黄花倒水莲提取物促凝血作用及机制的研究
黄花倒水莲提取物促凝血作用及机制的研究
发表时间：2013-05-21T10:55:05.153Z 来源：《中外健康文摘》2013年第14期供稿作者：严金玲严文华李斌曾洁钟声杨人泽
[导读] 实验表明：黄花倒水莲提取物既能影响内源性凝血途径，又能作用于外源性凝血途径。
严金玲严文华（通讯作者）李斌曾洁钟声杨人泽（赣南医学院第一附属医院江西赣州 341000）
【摘要】目的观察黄花倒水莲提取物促凝血作用及机制的影响。方法采用体外血浆法测定药物对凝血作用的影响。采用凝血因子分析仪测定血浆纤维蛋白原、优球蛋白溶解时间、活化部分凝血活酶时间。结果黄花倒水莲提取物能明显缩短血浆凝血酶时间；减小凝血酶原时间；升高血浆纤维蛋白原和延长优球蛋白溶解时间；缩短活化部分凝血活酶时间。结论黄花倒水莲提取物具有明显的促凝血作用，其促凝血作用机制可能与升高血浆纤维蛋白原和优球蛋白溶解时间；降低活化部分凝血活酶时间有关。
【关键词】黄花倒水莲凝血酶时间(TT) 凝血酶原时间(PT) 血浆纤维蛋白原(Fib) 优球蛋白溶解时间(ELT) 活化部分凝血活酶时间(APTT)黄花倒水莲（PFH）又称假黄花远志，主产于湖南、广西、江西、广东和云南等地，药用其全草[1-2]。其性平、微温、味甘、微苦；具补益气血、健脾祛湿、活血化瘀、调经等功效。研究表明：黄花倒水莲根含有皂苷、多糖、有机酸、氨基酸等，具有明显的抗衰老、改善心肌缺血、免疫调节、抗应激、抗衰老、抗病毒活性[3-5]等作用，主治虚弱虚肿、急慢性肝炎、腰腿酸痛、跌打损伤。有人报道黄花倒水莲提取物抗血脂作用[6]、对实验性胃黏膜损伤的保护作用、对实验性肝损伤的保护作用。现报道黄花倒水莲提取物促凝血作用及机制的研究。
1 材料和方法
1.1材料
1.1.1黄花倒水莲提取物的制备
取干燥黄花倒200g，加双蒸水过液面2cm，煮沸2次。30min/次，合并滤液，浓缩至400ml。加3倍量95%的乙醇，放冰箱静置过夜，次日减压过滤，并回收滤液中乙醇，继续浓缩滤液得无醇味的提取物。提取物加双蒸水至200ml使药液为相当于生药1g/ml。用0.5%NaOH 调整pH为7.0。置冰箱中备用。
1.1.2试验动物
健康成年SD大鼠（江西中医学院实验动物中心提供），体重300～400g，雌雄各半，随机分组。
1.1.3药品与试剂
10%的水合氯醛（国药集团化学试剂有限公司，批号：20090407）；枸橼酸钠(1:9)真空采血管（江西富尔康实业集团有限公司，批号：20090903）；凝血酶原时间测定试剂盒和凝血酶时间测定试剂盒（上海太阳生物技术有限公司产品）。
统计分析：实验结果均以-x±s表示，数据进行单因素方差分析。
2 方式与结果
2.1 分组及给药
清洁级SD大鼠15只，随机分为三组：A.空白对照组；B.低剂量黄花倒水莲提取物组（1.5g/kg）；C.高剂量黄花倒水莲提取物组（3.0g/kg）。高、低剂量组每天以相应量的药物灌胃，空白对照组给予等量生理盐水灌胃，每天一次，持续5天。
2.2 黄花倒水莲提取物对体外凝血时间的测定
实验前动物禁食12h，末次给药后0.5h，以10%的水合氯醛麻醉(0.35ml/100g)，用毛细管从眼睛内眦部插入眼底，血液即进入毛细管内，直至血液从毛细管内流出，舍弃第一滴，然后取洁净玻片接一滴血(直径约5mm左右)，并按下秒表开始计时，每10-20s用清洁6号针头自血滴边缘向里轻轻拨动，观察有无血丝挑起。从采血开始至挑起血丝为止即为凝血时间，记录凝血时间。
表1 黄花倒水莲提取物对大鼠玻片凝血时间的影响（-x±s；n=5）
与空白组比较，*P＜0.05；**P＜0.01。
2.3 黄花倒水莲提取物对凝血酶原时间（PT）的测定
取待测血浆0.1mL，37℃水浴孵育3min，加入37℃预温的凝血活酶0.2mL，混匀，立即启动秒表，记录凝固时间，即为凝血酶原时间值(s)。每个样品重复实验5次，取其平均值。
图1 黄花倒水莲提取物对凝血酶原时间的影响
与空白组比较，*P＜0.05。
2.4 黄花倒水莲提取物对凝血酶时间(TT)的测定
眼眦取血后，暴露大鼠腹腔，分离腹主静脉，用枸橼酸钠抗凝(1：9)真空采血管自腹主静脉采血2mL，轻轻摇匀，后3000r/min离心15min，取上清液，即待测血浆。
取待测血浆0.1mL，37℃水浴孵育3min，加入凝血酶0.1 mL，混匀，立即启动秒表，记录凝固时间，即为凝血酶时间值(s)。每个样品重复实验5次，取其平均值。
黄花倒水莲种植技术
黄花倒水莲种植技术 七冲瑶山生态农业提供 黄花倒水莲(拉丁学名:Polygala fallax Hemsl)为远志科植物，别名：黄花参、观音串。主产于广西，福建、江西、湖南、广东、贵州、云南等地有分布。生长于海拔300～1600m的山谷林下、水旁荫湿处。高1～3米，属灌木或小乔木；根粗壮，肉质，多分枝，表皮淡黄色；茎灰色，具浅灰色斑点；枝圆柱形，灰绿色，密被短柔毛。单叶互生；叶柄长9～14mm，叶膜质，披针形至椭圆状披针形，先端渐尖，基部楔形至钝圆，全缘，主脉在上表面凹陷。总状花序顶生或腋生；花两性，萼片5，早落，均具缘毛；花瓣3枚，纯黄色；雄蕊8枚，花药卵形；子房压扁，圆形，具缘毛，基部具环状花盘。蒴果阔倒心形至圆形，绿黄色。种子圆形，棕黑色至黑色，密被白色短柔毛，近种脐端具一顶端突起的种阜。花期5～10月，果期8～12月。 黄花倒水莲性味甘、微苦，平，具有补气血，健脾利湿，活血调经，强筋骨，通筋络等功效。临床主要用于产后、病后体弱、妇科疾病、腰肌劳损、急、慢性肝炎等的治疗，是广西民间少数民族常用药，民间广泛使用黄花倒水莲熬制滋补靓汤。（v:qxy042） 现代研究发现：黄花倒水莲含有皂苷、多糖、shan酮、有机酸和氨基酸等多种成分，（v:qxy042）主要有抗乙肝病毒、抗应激、抗过氧化脂质、抗衰老、提高免疫力、调脂、调节心肌功能、及活血、抗炎等作用。制药企业、提取企业、研究机构大量使用黄花倒水莲作为原料，提取有效成分，研发生产药品，如：用叶子加工成的黄花参养生茶、枝制药的舒脂苷片等已投入临床应用。 目前黄花倒水莲均依靠野生，民间不重视资源保护，野生资源蕴藏量逐年减少，货源零散。民间食用、成方制剂、企业制药用量成倍增长，而各大药市的上市量不足，使黄花倒水莲成为近年来市场的畅销品，全国各大药市价格不断上扬，现生叶子8元,阳枝7元，阴根40元/kg。业内人士分析认为：人工栽培尚未开展，市场即将出现空缺，价格将继续上扬。 经济效益分析：黄花倒水莲可采收全株，仅以种植三年每株最少可产药材1.0kg计算，亩产可达1800kg以上。（v:qxy042）产地收购价全株平均12／kg，亩产值可达21600元以上（不包括叶子收入）。每亩成本费用如下：土地租金150元，翻耕整地100元，石灰150公
