血清检查IGG和IGM的区别

IgG抗体是抗体中分子量最小的一种，可通过胎盘输给胎儿，保护了婴儿最初六个月内免受感染。该抗体产生晚，维持时间长，消失慢，浓度高。血中检测到可作为远期感染指标。

IgM抗体是抗体中分子量最大的一种，不能通过胎盘输给胎儿。抗体产生最早，一经感染，快速产生，在感染初期抗感染起作用。但维持时间短，消失快。当IgM 消失，IgG才开始上升，血中检测到可作为近期感染指标。

你结果只说明曾经感染过，无近期感染。可要小宝宝。

灵长类动物主要有四种免疫球蛋白I gG、IgM、IgA、和IgE。

所有用于检测抗原的免疫学方法经适当改良后，均可用于抗体的检测，如IFA、ELISA、RI A、LA......由于抗原方法的敏感性提高和PCR技术的应用，使得HSV抗体在HSV感染个

体中的不均一性和不稳定性影响了这类指标在临床诊断中的意义，但作为一种感染有关指标，在一定的范围和情况下，仍有必要进行检测和深入研究.目前HSV特异性抗体的检测，主要有IgG、IgM和IgA三种.

1.IgG抗体:HSV-IgG主要用于HSE诊断中，单份血清中IgG抗体水平表示自然免疫状况，在我国HSV-IgG阳性率达90%以上，只有在特定部位如CSF中>1∶80、或神经鞘内HSV -IgG阳性才有提示感染的意义;双份血清中IgG抗体滴度有4倍以上升提高者、或血/CSF

值在20～40∶1，才能诊断HSV近期感染;有些研究者对抗体HSV结构蛋白的特异性抗体

进行了探计，结论不一，还有待进一步研究.IgG抗体在ELISA检测时可以跟IgM同步出现或稍后几天.

2.IgM抗体:HSV-IgM作为HSV感染指标，特别是脑部感染具有一定的临床积极意义.HSV-IgM出现在临床症状发作后第3天直到4周，初次感染者100%阳性、再次感染者48%阳性，虽然IgM抗体常作为许多传染病的早期诊断指标、但在HSV感染中，由于HSV反复

感染均可引起IgM出现，影响了作为初次早期诊断的意义.HSV-IgM在CSF中的检测结果

仍有争议，有的结果发现成人HSE的CSF中IgM滴度比血清中更高;有的则只有新生儿脑

炎CSF中发现IgM抗体存在，成人脑炎CSF中未发现;但有的在HSE和急性硬化性全脑炎

的CSF中未发现IgM抗体.一般认为IgM抗体不能通过血脑屏障，在CSF中检测HSV-Ig

M对HSE具有诊断价值.

3.IgA抗体:HSV-IgA是一种与局部免疫有关的抗体.SIgA可在HSK初次症状出现后第3～5

天的泪液中达到高峰;在女性生殖道疱疹病毒感染的血清中，初次感染者以11SHSV-IgA为主，再次感染则以7S为主.单纯以ELISA检测血清中HSV-IgA出现，在初次感染者中阳性

率为72.4%，再次感染阳性率为81%，所以从血清中检测HSV-IgA来确诊HSV初次感染

是不可能的，但检测分泌物中SIgA作为局部感染的间接诊断指标和免疫指标仍有待进一步研究.

血清铁及血清总铁结合力测定

血清铁及血清总铁结合力测定铁是必需元素，原子式亚铁原子为Fe2＋，正铁原子Fe3＋，原子量为55．84。正常成人体内铁总量为71．63 ～89．54 m mol／L ，其中2／3左右有生理活性，1／3为贮存铁。血清铁正常参考值成年男子11．0 ～30．0μmol／L 成年女子9．0 ～27．0μmol／L 儿童9．0 ～32．2μmol／L 老年7．2 ～14．4μmol／L 血清总铁结合力正常参考值 1．血清TIBC 成年48．3～68．0μmol／L 2．血清UIB C25．0～50．1μmol／L 3．血清铁饱和度男性约为40 ％女性约为35 ％临床意义 1．血清铁增高（1）红细胞破坏增多，如溶血性贫血。（2）红细胞再生或成熟障碍性疾病，如再生障碍性贫血，巨幼红细胞性贫血等。（3）铁的利用率减低，如铅中毒或维生素B6 缺乏引起的造血功能减退。（4）贮存铁释放增加，如急性肝细胞损害、坏死性肝炎等，从受损的肝细胞释出贮存铁，释出铁蛋白。（5）铁的吸收率增加，如血色素沉着症、含铁血黄素沉着症、反复输血治疗或肌肉注射铁剂引起急性中毒症等。

2．血清铁降低（1）机体摄取不足如营养不良、胃肠道病变、消化性溃疡、慢性腹泻等，引起进量不足和吸收量不足，导致缺铁性贫血，血清铁可低于8．9μmol／L 以下。（2）机体失铁增加如失血，包括了大量和隐性失血，特别是肾炎、肾结核、阴道出血、溃疡病等，泌尿生殖道和胃肠道的出血。（3）体内铁的需要量增加又未及时补充、如妊娠，婴儿生长期等也有血清铁减少的倾向。（4）体内贮存铁释放减少，如急性和慢性感染，尿毒症、恶液质等均可引起单核巨噬细胞系统的铁释出减少。（5）某些药物治疗，如促肾上腺皮质激素或肾上腺皮质激素治疗时亦可引起血清铁减少。 3．血清总铁结合力增高（1）慢性缺铁，如缺铁性贫血，促使运铁蛋白的合成增加。（2）单核巨噬细胞系统急性损害，如肝细胞的坏死使得铁蛋白释出增加。 4．血清总铁结合力降低（1）运铁蛋白的丢失如肾病、尿毒症等。（2）运铁蛋白的合成不足如遗传性运铁蛋白缺乏症。（3）铁蛋白缺少见于肝硬化，血色素沉着症等。临床上把血清铁、TIBC 、铁饱和度结合起来观察治疗疾病，临床意义更大，主要疾病见下表表各种疾病时血清铁、TIBC 、铁饱和度的变动情况

