2020版《中国药典》重金属检验操作规程

一、目的：

制订详尽的工作程序，规范检验操作，保证检验数据的准确性。

二、范围：

本标准适用于样品重金属的测定。

三、职责：

1、检验员：严格按操作规程操作，认真、及时、准确地填写检验记录；

2、化验室负责人：监督检查检验员执行本操作规程。

四、内容：

本法所指的重金属系指在规定实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质。

1、原理：硫化钠或硫代乙酰胺在弱酸性条件下水解产生硫化氢，与供试品中重金属在实验室条件下所显颜色，与一定的标准铅溶液在同样操作条件下所显的颜色比较。检查供试品中重金属限量。

反应式：Pb2++S2-→ PbS↓

2、操作方法

2.1第一法

2.1.1仪器：纳式比色管（25ml）、电子天平（百分之一）、移液管（5、10ml,A级）。

2.1.2试剂：

2.1.2.1标准铅溶液：称取硝酸铅 0.1599g，置1000ml 量瓶中，加硝酸5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。精密量取贮备液10ml，置100ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml 相当于10μg 的Pb）。本液仅供当日使用。配制与贮存用的玻璃容器均不得含铅。

2.1.2.2醋酸盐缓冲液（pH

3.5）：见EK/SOP-QC8002缓冲液配制操作规程

2.1.2.3稀焦糖溶液：取蔗糖或葡萄糖适量，置瓷蒸发皿中，加热炒成褐色糊状，用水溶解后，贮于滴瓶中备用。

2.1.2.4硫代乙酰胺试液：见EK/SOP-QC8001试液配制操作规程

2.1.2.5维生素C：维生素C（AR）

2.1.3测定方法：

2.1.

3.1除另有规定外，取25ml纳氏比色管三支，甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml 后，加水或各品种项下规定的溶剂稀释成25ml，乙管中加入按各品种项下规定的方法制成的供试液25ml，丙管中加入与乙管相同重量的供试品，加配制供试品溶液的溶剂适量使溶解，再加与甲管相同量的标准铅溶液与醋酸盐缓冲液（pH 3.5)2ml 后，用溶剂稀释成25ml；若供试液带颜色，可在甲管与丙管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之均与乙管、丙管一致；再在甲、乙、丙三管中分别加硫代乙酰胺试液各2ml，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，当丙管中显出的颜色不浅于甲管时，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深。如丙管中显出的颜色浅于甲管，应取样按第二法重新检查。

2.1.

3.2如在甲管中滴加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液,仍不能使颜色一致时，应取样按第二法检查。

2.1.

3.3供试品如含高铁盐影响重金属检查时，可在甲、乙、丙三管中分别加入相同量的

维生素C 0.5～1.0g，再照上述方法检查。

2.1.

3.4配制供试品溶液时，如使用的盐酸超过1ml，氨试液超过2ml，或加入其他试剂进行处理者，除另有规定外，甲管溶液应取同样同量的试剂置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml 与水15ml，微热溶解后，移至纳氏比色管中，加标准铅溶液一定量，再用水或各品种项下规定的溶剂稀释成25ml。

2.2第二法

本法适用于含芳环或杂环的有机药物，经有机破坏后重金属杂质限量检查。

2.2.1仪器：纳式比色管（25ml）、电子天平（百分之一）、移液管（5、10ml,A级）、马弗炉、水浴锅、坩埚、滴管

2.2.2试剂：硫酸（AR）、硝酸（AR）、盐酸（AR）

2.2.2.1第一法中的试剂

2.2.2.2氨试液：EK/SOP-QC8001试液配制操作规程

2.2.2.3酚酞指示液：EK/SOP-QC8003指示剂与指示液配制操作规程

2.2.3测定方法：除另有规定外，当需改用第二法检查时，取各品种项下规定量的供试品，按炽灼残渣检查法(见EK/SOP-QC7009炽灼残渣检查操作规程)进行炽灼处理，然后取遗留的残渣；或直接取炽灼残渣项下遗留的残渣；如供试品为溶液，则取各品种项下规定量的溶液，蒸发至干，再按上述方法处理后取遗留的残渣；加硝酸0.5ml，蒸干,至氧化氮蒸气除尽后（或取供试品一定量，缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5-1.0ml,使恰湿润,用低温加热至硫酸除尽后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，在500-600℃炽灼使完全灰化），放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显微粉红色，再加醋酸盐缓冲液（pH