血液抗凝剂的特点及应用
实验室常用血液抗凝剂的特点及应用 在实验室检验中，有许多检测项目的血液标本是需要抗凝才可以检测的。而抗凝剂种类较多，实际应用中要根据不同的需要进行选择，才能获得理想的效果。实验室中常用的抗凝剂有肝素、乙二胺四乙酸盐（EDTA盐）、枸橼酸盐、草酸盐等4种，现将它们的特点及应用分别叙述如下： 一、肝素 抗凝是用于血液化学成分检测的首选抗凝剂。肝素是一种含有硫酸基团的粘多糖，是分散相物质平均分子质量为15000。其抗凝原理主要是通过与抗凝血酶Ⅲ结合引起抗凝血酶Ⅲ构型发生变化，加速凝血酶-凝血酶复合体形成而产生抗凝作用。此外，肝素还能借助血浆辅助因子（肝素辅助因子Ⅱ）来抑制凝血酶。常用肝素抗凝剂是肝素的钠、钾、锂、铵盐，其中以肝素锂最好，但其价格较贵，钠、钾盐会增加血液中的钠、钾含量，铵盐会增加尿素氮的含量。通常用肝素抗凝的剂量为10.0～12.5 IU/ml血液。 肝素对血液成分干扰较少，不影响红细胞体积，不引起溶血，适用于做红细胞渗透性试验、血气、血浆渗透量、红细胞压积及普通生化测定。但肝素具有抗凝血酶作用，不适合做血凝试验。另外，肝素过量可引起白细胞聚集和血小板减少，所以不适合做白细胞分类和血小板计数，更不能用于止血检验。此外，肝素抗凝血不能用于制作血涂片，因为Wright染色后出现深蓝色背景，影响显微镜减产。肝素抗凝血应于短时间内使用，否则放置过久血液又可凝固。 二、乙二胺四乙酸盐(EDTA盐) EDTA能与血液中Ca2+结合成螯合物，凝血过程被阻断，血液不能发生凝固。EDTA盐有钾、钠、锂盐，国际血液学标准化委员会推荐使用的是EDTA-K2，其溶解度最高，抗凝速度最快。EDTA盐通常配成质量分数是15%的水溶液，每ml血液加1.2mgEDTA,即每5ml血液加0.04ml 15%EDTA溶液。EDTA盐可在100℃下干燥，抗凝作用不变。 此抗凝剂不影响白细胞计数及大小，对红细胞形态影响最小，并且可以抑制血小板的聚集，适用于一般血液学检测。但如果抗凝剂浓度过高，渗透压上升，会造成细胞皱缩。EDTA溶液pH与盐类关系较大，低pH可使细胞膨胀。EDTA-K2可使红细胞体积轻度膨胀，采血后短时间内平均血小板体积非常不稳定半小时后趋于稳定。EDTA-K2使 Ca2+、Mg2+下降，同时使肌酸激酶、碱性磷酸酶降低，EDTA-K2的最佳浓度为1.5mg/ml血液，如果血少，中性粒细胞会肿胀分叶消失，血小板会肿胀、崩解，产生正常血小板的碎片，使分析结果产生错误。EDTA由于能抑制或干涉纤维蛋白凝块形成时纤维蛋白单体的聚合，不适于血凝和血小板功能检测，也不适用于钙、钾、钠及含氮物质的测定。此外，EDTA能影响某些酶的活性和抑制红斑狼疮因子，故不适合制作组化染色和检查红斑狼疮细胞的血涂片。 三、枸橼酸盐 枸橼酸盐主要是枸橼酸钠，其抗凝原理是能与血液中的Ca2+结合形成螯合物，使Ca2+失去凝血功能，凝血过程被阻断，从而阻止血液凝固。枸橼酸钠有Na3C6H5O7·2H2O和2Na3C6H5O7·11H2O两种晶体，通常用前者配成3.8%或3.2%的水溶液，与血液按照1:9体积混合。 大部分凝血试验都可用枸橼酸钠抗凝，它有助于Ⅴ因子和Ⅷ因子的稳定，并且对平均血小板体积及其他凝血因子影响较小，可用于血小板功能分析。枸橼酸钠细胞毒性较小，也是输血中血液保养液的成分之一。但是，枸橼酸钠6mg才能抗凝1ml血液，碱性强，不适用于血液化验和生化测验。 四、草酸盐 草酸盐也是常用的抗凝剂，优点是溶解度大，作用原理是溶解后解离的草酸根与标本中的Ca2+形成草酸钙沉淀，使Ca2+失去凝血功能，凝血过程被阻断。常用的草酸盐抗凝剂种类有草酸钠、草酸钾和草酸铵，草酸钠的常用浓度为O.1 mol/L，与血液按1:9比例使用。但是，高浓度k+或Na+易使血细胞脱水皱缩，而草酸铵则可使血细胞膨胀，故测定血细胞比容时用草酸铵与草酸钾或草酸钠两者适当比例混合的抗凝剂，恰好不影响红细胞的形态和体积。常用于血液生化测定，但不适用于K+、Ca 2+的测定。由于生成草酸钙沉淀，红细胞会出现锯齿状，白细胞出现空泡，淋巴细胞及单核细胞会变形，不宜做血片检查。草酸盐可使血小板聚集，并影响白细胞形态，不能用于白细胞和血小板分类计数。 附录四常用抗凝剂的配制及用法 在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。 一、肝素 （1）肝素抗凝作用原理 肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。
凝血及抗凝血机制
凝血及抗凝血机制 一.机体凝血与抗凝血的平衡 止血的过程可以分为三个阶段：血管痉挛到血小板血栓形成，成为血小板凝块，最后促使纤维蛋白凝块形成 机体凝血系统包括凝血和抗凝两个方面，另外还有纤溶系统 ，三者间的动态平衡是正常机体维持体内血液流动状态和防止血液丢失的关键。机体的正常止凝血，主要依赖于完整的血管壁结构和功能，有效的血小板质量和数量，正常的血浆凝血因子 活性。 生理止血过程 ?小血管于受伤后立即收缩，若破损不大即可使血管封闭；主要是由损伤刺激引起的局部缩血管反应，但持续时间很短。 生理止血过程 ?血管内膜损伤，内膜下组织暴露，可以激活血小板和血浆中的凝血系统；由于血管收缩使血流暂停或减缓，有利于激活的血小板粘附于内膜下组织并聚集成团，成为一个松软的止血栓以填塞伤口。起到初级止血作用，一期止血缺陷常用的筛检实验室BT和PLT 生理止血过程 ?局部又迅速出现血凝块，即血浆中可溶的纤维蛋白原转变成不溶的纤维蛋白分子多聚体，并形成了由血纤维与血小板一道构成的牢固的止血栓，有效地制止了出血。同时血小板的突起伸入纤维蛋白网内，血小板微丝（肌动蛋白）和肌球蛋白的收缩使血凝块收缩，血栓变得更坚实，能更有效地起止血作用，这是二级止血作用。二期止血缺陷常用的筛选实验室PT和APTT。 ?与此同时，血浆中也出现了生理的抗凝血活动与纤维蛋白溶解活性，以防止血凝块不断增大和凝血过程漫延到这一局部以外。
