人(Human)胆红素(Bilirubin)ELISA试剂盒说明书

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断

人(Human)胆红素(Bilirubin)ELISA检测试剂盒

使用说明书

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被胆红素(Bilirubin)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的胆红素(Bilirubin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品

1.酶标仪(450nm)

2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱

操作注意事项

1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

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试剂盒组成

名称96孔配置48孔配置备注

微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无

标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无

样本稀释液6mL3mL无

检测抗体-HRP10mL5mL无

20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无

底物B6mL3mL无

终止液6mL3mL无

封板膜2张2张无

说明书1份1份无

自封袋1个1个无

注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、1、2、4、8、16μmol/L

试剂的准备

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法

1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。

2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断

绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

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试剂盒性能

1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。

2.灵敏度:最低检测浓度小于0.1μmol/L。

3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

6.有效期:6个月免责声明

1.试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。

2.严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

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FOR RESEARCH USE ONLY.

NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.

Human Bilirubin ELISA Kit instruction Intended use

This Bilirubin ELISA kit is intended LaboHumanory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at450nm using a spectrophotometer.In order to measure the concentHumanion of Bilirubin in the sample,this Bilirubin ELISA Kit includes a set of calibHumanion standards.The calibHumanion standards are assayed at the same time as the samples and allow the opeHumanor to produce a standard curve of Optical Density versus Bilirubin concentHumanion.The concentHumanion of Bilirubin in the samples is then determined by comparing the O.D.of the samples to the standard curve. Sample collection and storages

Serum-Use a serum sepaHumanor tube and allow samples to clot for30minutes before centrifugation for10minutes at approximately3000×g.Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at-20℃or-80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles Plasma-Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant.Centrifuge samples for30minutes at3000×g at2-8℃within30minutes of collection.Store samples at-20℃or-80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.

Cell culture supernates and other biological fluids-Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at-20℃or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.

Note:The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or granule was allowed.

Materials required but not supplied

1.Standard microplate reader(450nm)

2.Precision pipettes and Disposable pipette tips.

3.37℃incubator

Precautions

1.Do not substitute reagents from one kit to another.Standard,conjugate and microplates are matched for optimal https://www.360docs.net/doc/d78319657.html,e only the reagents supplied by manufacturer.

2.Do not remove microplate from the storage bag until needed.Unused strips should be stored at2-8°C in their pouch with the desiccant provided.

3.Mix all reagents before using.

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Remove all kit reagents from refrigeHumanor and allow them to reach room tempeHumanure(20-25°C)

Materials supplied

Name96determinations48determinations Microelisa stripplate12*8strips12*4strips

Standard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubes

Sample Diluent 6.0ml 3.0ml

HRP-Conjugate reagent10.0ml 5.0ml

20X Wash solution25ml15ml

Chromogen Solution A 6.0ml 3.0ml

Chromogen Solution B 6.0ml 3.0ml

Stop Solution 6.0ml 3.0ml

Closure plate membrane22

User manual11

Sealed bags11

Note:Standard(S0→S5)concentHumanion was followed by:0,1,2,4,8,16μmol/L

Reagent prepaHumanion

20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water1:20.

Assay procedure

1.Prepare all re a g e n t s before starting assay procedure.It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.

2.Add standard:Set Standard wells,testing sample wells.Add standard50μl to standard well.

3.Add Sample:Add testing sample10μl then add Sample Diluent40μl to testing sample well;Blank well doesn’t add anyting.

4.Add100μl of HRP-conjugate reagent to each well,c over with an adhesive strip and incubate for60minutes at37°C.

5.AspiHumane each well and wash,repeating the process four times for a total of five washes.Wash by filling each well with Wash Solution(400μl)using a squirt bottle,manifold dispenser or https://www.360docs.net/doc/d78319657.html,plete removal of liquid at each step is essential to good performance.After the last wash,remove any remaining Wash Solution by aspiHumaning or decanting.Invert the plate and blot it against clean paper towels.

6.Add chromogen solution A50μl and chromogen solution B50μl to each well. Gently mix and incubate for15minutes at37°C.Protect from light.

7.Add50μl Stop Solution to each well.The color in the wells should change from blue to yellow.If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform,gently tap the plate to ensure thorough mixing.

8.Read the Optical Density(O.D.)at450nm using a microtiter plate reader within15minutes.

Calculation of results

1.This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample.

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The standard curve is geneHumaned by plotting the average O.D.(450nm) obtained for each of the six standard concentHumanions on the vertical(Y) axis versus the corresponding concentHumanion on the horizontal(X)axis. 2.First,calculate the mean O.D.value for each standard and sample.All O.D.

values,are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation.Construct the standard curve using graph paper or statistical software.