3.5）2ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加水稀释成25ml，作为乙管；另取配制供试品溶液的试剂，置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶液一定量，再用水稀释成25ml，作为甲管；再在甲、乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2ml，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深。

2.3第三法

本法适用于在碱性溶液中重金属杂质的限量检查。

2.3.1仪器：纳式比色管(25ml)、电子天平(百分之一)、移液管(5ml,A级)、滴管、量筒（20ml）

2.3.2试剂：

2.3.2.1氢氧化钠试液：见EK/SOP-QC8001试液配制操作规程

2.3.2.2硫化钠试液：见EK/SOP-QC8001试液配制操作规程

2.3.3测定方法：除另有规定外，取供试品适量，加氢氧化钠试液5ml与水20ml溶解后，置纳氏比色管中,加硫化钠试液5滴,摇匀,与一定量的标准铅溶液同样处理后的颜色比较，不得更深。

3、注意事项：

3.1标准铅溶液应在临用前精密量取标准铅贮备液新鲜稀释配制，以防止硝酸铅水解而造成误差，配制标准铅溶液使用的玻璃仪器，均不得含有铅。

3.2硫代乙酰胺试液与重金属反应的最佳PH值是3.5，故配制醋酸盐缓冲液(PH3.5)时，要用pH计调节，硫代乙酰胺试液加入量以2ml时呈色最深。硫代乙酰胺试液显色剂的最佳显色时间为2min。

3.3为了便于目视比较，第一、二和三法中的标准铅溶液用量以2ml(相当于20ug的Pb)

为宜，小于lml或大于3ml，呈色太浅或太深均不利于目视比较。

3.4如需将炽灼残渣项下遗留的残渣作重金属检查时，则炽灼温度必须控制500～600℃。实验证明，炽灼温度在700℃以上时，多数重金属盐都有不同程度的损失；以铅为便，为

700℃经6h炽灼，损失达68％。某些供试品(如安乃近，诺氟沙星等)在炽灼时能腐蚀瓷坩埚而带入较多的重金属，应改用石英坩埚或铂坩埚操作。

3.5炽灼残渣加硝酸处理，必须蒸干，将亚硝酸除尽，否则亚硝酸会使硫代乙酰水解生成的硫化氢，因氧化析出乳硫，影响检查。蒸干后残渣加盐酸处理，使重金属转化为氯化物，在水浴上蒸干赶除多余盐酸，加水溶解，加入酚酞指示液1滴，再逐滴加入氨试液，边加边搅拌，直到溶液刚显浅红色为止，再加醋酸盐缓冲液(PH3.5)，使供试液在pH调节至3.5。

3.6供试品中如含有高铁盐，在弱酸性溶液中会使硫代乙酰胺水解生成的硫化氢进一步氧化析出乳硫，影响检查，可加入抗坏血酸将高铁离子还原为亚铁离子而消除干扰。

3.7如供试品自身为重金属的盐，在检查这些药品中的其他重金属时，必须先将供试品本身的金属离子除去，再进行检查。如枸橼酸铁铵中检查铅盐时，利用Fe3+在一定浓度的盐酸中形成HFeCl62，用乙醚提取除去，再调节供试液至碱性，用氰化钾试液掩蔽微量的铁后进行检查；右旋醣酐铁注射液中重金属检查，也是在一定浓度的盐酸中，用醋酸异丁酯提取除去铁盐后进行检查。

3.8药品本身生成的不溶性硫化物，影响重金属检查，可加入掩蔽剂以避免干扰。如硫酸锌和葡萄糖锑钠中铅盐检查，是在碱性溶液中加入氰化钾试液，或在中性溶液中加入酒石酸，使锌离子或锑离子生成稳定的络合物，再依法检查。

3.9为了消除盐酸或其他试剂可能夹杂重金属，故在配制供试品溶液时，如使用盐酸超过1.0ml(或与盐酸1.0ml相当的稀盐酸)或使用氨试液超过2ml，以及用硫酸或硝酸进行有机破坏，或加入其他试剂进行处理者，除另有规定外，对照溶液应取同样量试液蒸干后，依法检查。

五、参考文献：

药品生产质量管理规范（2010年修订）

《中国药典》2020年版通则0821

六、相关文件：

EK/SOP-QC7009炽灼残渣检查操作规程

EK/SOP-QC8001试液配制操作规程

EK/SOP-QC8002缓冲液配制操作规程

EK/SOP-QC8003指示剂与指示液配制操作规程

七、相关记录：

N/A

八、变更记录及原因：