基因的表达测试题

基因的表达测试题
基因的表达测试题

基因的表达测试

1.甲、乙两图为真核细胞中发生的代过程的示意图,下列有关说确的是( )

A.甲图所示的过程叫作翻译,多个核糖体共同完成一条多肽链的合成

B.乙图所示过程叫作转录,转录产物的作用一定是作为甲图中的模板

C.甲图所示翻译过程的方向是从右到左

D.甲图和乙图中都发生了碱基互补配对且碱基互补配对方式相同

2.下列有关原核细胞和真核细胞转录和翻译过程的叙述中,正确的是( )

A.原核细胞,转录还未结束便启动遗传信息的翻译

B.真核细胞,在转录的同时,核糖体进入细胞核启动遗传信息的翻译

C.原核细胞,转录促进mRNA在核糖体上移动,以便合成肽链

D.真核细胞,一个mRNA分子在多个核糖体上移动,同时合成多条肽链

3.下列关于正常的干细胞遗传信息传递的叙述,不正确的是( )

A.遗传信息的复制阶段,遵循碱基互补配对原则,基因突变可发生在该阶段

B.遗传信息的转录阶段,转录产物的碱基序列与非模板链对应区段不完全相同

C.遗传信息的翻译阶段,mRNA上的密码子都会与tRNA上的反密码子发生碱基配对现象D.遗传信息的复制和转录阶段,都需要聚合酶的催化,且主要场所都是细胞核

4.真核细胞编码蛋白质的起始密码子是AUG,决定的氨基酸为甲硫氨酸。图中①、②、③分别是与起始密码子有关的碱基对序列。下列叙述正确的是( )

①…TAC…

…ATG…②

…UAC…

…AUG…③

…AUG…

…TAC…

A.真核细胞每个基因中只含有一组①B.图②所示碱基配对方式发生在转录过程中

C.含有②中UAC的tRNA只转运甲硫氨酸D.③中存在5种核苷酸

5.研究发现,人类免疫缺陷病毒(HIV)携带的RNA在宿主细胞不能直接作为合成蛋白质的模板。结合中心法则(下图),下列相关叙述不正确的是( )

A.子代病毒蛋白质外壳的合成至少要经过④、②、③过程

B.进行①、②、③过程的原料来自宿主细胞

C.通过④形成的DNA可以整合到宿主细胞的染色体DNA上

D.②、③过程分别在宿主细胞核和病毒的核糖体上进行

6.如图表示有关遗传信息传递的模拟实验。相关叙述合理的是

( )

A.若X是mRNA,Y是多肽,则管必须加入氨基酸

B.若X是DNA一条链,Y含有U,则管必须加入逆转录酶

C.若X是tRNA,Y是多肽,则管必须加入脱氧核苷酸

D.若X是HIV的RNA,Y是DNA,则管必须加入DNA酶

7.如图为基因的作用与性状表现的流程示意图。请据图分析,下列说法不正确的是( )

A.①过程以DNA的一条链为模板、四种核糖核苷酸为原料合成RNA

B.某段DNA上发生了基因突变,但形成的蛋白质不一定会改变

C.③过程中需要多种转运RNA,转运RNA不同,所搬运的氨基酸也不相同

D.人的镰刀型细胞贫血症是基因对性状的直接控制,使结构蛋白发生变化所致

8.如图为人体基因对性状的控制过程,据图分析正确的是( )

A.正常情况下,①②⑥⑦过程都会在皮肤细胞中发生

B.基因1和基因2的遗传一定遵循自由组合定律

C.③④反映了基因可以通过控制蛋白质的结构直接控制

生物体的性状

D.人体衰老引起白发的原因是⑥⑦过程不能完成

9.端粒酶由RNA和蛋白质组成,该酶能结合到端粒上,以自身的RNA为模板合成端粒DNA 的一条链。下列叙述正确的是( )

A.大肠杆菌拟核的DNA中含有端粒B.端粒酶中的蛋白质为RNA聚合酶

C.正常人细胞的每条染色体两端都含有端粒DNA

D.正常体细胞的端粒DNA随细胞分裂次数增加而变长

10.关于蛋白质生物合成的叙述,正确的是( )

A.一种tRNA可以携带多种氨基酸B.DNA聚合酶是在细胞核合成的

C.反密码子是位于mRNA上相邻的3个碱基

D.线粒体中的DNA能控制某些蛋白质的合成

11.同一物种的两类细胞各产生一种分泌蛋白,组成这两种蛋白质的各种氨基酸含量相同,但排列顺序不同。其原因是参与这两种蛋白质合成的( )

A.tRNA种类不同B.mRNA碱基序列不同

C.核糖体成分不同D.同一密码子所决定的氨基酸不同

12.下列关于DNA复制和转录的叙述错误的是( )

A.DNA分子的复制可以从多个起点开始,提高复制效率

B.两种过程都以DNA为模板,都有解旋现象

C.转录是指以DNA的两条链为模板合成mRNA的过程

D.两过程可在细胞核、细胞质、线粒体、叶绿体中发生

13.AUG、GUG是起始密码子,在mRNA翻译成肽链时分别编码甲硫氨酸和缬氨酸,但人体血清白蛋白的第一个氨基酸既不是甲硫氨酸,也不是缬氨酸,这是因为( )

A.组成人体血清白蛋白的单体中没有甲硫氨酸和缬氨酸

B.mRNA与核糖体结合前去除了最前端的部分碱基序列

C.mRNA起始密码子所在位置的碱基在翻译前发生了替换

D.肽链形成后的加工过程中去除了最前端的部分氨基酸

14.如图所示④代表核糖体,⑤代表多肽链,有关叙述不正确的是( )

A.图中所示的生理过程主要有转录和翻译

B.①链中(A+T)/(G+C)的比值与②链中的相同

C.以③为模板合成⑤的过程要产生水

D.③上所含有的密码子均能在tRNA上找到相对应的反密码子

15.如图甲、乙均表示生物体发生的生理过程,下列叙述错误的是( )

A.图甲所示为基因表达过程B.图甲中合成的mRNA首先与核糖体a结合

C.图乙中的②③可表示图甲所示过程D.图乙中涉及碱基A与U配对的过程为②③④⑤16.图①②③分别表示人体细胞中发生的3种生物大分子的合成过程。请回答下列问题:

(1)细胞中过程①、②、③发生的主要场所是________、________、________。

(2)请以流程图的形式表示图中涉及的遗传信息传递方向___________________。

(3)能特异性识别mRNA上密码子的分子是______;一种氨基酸可能有几个密码子,这一现象称作密码的________。

(4)已知过程②的α链中鸟嘌呤与尿嘧啶之和占碱基总数的54%,α链及其模板链对应区段的碱基中鸟嘌呤分别占29%、19%,则与α链对应的DNA区段中腺嘌呤所占的碱基比例为________。

(5)人的白化症状是由于基因异常导致③过程不能产生________引起的,该实例说明基因控制性状的方式是____________________________________。

17.如图为人体某基因控制蛋白质合成的过程示意图。根据所学的生物学知识回答:

(1)图中过程Ⅰ表示________,需要________酶参与。

(2)过程Ⅱ所需要的原料是________,相互间结合的方式叫作________。

(3)若③表示色氨酸,密码子是UGG,则对应的DNA模板链上的碱基顺序是________。若在

模板链中插入一个碱基,则可能导致肽链的________和________发生改变。

(4)图中所揭示的基因控制性状的方式是_____________________________________

________________________________________________________________________,

同时,性状还受到________影响。

基因的表达测试题答案

1.解析:由甲图可知,翻译过程中一个mRNA分子上结合多个核糖体,同时合成多条肽链;转录产物有信使RNA、转运RNA和核糖体RNA三种,而翻译的模板只是信使RNA;甲图中多肽链②最长,说明合成该多肽链的核糖体是最早与mRNA结合的,因此核糖体在mRNA上的移动方向是从右到左;转录和翻译过程中都发生了碱基互补配对,但碱基互补配对方式不完全相同。

答案:C

2.解析:原核细胞没有细胞核,转录和翻译都在细胞质中进行,转录还未结束便开始翻译;真核细胞在细胞核中转录形成mRNA后,mRNA通过核孔进入细胞质中与核糖体结合启动翻译过程;翻译过程中核糖体在mRNA上移动合成肽链。

