β-葡聚糖酶行业标准编制说明

β-葡聚糖酶行业标准编制说明
β-葡聚糖酶行业标准编制说明

《β-葡聚糖酶》行业标准(征求意见稿)编制说明

一、工作简况

(一)任务来源

β-葡聚糖酶是降解β-葡聚糖为葡糖糖一类酶的总称,目前没有国家或行业标准,只有农业部颁布的酶活检测方法《饲料添加剂β-葡聚糖酶活力的测定分光光度法》(NY/T 911-2004),标准适用于饲料添加剂用的饲料酶产品,也适用于添加有β-葡聚糖酶的浓缩饲料和添加剂预混合饲料。国内各自使用本企业的标准,在产品质量、检验标准等均不能统一,给生产企业和客户应用带来不便,同时也带来安全隐患,因此有必要制定产品标准规范行业生产。本标准的出台对企业乃至行业的发展有着重要的意义和作用,为产品走出国门,走向世界创造良好的条件。

本标准由中国轻工业联合会提出,全国食品工业标准化技术委员会(SAC/TC64)归口,计划名称为《β-葡聚糖酶》,计划编号为2010-2875T-QB。

(二)简要起草过程

1. 2010年11月工信部标准制修订计划下达后,中国生物发酵产业协会于2011年4月8日召开了标准启动工作会议,和有关起草单位一同针对制定《β-葡聚糖酶》行业标准的具体工作进行了认真研究,确定了总体工作方案,并组建了标准起草工作小组,中国生物发酵产业协会牵头组织该标准的制定工作,湖南鸿鹰祥生物工程股份有限公司作为组长单位,负责写出标准文本草稿(第一稿)。起草成员单位吸纳了科研及国内主要生产企业等部门,能代表全国的情况。

2. 启动会后,起草工作组收集国内外标准资料以及相关实验方法,综合各种情况进行了综合分析处理后,6月底前由湖南鸿鹰祥生物工程股份有限公司提出标准文本(草稿),通过电话、邮件与其它各起草单位沟通、探讨,确定标准文本(初稿)。2011年7月14日组织召开了第二次起草小组工作会议,立足国内现有标准统一方法、统一底物,采用通用国际单位,初步确定了各项指标要求和检验方法。

3. 第二次起草会后,收集各单位β-葡聚糖酶样品并完成送检工作,对样品采用盲样测试方式,进行了检验,并完成数据汇总。在测定过程中继续对底物的使用期跟踪实验、测定酶活对照分析、保存样跟踪检测等,以最后确定。根据检测数据情况,对一些指标的设定提供了数据支撑,经过大家的认真、细致的讨论研究,对标准中涉及的主要关键问题达成共识,修改形成征求意见稿,向行业内公开征集意见。

(三)主要起草单位

湖南鸿鹰祥生物工程股份有限公司、白银赛诺生物科技有限公司、青岛蔚蓝生物集团有限公司、武汉新华扬生物股份有限公司、山东隆大生物工程有限公司、诺维信(中国)生物技术有限公司、大连工业大学、合肥学院、中国生物发酵产业协会。

(四)工作组成员及其所承担的工作

中国生物发酵产业协会作为牵头单位,提出标准制定项目并申报,负责标准的资料查询、实验设计、组织验证、征求意见、资料汇总、送审《标准》等;组长起草单位湖南鸿鹰祥生物工程股份有限公司负责标准编制的全面起草工作;其他起草单位白银赛诺生物科技有限公司、青岛蔚蓝生物集团有限公司、武汉新华扬生物股份有限公司、山东隆大生物工程有限公司、诺维信(中国)生物技术有限公司、大连工业大学、合肥学院参与标准制定、指标及方法确定等。

二、标准编制原则和主要内容

(一)编制原则

1.以科学为依据

以科学技术和实验数据为依据,采用危险性评估方法,结合实践经验,经过科学研究而制定。

2.以推动行业的健康发展与科技进步,促进出口创汇为原则

我国还没有β-葡聚糖酶的产品标准。随着科技的发展,我国β-葡聚糖酶产品生产工艺也日趋稳定和完善,因此,制定β-葡聚糖酶产品的行业标准势在必行,行业标准制定将更好地确保产品质量安全,更有效地促进和满足国内外市场贸易需求。

随着生活水平的提高,为促进技术进步,提高产品质量;合理利用资源,提高经济效益,在强有力的产品质量做支持的前提下,吸引了大量国际稳定客户,进一步推动了β-葡聚糖酶产品标准化的进程。

3.参考国内标准统一方法

起草工作组通过对相关的国内外技术资料的分析,认为《饲料添加剂β-葡聚糖酶活力的测定分光光度法》(NY/T 911-2004)对β-葡聚糖酶分析的结果的稳定性、重现性较好,因此本标准结合我国产品的生产工艺、质量水平及检验水平的实际情况,采用该标准检验方法是较合适的。食品级各项指标确定引用《食品安全国家标准食品工业用酶制剂》(GB 25594-2010),对β-葡聚糖酶行业标准进行了规定,符合用户要求,保护消费者利益,促进对外贸易。

(二)主要内容

包括范围、规范性引用文件、术语和定义、产品分类、要求、检验方法、检验规则、标志、包装、运输及贮存。

本标准编写符合GB/T 1.1-2009的规定。

1. 标准名称

标准中使用行业惯用的准确名称β-葡聚糖酶。

2. 适用范围

本标准适用于以细菌、真菌为代表的微生物,经液体深层发酵,精制提取制得的β-葡聚糖酶。

3. 术语和定义

β-葡聚糖酶定义为:能水解β-葡聚糖的β-1,3和β-1,4葡萄糖苷键,产生低聚糖及葡萄糖的酶;

β-葡聚糖酶活力定义为:1g固体酶粉(或1mL液体酶),于50℃、pH值4.8条件下,1min从浓度4mg/mL的β-葡聚糖溶液中降解释放1umol还原糖,即为1个酶活力单位,以“u/g(u/mL)”表示。

4.产品分类

根据市场生产情况,对β-葡聚糖酶进行分类:

按产品形态分为固体剂型和液体剂型;

按产品的应用领域分为食品级和工业级。

5. 要求

(1)感官要求

按照产品实际情况分析,规定了产品的颜色、气味、性状,如下:

固体剂型:色泽均匀,粉状或颗粒状。无霉变、潮解、结块现象,有特殊发酵气味,无异味;

液体剂型:淡黄色至深褐色液体,允许有少量凝聚物,有特殊发酵气味,无异味。

(2)理化要求

(3)卫生要求

食品级应符合GB 25594的要求。

(4)保质期

在25℃以下,固体剂型不少于180天,保质期内酶活应不低于标示酶活的90%。

在25℃以下,液体剂型不少于90天,保质期内酶活应不低于标示酶活的90%。

5. 检验方法

本标准中的检验方法(除感官和酶活力外)全部直接引用相应国家标准方法,如下:

