微生物-肠道菌群
肠道菌群
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2019-5-21
肠道菌群
目录
简介
Introduction
1
分类
Classification
2
生理功能
影响因素
Physiological function
influence factor
3
4
CONTENTS
2019-5-21
肠道菌群
简介INTRODUCTION
Part1-简介
INTRODUCTION
肠道菌群
人体肠道的正常微生物。
如双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌等
人体肠道内寄生着10万亿个细菌，它们能影响体重和消化能力、抵御感染和
自体免疫疾病的患病风险，还能控制人体对癌症治疗药物的反应
分类CLASSICFICTION
Part 2-分类
RESEARCH METHODS AND PROCESSES
有益菌
即益生菌。
主要是各种双歧杆菌、乳酸杆菌等。
是人体健康不可缺少的要素，可以合
成各种维生素，参与食物的消化，促
进肠道蠕动，抑制致病菌群的生长，
分解有害、有毒物质等
有害菌数量一旦失控大量生长，就会引发多种疾病，产生致癌物等有害物质，或
者影响免疫系统的功能总结
菌群与宿主之间，菌群、宿主与环境之间，始终处于动态平衡状态中，形成一个互相依存，相互制约的系统。人体在正常情况下，菌群结构相对稳定，对宿主表现为不致病。
中性菌
即具有双重作用的细菌。
如大肠杆菌、肠球菌等，在正常情况下对健康有益，一旦增殖失控，或从肠道转移到身体其他部位，就可能引发许多问题。
生理功能PHYSIOLOGICAL FUNCTION
Part 3-生理功能
PHYSIOLOGICAL FUNCTION
对2型糖尿病的调节
1
2
帕金森症3
解决炎症性肠病的潜在方法
4
癌症
Part 3-1 对2型糖尿病的调节PHYSIOL FUNCTION
?膳食纤维，通常为寡糖或多糖，难以被人体消化吸收?肠道菌群可以通过消化膳食纤维产生短链脂肪酸（SCFA)?SCFA的缺乏是2型糖尿病发生发展的重要因素
结论
?鉴定出了一组特定的短链脂
肪酸产生菌，弄清楚了它们
通过升高短链脂肪酸改善了
2型糖尿病。
?为通过膳食纤维改善肠道菌
群结构来改善2型糖尿病提
供了有力证据
?为靶向肠道菌群以干预其他
疾病的研究提供了重要参考。
1.高膳食纤维干预糖尿病的
效果
2.肠道菌群变化与改善2型糖
尿病之间的关联
3.肠道菌群在基因水平上的
效应
4.精确“钓”出15株缓解2型
糖尿病的细菌
Part 3-2 帕金森症PHYSIOL FUNCTION
帕金森患者与正常人肠道中微生物种群结构存在显著差异
结论
结果显示，患者与健康人的微
生物不仅存在数量与类型上的
显著差别。而且它们在对药物
的代谢方面也存在一定区别。分析197名帕金森症患者肠道微
生物样本，并且将其与130名健
康人的样本进行了比较
Part 3-3 解决炎症性肠病的潜在方法PHYSIOL FUNCTION
?NLRP12的炎症抑制因子导致炎症失控。
?在缺少了NLRP12的临床前研究模型中，某些特定类型的有害细菌的丰度更高而有益细菌相对较少，导致炎症的进一步加剧。
结论
发现添加有益细菌或靶向炎症
信号可以逆转不良循环，有助
于治疗因NLRP12表达下降导致
的炎症性肠病。
1.发现将一种正常生长在肠
道中的有益细菌添加回去
可以帮助终止上述恶性循
环。
2.缺失了NLRP12的小鼠模型，
在结肠中出现更高水平的
炎症，肠道细菌的类型也
会发生改变。
Part 3-4 癌症PHYSIOL FUNCTION
转移性黑色素瘤患者接受免疫疗法前后用16S核糖体RNA测序、宏基因组测序、以及定量PCR的技术对特定菌类进行了分析。。
结论
研究结果表明，共生微生物可
能对人类癌症患者的抗肿瘤免
疫有机械影响。
对免疫疗法有反应的患者体内，
长双歧杆菌，气球菌和屎肠球
菌都更为丰富。
而接受了这些细菌的小鼠对肿
瘤有着更好的控制，T细胞反应
更强，免疫疗法的效果也更好。
影响因素INFLUENCE FACTOR
Part 4-影响因素
INFLUENCE FACTOR
人体自身的因素肠道的酸碱性，胆汁及消化酶的分泌，
肠道的蠕动，肠道黏液的分泌，肠道
表皮的脱离等
饮食可消化的食物与不可消化的纤维、药
物等细菌间相互作用
营养竞争，相互抑制作用，协同作用等
细菌自身因素
细菌的黏附能力，繁殖能力，营养需求量，抗消化酶能力等
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2019-5-21