血清铁总铁结合力测定的临床意义

血清铁（ＩＲＯＮ）、总铁结合力（ＴＩＢＣ）测定的临床意义人体内含铁量为4克左右，其中三分之二存在于红血球的血红蛋白当中，其余三分之一储备在肝、脾和骨髓中。血清中的铁离子全部与转铁蛋白结合，是铁离子的运输形式，称为血清铁（ＩＲＯＮ或Ｆe）。通常血清中内有三分之一转铁蛋白结合，其余转铁蛋白结合铁的潜力称为不饱和铁结合力（ＵＩＢＣ）。血清转铁蛋白结合最大铁量称为总铁结合力（ＴＩＢＣ）它等于血清铁与不饱和铁结合之和。一、血清铁（ＩＲＯＮ或Ｆe）正常参考值：－μmol/l 成人男子－μmol/l 成人女子－μmol/l 儿童－μmol/l 老人－μmol/l 临床意义： 1、血清铁增高：红细胞破坏增多，如溶血性贫血；红细胞再生成熟障碍性疾病，如再生障碍性贫血，巨幼红细胞性贫血等；铁的利用率减低，如铅中毒或维生素Ｂ6缺乏引起的造血功能减退；贮存铁释放增加，如急性肝细胞损害、坏死性肝炎等；铁的吸收率增加，如血色素沉着症、含铁血黄素沉着症、反复输血或铁剂治疗。 2、血清铁降低：机体摄取不足，如营养不良、胃肠道病、慢性腹泻等；失铁增加，如失血；生理成长所需补充不足，如妊娠、婴儿生长期；铁释放减少，如急性玫慢性感染、尿毒症等；某些药物治疗所致。二、血清总铁结合力（ＴＩＢＣ）正常参考值：—μmol/l 临床意义： 1、血清总铁结合力增高：转铁蛋白合成增加，如缺铁性贫血；转铁蛋白释放增加，如肝细胞坏死。 2、血清总铁结合力降低：转铁蛋白丢失，如肾病、尿毒症等；转铁蛋白合成不足，如遗传性转铁蛋白缺乏症。三、未饱和铁结合力（ＵＩＢＣ）正常参考值：－μmol/l 参考下图可助说明：

NDV抗血清制备及抗体效价测定

NDV抗血清制备及抗体效价测定【实验目的】 1. 学习抗血清制备的基本原理，掌握兔和小鼠免疫注射方法、兔颈动脉放血、小鼠眼球采血技术。 2. 学习双向琼脂扩散实验的基本原理，掌握的基本程序和结果判读方法。 3. 学习酶联免疫吸附实验（ELISA）的基本原理，掌握间接ELISA的基本程序和结果判读方法。 4. 学习免疫印迹实验的基本原理，掌握免疫印迹记实验的的基本程序和结果判读方法。 PartⅠ. NDV抗血清制备一、实验原理将具有免疫原性的物质注入健康动物体内后，抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。待动物血清中存在大量抗体时，采集动物血液，分离析出血清，便得到所需的抗血清（免疫血清或抗体）。由于抗原性物质通常具有多个抗原决定簇，可以刺激机体产生多种抗体形成细胞克隆，合成和分泌各种抗原决定簇的抗体，免疫血清中实际上是含有多种抗体的混合物，所以这种免疫法获得的免疫血清又称为多克隆抗体（Polyclonal antibody，PcAb）。多克隆抗体的制备是一个复杂的过程，为了获得特异性强，效价高的抗血清，除了抗原的因素外，还需注意动物品系的选择、抗原注射的浓度、剂量、次数、间隔时间及注射途径等。对于免疫原性较弱的可溶性抗原(如蛋白质类抗原)要加入佐剂，以增强免疫性。本实验介绍新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）抗血清的制备过程。新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）又称亚洲鸡瘟病毒、伪鸡瘟病毒或禽肺脑炎病毒。在病毒分类学中的位置属于副黏病毒科（Paramyxoviridae）、副黏病毒属（Paramyxovirus）中的一个种。该病毒主要危害鸡、珠鸡和火鸡，在被侵袭的鸡群中迅速传播，强毒株可使鸡群全群毁灭。以新城疫病毒灭活疫苗（Ulster 2C株）灭活油剂苗多种途径免疫兔和小白鼠，制备新城疫病毒抗血清。二、实验仪器、材料和试剂 1. 仪器