答案:A

3.解析:DNA复制遵循碱基互补配对原则,基因突变可发生在DNA复制的过程中,A正确;转录产物(RNA)的碱基中含有U不含T,非模板链(DNA)的碱基中含有T而不含U,故二者的碱基序列不完全相同,B正确;mRNA的终止密码子不对应氨基酸,故不会有tRNA与之发生碱基配对现象,C错误;DNA的复制过程要用到DNA聚合酶,转录过程中要用到RNA聚合酶,且DNA 复制和转录的主要场所都是细胞核,D正确。

答案:C

4.解析:真核细胞的每个基因可含有多组①,故A项错误;图②所示的碱基配对方式发生于翻译过程中密码子和反密码子的配对,故B项错误;tRNA具有专一性,一种tRNA只能识别与其配对的密码子对应的氨基酸,反密码子为UAC的tRNA只转运甲硫氨酸,故C项正确;③中含有5种碱基、6种核苷酸,故D项错误。

答案:C

5.解析:HIV为逆转录病毒,繁殖时需要进行逆转录,所以要合成子代蛋白质,至少要经过

④(逆转录)、②(转录)、③(翻译)过程,A正确;病毒繁殖时所需原料、能量和酶多由宿主细胞提供,B正确;逆转录形成的DNA可以整合到宿主细胞的染色体DNA上,C正确;病毒中没有核糖体,D错误。

答案:D

6.解析:如果X是mRNA,产物是多肽,说明是翻译过程,需要加原料氨基酸,故A正确。如果X是DNA一条链,产物Y中含有U,说明是转录过程,不需要加逆转录酶,故B错误。如果X是tRNA,产物是多肽,说明是翻译过程,不需要加脱氧核苷酸,因为脱氧核苷酸是合成DNA 的原料,故C错误。如果X是RNA,Y是DNA,说明是逆转录过程,需要加逆转录酶,故D错误。

答案:A

7.解析:有的氨基酸由多种密码子决定,故不同的tRNA有可能搬运相同的氨基酸。

答案:C

8.解析:由于基因的选择性表达,①②发生在红细胞中,⑥⑦发生在皮肤细胞中,A错误;基因1和基因2可能位于同一条染色体上,所以它们的遗传不一定遵循自由组合定律,B错误;

③④说明基因可以通过控制蛋白质的结构直接控制生物的性状,C正确;人体衰老引起白发的原因是酪氨酸酶活性降低,不是酪氨酸酶不能合成,D错误。

答案:C

9.解析:端粒是每条染色体两端都有的一段特殊序列的DNA,原核生物不具有染色体,A项错误,C项正确;由题意可知,端粒酶可以以自身的RNA为模板合成DNA的一条链,故其中的蛋白质为逆转录酶,B项错误;正常体细胞的端粒DNA序列在每次细胞分裂后会缩短一截,故正常体细胞的端粒DNA随着细胞分裂次数的增加而变短,D项错误。

答案:C

10.解析:本题主要考查蛋白质生物合成的相关知识。tRNA具有专一性,一种tRNA只能携带一种特定的氨基酸;DNA聚合酶是在细胞质中的核糖体上合成的;反密码子是位于tRNA上可以与mRNA上的密码子互补配对的3个碱基;线粒体中含有DNA、RNA、核糖体以及相关的酶,能完成转录和翻译过程,因而线粒体中的DNA能控制某些蛋白质的合成。

答案:D

11.解析:两种分泌蛋白的氨基酸排列顺序不同的原因是参与这两种蛋白质合成的mRNA不同,B符合题意;自然界的生物共用一套遗传密码子,tRNA的种类理论上都是61种,同种生物

的核糖体成分相同,A、C、D错误。

答案:B

12.解析:DNA分子的复制可以从多个起点开始,提高复制效率,A正确;DNA的转录和翻译都是以DNA为模板,都有解旋现象,B正确;转录是指以DNA一条链为模板合成信使RNA 的过程,C错误;真核细胞中,这两个过程可在细胞核、线粒体、叶绿体中发生,在原核细胞中,这两个过程都能在细胞质中发生,D正确。

答案:C

13.解析:血清白蛋白的第一个氨基酸不是甲硫氨酸、缬氨酸,原因可能是起始密码子决定的氨基酸在肽链合成后的加工过程中被切除了。若mRNA与核糖体结合前去除了最前端的部分碱基序列或mRNA起始密码子所在位置的碱基在翻译前发生了突变,则血清白蛋白不能正常合成。

答案:D

14.解析:图示为基因表达的转录和翻译过程,A正确;双链DNA中A=T、C=G,而①链是②链的互补链,B正确;合成⑤的过程为氨基酸的脱水缩合过程,C正确;③mRNA上的终止密码子没有与之对应的反密码子,D错误。

答案:D

15.解析:图甲中边转录边翻译,是原核生物的基因表达过程,故A正确。图甲中合成的mRNA 应首先与核糖体b结合,因为核糖体b上翻译出来的肽链较长,故B错误。图乙中的②③表示转录和翻译,所以可表示图甲所示过程,故C正确。图乙中涉及碱基A与U配对的过程为②转录、③翻译、④RNA的复制和⑤逆转录过程,故D正确。

答案:B

16.解析:(1)由图可知细胞中①、②、③过程分别是DNA的复制、转录和翻译,它们发生的主要场所分别是细胞核、细胞核和细胞质。(2)流程图上涉及DNA的复制,DNA到RNA的转录,RNA 到蛋白质的翻译,详见答案。(3)能特异性识别mRNA上密码子的分子是tRNA,一种氨基酸可能有几个密码子,这一现象被称作密码的简并性。(4)已知过程②的α链中鸟嘌呤与尿嘧啶之和占碱基总数的54%,即G+U=54%。α链及其模板链对应区段的碱基中鸟嘌呤分别占29%、19%,说明mRNA中G为29%,则U为54%-29%=25%,模板链上G为19%,说明mRNA中C为19%,而C +A应为1-54%=46%,A应为46%-19%=27%。DNA是两条链,腺嘌呤所占的比例应是(25%+

27%)÷2=26%。(5)人的白化症状是因为缺乏酪氨酸酶,应是由于基因异常导致③过程不能产生酪氨酸酶。该实例说明基因控制性状的方式是基因通过控制酶的合成来控制代过程,进而控制生物的性状。

答案:(1)细胞核细胞核细胞质

(2)

(3)tRNA 简并性(4)26% (5)酪氨酸酶通过控制酶的合成来控制代过程,进而控制生物的性状

17.解析:过程Ⅰ、Ⅱ分别表示转录和翻译过程。mRNA上的密码子与DNA模板链上的碱基互补配对。模板链中插入一个碱基,可导致mRNA上插入位点后的密码子改变,从而引起氨基酸的种类改变,若密码子变成终止密码子,则会影响肽链的长度。图中基因通过控制膜蛋白的合成控制生物的性状,属于基因对性状的直接控制。

