合成的两条子链间隔分布着母链strands. D?两条新合成的链
3. DNA聚合酶的功能是A
A?以DNA为模板合成DNA B?以DNA为模板合成RNA
C?以RNA为模板合成DNA D?以RNA为模板合成RNA
4.为了能够起始DNA的复制，一段短的_B__引物必须预先合成
A?DNA B?RNA C?多肽D?组蛋白
5. 在大肠杆菌中，哪一种DNA聚合酶对新合成的DNA具有校正功
能，能把错配的碱基移去？D
A?只有DNA聚合酶I B?只有DNA 聚合酶III
C?DNA 聚合酶I 和III D?所有三种DNA 聚合酶都含有校正功能
6. 在DNA合成过程中, 所有DNA聚合酶以什么方向添加核苷酸? C
A?从左到右B?从3’到5’ C?从5’到3’ D?每次合成不止一个方向
7. 在真核生物中, DNA复制在细胞周期的哪一期? A
A?S B?G1 C?G2 D?M
8. 下面那一项对DNA合成反应不是必须的?D
A?dCTPs B?模板DNA C?DNA 聚合酶D?钙离子
9. DNA 聚合酶催化下面哪两个基团间形成磷酸二酯键C
A?5’磷酸and a 5’羟基基团. B?3’磷酸and a 5’羟基基团.
C?5’磷酸and a 3’羟基基团. D?3’磷酸and a 3’羟基基团. 10. 如果一条链上的核苷酸序列为5’-C C A C T G G-3’, 则另一条
互补链上的DNA序列是? D
A?5’-C C A C T G G-3’ B?3’-C C A C T G G-5’
C?5’-G G T C A C C -3’ D?3’-G G T G A C C-5’
11. 在如大肠杆菌的原核生物中,染色体的复制是A
A?半不连续和双向的B?间断,不连续和单向的.
C?连续和双向的D?半不连续和单向的
12. DNA聚合酶附带的3’ 5’外切酶活性可以使复制的错误频率
下降到D
A?1/10. B?1/1,000. C?1/1,000,000. D?1/1,000,000,00. 13. DNA聚合酶的校正活性将错误的核苷酸从DNA链的_A__ .切
除
A?3’ 端B?5’ 端C?3’ 和5’ 端D?中间
14. 在大肠杆菌的染色体上, oriC C
A?编码DNA 聚合酶I. B?是结合组蛋白的位点?是DNA复制的起始点. D?编码RNA引物
15. 能够解开双螺旋DNA,促进复制的酶是B
A? 3 ’ ?5 ’ 核酸外切酶. B?DNA解旋酶C?DNA 聚合酶.D?拓扑异构酶.
16. 当DNA双螺旋链复制时,新合成的5’ ?3’ 的链被称为A
A?前导链B?后随链C?模板D?不连续
17. 后随链的以什么形式合成?C
A?连续地. B?保守地. C?不连续地D?半不连续地.
18. 下面那种类型的DNA是以滚环复制的形式复制的?D
A?λ噬菌体B?质粒DNA C?噬菌体Φ X174 D?上面都是19. 很多类型的哺乳动物癌症细胞有着共同的突出特征是A
A?端粒酶活性B?端粒酶活性缺乏C?缺少端粒D?端粒数目增加
20.为了确定大肠杆菌DNA复制起点的位置以及复制的方向是单
向的还是双向的，你调查了两种不同实验结果。在这两个实验过程中，大肠杆菌均生长在含有放射性标记的胸腺嘧啶。
在你的实验中加入放射性标记的胸腺嘧啶的作用是什么？B A?区分前导链和后随链的不同B?区分发生复制和没发生复制的不同DNA区段
C?区分RNA引物和新合成的DNA D?区分复制叉和新和成的DNA
21.根据放射性实验的结果，关于大肠杆菌DNA复制的描述，下列
那一项是正确的？D
A?复制发生在染色体上的单一位点B?复制是双向的
C?复制发生在模板链上的特定位点上D?以上全对.
22. 在复制过程中,新合成DNA的校正功能由下面那种酶完成?D
A?RNA 聚合酶B?逆转录酶C?拓扑异构酶D?DNA聚合酶
23. 尿嘧啶糖苷酶的功能是C
A?去除嘧啶二聚体B?切除RNA分子中的尿嘧啶
C?切除DNA分子中的尿嘧啶D?切除DNA分子中的尿苷酸E?切除RNA分子中的尿苷酸
24. DNA复制需要一系列的蛋白质促进复制叉的移动，大肠杆菌
DNA在体外的复制至少需要那些蛋白质？D
A?DNA聚合酶Ⅰ、引发酶、SSB和连接酶B?SSB、解链酶、和拓扑异构酶
C?连接酶、DNA聚合酶Ⅰ和ⅢD?DNA聚合酶Ⅲ、解链酶、SSB和引发酶
E?拓扑异构酶、解链酶和DNA聚合酶Ⅱ
25. 参与DNA复制的几种酶的作用次序是B
A?DNA解链酶→引发酶→DNA聚合酶→DNA连接酶→切除引物的酶
B?DNA解链酶→引发酶→DNA聚合酶→切除引物的酶→DNA连接酶
C?引发酶→DNA解链酶→DNA聚合酶→DNA连接酶→切除引物的酶
D?DNA解链酶→引发酶→切除引物的酶→DNA连接酶→DNA聚合酶
E?DNA聚合酶→引发酶→DNA解链酶→DNA连接酶→切除引物的酶
26. 将两段寡聚脱氧核苷酸片段5’-ACCACGTAACGGA-3’和
5’-GTTAC-3’与DNA聚合酶一起加到含有dATP、dGTP、dCTP 和dTTP的反应混合物之中，预测反应的终产物被参入的各碱基的比例是C
A?2C∶1T B?1G∶1T C?3G∶2T D?3G∶3T∶2C E?5T∶4G∶3C∶1A
27. 噬菌体Φx174的基因组是一个由5386个碱基组成的单链DNA，
该基因组编码有11种不同的蛋白质，这些蛋白质约有2380个氨基酸残基。这种病毒基因组编码的蛋白质似乎超过了它能编码的能力。对这种现象最好的解释是A
A?它的基因组含有重叠基因B?氨基酸由二联体密码编码
C?细胞核糖体翻译它的每一个密码子不止一个D?蛋白质在使用后即被后加工
二填空题
1．DNA复制的方向是从（5’）端到（3’）端展开。
2．维持DNA复制的高度忠实性的机制主要有（DNA聚合酶的高度选择性）、（DNA聚合酶的自我校正功能）和（错配修复）。3．端粒酶由（RNA）和（蛋白质）两个部分组成，它的生理功能是（维持端粒的完整）。
4．染色体中参与复制的活性区呈Y型结构，称为（复制叉）。
三简答题
1．请解释下列术语或概念：
（1）前导链和滞后链；
（2）σ因子与全酶。
答：（1）前导链是指随着亲本双螺旋的解开而按照
5′ ?3′方向连续合成的DNA 子链，以3′?5′方向的亲本链为模板。 滞后链是指以5′?3′方向的亲本链为模板，不连续合成一系列5′ ?3′方向冈崎片断，然后连接成一条完整的子链DNA 。滞后链的合成需要若干次引发事件的发生。
（2）σ因子是RNA 聚合酶全酶的一个组成成分，RNA 聚合酶全酶是由核心酶和σ因子组成。σ因子负责对启动子的识别，并起始转录。R NA 核心酶负责RNA 的合成。是一种特异性因子，能够指导核心酶转录特异的基因。
2．端粒酶在向染色体末端添加寡聚重复单元时，以什么为模板？
答：端粒酶以自身携带的RNA 为模板，聚合端粒的DNA 重复单元。因此端粒酶是一种反转录酶，依赖RNA 的DNA 聚合酶。
3．在利用飞船进行科学实验过程中，当飞船着陆后，你的任务是确定某一细菌样品DNA 复制的方式。你首先使细菌在没有标记的培养基上生长几代，然后转到15N 标记的培养基中准确地繁殖一代。你提取细菌样品的DNA 并进行CsCl 梯度离心，你获得了如下结果： 根据这一结果，你认为DNA 是以半保留方式进行复制，但你的观点是不正确的，为什么？请你设计另一个实验方案（用同样的样品和相同的技术手段即CsCl 梯度离心）能够有效地将半保留复制和弥散复制这两种复制方式区分开来。