血清总铁结合力(Total Iron Binding Capacity,TIBC)试剂盒说明书

货号：MS2811 规格：100管/96样血清总铁结合力(Total Iron Binding Capacity，TIBC)试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。测定意义：血清总铁结合能力指血清转铁蛋白可结合铁的能力，其含量高低与缺铁性贫血、急性肝炎等疾病的发生密切相关。测定原理： Fe2+与菲洛嗪反应形成紫红色化合物，在562nm处有特征吸收峰。碱性条件下，血清转铁蛋白可以与Fe3+结合，剩余未结合的Fe3+可以被还原成Fe2+，此时吸光度A1与未结合Fe3+数量正相关；酸化后，转铁蛋白结合的Fe3+释放，并且进一步被还原 Fe2+，此时吸光度A2与总Fe3+数量正相关。A2减A1与TIBC浓度呈正比。自备实验用品及仪器：天平、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。试剂组成和配制：试剂一：液体 30mL×1 瓶，4℃保存。试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。（临用前根据用量将A液和B液按1:1混合）试剂四：液体 7mL×1 瓶，4℃保存。测定操作表： 1、分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至562nm。血清总铁结合力计算公式：总铁结合能力定义：37℃条件下，每升血清结合Fe3+的μmol数。 a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y=0.5478x+0.0281，R2=0.9981 总铁结合能力TIBC（μmol/L）=（ΔA-0.0281）÷0.5478×V反总÷V样=20.99×（ΔA-0.0281）b. 用 96 孔板测定的计算公式如下第1页，共2页

血清铁总铁结合力未饱和铁结合力铁饱和度

血清铁总铁结合力未饱和铁结合力铁饱和度 SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#

血清铁、总铁结合力、未饱和铁结合力、铁饱和度１．原理：血清铁离子在酸性溶液中与显色剂反应生成红色络合物，其颜色的深浅与铁含量成正比，与标准铁比较可求得血清铁的含量。测铁结合力时，在被检血中加入过量的铁，使血清中的铁蛋白饱和，过剩的铁用碱性碳酸镁吸附，去除，然后用血清铁方法测定。２．试剂：试剂ＲⅠ抗坏血酸，试剂ＲⅡ缓冲液，试剂ＲⅢ显色剂。结合力试剂盒内ＲⅠ铁溶液，ＲⅡ碱性碳酸镁。３．操作：工作液配制：取一定量ＲⅡ复溶一瓶ＲⅠ即为工作液。血清铁测定：再次混匀，分别读取吸光度为终末吸光度。４．计算：Ｒ、Ｓ、Ｂ管分别减自已的试剂空白，其结果用下公式计算Ｆe=(R-B/S-B)标准液浓度。总铁结合力测定：血清测定前要作如下处理：血清加铁溶液１ml混匀1分钟，置室温５－３０分钟再加入２／３量匙的碳酸镁，混匀１分钟，放室温３０－６０分钟，其间振摇５次，然后3000转／分离心５分钟，取上清液按血清铁法进行铁测定。计算：总铁结合力＝（Ｒ－Ｂ／Ｓ－Ｂ）×标准液浓度×３未饱和铁结合力＝总铁结合力－血清铁铁饱和度＝（血清铁／总铁结合力）×１００％５．正常参考值：ＳＩ脐血：~L，出生时：~L；6个月~２岁：~L,２~6岁：~L,６~12岁：~／Ｌ; SI 男：~／L。女：~L。 TIBC男：~L。女~L。 UIBC男：~L。女：~L ISAT男：~。女：~。６．注意事项：标本新鲜无溶血，所有的用器不能含有铁，每次需作试剂空白。７．临床意义：血清铁及总铁结合力的高低受铁的吸收、贮存及利用因素的影响，在不同疾病有相应的变化。血清铁水平代表铁进入和离开循环之间的平衡，总铁结合力于铁贮存减少时开始增高。７．１血清铁增加：见于ＨＡ、ＡＡ、ＭＡ、ＳＡ等。７．２血清铁降低：见于ＩＤＡ、肾病综合症、慢性贫血、Vit 缺乏、先天性转铁蛋白缺乏。

实验室血清学常用检测方法

常用血清学检测方法介绍一、酶联免疫吸附试验诊断技术目前，该项技术已在兽医学上得到广泛的应用，大多数动物传染病都已经研制成ELISA检测方法。 1、酶联免疫吸附试验的原理 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。 2、ELISA的类型根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件，可设计出各种不同类型的检测方法。用于动物疫病检测的ELISA主要有以下几种类型： ①.双抗体夹心法测抗原双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法。在临床检验中，此法适用于检验各种蛋白质、微生物病原体第二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。例如猪瘟病毒检测ELISA、禽流感病毒抗原捕获ELISA，就是根据这种原理设计的。 ②.双抗原夹心法测抗体反应模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物，以检测相应的抗体。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。乙肝HBs的检测常采用本法。本法关键在于酶标抗原的制备，需要根据抗原结构的不同，寻找合适的标记方法。此法中受检标本不需稀释，可直接用于测定，因此其敏感度相对高于于间接法。此外，该方法不受被检动物种属差异的限制。

