2021年中国科学技术大学生命科学与医学部附属第一医院619生物化学与分子生物学考研核心题库之生物化
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1．酶反应的最适温度是什么？是怎样测定的？最适温度(对一种酶反应来说)是不是不变的常数？
【答案】酶反应最适温度的测定过程为：先在一系列温度下(一般可在的范围内，每间隔取一个温度)，测定酶的活性，然后，以活性对温度作图，活性最高的温度即是最适温度。一般情况下，在的范围内，进行的实验已能测得最适温度。如在这样的温度范围内，酶的活性仍在上升，或下降，则实验的温度范围应向更高的温度或更低的温度扩展。
2．现有两支试管，分别装有和海胆DNA，但忘了给它们贴上标签。已知和海胆DNA的碱基、碱基对的含量(见下表)，你怎样鉴别它们？
【答案】由于这两个样品的A=T和G=C对的比例有显著的差别，为区别两者，可以通过CsCl 密度梯度离心进行鉴别。含G=C对量高的样品的浮力密度比含A-T对量高的浮力密度大。当在有适当密度的CsCl溶液中离心时，将会出现两条不同位置的带。密度较大的是，经CsCl 密度梯度离心后，居离心的底部，而密度较小的是海胆DNA，居离心的上部。
3．指出从分子排阻层析往上洗脱下列蛋白质的顺序。分离蛋白质的范围是5000到400000。已知这些蛋白质的相对分子质量如下：
肌红蛋白(马心肌)16900
过氧化氢面(马肝)247500
细胞色素C(牛心肌)13370
肌球蛋白(鳕鱼肌)524800
糜蛋白酶元(牛胰)23240
血清清蛋白(人)68500
【答案】根据分子排阻层析的原理，当不同大小分子的蛋白质混合液借助重力通过层析柱时，比“网眼”大的蛋白质分子不能进入网眼内，而被排阻在凝破颗粒之外，随着洗脱剂在凝胶颗粒外围流出。比网眼小的分子则进入凝胶颗粒之内，随着洗脱剂经凝胶颗粒的网眼内流出。这样由于不同大小的分子所经过路程距离不同而达到分离，大分子物质先被洗脱出来，小分子物质后被洗脱出来。
据此原理，上述蛋白质洗脱次序应根据分子大小而定。其洗脱先后顺序如下：
肌球蛋白一过氧化氢酶一血清清蛋白一糜蛋白酶原一肌红蛋白一细胞色素c
4．试以磺胺为例阐明竞争性抑制的特点及磺胺抑菌的作用机制。
【答案】竞争性抑制剂与底物的结构近似，与底物竞争和酶的活性中心结合，增大底物浓度可降低抑制程度，其抑制特点是增加，不变。磺胺结构和对氨基苯甲酸(PABA)近似，而
PABA是一些细菌合成二氢叶酸(DHF)的原料，因此磺胺与PABA竞争和二氢叶酸合成酶的活性中心结合，DHF合成受抑制。细菌不能直接利用叶酸合成四氢叶酸(核苷酸合成中的一种辅酶)而要由PABA经二氢叶酸合成酶催化合成二氢叶酸，再经还原酶还原为四氢叶酸。因此磺胺类药抑制细菌生长。
5．什么是淀粉糊化？淀粉糊化分几个阶段？影响淀粉糊化的因素有哪些？
【答案】(1)淀粉在高温下溶胀、分裂形成均勾糊状溶液的特性、称为淀粉的糊化(gelatinization)。
(2)淀粉要完成整个糊化过程、必须要经过三个阶段：即可逆吸水阶段、不可逆吸水阶段和颗粒解体阶段。
(3)影响淀粉糊化的因素：①淀粉的种类和颗粒大小；②含水量；③添加物：高浓度糖降低淀粉的糊化，脂类物质能与淀粉形成复合物降低糊化程度，提高糊化温度，食盐有时会使糊化温度提高，有时会使糊化温度降低；④酸度:在的范围内酸度对糊化的影响不明显，当大于
10.0,降低酸度会加速糊化。
6．结合最新的科学发现，RNA的种类并简要说明其生物学功能？
【答案】(1)转运RNA(tRNA)，功能：转运氨基酸；(2)核糖体RNA(rRNA)，功能：参与蛋白质翻译；(3)信使RNA(mRNA)，功能：蛋白质合成模板；(4)核不均一RNA(hnRNA)，功能：成熟mRNA的前体；(5)核内小RNA(snRNA)，功能：参与hnRNA的剪接；(6)核仁小RNA(snoRNA)，功能：参与rRNA的修饰；(7)反义RNA()，功能：对基因的表达起调节作用；(8)微RNA(microRNA)，功能：对基因的表达起调节作用；(9)干扰RNA(siRNA)，功能：对基因的表达起调节作用；(10)核酶(ribozyme)，功能：tRNA、rRNA加工；(11)piRNA，功能：功能未知。
7．试比较糖原磷酸化酶在肝脏及肌肉细胞中的别构调节差异，有何生物学意义？
【答案】高活性的糖原磷酸化酶a在肝细胞中可被葡萄糖抑制，而低活性的糖原磷酸化酶b 在肌细胞中可被AMP激活。这类别构调节差异与各组织中糖原的代谢功能直接相关:肝脏利用糖原以稳定血糖浓度，而肌糖原降解则主要是为肌细胞收缩提供能量。
8．琼脂糖凝胶在低温条件下凝胶较快，而聚丙烯酰胺凝胶在相对较高温度下凝胶较快，为什么？
【答案】从琼脂中除去带电荷的琼脂胶后，剩下的不含磺酸基团、羧酸基团等带电荷基团的中性部分，结构是链状的聚半乳糖，易溶于沸水，在溶胶的时候借助高温煮沸实现琼脂糖分子之
间的交联，温度高时分子热运动能量高，分子运动与碰撞的频率高，这时候的能量大于分子交联的能量，所以是液态。当温度下降至冷却，分子热运动能量逐渐变小，依靠糖基间的氢键引力形成网状结构的凝胶，这时候变为固态。凝胶的网孔大小和凝胶的机械强度取决于琼脂糖浓度。因此琼脂糖凝胶可作为分子筛，常用于凝胶层析和电泳。
聚丙烯酰胺凝胶是丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺在催化剂、加速剂作用下交联形成的，温度高、催化活性强，所以凝聚得快。
9．一寡核苷酸片段含有2mol的腺嘌呤及尿嘧陡、胞嘧啶和鸟嘌呤各1mol。当用Rnase A处理这个片段时，产生两个二核苷酸和一个腺苷。当用RNase T1处理这个片段时，产生一个三核苷酸和一个二核苷酸。这些数据能否有效地确定这个寡核苷酸只有一种结构？为什么？
【答案】根据RNaseA和RNaseTl两种核糖核酸酶的作用特性，我们可以从它们的水解产物推导出该寡核苷酸片段的核苷酸顺序：
用RNaseA处理可得：AC、GU和A或AU、GC和A。
用RNaseT1处理可得(结合RNaseA处理的结果):AUG、CA或ACG、UA。
合并上述分析，可知该寡核苷酸的顺序有两种可能性，即ACGUA或AUGCA。
10．将A(200 000)，B(150 000)，C(75 000)，D(65 000)的4种蛋白质的混合液进行凝胶过滤层析，下图中哪个图是真正的层析图，说明理由。此凝胶的排阻极限是100000左右。伴刀豆球蛋白、血纤维蛋白、香菇多糖分子质量能否一起用葡聚糖凝胶层析柱测定？为什么？
(a)
(b)
(c)