答： CsCl 梯度离心的结果虽然排除了全保留复制的可能性，但不能根据这一结果就可证明DNA 的复制是半保留复制，因为弥散复制也会出现同样的结果。用同样的样品和相同的技术手段即CsCl 梯度离心将半保留复制和弥散复制区分开来的方法是将
DNA 样品变性，
然后利用碱性CsCl 梯度离心技术对单链DNA 进行离心，半保留复制会出现两条带，而若是弥散复制则出现一条带，如下图所示：
4．科恩伯格从大肠杆菌中分离出了DNA 聚合酶Ⅰ，
在DNA 复制过程中具有一个基本的功能，DNA 聚合酶Ⅰ在DNA 复制过程中具有什么功能？ Control 15N 15N Experimental sample 14N 14
N 半保留复制 弥散复制 变性后离心 变性后离心
变性后离心 变性后离心
答：. DNA 聚合酶Ⅰ具有切除在起始DNA 复制时合成的RNA 引物的功能，并合成一段DNA 以取代RNA 。执行DNA 聚合功能的DNA 聚合酶Ⅲ在遇到RNA 引物时，就会从DNA 链上脱离下来，DNA 聚合酶Ⅰ利用自身具有的5’，3’核酸外切酶的功能切除RNA 引物，然后按5’ 3’方向合成DNA 。
5．请描述DNA 连接酶的分子作用机制。
请你推测一下，如果DNA 连接酶基因发生温度敏感型突变，则大肠杆菌突变株会产生怎样的表型效应？
答：：DNA 连接酶可以催化单链DNA 两端的3’-OH 和5’-
单磷酸基团之间形成磷酸二酯键 ,封闭缺口。 温度敏感性连接酶突变体在极端温度条件下可能能封闭缺口，使后随链片段化，最终导致细胞死亡。如果以这种突变体为研究对象进行生化实验，DNA 复制过程中，细菌细胞被转移至高温条件下，这样在细菌细胞中会有大量的冈崎片段的积累，这将为DNA 一条链采取不连续复制提供额外的证据。
6. 什么是DNA 聚合酶的进行性？如何测定一种DNA 聚合酶的进行性？
答：DNA 聚合酶的进行性是指某一种DNA 聚合酶在催化聚合反应中，从酶与模板结合到与解离的这段时间内，催化了多少脱氧核苷酸的掺入。
测定某一DNA 聚合酶的进行性，可先让酶与模板结合并进行聚合反应，然后迅速加入大量的非特异性DNA ，当DNA 聚合酶从模板上解离下来后，由于大量的非特异性DNA 稀释了原来的DNA 模板，使得DNA 聚合酶很难再与原来的模版结合，这样就得到了新合成的DNA 片段，通过凝胶电泳可大概知道片段的长度。
7．尽管DNA 聚合酶催化聚合反应既需要模板，又需要引物。但下面的单链DNA 却可以直接作为DNA 聚合酶Ⅰ的有效的底物。试解释其中的原因，并写出由DNA 聚合酶Ⅰ催化而形成的终产物的结构。
答：由于此链DNA 特殊的碱基组成，使得该DNA 能够形成如图所示的茎环结构：
3’---
OH-TGGCTCATAGCCGGAGCCCTAACCGTAGACCACGA
ATAGCATTAGGp ---5’ GAGCC C TAACCGTAGACCACGAATAGCATTAGGp 5’ CTCGG T - OH3’ G A T A
DNA 聚合酶Ⅰ能以该结构的3’-OH 为引物，以5’-端的序列为模板催化聚合反应的进行，但对于DNA 聚合酶Ⅰ来讲，在催化聚合反应之前，会通过其3’?5’的外切酶活性将末端错配的T 水解掉而引入正确的G ，然后再进行延伸反应，最终得到的产物是：
8．简述维持DNA 复制的高度忠实性的机制。
答：维持DNA 复制的高度忠实性的机制主要包括：DNA 聚合酶的高度选择性；DNA 聚合酶所具有的3’?5’外切酶活性能够进行自我校正，以切除复制过程中错误掺入的核苷酸；错配修复机制；使用RNA 引物也能提高DNA 复制的忠实性，因为当DNA 在刚开始复制的时候，由于缺乏协同性，所以错误的机会很大，但因为RNA 引物最终要被被切除，所以降低了在开始阶段所发生的错误。
9．在冈崎提出DNA 复制的不连续性观点以后，对于DNA 复制过程中两条链都是不连续复制，还是仅仅是后随链才是不连续复制，存在着很大争议。显然前导链的合成不需要不连续复制，但是许多研究者发现经脉冲标记的冈崎片段可以和亲代DNA 的两条链杂交，这似乎意味着亲代DNA 的两条链都可以作为冈崎片段的模板。试提出一种机制解释前导链的复制也可能产生冈崎片段，并设计一个实验证明你提出的机制。
答：前导链似乎也形成小的片断，是因为在一个细胞中，含有微量的dUTP ，它在DNA 复制过程中有可能代替dTTP 掺入到新合成的子链中，由于脱氧尿苷酸不是DNA 分子中的正常核苷酸，所以体内修复系统会将它除去。去除的机制是先在尿嘧啶糖苷酶的作用下切除DNA 链上的尿嘧啶，然后AP 核酸内切酶在AP 位点将DNA 链切开，然后核酸外切酶将包括AP 位点在内的一段DNA 链切除，再由DNA 聚合酶和连接酶完成修复。AP 核酸内切酶的作用必然导致前导链形成小的DNA 片断。 筛选AP 核酸内切酶缺失的大肠杆菌突变株，观察上述现象是否发生。
10．端粒是一类特殊的重复序列。端粒序列存在于DNA 链的什么部位？具有怎样的功能？
GAGCC C TAACCGTAGACCACGAA TAGCA TTAGGp 5’ CTCGG GATTGGCATCTGGT GCTTA TCGTA ATCC- OH3’ G C C G A T A
答：端粒是真核生物线性染色体末端的特有的异染色质序列。对大多数有机体而言，端粒是染色体末端简单的高度重复序列，具有种的特异性。这一序列由端粒酶合成，靠近染色体末端而不是最末端序列是端粒相关序列。在不同有机体中，端粒的组成很不相同。在果蝇中，端粒由转座因子LINE家族序列组成。端粒在DNA复制和维持染色体稳定性方面起重要作用。
11．端粒解决了线性染色体末端DNA复制的问题。请简要描述这一机制。
答：端粒是短串联重复序列，几乎不编码基因。端粒的复制由端粒酶催化，DNA聚合酶不参与，所以没有复制末端问题。端粒通过与DNA复制完全不同的机制进行复制和维持端粒的长度。
12．请描述端粒酶的结构与功能，包括端粒酶的每一个分子成分。
答：端粒为核糖核蛋白体。由蛋白和RNA成分组成。蛋白部分用于催化T,G 富集的端粒DNA的合成；RNA组分作为C,A 富集的模板。端粒酶是逆转录酶，作为反应模板的RNA是酶的一部分。
第五章突变与修复
一选择题
1. GC碱基对突变为AT碱基对，这一突变称为__B_ 突变.
A?颠换transversion
B?转换transition
C?转座transpositional
D?转位translocation
2. AT碱基对突变为TA碱基对，这一突变为_A__ 突变
A?颠换transversion
B?转换transition
C?转座transpositional
D?转位translocation
3. 下面哪一突变为无义突变？C
A?ACG 突变为ACC
B?AUG 突变为UUG
C?UAC 突变为UAG
D?AAA 突变为UUU
4. 一个突变使一个密码子从亮氨酸密码子变为异亮氨酸密码子，
这一突变为 B
A?无义突变
B?错义突变missense
C?致死突变lethal
D?中性突变neutral
5. 一个突变发生使AUU 密码子转变为AUC 密码子. 这两个密码
子均编码亮氨酸，这一突变为 C .