血清铁、总铁结合力、未饱和铁结合力、铁饱和度

血清铁、总铁结合力、未饱和铁结合力、铁饱和度１．?原理：血清铁离子在酸性溶液中与显色剂反应生成红色络合物，其颜色的深浅与铁含量成正比，与标准铁比较可求得血清铁的含量。测铁结合力时，在被检血中加入过量的铁，使血清中的铁蛋白饱和，过剩的铁用碱性碳酸镁吸附，去除，然后用血清铁方法测定。２．?试剂：试剂ＲⅠ抗坏血酸，试剂ＲⅡ缓冲液，试剂ＲⅢ显色剂。结合力试剂盒内ＲⅠ铁溶液，ＲⅡ碱性碳酸镁。３．?操作：工作液配制：取一定量ＲⅡ复溶一瓶ＲⅠ即为工作液。 ??? 血清铁测定： ? 再次混匀，分别读取吸光度为终末吸光度。 ? ４．计算：Ｒ、Ｓ、Ｂ管分别减自已的试剂空白，其结果用下公式计算 ????? Ｆe=(R-B/S-B)标准液浓度。 ?? 总铁结合力测定： ?? 血清测定前要作如下处理：血清0.5ml加铁溶液１ml混匀1分钟，置室温５－３０分钟再加入２／３量匙的碳酸镁，混匀１分钟，放室温３０－６０分钟，其间振摇５次，然后3000转／分离心５分钟，取上清液0.5ml按血清铁法进行铁测定。 ?? 计算：总铁结合力＝（Ｒ－Ｂ／Ｓ－Ｂ）×标准液浓度×３ ???????? 未饱和铁结合力＝总铁结合力－血清铁 ???????? 铁饱和度＝（血清铁／总铁结合力）×１００％? ??? ５．正常参考值： ????? ＳＩ? 脐血：12.9~42.4umol/L，出生时：26.9~35.8umol/L；6个月~２岁：2.9~21.5umol/L,２~6岁：3.6~22.1umol/L,６~12岁：4.1~22.0／Ｌ; ????? SI 男：14.3~26.9umol／L。女：10.7~25.1umol/L。 ????? TIBC男：40.28~64.44umol/L。女47.44~72.49umol/L。 ????? UIBC男：29.54~53.8umol/L。女：38.49~63.54umol/L ????? ISAT男：0.28~0.5。女：0.25~0.45。 ???? ６．注意事项：标本新鲜无溶血，所有的用器不能含有铁，每次需作试剂空白。７．临床意义：血清铁及总铁结合力的高低受铁的吸收、贮存及利用因素的影响，在不同疾病有相应的变化。血清铁水平代表铁进入和离开循环之间的平衡，总铁结合力于铁贮存减少时开始增高。 ?７．１血清铁增加：见于ＨＡ、ＡＡ、ＭＡ、ＳＡ等。 ?７．２血清铁降低：见于ＩＤＡ、肾病综合症、慢性贫血、Vit 缺乏、先天性转铁蛋白缺乏。７．３总铁结合力降低：见于ＡＡ、ＭＡ、ＨＡ、慢性贫血、肾病综合症、Vit 缺乏、先天性转铁蛋白缺乏。

血清免疫球蛋白测定(一)

血清免疫球蛋白测定(一) B-淋巴细胞受抗原刺激后，引起一系列细胞形态与生化特性变化，转化为淋巴母细胞并增生繁殖，最后演化为浆细胞，合成免疫球蛋白。免疫球蛋白普遍存在于生物体的血液、体液、外分泌液及某些细胞（如淋巴细胞）的细胞膜上。免疫球蛋白是一组具有抗体特性的球蛋白，其分子量很大，含有1000个以上的氨基酸分子，均由其共同抗原的两个相同的轻链（L链）和具有特异性抗原的两个不同的重链（H链）组成。 1分类根据重链的氨基酸组成不同，免疫球蛋白可分为分五类：免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白D（IgD）和免疫球蛋白E（IgE）。 1.1IgG IgG是人体的主要免疫球蛋白，也是唯一能通达胎盘的免疫球蛋白。根据IgG的重链氨基酸顺序的差别，可分为IgG1，IgG2，IgG3，IgG4各亚类。IgG是主要抗感染抗体，对各种细菌、病毒有抗体活性，并有激活补体的作用。 1.2IgA IgA是分泌液中主要抗体，可分为IgA1和IgA2两个亚类。存在于血清中的称血清型IgA，存在于泪液、乳汁、胃肠道、呼吸道和泌尿生殖道分泌液中的称分泌型IgA，对局部粘膜有抗菌和抗病毒作用。 1.3IgM IgM可分为IgM1和IgM2两个亚类。是抗原刺激最先产生的免疫球蛋白，有较强的固定补体、溶解细菌及细胞的能力。IgM是抗革兰氏阴性菌和异体红细胞的主要抗体，也是存在于B淋巴细胞表面的主要免疫球蛋白。 1.4IgD 其作用与过敏反应有关。据报道，IgD可对某些抗原起反应，如青霉素、胰岛素、核抗原、甲状腺抗原等。它存在于B淋巴细胞表面，构成早期的膜受体，具有识别抗原，制动B淋巴细胞的分化作用。 1.5IgE 与I型变态反应有关，具有亲细胞特性。IgE通过Fc段与肥大细胞、嗜碱粒细胞上的Fc受体结合，故属亲同种细胞性抗体。当机体再次接触同种抗原后，过敏原即与结合在细胞表面的IgE作用，使细胞释放介质，引起平滑肌痉挛，血管通透性增加等过敏反应，还具有抗寄生虫感染作用。 2正常参考值 IgG：8～16g/L，IgA：1～4g/L，IgM：0.5～1.9g/L，IgD：0.01～0.4g/L，IgE：0.001～0.009g/L。3临床意义 3.1血清免疫球蛋白降低血清免疫球蛋白水平取决于免疫球蛋白合成和分解代谢的速率以及由体内丢失的程度。血清免疫球蛋白降低可由于合成不足，丢失增多和分解加快引起。合成不足：血清免疫球蛋白降低可由于原发性或继发性合成缺陷所致。原发性免疫缺陷病有性联先天性丙种球蛋白缺乏症、婴儿暂时性丙种球蛋白低下症、伴IgM升高的性联低丙种球蛋白血症、选择性IgA缺乏症、选择性IgM缺乏症、选择性IgG亚类缺乏症等。继发性免疫缺陷病有慢性淋巴细胞性白血病、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症和恶性肿瘤等。丢失增多：从胃肠道丢失的见于溃疡性结肠炎、消化道癌肿、吸收不良综合征、淋巴瘤、肠淋巴管扩张症。从皮肤丢失的有急性灼伤、特异反应性皮炎。从浆膜腔丢失的有胸膜炎、腹膜炎、反复抽胸腹水。从肾脏丢失的有肾小球肾炎（微小病变型、膜性、增殖性）、肾静脉血栓形成、SLE和淋巴瘤。主要是由于蛋白从尿中丢失或毒素抑制免疫球蛋白合成，后者首先影响IgM，其次影响IgA，然后再影响IgG。分