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大肠菌群及检验 一、大肠菌群介绍 大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在。调查研究表明，大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。粪便是人类肠道排泄物，其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除一般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在（如沙门氏菌、志贺氏菌等），因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被国内外广泛应用于食品卫生工
作中。 二、大肠菌群检验方法：由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，即：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。因此大肠菌群的检测一般都是按照它的定义进行。目前国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准和原国家商检局制订的行业标准。两个标准方法在检测程序上略有不同。 （一）国家标准：国家标准采用三步法，即：乳糖发酵试验、分离培养和证实试验。乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。分离培养：将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上，36±1℃培养18-24h，观察菌落形态。证实试验：挑取平板上的可疑菌落，进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h，观察产气情况。报告：根据证实为大肠杆菌阳性的管数，查MPN表，报告每100ml（g）大肠菌群的MPN值。 具体操作参见GB4789.3-94 《中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》 （二）原国家商检局制订的行业标准，等效采用美国FDA的标准方法，用于对出口食品中的大肠杆菌进行检测。本方法采用两步法：推测试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管LST肉汤。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。证
人体肠道微生物群落与疾病 .82.公共卫生与临床医学201062J】JJPublicHealthandClinicalMedicineV olume6,Number2,May2010 人体肠道微生物群落与疾病 翁幸鐾,糜祖煌 术专家论坛术 通讯作者:糜祖煌(1962一),男(汉族),江苏省无锡市人;1982年毕业于镇江医学院(现改为江苏 大学),研究员,任无锡市克隆遗传技术研究所所长;任公共卫生与临床医学》常务编委,编辑委 员会副主任委员,中国优生与遗传杂志编委,中华检验医学杂志编审专家,现代实用医学杂志编委, 世界感染杂志常务编委,中国人兽共患病学报编委,中国抗生素杂志编委,中华流行病学杂志审稿专 家,中华医学会微免学会支原体学组成员,亚洲支原体组织(AOM)理事;先后在中华检验医学杂 志》,Ⅸ中华医院感染学杂志,中华流行病学杂志》,中国抗生素杂志》,世界感染杂志》 和国外专业期刊发表论着,述评,专家论坛栏目文章共200余篇;主持完成国家自然科学基金项目2
个,省市基金项目多个;参编专着3部.主要研究方向:从事微生物分子鉴定,耐药基因和毒力基因 及菌株亲缘性分析等. 摘要:人体肠道定植的微生物群落绝大多数是无害甚至是有益的,它们就像器官一样行使实质性功能. 一 旦肠道微生物群落异常,就会产生一系列疾病.本文阐述了人体肠道微生物群落的形成和影响因素, 以及微生物群落异常与疾病的关系,并探讨了治疗方案和研究前景 关键词:肠道;微生物群落;异常;疾病;治疗 中图分类号:Q939.121文献标识码:A HumanIntestinalMicrobiotaandDiseasesWENGXing-beM1Zu—huang2(| Departmentof MedicalLaboratory,NingboNO.Hospital,Ningbo,31501~China,2Departme ntofBioinformatics,Wuxi CloneGen—TechInstitu把.Wuxi,214026.Chma1 Abstract:Themajorityofhumanintestinalmicrobiotaareharmlessorevenbene ficialbyperforming functionsessentialforoursurviva1.Shiftsinthemicrobialspeciesthatresideino urintestineshavebeen associatedwi也alonglistofpathogenesis.Thereviewprovidedanoverviewontheformationof