A?无义突变nonsense
B?错义突变missense
C?沉默突变silent
D?中性突变neutral
6. AAA 密码子编码赖氨酸，这一密码子被突变为AGA，这一密
码子编码赖氨酸类似氨基酸精氨酸，这一突变为__D_ 突变.
A?无义突变nonsense
B?错义突变missense
C?沉默突变silent
D?中性突变neutral
7.核苷酸的缺失或插入会导致__C_突变的发生。.
A?无义突变nonsense
B?错义突变missense
C?移码突变frameshift
D?中性突变neutral
8. 一个氨基酸合成途径相关基因的突变可以使这一细菌重新合成
这一氨基酸，这是 A 突变
A?回复突变reversion
B?错义突变missense
C?中性突变neutral
D?移码突变frameshift
9. 在大肠杆菌细胞中，抑制突变多定位于编码 C 基因内？
A?代谢基因metabolic enzymes
B?启动子promoters
C?tRNA 基因
D?DNA聚合酶.
10. 下面哪种突变可以同时发生在细胞？D
A?脱氨基
B?脱嘌呤depurination
C?脱嘧啶depyrimidination
D?以上所有all of the above
11.下面哪些试剂可以诱导DNA突变？D
A?紫外线辐射ultraviolet radiation
B?gamma射线辐射
C?5-溴尿嘧啶bromouracil
D?以上全是
12.紫外线造成DNA突变发生的主要形式是 B
A?碱基替代a base substitution
B?胸腺嘧啶二聚体的形成creation of thymine dimmers
C?互变异构
D?碱基脱氨基deamination of a base
13. 5-溴尿嘧啶是哪一碱基的类似物?A
A?胸腺嘧啶thymine
B?尿嘧啶uracil
C?胞嘧啶cytosine
D?腺嘌呤adenine
14. 下面哪一碱基的脱氨基作用会在DNA中产生错配的胸腺嘧啶.C
A?腺嘌呤adenine
B?尿嘧啶uracil
C?5-甲基胞嘧啶methylcytocine
D?5-溴尿嘧啶bromouracil
15. 一氧化氮可以诱发DNA碱基发生_B__ 作用
A?脱嘌呤depurination
B?脱氨基deamination
C?烷化作用alkylation
D?羟基化hydroxylation
16. 下面哪种化学试剂通过烷基化DNA的哪种特定碱基?D
A?5-溴尿嘧啶
B?一氧化氮nitrous oxide
C?羟胺hydroxylamine
D?乙烷磺基methylmethane sulfonate
17.溴化乙锭是一 C 试剂.
A?烷基化alkylating
B?脱氨基deaminating
C?插入intercalating
D?羟基化hydroxylating
18. 突变是(选择正确答案)B
A?由基因重组造成
B?遗传信息上的可遗传改变
C?遗传密码的有错误的转录
D?通常对发生突变的个体的发育有益
二简答题
1．在大肠杆菌的一种突变株中，编码tRNA的一个基因发生突变，使tRNA的反密码子由原来的5’-GUA-3’变为5’-UUA-3’，这种突变将会产生怎样的效应？请加以解释。
答：正常tRNA识别密码子5’-UAC-3’，装载酪氨酸。发生突变后，tRNA识别终止密码子5’-UAA-3’，这会导致mRNA 链上处在核糖体A的无义密码子UAA发生通读（在终止释放因子还没有结合到终止密码子上时），这样，在蛋白质的C末端就会增添多余的氨基酸，mRNAs链上的终止密码子UAG和UGA 不受影响。
2.由诱变剂引起的DNA损伤会在DNA复制时带来严重的后果。失去特定的碱基互补配对，复制酶系就不能合成模板链的互补链，而是在经过复制叉后留下一个裂口。
（1）大肠杆菌进化形成了怎样的反应来应对因诱变剂而引起的大量DNA损伤？这种反应是如何协同调控的？
（2）为什么说这一反应自身是一个错误潜伏的系统，易导致DNA的突变？
（3）在recA或lexA功能丧失的突变体中将会对这个反应体系产生怎样的影响？
答：（1）为了应对大量DAN的损伤，大肠杆菌进化形成了一种应急反应即SOS修复系统。当损伤发生时，RecA蛋白被激活而具有蛋白酶活性，引起LexA蛋白的降解。LexA蛋白作为一种阻遏蛋白能够抑制uvrA、uvrB、uvrC等大约十七个基因的表达，这些基因的产物都是DNA损伤修复过程中所必须的。这些基因是协同被转录的。当这些蛋白因子将损伤的DNA修复后，DNA合成转入正常，RecA蛋白又失去蛋白酶活性，LexA蛋白又得以控制SOS系统的基因表达，从而使SOS系统处于关闭状态。
（2）SOS修复系统是一个错误潜伏的系统，在某些情况下会引起DNA的突变，例如，SOS修复系统在修复由紫外线引起的胞嘧啶二聚体时，由于错配，修复系统的酶系在二聚体位点发生延宕，致使形成二聚体的胞嘧啶有足够的时间发生脱氨反应而形成尿嘧啶，从而发生转换突变，由CG变为TA。
（3）recA和lexA基因的产物阻遏参与SOS反应的基因的转录。如果recA和lexA功能丧失或仅lexA功能丧失，则这些突变体就不能产生有功能的LexA蛋白，SOS反应就处于一种组成型激活状态。如果只是recA失活，那么，即使DNA损伤较为严重也不能激活RecA蛋白，因而LexA蛋白不能被水解，作为阻遏蛋
白继续阻遏参与SOS反应的基因的表达。所以recA功能丧失而lexA正常的大肠杆菌突变株缺失SOS修复系统，对紫外线敏感。3．在进行琼脂糖凝胶电泳时，随着溴化乙锭量的增加，质粒DNA 的迁移速率会发生怎样的变化？请简要说明。
答：因为EtBr局部使DNA的缠绕数下降，获得正超螺旋。起初会使负超螺旋降低，质粒迁移会减慢。如果添加足够的EtBr, 质粒会正超螺旋化并迁移到超螺旋DNA的位置。
4．试比较切除修复和光复活机制是如何清除由紫外线诱导形成的嘧啶二聚体的？你可使用什么方法区分这两种机制？
答：切出修复需要将嘧啶二聚体切除，换上正常的胸腺嘧啶核苷酸，而光复活机制是通过光复活酶直接破坏嘧啶二聚体的环丁烷从而逆转为正常的胸腺嘧啶核苷酸。
可使用[3H]标记胸腺嘧啶核苷追踪修复过程，如果[3H]出现在修复的DNA分子上，则修复的方式是切除修复，否则就是光复活机制。
5．在DNA中的尿嘧啶是通过那种主要途径形成的，这种改变会产生怎样的有害结果？
答：对胞嘧啶的氧化脱氨基作用使C?U，这样转换突变会发生，因为U和A配对，但C和G配对。
6．. 阐述尿嘧啶修复系统修复的主要步骤，并列出这一修复系统所需要的酶。
答：（1）尿嘧啶糖基化酶去除尿嘧啶，留下完整的糖-P-DNA 骨架
（2）AP核酸内切酶识别AP（无嘧啶碱基）位点，并在AP 位点两侧切割DNA。
核苷酸切除修复完成修复，即解螺旋酶去除一小段APDNA,DNA聚合酶催化合成新链，连接酶连接缺口。
7．由紫外线造成的嘧啶二聚体有多少种修复机制？
答：核苷酸切除修复，碱基切除修复，重组修复或者DNA损伤跨越修复等
第7，8章RNA转录及加工
一选择题
1. 下列哪一项最能代表转录过程?C
A?DNA?蛋白质.B?RNA?蛋白质.C?DNA ?RNA. D?DNA ?DNA.