答案:(1)转录RNA聚合

(2)氨基酸脱水缩合

(3)ACC 长度氨基酸排列顺序

(4)通过控制蛋白质的结构直接控制生物体性状环境

基因的表达测试题

基因的表达测试 1.甲、乙两图为真核细胞中发生的代谢过程的示意图,下列有关说法正确的是( ) A.甲图所示的过程叫作翻译,多个核糖体共同完成一条多肽链的合成 B.乙图所示过程叫作转录,转录产物的作用一定是作为甲图中的模板 C.甲图所示翻译过程的方向是从右到左 D.甲图和乙图中都发生了碱基互补配对且碱基互补配对方式相同 2.下列有关原核细胞和真核细胞转录和翻译过程的叙述中,正确的是( ) A.原核细胞内,转录还未结束便启动遗传信息的翻译 B.真核细胞内,在转录的同时,核糖体进入细胞核启动遗传信息的翻译 C.原核细胞内,转录促进mRNA在核糖体上移动,以便合成肽链 D.真核细胞内,一个mRNA分子在多个核糖体上移动,同时合成多条肽链 3.下列关于正常的干细胞内遗传信息传递的叙述,不正确的是( ) A.遗传信息的复制阶段,遵循碱基互补配对原则,基因突变可发生在该阶段 B.遗传信息的转录阶段,转录产物的碱基序列与非模板链对应区段不完全相同 C.遗传信息的翻译阶段,mRNA上的密码子都会与tRNA上的反密码子发生碱基配对现象D.遗传信息的复制和转录阶段,都需要聚合酶的催化,且主要场所都是细胞核 4.真核细胞编码蛋白质的起始密码子是AUG,决定的氨基酸为甲硫氨酸。图中①、②、③分别是与起始密码子有关的碱基对序列。下列叙述正确的是( ) A.真核细胞每个基因中只含有一组① B.图②所示碱基配对方式发生在转录过程中 C.含有②中UAC的tRNA只转运甲硫氨酸 D.③中存在5种核苷酸 5.研究发现,人类免疫缺陷病毒(HIV)携带的RNA在宿主细胞内不能直接作为合成蛋白质的模板。结合中心法则(下图),下列相关叙述不正确的是( ) A.子代病毒蛋白质外壳的合成至少要经过④、②、③过程 B.进行①、②、③过程的原料来自宿主细胞 C.通过④形成的DNA可以整合到宿主细胞的染色体DNA上 D.②、③过程分别在宿主细胞核内和病毒的核糖体上进行 6.如图表示有关遗传信息传递的模拟实验。相关叙述合理的是 ( )

基因表达的检测的几种方法

基因表达检测的最终技术目标是能确定所关注的任何组织、细胞的 RNA的绝对表达量。可以先从样本中抽提RNA,再标记RNA, 然后将这些标记物作探针与芯片杂交,就可得出原始样本中不同 RNA的量。然而用于杂交的某个特定基因的RNA的量与在一个 相应杂交反应中的信号强度之间的关系十分复杂,它取决于多种 因素,包括标记方法、杂交条件、目的基因的特征和序列。所以 芯片的方法最好用于检验两个或多个样本中的某种RNA的相对 表达量。样本之间某个基因表达的差异性(包括表达的时间、空 间特性及受干扰时的改变)是基因表达最重要的,而了解RNA 的绝对表达丰度只为进一步的应用或多或少地起一些作用。 基因表达的检测有几种方法。经典的方法(仍然重要)是根据在 细胞或生物体中所观察到的生物化学或表型的变化来决定某一 特定基因是否表达。随着大分子分离技术的进步使得特异的基因 产物或蛋白分子的识别和分离成为可能。随着重组DNA技术的 运用,现在有可能检测.分析任何基因的转录产物。目前有好几 种方法广泛应用于于研究特定RNA分子。这些方法包括原位杂交.NORTHERN凝胶分析.打点或印迹打点.S-1核酸酶分 析和RNA酶保护研究。这里描述RT-PCR从RNA水平上检查 基因表达的应用。8 f3 f- |2 L) K) b7 ]- ~- | RT-PCR检测基因表达的问题讨论

关于RT-PCR技术方法的描述参见PCR技术应用进展,在此主要讨论它在应用中的问题。理论上1μL细胞质总RNA对稀有mRNA扩增是足够了(每个细胞有1个或几个拷贝)。1μL差不多相当于50-100,000个典型哺乳动物细胞的细胞质中所含RNA的数量,靶分子的数量通常大于50,000,因此扩增是很容易的。该方法所能检测的最低靶分子的数量可能与通常的DNAPCR相同;例如它能检测出单个RNA分子。当已知量的转录RNA(用T7RNA聚合酶体外合成)经一系列稀释,实验结果表明通过PCR的方法可检测出10个分子或低于10个分子,这是反映其灵敏度的一个实例。用此技术现已从不到1个philadelphia染色体阳性细胞株K562中检测到了白血病特异的MRNA的转录子。因此没必要分离polyA+RNA,RNA/PCR法有足够的灵敏度来满足绝大多数实验条件的需要。 7 H+ F& _* S6 W( a8 p: [, @- d, { 将PCR缓冲液同时用于反转录酶反应和PCR反应,可简化实验步骤。我们发现整个反应过程皆用PCR缓冲液的结果相当于或优于先用反转录缓冲液合成CDNA,然后PCR缓冲液进行PCR扩增循环。当然,值得注意的是PCR缓冲液并不最适合第一条DNA链的合成。我们对不同的缓冲液用于大片段DNA 合成是否成功还没有进行过严格的研究。

基因的表达专题练习

基因的表达练习 1 ?某研究小组在我国首次发现了一种罕见的疾病一一静脉血管畸形(VMCM),研究发现该病的发生与体内一种酶 的分泌相关,如果相关基因异常,就会促使这种酶指导合成的蛋白质等异常堆积,最终导致发病。下列说法正确的是() A. 核糖体是该酶的加工场所 B.基因突变是静脉血管畸形发病的直接原因 C.上述事例说明基因可通过控制蛋白质的结构来直接控制生物的性状 D.mRNA是翻译过程的模板 2 ?如图甲、乙所示为真核细胞内两种物质的合成过程,二者的不同之处有() ①与催化反应的酶的种类②反应进行的场所③碱基互补配对的具体方式④所需能量的提供方式 A. ①③ B.②④ C.③④ D.①② 3 .下列有关基因对性状的控制的说法不正确的是() A. 基因能通过控制酶的合成来控制生物体的性状 B. 性状受基因的控制,基因发生突变,其所控制的性状也必定改变 C. 噬菌体的蛋白质是由噬菌体的DNA控制,利用细菌的原料和核糖体合成的 D. 基因控制蛋白质的合成,符合中心法则,但与孟德尔的遗传规律无关 4 .《科学》杂志称,水果长毛的原因是一种灰霉菌将一些小分子RNA送入植物细胞,这些小分子RNA能够与某种 宿主蛋白结合,让有关基因“沉默”,从而使水果的免疫结构失效,据此分析正确的是 A.灰霉菌和植物都具有细胞壁和叶绿体 B.小分子RNA是灰霉菌的遗传物质 C. 小分子RNA抑制了水果中与免疫有关的基因的表达 D. 小分子RNA通过碱基互补配对与宿主蛋白结合

5 .关于真核细胞的核 DNA分子的复制与转录的描述,错误的是 A.参与催化反应的酶的种类不同 B.反应进行的场所相同 C.所需能量的提供方式相同 D.碱基互补配对的具体方式相同 6 ?下列是某同学关于真核生物基因的叙述: ①携带遗传信息②能转运氨基酸③能与核糖体结合④能转录产生RNA⑤每三个相邻的碱基组成一个反密码子⑥ 可能发生碱基对的增添、缺失或替换,其中正确的是 A.①③⑤ B.①④⑥ C.②③⑥ D.②④⑤ A .图中①②③依次是核糖体、tRNA、mRNA B .丙氨酸的密码子是 GCU C .若图中④含60个组成单位,则③中至少含 180个密码子 D .该图表示的是基因控制蛋白质合成过程中的翻译过程 8 .下列有关蛋白质合成的叙述中,正确的是()。 A.—种氨基酸必定有一种密码子对应 B.mRNA可由细胞质进入细胞核 C.都在内质网上的核糖体中合成 D.mRNA上的密码子一定决定某种氨基酸 9 .已知a、b、c、d是某细菌DNA片段上的4个基因,下图中 W表示野生型,①、②、③分别表示三种缺失 不同基因的突变体。若分别检测野生型和各种突变体中某种酶的活性,发现仅在野生型和突变体①中该酶有活性, 则编码该酶的基因是()