(1)感官

称取样品10g(或10mL),观察、嗅闻做出判断,做好记录。

(2)酶活力

β-葡聚糖酶能将β-葡聚糖降解成寡糖和单糖。具有还原性末端的寡糖和有还原基团的单糖在沸水浴条件下可以与DNS试剂发生显色反应。反应液颜色的强度与酶解产生的还原糖量成正比,而还原糖的生成量又与反应液中β-葡聚糖酶的活力成正比。因此,通过分光比色测定反应液颜色的强度,可以计算反应液中β-葡聚糖酶的活力。

具体方法详见标准文本附录A。

(3)pH

按QB/T 1803规定的方法进行测定。

(4)干燥失重

按QB/T 1803规定的方法进行测定。

(5)细度

按QB/T 1803规定的方法进行测定。

三、主要试验(或验证)情况

本次β-葡聚糖酶检测共进行30个样品,由五家生产单位提供,中国生物发酵产业协会统一安排送检,对β-葡聚糖酶样品的理化要求进行了检测,检测结果全部达到标准要求,具体数据见附表。

四、标准知识产权说明

本标准并未涉及任何专利。

五、产业化情况、推广应用论证和预期达到的经济效果等情况;

β-葡聚糖酶广泛应用于啤酒酿造、淀粉制糖、饲料加工等行业,在国外上世纪八十年代开始生产应用,国内在九十年代末开始应用到啤酒酿造和饲料行业,是继α-淀粉酶、糖化酶、蛋白酶后主要酶制剂产品,目前是啤酒酿造和饲料加工首选使用的酶制剂,改善国产麦芽β-葡聚糖含量较高所带来的麦汁难以过滤、收率较低及啤酒非生物浑浊等问题,降解饲料中β-葡聚糖酶,提高饲料的利用率。

本标准符合国内外产品的要求,在市场经济中占有十分重要的地位。推进产品标准化,是提高产品竞争力、促进产品质量稳步提高的有力保障。同时,保证人民身体健康,提高消费者生活水平,促进整个行业的高速发展,使我国制定的标准达到国内领先水平,保护民族产业,提高经济和社会效益。

六、采用国际标准和国外先进标准情况,与国际、国外同类标准水平的对比情况,国内外关键指标对比分析或与测试的国外样品、样机的相关数据对比情况

目前国际上还没有β-葡聚糖酶产品的相关标准。

七、与现行相关法律、法规、规章及相关标准,特别是强制标准的协调性

依据《食品安全法》的相关条例,结合轻工行业标准的要求和规定,进行标准制定,与现行法律、法规、规章和政策以及有关基础和相关标准不矛盾。

八、重大分歧意见的处理经过和依据

本标准未产生重大分歧意见。

九、标准性质的建议说明

鉴于β-葡聚糖酶的技术尚在发展之中,本标准可以作为推荐性轻工行业标准。

十、贯彻标准要求和措施建议(包括组织措施、技术措施、过渡办法、实施日期等)

本标准为首次发布。

十一、无废止现行相关标准的建议

十二、无其它应予说明的事项

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附表:β-葡聚糖酶样品检测结果(S为固体剂型;L为液体剂型)

β-葡聚糖酶行业标准起草工作组

2012年2月

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QS2631内切-β-1,4-葡聚糖酶(Cx)活性测定试剂盒说明书

货号:QS2631 规格:50管/24样 内切-β-1,4-葡聚糖酶(Cx)活性测定试剂盒说明书 分光光度法 正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 测定意义: Cx存在于细菌、真菌和动物体内,是纤维素酶系的组份之一,Cx主要作用于非晶态纤维素和水溶性纤维素衍生物,随机水解糖苷键,将其分解成葡萄糖、纤维二糖、纤维三糖和其他寡聚体。 测定原理: 采用3,5-二硝基水杨酸法测定Cx催化羧甲基纤维素钠降解产生的还原糖的含量。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 试剂的组成和配制: 提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存; 试剂一:液体 15mL×1 瓶,4℃保存; 试剂二:液体 60mL×1 瓶,4℃保存; 样品测定的准备: 1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织, 加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 3、血清(浆)样品:直接检测。 测定步骤: 1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。 混匀, 90℃水浴 10min(盖紧,防止水分散失),冷却后,测 540nm 下吸光值 A,计 算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。 第1页,共2页

β-1,3 葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,β-1,3-GA)试剂盒使用说明

β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,β-1,3-GA)试剂盒使用说明 分光光度法货号:BC0830 规格:50管/24样 产品内容: 提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存; 试剂一:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入3mL蒸馏水,充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存; 试剂二:液体30mL×1瓶,4℃保存; 产品说明: β-1,3-GA(EC3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆境条件下,可诱导细胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。 β-1,3-GA水解昆布多糖,内切β-1,3-葡萄糖苷键,产生还原末端,通过测定还原糖生成速率,来计算其酶活性。 自备仪器和用品: 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 操作步骤: 粗酶液提取: 按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆。12000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤: 1、分光光度计预热30min以上,调节波长至550nm,蒸馏水调零。 2、样本测定(在1.5mL EP管中依次加入下列试剂): 试剂名称(μL)测定管对照管 样本100100 蒸馏水100 试剂一100 充分混匀,放入37℃水浴60min。 试剂二600600 充分混匀,沸水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却,550nm处记录各管吸光值A,如果吸光值大于2,可以用蒸馏水稀释后测定(计算公式乘以相应稀释倍数),ΔA=A测定-A对照。每个测定管需设一个对照管。 β-1,3-GA活性计算: 标准条件下测定回归方程为y=0.0958x-0.0192;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。 (1)按蛋白浓度计算 单位的定义:每mg组织蛋白每小时产生1mg还原糖定义为一个酶活性单位。 β-1,3-GA(U/mg prot)=[(ΔA+0.0192)÷0.0958×V1]÷(V1×Cpr)=10.438×(ΔA +0.0192)÷Cpr (2)按样本鲜重计算 单位的定义:每g组织每小时产生1mg还原糖定义为一个酶活性单位。 β-1,3-GA(U/g鲜重)=[(ΔA+0.0192)÷0.09585×V1]÷(W×V1÷V2)=10.438×(ΔA