二凝血系统 ?凝血过程的三要素： 凝血因子+血小板+Ca2+. 凝血因子——血浆与组织中直接参与凝血的物质。 凝血因子的特性：迄今为止，参与凝血的因子共有12个。其中用罗马数字编号的有12个(从Ⅰ－XIII，其中因子Ⅵ并不存在)。血浆中最不稳定的凝血因子是因子是V（无），血浆中含量最高的凝血因子是因子Ⅰ（老大），在肝脏中合成且依赖维生素K的凝血因子是2,7,9,10，血友病甲（A）缺乏的是8因子，血友病乙（B）缺乏的是9因子。内源性途径和外源性途径共同激活的因子是10因子。 . 通常分为： ①内源性凝血途径； ②外源性凝血途径； ③共同凝血途径 ?如果只是损伤血管内膜或抽出血液置于玻璃管内，完全依靠血浆内的凝血因子逐步使因子Ⅹ激活从而发生凝血的，称为内源性激活途径（intrinsic route） ?如果是依靠血管外组织释放的因子Ⅲ来参与因子Ⅹ的激活的，称为外源性激活途径（extrinxic route） 学习生理学的时候，生理性凝血过程的外源性凝血和内源性凝血怎么也记不住，记了忘忘了记，其实很简单： 内源途径：有8、9、11、12因子参与，可记为：婴儿（12）拿着筷子（11）去酒吧（9、8）。 酒吧在室内，所以是内源。 外源途径有3、7因子参与，可记为山鸡。山鸡一般在外面才有。 共同途径有10、5、2因子参与，可记为：十五的月亮（10、5）下有条鳄鱼（2）因子Ⅹ的激活可以通过两种途径 共同凝血途径的三个阶段 1.因子FX激活成FXa 凝血酶原激活物的形成 2.凝血酶原（FII）激活成凝血酶(FIIa）
常用抗凝剂的配制及用法
在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。 一、肝素 （1）肝素抗凝作用原理 肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。 （2）配制和用量 纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml 血液计)。但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg／kg体质量，狗5～10mg／kg 体质量。肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于10 0mg。 二、草酸盐合剂 （1）原理 草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。 （2）配制方法及用量 草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。 （3）注意事项 草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。用时注意加的量应适中，不能过多，以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。不适用于血液内钙或钾的测定，也不能用于血液非蛋白氮测定。 三、枸櫞酸钠 常配成3～5%水溶液。也可直接加粉剂，每毫升血加3～5mg，即可达到抗凝目的。 枸櫞酸钠可使钙失去活性，防止凝血。但其抗凝作用较差，碱性较强，不宜作化学检验之用。仅可用于红细胞沉降速度测定。急性血压测定实验所用枸櫞酸钠为5～6％溶液。 四、草酸钾 （一）原理和注意事项 草酸钾为最常用的抗凝剂。其与血液混合后可迅速与血液中的钙离子结合，形成不溶解的草酸钙，使血液不凝固。常用于非蛋白氮测定，但不适用于测定钾和钙。草酸盐能抑制乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和淀粉酶的活性，故应注意。 （二）配制及使用方法
凝血及抗凝血机制
一、机体凝血与抗凝血的平衡 止血的过程可以分为三个阶段：血管痉挛到血小板血栓形成，成为血小板凝块，最后促使纤维蛋白凝块形成。机体凝血系统包括凝血和抗凝两个方面，另外还有纤溶系统，三者间的动态平衡是正常机体维持体内血液流动状态和防止血液丢失的关键。机体的正常止凝血，主要依赖于完整的血管壁结构和功能，有效的血小板质量和数量，正常的血浆凝血因子活性。 生理止血过程 小血管于受伤后立即收缩，若破损不大即可使血管封闭；主要是由损伤刺激引起的局部缩血管反应，但持续时间很短。 血管内膜损伤，内膜下组织暴露，可以激活血小板和血浆中的凝血系统；由于血管收缩使血流暂停或减缓，有利于激活的血小板粘附于内膜下组织并聚集成团，成为一个松软的止血栓以填塞伤口。起到初级止血作用，一期止血缺陷常用的筛检实验室BT和PLT。 局部又迅速出现血凝块，即血浆中可溶的纤维蛋白原转变成不溶的纤维蛋白分子多聚体，并形成了由血纤维与血小板一道构成的牢固的止血栓，有效地制止了出血。同时血小板的突起伸入纤维蛋白网内，血小板微丝（肌动蛋白）和肌球蛋白的收缩使血凝块收缩，血栓变得更坚实，能更有效地起止血作用，这是二级止血作用。二期止血缺陷常用的筛选实验室PT和APTT。 与此同时，血浆中也出现了生理的抗凝血活动与纤维蛋白溶解活性，以防止血凝块不断增大和凝血过程漫延到这一局部以外。 二、凝血系统 凝血过程的三要素： 凝血因子+血小板+Ca2+. 凝血因子——血浆与组织中直接参与凝血的物质。 凝血因子的特性：迄今为止，参与凝血的因子共有12个。其中用罗马数字编号的有12个(从Ⅰ－XIII，其中因子Ⅵ并不存在)。血浆中最不稳定的凝血因子是因子是V（五），血浆中含量最高的凝血因子是因子Ⅰ（老大），在肝脏中合成且依赖维生素K的凝血因子是2,7,9,10，血友病甲（A）缺乏的是8因子，血友病乙（B）缺乏的是9因子。内源性途径和外源性途径共同激活的因子是10因子。 .通常分为： 1.内源性凝血途径； 2.外源性凝血途径； 3.共同凝血途径 如果只是损伤血管内膜或抽出血液置于玻璃管内，完全依靠血浆内的凝血因子逐步使因子Ⅹ激活从而发生凝血的，称为内源性激活途径。 如果是依靠血管外组织释放的因子Ⅲ来参与因子Ⅹ的激活的，称为外源性激活途径。 学习生理学的时候，生理性凝血过程的外源性凝血和内源性凝血怎么也记不住，记了忘忘了记，其实很简单： 内源途径：有8、9、11、12因子参与，可记为：婴儿（12）拿着筷子（11）去酒吧（9、8）。酒吧在室内，所以是内源。 外源途径有3、7因子参与，可记为山鸡。山鸡一般在外面才有。 共同途径有10、5、2因子参与，可记为：十五的月亮（10、5）下有条鳄鱼（2）。 因子Ⅹ的激活可以通过两种途径。 共同凝血途径的三个阶段 1.因子FX激活成Fxa：凝血酶原激活物的形成。 2.凝血酶原（FII）激活成凝血酶(FIIa)：凝血酶的形成。 3.纤维蛋白原(Fbg，FI) 转变成纤维蛋白(Fbn)：纤维蛋白的形成。 三、抗凝系统