3.To determine the amount in each sample,first locate the O.D.value on the

Y-axis and extend a horizontal line to the standard curve.At the point of intersection,draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentHumanion.

4.Any variation in opeHumanor,pipetting and washing technique,incubation

time or tempeHumanure,and kit age can cause variation in result.Each user should obtain their own standard curve.

5.The sensitivity by this assay is0.1μmol/L

6.Standard

curve

Storage:2-8℃.

validity:six months.

FOR RESEARCH USE ONLY;NOT FOR THERAPEUTIC OR

DIAGNOSTIC APPLICATIONS!PLEASE READ THROUGH

ENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!

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elisa试剂盒

elisa试剂盒 Elisa试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒IgM 抗体ELISA检测。 目录 1elisa试剂盒简介 2优点 3回收率 4发展 5使用方法 6制备方法 7影响 8检测原理 9操作步骤 10试剂器材 elisa试剂盒简介 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。 然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。 2优点 一、高效、灵敏、特异的抗体; 二、稳定的重复性和可靠性; 三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体; 四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型; 五、节省实验经费。

总结总、直接胆红素的检测方法

血清总胆红素和直接(结合)胆红素测定 目前测定血清胆红素的方法主要有重氮试剂法(包括改良J-G法、二甲亚砜法、二氯苯重氮盐法和2,5二氯苯重氮四氟硼酸盐法等)、胆红素氧化酶法、钒酸盐氧化法、高效液相色谱法、导数分光光度法、经皮胆红素测定法以及直接分光光度法等。 改良咖啡因(J-G)法: 一、实验原理 血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应,生成紫色的偶氮胆红素;在同样条件下,未结合胆红素须有加速剂破坏胆红素氢键后才能与重氮试剂反应。咖啡因、苯甲酸钠作为加速剂,醋酸钠缓冲液可维持反应的PH值同时兼有加速作用。叠氮钠破坏剩余重氮试剂,终止结合胆红素测定管的偶氮反应。最后加入碱性酒石酸钠,在碱性条件下,紫色偶氮胆红素转变为蓝色偶氮胆红素,使最大吸光度由530nm转移到598nm,此时,非胆红素的黄色色素及其它红色与棕色色素产生的吸光度可忽略不计,使测定的灵敏度和特异性增加。最后形成的绿色是由蓝色的碱性偶氮胆红素和咖啡因与对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素混合而成。 二、实验方法 (一)器材 试管,刻度吸管,分光光度计,37℃水浴箱。 (二)试剂 1.咖啡因-苯甲酸钠试剂无水醋酸钠41g,苯甲酸钠37.5g,EDTANa2 0.5g,溶于约500mL 的蒸馏水中,再加入咖啡因25g,搅拌至完全溶解(不可加热),然后加蒸馏水稀释至1000mL,混匀,过滤后放置棕色试剂瓶中,室温保存可稳定6个月。 2. 5g/L 亚硝酸钠溶液:亚硝酸钠5.0g,加蒸馏水溶解并稀释至100mL,若发现溶液呈淡黄色时,应丢弃重配。 3. 5g/L 对氨基苯磺酸溶液:对氨基苯磺酸(NH2C6H4SO3H·H20)5.0g,加于约800mL 蒸馏水中,加浓盐酸15mL,待完全溶解后,加蒸馏水至1000mL。 4. 重氮试剂临用前,取5g/L 亚硝酸钠溶液(试剂2)0.5mL 与5g/L 对氨基苯磺酸溶液(试剂3)20mL 混合。 5. 5g/L 叠氮钠溶液:叠氮钠0.5g,用蒸馏水溶解并稀释至100mL。 6. 碱性酒石酸钠溶液:氢氧化钠75g,酒石酸钠(Na2C4H4O6·2H2O)263g,加蒸馏水溶解并稀释至1000mL,混匀,置塑料瓶中,室温保存可稳定6个月。 7.胆红素标准液可购买,也可按以下方法配制: (1)稀释血清:收集不溶血、无黄疽、清晰的血清过滤作为混合血清稀释剂。取过滤血清1.0ml,加生理盐水24ml,混匀。在分光光度计中,以比色杯光径1cm,波长414nm,用生理盐水调零,读取的吸光度应小于0.100,波长460nm 处读取的吸光度应小于0.040。(2)171umol/L胆红素标准液:称取符合标准的胆红素(MW:584.68)10mg,加入二甲基亚砜1ml,玻棒搅匀,加入0.05mol/LNa2CO3溶液2ml,使胆红素完全溶解。移入100ml 容量瓶,用稀释血清洗涤数次并移入容量瓶中,缓慢加入0.1mol/LHCl溶液2ml(边加边缓慢摇动,切勿产生气泡),最后用稀释血清稀释至100ml。避光,4℃保存,三天内有效,最好当天绘制标准曲线。 (三)步骤 1. 取试管3支,标明总胆红素管、结合胆红素管和空白管,然后按下表操作: 试剂(ml) 总胆红素管结合胆红素管空白管 血清0.2 0.2 0.2

大鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒说明书

大鼠皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析试剂盒 使用说明书 厦门慧嘉生物科技有限公司 本试剂盒仅供体外研究使用! 预期应用 ELISA法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关生物液体中皮质醇(Cortisol)含量。 实验原理 用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗皮质醇(Cortisol)抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗皮质醇(Cortisol)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的皮质醇(Cortisol)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。ELISA法 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板:一块(96孔) 2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上, 然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为180 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成180 ng/ml,90 ng/ml,45 ng/ml,22.5 ng/ml,11.25 ng/ml, 5.63 ng/ml,2.82 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。 如配制90 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 180 ng/ml的上述标准品加入含有 0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 3. 样品稀释液:1×20ml。 4. 检测稀释液A:1×10ml。 5. 检测稀释液B:1×10ml。 6. 检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算 好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 7. 检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶 液A。 8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 11. 覆膜:5张 12. 使用说明书:1份 自备物品 1. 酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热) 2. 微量加液器及吸头,EP管 3. 蒸馏水或去离子水,全新滤纸

总胆红素测定试剂盒(钒酸盐氧化法)产品技术要求meigaoyi

总胆红素测定试剂盒(钒酸盐氧化法) 适用范围:用于体外定量检测人血清中总胆红素的浓度。 1.1包装规格 a) 试剂1:2×60ml,试剂2:2×15ml; b) 试剂1:4×60ml,试剂2:4×15ml; c) 试剂1:3×80ml,试剂2:3×20ml; d) 试剂1:2×40ml,试剂2:2×10ml; e)试剂1:2×400ml,试剂2:2×100ml; f)试剂1:2×72ml,试剂2:2×18ml; g)试剂1:12×16ml ,试剂2:12×4ml; h)试剂1:1×40ml,试剂2:1×10ml。 1.2主要组成成分 试剂1主要成成组分 试剂2主要组成成分 2.1 外观和性状 2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏;外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。 2.1.2 试剂1应为无色或淡黄色透明溶液;试剂2应为无色或淡黄色透明溶液。

2.2 净含量 应不低于试剂瓶标示装量。 2.3 试剂空白吸光度 在450nm波长下,测定试剂空白吸光度,应≤0.05。 2.4 分析灵敏度 测试550 umol/L的被测物时,吸光度变化(ΔA)应不低于0.15。 2.5 准确度 测定国家标准品(YY90377),测定值与靶值相对偏差不超过±10%。2.6 精密度 2.6.1批内精密度 批内精密度应不大于5%。 2.6.2批间差 抽取3个不同批号试剂,对两个浓度样品进行重复检测,批间差应不大于10%。 2.7 线性 2.7.1 在[3,628]umol/L区间内,线性回归的相关系数(r)应不低于0.990; 2.7.2 (50,628]umol/L区间内,相对偏差不超过±15%。 2.7.3 [3,50]umol/L区间内,绝对偏差不超过±7.5umol/L。 2.8 稳定性 该产品在2℃~8℃条件下贮存有效期为18个月,取效期末的产品进行检测,应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7之规定。

总胆红素测定试剂盒(重氮盐法)产品技术要求艾威德

总胆红素测定试剂盒(重氮盐法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中总胆红素的含量。 1.1 包装规格 a) 试剂1:1×20mL 试剂2:1×5mL b) 试剂1:2×40mL 试剂2:1×20mL c) 试剂1:4×60mL 试剂2:2×30mL d) 试剂1:2×80mL 试剂2:2×20mL 1.2 主要组成成分 1.2.1试剂1主要组分 三羟甲基氨基甲烷缓冲液100 mmol/L 氨基磺酸30 mmol/L 二甲基亚砜10 mmol/L 表面活性剂及稳定剂适量 1.2.2试剂2主要组分 三羟甲基氨基甲烷缓冲液100 mmol/L 亚硝酸钠60 mmol/L 表面活性剂及稳定剂适量 2.1 外观 试剂1应为无色透明液体,试剂2应为无色或淡黄色透明液体。 2.2 试剂装量 应不低于试剂瓶标示装量。

2.3 试剂空白吸光度 在546nm处测定试剂空白吸光度,应≤0.5。 2.4 分析灵敏度 测定TBIL含量为100 μmol/L样本时,其△A应≥0.01。 2.5 线性范围 2.5.1在(0,500)μmol/L范围内,线性回归的确定系数应不低于0.990; 2.5.2测试浓度在(0,50] μmol/L范围内,线性绝对偏差应不超过±5 μmol/L; 测试浓度在(50,500)μmol/L范围内,线性相对偏差应不超过±10%。 2.6 测量精密度 2.6.1重复性:用两个水平质控血清重复测试其变异系数(CV)应不超过5%。 2.6.2批间差:抽取3个不同批号试剂,对同一份样本进行重复测定,相对极差≤10%。 2.7 准确度 在样本中加入一定量的纯品,计算回收率,应在85%~115% 范围内。 2.8 稳定性 取在2℃~8℃条件下贮存达到12个月的试剂进行检测,应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