标准编制说明

《铝及铝合金板带材单位产品能源消耗限额》编制说明 1 工作简况 1.1 任务来源 为了贯彻落实《福建省人民政府关于进一步加强节能工作的意见》,省经贸委环境和资源综合利用处制定了2009年福建能源地方标准制订计划,由省冶金行管办负责组织《铝及铝合金板带材单位产品能源消耗限额》福建省地方标准的制定工作,并将标准的起草等任务下达给中铝瑞闽铝板带有限责任公司,计划编号为:。 1.2 预期社会经济效益 随着我国经济快速增长,各项建设取得巨大成就,但也付出了巨大的资源和环境代价,经济发展与资源环境的矛盾日趋尖锐。党中央、国务院适时提出节能减排发展战略,并在“十一五”规划纲要中,首次提出明确的节能目标。 《铝及铝合金板带材单位产品能源消耗限额》福建省地方标准的制定将引导我省铝板、带材生产企业的健康发展,推动我省铝板、带材生产企业的技术升级和结构调整,提高我省铝加工业整体技术水平,降低物耗能耗,重视环境保护,从而提高企业综合竞争力。 1.3 主要工作过程 1.3.1 前期调研 中铝瑞闽公司为了完成省冶金办下达的能耗标准编制任务,组织相关技术人员对编制过程中所涉及的产品品种、能耗种类、工艺能耗、辅助能耗、各产品工艺流程等方面的进行调查摸底,收集了国家关于能耗限额的法律、法规、政策以及铝加工能耗现状和行业标准,制定了调查表收集了省内外其它企业的实际能耗数据,共收集到南平铝等3家书面回复,进行产品能耗的汇总分析、作为各类产品能耗指标分档定级依据,同时对参考标准YS/T694.1《变形铝及铝合金单位产品能源消耗限额第1部分:铸造锭》,YS/T694.2《变形铝及铝合金单位产品能源消耗限额第2部分:板、带材》行业标准的指标适用性进行对比分析,以保证该省级地方能耗标准的先进性、广泛性和实用性。 1.3.2 征求意见稿形成 本标准起草小组结合省冶金行业协会关于分档的意见对本标准讨论稿进行了认真修改,于2009年12月底形成了《铝及铝合金板带材单位产品能源消耗限额》福建省地方标准的征求意见稿。 1.3.3 标准初审会 2010年01月29日由省经贸委冶金行管办组织在福州召开《铝及铝合金板带材单位产品能源消耗限额》标准的初审会,省内4家铝加工企业和标准化研究所、质量监督局、节能监测中心等单位和部门的专家参会,通过研讨根据修改意见,达成共识。与会单位和专家如下:林臻毅福建省标准化研究所

中华人民共和国交通行业标准(JTT93—94)

中华人民共和国交通行业标准(JT/T93—94) 港口机械通用电气检测方法和技术要求Detecting methods and technical requirement of general electric device for port crane 1主题内容与使用范围 本标准规定了港口装卸机械电气设备检测的项目以及检测方法与技术要求. 本标准适用于港口装卸机械电气设备,进口港口装卸机械电气设备可参照执行. 2引用标准 GB998低压电器试验方法 GB1032三相异步电动机的试验方法 GB1311直流电动机试验方法 GB1497低压电器基本标准 GB2682电工成套装置中指示灯与按钮的颜色 GB3797电控设备第二部分:装有电子器件的电控设备 GB3811起重机设计规范 GB4720电控设备第一部分:低压电器电控设备 GB4942·1电机外壳防护分级 GB4942·2低压电器外壳防护等级 GB6067起重机械安全规程 GB10233电气传动控制设备基本试验方法 GB11022高压开关设备通用技术条件 GBJ232电气装置安装工程施工及验收规范,起重机电气装置篇 JB4315起重机电控设备 JT2012港口装卸区域照明照度及其检测方法 JT5017港口门座起重机技术条件 钢质海船入级与建造规范中国船级社 3测量仪器仪表的基本要求 3.1 应采用不低于0.5级精度的测量仪器、仪表(兆欧表、功率因数表及直流电桥不低于1.0级)、 3.2 仪器、仪表的选用应使所测量值在30%~95%仪器、仪表量程范围内. 3.3 测量仪器、仪表须有计量管理机构鉴定的证书,并且在有效使用期内方可使用. 4测量环境条件 4.1 海拔高度不超过1000米.

酶活力测定方法

蛋白酶活力测定: 参照中华人民共和国专业标准SB/ T10317-1999蛋白酶活力测定方法( Asha 等, 2007)。 纤维素酶DNS酶活力测定方法 DNS, 活力, 纤维素酶, 测定 1 定义" |0 `. y6 t9 b" ^ 2 x 1g固体酶粉在40℃和pH值4.2条件下,每分钟水解纤维素生成1微克葡萄糖的量为1个酶活力单位,以u/g表示。 2 原理 纤维素酶分解纤维素,产生纤维二糖、葡萄糖等还原糖,纤维二糖、葡萄糖等还原糖能将3,5二硝基水杨酸中的硝基还原成橙黄色的氨基化合物,利用比色法测定其还原物生成量,表示酶的活力。! Y" m& p' q; I& K B& e$ T( B4 } 3.试剂和溶液 3.1 1%葡萄糖标准溶液(同β-葡聚糖酶酶活测定) 3.2 羧甲基纤维素钠(CMC)溶液 取1g羧甲基纤维素钠(粘度300~600厘泊),加入pH4.2的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液(甲液414ml和乙液586ml并用pH计校正至pH为4.2)混合均匀,水浴加热至溶,冷却后用2M 盐酸或氢氧化钠调节pH到4.2,定溶至100ml,再用二层纱布过滤,此溶液在4℃冰箱贮存,有效期3天。取滤液100ml,20ml,蒸馏水40ml,混匀,贮冰箱备用。4 C) c+ }( l2 R( M( p! L 3.3 DNS 试剂(同β-葡聚糖酶酶活测定); h1 a. l3 Z3 k6 t2 | 4仪器和设备 4.1恒温水浴锅(40℃±0.2℃) 4.2分光光度计 含10mm比色皿,可在550nm处测量吸光度。$ ]1 h& A) p) K 5测定步骤 5.1 标准曲线绘制. [* |! P6 u* G& u2 ^6 J4 Q 分别吸取1%葡萄糖标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml于50ml容量瓶中,用蒸馏水制成每ml分别含有葡萄糖0、200、400、600、800、1000、1200mg的稀标准液。各取不同浓度的稀标准液0.5ml于试管中,加入CMC溶液1.5ml、DNS试剂3.0ml,于沸水浴中沸腾7min,取出后立即加入蒸馏水10ml混匀。冷却后,用10mm比色皿,在波长550nm处用分光光度计分别测定其吸光度。以吸光度为纵坐标,相对应的葡萄糖浓度为横坐标,绘制标准曲线或计算回归方程。1 H, `% F/ `7 X/ U. W 5.2待测酶液的制备(同β-葡聚糖酶酶活测定) 1 L- {5 h8 W; q+ V4 u2 Y 5.3 比色测定 精确吸取经待测稀释酶液0.5ml,40℃预热5min,加入经40℃预热的CMC液1.5ml(每个样品同时作3支平行试管),于40℃水浴精确反应10min,立即加入DNS试剂3.0ml终止反应,以后按标准曲线制作步骤测定样品吸光度。 同时进行空白对照测定,取稀释酶液0.5ml,先加入DNS试剂3.0ml,再加入CMC液1.5ml,其余步骤同于样品测定。 6.计算0 W+ i$ S: }( _1 o7 ], R5 m( N