2. 依赖DNA催化合成RNA的酶是 A
A?RNA 聚合酶B?逆转录酶C?ATP 合成酶.D?DNA聚合酶
3. 在所有细胞类型中，主要RNA分子有几类？.C
A? 1 . B?2.C?3.D?4.
4. 转录的主要产物是B
A?DNA B?RNA C?protein. D?phospholipid.
5.转录和翻译发生在细胞周期是哪一个时期？D
A?S B?G1 C?G2 D?在整个细胞周期中
6. 将不同种类的RNA和其功能配对，每种答案只用一次A
___ mRNA a. 帮助氨基酸结合到核糖体上
___ tRNA b. 核糖体的结构组成
___ rRNA c. 蛋白编码基因的转录本
___ snRNA d. 在RNA剪接中起作用
A?mRNA (c); tRNA (a); rRNA (b); snRNA (d)
B?mRNA (d); tRNA (b); rRNA (c); snRNA (a)
C?mRNA (c); tRNA (b); rRNA (d); snRNA (a)
D?mRNA (a); tRNA (b); rRNA (c); snRNA (d)
8. 转录过程中，RNA聚合酶聚合核苷酸的方向为A
A?从5’到3’ B?从左到右. C?从3’到5’ D?从右到左
9. 下面那种核苷酸不组成RNA? D
A?ATP B?GTP C?CTP D?TTP
10. 下面哪一项不是转录起始所必须的？B
A?NTPs B?引物RNA序列C?RNA 聚合酶D?模板DNA链11. RNA分子是C
A?环状的.B?双链的C?单链的D?双螺旋链
12. 一个基因的DNA序列是3’ -C C A T G C T A- 5’，那么从这一
基因转录来的mRNA序列为： D
A?5’-C C A T G C T A- 3’ B?3’-G G T A C G A T- 5’
C?3’-A T C G T A C C-5’ D?5’-G G U A C G A U-3’
13.转录起始时RNA聚合酶结合的DNA序列称作：A
A?启动子.B?操作子.C?起始子D?终止子
14.大肠杆菌基因启动子的-35区的共有序列为B
A?5’- A A C T G T-3’ B?5’-T T G A C A-3’ C?5’-T A T A A T-3’D?5’-T T A A G A-3’
15. RNA聚合酶全酶的哪一个亚基对于识别大肠杆菌启动子的共
有序列是必须的？D
A?α-亚基B?β-亚基C?rho 因子D?sigma 因子
16. 在热激反应过程中，细胞转录时那种sigma 因子占据主要作用?D
A?σ70 B?σ54 C?σ23 D?σ32
17. rho蛋白参与了转录的哪一个阶段？C
A?起始B?链的延伸C?终止D?转绿泡形成
18. 依赖rho 因子的终止子的特征是?B
A?rho 蛋白B?发夹结构尾随着一串的U ；C?只有发夹结构. D?只有一串U.
19. 在细菌中，RNA聚合酶转录D
A?只转录tRNA 基因B?只转录蛋白质编码基因.
C?转录rRNA 基因和tRNA 基因；D?转录所有类型的基因
20. 转录和翻译在下面那种细胞中是偶联的？C
A?酵母B?人类细胞C?细菌细胞D?原生动物细胞
21. 在真核细胞中参与pre-mRNA 剪接的是?C
A?rRNA B?hnRNA C?snRNA D?gRNA
22.在真核细胞中，成熟的tRNA分子定位于C
A?细胞核B?下了头. C?cytoplasm.D?高尔基复合体. 23..在原核生物中，其mRNA的上游序列是起始蛋白质合成所必需
的，这一序列称为
A?Pribnow B?Hogness C?Watson-Crick D?Shine-Dalgarno
24. 转录因子TFIIS 的功能是D
A?结合Sp1 B?磷酸化TFIIH C?解链DNA
D?促进RNA校读E?终止转录
二填空题
1．大肠杆菌RNA聚合酶由（核心酶）和（σ）因子组成，其中前者由（α）亚基、（β）亚基和（β’）亚基组成，活性中心位于（β）亚基上。
2．使用（α-鹅膏碱）可将真核细胞的三种RNA聚合酶区分开来。3．原核细胞启动子-10区的序列通常被称为（Pribnow box），其一致序列是（TATA）。
4．RNA聚合酶（Ⅱ）对α-鹅膏蕈碱最敏感，主要用于（mRNA）的转录；而RNA聚合酶（Ⅰ）对α-鹅膏蕈碱最不敏感，主要用于（rRNA）的转录。
三简答题
1．如何把mRNA从rRNA 和tRNA中分离出来？
答：用oligo（dT）基质选择性结合带有poly(A)尾巴的mRNA，从
(完整版)分子生物学试题及答案(整理版)
分子生物学试题及答案 一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。 3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。 9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA、-35区的TGACA 及增强子，弱化子等。 12．DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13．SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。 14．单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15．考斯质粒：是经过人工构建的一种外源DNA载体，保留噬菌体两端的COS区，与质粒连接构成。16．蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。 17．顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。18．Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（IF-2）和（IF-3）。 4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（DNA重组技术）三部分。7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接，）、 （mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法）、（可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响）、（活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭）。 10．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11．半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（ S2）开始，无G时转录从（ S1）开
分子生物学试题及答案
分子生物学试题及答案
分子生物学试题及答案一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。
除了5’ 3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（ IF-2 ）和（IF-3 ）。4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。 5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（ DNA重组技术）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（ hnRNA在转变为mRNA 的过程中经过剪接，）、
现代分子生物学_复习笔记完整版.doc
现代分子生物学 复习提纲 第一章绪论 第一节分子生物学的基本含义及主要研究内容 1 分子生物学Molecular Biology的基本含义 ?广义的分子生物学：以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究 对象，从分子水平阐明生命现象和生物学规律。 ?狭义的分子生物学：偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调控 等过程，也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 1.1 分子生物学的三大原则 1) 构成生物大分子的单体是相同的 2) 生物遗传信息表达的中心法则相同 3) 生物大分子单体的排列（核苷酸、氨基酸）的不同 1.3 分子生物学的研究内容 ●DNA重组技术（基因工程） ●基因的表达调控 ●生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学） ●基因组、功能基因组与生物信息学研究 第二节分子生物学发展简史 1 准备和酝酿阶段 ?时间：19世纪后期到20世纪50年代初。 ?确定了生物遗传的物质基础是DNA。 DNA是遗传物质的证明实验一：肺炎双球菌转化实验 DNA是遗传物质的证明实验二：噬菌体感染大肠杆菌实验 RNA也是重要的遗传物质-----烟草花叶病毒的感染和繁殖过程 2 建立和发展阶段 ?1953年Watson和Crick的DNA双螺旋结构模型作为现代分子生物学诞生的里程碑。 ?主要进展包括： ?遗传信息传递中心法则的建立 3 发展阶段 ?基因工程技术作为新的里程碑，标志着人类深入认识生命本质并能动改造生命的新时期开始。 ? 第三节分子生物学与其他学科的关系 思考 ?证明DNA是遗传物质的实验有哪些？ ?分子生物学的主要研究内容。 ?列举5～10位获诺贝尔奖的科学家，简要说明其贡献。