微生物菌群的选择与培养 针对所学的关于水污染治理的有关理念，加之对环境微生物这门课程的理解，此次环境微生物这门课程的设计我选用的微生物菌群是对保健、水产、养殖、种植甚至环保等方面都有益的菌群。 一、有益微生物的概念（“EM”菌群） “EM”是英语Effective和microorganisms的缩写，意为有益微生物群，是日本琉球大学的比嘉夫教授于1983年研制成功的微生物工程技术中综合性最强的新创造。有益微生物群由整个生态系统都存在的五大类微生物（光合细菌、乳酸菌、放线菌、酵母菌、发酵型丝状菌）中的多种有益微生物组成。 这些微生物组合在一个统一体中互相促进，共同组成一个复杂而稳定的具有多元功能的微生物生态系统，在水族箱使用后，可抑制有害微生物，特别是病原菌和腐败菌的活动，从而改善水质，并改善鱼类消化道细菌群落，促进鱼类健康快速生长。其功能要超过硝化细菌和光合细菌。 二、有益微生物群的主要成分 1、光合菌群（好氧型和厌氧型）如光合细菌和蓝藻类。属于独立营养微生物，菌体本身含60％以上的蛋白质，且富含多种维生素，还含有辅酶Ｑ10、抗病毒物质和促生长因子；它以土壤接受的光和热为能源，将土壤中的硫氢和碳氢化合物中的氢分离出来，变有害物质为无害物质，并以植物根部的分泌物、土壤中的有机物、有害气体（硫化氢等）及二氧化碳、氮等为基质，合成糖类、氨基酸类、维生素类、氮素化合物、抗病毒物质和生理活性物质等，是肥沃土壤和促进动植物生长的主要力量。光合菌群的代谢物质可以被植物直接吸收，还可以成为其它微生物繁殖的养分。 2、乳酸菌群（厌氧型）以嗜酸乳杆菌为主导。它靠摄取光合细菌、酵母菌产生的糖类形成乳酸。乳酸具有很强的杀菌能力，能有效抑制有害微生物的活动和有机物的急剧腐败分解。乳酸菌能够分解在常态下不易分解的木质素和纤维素，并使有机物发酵分解。乳酸菌还能够抑制连作障碍产生的致病菌增殖。 3、酵母菌群（好氧型）它利用植物根部产生的分泌物、光合菌合成的氨基酸、糖类及其它有机物质产生发酵力，合成促进根系生长及细胞分裂的活性化物质。酵母菌在有益微生物群中对于促进其它有效微生物（如乳酸菌、放线菌）增殖所需要的基质（食物）提供重要的给养保障。此外，酵母菌产生的单细胞蛋白是动物不可缺少的养分。 4、革兰氏阳性放线菌群（好氧型）它从光合细菌中获取氨基酸、氮素等作为基质，产生出各种抗生物质、维生素及酶，可以直接抑制病原菌。它提前获取有害霉菌和细菌增殖所需要的基质，从而抑制它们的增殖，并创造出其它有益微生物增殖的生存环境。放线菌和光合细菌混合后的净菌作用比放线菌单兵作战的杀伤力要大得多。它对难分解的物质，如木质素、纤维素、甲壳素等具有降解作用，并容易被动植物吸收，增强动植物对各种病害的抵抗力和免疫力。放线菌也会促进固氮菌和VA菌根菌增殖。
EM复合微生物的详细使用方法 一、部分制作方法 １．发酵青贮饲料 玉米秸秆、薯藤、花生藤、甘蔗叶、青草、蒿、苜蓿等，含水量在60-70％之间，均可作为发酵原料。方法：用500 倍ＥＭ有效微生物稀释液喷洒已洗净的容器，再把原料切碎装入，每填高10 厘米喷洒一次ＥＭ有效微生物稀释液，直至装满，然后踏实，尤其要踏实边缘，最后在料面多喷些ＥＭ有效微生物稀释液，盖上塑料薄膜，密封发酵一个月左右，待青贮料发酵成熟有芳香或腌菜味时便可启用。若表层呈黑色或有腐臭味，应把表层弃掉，然后由上而下，逐层取用，用后及时盖严。水分含量适度是影响青贮料质量的重要条件，注意层层之间水分的衔接，不得出现夹干层，（青贮料含水量以手抓拧扭不滴水，松后有明显水份为度）。青贮料饲喂，初期不宜多，畜禽要有适应时间，可掺一部分精料或配合饲料，禽畜适应后逐渐增加用量。母畜怀孕后期不宜多喂。 ２．发酵鸡粪 健康的鲜鸡粪60％（病鸡粪切不可用）、秸秆粉或米糠、麦麸40％掺和成混合料；以混合料500∶EM有效微生物1∶红糖1∶水30 －35％（视干湿度增减水量）混和制作。发酵方法同发酵饲料。成功的鸡粪发酵料酸香而不臭。将发酵的鸡粪料以一定比例掺到日粮中饲喂。仔猪掺和比例以3％－5％为宜，育肥猪可掺入30％，牛可掺至50％。 ３．发酵兔粪 将健康鲜兔粪稍加晾晒后粉碎（病兔粪不可用），按200（兔粪）∶1（ＥＭ有效微生物）∶1?（红糖）加适量水，发酵方法同发酵饲料。夏天经2-3 天，冬天5-7 天，即可散发出酒曲香味且不臭，可喂猪。可略低于鸡粪料掺入的比例。 ４．发酵糟渣（ＥＭ有效微生物可分解乙醇，酒精糟渣作饲料效果良好。） ⑴以提取酒精后的废糟液为原料，回收酒精后，将渣自然冷却，待含水量40％左右，再按酒精糟10：秸秆粒3：麦麸1 的比例混合，按混合料量的5％加入200 倍ＥＭ有效微生物稀释液充分混匀后，装入发酵容器，压实密封4-5天，即成具清香酸甜的褐黄色发酵产品，据检测其粗蛋白含量为25.6％，增加4.4 倍，氨基酸总和为22.8％，增加近4.6 倍。以一定的比例掺和到畜禽日粮中饲喂，畜禽爱吃，生长较快、抗病力增强，毛色亮洁，粪便臭味减轻。⑵以粮食鲜酒糟渣发酵喂母猪、仔猪、育肥猪效果均好，出栏时间可缩短1／5左右。方法是ＥＭ有效微生物1∶红糖1∶混合料1000，混合料中鲜酒糟渣占50％，其余50％为米糠、麦麸、玉米粉、饼粕等，同时掺适量黄豆粉、骨粉、鱼干和盐。发酵方法同上。 ５．制作颗粒料 制粒前，按配料3％的比例喷入10倍ＥＭ有效微生物稀释液，混和均匀，即可制粒。 