人(Human)瘦素(LEP)ELISA试剂盒说明书

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断人(Human)瘦素(LEP)ELISA检测试剂盒 使用说明书 检测原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被瘦素(LEP)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的瘦素(LEP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。 样品收集、处理及保存方法 1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。 5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品 1.酶标仪(450nm) 2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 操作注意事项 1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。 2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。 3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。 4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 5.所有液体组分使用前充分摇匀。

总胆红素(TBIL)测定试剂盒(重氮盐法)产品技术要求lideman

总胆红素(TBIL)测定试剂盒(重氮盐法) 适用范围:本产品用于体外定量测定人血清中总胆红素的含量。 1.1规格 试剂1(R1):4×80mL,试剂2(R2):1×16mL; 试剂1(R1):5×60mL,试剂2(R2):1×16mL; 试剂1(R1):3×40mL,试剂2(R2):1× 6mL; 试剂1(R1): 4×80mL,试剂2(R2):4×16mL; 试剂1(R1):5×60mL,试剂2(R2):5×12mL; 试剂1(R1):4×80mL,试剂2(R2):4×20mL; 试剂1(R1):4×60mL,试剂2(R2):4×20mL; 试剂1(R1):5×60mL,试剂2(R2):5×15mL; 试剂1(R1):1×20mL,试剂2(R2):1×3mL。 1.2 组成 表1 试剂组成 2.1 外观

液体双试剂:试剂1(R1)为无色澄清液体,试剂2(R2)为无色澄清液体。 2.2 净含量 液体试剂的净含量不得低于标示体积。 2.3 空白吸光度 在37℃、(546 nm±10%范围内的)波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应<0.1 ABS。 2.4 分析灵敏度 浓度为84.9μmol/L时,吸光度变化范围在(0.2-0.5)之间。 2.5 线性范围 在[0 -340]μmol/L线性范围内,线性相关系数r2 ≥0.996。在(100–340]μmol/L范围内的相对偏差≤10%;测定结果[0-100]μmol/L时绝对偏差≤10μmol/L。 2.6 精密度 试剂盒测试项目精密度 CV< 6%。 2.7 批间差 不同批号之间测定结果的相对极差应< 10%。 2.8 准确度 相对偏差:用参考物质配制一定浓度的溶液作为样本进行检测,其测量结果在(100–340]μmol/L范围内的相对偏差≤10%,在[0-100]μmol/L范围内的绝对偏差≤10μmol/L。 2.9稳定性

人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)ELISA检测试剂盒说明书

人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)ELISA检测试剂 盒说明书 本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆 樊克生物专业供应: 使用目的: 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)含量。 试验原理: CX3CR1试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知CX3CR1浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板 内进行检测。先将CX3CR1和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合 的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中CX3CR1的浓度呈比例关系。 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制 96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型 塑料膜板盖1块半块即用型 标准品:80ng/ml 1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀 稀 空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型 标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型 生物素标记的抗CX3CR1抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型 洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀 释 底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型 自备材料 1.蒸馏水。 2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。 3.振荡器及磁力搅拌器等。 安全性 1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

总胆红素测定试剂盒(重氮法)

总胆红素测定试剂盒(重氮法) 一、胆红素的代谢 正常人血中胆红素来源有以下几种 (1)大部分来自于衰老RBC破坏后的Hb衍化而成 (2)小部分来自于非Hb的血红素蛋白质的血红素辅基分解,即分路胆红素 (3)极少部分来自于骨髓无效造血所产生的胆红素 胆红素与ALB结合后为肝细胞摄取并转变为水溶性的结合 胆红素,排至胆汁中,结合胆红素在肠道中被细菌作用还原成尿胆原,在肠道被吸收入门静脉,大部分肠肝循环,另一部分入体循环,经肾排泄入尿。 因此,在胆红素代谢的上述途径中有任一环节受阻,均可导致结合或非结合胆红素升高而产生黄疸。 二、胆红素测定的意义 测定胆红素有助于鉴别溶血性黄疸,肝细胞性黄疸及梗阻性黄疸 联合其它检测项目还可鉴别肝内淤胆和肝外梗阻性黄疸 溶血性黄疸肝细胞性黄疸梗阻性黄疸 血浆总胆红素(mg/dl)<5 1-70 不完全梗阻10~15,完全梗阻20~30