分子生物学期中考试
1.广义的分子生物学：蛋白质及核酸等生物大分子结构和功能的研究都属于分子生物学的范畴，即从分子水平阐明生命现象和生物学规律 狭义的分子生物学：偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调控等过程，以涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究 2.What is Molecular Biology? Molecular biology seeks to explain the relationships between the structure and function of biological molecules and how these relationships contribute to the operation and control of biochemical processes. ---Turner et al. Molecular biology is the study of genes and their activities at the molecular level, including transcription, translation, DNA replication, recombination and translocation. --- Robert Weaver 3.遗传物质的特性:①存储并表达遗传信息；②能把遗传信息传递给子代；③物理和化学性质稳定；④有遗传变异的能力。 4.三个经典实验：肺炎双球菌的转化实验1944，首先证明DNA是遗传物质；噬菌体感染实验1952进一步肯定DNA是遗传物质；病毒重建实验1956证明RNA是遗传物质 5．发展史： 碱基配对原则：不同生物种属的DNA的碱基组成不同；同一个体的不同器官或组织的DNA碱基组成相同对于一特定组织的DNA，其碱基组分不随年龄、营养状态和环境而变化[A] = [T]，[G] ≡[C] A+G=T+C,嘌呤碱总数与嘧啶碱总数相等DNA分子的双螺旋结构模型；中心法则 1.遗传物质 DNA携带两类不同的遗传信息：a、编码蛋白质和RNA的信息(编码tRNA、rRNA) b、编码基因选择性表达的信息； RNA也可作为遗传物质：RNA病毒TMV 类病毒 蛋白质作为遗传物质：朊病毒 2.DNA化学组成：碱基（嘧啶嘌呤ATCG）、核苷、核苷酸 DNA一级结构：多聚核苷酸链主链是核糖和磷酸侧链为碱基由3’,5’磷酸二酯键连接 链的方向：同一个磷酸基的3’酯键到5’酯键的方向(5’→3’) 3.DNA双螺旋模型：每一单链具有5‘3’极性两条单链极性相反,反向平行两条单链间以氢键连接以中心为轴，向右盘旋（直径2nm）双螺旋中存在大，小沟 双螺旋模型参数：直径20?；螺距为34?（任一条链绕轴一周所升降的距离）；每圈有10个核苷酸；两个碱基之间的垂直距离是3.4?。螺旋转角是36度；有大沟和小沟配对碱基并不充满双螺旋空间，且碱基对占据的空间不对称 影响双螺旋结构稳定性的因素：氢键，磷酸酯键，碱基堆积力(非特异性结合力)，疏水作用力。不稳定因素：磷酸基团间的静电斥力，碱基内能增加(温度), 使氢键因碱基排列有序状态的破坏而减弱 双螺旋结构的基本形式：B-DNA 此外人们还发现了A、C、D、E等右手双螺旋和左手双螺旋Z构象等形式 DNA结构的多态性：几种不同的DNA双螺旋结构以及同一种双螺旋结构内参数存在差异的现象 一些DNA序列的不寻常结构：1、反向重复序列又称回文序列（廻文）：指两段同样的核苷酸序列同时存在于一个分子中,有时也有不完全相同的情况较短的回文序列可能是作为一种信号如：限制性内切酶的识别位点一些调控蛋白的识别位点 4.变性（denaturation 或融解melting）：DNA双螺旋区的氢键断裂，使双螺旋的两条链完全分开变成单链，这一双链分离的过程叫做变性。1、条件：加热, 极端pH,有机溶剂（尿素、酰胺)，低盐浓度等 Tm = OD增加值的中点温度(一般为85-95℃)或DNA双螺旋结构失去一半时的温度 影响Tm值的因素：在A, T, C, G 随机分布的情况下，决定于GC含量；GC%含量相同的情况下碱基排列对Tm 值具有明显影响从嘌呤到嘧啶方向的碱基堆积力作用显著地大于同样组成的嘧啶到嘌呤方向的碱基堆积作用DNA分子的复性：变性DNA在适当条件下，两条彼此分开的链又可以重新地合成双螺旋结构的过程（退火）影响DNA复性过程的因素：阳离子浓度；复性反应的温度，低于Tm值25℃左右；S.S, DNA 的初始浓度C0；S.S. DNA分子的长度；DNA 分子中, 碱基的排列状况DNA呼吸作用：DNA双螺旋结构内部，配对碱基的氢键的迅速断裂和再生的过程。很多有重要调节功能的的DNA
(精选)分子生物学期末考试题目及答案
分子生物学复习提纲 一．名词解释 （1）Ori ：原核生物基因质粒的复制起始位点，是四个高度保守的19bp组成的正向重复序列，只有ori能被宿主细胞复制蛋白质识别的质粒才能在该种细胞中复制。 ARS：自主复制序列，是真核生物DNA复制的起点，包括数个复制起始必须的保守区。不同的ARS序列的共同特征是一个被称为A区的11bp的保守序列。（2）Promoter：启动子，与基因表达启动有关的顺式作用元件，是结构基因的重要成分，它是位于转录起始位点5’端上游区大约100~200bp以内的具有独立功能的DNA序列，能活化RNA 聚合酶，使之与模板ＤＮＡ准确地相结合并具有转录起始的特异性。 （3）r-independent termination不依赖r因子的终止，指在不依赖r因子的终止反应中，没有任何其他因子的参与，核心酶也能在某些位点终止转录。（强终止子） （4）SD sequence：ＳＤ序列（核糖体小亚基识别位点），存在于原核生物起始密码ＡＵＧ上游７～１２个核苷酸处的一种４～７个核苷酸的保守片段，它与１６ＳｒＲＮＡ３’端反向互补，所以可以将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。 Kozak sequence：存在于真核生物mRNA的一段序列，核糖体能够识别mRNA 上的这段序列，并把它作为翻译起始位点。 （5）Operator：操纵基因，与一个或者一组结构基因相邻近，并且能够与一些特异的阻遏蛋白相互作用，从而控制邻近的结构基因表达的基因。 Operon：操纵子，是指原核生物中由一个或多个相关基因以及转录翻译调控元件组成的基因表达单元。包括操纵基因、结构基因、启动基因。 （6）Enhancer：增强子，能强化转录起始的序列的为增强子或强化子Silencer：沉默子，可降低基因启动子转录活性的一段DNA顺式元件。与增强子作用相反。 （7）cis-acting element ：顺式作用元件，存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列，包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件，本身不编码任何蛋白质，仅仅提供一个作用位点，与反式作用因子相互作用参与基因表达调控。 trans-acting factor：反式作用因子，是指直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。具有三个功能结构域，即DNA结合域、转录结合域、结合其他结合蛋白的结构域。 （8）Open reading frame (ORF)：开放式阅读框架，是指一组连续的含有三联密码子的能够被翻译成为多肽链的DNA序列。它由起始密码子开始，到终止密码子结束。 （9）Gene：基因，产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。（能转录且具有生物学功能的DNA/RNA的序列。）
《分子生物学》期末试卷及答案(C)
《分子生物学》期末试卷（C） 一、术语解释（20分，每题2分） 1、操纵子 2、增强子 3、启动子 4、内含子 5、外显子 6、顺式作用元件 7、反式作用因子 8、转录因子 9、单顺反子mRNA 10、多顺反子mRNA 二、选择题（20分） 1.指导合成蛋白质的结构基因大多数为: ( ) A.单考贝顺序 B.回文顺序 C.高度重复顺序 D.中度重复顺序 2. 下列有关Shine-Dalgarno顺序(SD-顺序)的叙述中错误的是: ( ) A.在mRNA分子的起始密码子上游7-12个核苷酸处的顺序 B.在mRNA分子通过 SD序列与核糖体大亚基的16s rRNA结合 C.SD序列与16s rRNA 3'端的一段富含嘧啶的序列互补 D. SD序列是mRNA分子结合核糖体的序列 3.原核生物中起始氨基酰-tRNA是: ( ) A.fMet-tRNA B.Met-tRNA C.Arg-tRNA D.leu-tRNA 4.下列有关TATA盒 (Hognessbox)的叙述,哪个是错误的: ( ) A. 保守序列为TATAAT B.它能和RNA聚合酶紧密结合 C. 它参与形成开放转录起始复合体 D.它和提供了RNA聚合酶全酶识别的信号 5. 一个mRNA的部分顺序和密码的编号是 140 141 142 143 144 145 146 CAG CUC UAU CGG UAG AAC UGA 以此mRNA为模板,经翻译生成多肽链含有的氨基酸为: ( ) A.141 B.142 C.143 D.144 6. DNA双螺旋结构模型的描述中哪一条不正确：( ) A.腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数 B.同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似 C.DNA双螺旋中碱基对位于外侧 D. 维持双螺旋稳定的主要因素是氢键和碱基堆集力。 7． DNA聚合酶III的描述中哪条不对：( ) A.需要四种三磷酸脱氧核苷酸作底物 B.具有5′→3′外切酶活性 C. 具有5′→3′聚合活性 D. 是DNA复制中链延长反应中的主导DNA聚合酶