细胞RNA的提取及鉴定、RT-PCR检测p53基因的表达

实验报告 实验题目:细胞RNA的提取及鉴定、RT-PCR检测p53基因的表达 报告人:张铨合作者:殷悦涵实验日期:2016.4.26 一、实验原理 1. 细胞RNA的提取及鉴定 细胞内RNA通常与蛋白质结合,以核蛋白(RNP)的形式存在。分离、制备RNA时首先须破碎细胞,使RNP释放到溶液中并与蛋白质分离,然后将RNA同其他的细胞成分分离开并保证RNA的完整性。Trizol法分离提取的RNA产率高、纯度好且不易降解,它是一种总RNA抽提试剂,可以直接从细胞或组织中提取总RNA。由于RNase能迅速降解RNA,所以需创造一个无RNase的环境,在各个环节避免它的污染。评价RNA质量的标准是RNA的均一性和完整性,采用紫外分光光度法测定RNA的浓度和纯度,纯RNA的A260/280=2.0,实验室条件下一般在 1.7- 2.0之间,低于该值说明有蛋白污染,需要进一步抽提。 2. RT-PCR检测p53基因的表达 PCR是一种体外大量扩增特异DNA片段的分子生物学技术,利用已知序列作为引物,将两引物之间的特定DNA片段进行复制,经过多次循环是模板上特定DNA拷贝数呈指数级增长。基本过程为变性、退火、延伸三个步骤循环往复进行,每一轮过后特定的DNA片段的分子数增加一倍。 RT-PCR将mRNA反转录合成cDNA后再经PCR进行大量扩增,实质上是对mRNA 的扩增,常利用此技术克隆cDNA或分析某一特异基因在组织细胞中的表达情况。本实验先以Oligo引物来反转录合成细胞cDNA模板,然后采用p53特异性引物进行PCR扩增,最后通过琼脂糖凝胶电泳分析p53在两种肺癌细胞(A549和H1299)中的表达水平。 二、实验材料及设备 材料:肺癌细胞A549(野生型)和H1299(p53缺失型)、p53引物、GAPDH 引物 试剂:Trizol试剂、氯仿、异丙醇、无RNase水、乙醇、、Promega RT-PCR 试剂盒、2*TaqPCR mix 、DNA染料:GoldView、5*TBE、6*上样缓冲液、DNA分子量标准、琼脂糖 耗材:Ep管、吸头、一次性手套、口罩 设备:5415R型冷冻离心机、NanoDrop2000超微量分光光度计、高压消毒锅、恒温干燥箱、制冰机、可调式取液器、PCR仪、电泳仪、电泳槽、紫外检测器、凝胶成像系统、冰箱 三、实验步骤 1. 细胞RNA的提取及鉴定 (一)RNA提取 取1*106个细胞与1.5mlEp管→加0.2ml氯仿摇匀→4℃,12000rpm离心

基因的表达测试题

基因的本质、基因的表达测试题 一、选择题(共30题,每题2分,共60分) 1.除病毒外,其他所有生物的遗传物质是 A.脱氧核糖核酸(DNA)B.核糖核酸(RNA) C.脱氧核糖核酸和核糖核酸D.脱氧核糖核酸或核糖核酸 2.噬菌体、酵母菌和烟草花叶病毒中,碱基种类依次是 A.4、5、4 B.4、4、4 C.4、8、4 D.5、5、5 3.DNA指纹技术是法医物证学上进行个人认定的主要方法,人的DNA“指纹”是指DNA的 A.双螺旋结构B.脱氧核糖的排列顺序 C.碱基配对原则D.脱氧核苷酸的排列顺序 4.右图表示某生物的基因型,其中的等位基因是 A.a与b B.a与B C.B与b D.C与C或D与D 5.遗传密码和遗传信息分别存在于 A.DNA分子和信使RNA分子上B.信使RNA分子和DNA分子上C.信使RNA分子和转运RNA分D.DNA分子和转运RNA分子上6.关于DNA分子结构的叙述不正确的是 A.每个DNA分子一般都含有四种脱氧核苷酸 B.每个DNA分子中的碱基、磷酸、脱氧核苷酸、脱氧核糖的数目是相等的 C.每个脱氧核糖上均连着一个磷酸和一个碱基 D.双链DNA分子中的一段,如果有40个腺嘌呤,就一定同时含有40个胸腺嘧啶 7.一段信使RNA中,A+U占25%,对应的双链DNA中A+T占碱基总数的 A.% B.25% C.40% D.50% 8.某DNA分子片段含900个碱基,问由该片断所控制合成的多肽链中,最多有多少种氨基酸 A.150 B.450 C.600 D.20 9.一条双链DNA分子,A和T占全部碱基的38%,其中一条链的碱基中,A 占该链的24%,C占该链的26%,那么互补链中的A和C占该链全部碱基的百分比是 A.12%和26% B.14%和36% C.26%和24% D.24%和30% 10.遗传物质的主要载体是 A.DNA B.染色体C.叶绿体D.线粒体

Tp基因检测

T p53基因检测 什么是Tp53基因? Tp53基因是一种抑癌基因,定位于人类第17号染色体的短臂上,编码和表达Tp53蛋白。Tp53基因是细胞生长周期中的调节因子,与细胞周期的调控、DNA修复、细胞分化、细胞凋亡等重要的生物学功能相关联。 Tp53基因分为野生型(正常的基因)和突变型两种,其产物也有野生型和突变型。野生型Tp53蛋白可抑制带有DNA损伤和染色体畸变的细胞发生分裂,从而阻止畸变传递给子细胞,具有广谱的肿瘤抑制作用。相反Tp53基因的突变(缺失)则与肿瘤的发生、发展有密切关系。因此Tp53被誉为基因卫士。 Tp53检测意义 1、应用于肿瘤的超早期预警检测 检测范围包括:肝癌、乳腺癌、膀胱癌、胃癌、结肠癌、前列腺癌、软组织肉瘤、卵巢癌、脑瘤、淋巴细胞肿瘤、食道癌、肺癌、成骨肉瘤等人类多发肿瘤与p53基因突变有关。 2、应用于肿瘤手术后复发监控 肿瘤具有易转移和复发的特点,及早发现复发或转移,可获得二次治疗机会,延长生命。肿瘤DNA片段存在于血液循环DNA中,被称细胞游离DNA(cell-freeDNA,cfDNA)。P53扫描肿瘤组织中存在的突变,p53定期检测cfDNA突变,监控术后复发和评估疗效。 3、放、化疗的疗效评估 P53发现肿瘤特有突变,通过p53定量检测放化疗前后血浆中基因突变含量变化,间接反映肿瘤治疗的效果。 基因小知识:肿瘤的发生和演变过程 肿瘤是基因突变累积的结果。肿瘤的发生和演变过程:从单个细胞开始到形成米粒小的肿瘤,大约需要8—10年,此阶段人体几乎没有任何症状。从米粒大小发展成杏仁大小,只需一年左右时间,如果没有及时发现,发展到晚期只需要3—8个月的时间。通过相关突变检测发现肿瘤的早期踪迹,进行合理干预,能够逆转肿瘤的形成。 肿瘤从单细胞基因突变到晚期发展历程图 Tp53检测适用人群 由于Tp53基因突变主要发生在肿瘤细胞中,因此对于Tp53基因突变的检测主要适用于与癌症相关的人群的检测,主要包括以下几种: (1)癌症高危人群 主要包括长期生活在大城市,工作压力大的职业;有癌症家族史或有遗传易感性的人群;长期接触有害化学物质或放射线的人群;有慢性炎症或癌前病变人群以及长期吸烟、饮酒者,过多摄入高脂肪失误导致肥胖者。 (2)疑似癌症患者 主要指身体里发现可疑肿块或病理检查有不典型增生、癌前病变人群。 (3)治疗中后期的癌症患者 癌症患者治疗中或治疗后,跟踪监测血液中基因变量的变化,评估疗效,帮助选择治疗方案;曾患癌症,治疗后可定期做Tp53基因检测,从分子层面监控是否再次出现原有的基因突变,能够较临床检查更早发现复发迹象,评估预后。