未结合胆红素高度增加增加增加 结合胆红素正常增加高度增加 尿胆素定性阴性阳性强阳性 尿中胆素原增多不定或升高减少或消失 粪中胆素原增多减少减少或消失 三、测定原理 血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应产生偶氮胆红素,所以称为直胆,又称1min胆红素测定,非结合胆红素测定时要以咖啡因、苯甲酸钠为加速剂破坏胆红素氢键再与重氮试剂反应,抗坏血酸破坏剩余重氮试剂,加入碱性酒石酸钠使最大吸光度由530nm转到598nm,非胆红素的黄色色素及其它红色与棕色色素产生的吸光度降至可忽略不计,使灵敏度和特异性升高,最后形成的绿色是由兰色的碱性偶氮胆红素和咖啡因与对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素混合而成。 试剂:(1)咖啡因(2)碱性酒石酸钠液(3)亚硝酸钠液 (4)对氨基苯磺酸溶液(5)重氮试剂(将3、4混合) (6)5g/L NaN3 (7)胆红素标准液 操作: 总胆管结合管对照管

人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒

人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试 剂盒 人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒 产品规格:96T/48T。 供应商:上海乔羽生物有限公司 上海乔羽有限公司,有elisa试剂盒,抗体,培养基 人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒其主要特点如下 专一性强:抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。 灵敏度高:由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。 人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。 1.标准品复溶:试剂盒提供6管标准品,每管已标定浓度,并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL 样本稀释液,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动助其溶解,使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。 2.20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。 人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒试剂的准备: 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。 ELISA试剂盒的优势: 全面——混合8 种不同的常见抗原,对自身免疫性疾病进行全面筛查。

实验十八血清胆红素测定(改良j-g法)

实验十六血清胆红素测定 (改良J-G法) 【目的】 1.熟悉血清胆红素测定的原理和方法; 2.掌握胆红素测定的正常参考范围及临床意义。 【原理】 血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应,生成偶氮胆红素;未结合胆红素需要在加速剂(咖啡因-苯甲酸钠)作用下,分子内氢键破坏后,才能与重氮试剂反应生成偶氮胆红素。醋酸钠缓冲液保持反应的pH,反应完成后加入终止试剂(叠氮钠)以破坏重氮试剂,最后加入碱性酒石酸钠溶液,使颜色不稳定的紫红色偶氮胆红素在咖啡因存在下转化为稳定的蓝色偶氮胆红素,在600nm波长比色,从标准曲线查找总胆红素和结合胆红素含量。 【器材】 试管及试管架、吸管、恒温水浴箱、分光光度计、秒表。 【试剂】 1.咖啡因试剂 称取无水水醋酸钠,苯甲酸钠,乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2),溶于约500ml去离子水中,再加入咖啡因,搅拌使溶解(加入咖啡因后不能加热溶解),用去离子水补足至1L,混匀。过滤后置棕色瓶,室温保存。 2.碱性酒石酸钠溶液 称取氢氧化钠,酒石酸钠(Na2C4H4O6·2H2O),用去离子水溶解并补足至1L,混匀。置塑料瓶中,室温保存。 3.5g/L亚硝酸钠溶液 称取亚硝酸钠,用去离子水溶解并定容至100ml,混匀,置棕色瓶,冰箱保存,稳定期不少于2周。若发现溶液呈淡黄色,应废弃重配。 4.5g/L 对氨基苯磺酸溶液 称取对氨基苯磺酸(NH2C6H4SO3H·H2O),溶于800ml去离子水中,加入浓盐酸15ml,用去离子水补足至1L。 5.重氮试剂

临用前取上述亚硝酸钠溶液和对氨基苯磺酸溶液20ml,混匀即成。 6.L叠氮钠溶液 7.胆红素标准液 (1)目前一般用未结合胆红素配制标准液,此标准品须用含白蛋白的溶剂配制,常用人混合血清,对此血清的要求如下: 收集无溶血、无黄疸、无脂浊的新鲜血清,混合,必要时可用过滤器过滤。取过滤后的血清1ml,加入新鲜L NaCl溶液24ml,混合。在414nm波长,1cm光径,以L NaCl溶液调零点,其吸光度应小于;在460nm的吸光度应小于。 (2)配制标准液的胆红素须符合下列标准:纯胆红素的氯仿溶液,在25℃条件下,光径±,波长453nm,摩尔吸光系数应在60700±1600范围内;改良J-G法偶氮胆红素的摩尔吸光系数应在74380±866。 (3)胆红素标准贮存液(171μmol/L): 准确称取符合要求的胆红素10mg,加入二甲亚砜1ml,用玻璃棒搅拌,使成混悬液。加入L碳酸钠溶液2ml,使胆红素完全溶解后,移入100ml容量瓶中,以稀释用血清洗涤数次并入容量瓶中,缓慢加入L盐酸2ml,边加边摇(勿用力摇动,以免产生气泡)。最后以稀释血请加至刻度。配制过程中应尽量避光,贮存容器用黑纸包裹,置4℃冰箱3天内有效,但要求配后尽快作校正曲线。 【操作】 取试管3支,按下表操作: 表3-20 改良J-G法测定血清胆红素 加人物(m1)总胆红素管结合胆红素管空白管 血清 咖啡因苯甲酸钠试剂- 对氨基苯磺酸-- 重氮试剂- 混匀,准确1分钟 叠氮钠-- 咖啡因苯甲酸钠试剂--