二、种植业的应用 （1）一般使用方法 1．用ＥＭ有效微生物稀释液浸种、拌种、泡根、叶面喷施和喷洒还田秸秆后翻耕等。2．用ＥＭ有效微生物制作发酵堆肥，施入土中作基肥改良土壤，提高地力（亦可用ＥＭ有效微生物稀释液喷施土壤）。制作方法：就地取原料，如谷糠、杂草、人畜粪便、作物秸秆（切碎）、茎叶、锯木屑均可，最好加些酒槽渣、食用菌基质残渣和饼粕等混合搅拌；按原料总量500-1000：EM有效微生物1：红糖1：清水30-35％（视材料干湿增减水量）的比例，先溶化红糖，倒入水中，再加入ＥＭ有效微生物，然后与原料混合拌匀，堆垛压实，用塑料薄膜或帆布密封，厌氧发酵，经夏10 天、冬15 天发出酒曲香味或出现白色、红色菌丝，表明发酵成功。也可在地上挖一大坑，用500-1000倍ＥＭ有效微生物稀释液先喷湿坑底及四壁，然后每放一层料（20 公分厚）喷一次500 倍ＥＭ有效微生物的稀释液，直到填满大坑，再盖上泥土踩实，
微生物菌群与土壤 一、有益土壤的微生物的类别： 有益土壤微生物除了转变有机质为肥分之外，它对促进植物生长贡献很大，依其功用来分类，可略分如下： 1、固氮菌群（NitrogenFixing Bacteria Seties）：固态自然界氮分 子为氮源，制造肥份。 2、硝酸菌群（Nitrifying BacteriaSeriea）：转变有毒氨气为硝酸 态氮。供植物吸收。 3、溶磷菌群（Phosphoric acidReleasing Series）：解开土壤不溶 性磷酸盐，转为磷，铁，钙肥。 4、酵母菌群（Yeast gtoup Series）：制造维生素，生长促进素， 分解有机物，增加抗病力。 5、乳酸菌群（Lactobacillus Series）：分泌有机酸，提高植物抗 病力。 6、光合成菌群（Photosynthetic Bacteria Series）：制造葡萄糖， 分泌类胡萝卜素，消除硫化氢，氨气（解毒造肥）等有毒物 质产生。 7、放线菌群（Actinomynthetic Bacteria Series）：长期分泌定量 抗生物质，抑制病害。 8、生长菌群（Growth Factors Produoing Bacteria Series）：长期 分泌定量植物生长荷尔蒙，促进根，茎，叶生长。 二、施用有机肥别忘了“土壤微生物”
现今农业局界常有一种错误的观念，就是以为施用鸡粪，猪粪或其他生肥，如鱼粉，米糠之类的有机质就是道地的有机农业了，其实这些生肥材质并不能为植物所吸收，反而造成腐败与病虫害的衍生，有机质必须经过微生物分解成可溶于水的营养分之后，才能为植物所吸收，同时微生物也必须靠这些物质分解时，取得能量与养分才能大量繁殖以发挥其功能，只有当有机物与有益微生物同时并存时，才能使植物体健康成长。因此，有机农业的运用除了施用有机肥外，千万别忘了土壤微生物群。 三、有机物的利害关键： 土壤中除了有益微生物之外，也有病原菌及病虫害的同时存在，这一些微生物同样地会利用有机质来大理繁殖，其结果除了造成作物的病害之外，同时也招来虫害与蚊蝇。因此，有机物的施加必须配合以有益微生物来对抗病原菌才能有助于作物。现今的农地，因为滥用化学农药与肥料，天然的有益土壤微生物都被毒杀尽，而牵强的病原菌则相对地肆决猖獗，在耕地上占其优势，因此如果一味地施加有机物于
E T S复合菌群的作用机理(总 10页) -CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1 -CAL-本页仅作为文档封面，使用请直接删除
ETS复合菌群的作用机理 ETS复合菌群含有100余种有益微生物，其中好氧菌40%，厌氧菌60%。好氧菌由托马斯先生从自然界中提取出的古细菌为主，遗传性质稳定，作用机理明确；厌氧菌来源于在世界生物技术中具有举足轻重地位的法国巴斯德研究所，菌种丰富优质，培养技术成熟。ETS菌群就是通过独特的技术将这两大菌群叠加而成的相互协同、功能全面的复合菌群。 1、固体废料的处理原理 将固体废料，如动物排泄物、植物秸秆、海洋生物残体等按比例堆置，调节好水分后，均匀撒入ETS菌，将其堆肥发酵，经过深加工后成为固体肥料。发酵过程中发生的变化简单叙述如下： 1.1热失活 ETS菌进入堆肥后，会迅速进行繁殖、新陈代谢，使得堆肥在很短时间内温度升至60-70℃，甚至80℃。许多堆肥用的基质携带人类、动植物的病原体，以及令人讨厌的生物如杂草种子。在用ETS菌进行堆肥过程中，通过短时间的持续升温，可以有效地控制这些生物的生长。因此，用ETS菌处理堆肥的一个主要优势就是能够使人和动植物病原体以及种子失活，使得经过发酵的固体废料达到无害化标准。 1.2堆肥过程中有机质的转化 ETS堆肥过程中的有机质转化分为两个过程：