塔格糖行业标准编制说明

《塔格糖》行业标准(征求意见稿)编制说明 一.工作简况 1.任务来源 D-塔格糖(D-tagatose)属于稀有糖的一种,是一种罕见的天然己酮糖,甜味类似于蔗糖,而热量值只有1.5kcal/g,仅相当于蔗糖热量值的30%;10%(w/w)浓度D-塔格糖甜度为蔗糖的92%,没有后味也不会产生任何不良风味,是FDA批准的5种低能量甜味剂中唯一一个口感、甜度和蔗糖最相似的甜味剂。D-塔格糖具有低热量、降血糖、调节肠道菌群、防龋齿、抗衰老作用、防止心血管疾病等功效,本标准项目属于战略性新兴产业中的生物技术领域,及时制定标准规范非常重要。 2001年美国食品与药物管理局(FDA)已正式批准D-塔格糖作为甜味剂用于食品饮料业以及医药制剂中;JECFA第57次会议批准D-塔格糖用于食品添加,推荐ADI值0—80 mg/kg:欧盟也于2005年12月批准D-塔格糖在欧洲上市;目前D-塔格糖在美国已被大量用于健康饮料以及酸奶、果汁等产品中作为白糖的代用品。D-塔格糖产品目前已获得美国、澳大利亚、日本、韩国、新西兰等食品卫生部门批准使用,在我国仍未获得产业化。本标准国内首次制定。 本标准由中国生物发酵产业协会于2011年组织上报,被工业和信息化部列入2011年第三批行业标准制修订计划,本标准由中国轻工业联合会提出,全国食品工业标准化技术委员会(SAC/TC64)归口,计划号为2011-2447T-QB,计划名称为《结晶塔格糖》,后调整为《塔格糖》。 2.简要起草过程 2011年10月工信部标准制修订计划下达后,中国生物发酵产业协会于2012年3月15日召开了标准启动工作会议,和有关起草单位一同针对制定《结晶塔格糖》行业标准的具体工作进行了认真研究,确定了总体工作方案,并组建了标准起草工作小组,中国生物发酵产业协会牵头组织该标准的制定工作,山东绿健生物技术有限公司作为主起草单位,负责写出标准文本(第一稿)。按照具体工作时间和进度,2012年6月15日,中国生物发酵产业协会在北京组织召开《结晶塔格糖》行业标准第二次起草工作组会议。针对标准文本(第一稿)进行讨论,会后,综合各方意见,整理修改成标准文本(第二稿)。之后,进行了大量样品检验,完成数据汇总分析,为标准方法的确定提供了有力依据,标准名称调整为《塔

酶活测定方法

酶活测定方法 还原法 酶与底物在特定的条件下反应,酶可以促使底物释放出还原性的基团。在此反应体系中添加 化学试剂,酶促反应的产物可与该化学试剂发生反应,生成有色物质。通过在特定的波长下 比色,即可求出还原产物的含量,从而计算出酶活力的大小。 色原底物法 通过底物与特定的可溶性生色基团物质结合,合成人工底物。该底物与酶发生反应后,生色基团可被释放出来,用分光光度法即可测定颜色的深浅,在与已知标准酶所做的曲线比较后,即可求出待测酶的活力。 粘度法 该法常用于测定纤维素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶的活力。木聚糖和β-葡聚糖溶液通常 情况下可形成极高的粘度,当酶作用于粘性底物时木聚糖和β-葡聚糖会被切割成较小的分子 使其粘度大为降低。基于Poiseuille定律我们知道,只要测定一定条件下溶剂和样品溶液的运动粘度,便可计算特性粘数,并以此来判断酶的活力。 高压液相色谱法 酶与其底物在特定的条件下充分反应后,在一定的色谱条件下从反应体系中提取溶液进行 色谱分析,认真记录保留时间和色谱图,测量各个样的峰高和半峰高,计算出酶促反应生成物 的含量,从而换算出酶活力的数值。 免疫学方法 常用于酶活性分析的免疫学方法包括:免疫电泳法、免疫凝胶扩散法。这两种方法都是根据酶与其抗体之间可发生特定的沉淀反应,通过待测酶和标准酶的比较,最终确定酶活力。 免疫学方法检侧度非常灵敏,可检侧出经过极度稀释后样品中的酶蛋白,但其缺点是不同厂 家生产的酶产品需要有不同特定的抗体发生反应。 琼脂凝胶扩散法 将酶作用的底物与琼脂混合熔融后,倒入培养皿中或载波片上制成琼脂平板。用打孔器在 琼脂平面上打出一个约4-5mm半径的小孔。在点加酶样并培养24h以后,用染色剂显色或用展开剂展开显出水解区,利用水解直径和酶活力关系测定酶活力。 蛋白酶活力的测定