玉米须总黄酮提取的开题报告
本科毕业论文（设计） 开题报告 论文题目：玉米须多糖和皂苷提取 The Extraction of Stigma maydis 学生姓名：冯苏学号 0707040017 专业：生物科学（师范） 指导教师：丁红秀 完成时间： 2009-8-3 生命科学学院 二○一○年八月
玉米须多糖和皂苷提取 The Extraction of Stigma maydis 一、论文研究背景及意义 1.1论文研究背景（依据） 玉米须为禾本科玉属植物玉米地花柱和柱头，内含有大量有效成分，如矿物质、黄酮类、糖类、皂苷、挥发性化学物质、天然维生素E、有机酸等。为《中华人民共和国卫生部药材标准》1985版（一部）收录的常用药材品种之一。民间常用于药茶、药膳中，作为唐念冰、高血压的辅助治疗药物。现代药理研究也正式证实玉米须有降血糖，抗癌、抑菌、增强免疫功能、利尿、降血压等功效。从玉米须中提取的多糖和皂苷具有多种功效，并且具有安全无毒无副作用的优点备受研究关注。在我国玉米地种植面积非常的广，所以原材料也非常的丰富。有很好的发展前景。 提取玉米须多糖的方法有热水提醇沉法、酶法提取、超声提取、酶2超声联合提取、。而其中的酶法提取对提取的温度控制相当严格，加大了工作的难度，不利于大量生产，而超声提取对仪器设备要求较高，但是产量却不高，不易于企业投产使用。此次试验采取的是热水提醇沉发提取多糖，这种方法成本低，工艺简单，无添加有毒溶剂，产品产率高。（这些内容中可以把相关研究人员所做的工作概述进去） 提取皂苷的方法有打孔吸附树脂技术、微波提取技术、超声波振荡辅助技术、色谱技术、泡沫分离技术、膜分离技术、超临界流体萃取技术、加热回流提取法。虽然以上各大技术在各领域都得到广泛的应用，但是个技术投入量和成本都非常高，此次试验根据皂苷溶于热乙醇的特性，结合多糖的提取技术，充分利用试验资源，采取的是热乙醇提取技术。并用正交法对两种物质提取工艺进行优化。（以上及后面内容中各论述的文献来源请标注。语言流畅性、错别字请好好修改） 1.2相关国内外的研究现状 20世纪20年代起，基于玉米须的临床作用，国内外学者对其化学成分开始大量研究。科学研究已经确认多糖类物质具有许多生物活性，包括抗肿瘤、免疫、降血糖和抗病毒等，且无毒副作用，在保健食品的开发应用上前景广阔。现在国际上多糖研究以日本、美国、德国等处于领先地位。美国的食品药品管理局确认其安全、无毒，其提取物所制药品为非处方药。我国多糖的研究起步较晚，对于日常食品中多糖的研究相对较少。（国内外学者对玉米须化学成分相关研究究竟有哪些，要在这部分内容中表现出来，并注明参考文献出处） 我国的《中药大辞典》、《全国中草药汇编》等当代中医药典籍中均有有关玉
黄花倒水莲
黄花倒水莲 黄花倒水莲为远志科植物Polygala fallax Hemsl.的根或全株，别名：黄花参、观音串。主产于广西，福建、江西、湖南、广东、贵州、云南等地有分布。生长于海拔300～1600m的山谷林下、水旁荫湿处。高1～3米，属灌木或小乔木；根粗壮，肉质，多分枝，表皮淡黄色；茎灰色，具浅灰色斑点；枝圆柱形，灰绿色，密被短柔毛。单叶互生；叶柄长9～14mm，叶膜质，披针形至椭圆状披针形，先端渐尖，基部楔形至钝圆，全缘，主脉在上表面凹陷。总状花序顶生或腋生；花两性，萼片5，早落，均具缘毛；花瓣3枚，纯黄色；雄蕊8枚，花药卵形；子房压扁，圆形，具缘毛，基部具环状花盘。蒴果阔倒心形至圆形，绿黄色。种子圆形，棕黑色至黑色，密被白色短柔毛，近种脐端具一顶端突起的种阜。花期5～8月，果期8～12月。 黄花倒水莲有补气血，强筋骨，通筋络等功效。临床主要用于产后、病后体弱、妇科疾病、腰肌劳损、急、慢性肝炎等的治疗，是广西民间少数民族常用药，民间广泛使用黄花倒水莲熬制滋补靓汤。现代研究发现：黄花倒水莲含有皂苷、多糖、shan酮、有机酸和氨基酸等多种成分，主要有抗乙肝病毒、抗应激、抗过氧化脂质、抗衰老、提高免疫力、调脂、调节心肌功能、及活血、抗炎等作用。制药企业、提取企业、研究机构大量使用黄花倒水莲作为原料，提取有效成分，研发生产药品，如：黄花参舒肝茶、舒脂苷片等已投入临床应用。 目前黄花倒水莲均依靠野生，民间不重视资源保护，野生资源蕴藏量逐年减少，货源零散。民间食用、成方制剂、企业制药用量成倍增长，而各大药市的上市量不足，使黄花倒水莲成为近年来市场的畅销品，全国各大药市价格不断上扬，现已升至20元/kg。业内人士分析认为：人工栽培尚未开展，市场即将出现空缺，价格将继续上扬。 目前，我公司已筛选出生物学综合性状优异的黄花倒水莲单株，以其茎尖作为外植体，成功培育出黄花倒水莲组培苗，遗传稳定性好、生长势旺、移栽成活率高，药材形成产量快，有效成分含量高，是规模化种植的首选种苗，规模化种植将带来巨大的经济效益。 经济效益分析：黄花倒水莲可采收全株，仅以种植三年每株最少可产药材1.0kg计算，亩产可达1800kg以上。产地收购价12元／kg，亩产值可达21600元以上。每亩成本费用如下：土地租金150元，翻耕整地100元，石灰150公斤40元，农家肥3000公斤450元，有机磷肥200公斤100元，杀虫、防病50元，种苗费3600元，施肥、种植、锄草、采收等人工费500元，其他费用100元，三年合计总投资5090元。纯收入达16510元/亩，经济效益显著。 种苗规格：有多张叶片，健康无病斑，苗芽头健壮、长势旺盛，根系发达。
常用的抗凝剂肝素