早期肺癌的血清七种自身抗体检测.docx

早期肺癌的血清七种自身抗体检测肺癌是我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，因早期没有明显的临床特征，肺癌早期发现、早期诊断非常困难， 85% 的肺癌患者确诊时已是晚期，失去手术治愈的机会，大大影响了肺癌患者的生存， 5 年生存率只有 16% 。血清肿瘤自身抗体谱检测具有无创、无辐射暴露风险，敏感度高、阳性准确率高达 90% ，能同时检测早期小细胞肺癌与非小细胞肺癌，在肺癌早期发现方面具有重要临床意义。基于循环肿瘤抗体（Circulating Antibody ）分子生物学方法的“七种自身抗体检测”临，床研究表明，其对于 8mm 以下的结节、 8mm 到 20mm 之间肺部结节都有 90% 的阳性准确率。以下就对这 7 种抗体进行简要的介绍： GAGE 7 ：属于肿瘤 /睾丸抗原，只表达于恶性肿瘤以及睾丸组织。该蛋白具有抗细胞凋亡的活性，其自身抗体在鳞状细胞肺癌的早期可检出。 PGP9.5 ：神经元胞质白基因产物 9.5 。其表达不依赖于神经的分化而独立存在，与肿瘤的病理分期密切相关，在原发性肺癌中有大量表达。 CAGE ：只表达于恶性肿瘤和睾丸组织，因此被称为肿瘤/睾丸抗原。它的表达量与细胞周期有关，在癌细胞中激活ERK和p38蛋白并增加肿瘤细胞的扩散。MAGE A1 ：只表达于恶性肿瘤和睾丸组织，因此被称为肿瘤/睾丸抗原。MAGE A1在非小细胞肺癌中表达与较差的预后相关。

SOX2 ：能够诱导肿瘤癌信号EGFR及BCL2L1，促进肺癌细胞的增殖、存活；同时SOX2 还是 I 期肺腺癌预后不佳的独立预测因子，且与复发风险相关。p53 ：是最早发现的抑癌基因之一， p53蛋白能调节细胞周期以及避免细胞癌变的发生。在许多癌症病例中，p53基因突变导致的p53蛋白失活是癌症产生的一个重要步骤。GBU4-5 ：属于ATP结合 RNA 解旋酶，在癌变过程中发挥重要作用，同时具有肿瘤特异性和免疫原性。早期肺癌的七种自身抗体检测，其技术核心是肿瘤免疫应答机理，与传统的抗原类标志物相比，自身抗体肿瘤标志物有天然的高特异性与免疫生物放大信号系统等独特优势，已经成为国际上肿瘤早期诊断临床应用的技术发展趋势。