ad木聚糖酶(XYNB)的分离纯化与性质研究

南京工业大学 硕士学位论文 耐热木聚糖酶(XYNB)的分离纯化与性质研究 姓名:孙雷 申请学位级别:硕士 专业:生物化工 指导教师:韦萍;李环 20060601

摘要 木聚糖是植物半纤维素的重要组成部分,在自然界中是继纤维素之后含量第二丰富的再生物质资源。木聚糖结构复杂,它的完全降解需要多种水解酶的共同作用。内切-β-1,4-木聚糖酶(1,4-β-D-木聚糖水解酶,EC3.2.1.8)以内切的方式作用于木聚糖的主链,产生不同链长的寡糖及少量的木糖,是木聚糖降解酶系中关键的酶。木聚糖酶的耐高温和热稳定性是工业化应用的理想特性,在生物转化、制浆造纸,食品饲料等工业中存在很大的应用潜力。 本文综述了木聚糖酶的分离纯化技术以及性质和结构研究进展,研究了重组大肠杆菌1020产生的耐热木聚糖酶(XYNB)的纯化方法与性质。 采用不同的破碎方法,对表达的木聚糖酶在细胞中的分布进行分析,确定了表达的耐热木聚糖酶XYNB主要分布中可溶性细胞质中。纯化前对表达的酶进行细胞定位是本论文的一个特色。 XYNB是胞内酶,采用反复冻融和超声波联合的方法破碎,发现对湿菌泥反复冻融三次后,酶的释放量最大;50 mL 20%的菌悬液,采用500 W,间歇时间10 s,超声波破碎15 min后,酶的释放量最大。利用热变性除去杂蛋白,选择变性温度70℃,时间30 min,回收率可达到69.4%,纯化倍数4.9。结合Ni-NTA 亲和层析,采用梯度洗脱方法,一步得到电泳纯XYNB,回收率29.4%,纯化倍数13.4。采用热变性和一步亲和层析分离得到电泳纯的耐热木聚糖酶XYNB,简化了分离纯化步骤,是本论文的一个特色。 酶学性质研究表明XYNB的最适pH在6.5左右,在pH 6.0-10.0能保持最高活力的60%以上,在pH值低于6.0和高于10.0时,活力显著下降。在50-100℃范围内,酶催化活力随着温度的升高不断上升,酶在80-100℃范围内表现出50%以上的酶活力。在pH8.0,70℃,保温6 h后,酶活力变化不大;100℃保温1.5 h 后,残余50%的酶活力。1mmol/L Hg2+显著影响酶活力,其它金属阳离子和EDTA 对酶活的影响不大。XYNB对Oat spelt xylan 酶促反应的K m为0.23 mg/mL,最大反应速度V max为0.36 μmol/(min﹒mL)。 采用生物信息学手段分析XYNB的序列和结构,发现XYNB属于F/10族,与Thermotoga sp. strain FjSS3-B.1的xyn A有85%一致性,与Thermotoga

交通运输企业安全生产标准化建设评价管理办法

交通运输部关于印发《交通运输企业安全生产标准化建设评价管 理办法》的通知 为深入贯彻落实《中华人民国安全生产法》,大力推进企业安全生产标准化建设,现将《交通运输企业安全生产标准化建设评价管理办法》印发给你们,请遵照执行。 交通运输部 2016年7月26日 交通运输企业安全生产标准化建设评价管理办法 第一章总则 第一条为推进交通运输企业安全生产标准化建设,规评价工作,促进企业落实安全生产主体责任,依据《中华人民国安全生产法》,制定本办法。 第二条本办法适用于中华人民国境交通运输企业安全生产标准化建设评价及其监督管理工作。 第三条交通运输部负责全国交通运输企业安全生产标准化建设工作的指导,具体负责一级评价机构的监督管理。 省级交通运输主管部门负责本管辖围交通运输企业安全生产标 准化建设工作的指导,具体负责二、三级评价机构的监督管理。 长江航务管理局、珠江航务管理局分别负责行政许可权限围的长江干线、西江干线省际航运企业安全生产标准化建设工作的指导,具体负责二、三级评价机构的监督管理(以上部门和单位统称为主管机

关)。 第四条交通运输企业安全生产标准化建设按领域分为道路运输、水路运输、港口营运、城市客运、交通运输工程建设、收费公路运营六个专业类型和其他类型(未列入前六种类型,但由交通运输管理部门审批或许可经营)。 道路运输专业类型含道路旅客运输、道路危险货物运输、道路普通货物运输、道路货物运输站场、汽车租赁、机动车维修和汽车客运站等类别;水路运输专业类型含水路旅客运输、水路普通货物运输、水路危险货物运输等类别;港口营运专业类型含港口客运、港口普通货物营运、港口危险货物营运等类别;城市客运专业类型含城市公共汽车客运、城市轨道交通运输和出租汽车营运等类别;交通运输工程建设专业类型含交通运输建筑施工企业和交通工程建设项目等类别;收费公路运营专业类型含高速公路运营、隧道运营和桥梁运营等类别。 第五条交通运输企业安全生产标准化建设等级分为一级、二级、三级,其中一级为最高等级,三级为最低等级。水路危险货物运输、水路旅客运输、港口危险货物营运、城市轨道交通运输、高速公路、隧道和桥梁运营企业安全生产标准化建设等级不设三级,二级为最低等级。 交通运输企业安全生产标准化建设标准和评价指南,由交通运输部另行发布。 第六条交通运输企业安全生产标准化建设评价工作应坚持“政

β-1,3葡聚糖酶检测试剂盒使用说明

β-1,3葡聚糖酶检测试剂盒使用说明 分光光度法货号:BC0360 规格:50管/24样 产品内容: 提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存; 试剂一:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入3mL蒸馏水,充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存; 试剂二:液体42mL×1瓶,4℃保存; 标准品:粉剂×1支,4℃保存,含10mg无水葡萄糖(干燥失重<0.2%),临用前加入1ml蒸馏水溶解,配制成10mg/ml葡萄糖溶液备用,4℃可保存1周,或者用饱和苯甲酸溶液溶解,可保存更长时间。 标准品准备:将标准品用蒸馏水稀释至1、0.8、0.6、0.4、0.2mg/ml。 产品说明: β-1,3-GA(EC3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆境条件下,可诱导细胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。 β-1,3-GA水解昆布多糖,内切β-1,3-葡萄糖苷键,产生还原末端,通过测定还原糖生成速率,来计算其酶活性。 自备仪器和用品: 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤: 粗酶液提取: 按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆。12000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 测定步骤: 1、分光光度计预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。 2、样本测定(在1.5mL EP管中依次加入下列试剂): 试剂名称(μL)测定管对照管标准管(葡萄糖溶液)样本或标准液100100100蒸馏水100100 试剂一100 充分混匀,放入37℃水浴60min。 试剂二600600600 充分混匀,沸水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却,540nm处记录各管吸光值A,如果吸光值大于2,可以用蒸馏水稀释后测定(计算公式乘以相应稀释倍数),ΔA=A测定-A对照。每个测定管需设一个对照管。 β-1,3-GA活性计算: 根据标准管吸光度(x)和浓度(y,mg/ml)建立标准曲线,将ΔA带入公式中计算出样品中产生的还原糖的含量y值(mg/ml) (1)按蛋白浓度计算 单位的定义:每mg组织蛋白每小时产生1mg还原糖定义为一个酶活性单位。 β-1,3-GA(U/mg prot)=(y×V1)÷(V1×Cpr)=y÷Cpr (2)按样本鲜重计算