分子生物学笔记
分子生物学笔记 ? ?第一章基因的结构第一节基因和基因组 一、基因(gene) 是合成一种功能蛋白或RNA分子所必须的全部DNA序列． 一个典型的真核基因包括 ①编码序列—外显子(exon) ②插入外显子之间的非编码序列—内合子(intron) ③5'-端和3'-端非翻译区(UTR) ④调控序列(可位于上述三种序列中) 绝大多数真核基因是断裂基因(split-gene)，外显子不连续。 二、基因组(genome) 一特定生物体的整套(单倍体)遗传物质的总和， 基因组的大小用全部DNA的碱基对总数表示。 人基因组3X1 09(30亿bp)，共编码约10万个基因。 每种真核生物的单倍体基因组中的全部DNA量称为C值，与进化的复杂性并不一致(C-value Paradox)。 人类基因组计划（human genome project, HGP） 基因组学（genomics）,结构基因组学（structural genomics）和功能基因组学（functional genomics）。蛋白质组（proteome）和蛋白质组学（proteomics）
第二节真核生物基因组 一、真核生物基因组的特点：， ①真核基因组DNA在细胞核内处于以核小体为基本单位的染色体结构中． ②真核基因组中，编码序列只占整个基因组的很小部分(2—3％)， 二、真核基因组中DNA序列的分类？ (一)高度重复序列(重复次数>lO5) 卫星DNA(Satellite DNA) (二)中度重复序列 1．中度重复序列的特点 ①重复单位序列相似，但不完全一样， ②散在分布于基因组中． ③序列的长度和拷贝数非常不均一， ④中度重复序列一般具有种属特异性，可作为DNA标记． ⑤中度重复序列可能是转座元件(返座子)， 2．中度重复序列的分类 ①长散在重复序列(long interspersed repeated segments．)LINES ②短散在重复序列(Short interspersed repeated segments)SINES SINES：长度<500bp，拷贝数>105．如人Alu序列 LINEs：长度>1000bp(可达7Kb),拷贝数104-105，如人LINEl (三)单拷贝序列(Unique Sequence) 包括大多数编码蛋白质的结构基因和基因间间隔序列， 三、基因家族(gene family)
期末考试分子生物学精彩试题
选择题 1．证明DNA 是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2 噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是（C ）。 A．从被感染的生物体内重新分离得到DNA 作为疾病的致病剂 B．DNA 突变导致毒性丧失 C．生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能 D．DNA 是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子 E．真核心生物、原核生物、病毒的DNA 能相互混合并彼此替代 2.1953 年Watson 和Crick 提出（A ）。 A．多核苷酸DNA 链通过氢键连接成一个双螺旋 B．DNA 的复制是半保留的，常常形成亲本-子代双螺旋杂合链 C．三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D．遗传物质通常是DNA 而非RNA E．分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 3．DNA 双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA 的解链温度的正确描述？（C,D ） A．哺乳动物DNA 约为45℃，因此发烧时体温高于42℃是十分危险的 B．依赖于A-T 含量，因为A-T 含量越高则双链分开所需要的能量越少 C．是双链DNA 中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值 D．可通过碱基在260nm 的特征吸收峰的改变来确定 E．就是单链发生断裂（磷酸二酯键断裂）时的温度 4．Watson和Crick提出的经典DNA双螺旋结构属于(B) A．A型B．B型C．Z型 5．多种密码子编码一个氨基酸的现象，称为密码子的(B) A．连续性B．简并性C．通用性D．摆动性 6．真核基因经常被断开（B,D,E ）。 A．反映了真核生物的mRNA 是多顺反子 B．因为编码序列外显子被非编码序列内含子所分隔 C．因为真核生物的DNA 为线性而且被分开在各个染色体上，所以同一个基因的不同部分可能分布于不同的染色体上 D. 表明初始转录产物必须被加工后才可被翻译 E．表明真核基因可能有多种表达产物，因为它有可能在mRNA 加工的过程中采用不同的外显子重组方式 7．选出下列所有正确的叙述。（A,C ） A．外显子以相同顺序存在于基因组和cDNA 中 B．内含子经常可以被翻译 C．人体内所有的细胞具有相同的一套基因 D．人体内所有的细胞表达相同的一套基因 E．人体内所有的细胞以相同的方式剪接每个基因的mRNA 8．下列哪些基因以典型的串联形式存在于真核生物 基因组？（B,C ） A．珠蛋白基因B．组蛋白基因 C．rRNA 基因D．肌动蛋白基因 9．细胞器基因组（ A ）。
分子生物学笔记完全版
分子生物学笔记第一章基因的结构 第一节基因和基因组 一、基因(gene)是合成一种功能蛋白或RNA分子所必须的全部DNA序列. 一个典型的真核基因包括 ①编码序列—外显子(exon)②插入外显子之间的非编码序列—内合子(intron)③5'-端和3'-端非翻译区(UTR) ④调控 序列(可位于上述三种序列中) 绝大多数真核基因是断裂基因(split-gene) ，外显子不连续。 二、基因组(genome) 一特定生物体的整套(单倍体)遗传物质的总和，基因组的大小用全部DNA的碱基对总数表示。人基因组3X1 09(30亿bp)，共编码约10万个基因。 每种真核生物的单倍体基因组中的全部DNA量称为C值，与进化的复杂性并不一致(C-value Paradox)。 人类基因组计划( human genome project, HGP ) 基因组学( genomics ),结构基因组学( structural genomics )和功能基因组学( functional genomics )。 蛋白质组( proteome )和蛋白质组学( proteomics ) 第二节真核生物基因组 一、真核生物基因组的特点：， ①真核基因组DNA在细胞核内处于以核小体为基本单位的染色体结构中. ②真核基因组中，编码序列只占整个基因组的很小部分(2 —>% ), 三、基因家族(gene family) 一组功能相似且核苷酸序列具有同源性的基因. 可能由某一共同祖先基因(ancestral gene) 经重复(duplication) 和突变产生。 基因家族的特点： ①基因家族的成员可以串联排列在一起，形成基因簇(gene cluster)或串联重复基因(tandemly repeated genes)，如 rRNA、tRNA和组蛋白的基因；②有些基因家族的成员也可位于不同的染色体上，如珠蛋白基因；③有些成员不产生 有功能的基因产物，这种基因称为假基因(Pseudogene) . ￥ a1表示与a1相似的假基因. 四、超基因家族(Supergene family ，Superfamily) 由基因家族和单基因组成的大基因家族，结构上有程度不等的同源性，但功能不同． 第四节细菌和病毒基因组 一、细菌基因组的特点。 1 ．功能相关的几个结构基因往往串联在—起，受它们上游的共同调控区控制，形成操纵子结构，2．结构基因中没有内含子，也无重叠现象。 3 .细菌DNA大部分为编码序列。 二、病毒基因组的特点 1 .每种病毒只有一种核酸，或者DNA，或者RNA ; 2 .病毒核酸大小差别很大，3X10 3 一3X106bp ; 3.除逆病毒外，所有病毒基因都是单拷贝的。 4 .大部份病毒核酸是由一条双链或单链分子(RNA或DNA)，仅少数RNA病毒由几个核酸片段组成. 5. 真核病毒基因有内含子，而噬菌体(感染细菌的病毒)基因中无内含子. 6. 有重叠基因. 第五节染色质和染色体 (二)组蛋白(histone): 一类小的带有丰富正电荷<富含Lys，Arg)的核蛋白，与DNA有高亲和力. (二).端粒(telomere) ：真核生物线状染色体分子末端的DNA 区域端粒DNA的特点： 1、由富含G的简单串联重复序列组成(长达数kb). 人的端粒DNA重复序列：TTAGGC。
关于分子生物学试题及答案