一个是有机质的矿质化过程，即把复杂的有机质分解成为简单的物质，最后生成二氧化碳、水和矿质养分等。ETS堆肥过程中有机质的矿质化是ETS菌新陈代谢的结果，产物不仅可为活动的ETS菌群及堆肥中的有益土着微生物提供速效养分，为其活动提供能源，也是作物所需的养分，并为ETS堆肥有机质的腐殖化准备基本原料。 另一个是有机质的腐殖化过程，即有机质经分解再合成，生成更复杂的特殊有机质---腐殖质。第一阶段，ETS菌将有机残体分解形成组成腐殖质分子的原始材料，如多元酚、含氮有机物（氨基酸、肽等）等；第二阶段，先由ETS菌分泌的多酚氧化酶将多酚氧化成醌，然后醌与氨基酸或肽缩合而成腐殖质单体。 1.3堆肥过程中重金属的的转化 微生物特别是细菌、真菌在重金属的生物转化中起重要作用。虽然有些微生物可以改变重金属在环境中的存在状态，使化学物毒性增强而引起严重的环境问题或浓缩重金属，并通过食物链积累。但ETS菌群中的微生物可以通过对重金属的转化作用，控制其转化途径，虽然不能降解重金属，却可以达到减轻毒性的作用，有助于改善环境。 2、农产品加工业废弃物（液体）的处理原理 农产品加工业，如小麦深加工生产谷朊粉，同时产生的几种次生液体中含有大量淀粉、脂肪、蛋白质、葡萄糖，通过添加
伤寒与细菌性痢疾 1 【单选题】（B）是细菌性痢疾的主要传播渠道。 A、唾液 B、食物 C、水源 D、体液 2 【单选题】通过（B）传播有可能会感染伤寒沙门氏菌。 A、空气 B、水源 C、唾液 D、接触 3 【单选题】伤寒可能首先出现的症状是引起（A）出血和穿孔。 A、肠道 B、胃 C、肾 D、肺 4 【判断题】采用抗生素治疗后，伤寒病死率可以降低到1%以下。（对）
【判断题】任意一种细菌与志贺氏菌结合都可以感染伤寒。（错） 1.2 霍乱与破伤风 1 【单选题】下列选项中，哪些不是霍乱可能引起的结果？（D） A、酸中毒 B、腹泻 C、反射性呕吐 D、血压上升 2 【单选题】下列不是关于破伤风杆菌说法的是（A）。 A、经飞沫传播感染 B、棒槌状 C、广泛分布与环境、土壤 D、厌氧细菌 3 【单选题】霍乱从1817年到1923年在世界范围内流行了（A）次。 A、6次 B、5次
C、4次 D、3次 4 【判断题】几乎不引起局部炎症症状，煮沸即可使之失活是破伤风感染。（错）5 【判断题】分泌外毒素，造成末端神经系统急性中毒的症状是破伤风感染。（错） 1.3 梅毒与幽门螺杆菌 1 【单选题】梅毒在不治疗的情况下，死亡率约达（D）。 A、50% B、30% C、40% D、20% 2 【单选题】由幽门螺杆菌引起的病症，（C）是十二指肠溃疡。 A、95% B、85% C、90% D、80%
3 【单选题】梅毒根据现有资料推测，（B）是其原发地。 A、亚洲 B、美洲 C、欧洲 D、大洋洲 4 【判断题】 梅毒病毒可能通过胎盘直接传染给胎儿。（对） 5 【判断题】存在于胃的上半部分幽门附近的病菌是幽门螺杆菌。（错） 1.4 黑死病 1 【单选题】通过（A）传播最容易得结核病。 A、空气 B、食物 C、水源 D、唾液 2
2019年4月第27卷一第2期中国实验动物学报ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA April 2019Vol.27一No.2黄树武,闵凡贵,王静,等.常见SPF 级小鼠和大鼠肠道菌群多样性研究[J].中国实验动物学报,2019,27(2):229-235.Huang SW,Min FG,Wang J,et al.Diversity of intestinal flora in commonly used SPF mice and rats [J].Acta Lab Anim Sci Sin,2019,27(2):229-235.Doi:10.3969/j.issn.1005-4847.2019.02.016 [基金项目]广东省科技计划项目(2016A030303024,2017B030314171,2017A070702001,2018B030317001)三 Funded by Science and Technology Planning Project of Guangdong Province (2016A030303024,2017B030314171,2017A070702001, 2018B030317001).[作者简介]黄树武(1990 ),男,医学学士,研究方向:实验动物质量监测和微生物学研究三Email:hsw2015@https://www.360docs.net/doc/e517723942.html, [通信作者]潘金春(1979 ),男,副研究员,研究方向:实验动物质量监测和比较医学研究三Email:jcpan@https://www.360docs.net/doc/e517723942.html, 常见SPF 级小鼠和大鼠肠道菌群多样性研究 黄树武,闵凡贵,王静,潘金春? (广东省实验动物监测所,广东省实验动物重点实验室广东广州一510663)一一?摘要?