转铁蛋白与总铁结合力的关系探讨1

转铁蛋白与总铁结合力的相关关系高永生，时丽秀，王耀荣（内蒙古医学院第三附属医院检验科，内蒙古包头014010）[摘要] 目的：比较转铁蛋白(TRF)与总铁结合力(TIBC)两者的测定结果，分析其相关程度，计算出两者的平均比值和回归方程。方法：用正常和贫血、肝病、肾病、营养不良等患者血清样本共67例在同一实验室进行转铁蛋白与总铁结合力的测定，用统计学方法进行相关性分析。结果：两者具有较好的相关性，相关系数r=0.870，平均比值：TIBC / TRF= 22.46。回归方程：TIBC=28.1*TRF-11.45。结论：TRF与TIBC在临床应用中基本一致，TRF的测定可代替TIBC。 [关键词]转铁蛋白；总铁结合力；相关性 A Study on the Relationship of Transferrin and Total Iron Binding Capacity GAO Yongsheng, SHI Lixiu,，WANG Yaorong (The Clinical Laboratory,3rd Affiliated Hospital of Inner Mongolia Medical College, Baotou 014010 China) [Abstract] Objective：To study the results of transferrin and total iron binding capacity (TIBC), and analyze the relativity of them, then work out the average ratio and regression equation of the two variables. Methods：The levels of transferrin and TIBC in 67 cases were tested in the same laboratory,including healthy persons and patients with anemia, kidney or liver diseases and malnutrition.Correlation analysis between the two variables were given by statistical methods. Results：The changes of transferrin and TIBC were positively correlated (r=0.870).The mean ratios of TIBC / TRF= 22.46.The regression equation was established as TIBC=28.1*TRF-11.45. Conclusions：The level of transferrin is well correlated with that of TIBC in clinical application,and the test result of TRF can take the place of TIBC. [Key words]Transferrin; Total iron binding capacity; Relativity 转铁蛋白(Transferrin, TRF)也称运铁蛋白，分子量约86000，为糖蛋白。其电泳位置在β1球蛋白区，TRF由肝细胞合成。每分子TRF可结合两个三价铁原子，大部分Fe+3被运到骨髓用于Hb的合成。小部分运到各组织细胞形成铁蛋白，以及合成肌红蛋白、细胞色素等。血浆中TRF浓度受食物中铁供应的影响，机体在缺铁状态时血浆TRF浓度上升，经铁剂有效治疗可恢复到正常水平。现在许多实验室用免疫比浊法可直接测出TRF的含量。以往血浆总铁结合力（TIBC）的概念是血浆原有的铁（血清铁）与未饱和铁结合力（UIBC）的和。UIBC是在体外向血浆中加入铁盐后，这一定数量的铁与其余未结合铁的TRF全部结合。此时结合的铁量称为UIBC。因此，血清铁、总铁结合力是以测定铁的量来间接推算TRF含量的。因此总铁结合力也即是TRF的铁结合容量，实际反映转铁蛋白的水平。但由于总铁结合力实际上是铁离子和各种蛋白的非特异结合，除与TRF结合外，还可与清蛋白［1］等结合。所以不能依据转铁蛋白的分子量将二者进行简单的相互转换。同时，由于转铁蛋白和总铁结合力的检测方法和原理并不相同，所以二者之间的相关性如何需进一步实验研究。从而确定TRF在多大程度上代替TIBC的测定。笔者对二者的关系进行了实验比较，结果报告如下： 1 材料与方法 1.1标本来源选取本院门诊、住院、体检、发热、肝肾疾患和贫血患者共67例。男33例，女34例，年龄1岁-84岁。空腹采集静脉血，3 000 r/min离心10 min 分离血清。标本无溶血、黄疸和脂血。 1.2仪器及试剂日立7600-020全自动生化分析仪为日本生产。豪迈公司转铁蛋白(Transferrin) 试剂盒及标准液。朗道公司总铁结合力（Total Iron binding capacity）、血清铁（Iron）试剂盒及铁标准液。总铁结合力,转铁蛋白的参考范围分别见各自试剂盒说明书：TIBC(27.8-53.7μmol/L) ；TRF(2.5-4.3 g/L)。 1.3检测方法转铁蛋白采用免疫透射比浊法。总铁结合力采用加入已知过量的铁标准液，使血清中全部的转铁蛋白与铁结合达到饱和状态，再用碳酸镁除去多余

总铁结合力(TIBC)测定试剂盒(Ferene法)产品技术要求ldm

总铁结合力(TIBC)测定试剂盒（Ferene法）适用范围：本产品用于体外定量测定人血清或血浆中总铁结合力的含量。 1.1规格 FE：试剂1（R1）:1×40mL；试剂2（R2）: 1×8ml； UIBC:试剂3（R3）:1×40mL；试剂4(R4): 1×8mL； FE：试剂1（R1）:2×80mL；试剂2（R2）：2×16mL； UIBC:试剂3（R3）:2×80mL；试剂4(R4): 2×16mL; FE：试剂1（R1）:2×60mL；试剂2（R2）: 2×12mL； UIBC:试剂3（R3）: 2×60mL；试剂4(R4): 2×12mL; FE：试剂1（R1）:1×20mL；试剂2（R2）: 1×6mL。 1.2组成 1.2.1试剂组成试剂1(R1)（以下简称R1），试剂2(R2)（以下简称R2）,试剂3(R3)（以下简称R3）,试剂4(R4)（以下简称R4），试剂的组成见表1：表1 试剂组成 2.1 外观液体四试剂 FE： R1:无色透明液体， R2：澄清黄绿色液体。 UIBC： R3:无色到浅绿色液体， R4: 澄清黄绿色液体。 2.2 净含量

液体试剂的净含量不得低于标示体积。 2.3 空白吸光度（R1+ R2）：在37℃、600 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应<0.3 ABS。R4：在37℃、600 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应<0.15 ABS。2.4 分析灵敏度 FE：浓度为102.9μmol/L时，吸光度变化范围在(0.17-0.36)之间。 UIBC：浓度为50μmol/L时，吸光度变化范围在(0.04-0.24)之间。 2.5 线性范围 R1+R2：在[2-120]μmol/L线性范围内，线性相关系数r2≥0.996。在（50-120]μmol/L范围内的相对偏差≤10%；测定结果[2- 50]μmol/L时绝对偏差≤5.0μmol/L。 R3+R4：在[1- 80]μmol/L线性范围内，线性相关系数r2≥0.996。在（20 - 80]μmol/L,范围内的相对偏差≤10%；测定结果[1-20]μmol/L时绝对偏差≤2.0 μmol/L。 2.6 精密度试剂盒测试项目精密度 CV< 6%。 2.7 批间差不同批号之间测定结果的相对极差应< 6%。 2.8 准确度相对偏差：用参考物质作为样本进行检测，测量结果与参考物质靶值的相对偏差应不超过±10%。 2.9稳定性原包装试剂，在（2-8）℃下有效期为18个月，取失效期的试剂盒检测其试剂空白、分析灵敏度、线性范围、精密度、准确度应分别符合2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。