分子生物学试题（一） 一.填空题(,每题1分,共20分) 一.填空题(每题选一个最佳答案,每题1分,共20分) 1. DNA的物理图谱是DNA分子的（）片段的排列顺序。 2. 核酶按底物可划分为（）、（）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（）、（）和（）。 4．蛋白质的跨膜需要（）的引导，蛋白伴侣的作用是（）。5．真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：（）和（）。6．分子生物学的研究内容主要包含（）、（）、（）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（）、（）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（）、（）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（）、（）、（）。 10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11.半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP-CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP-CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（S2 ）开始，无G时转录从（S1 ）开始。 12．DNA重组技术也称为（基因克隆）或（分子克隆）。最终目的是（把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体）。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤： ①提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上（克隆载体），形一个新的重组DNA分子。 ②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。 ③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。 ④对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。 13、质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为（严紧型质粒），不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为（松弛型质粒）。 14．PCR的反应体系要具有以下条件： a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的 DNA引物（约20个碱基左右）。 b、具有热稳定性的酶如：TagDNA聚合酶。 c、dNTP d、作为模板的目的DNA序列 15．PCR的基本反应过程包括：（变性）、（退火）、（延伸）三个阶段。 16、转基因动物的基本过程通常包括： ①将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中； ②接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫；
分子生物学期末试题
分子生物学期末考试试题 一、名词解释 1、反式作用因子：能直接或间接地识别或结合各类顺式作用元件核心序列，参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 2、基因家族： 3、C值矛盾：C值是指真核生物单倍体的DNA含量，一般的，真核生物的进化程度越高，C值越大，但在一些两栖类生物中，其C值却比哺乳动物大的现象。原因是它含有大量的重复序列，而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开。 4、核型：指一个物种所特有的染色体数目和每一条染色体所特有的形态特征。 5、RNA editing：转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。 二、判断： 1、真核生物所有的mRNA都有polyA结构。（X ） 组蛋白的mRNA没有 2、由于密码子存在摇摆性，使得一种tRNA分子常常能够识别一种以上同一种氨基酸的密码子。（√ ） 3、大肠杆菌的连接酶以ATP作为能量来源。（X ） 以NAD作为能量来源 4、tRNA只在蛋白质合成中起作用。（X ） tRNA还有其它的生物学功能，如可作为逆转录酶的引物
5、DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物。（X ） RNA聚合酶的催化反应不需要引物 6、真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲酰甲硫氨酸（X ） 真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲硫氨酸 7、质粒不能在宿主细胞中独立自主地进行复制（X ） 质粒具有复制起始原点，能在宿主细胞中独立自主地进行复制 8、RNA因为不含有DNA基因组，所以根据分子遗传的中心法则，它必须先进行反转录，才能复制和增殖。（X ） 不一定，有的RNA病毒可直接进行RNA复制和翻译 9、细菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和ρ因子组成。（X ） 细菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和σ因子组成 10、核小体在复制时组蛋白八聚体以全保留的方式传递给子代。（√ ） 11、色氨酸操纵子中含有衰减子序列（√ ） 12、SOS框是所有din基因（SOS基因）的操纵子都含有的20bp的lexA结合位点。（√ ） 三、填空： 1、原核生物的启动子的四个保守区域为转录起始点、-10区、-35区、-10区与-35区的距离。
!!分子生物学笔记完全版
列〃一个典型的真核基因包括 ①编码序列—外显子(exon) ②插入外显子之间的非编码序列—内合子(intron) ③5'-端和 3'-端非翻译区(UTR) ④调控序列(可位于上述三种序列中) 绝大多数真核基因是断 裂基因(split-gene)，外显子不连续。二、基因组(genome) 一 特定生物体的整套(单倍体)遗传物质的总和，基因组的大小 用全部 DNA 的碱基对总数表示。 人基因组 3X1 09(30 亿 bp)，共编码约 10 万个基因。 每种真核生物的单倍体基因组中的全部 DNA 量称为 C 值，与进化的复杂性并不一致(C-value Paradox)。 人类基因组计划（human genome project, HGP）基因组学（genomics）,结构基因组学（structural genomics）和功能基因组学（functional genomics）。 蛋白质组（proteome）和蛋白质组学（proteomics） 第二节真核生物基因组一、真核生物基因组的特 点：， ①真核基因组 DNA 在细胞核内处于以核小体为基本单位的染色体结构中〃 ②真核基因组中，编码序列只占整个基因组的很小部分(2—3％)， 二、真核基因组中 DNA 序列的分类 • (一)高度重复序列(重复次数>lO5) 卫星 DNA(Satellite DNA) (二)中度重复序列 1〃中度重复序列的特点
①重复单位序列相似，但不完全一样， ②散在分布于基因组中〃 ③序列的长度和拷贝数非常不均一， ④中度重复序列一般具有种属特异性，可作为 DNA 标记〃 ⑤中度重复序列可能是转座元件(返座子)， 2〃中度重复序列的分类 ①长散在重复序列(long interspersed repeated segments〃) LINES ②短散在重复序列(Short interspersed repeated segments) SINES SINES：长度<500bp，拷贝数>105〃如人 Alu 序列 LINEs：长
分子生物学复习题(有详细答案)
绪论 思考题：（P9） 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义？ 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念，即将分子生物学的范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面？什么是反向生物学？什么是 后基因组时代？ 研究内容： DNA的复制、转录和翻译；基因表达调控的研究；DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学：是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能，在体外使基因突变，再导入体内，检测突变的遗传效应，即以表型来探索基因结构。 后基因组时代：研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式，人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件（年代、发明者、简要内容） 1953年Watson和Click发表了?脱氧核糖核苷酸的结构?的著名论文，提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年，重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术，并完成了第一个细菌基因的克隆，开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的？ 随着基因组计划的完成，人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代，人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生，如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题：（P130） 1、基因的概念如何？基因的研究分为几个发展阶段？ 概念：基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段：○120世纪50年代以前，主要从细胞的染色体水平上进行研究，属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后，主要从DNA大分子水平上进行研究，属于分