小鼠Ⅰ型胶原 (Col I)-ELISA试剂盒说明书

小鼠Ⅰ型胶原 (Col I)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书 产品编号:E-EL-M0314 (本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!) 声明:尊敬的客户,感谢您选用本公司的产品。本产品选用世界著名生产厂家的原料,采用专业ELISA kit生产技术制造。适用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中天然和重组Col I浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分!如有疑问,请及时联系伊莱瑞特生物科技有限公司。 *: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整)

检测原理: 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠Col I抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的Col I会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠Col I抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠Col I抗体与结合在包被抗体上的小鼠Col I结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值,Col I浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中Col I的浓度。 标本收集: 1.血清:全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集 血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。 2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA.Na2,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可 检测。避免使用溶血,高血脂标本。 3.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞 会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟,取上清检测。 4.细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。 5.其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测 (具体处理方法可参考:https://www.360docs.net/doc/d78319657.html,/news2.asp?tid=477 ) 6.标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。 7.标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃/-80℃冰箱内,避免反复冻融, 1-6月内检测,4℃保存的应在1周内进行检测。 8.如果您的样本中检测物浓度高于标准品最高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做 预实验,以确定稀释倍数)。 试验所需自备物品: 1.酶标仪(450nm波长滤光片) 2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL 3.37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水 4.吸水纸

人elisa试剂盒,人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒使用说明书

人elisa试剂盒,人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆 樊克生物专业供应: 使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本8羟基脱氧鸟苷 (8-OHdG)含量。 试验原理: 8-OHdG试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知8-OHdG浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板 内进行检测。先将8-OHdG和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合 的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中8-OHdG的浓度呈比例关系。 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制 96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型 塑料膜板盖1块半块即用型 标准品:80ng/ml 1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀 稀 空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型 标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型 生物素标记的抗8-OHdG抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型 洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀 释 底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型 自备材料 1.蒸馏水。 2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。 3.振荡器及磁力搅拌器等。 安全性

ELISA试剂盒

1、elisa试剂盒简介 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。ELISA 可用于测定抗原,也可用于测定抗体。 然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。 2 优点 一、高效、灵敏、特异的抗体; 二、稳定的重复性和可靠性; 三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体; 四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型; 五、节省实验经费。 3 回收率 elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度。比如水中总无机氯含量测定,样品水中含有无机氯20mg/L,取100mL 被测水样品,加入0.1mL浓度为10mg/mL的含无机氯标准样品,测定时忽略体积变化,如果测定出样品中无机氯为2.98mg/L,则认为回收率为99%。 4 发展 临床测定技术的发展主要在于方法学的发展,而方法学的发展依托于试剂生产技术不断进步更新和型标记物的应用。目前,分子生物学正在并最终肯定会让我们对整个生命科学有一个全面而彻底的认识,其对免疫测定技术发展的影响也是直接而又有效的,它使我们对以前一些难以检测的生物活性物质的测定变得轻而易举,并且大大提高了检测的灵敏度和特异性。 5 使用方法 (1)血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。 (2)血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。 (3)细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。 (4)组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清

高胆红素血症

高胆红素血症 胆红素是临床上判定黄疸的重要依据,亦是肝功能的重要指标。正常血清总胆红素浓度为1.7~17.1μmol/L,其中一分钟胆红素低于3.4μmol/L。当总胆红素在34μmol/L时,临床上即可发现黄疸;如血清总胆红素超过正常范围而肉眼看不出黄疸,则称为隐性黄疸,黄疸最常见于肝胆疾病,但其他系统疾病也可出现。 目录简介高胆红素血症(黄疸)的分类各种黄疸发生机理及临床特征先天性非溶血性黄疸高胆红素血症(黄疸)的鉴别诊断婴儿高胆红素血症分流性高胆红素血症综合征展开 简介正常胆红素代谢过程,如下: 一、胆红素来源正常红细胞的平均寿命为120天,衰老红细胞所释放的血红蛋白为胆红素的主要来源,占80%~85%,约10%~15%胆红素来自骨髓中未成熟红细胞的血红蛋白,另1%~5%来自肝的游离血红素及含血红素的蛋白质。血红素经微粒体血红素加氧酶催化变为胆绿素,胆绿素由胆绿素还原酶还原为胆红素。 二、胆红素的运输上述胆红素是游离胆红素,因未经肝细胞摄取,未与葡萄糖醛酸结合,故称为非结合胆红素。游离胆红素于血循环中附着于白蛋白上,形成胆红素-白蛋白复合物,运载到肝。 三、胆红素的摄取在肝窦内,胆红素被肝细胞微突所摄取,并将白蛋白与胆红素分离。胆红素进入肝细胞后,由胞浆载体蛋白Y和Z所携带,并转运到光面内质网内的微粒体部分。 四、胆红素的结合游离胆红素在微粒体内经葡萄糖醛酸转移