标准编制说明

《额定电压26/35kV以上电压等级挤包绝缘电力电缆用半导电缓冲层材料》(征求意见稿)中国标准化协会 标准编制说明 一、工作简况 1.1 任务来源 《额定电压26/35kV以上电压等级挤包绝缘电力电缆用半导电缓冲层材料》团体标准是由中国标准化协会批准立项。文件号中国标协【2019】161号。本标准由上海缆慧检测技术有限公司提出,中国标准化协会归口,上海缆慧检测技术有限公司、福建南平太阳电缆股份有限公司、广州南洋电缆有限公司、杭州电缆股份有限公司、江苏东峰电缆有限公司、江苏亨通高压海缆有限公司、江苏上上电缆集团有限公司、青岛汉缆股份有限公司、上海上缆藤仓电缆有限公司、特变电工山东鲁能泰山电缆有限公司、无锡江南电缆有限公司、扬州曙光电缆股份有限公司、远东电缆有限公司、浙江晨光电缆股份有限公司、宁波东方电缆股份有限公司、中天科技海缆有限公司、重庆泰山电缆有限公司、浙江万马电缆股份有限公司、中辰电缆股份有限公司、中国南方电网广州供电局有限公司、国网电力科学研究院有限公司、国网江苏省电力有限公司电力科学研究院、国网福建省电力有限公司厦门供电公司联合起草。 1.2编制背景与目标 高压电缆缓冲层烧蚀问题困扰了高压电缆界近二十年,标准参与单位组建的“高压电缆缓冲层特性联合研究战略合作平台”,经过二年多时间的专心研究、反复试验验证、事故调研和分析研究,对高压电缆缓冲层烧蚀的成因机理有了充分的了解。虽然JB/T10259《电缆和光缆用阻水带》标准中给出了一些性能项目和指标,但从二十几年的使用情况看,高压电缆出现的缓冲材料发白、烧蚀、电缆击穿等故障现象,与对半导电聚酯纤维缓冲带材料的特性了解不深入有关,特别是在高压电缆结构设计不合理或与其他材料相容性未掌握,以及对缓冲层材料特性或性能指标及其测试条件未明确规定有关。仔细分析JB/T10259标准中阻水带的技术指标要求,

交通行业标准

交通行业标准 《营运客车爆胎应急安全装置技术要求》 征求意见稿 编制说明 二○○九年二月

一、任务来源 根据交通部交科教发“交科教发[2007]397号”文《关于下达2007年交通标准化计划的通知》,制订交通行业标准“营运客车轮胎保险装置技术要求”(标准名称现改为“营运客车爆胎应急安全装置技术要求”),标准制订工作由佛山市南海区骏达经济实业有限公司、交通部公路科学研究院、中国公路学会客车分会、中通客车、厦门金龙客车等单位承担。项目编号为JT2007-05。 二、标准制订的目的、意义 我国机动车保有量已超过1.5亿辆,全国汽车驾驶人超过1亿人。全国公路通车总里程达348万公里,高速公路达4.54万公里。据公安部统计:近几年每年年道路交通事故夺去八、九万人生命。我国仍然是世界上道路交通事故死亡人数较多的国家之一。交通事故中因驾驶员超速行驶而引发的交通事故约占全年事故总数的43.2%。而在高速公路上因汽车爆胎而引发的交通事故约占高速公路交通事故原因的30-40%以上(据统计数字,在广州至深圳的高速公路上因爆胎造成的交通事故约占该路段事故总数的43%)。当车辆行驶至160km/h发生爆胎,发生车毁人亡事故机率几符是接近100%。因此,如何减少道路交通事故,最大限度的减少避免因汽车轮胎爆胎而引发的交通事故(特别是防范由此引发的大客车群死群伤事故),成为大家共同关心的课题。 针对保证汽车轮胎爆胎后能够保证车辆正常行驶一定的距离,先

后有各式相关的产品问世。主要包括:一是通过轮胎自身设有的密封层以及轮胎内部装有的可以流动的软体胶对轮胎的刺孔进行封补,阻止轮胎充气内压下降,从而可维持车辆正常行驶状态;还有就是通过轮胎自身或特殊的轮辋或者在轮辋上增加各种不同材料、不同结构的应支承包证轮胎在爆胎或者轮胎没气状态下的行驶一定的距离,保证车辆能够在轮胎爆胎后停放到安全地带,从而保证人员的安全。由于各类产品功能各异,其能保障爆胎时车辆行驶安全的效能相差甚远,还有的产品是鱼目混珠、良莨不齐,所以通过制定标准来规范该类产品的性能,保证安装的轮胎保险装置能够真正的起到保护车上成员安全的作用。 具体产品实例:该装置选用特种材料,注成圆形的内环和两个半圆形的外环。采用连接机构把外环连接成圆环,使内、外环方便地安装在无内胎轮胎的轮辋上。汽车在正常行驶时该轮胎与一般轮胎无异,一旦轮胎瘪气或爆胎,该装置的外环外表面与轮胎内表面发生接触,替代了紧箍在轮辋上的胎圈内侧与轮胎内表面的直接接触,大大降低了轮胎和轮辋相互牵扯的阻力,使轮辋所受的阻力限制在驾驶员的可控制力之内。同时,由于保险装置的作用,轮胎爆胎前后的静半径变化量小,使得爆胎处的车身下沉量小。由于保险装置的内、外环相对可以转动,轮胎在轮辋的牵动下,外环可绕内环转动,使胎面能随轮辋的转速需要,不断往后滑移,使得车轮的滚动阻力变化较小,增强了行驶的可操作性。(示意图如下)

蛋白酶活力测定方法

酸性蛋白酶产品概述: 蛋白质由氨基酸组成,是自然界中发现的最复杂的有机化合物之一。由盐酸和蛋白酶分解成易被高等动物的肠道和微生物有机体的细胞膜吸收的氨基酸。包括人类在内的每种动物,必须要有足够的蛋白质来维持自身生长,来生成每个细胞所必需的氨基酸,一些特种蛋白质还是某些特殊细胞、腺体分泌物、酶和激素的功能性组成元素。蛋白酶是指一些有催化功能的酶,能够水解(断裂)蛋白质,因此也被称为蛋白水解酶。蛋白水解酶在许多的生理和病理过程中发挥着重要作用,在食品和乳品加工业也有着广泛应用。工作机理 蛋白水解酶制剂本产品能在酸性条件下水解蛋白质食品中的缩氨酸键,释放氨基酸或者多肽。在酒精、葡萄酒、果汁、啤酒、黄油和酱油生产中,添加酸性蛋白酶可澄清发酵液中的雾气。酵母在发酵阶段的生长可以通过悬浮蛋白质转化的氨基酸来加以促进,从而加速发酵并提高产量。本产品是一种酸性蛋白酶制剂,在酸性条件下具有较高活性,由酸性蛋白酶高产菌株——曲霉菌深层发酵而成。它广泛应用于饲料、纺织、废水处理和果汁提纯方面。 酸性蛋白酶(Acid protease )是指蛋白酶具有较低的最适pH,而不是指酸性基团存在于酶的活性部位,酸性蛋白酶的最适PH从2左右(胃蛋白酶)到4左右。从酶的活力-PH曲线分析,在酶的活性部位中含有一个或更多的羟基。这一类蛋白酶中研究最彻底的是胃蛋白酶。(酸性蛋白酶537容易失活)