一目的一研究常见SPF 级小鼠和大鼠的肠道菌群多样性三方法一分别采集广东地区三家实验动物生产单位的C57BL /6二ICR二BALB /c 小鼠和Wistar二SD 大鼠的盲肠内容物样品,用细菌16S rDNA 通用引物扩增V4-V5 区域,采用Illumina Miseq 2?300bp 测序平台进行测序,使用生物信息学方法进行微生物群落分析二Alpha 多样性分析与Beta 多样性分析三结果一对序列去杂优化后OTU 聚类分析,稀释性曲线说明本次测序的数据量合理;实验小鼠和大鼠肠道菌群共分成八个门,其中拟杆菌门(Bacteroidetes )二厚壁菌门(Firmicutes )占据主要地位,属水平上主要是拟杆菌属(Bacteroides )二Hungatella 二副杆状菌属(Parabacteroides )二乳酸杆菌属(Lactobacillus )等;样品间差异性分析显示相同设施来源动物的菌群组成相似性较高;Alpha 分析结果显示来源于同种设施的动物物种丰富度相近;Beta 分析显示相同设施动物的肠道菌群差异较小,但品系对肠道菌群差异性有所影响三结论一不同来源设施的饲养环境是动物肠道菌群多样性的主要影响因素,不同品系对肠道菌群多样性有一定影响三 ?关键词?一小鼠;大鼠;肠道菌群;Illumina miseq ?中图分类号?Q95-33一一?文献标识码?A一一?文章编号?1005-4847(2019)02-0229-07Diversity of intestinal flora in commonly used SPF mice and rats HUANG Shuwu,MIN Fangui,WANG Jing,PAN Jinchun ?(Guangdong Laboratory Animals Monitoring Institute,Guangdong Provincial Key Laboratory of Laboratory Animals, Guangzhou 510663,China)Corresponding author:PAN Jinchun.E-mail:jcpan@https://www.360docs.net/doc/e517723942.html, ?Abstract ?一Objective 一To study the diversity of intestinal flora in commonly used SPF mice and rats.Methods The cecum contents of C57BL /6,ICR,BALB /c mice as well as Wistar and SD rats were collected from three experimental animal production units in the Guangdong area.The V4-V5region was amplified using 16S rDNA primers and sequenced by the Illumina Miseq 2x 300bp sequencing platform.Microbial community analysis,alpha diversity analysis,and beta diversity analysis were carried out by bioinformatics.Results 一In OTU cluster analysis after sequence removal optimization,the dilution curve indicated that the data quantity of the sequencing was reasonable.The intestinal microflora of mice and rats were divided into eight phyla.Bacteroidetes and Firmicute phyla occupied the main position,mainly in the level of Bacteroides ,followed by the genuses Hungatella and Parabacteroides and then Lactobacillus.Analysis of the differences among the samples showed that the flora composition of animals from the same facility,and that of the same strains from the same facility was also similar.Alpha analysis showed that the species richness was similar in animals from the same facility,and beta analysis showed little difference in intestinal flora of the same origin animals.Moreover,the strain had an effect on the difference of intestinal flora.Conclusions 一The origin is the main factor influencing the diversity of intestinal flora,and