分子生物学(题库二)
习题2 一、比较下列概念 2．转录和翻译 3．RNA聚合酶和引物酶 4．启动子和增强子 5．同源重组和位点特异性重组 6. 密码子和遗传密码 7. 基因内抑制突变和基因间抑制突变 8 SD序列和Kozak序列 9．密码子和反密码子 10．同义密码子和偏爱密码子
11．-10序列（ Pribnow box ）和TATA框（Goldberg-Hogness box） 二、填空 1．位点特异性重组的结果与重组位点的位置和方向有关。如果重组位点以相反方向存在于同一DNA分子上，重组结果发生；重组位点以相同方向存在于同一DNA分子上，重组发生。重组位点在不同DNA分子上，重组发生。 2. 1956年，Crick提出了遗传信息传递的途径，称为，其内容概括为 3．被转录的ＤＮＡ链称为模板链，又称链, 它与转录出来的ＲＮＡ序列，非模板的DNA链为编码链，又称链；它与转录生成的ＲＮＡ序列，不过在ＲＮＡ中含有Ｕ而不含Ｔ。 4. 大肠杆菌中DNA指导的RNA聚合酶全酶的亚基组成为，去掉因子后剩 下的部分称为核心酶，这个因子使全酶能辩认DNA上的位点。 5. 利福平抑制细菌中转录的起始，因为。 6. 原核细胞中各种RNA是催化生成的。而真核细胞核基因的转录分别由 种RNA聚合酶催化，其中rRNA基因由转录，hnRNA基因由转录，各类小分子量RNA则是的产物。 7.在真核生物中，转录mRNA基因的酶是_____；转录tRNA基因的酶是____；转录18S和28S rRNA基因的酶是__________。 8. 一个转录单位一般应包括序列、序列和序列。 9.真核细胞每个mRNA一般只带一种蛋白质编码信息，是 mRNA; 原核细胞每个mRNA 分子常带有多个功能相关蛋白质的编码信息,是 mRNA 。 10.真核细胞中编码蛋白质的基因多为。编码的序列被保留在成熟mRNA中的 是，编码的序列在前体分子转录后加工中被切除的是。 11在基因中 ______被_____分隔开，而成熟的mRNA中序列被拼接起来。
分子生物学期末考试重点
1.定义重组DNA技术 将不同的DNA片段按照人们的设计定向连接起来，然后在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。 2.说出分子生物学的主要研究内容 1.DNA重组技术 2.基因表达研究调控 3.生物大分子的结构功能研究 4.基因组、功能基因组与生物信息学研究 3.简述DNA的一、二、三级结构 一级：4种核苷酸的连接及排列顺序，表示了该DNA分子的化学成分 二级：2条多核苷酸连反向平行盘绕所形成的双螺旋结构 三级：DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定的空间结构 4.原核生物DNA具有哪些不同于真核生物DNA的特征？ ①DNA双螺旋是由2条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成，多核苷酸的方向由核苷酸间的磷酸二酯键的走向决定，一条是5---3，另一条是3---5②DNA双螺旋中脱氧核糖和磷酸交替连接，排在外侧构成基本骨架，碱基排在内侧③两条链上的碱基通过氢键相结合，形成碱基对 5.DNA双螺旋结构模型是由谁提出的？沃森和克里克 6.DNA以何种方式进行复制，如何保证DNA复制的准确性？ 线性DNA的双链复制：将线性复制子转变为环状或者多聚分子，在DNA末端形成发卡式结构，使分子没有游离末端，在某种蛋白质的介入下在真正的末端上启动复制。环状DNA 复制：θ型、滚环型、D型 ①以亲代DNA分子为模板进行半保留复制，复制时严格按照碱基配对原则 ②DNA聚合酶I 非主要聚合酶，可确保DNA合成的准确性
③DNA修复系统：错配修复、切除修复、重组修复、DNA直接修复、SOS系统 7.简述原核生物DNA复制特点 只有一个复制起点，复制起始点上可以连续开始新的DNA复制，变现为虽只有一个复制单元，但可以有多个复制叉 8.真核生物DNA的复制在哪些水平上受到调控？ 细胞生活周期水平调控；染色体水平调控；复制子水平调控 9.细胞通过哪几种修复系统对DNA损伤进行修复？ 错配修复，恢复错配；切除修复，切除突变的碱基和核苷酸片段；重组修复，复制后的修复；DNA直接修复，修复嘧啶二聚体；SOS系统，DNA的修复，导致变异 10.什么是转座子？分为哪些种类？ 是存在于染色体DNA上可自主复制和移动的基本单位。可分为插入序列和复合型转座子11.什么是编码链？什么是模板链？ 与mRNA序列相同的那条DNA链称为编码链，另一条根据碱基互补配对原则指导mRNA 合成DNA链称为模板链 12.简述RNA的种类及其生物学作用 mRNA：编码了一个或多个多肽链序列。 tRNA：把mRNA上的遗传信息变为多肽中的氨基酸信息。 rRNA：是核糖体中的主要成分。 hnRNA：由DNA转录生成的原始转录产物。 snRNA：核小RNA，在前体mRNA加工中，参与去除内含子。 snoRNA：核仁小RNA，主要参与rRNA及其它RNA的修饰、加工、成熟等过程。scRNA：细胞质小RNA在蛋白质合成过程起作用。
分子生物学复习题及其答案
一、名词解释 1、广义分子生物学：在分子水平上研究生命本质的科学，其研究对象是生物大分子的结构和功能。2 2、狭义分子生物学：即核酸（基因）的分子生物学，研究基因的结构和功能、复制、转录、翻译、表达调控、重组、修复等过程，以及其中涉及到与过程相关的蛋白质和酶的结构与功能 3、基因：遗传信息的基本单位。编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位，是染色体或基因组的一段DNA序列(对以RNA作为遗传信息载体的RNA病毒而言则是RNA序列)。 4、基因：基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，包含产生一条多肽链或功能RNA 所必需的全部核苷酸序列。 5、功能基因组学：是依附于对DNA序列的了解，应用基因组学的知识和工具去了解影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。 6、蛋白质组学：是以蛋白质组为研究对象，研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。 7、生物信息学：对DNA和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和转输 8、蛋白质组：指的是由一个基因组表达的全部蛋白质 9、功能蛋白质组学：是指研究在特定时间、特定环境和实验条件下细胞内表达的全部蛋白质。 10、单细胞蛋白：也叫微生物蛋白，它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而，单细胞蛋白不是一种纯蛋白质，而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。 11、基因组：指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。 12、C值：指生物单倍体基因组的全部DNA的含量，单位以pg或Mb表示。 13、C值矛盾：C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。 14、重叠基因：共有同一段DNA序列的两个或多个基因。 15、基因重叠：同一段核酸序列参与了不同基因编码的现象。 16、单拷贝序列：单拷贝顺序在单倍体基因组中只出现一次，因而复性速度很慢。单拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息，编码各种不同功能的蛋白质。 17、低度重复序列：低度重复序列是指在基因组中含有2～10个拷贝的序列 18、中度重复序列：中度重复序列大致指在真核基因组中重复数十至数万（<105）次的重复顺序。其复性速度快于单拷贝顺序，但慢于高度重复顺序。 19、高度重复序列：基因组中有数千个到几百万个拷贝的DNA序列。这些重复序列的长度为6~200碱基对。 20、基因家族：真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因，可能由某一共同祖先基因经重复和突变产生。 21、基因簇：基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位，定位于染色体的特殊区域。 22、超基因家族：由基因家族和单基因组成的大基因家族，各成员序列同源性低，但编码的产物功能相似。如免疫球蛋白家族。 23、假基因：一种类似于基因序列，其核苷酸序列同其相应的正常功能基因基本相同、但却不能合成功能蛋白的失活基因。 24、复制：是指以原来DNA（母链）为模板合成新DNA（子链）的过程。或生物体以DNA/RNA