2020新教材生物人教版必修二检测第4章 第2节 基因表达与性状的关系 Word版含解析

第2节基因表达与性状的关系 一、选择题 知识点一基因表达产物与性状的关系 1.囊性纤维病是北美白种人中常见的一种疾病,研究表明,在70%的患者中,-的CFTR蛋白的第Cl508位的氨发病原因是CFTR基因缺失3个碱基,导致运输-不能有效运出肺等器官的组织细胞。下列理解错误的而直接原因是基酸缺失,Cl是() A.从个体水平看,病人的性状已经发生改变 B.从细胞水平看,病人肺组织细胞膜的功能已发生改变 C.从分子水平看,病人的基因的结构没有发生改变 D.此病可以说明基因通过控制蛋白质的结构来直接控制生物体的性状 答案C 解析该病根本原因是CFTR基因缺失3个碱基,基因结构发生改变。囊性纤维病发病的直接原因是CFTR蛋白发生改变,所以此病可以说明基因是通过控制蛋白质的结构直接影响了生物体的性状。 2.酪氨酸酶存在于正常人体的皮肤、毛囊等处的细胞中,它能使酪氨酸转变为黑色素,下列相关叙述正确的是() A.人体的神经细胞中含有控制酪氨酸酶合成的基因 B.白化病实例说明基因通过控制蛋白质的结构直接控制生物体的性状 C.酪氨酸是基因表达的产物 D.老年人头发变白是由控制酪氨酸酶合成的基因异常引起的 答案A 解析人体所有细胞都是由同一个受精卵发育而来的,都含有该生物全部的基因,因此人体的神经细胞中含有控制酪氨酸酶合成的基因,A正确;白化症状是由编码酪氨酸酶的基因异常引起的,这一实例说明基因通过控制酶的合成来影响细胞代谢,进而间接控制生物体的性状,B错误;酪氨酸是一种氨基酸,不是基因表达的产物,基因表达的产物是蛋白质,C错误;老年人头发变白的原因是酪氨酸

酶的活性降低,黑色素合成减少,D错误。 知识点二基因的选择性表达与细胞分化 3.人的胰岛B细胞能产生胰岛素,但不能产生血红蛋白,据此推测胰岛细胞中() .只有胰岛素基因A. B.比人受精卵的基因数少 C.既有胰岛素基因,也有血红蛋白基因和其他基因,但只存在胰岛素mRNA D.有胰岛素基因和其他基因,但没有血红蛋白基因 答案C 解析胰岛B细胞由受精卵经分裂分化产生,故胰岛B细胞中既有胰岛素基因也有血红蛋白基因和其他基因,胰岛B细胞能产生胰岛素,不产生血红蛋白是由于基因的选择性表达,故只存在胰岛素mRNA。 4.下列关于细胞分化的叙述,不正确的是() A.细胞分化的本质是基因选择性表达 B.基因选择性表达与基因表达的调控有关 C.生物多种性状的形成,都是以细胞分化为基础的 D.由于细胞分化,肌细胞中已经不存在血红蛋白基因了 答案D 解析肌细胞由受精卵分裂分化而来,分化不会导致基因丢失,只是基因进行选择性表达,D错误。 5.有人把分化细胞中表达的基因形象地分为“管家基因”和“奢侈基因”。“管家基因”在所有细胞中都处于活动状态,是维持细胞基本生命活动所必需的;而“奢侈基因”只在特定组织细胞中才处于活动状态。下列属于“管家基因”指导合成的产物是() A.ATP水解酶B.血红蛋白 D.抗体C.胰岛素 A 答案 正确;血红水解酶基因在所有细胞中都表达,属于管家基因,A解析ATP细胞中特异性表达,抗体在浆B蛋白基因只在红细胞中表达,胰岛素基因在胰岛、细胞中表达,都属于奢侈基因表达的产物,B、CD错误。知识点三表观遗传不同个体出现了不同体F(aa)杂交,产生的(Aa)(AA)6.黄色小鼠与黑色小鼠 1(CpG)基因上二核苷酸基因的碱基序列相同,色。研究表明,不同体色的小鼠A 但A复制。有关胞嘧啶有不同程度的甲基化(如图现象出现,甲基化不影响基因DNA))

第四章 基因的表达试题

第四章基因的表达试题 一、单项选择题 1.转运RNA的功能是( ) A.决定信使RNA的碱基排列顺序 B.完全取代DNA C.合成特定的氨基酸 D.运输氨基酸,识别信使RNA的遗传密码 2.下列哪一项不属于遗传信息转录所必需的条件() A.解旋酶B.ATP C.模板链D.氨基酸 3.下图为蛋白质合成示意图(图中甲表示甲硫氨酸,丙表示丙氨酸),下列说法正确的是 A.若③上的某一个碱基发生了改变,一定会引起生物性状的改变 B.组成②的单体是核糖核苷酸,②在生物体内共有61种 C.该图表示翻译过程,丙氨酸的密码子是CGA D.若合成蛋白质的基因中有3000个碱基对,则合成的蛋白质中最多有氨基酸500个 4.在生物体内性状的表达一般遵循DNA→RNA→蛋白质的表达原则。下面是与此有关的说法,不正确的是 A.在细胞的一生中,DNA一般是不变的,RNA和蛋白质分子是变化的 B.在人体内DNA→RNA主要是在细胞核中完成的,RNA→蛋白质是在细胞质中完成的 C.在同一个体不同的体细胞中,DNA相同,RNA和蛋白质不一定相同 D.在细胞的一生中,DNA、RNA和蛋白质的种类与数量是不变的 5.据研究发现,红霉素等抗生素能抑制细菌生长,原因是有的抗生素能干扰细菌核糖体的形成,有的能阻止mRNA 与tRNA的结合,以上事实不能说明 A.有的抗生素能抑制蛋白质的合成 B.有的抗生素能阻止翻译过程 C.有的抗生素能阻止转录过程 D.有的抗生素能抑制基因的表达

6.关于遗传密码或遗传密码子的叙述正确的是() A.遗传密码是DNA上能够决定一个氨基酸的3个相邻的碱基 B.绝大多数生物通用一套遗传密码子 C.因为有20种氨基酸,所以遗传密码子也一定有20种 D.遗传密码的形成主要是在核糖体上 7.人的促黑色素细胞激素是一个22肽化合物,它的合成过程中需要的转运RNA最多有多少种() A.60种 B.22种 C.4种 D.64种 8.一个转运RNA的一端三个碱基是CGA,此转运RNA转运的氨基酸是() A.精氨酸(密码子CGA) B.丙氨酸(密码子GCU) C.酪氨酸(密码子UAU) D.谷氨酸(密码子GAG) 9.在蛋白质合成过程中,碱基互补配对的原则体现在() A.DNA的复制过程中 B.转录过程中 C.翻译过程中 D.以上各种过程中 10.决定信使RNA中核苷酸顺序的是() A.转运RNA中核苷酸的排列顺序 B.蛋白质分子中氨基酸的排列顺序 C.核糖体RNA中的核苷酸排列顺序 D.DNA分子中脱氧核苷酸的排列顺序 11.遗传信息和“密码子”分别位于 A、核DNA 和mRNA上 B、DNA和tRNA上 C、mRNA和tRNA上 D、染色体和核基因上 12.已知某转运RNA一端的三个碱基是GAU,它所转运的是亮氨酸,那么决定此氨基酸的密码子是由下列哪个碱基 序列转录而来的 ( ) A.GAT B.GAA C.CUA D.CTA

高中生物 必修二 基因的表达测试题及答案

基因的表达 一、选择题 1.DNA分子的复制、转录和翻译分别形成() A.DNA、RNA、蛋白质B.DNA、RNA、氨基酸 C.DNA、RNA、核糖体D.核苷酸、RNA、蛋白质 2.对于中心法则,经科学家深入研究后,发现生物中还存在着逆转录现象,它是指遗传信息的传递从()A.蛋白质→RNA B.RNA→DNA C.DNA→RNA D.DNA→DNA 3.遗传密码是指() A.DNA分子决定蛋白质合成的有意链上的碱基排列顺序 B.转运RNA分子一端决定一个氨基酸的三个碱基排列顺序 C.信使RNA上的碱基排列顺序 D.蛋白质分子的氨基酸排列顺序 4.决定信使RNA中核苷酸顺序的是() A.转运RNA中核苷酸的排列顺序B.蛋白质分子中氨基酸的排列顺序 C.核糖体RNA中的核苷酸排列顺序D.DNA分子中脱氧核苷酸的排列顺序 5.在翻译过程中,不属于信使RNA与转运RNA的碱基配对的一组是() A.U-A B.A-U C.G-C D.A-T 6.在蛋白质合成过程中,碱基互补配对的原则体现在() A.DNA的复制过程中B.转录过程中C.翻译过程中D.以上各种过程中 7.一个转运RNA的一端三个碱基是CGA,此转运RNA转运的氨基酸是() A.精氨酸(密码子CGA)B.丙氨酸(密码子GCU) C.酪氨酸(密码子UAU)D.谷氨酸(密码子GAG) 8.下列对DNA的叙述正确的是() ①在人白细胞的DNA上含有人的全部遗传信息②DNA是一切生物的遗传物质 ③同种个体间的DNA是完全相同的④一个DNA分子可以控制许多性状 ⑤翻译是以DNA的一条链为模板 A.①②③B.③④⑤C.①④D.②③ 9.人的促黑色素细胞激素是一个22肽化合物,它的合成过程中需要的转运RNA最多有多少种()A.60种B.22种C.4种D.64种 10.在细胞核内从DNA中的……A-T―G―C ……转录成RNA中的……U―A―C―G ……这一具体