检测口蹄疫血清抗体的方法

检测口蹄疫血清抗体的方法（一）口蹄疫正向间接红细胞凝集试验（间接血凝试验）该试验是以口蹄疫O、A、C、Asia-1型病毒和猪水泡病病毒的细胞培养物（细胞毒）经PEG浓缩，蔗糖密度梯度超离后纯化的病毒抗原分别致敏戊二醛鞣酸处理的绵羊红细胞，而制成的血凝抗原，用于快速检测动物血清中的口蹄疫和猪水泡病特异抗体水平。该法简易、快速、特异、直观、是当前测抗的实用方法。 1．试验材料V型96孔110。医用血凝滴定板、玻璃板（与血凝板大小相同）、微量移液器（10~100微升）、塑料咀、微量振荡器、1毫升/5毫升刻度玻璃吸管、玻璃中试管（内径毫米，长度100毫米）、铝质试管架（40孔）、口蹄疫各型和猪水泡正向间接血凝诊断液、口蹄疫O、A、C、Asia-1型阳性血清、SVD阳性血清、阴性血清、稀释液。 2．试验方法根据试验目的可分为用于鉴别诊断；用于监测疫苗接种动物的抗体水平的检测方法。（1）疫苗接种动物抗体水平监测方法接种何种疫苗就使用何种正向血凝诊断液。 ①稀释待检血清在血凝板上1~8孔各加稀释液50微升，取待检血清50微升加入第1孔，混匀后从中取出50微升加入第2孔，混匀后从中取出50微升加入第3孔……直至第8孔混匀后从该孔取出50微升丢弃，保持每孔50微升的剂量。此时1~8孔的血清稀释度依次为1：2、1：4、1：8、1：16；1：32、1：64、1：128、1：256。 ②稀释阴性对照血清取中试管1支加稀释液毫升，再加阴性血清毫升，充分摇匀阴性血清的稀释度即为1：16。 ③稀释阳性对照血清取中试管5支，第1管加稀释液毫升，第2~5管分别加稀释液毫升，取阳性血清毫升加入第1管混匀后从中取出毫升，加入第2管混匀后从中取出毫升，加入第3管……直至第5管，此时各管阳性血清的稀释度低次为1：32、1：64、1：128、1：256、1：512。 ④滴加对照孔取1：16稀释的阴性血清50微升加入血凝板的第10孔；取1：500稀释的阳性血清50微升加入第11孔；取稀释液50微升加入第12孔。 ⑤滴加正向血凝诊断液取正向血凝诊断液充分摇匀（瓶底应无血球沉淀），每孔各加25微升后立即置微量振荡器上振荡1分钟，取下血凝板放在白纸上观察每孔中的血球是否均匀（孔底应无血球沉淀）。如仍有部分孔底出现血球沉积，应继续振荡直至完全混匀为止。 ⑥静置将血凝板放在室温下（15~30℃）静置2h后判定检测结果，若结果不清晰或来不及判定，也可放置第2天判定。 ⑦判定标准先观察10~12孔（对照孔），第10孔为阴性血清对照，应无红细胞凝集现象，红细胞全部沉入孔底，形成小园点或仅有25%红细胞有凝集（“+”的凝集）；第11孔为阳性血清对照，应出现“++”以上的凝集（50%以上

血清总铁结合力

货号: QS2811 规格：50管/48样血清总铁结合力 (Total Iron Binding Capacity，TIBC)试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。测定意义：血清总铁结合能力指血清转铁蛋白可结合铁的能力，其含量高低与缺铁性贫血、急性肝炎等疾病的发生密切相关。测定原理： Fe2+与菲洛嗪反应形成紫红色化合物，在562nm处有特征吸收峰。碱性条件下，血清转铁蛋白可以与Fe3+结合，剩余未结合的Fe3+可以被还原成Fe2+，此时吸光度A1与未结合Fe3+数量正相关；酸化后，转铁蛋白结合的Fe3+释放，并且进一步被还原成Fe2+，此时吸光度A2与总Fe3+数量正相关。A2减A1与TIBC浓度呈正比。自备实验用品及仪器：天平、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、蒸馏水。试剂组成和配制：试剂一：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。（临用前根据用量将A液和B液按1:1混合）试剂四：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。血清总铁结合力计算公式：标准曲线：y=0.5478x+0.0281，R2=0.9981 总铁结合能力定义：37℃条件下，每升血清结合 Fe3+的μmol数。总铁结合能力 TIBC（μmol/L）=（△A-0.0281）÷0.5478×V 反总÷V 样= 23.731×(A-0.0281) V 反总：反应总体积，1.3mL；V 样：反应中样本体积，0.1mL 第1页，共2页

注意事项： 1. 吸光值大于0.8，样品适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数。 2. 试剂二、试剂三有一定的毒性，操作时请做好防护措施。 3. 检测限为 4.78μmol/L。第2页，共2页

总铁结合力检测试剂盒(亚铁嗪比色法)