常用的抗凝剂肝素、草酸盐合剂、枸橼酸钠和草本钾的配制方法 肝素（Heparin） 肝素的抗凝血作用很强，常用来作为全身抗凝剂，特别是在进行微循环方面动物实验时的肝素应用更有重要意义。纯的肝素10mg能抗凝100ml血液（按1mg等于100个国际单位，10个国际单位能抗凝1ml血液计）。如果肝素的纯度不高，或过期，所用的剂量应增大2～3倍。用于试管内抗凝时，一般可配成1%肝素生理盐水溶液，取0.1ml加入试管内，加热80℃烘干，每管能使5～10ml血液不凝固。 作全身抗凝时，一般剂量为：大鼠2.5～3mg·(200～300g体重)-1，兔或猫10mg·kg-1，狗5～10mg·kg-1。如果肝素的纯度不高，或过期，所用的剂量应增大2～3倍。 草酸盐合剂 配方：草酸铵 1.2g 草酸钾0.8g 福尔马林1.0ml 蒸馏水加至100ml 配成2%溶液，每1ml血加草酸盐2mg（相当于草酸铵1.2mg，草酸钾0.8mg）。用前根据取血量将计算好的量加入玻璃容器内烤干备用。如取0.5ml于试管中，烘干后每管可使5ml血不凝固。此抗凝剂量适于作红细胞比容测定。能使血凝过程中所必须的钙离子沉淀达到抗凝的目的。
枸橼酸钠 常配成3%～8%水溶液，也可直接用粉剂。 枸橼酸钠可使钙失去活性，故能防止血凝。但其抗凝作用较差，其碱性较强,不适作化学检验之用。一般用1：9（即1份溶液，9份血）用于红细胞沉降和动物急性血压实验（用于连接血压计时的抗凝）。不同动物，其浓度也不同：狗为6%，猫为2%+硫酸钠25%，兔为5%。草酸钾 每1ml血需加1-2mg草酸钾。如配制10%水溶液，每管加0.1ml 则可使5-10ml血液不凝固。
多糖提取使用料液比参考文献
多糖提取使用“料液比”参考文献 说明：在中文文献期刊检索中共检索到43篇，选取前10篇供参考 1、巴西菇多糖提取方法研究 【作者】叶怀义. 于浩. 哈尔滨商业大学食品学院 【刊名】江苏食品与发酵 2004年01期 【摘要】本文探讨了巴西菇多糖的提取工艺，分别作了热水提取和酶法提取的正交试验，并对多糖提取率进行了比较分析。结果显示，热水提取巴西菇多糖的最佳工艺参数是：提取温度110℃，提取时间1.5h，料液比1:25，其多糖最高提取率5.80%。而采用酶法提取巴西菇多糖的最佳工艺参数分别是：木瓜蛋白酶酶用量0.20%，酶解温度55℃，酶解时间2h，作用pH值6.5；纤维素酶酶用量0.15%，酶解温度45℃，酶解时间3h，作用pH值4.5；果胶酶酶用量0.20%，酶解温度40℃，酶解时间3h，作用pH值4.0。其中木瓜蛋白酶提取巴西菇多糖提取率最高，可达到15.08%。 2、茶籽多糖提取工艺的研究 【作者】田洪舟. 裘爱泳. 史小华. 江南大学食品学院 【刊名】中国油脂 2004年06期 【摘要】以乙醇为溶剂对影响茶籽粕中多糖的提取因素进行了实验分析，在单因素实验的基础上，通过正交实验得出优化后的提取工艺条件为：料液比为 1∶12 ，乙醇浓度为55 %，提取温度为55℃，提取时间为3.0h，茶籽多糖的得率和纯度分别为6.92 %和78.74%。 3、榛蘑粗多糖提取工艺的研究 【作者】李巧云. 翟春. 居红芳. 葛粉凤. 常熟高等专科学校化学系 【刊名】化学世界 2004年07期 【摘要】对榛蘑中可溶性粗多糖的提取工艺进行了研究,通过单因素试验和L9(33)正交试验,研究了料液比、温度、时间对多糖提取率的影响，结果显示温度和料液比是影响多糖提取率的主要因素，最佳工艺为料液比1：25，温度100℃，时间4h,在最佳提取工艺时,榛蘑的多糖提取率为4.37%。对常用的醇析方法进行改进,在传统Sevag法除蛋白的基础上采用Sevag法结合酶法除蛋白,大大缩短了除蛋白时间,又用改良的蒽酮—硫酸法测定多糖含量。 4、异枝麒麟菜活性硫酸粗多糖的提取工艺优化 【作者】王庆荣. 岑颖洲. 马夏军. 陈润智. 许少玉. 暨南大学化学系 【刊名】暨南大学学报 2004年03期 【摘要】采用能有效保护抗病毒活性基团的直接水提法提取异枝麒麟菜活性硫酸多糖,通过正交试验研究了影响多糖得率的工艺参数:KCl质量分数、温度、时间、料液比;通过均匀试验研究了其中影响最大的因素的最佳水平.结果表明,温度和KCl质量分数为多糖得率的最大影响因素,其最佳水平分别为125℃和0 93%.结合实际情况,最佳提取工艺条件可为:浸提温度95～100℃、浸提时间6h、料液质量比1∶90、KCl质量分数0 93%. 5、五味子粗多糖提取工艺的研究 【作者】李巧云. 居红芳. 翟春. 常熟高等专科学校化学系 【刊名】食品科学 2004年05期 【摘要】本文对五味子中可溶性粗多糖的提取工艺进行了研究,通过单因素试验和L9(33)正交试验,研究了料液比、温度、时间对多糖提取率的影响,结果显
常用抗凝剂的配制和使用
常用抗凝剂的配制及用法 在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。 一、肝素 （1）肝素抗凝作用原理 肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。 注意事项：做全血DNA提取的时候抗凝剂不能采用肝素！因为肝素是聚合酶链式反应的抑制剂！ （2）配制和用量 纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml血液计)。但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。 二、草酸盐合剂 （1）原理 草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配臵，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。 （2）配制方法及用量 草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。 （3）注意事项 草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。用时注意加的量应适中，不能过多，以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。不适用于血液内钙或钾的测定，也不能用于血液非蛋白氮测定。 三、枸櫞酸钠 常配成3～5%水溶液。也可直接加粉剂，每毫升血加3～5mg，即可达到抗凝目的。 枸櫞酸钠可使钙失去活性，防止凝血。但其抗凝作用较差，碱性较强，不宜作化学检验之用。仅可用于红细胞沉降速度测定。急性血压测定实验所用枸櫞酸钠为5～6％溶液。 四、草酸钾 （一）原理和注意事项 草酸钾为最常用的抗凝剂。其与血液混合后可迅速与血液中的钙离子结合，形成不溶解的草酸钙，使血液不凝固。常用于非蛋白氮测定，但不适用于测定钾和钙。草酸盐能抑制乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和淀粉酶的活性，故应注意。