简介:酸性蛋白酶是由隆科特黑曲霉优良菌种经发酵精制提炼而成,它能在低PH条件下,有效水解蛋白质,广泛应用于酒精、白酒、啤酒、酿造、食品加工、饲料添加、皮革加工等行业。 1、产品规格:,规格有5万u/g~10万u/g 液体型为黑褐色液体,规格有50000u/ml~10000u/ml. 2、酶活力定义:一个酶活力单位是1g酶粉或1ml酶液在40℃,PH3.0条件下,1分钟水解酪素产生1ug酪氨酸为一个酶活力单位(u/g或u/ml) 特性1、温度范围为:最适温度范围为40℃-50℃2、PH为:最适PH范围为2.5~3.5 使用方法 1、白酒工业: 本品用以淀粉为原料的生产酒精及白酒行业,提高出酒率0.25%个酒分,提高发酵速度。 2、食品工业: 食品上用以淀粉改良,提高食品风味、改良品质,因能提高氨基酸含量 3、啤酒生产: 能有效阻断双乙酰生成,缩短啤酒成熟期。 4 饲料添加剂:提高饲料利用率。 5、毛皮软化: 提高上色率,手感丰满,增加毛皮光泽。

木聚糖酶在大肠杆菌中的表达

嗜热内切木聚糖酶基因xyn10B 克隆及其在大肠杆菌中的表达 食品科学093 谢江英 2009016513 自 Horflcoshi 于 1973 年首次报道了来自细菌中的木聚糖酶以来,国外科研工作者已分离出百余种不同微生物来源的木聚糖酶,并将其基因在各种宿主菌中得到活性表达。由于高产野生的微生物生产木聚糖酶时,释放出的产物较为复杂,往往产生大量的纤维素酶,导致在应用中产生不必要的麻烦。如在纸浆预漂白时,纤维素会被意外降解。并且这些酶的性质极为相近,分离纯化的成本较高,不利于木聚糖酶的推广使用,通过基因工程的方法来构建一些高效表达或胞外分泌的工程菌株,将有助于解决木聚糖酶的大量收集和纯化问题。我国对木聚糖酶的研究最近十几年才开始,大多限于天然木聚糖酶高产菌株的筛选,木聚糖酶的分离、纯化及性质分析,仅克隆和表达了少数木聚糖酶基因,而运用基因工程手段产业化生产木聚糖酶制剂在国内还刚刚起步。本研究从Caldicellulosiruptor bescii DSM 6725 分离出木聚糖酶基因 xyn10B,连接于表达载体 pET-28a(+)的NcoⅠ和XhoⅠ酶切位点之间,构建重组表达质粒pET28a-xyn10B,转化大肠杆菌 E.coli BL21(DE3)codon plus-RIL,构建基因工程菌,实现木聚糖酶高效表达。 1 实验材料 1.1 菌株和质粒 (1)热解纤维素菌Caldicellulosiruptor bescii DSM 6725; (2)质粒 pET-28a; (3)大肠杆菌 E.coli BL21(DE3)codonplus-RIL; 1.2 实验材料及主要试剂 1.2.1抗生素 氨苄青霉素,卡那霉素 1.2.2 试剂 胰化蛋白胨、酵母提取物、琼脂糖;PCR引物合成;DNA测序;不同来源底物; 其他常用化学试剂。 1.2.3 工具酶 限制性内切酶Nco I、Xho I、T4DNA连接酶、Taq DNA聚合酶、DNA Marker(DL2000 DNA Marker 和λ-HindⅢ digest DNA Marker)。 1.2.4 试剂盒 PCR产物回收试剂盒,质粒小提试剂盒,细菌基因组提取试剂盒,DNA凝胶回收试剂盒, Ni-柱纯化柱料。 2.培养基及主要试剂配制 (1)TAE buffer:核酸电泳缓冲液 Tris-乙酸 0.04 mol/L EDTA 0.001 mol/L (2)5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液: Tris碱 15.1 g 甘氨酸 94 g SDS 5 g 去离子水补齐至1000ml。 (3)考马斯亮蓝染色液配方 甲醇/水(1 :1,v/v) 90 ml

交通运输行业机动车运行安全技术条件标准规范

GB7258—20×× 代替 GB 7258—2012 机动车运行安全技术条件 Technical specifications for safety of power-driven vehicles operating on roads

GB 7258—20×× 目录 前言 ················································································································ VI 引言 ··············································································································· XII 1 范围 (1) 2 规范性引用文件 (1) 3 术语和定义 (2) 3.1机动车POWER-DRIVEN VEHICLE (3) 3.2汽车MOTOR VEHICLE (3) 3.2.1 载客汽车passenger vehicle (3) 3.2.1.1 乘用车passenger car (3) 3.2.1.2 旅居车motor caravan (3) 3.2.1.3 客车bus (3) 3.2.1.3.1 未设置乘客站立区的客车bus without standing passenger area (3) 3.2.1.3.1.1 公路客车interurban bus (3) 3.2.1.3.1.2 旅游客车touring bus (3) 3.2.1.3.1.3 未设置乘客站立区的公共汽车public bus without standing passenger area (4) 3.2.1.3.1.4 专用客车special bus (4) 3.2.1.3.2 设有乘客站立区的客车bus with standing passenger area (4) 3.2.1.4 校车school bus (4) 3.2.1.4.1 幼儿校车school bus for infants (4) 3.2.1.4.2 小学生校车school bus for primary student (4) 3.2.1.4.3 中小学生校车school bus for primary and middle school student (4) 3.2.1.4.4 专用校车special school bus (4) 3.2.2 载货汽车goods vehicle (4) 3.2.2.1 半挂牵引车semi-trailer towing vehicle (4) 3.2.2.2 低速汽车low-speed vehicle (4) 3.2.2.2.1 三轮汽车tri-wheel vehicle (4) 3.2.2.2.2 低速货车low-speed goods vehicle (5) 3.2.3 专项作业车special motor vehicle (5) 3.2.4 气体燃料汽车gaseous fuel vehicle (5) 3.2.5 两用燃料汽车bi-fuel vehicle (5) 3.2.6 双燃料汽车dual-fuel vehicle (5) 3.2.7 纯电动汽车battery electric vehicle (5) 3.2.8 插电式混合动力汽车plug-in hybrid electric vehicle (5) 3.2.9 燃料电池汽车fuel cell electric vehicle (5) 3.2.10 教练车training vehicle (5) 3.2.11 残疾人专用汽车vehicle for handicapped driving (5) 3.3挂车TRAILER (5) 3.3.1 牵引杆挂车draw-bar trailer (6) I