总铁结合力(TIBC)检测试剂盒(亚铁嗪比色法) 产品简介：铁是人体必需微量元素，总含量约为3270mg 。铁分布较广，有67.6%的铁作为血红蛋白分子的辅基分布于血红蛋白中，参与铁的运输；骨骼和肌红蛋白中各存在2.59%和4.15%，储存铁约占25.37%血清中铁均以三价铁离子形式与转铁蛋白结合，因此测定血清铁时。 Leagene 总铁结合力(TIBC)检测试剂盒(亚铁嗪比色法)是采用分光光度法以亚铁嗪为底物进行总铁结合力的检测。在酸性介质中与转铁蛋白结合的血清铁从转铁蛋白中解离出来，再被还原剂还原为Fe 2+，后者与亚铁嗪生成紫红色化合物，通过分光光度计检测562nm 处吸光度值，适用于检测血清、血浆样品中的总铁含量，即为总铁结合力(TIBC)本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。组成：操作步骤(仅供参考)： 1、制备处理样品铁溶液和铁标准工作液，4℃避光保存3个月有效。 2、制备样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃冻存，用于TIBC 的检测。离心，取上清液，待用。 3、 TIBC 检测：选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的干燥的试管或者一次性无菌聚乙烯的离心管，按下表操作。编号名称 TC1012 50T Storage 试剂(A): 铁标准(100μg/ml) 3ml 4℃ 避光试剂(B): TIBC 铁标准稀释液 30ml RT 试剂(C): TIBC Assay buffer 60ml 4℃ 试剂(D): 亚铁嗪显色液 3ml 4℃ 避光试剂(E): ddH 2O 10ml RT 试剂(G): 铁吸附剂 3g RT 使用说明书 1份加入物空白管标准管测定管 ddH 2O/ml 0.45 — — 铁标准(2μg/ml)/ml — 0.45 — 上清液/ml — — 0.45 TIBC Assay buffer/ml 1.2 1.2 1.2 混匀，于562nm 处，以空白管调零，读取测定管吸光度(即血清空白)。亚铁嗪显色液/ml 0.05 0.05 0.05

总铁结合力(TIBC)测定试剂盒(Ferene法)产品技术要求sainuopu

总铁结合力（TIBC）测定试剂盒（Ferene法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中的总铁结合力。 1.1 试剂盒包装规格试剂1：2×60ml，试剂2：2×12ml，试剂3：2×60ml，试剂4：2×12ml；试剂1：3×40ml，试剂2：3×8ml，试剂3：3×40ml，试剂4：3×8ml。校准品（选配，冻干品）：1×1ml。 1.2 试剂盒主要组成成分

2.1 外观铁（Fe）：试剂1：无色透明液体；试剂2：淡黄绿色澄清液体。不饱和铁结合力（UIBC）：试剂3：无色至浅绿色液体；试剂4：黄绿色澄清液体。校准品：冻干品，复溶后为淡黄色液体。 2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。 2.3 试剂空白吸光度 Fe（试剂1+试剂2）：在37℃、600nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.3。

UIBC（试剂4）：在37℃、600nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.3。 2.4 分析灵敏度 Fe：测定浓度为30μmol/L样本时，吸光度差值△A应在（0.03，0.11）范围内。UIBC：测定浓度为50μmol/L样本时，吸光度差值△A应在（0.04，0.24）范围内。 2.5 线性范围 Fe：在(5，120) μmol/L线性范围内，r应不小于0.996；在[50，120）μmol/L 范围内的线性相对偏差应不大于±10%；在（5，50）μmol/L的线性绝对偏差应不大于±5.0μmol/L。 UIBC：在(2，80)μmol/L线性范围内，r应不小于0.996。在[20，80）μmol/L 范围内的线性相对偏差应不大于±10%；在（2，20）μmol/L时线性绝对偏差应不大于±2.0μmol/L。 2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于6%。 2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于6%。 2.8 准确度 a．Fe相对偏差：相对偏差应不超过±15%。 b．UIBC与已上市产品进行比对试验：在(2，80) μmol/L线性范围内，与参比试剂的相关系数r应不小于0.975。在[20，80）μmol/L范围内与参比试剂的相对偏差应不大于±10%；在（2，20）μmol/L范围内与参比试剂的绝对偏差应不大于±2.0μmol/L。 2.9 瓶间差（均一性）校准品瓶间变异系数（CV%）应不大于5%。 2.10 含水量（冻干品）校准品水分含量应不大于5%。 2.11 校准品溯源性

免疫荧光法IFA检测人血清IgG抗体

附件3 免疫荧光法（IFA）检测人血清IgG抗体试验材料：（1）抗原片：家鼠型和姬鼠型汉坦病毒标准毒株感染Vero E6或Vero细胞制备，低温干燥保存；（2）阳、阴性对照：单克隆抗体或确诊阳性患者恢复期血清（阳性对照）、阴性血清；（3）羊抗人（或兔抗人）IgG荧光抗体；（4）常用稀释液：pH7.2～7.4PBS、伊文思兰等；（5）荧光显微镜。检测步骤：（1）用pH7.4，0.02mol/L PBS稀释待检血清，从1:20开始做2倍或4倍连续稀释至需要的稀释度。（2）取出抗原片，用蒸馏水漂洗后，冷风吹干。（3）用加样器依次从高稀释度到低稀释度逐个加入已稀释的待检血清，加入量以覆盖细胞抗原面为准（若为双份血清，最好上排为急性期血清，下排为恢复期血清），在37℃水浴箱湿盒孵育30～40分钟（每次试验同时设阳、阴性对照）。（4）用PBS震荡洗涤3次，每次5分钟，再用蒸馏水洗涤1次脱盐，冷风吹干。（5）用含1：3万的伊文思兰PBS按工作浓度稀释荧光结合物，滴加各孔（以覆盖细胞抗原面为准），在37 ℃水浴箱湿盒孵育30分钟，然后同（4）洗涤、漂洗、吹干。（6）荧光显微镜观察结果。结果判断：细胞内病毒特异性荧光为黄绿色颗粒，分布在感染细胞的胞浆内。根据特异性荧光颗粒多少、荧光亮度、阳性细胞在细胞总数中所占比例，可将免疫荧光反应大致区分为1～4个“+”。可参考阳性细胞数：<25%为“+”，25%～50%为“++”，51%～75%为“+++”，>75%为“++++”；无特异性荧光者为“—”（阴性）。检测抗体滴度时，以能观察到明显特异性荧光反应（>“+”）最高血清稀释