酶催化,与葡萄糖醛酸基相结合,形成结合胆红素。主要为胆红素葡萄糖醛酸酯,约占结合胆红素总量的75%,其余部分与葡萄糖、木糖、双糖和甘氨酸结合。 五、胆红素的排泄结合胆红素形成后从肝细胞排出的机制,至今仍不甚清楚,可能经高尔基器运输到毛细胆管微突、细胆管、胆管而排入肠道,但无疑是主动转运、限速和耗能过程,其间并有胆汁酸盐、钠离子的参与。结合胆红素进入肠腔后,由肠道细菌脱氢的作用还原为尿胆原,大部分(每日总量约68~473μmol)随粪便排出,称为粪胆原;小部分(10%~20%)经回肠下段或结肠重吸收,通过门静脉血回到肝,转变为胆红素,或未经转变再随胆汁排入肠内,这一过程称为胆红素的“肠肝循环”,从肠道重吸收的尿胆原,有很少部分(每日不超过6.8μmol)进入体循环,经肾排出。 高胆红素血症(黄疸)的分类 一、病因发病学分类 (1)溶血性黄疸;(2)肝细胞性黄疸;(3)胆汁郁积性黄疸;(4)先天性非溶血性黄疸。 二、按胆红素的性质分类 (一)以非结合胆红素增高为主的黄疸 1. 胆红素生成过多 2. 胆红素摄取障碍3. 胆红素结合障碍 (二)以结合胆红素增高为主的黄疸可由于胆红素在肝细胞内转运、排泄障碍或同时有胆红素摄取、结合和排泄障碍引起。 无论哪种分类方法,黄疸的发生归根到底都源于胆红素的某一个或几个代谢环节障碍。

人P16ELISA试剂盒使用说明书

人P16ELISA试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人P16的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人P16水平。用纯化的人P16抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入P16,再与HRP标记的P16抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的P16呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人P16浓度。 样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备

总胆红素测定试剂盒(钒酸盐氧化法)标准化操作规程TB-v-SOP

总胆红素测定试剂盒(钒酸盐氧化法)标准化操作规程 1 目的 规实验室操作,保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。 2 授权操作人经培训且考核通过的实验室检验人员。 3 适用围本试剂适用于体外定量检测人血清或血浆中的总胆红素的浓度。 4 检验方法 本试剂盒采用钒酸盐氧化法测定总胆红素的浓度。 5 检验原理 pH值接近3时,在钒酸盐、加速剂和表面活性剂的作用下,总胆红素被氧化成胆绿素,胆红素在450nm处的特异性吸光度下降。通过测定钒酸盐氧化前后吸光度的变化,即可计算出样品中总胆红素的含量。 6 检验标本要求 6.1标本类型: 使用新鲜血清样本,不要使用溶血及乳糜血样本。 6.2标准运输:室温条件下运输。 7 试剂及配套品 7.1试剂来源 迪瑞医疗科技股份总胆红素试剂盒(钒酸盐氧化法) 7.3试剂的稳定性与贮存: 7.3.1试剂在2?C ~8?C条件下,干燥、避光、密封贮存,有效期12个月。 7.3.2后在2~8℃可稳定30天。 8 实验仪器及性能指标 8.1 实验仪器 迪瑞CS系列全自动生化分析仪 8.2试剂性能指标 8.2.1试剂空白:试剂空白吸光度A≤0.050 8.2.2分析灵敏度:测试1μmol/L被测物时,吸光度变化△A<-0.0002。