凝血与抗凝血题题
第十二章凝血与抗凝血平衡紊乱 一、单择 题 1.在启动凝血过程中起主要作用的是 ( ) A.血小板 B.FⅦ C.FⅫ D.FⅢ E.凝血酶 2.正常时表达TF的细胞是 ( ) A.血管外层的平滑肌细胞 B.血管内皮细胞 C.血液单核细胞 D.嗜中性粒细胞 E.巨噬细胞 3.局部组织损伤后TF启动的凝血过程不能扩大的原因是由于血液中存在 ( ) A.PC B.AT-Ⅲ C.肝素 D.TFPI E.PS 4.TF-Ⅶa促进凝血酶原激活物的形成是因为激活了 ( ) A.FⅧ B.FⅨ C.FⅩ D.FⅪ E.FⅫ 5.血小板的激活剂不包括 ( ) A.ADP B.凝血酶 C.TXA2 D.PGI2 E.肾上腺素 6.血小板释放反应中，致密颗粒可释放 ( ) A.5-HT B.纤维蛋白原 C.TXA2 D.纤维连结蛋白 E.凝血酶敏感蛋白 7.在抗凝系统中不属于丝氨酸蛋白酶抑制物的是 ( ) A.AT-Ⅲ B.α2-AP C.PC D.C1抑制物 E.HCⅡ 8.使AT-Ⅲ灭活凝血酶作用明显增强并在血管内皮细胞表达的是 ( ) A.PGI2 B.NO C.ADP酶 D.APC E.HS 9.肝素刺激血管内皮细胞释放的抗凝物质是 ( ) A.TXA2 B.NO C.TM D.TFPI E.PC 10.激活的蛋白C(APC)可水解 ( ) A.FⅡ B.FⅢ C.FⅤ D.FⅦ E.FⅩ 11. APC阻碍凝血酶原激活物的形成是由于其灭活了 ( ) A.FⅡa B.FⅤa C.FⅦa D.FⅨa E.FⅪa 12.APC的作用不包括 ( ) A.水解FⅤa B.水解FⅧa C.水解FⅡa D.限制FⅩa与血小板的结合 E.灭活PAI-1 13.可使PK分解为激肽释放酶的是 ( ) A.FⅧa B.FⅨa C.FⅩa D.FⅪa E.FⅫa 14.可通过外源性激活途径使纤溶酶原转变为纤溶酶的是 ( ) A.激肽释放酶 B.FⅪa C.uPA D.凝血酶 E.FⅫa 15.激活TAFI所必需的高浓度凝血酶的产生主要依赖于 ( ) A.FⅪa B.FⅩa C.FⅨa D.FⅧa E.FⅦa 16.不受Vi t K缺乏影响的凝血因子是 ( ) A.FⅡ B.FⅩ C.FⅦ D.FⅨ E.FⅢ 17.由于基因变异而产生APC抵抗的凝血因子是 ( ) A.FⅡ B.FⅢ C.FⅣ D.FⅤ E.FⅦ 18.全身性shwartzman反应促进DIC发生的原因是 ( ) A.抗凝物质合成障碍 B.血液高凝状态 C.单核-吞噬细胞系统功能受损 D.微循环障碍 E.纤溶系统受抑制 19.使AT-Ⅲ消耗增多的情况是 ( )
药理学8 肝素的抗凝血试验
试验8 肝素对小鼠的抗凝血作用 【目的】 1.熟悉抗凝血药的筛选方法。 2.观察肝素的抗凝作用和硫酸鱼精蛋白的解救效果。 【原理】 肝素为硫酸化的糖胺聚糖，分子量为3~30kDa，其中硫酸根约占40%，硫酸根呈强酸性，带大量负电荷。肝素能增强抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）与凝血酶等活化型凝血因子的亲和力，产生体内外抗凝作用，主要灭活IIa和Xa，也灭活IXa, XIa, XIIa, 激肽释放酶和纤溶酶等。 硫酸鱼精蛋白呈碱性，带有大量正电荷，如果肝素过量造成出血，则可用硫酸鱼精蛋白中和解救。 【材料】 1.器材：注射器、电子秤、玻片、针头； 2.药品：0.05%肝素溶液、生理盐水、1%硫酸鱼精蛋白，苦味酸； 3.动物：小鼠12只，20 g左右，雌雄兼用。 【试验步骤】 1.小鼠标记，称重； 2.分组，分为3组，每组4只，分别为A（生理盐水）、B（肝素）和C（肝素 +硫酸鱼精蛋白）组； 3.给药： A组：腹腔注射生理盐水，0.2 ml/10 g，10 min后测定凝血时间； B组：腹腔注射肝素，0.2 ml/10 g，10 min后测定凝血时间； C组：腹腔注射鱼精蛋白，0.1 ml/10 g；10 min后腹腔注射肝素，0.2 ml/10 g， 10 min后测定凝血时间； 4.测定凝血时间的方法 ①眼球后静脉丛取血2滴。眼球后静脉丛取血法：左手拇指及中指抓住头 颈部皮肤，左手掌尽量将小鼠全身皮肤向左移，慢慢使小鼠右眼球突出，小鼠头向下充血。取长约2cm的毛细管从内皉间45度角进针，至有抵骨
质的感觉，然后毛细管向外拔出约1-2mm即可有血滴流出。 ②采出的血滴分别置于洁净的玻片（自来水清洗后用生理盐水润洗，晾干） 上，计时； ③每隔30 s用针头（自来水清洗后用生理盐水润洗）自滴血内连续挑起纤 维丝为止，计时。另一滴血作为最后挑起纤维丝的对照。 ④正常小鼠血液的凝血时间为0.5-2min，如果观察10 min无凝血可计时为 10 min。 5.汇总全实验室结果，数据统计分析，得到平均值，标准偏差，Student T-Test 得到P值。 【结果】
黄花倒水莲提取物促凝血作用及机制的研究
黄花倒水莲提取物促凝血作用及机制的研究 发表时间：2013-05-21T10:55:05.153Z 来源：《中外健康文摘》2013年第14期供稿作者：严金玲严文华李斌曾洁钟声杨人泽 [导读] 实验表明：黄花倒水莲提取物既能影响内源性凝血途径，又能作用于外源性凝血途径。 严金玲严文华（通讯作者）李斌曾洁钟声杨人泽（赣南医学院第一附属医院江西赣州 341000） 【摘要】目的观察黄花倒水莲提取物促凝血作用及机制的影响。方法采用体外血浆法测定药物对凝血作用的影响。采用凝血因子分析仪测定血浆纤维蛋白原、优球蛋白溶解时间、活化部分凝血活酶时间。结果黄花倒水莲提取物能明显缩短血浆凝血酶时间；减小凝血酶原时间；升高血浆纤维蛋白原和延长优球蛋白溶解时间；缩短活化部分凝血活酶时间。结论黄花倒水莲提取物具有明显的促凝血作用，其促凝血作用机制可能与升高血浆纤维蛋白原和优球蛋白溶解时间；降低活化部分凝血活酶时间有关。 