P53基因的功能

P53基因的功能 1 阻滞细胞周期 在细胞周期中,P53的调节功能主要体现在G1和G2/M期校正点的监测,与转录激活作用密切相关。P53下游基因P21编码蛋白是一个依赖Cyclin(细胞周期蛋白)的蛋白激酶抑制剂,一方面P21可与一系列Cyclin-cdk (细胞周期蛋白依赖性激酶)复合物结合,抑制相应的蛋白激酶活性,导致低磷酸化Rb 蛋白(视网膜母细胞瘤蛋白)堆积,后者使E2F转录因子(参与细胞周期调控的细胞因子)不能活化,引起G1期阻滞;另外P53的另外3个下游基因Cyclin B1,CADD45 和14-3-3σ则参与G2/M期阻滞。 2 促进细胞调亡 Bcl-2(调控线粒体外膜通透性的基因家族)可阻止凋亡形成因子如细胞色素C等从线粒体释放出来,具有抗凋亡作用,而Bax (促凋亡基因)可与线粒体上的电压依赖性离子通道相互作用,介导细胞色素c的释放,具有凋亡作用,p53可以上调Bax的表达水平,以及下调Bcl-2的表达共同完成促进细胞凋亡作用。P53还可通过死亡信号受体蛋白途径诱导凋亡,T NF受体(在真核细胞表达具有生物活性的可溶性肿瘤坏死因子)和Fas蛋白(一种细胞膜抗原,主要功能是介导细胞凋亡)。 3 维持基因组稳定

DNA受损后,由于错配修复的累积,导致基因组不稳定,遗传信息发生改变。P53可参与DNA的修复过程,其DNA结合结构域本身具有核酸内切酶的活性,可切除错配核苷酸,结合并调节核苷酸内切修复因子XPB和XPD的活性,影响其DNA重组和修复功能。 4 抑制肿瘤血管生成 肿瘤生长到一定程度后,可以通过自分泌途径形成促血管生成因子,刺激营养血管在瘤体实质内增生。P53蛋白能刺激抑制血管生成基因Smad4等表达,抑制肿瘤血管形成。在肿瘤进展阶段,P53基因突变导致新生血管生成,有利于肿瘤的快速生长,这常常是肿瘤进入晚期的表现。ASDDA p53既可阻滞细胞周期,也可诱导细胞凋亡。两种作用方式都是为了维护基因组的稳定,但二者的性质截然不同。前者是为DNA的修复或某种应激状态的改善创造时机。即便不能完全修复DNA的损伤,只要还能容忍,细胞依旧可以存活,但可能会留下基因组不稳定的后患;后者则是从根本上去除造成基因组不稳定的因素,以绝后患。显然,p53的这两种作用方式不能同时并存,二者之间有选择。 究竟p53在被激活后选择何种作用方式,要由活性p53的数量与应激细胞的损伤程度两方面来决定。当通过暂时转染方式让p53在肿瘤细胞内高水平表达时,即可诱导凋亡;而采用温度敏感突变或可诱导系统让p53低水平表达时,则只能导致细胞周期阻滞。但从根本上讲,应激细胞的DNA损伤程度等因素才是决定p53选择何种

基因的表达基础练习题(附答案)

第4章基因的表达 一、选择题 1.DNA分子的复制、转录和翻译分别形成() A.DNA、RNA、蛋白质 B.DNA、RNA、氨基酸 C.DNA、RNA、核糖体 D.核苷酸、RNA、蛋白质 2.对于中心法则,经科学家深入研究后,发现生物中还存在着逆转录现象,它是指遗传信息的传递从() A.蛋白质→RNA B.RNA→DNA C.DNA→RNA D.DNA→DNA 3.遗传密码是指() A.DNA分子决定蛋白质合成的有意链上的碱基排列顺序 B.转运RNA分子一端决定一个氨基酸的三个碱基排列顺序 C.信使RNA上的碱基排列顺序 D.蛋白质分子的氨基酸排列顺序 4.决定信使RNA中核苷酸顺序的是() A.转运RNA中核苷酸的排列顺序 B.蛋白质分子中氨基酸的排列顺序C.核糖体RNA中的核苷酸排列顺序 D.DNA分子中脱氧核苷酸的排列顺序5.在翻译过程中,不属于信使RNA与转运RNA的碱基配对的一组是() A.U-A B.A-U C.G-C D.A-T 6.在蛋白质合成过程中,碱基互补配对的原则体现在() A.DNA的复制过程中 B.转录过程中 C.翻译过程中 D.以上各种过程中7.一个转运RNA的一端三个碱基是CGA,此转运RNA转运的氨基酸是() A.精氨酸(密码子CGA) B.丙氨酸(密码子GCU) C.酪氨酸(密码子UAU) D.谷氨酸(密码子GAG) 8.下列对DNA的叙述正确的是() ①在人白细胞的DNA上含有人的全部遗传信息②DNA是一切生物的遗传物质 ③同种个体间的DNA是完全相同的④一个DNA分子可以控制许多性状 ⑤翻译是以DNA的一条链为模板 A.①②③ B.③④⑤ C.①④ D.②③ 9.信使RNA在细胞核中合成,它从细胞核中出来与核糖体结合的过程中,要通过几层选择透过性膜()

RT PCR 方法检测细胞中p53基因的特异表达预习报告

RT PCR 方法检测细胞中p53基因的特异表达预习报告 1310301315 张铨 一、RT PCR技术 1.基本原理 聚合酶链反应(PCR)技术是利用DNA聚合酶在体外条件F.催化一对特异引物之间特异DNA片段合成的基因扩增技术。PCR包括三个基本过程: (1)变性,在高温度条件下使双链模板DNA变性、解链,成为两条单链DNA; (2)退火,在较低温度时使加入的引物单链DNA模板特异性结合; (3)延伸,在适当的温度下,Taq DNA聚合酶从结合到DNA模板上的引物3’-OH 端开始.根据碱基互补配对原则,按照DNA模板核苷酸序列,进行DNA链的延伸,合成与模板互补的新的DNA分子,,这三个过程组成一个循环周期;每个周期合成的产物又可作为下一个周期的模板,如此循环往复,经过若干次循环后,目的DNA片段的拷贝数大最增加。 RT-PCR方法由两部分组成: (1)cDNA的合成:以mRNA为模板,在逆转录酶的作用下以Oligo(dT)16或特异的下游引物合成与mRNA互补的cDNA片段 (2)PCR扩增:以已合成的cDNA为模板,使用上、下游引物在耐热的DNA聚合酶作用下进行标准的PCR扩增。1 2.实验方法 【实验材料】 1.试剂 (1)β-actin引物 上游引物:5 7一ATG CGA ATT CCC AAC CGT GAA AAG ATG A-3’ 下游引物:5 7一ATG CGG ATC CGA AGG AAG GCT GGA AAA一3’ (2)Promega RT-PCR试剂盒 (3)酚/氯仿:1:1混合 (4)醋酸钠:3mol/L,pH5.2 (5)无水乙醇 2.仪器 基因扩增仪(PCR仪),5415R型离心机,电泳仪,电泳槽,紫外检测仪,制冰机,低温冰箱,可调式取液器,解剖用具。 3.耗材 0.2ml、1.5ml Ep管,20μl和200μl吸头若干个。 【实验步骤】

第四章 基因的表达 测试题(附答案)