8.2.3线性围: 0~684.0μmol/L,线性相关系数r值≥0.9900;线性围在0~187.0μmol/L时,绝对偏差应不超过±28.05μmol/L;线性围在187.0~684.0μmol/L时,相对偏差应不超过±15%。 8.2.4准确度:相对偏差应在±10%。 8.2.5精密度: 重复性: CV≤5.0% 批间差: R≤6.0% 9 校准 9.1校准品来源 迪瑞医疗科技股份生产的临床化学校准血清 9.2校准品的组成:人血清 9.4校准品使用注意事项 9.4.1 若该复溶血清受细菌污染,将会降低许多成分的稳定性。 9.4.2 不同批号的校准血清不能交叉使用,因为批号于批号之间的赋值不同。9.4.3 请勿用嘴直接吸取试剂,避免接触皮肤、眼睛及粘膜,一旦接触,应立即用大量水冲洗。 9.4.4 胆红素对光敏感,因此应将校准血清置于避光冷藏处。复溶的校准血清中的胆红素在2~8℃下至少可以稳定8小时;勿置于15~25℃的温度下保存,勿冷冻。 9.5 校准程序: 使用迪瑞公司的临床化学校准血清,按仪器使用说明书进行校准。 10 质量控制 10.1质控品来源 迪瑞医疗科技股份生产的临床化学质控血清(水平I和水平II) 10.2质控品组成:人血清 10.3质控品存贮 未复溶的校准血清在避光条件下,2~8℃可稳定至标签失效期。 复溶后校准血清在避光条件下,2~8℃可稳定7天;15~25℃可稳定1天;-20℃可稳定30天。 10.4质控品使用注意事项 10.4.1若该复溶血清受细菌污染,将会降低许多成分的稳定性。 10.4.2请勿用嘴直接吸取试剂,避免接触皮肤、眼睛及粘膜,一旦接触,应立即用大量水冲洗。 10.4.3 因批与批之间的质控血清赋值不同,所以不同批号的质控血清不能当做

人脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒说明书

人脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒说明书 本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断 人(Human)脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA检测试剂盒使用说明书 检测原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预 先包被脂多糖结合蛋白(LBP)抗体的包被微孔中,依次加入标本、 标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显 色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成 最终的黄色。颜色的深浅和样品中的脂多糖结合蛋白(LBP)呈正相 关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。 样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞 刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地 分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟 取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于 -20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 自备物品 1. 酶标仪(450nm) 2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3. 37℃恒温箱 操作注意事项 1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的 浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解 后再使用。 2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。 3. 浓度为0 的S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5 倍,最终结果乘以5 才是样本实际浓度。 4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 5. 所有液体组分使用前充分摇匀。 试剂盒组成 名称96孔配置48孔配置备注 微孔酶标板12 孔×8 条12 孔×4 条无 标准品0.3mL*6 管0.3mL*6 管无

总胆红素偏高的防治汇萃

总胆红素偏高的防治 总胆红素 总胆红素total bilirubin,英文缩写TBIL或STB。参考值:3.42~20μmol/L。总胆红素是直接胆红素和间接胆红素二者的总和。总胆红素升高就是人们常说的黄疸。 总胆红素主要用来诊断是否有肝脏疾病或胆道是否发生异常,总胆红素正常值在1.7-20.5μmol/L之间,17.1-34.2μmol/L可视为隐性黄疸;34.2-170μmol/L之间为轻度黄疸;170-340μmol/L为中度黄疸;大于340μmol/L则为重度黄疸。 检查要求 空腹[1]12小时取静脉血。 详细解释 胆红素 胆红素 血清中的[2-4]胆红素大部分来源于衰老红细胞被破坏后产生出来的血红蛋白衍化而成,在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做直接胆红素,未在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做间接胆红素,二者的和就是总胆红素。 临床意义:临床上主要用于诊断肝脏疾病和胆道梗阻,当血清总胆红素有很大增高时,人的皮肤、眼睛巩膜、尿液和血清呈现黄色,故称黄疸。当肝脏发生炎症、坏死、中毒等损害时均可以引起黄疸,胆道疾病及溶血性疾病也可以引起黄疸。以直接胆红素升高为主常见于原发性胆汁型肝硬化、胆道梗阻等。以间接胆红素升高为主常见于溶血性疾病、新生儿黄疸或者输血错误等。肝炎与肝硬化病人的直接胆红素与间接胆红素都可以升高。总胆红素增高,见于中毒性或病毒性肝炎、溶血性黄疸、恶性贫血、阵发性血红蛋白尿症。红细胞增多症、新生儿黄疸、内出血、输血后溶血性黄疸、急性黄色肝萎缩。先天性胆红素代谢异常(Crigler-Najjar综合征、Gilbert综合征、Dubin-Johnson综合征)、果糖不耐受等,以及摄入水杨酸类、红霉素、利福平、孕激素、安乃近等药物。 临床意义 胆红素增高见于: (1)肝脏疾患:急性黄疸型肝炎、急性黄色肝坏死、慢性活动性肝炎、肝硬化等。 总胆红素测定试剂盒 (2)肝外的疾病:溶血型黄疸、血型不合的输血反应、新生儿黄疸、胆石症、肝癌、胰头癌等。 总胆红素偏低的原因:

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