【关键词】黄花倒水莲凝血酶时间(TT) 凝血酶原时间(PT) 血浆纤维蛋白原(Fib) 优球蛋白溶解时间(ELT) 活化部分凝血活酶时间(APTT)黄花倒水莲（PFH）又称假黄花远志，主产于湖南、广西、江西、广东和云南等地，药用其全草[1-2]。其性平、微温、味甘、微苦；具补益气血、健脾祛湿、活血化瘀、调经等功效。研究表明：黄花倒水莲根含有皂苷、多糖、有机酸、氨基酸等，具有明显的抗衰老、改善心肌缺血、免疫调节、抗应激、抗衰老、抗病毒活性[3-5]等作用，主治虚弱虚肿、急慢性肝炎、腰腿酸痛、跌打损伤。有人报道黄花倒水莲提取物抗血脂作用[6]、对实验性胃黏膜损伤的保护作用、对实验性肝损伤的保护作用。现报道黄花倒水莲提取物促凝血作用及机制的研究。 1 材料和方法 1.1材料 1.1.1黄花倒水莲提取物的制备 取干燥黄花倒200g，加双蒸水过液面2cm，煮沸2次。30min/次，合并滤液，浓缩至400ml。加3倍量95%的乙醇，放冰箱静置过夜，次日减压过滤，并回收滤液中乙醇，继续浓缩滤液得无醇味的提取物。提取物加双蒸水至200ml使药液为相当于生药1g/ml。用0.5%NaOH 调整pH为7.0。置冰箱中备用。 1.1.2试验动物 健康成年SD大鼠（江西中医学院实验动物中心提供），体重300～400g，雌雄各半，随机分组。 1.1.3药品与试剂 10%的水合氯醛（国药集团化学试剂有限公司，批号：20090407）；枸橼酸钠(1:9)真空采血管（江西富尔康实业集团有限公司，批号：20090903）；凝血酶原时间测定试剂盒和凝血酶时间测定试剂盒（上海太阳生物技术有限公司产品）。 统计分析：实验结果均以-x±s表示，数据进行单因素方差分析。 2 方式与结果 2.1 分组及给药 清洁级SD大鼠15只，随机分为三组：A.空白对照组；B.低剂量黄花倒水莲提取物组（1.5g/kg）；C.高剂量黄花倒水莲提取物组（3.0g/kg）。高、低剂量组每天以相应量的药物灌胃，空白对照组给予等量生理盐水灌胃，每天一次，持续5天。 2.2 黄花倒水莲提取物对体外凝血时间的测定 实验前动物禁食12h，末次给药后0.5h，以10%的水合氯醛麻醉(0.35ml/100g)，用毛细管从眼睛内眦部插入眼底，血液即进入毛细管内，直至血液从毛细管内流出，舍弃第一滴，然后取洁净玻片接一滴血(直径约5mm左右)，并按下秒表开始计时，每10-20s用清洁6号针头自血滴边缘向里轻轻拨动，观察有无血丝挑起。从采血开始至挑起血丝为止即为凝血时间，记录凝血时间。 表1 黄花倒水莲提取物对大鼠玻片凝血时间的影响（-x±s；n=5） 与空白组比较，*P＜0.05；**P＜0.01。 2.3 黄花倒水莲提取物对凝血酶原时间（PT）的测定 取待测血浆0.1mL，37℃水浴孵育3min，加入37℃预温的凝血活酶0.2mL，混匀，立即启动秒表，记录凝固时间，即为凝血酶原时间值(s)。每个样品重复实验5次，取其平均值。 图1 黄花倒水莲提取物对凝血酶原时间的影响 与空白组比较，*P＜0.05。 2.4 黄花倒水莲提取物对凝血酶时间(TT)的测定 眼眦取血后，暴露大鼠腹腔，分离腹主静脉，用枸橼酸钠抗凝(1：9)真空采血管自腹主静脉采血2mL，轻轻摇匀，后3000r/min离心15min，取上清液，即待测血浆。 取待测血浆0.1mL，37℃水浴孵育3min，加入凝血酶0.1 mL，混匀，立即启动秒表，记录凝固时间，即为凝血酶时间值(s)。每个样品重复实验5次，取其平均值。
皂苷的提取与纯化工艺研究进展-陈明
青海大学 天 然 产 物 提 取 工 艺 学 综述 姓名: 陈明 日期: 2016年4月5日
皂苷的提取与纯化工艺研究进展 [摘要] 皂苷的提取和纯化对皂苷的理论研究和有效利用具有重要意义。文章分析了影响皂苷提取、纯化过程的主要因素，介绍了国内外该方面的研究成果，对今后的研究工作提出了一些建议。 [关键词] 皂苷；提取；纯化；综述 Development of Extraction and Purification Technology in Total Saponins Abstract: The extraction and purification technology is a crucial process for the Saponin production. Recent development of extraction and purification technology and major factors affecting extraction process in the field of the Total Saponins were reviewed in the paper. Keywords: saponins；extraction；purification；review 皂苷广泛分布于自然界，包括三萜皂苷和甾体皂苷，因其水溶液振摇后可生成胶体溶液，并有持久性似肥皂溶液的泡沫而得名。其中，三萜皂苷在豆科、五加科、葫芦科、毛茛科、石竹科、伞形科、鼠李科、报春花科等植物分布较多。而甾体皂苷主要分布在薯蓣科、百合科、玄参科、菝葜科、龙舌兰科植物中。经临床及药理证明，皂苷具有抗炎、抗肿瘤、抗菌和抗病毒、降低胆固醇、降血糖和免疫调节等多方面的生物活性和药理作用[1-4]。由于其提取物往往被认为有效成分含量低、杂质多、质量不稳定，用药多建立在经验的基础上，难以与现代医学接轨。为解决这个问题，研究并优化皂苷的提取与纯化工艺十分必要。 1基本原理及影响因素 皂苷的提取是溶剂进入药材，将有效成分从固相转移到液相，再将不溶性固体和溶液分开的过程。由于药材原料结构复杂，提取物为多组分混合物，因此提取过程中，能量消耗大，传质机理复杂，影响因素颇多。一般认为，有效成分在药材中的扩散是决定浸出速率的主要步骤。影响浸出的因素主要有溶剂、温度、压力、粉碎度、料液比与液体的流动状态等。溶剂提取的关键是选择适当的溶剂，“相似相溶”原理是基本依据。溶剂的极性、粘度等物性影响到植物组织中不同物质的浸出速度和溶出度。水和乙醇在皂苷提取中是最常用的溶剂，两者的不同
肝素类抗凝血药物