摘要 介绍了复合微生物制剂的组成特点，以及在水体污染治理、生物除臭和土壤修复等环保领域方面的应用，分析了复合微生物制剂在环境防治中存在的问题及解决办法，并对其应用前景进行了分析展望。 关键词：复合微生物环境保护发展现状
ABSTRACT Describes the characteristics of the composition of complex microbial agents, and water pollution control, biological odor and soil remediation and other environmental protection areas of application, analysis of complex microbial control agents in the environment problems and solutions, and its potential application the analysis of prospects. Key words:Complex microbial Environmental Protection Development Status
复合微生物制剂在环境保护中的应用 马可 （天津农学院农学系） 1 前言 微生物无处不在" 大到整个地球生物圈" 从陆地到海洋" 从食品工业、石油工业到纺织、制革、制药等凡是涉及有机物质的各种工业的工艺流程。小到各种动植物包括我们每一个人的体表和体内" 特别是肠胃消化系统" 都有无数肉眼看不见的微生物在默默地工作着。它们虽然个体极小" 但分布广、种类多、繁殖快、新陈代谢旺盛" 具有强大的分解能力" 它们的活动保障着生态系统的物质循环" 净化着生态环境" 协调着生态平衡# $ %。但是许多重要的生化过程靠单种微生物是不能完成或只能微弱进行" 而必须依靠两种或多种微生物共存的条件下" 共生、共荣、共养" 使微生物的有害作用朝着出现有益效果的方向发展" 从而完成这一优化的生化过程。复合微生物制剂就是在这种环境下产生出来的。所谓复合微生物制剂是指由两种或两种以上的微生物通过共同培养，相互之间互相作用，能达到发挥最大功能优势的微生物群体# & %。复合微生物制剂具有现实和潜在的巨大用途，现已广泛应用于农业、工业、医药和环保等各个领域，在环境保护领域，复合微生物具有见效快、投资少、操作简单、不会造成二次污染等优势，显示出其巨大的发展前景。 1复合微生物制剂简介 复合微生物制剂一般由光合菌类、醋酸杆菌类、放线菌类、乳酸菌类、酵母菌类等数种微生物菌群组成，其中既有分解性细菌，又有合成性细菌，既有厌氧菌、兼性菌，又有好氧菌，是一个多菌种共存的生物体。制剂组成中的光合细菌群在本身生长过程中能产生大量VC和VE以及各种氨基酸和刺激素" 从而能促进动植物生长，提高抵抗力；醋酸杆菌是氮素合成中具有代表性的微生物" 它从光合作用微生物中摄取糖类、固定氮，然后将固定的氮部分存留于产品作为作物所需养分" 部分再还给光合细菌，这样醋酸杆菌和光合细菌就形成共生结构；酵母菌细胞含有的高量超氧化物歧化酶（SOD）可有效地催化体内超氧阴离子自由基（O2-）转换成无害的H2O2和O2解除, O2-对机体的毒害作用。而且在他们生长代谢过程中能形成多种2 族维生素和生理活性物质，有助于其他微生物和动植物的营养吸收，增强有效菌的活性。研究表明：酵母菌细胞中超氧化物歧化酶的含量高于其他微生物3~10倍；放线菌中的大多数菌种" 在代谢过程中能产生不同类型的抗生素"从而确保畜禽健康，而且放线菌群还具有较强的分解复杂含氮和不含氮有机物的能力，对自然界物质转化和土壤改良起着重要作用；乳酸菌属的多种杆菌" 在有氧条件下获得能量合成细胞物质，在厌
实验六食品中大肠菌群的测定一、概述 (一)大肠菌群的定义及范围 根据国家1994年颁布的食品卫生检验方法微生物学部分，大肠菌群(coliform bacteria)系指一群在37℃、24h能发酵乳糖，产酸、产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。 大肠菌群主要是由肠杆菌科中四个菌属内的一些细菌所组成，即艾希氏菌届、拘橼酸杆菌属、克雷伯氏菌属及肠杆菌属，其生化特性分类见表5-4。 表5-4 大肠菌群生化特性分类表
注：+，表示阳性；—，表示阴性；+/-，表示多数阳性，少数阴性。 由上表可以看出，大肠菌群中大肠艾希氏菌I型和Ⅲ型的特点是，对靛基质、甲基红、v-P和拘橼酸盐利用四个生化反应分别为“十十一一”，通常称为典型大肠杆菌；而其他类大肠杆菌则披称为非典型大肠杆菌。 (二)大肠菌群的测定意义 1、粪便污染的指标细菌 早在1892年，沙尔丁格(Schardinger)氏首先提出大肠杆菌作为水源中病原菌污染的指标菌的意见，因为大肠杆菌是存在于人和动物的肠道内的常见细菌。一年后，塞乌博耳德“斯密斯(Theobold．Smith)氏指出，大肠杆菌因普遍存在于肠道内，若在肠道以外的环境中发现，就可以认为这是由于人或动物的粪便污染造成的；从此，就开始应用大肠杆菌作为水源中粪便污染的指标菌。 据研究发现，成人粪便中的大肠菌群的含量为：108个／g一109个／g。若水中或食品中发现有大肠菌群，即可证实已被粪便污染，有粪便污染也就有可能有肠道病原菌存在。根据这个理由，就可以认为这种含有大肠菌群的水或食品供食用是不安全的。所以目前为评定食品的卫生质量而进行检验时，也都采用大肠菌群或大肠杆菌作为粪便污染的指标细菌。当然，有粪便污染，不一定就有肠道病原菌存在，但即使无病原菌，只要被粪便污染的水或食品，也是不卫生的，不受人喜欢的。 2．粪便污染指标菌的选择 作为理想的粪便污染的指标菌应具备以下几个特性，才能起到比较正确