β-葡聚糖酶是一类分解β-葡聚糖的酶

β-葡聚糖酶是一类分解β-葡聚糖的酶,它主要分解大麦等麦类中以β-1,3和β-1,4混合键连接的β-D-葡聚糖和细菌地衣多糖,也称地衣多糖酶。β-葡聚糖酶主要由植物和微生物产生,在动物饲粮(尤其是含有大麦的饲粮)中添加能有效地解决β-葡聚糖的抗营养作用,降低食糜粘度。 产品规格 型号酶活剂型包装规格 FE303A2000 IU/g粉状20 kg/袋或桶 FE303B4000 IU/g粉状20 kg/袋或桶 FE303C6000 IU/g粉状20 kg/袋或桶 FE303AL2000 IU/ml液体30 kg/桶或200 kg/桶FE303BL4000 IU/ml液体30 kg/桶或200 kg/桶FE303CL6000 IU/ml液体30 kg/桶或200 kg/桶 产品特点 ●采用新型国际专利菌种生产,产品性能优良,使用效果得以保证; ●先进的全自动液体深层发酵技术,领先的后处理加工工艺,保障了产品的 高纯度、高稳定性和良好的均匀度; ●采用基因工程技术改良发酵菌种,使内切酶活性大幅度提高,是普通产品 的2.5~3.5倍; ●有良好的对高温高湿的耐受能力,在饲料制粒条件下,制粒后的酶活可以 保持85%以上,保证了其在颗粒饲料中的使用效果; ●有良好的对动物胃酸、胃蛋白酶、胰蛋白酶和高浓度金属离子的耐受能力, 保证了其在动物生产中的使用效果。 产品功能 ●有效降解植物饲料中的抗营养因子——β-葡聚糖,消除其抗营养作用, 降低食糜粘度,提高饲料养分的消化率和吸收利用率; ●与纤维素酶、木聚糖酶一起作用,有效摧毁植物细胞壁结构,促进植物细 胞内其它营养物质释放,提高原料中营养物质的利用率; ●促进内源酶的分泌,提高消化道中内源酶活性,促进营养物质的消化和吸 收,提高饲料利用率;

标准编制说明的编写内容和要求

《遗体收殓运输消毒卫生技术规范》 行业标准 编制说明 (征求意见稿) 本标准编写组 二〇一七年十一月

《遗体收殓运输消毒卫生技术规范》行业标准编制说明 一、工作简况 为落实民政部、国家标准化管理委员《关于加快推进民政标准化工作的意见》(民发〔2015〕238号),根据《民政部办公厅关于组织申报2017年度民政标准立项的通知》(民办函〔2017〕56号)要求,民政部一零一研究所、吉林省师道文化发展有限责任公司提出了承担《遗体收殓运输消毒卫生技术规范》立项建议稿的编制工作。 根据《关于印发<2017年民政部标准立项计划>的通知》(民人科字〔2017〕2号),经专家会议评审并报部领导同意,民政行业标准《遗体收殓运输消毒卫生技术规范》予以立项。民政部一零一研究所现已编制完成《遗体收敛运输消毒卫生技术规范》(征求意见稿)。 二、行业标准编制原则及确定标准主要内容的原则及主要内容 (一)目的意义 在我国每年死亡900多万人口中,有许多是死于各类感染性疾病。调查显示,目前我国受结核菌感染者约有5.5亿人,现有肺结核病人约450万人,其中传染性肺结核病人150万,每年至少有13万人死于结核病。此外, 据中国疾病预防控制中心统计,截至2016年9月,我国报告现存活艾滋病病毒感染者和病人65.4万例。这些感染者将在未来十年中陆续死亡,并由殡葬行业处理遗体。数量众多的遗体是大量致病菌的栖息地,是殡仪场所的重要污染源。 国外有大量研究表明,殡仪职工尤其是防腐整容工在日常的殡仪服务中不可避免的暴露于多种微生物污染原的感染风险中。目前报导的对殡仪职工有潜在危害的病原体有:结核分枝杆菌,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和化脓性链球菌,乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒,以及嗜肺军团菌、肺炎克雷伯菌、流感嗜血杆菌、致病性大肠埃希氏菌等。据报道,遗体所释放的生物性污染源已经对殡仪职工造成很大的伤害。根据Morgan 等对美国2000多名殡仪人员

毕赤酵母产木聚糖酶实验方案(最终)

重组毕赤酵母产木聚糖酶摇瓶培养实验 一、实验目的 1)熟练摇瓶发酵的操作流程和无菌操作技术。 2)掌握细胞浓度、产物浓度的表征和测定方法。 3)熟悉测定生长曲线和产物生成曲线的方法。 二、毕赤酵母简介 甲醇营养型毕赤酵母(Pichia pastoris) 表达系统是80年代初被开发和研制的一种新型酵母表达系统。40年前,Ogata等人首次发现有些酵母能够利用甲醇作为唯一的碳源和能源进行生长。随后,甲醇营养酵母作为潜在的单细胞蛋白(single cell protein, SCP) 来源立即引起广泛关注,最初将其作为高蛋白的动物饲料在市场上销售。在20世纪70年代,Phillips Petroleum公司开发出毕赤酵母利用甲醇生长的培养基、发酵操作手册和高密度连续培养生产工艺。70年代的石油危机导致了甲烷价格的急剧上升,与此同时,动物饲料蛋白的主要替代源——大豆价格的下降,导致利用甲醇生产SCP在经济上已不再合适。在以后的10年中,PhiLLips PetroLeum公司与SIBIA公司合作开发利用毕赤酵母作为生物体表达外源蛋白的研究,研究人员分离了醇氧化酶(alcohol oxidase, AOX) 的基因和启动子,构建了表达载体和菌株,开发了毕赤酵母基因操作相关技术。成熟的SCP发酵方法的开发,加上醇氧化酶强启动子的可调控表达特性,极大地影响着外源蛋白在毕赤酵母中的高水平表达。1993年,Phillips Petroleum公司委托Invitrogen公司代理毕赤酵母表达系统产品。 毕赤酵母能在以甲醇为唯一碳源的培养基中快速生长,其中醇氧化酶AOX——甲醇代谢途径的关键酶可达细胞可溶性蛋白的30%。而在葡萄糖、甘油或乙醇作为碳源的培养细胞中则检测不到AOX。AOX的合成是在转录水平调控的。其基因启动子具有明显的调控功能,可用于调控外源基因的表达。此调控作用是由一般碳源抑制/解抑制及碳源特殊诱导机制控制的。外源基因在甲醇以外的碳源中处于非表达状态,而在培养液中加入甲醇后,外源基因即被诱导表达。巴斯德毕赤酵母中存在着一种称为微体的细胞器,其中大量合成过氧化物酶,因此也称为过氧化物酶体。

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