第4章《基因的表达》综合测试题 一.单选择题 1.碱基互补配对发生在() A.DNA复制和转录B.转录和翻译 C.复制和翻译D.复制、转录和翻译 2.信使RNA在翻译过程中,具有模板作用的根本原因是信使RNA() A、能与核糖特异结合 B、能从细胞核转移到细胞质 C、有特定的核苷酸结合而成链状 D、转录了遗传信息 3.如果细胞甲比细胞乙RNA的含量多,可能的原因有() A、甲合成的蛋白质比乙多 B、乙合成的蛋白质比甲多 C、甲含的染色体比乙多 D、甲含的DNA比乙多 4.在同一草场,牛和羊虽吃同样的草料,但牛肉和羊肉的味道却不同,其根本原因是() A、牛羊肉所含物质成分不同 B、牛羊的染色体数目不同 C、不同的DNA控制合成不同的蛋白质 D、牛和羊的祖先不同 5.有n个碱基组成的基因,控制合成有一条多肽链组成的蛋白质,氨基酸的平均相对分子质量 为a则该蛋白质的相对分子质量最大为() A、na/b B、na/3-18(n/3-1) C、na-18(n-1) D、na/6-18(n/6-1) 6.某一DNA分子上有一个基因,经转录翻译后产生两条共含2000个肽键的多肽链,则该基因所 含的碱基数是() A、 12012 B、12000 C、12006 D、6006 7.某基因中含有1200个碱基对,则由它控制合成的含有两条肽链的蛋白质分子中最多含有肽健的个数是 ( ) A.198个 B.398个 C.400个 D.798个 8.已知一段mRNA有30个碱基,其中A和C共有12个,那么转录成mRNA的一段DNA分子中G 和T的数目以及该mRNA经翻译而合成肽链时,应脱去的水分子数目分别是() A、12和30 B、30和90 C、18和0 D、30和9 9.某DNA片段所转录的mRNA中尿嘧啶占28%,腺嘌呤占18%,则这个DNA片段中胸腺嘧啶和鸟嘌呤分别占() A.46%、54% B.23%、27% C.27%、23% D.46%、27% 10、某一个DNA分子中含有30%的G+C,则由它转录成的RNA中G+C应为() A、60% B、30% C、20% D、15% 11.某有遗传效应的DNA片断上有碱基1800个,则由它控制合成的蛋白质最多有多少种氨基酸( ) A.20 B.150 C.300 D.900 12.人的胰岛素基因和得以表达的胰岛素基因依次位于() A、全部细胞,胰岛细胞中 B、胰岛细胞,全部细胞中 C、均位于胰岛细胞中 D、全部细胞,肾小管细胞 13. 我国学者童第周等人以蝾螈内脏中提取DNA注入金鱼的受精卵中,结果约有1﹪的小金鱼的最后长有一根有尾两栖类的棒状平衡器,这个实验证明DNA() A、分子结构相对稳定 B、能够自我复制 C、能够控制蛋白质的合成 D、能产生可遗传的变异 14.要研究基因控制蛋白质的合成过程,最好选择下列哪一项为实验材料() A.成熟的红细胞 B.成熟的白细胞 C.卵细胞 D.受精卵 15.已知某转运RNA一端的三个碱基是GAU,它所转运的是亮氨酸,那么决定此氨基酸的密码子是由下列哪个碱基序列转录而来的 ( ) A.GAT B.GAA C.CUA D.CTA 16.科学家通过对前列腺癌细胞系的研究发现,绿茶中的多酚可减少BCL-XL蛋白,而这种蛋白有抑制癌细胞凋亡的作用,这表明绿茶具有抗癌作用的根本原因是由于绿茶细胞中具有() A、多酚 B、多酚酶基因 C、 BCL-XL蛋白 D、BCL-XL蛋白酶 17、蒜黄和韭黄是在缺乏光照的环境下培育的蔬菜,对形成这种现象的最好解释是() A、环境因素限制了基因的表达 B、两种均为基因突变 C、叶子中缺乏形成叶绿素的基因 D、黑暗中植物不进行光合作用 18、下图是两种化学合成的mRNA分子和两种以 它们为模板合成的多肽。两种多肽中存在的氨基酸 种数最可能为() mRNA AGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAG 多肽P AUCGAUCGAUCG AUCGAUCGAUCG 多肽Q 19.一个转运RNA一端的三个碱基是CGA,这个RNA转运的 氨基酸是() A.酪氨酸(UAC) B.谷氨酸(GAG) C.精氨酸(CGA) D.丙氨酸(GCU) 20.反密码子是指() A.DNA一端的3个碱基B.信使RNA分子一端的3个碱基 C.转运RNA分子一端的3个碱基 D.核糖体RNA分子一端的3个碱基 21.下列哪项是DNA复制和遗传信息的转录过程中完全相同的地方() A.解旋酶解旋B.碱基配对的原则

RT PCR方法检测细胞中p53基因的特异表达

RT-PCR方法检测细胞中p53基因的特异表达 一、实验原理 细胞内RNA通常与蛋白质结核,防止RNA酶讲解,以核蛋白形式存在。分离制备RNA 是必须先破碎细胞,使得核蛋白释放到溶液中,并进一步与蛋白质分离,然后再讲RNA 与其他成分分离,并保证RNA的完整性。 1、Trizol法 该法分离提取RNA产率高、纯度好且不易降解,是目前实验室中最常用的提取RNA 的方法。Trizol是一种总RNS抽提试剂,含有苯酚(蛋白质变性,膜蛋白变性、 膜磷脂溶解、RNA酶变性保护RNA)、异硫氰酸胍(蛋白质变性、RNS酶抑制剂)等 物质,可以迅速溶解细胞同时保护RNA完整性。之后再加入氯仿抽提,离心后,RNA 位于水相,用异丙醇可沉淀回收水相中的RNA。 2、RNA质量标准 RNA的均一性以及完整性,均一性在于有效去除其他成分,完整性在于最大限度减 少RNA酶对RNA的讲解。通常采用紫外分光光度法测定RNA的浓度和纯度: A260/A280=1.7~2.0,低于该值表明有蛋白污染。PCR 3、PCR 聚合酶链式反应是一种体外大量扩增特异DNA片段的分子生物学技术。利用两段已 知序列度寡核苷酸作为引物,将两引物间特定的DNA片段进行复制,经过多次循环,使得模板上特定DNA拷贝数呈指数级增长。其基本过程分为变性、退火、延伸三个 步骤。变性是高温加热导致模板DNA双链间的解离,退火是降低温度使得模板DNA 与高浓度引物间发生互补结合,延伸是在耐热DNA聚合酶参与下延伸引物。每次循 环可作为下一次循环的模板,因此每经过一次循环特定DNA的分子数目扩增一倍。 4、RT-PCR 反转录聚合酶链式反应是将mRNA反转录合成cDNA后再经PCR进行大量扩增。 RT-PCR实质上是对mRNA的扩增,我们常用此法克隆cDNA或分析某一特异基因在 组织细胞中的表达情况。成熟的mRNA3’端有Poly尾可与Oligo特异性结合,然 后在反转录酶催化下以mRNA为模板合成一条互补DNA链称为cDNA。 本实验先用Oligo引物反转录合成细胞cDNA模板,再用p53特异引物进行PCR扩 增,最后通过琼脂糖凝胶电泳分析p53基因在两种肺癌细胞的表达水平。