肝素类抗凝血药物 摘要：肝素类药物是目前使用最广泛一类的抗凝血药物，并具有较好的抗血栓的疗效。低分子肝素和合成肝素是现在最常用的一类肝素药物[1]。但肝素类药物会有血小板减少症和出血的副作用。如何减少副作用的发生是目前肝素类药物研发的一个重要方向。 Abstract:Heparin drugs is currently the most widely used class of anti-clotting drugs, and has good antithrombotic efficacy.Low molecular weight heparin, synthetic heparin is now the most commonly used type of heparin drugs.But heparin drugs has thrombocytopenia and bleeding side effects,How to reduce side effects is an important direction of research and development of the heparin drugs. 关键词：肝素；抗凝血；抗血栓；血小板减少症； Keywords: heparin; anticoagulant; antithrombotic; thrombocytopenia; 一.肝素的结构 肝素是硫酸化的糖胺聚糖，由糖醛酸和葡萄糖胺以1→4 键连接起来的重复二糖单位组成的多糖链的混合物[2]。含10—30 个二糖单位不等,分子量3000—30000, 平均分子量12000.整个结构变得异常复杂因其与硫酸和羧酸共价结合，故为强酸带有很强负电荷,每个糖单位之间可产生排斥力,使肝素分子链不易卷曲和交叉连接，因此呈线形结构,称为线形阴离子聚电解质体[3]。 [4] 只有部分肝素分子（约三分之一）含核心五糖[5]。
黄花倒水莲抗氧化活性研究
黄花倒水莲抗氧化活性研究 黄 锋1,2,林黎琳2,胡娟娟1,刘艾林1,肖培根2,杜冠华13 1中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所国家药物筛选中心,北京100050;2 中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所,北京100094 【摘 要】 目的:阐明黄花倒水莲(Polygala fallax Hemsl.[P.aureocauda Dumn])的抗氧化活性及有效部位,为进一步的活性追踪及临床应用提供理论依据。方法:从广西采集黄花倒水莲的根部分,经植化手段分离得到 7个化学性质不同的组分(PFE1、PFE2、PFE3、PF B4、PF B5、PF B6、PFW7)。用比色法研究了各组分还原三价铁离子 及清除脂性自由基DPPH 能力,采用化学发光法观察各组分清除羟自由基和超氧阴离子的活性。结果:PFE3、 PF B4对DPPH 、羟自由基、超氧阴离子的清除作用EC 50分别为92144,42129,5150;96133,38126,6121μg ?m L -1。结 论:黄花倒水莲各组分均有一定的清除自由基作用,这可以用来解释其在传统应用中的抗炎、抗衰老作用。 【关键词】 黄花倒水莲,抗氧化,自由基 【中图分类号】 R965 【文献标识码】 A 【文章编号】 167223651(2006)0420291204 【收稿日期】 2005201220 【基金项目】 国家自然科学基金资助项目(N o.3001161940);国家“十五”重大科技专项“创新药物和中药现代化”(NO : 2004AA2Z 3782) 【3 通讯作者】 杜冠华:教授,博导,中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所副所长,中国药理学会秘书长,T el :0102 63165184,Fax :010*********,E 2mail :dugh @https://www.360docs.net/doc/b02856605.html, 黄花倒水莲(Polygala f allax Hemsl.[P.aureo 2cauda Dumn ])又名假黄花远志、黄花参,为远志科远志属植物[1],主要分布于江西、福建、湖南、广东、广西、贵州、云南等地,是广西民间少数民族常用药,以根、茎、叶入药。其味甘、微苦、性平,具补益气血、健脾祛湿、活血化瘀和调经等功效[224],用于治疗病后体虚、腰肌劳损、风湿关节痛、跌打损伤、急慢性肝炎、子宫下垂和月经不调等症[5]。近年来已有一些关于黄花倒水莲化学成分和药理活性的报道[6210],但是对黄花倒水莲的传统应用尚缺乏系统的实验研究。本文在植化分离研究的基础上,对其各种组分进行了抗氧化活性的探索,试图阐明其药理活性及有效部位,为进一步的活性追踪及临床应用提供依据。1 材料与方法111 试 剂 DPPH 、维生素C (Vit C )、NADH 、鲁米诺为美国 Sigma 公司产品,丹酚酸A 由中国医学科学院药物 研究所黎莲娘教授惠赠,其它试剂均为国产分析纯。 112 植化分离 黄花倒水莲(Polygala f allax Hemsl.[P.aure 2 ocauda Dumn ]),2001年10月采自广西,经肖培根研究员鉴定,植物标本存放于中国医学科学院药用植物研究所标本馆,编号为PF200110。 黄花倒水莲根经干燥粉碎后,先用95%EtOH 回流提取2次,每次2h ,过滤,滤液浓缩,得到组分PFE1(含量为生药的7%);残渣继续用50%E 2tOH 提取2次,每次2h ,过滤,滤液浓缩,得到组分PFE2(含量为3%);将PFE1和PFE2两部分合并, 溶于水中,乙酸乙酯萃取3次,乙酸乙酯层浓缩得到组分PFE3(含量为018%);水层继续用正丁醇萃取3次,将正丁醇萃取得到的物质与D101大孔树脂混合装柱,依次用30%EtOH 、50%EtOH 及90%EtOH 洗脱,分别得到PF B4(含量为013%)、PF B5(含量为112%)及PF B6(含量为011%)。萃取后的水层干燥得组分PFW7(含量为619%)。 根据文献[11,12]等报道,黄花倒水莲中主要含有xanthone 、皂苷和寡糖酯等三类成分,采用95%及50%的EtOH 加热提取,能把主要成分提取完全。通过进一步的植化分离,xanthone 类成分主要在PF 2EtOAc 部分富集,皂苷类成分主要在PF 2