基因复习题

第八章 外源DNA片段与载体DNA的重组主要有哪几种方法?各自的优缺点? (一)黏性末端连接法:. 1同一限制酶切位点连接:单酶切 优点: 黏性末端连接可抑制载体和目的DNA分子的自连,因而可大大提高连接的效率。更重要是不同限制性酶切位点的黏性末端连接可以控制目的DNA和载体DNA的连接方向。 缺点: 载体易自身环化;不易定向克隆;产生串联重组体;难以插入特定的基因;大片段DAN 的重组率低, 2.不同一限制酶切位点连接:双酶切 优点: ①不必将原有的内切酶失活,可以直接进行重组连接; ②有原有限制性内切酶的重组,载体自连就不会发生,不必用碱性磷酸酶进行处理,从而得到高效连接。 缺点: 同尾酶的粘性末端互相结合后形成的新位点一般不能再被原来的酶识别 (二)平头末端连接法:常用①同聚物加尾连接②人工接头连接等 缺点:1效率很低2平头末端连接常常破坏原有的识别性序列3双向插入,由于平头末端没有粘性末端的碱基互补限制,只要是平头末端均能连接,造成插入方向良种可性。4造成多拷贝外源DNA片段插入载体可能性。 优点::1连上后就能用。2能把任何片段连接起来 第九章 1转化子:接纳载体或重组分子的转化细胞。 2重组子:含有重组DNA分子的转化细胞。 3酶联免疫吸附测定(ELISA原理: 一抗(primary antibody): 与目标分子的特异结合。 二抗(secondary antibody):与一抗的特异性结合。 酶连(enzyme-linke):二抗上携带一种酶能催化一种反应将无色的底物转变为有色的物质(或发光),再通过比色测定有色物质的含量(或光强度),从而推测目标分子的含量。 酶联免疫吸附测定(ELISA)步骤: ①抗体制备(普通抗体、酶标记抗体[一抗、二抗]) ②抗体或抗原的包被(固定在固相载体上) ③免疫反应 ④特异性表达产物的检测 具体步骤: 1)固定样品:将待测样品加入96孔微量滴定板(microtiter plate)的孔中,干燥后就被固定在孔底。 2)一抗结合:加入一抗,反应后冲洗掉未结合的抗体。 3)二抗结合:加入二抗,与一抗结合后再将未结合的二抗冲洗掉。二抗只识别一抗。二抗上联着一种酶(碱性磷酸酶、过氧化物酶、脲酶等)。 4)显色反应:加入无色的底物,被二抗上所带的酶催化反应转变成有色物质(或发光)。5)比色:在特殊的分光光度仪(酶标仪)上比色,打印出结果。

P53基因概述

P53基因概述及应用实例 姓名;赵飞 1.P53基因概述 1.1 P53基因的发现 1979年,在大家都在研究SV40病毒的癌蛋白时,好几个科研小组都无意中分别独立发现了P53蛋白。当时在伦敦癌症研究所(London Research Institute)工作的David Lane和Lionel Crawford发现,用感染了SV40病毒的动物血清与SV40大T抗原发生免疫沉淀反应时能共沉淀下来一个分子量约为53kDa的宿主细胞蛋白。另外三个科研小组也都在1979年同时发表文章报道了同样的结论,他们分别是法国的Pierre May科研小组、美国纽约的Robert Carroll科研小组和英国的Alan Smith科研小组。 1.2P53基因的命名 在这个基因在发现之初,每一个发现它的实验室分别给这种分子量为53 kDa的蛋白质取了各自的名字,并且使用这些名字发表了很多论文,这样就造成极大的混乱。它的真正命名是在1983年在英国牛津举办的第一届国际P53蛋白研讨会上,来自各国的代表专门就这个蛋白的命名进行了讨论。经过一番激烈争论之后,大家一致认为,P53这个名字最为合适,自此被保留下来一直沿用至今。其实P53这个名字根本就不是一个名字,只是因为这个蛋白在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳试验中表现出的分子量大约为53 kDa才因此而得名。后来大家才发现,这个表观分子量其实也只是一个大概的估计,因为该蛋白富含脯氨酸,所以在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳试验中的迁移率偏慢,表现出来的分子量要比它实际的分子量大。该蛋白的实际分子量只有43.7 kDa,而小鼠体内P53蛋白的分子量会更小。 1.3P53 基因的功能 P53基因是因编码一种分子质量为53 kDa 的蛋白质而得名,是一种抗癌基因。其表达产物为基因调节蛋白( P53 蛋白) ,当DNA 受到损伤时表达产物急剧增加,可抑制细胞周期进一步运转。一旦P53 基因发生突变,P53 蛋白失活,细胞分裂失去节制,发生癌变,人类癌症中约有一半是由于该基因发生突变失活。因此说这个基因具有两面性。 1.4 P53基因三十年的发展史 最初10年里,P53一直被视为能够诱发肿瘤产生的癌基因。1979年,英国癌症研究基金会、美国普林斯顿大学的研究者Lionel·Crawford,David·P.·Lane等人首次追踪到了P53基因的踪迹,不久以后,俄罗斯科学家Petet·Chumakov从小鼠体内克隆到了这个基因的完整版本。但此时P53基因并未受到重视,甚至在最初的几年中,一直被视为能够诱发肿瘤产生的癌基因。导致这样南辕北辙认识的症结在于科学家在研究时并未找对P53基因的正确版本。十年之后,美国约翰霍普金斯医学院的分子生物学Bert·Vogelstein最终找到了正确的P53基因,即野生型P53。不但如此,科学家的发现还为这一基因摘掉了癌基因的恶名:与此前认识恰恰相反的是,P53是一个在人体内发挥广泛作用的强有力的抑癌基因。 第二个10年里,科学家发现P53蛋白实际上是一种转录因子,可以胁迫诱导。基于P53真正功能的重新认识,科学家发现了一系列与肿瘤相关的基因。对这些基因的深入挖掘不但

基因的表达练习题

高中生物基因的表达练习题 一、选择题: 1.一条多肽链中有氨基酸1000个,则作为合成该多肽链模板的信使RNA 分子和用来转录RNA的DNA分子分别至少要有碱基(???? ) ? A.3000个和3000个?? B.1000个和2000个 ? C.2000个和4000个?? D.3000个和6000个 2.下面是关于基因、蛋白质、性状之间关系的叙述,其中不正确的是(???? ) ? A.基因可以决定性状 ? B.蛋白质的结构可以直接影响性状 ? C.基因控制性状是通过控制蛋白质合成来实现的 ? D.蛋白质的功能可以控制性状 3.下列哪一项不是基因的“遗传效应”(???? ) ? A.能控制一种生物性状的表现 ? B.能控制一种蛋白质的生物合成 ? C.能转录一种信使RNA ? D.在蛋白质合成中能决定一种氨基酸的位置 4.基因的功能之一,是传递遗传信息,下列哪一项与这一功能没有直接关系(???? ) ? A.DNA复制?? B.生殖 ? C.细胞分裂??D.蛋白质合成 5.经测定,某 RNA片段中有 30个碱基,其中 A+U为 12个,那么转录该RNA片段的 DNA片段上应含A+T的数量为(???? ) ? A.30 ???B.24??? C.20?? D.12 6.在一个DNA分子中,胞嘧啶与鸟嘌呤之和占全部碱基数目的46%,其中一条链中腺嘌呤与胞嘧啶分别占该链碱基总数的28%和22%,那么由它转录的RNA中腺嘌呤与胞嘧啶分别占碱基总数的(???? )

? A.22 %、8%????B.23%、27% ? C.26%、24%??? D.54%、6% 7.把控制兔子血红蛋白的信使RNA加入到大肠杆菌的提取液中,结果能合成兔子的血红蛋白,这说明(???? ) ? A.所有的生物共用一套遗传密码 B.蛋白质的合成过程很简单 C.兔血红蛋白的合成基因进入大肠杆菌 D.兔子的DNA可以指导大肠杆菌的蛋白质合成 8.20种氨基酸的平均相对分子质量为m,某蛋白质由51个氨基酸组成了n 条多肽链。该蛋白质的相对分子质量为(???? ) ? A.B. ? C.D. 9.某基因的一个片段是,在解旋时,a链发生了差错,C变成了G,该基因复制三次后,发生突变的基因占全部基因的(???? )? A.100%???? B.50%??? C.25%??? D.12.5% 10.下图为生物遗传信息在三种生物大分子之间的流动示意图。 (1)下列说法正确的是(???? ) ?A.l、2、4途径常见,其他从未发现 B 2、4、9途径常见,其他从未发现 C.2、3途径常见,7、9很少见 D.l、2、4常见,3、7少见,6已在实验室发现 (2)关于图中实线和虚线所表示的含义正确的是(???? ) ? A.实线表示遗传信息流的调节,虚线表示遗传信息流 ? B.实线表示遗传信息流;虚线表示遗传信息流的调节 ? C.实线表示蛋白质的合成,虚线表示逆转录

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