池塘微生物制剂使用技术 微生态制剂是指在微生态理论指导下采用已知的有益微生物， 经培养、复壮、发酵、包埋、干燥等特殊工艺制成的用于动物的生 物活菌制剂。有时将其称为益生菌、益生素等。我国微生物制剂于 上世纪80年代开始应用于水产养殖，经过20多年的发展，目前已 颇具规模，光合细菌、EM菌、枯草芽孢杆菌、放线菌、硝化细菌、反硝化细菌、乳酸菌等被广泛应用于水产养殖业。 一、水产养殖业应用微生物制剂的背景 随着水产养殖业的迅猛发展，养殖规模越来越大，由于种质退化、池塘老化、饲料不当投喂等原因导致病害频繁发生，可以说，病害问题目前已成为制约我国水产养殖业发展的一个重要因素。为了防治疾病，用药量不断加大，尤其是抗生素的大量使用，不仅使一些致病菌产生较强的抗药性，同时也影响了鱼虾肠道内的有益菌群的正常生长，引起肠道内菌群生态的失调，从而影响鱼虾类的抗病能力。同时，大量使用药物对生态环境产生了不良影响，甚至对人类的健康带来威胁。2001年我国出口欧盟的冻虾仁产品含有违禁物质氯霉素便是敲响了我国水产品质量安全的警钟。因为药物残留超标引发的水产品质量安全事件迫使人们开始思考，如何让水产养殖业走上健康发展的轨道。答案只有一个：推行水产品无公害养殖技术。由于微生物制剂可通过调节养殖水体内的微生态平衡，净化水质，达到提高养殖品种健康水平及改良养殖环境的目的，而且微生物制剂具有无残留、无耐药性、无污染等副作用，它在一定程度上可部分替代或完全替代抗生素，为无公害水产品的生产创造条件。 二、水产微生物制剂的种类及其特点 作为水产动物微生物制剂的主要菌种有光合细菌、酵母菌、乳酸菌、硝化细菌、芽孢杆菌等。以复合型产品为主，如EM菌。 1、光合细菌：在水产养殖业中应用较广泛的微生物制剂，它是一类能进行光和作用原核生物的总称，它们的共同点是体内具有光和色素，可在厌氧、光照条件下进行光合作用。其在养殖水体内，可利用硫化氢或小分子有机物作为供氢体，同时也能将小分子有机物作为
肠道微生物与人类健康 很多人认为，显微镜下才能看到的微生物和人们的生活关系不大，即便有关也不是我们需要了解的。但事实上，微生物和人类健康有着密不可分的关系。在我们身体的表面和内部，尤其是在肠道里，不为人知地“居住”着许多微生物。在人体内，渺小的微生物最有“发言权”。 我们体内有2公斤重的细菌，但是其中只有大约20%可以被培养和研究。绝大多数的“人体房客”至今还不为人所知，它们对人体的健康也还不被理解。 1、基本概念及综述 1.1 肠道微生物的定义：是一类生长在动物肠道中的微生物，它们构成了一个独特、多变的生态系统。这是在已发现的生态系统中细胞密度最高的系统之一。该系统中积聚着大量的微生物，同时细菌与宿主细胞之间紧密地接触在一起。 人类肠道微生物：即生长在人体内的肠道微生物。 1.2 肠道微生物的类别：分为两种，第一种称为正常菌群，第二种称为过路菌群，又称为外籍菌群。 正常菌群：数量是巨大的，约为1014左右，在长期的进化过程中，通过个体的适应和自然选择，正常菌群中不同种类之间，正常菌群与宿主之间，正常菌群、宿主与环境之间，始终处于动态平衡状态中，形成一个互相依存，相互制约的系统，因此，人体在正常情况下，正常菌群对宿主表现不致病。 过路菌群：是由非致病性或潜在致病性细菌所组成，来自周围环境或宿主其它生境，在宿主身体存留数小时，数天或数周，如果正常菌群发生紊乱，过路菌群可在短时间内大量繁殖，引起疾病。 1.3 肠道微生物的分布：在人类胃肠道内的细菌可构成一个巨大而复杂的生态系统，一个人结肠内就有400个以上的菌种。从口腔进入胃的细菌绝大多数被胃酸杀灭，剩下的主要是革兰氏阳性需氧菌。小肠微生物的构成介于胃和结肠的微生物结构之间。近端小肠的菌丛与胃内相近，但常能分离出大肠杆菌和厌氧菌。远段回肠，厌氧菌的数量开始超过需氧菌，其中大肠杆菌恒定存在，厌氧菌如类杆菌属、双歧杆菌属、梭状芽孢杆菌属，都有相当数量。在回盲瓣的远侧，细菌浓度急剧上升，结肠细菌浓度高达1011～1012 CFU/mL（CFU即colony forming unit，菌落形成单位），细菌总量几乎占粪便干重的1/3。其中厌氧菌达需氧菌的103～
微生物大小及菌群数量的测定实验 王康周三下午第一排 摘要：本次实验中，通过校正目镜测微尺，然后将染色的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、 酿酒酵母（Saccharomy cescerevisiae）至于镜下，分别测量长宽、并计算得到它们的大小；在血细胞计数板上滴加酿酒酵母，然后在高倍镜下进行计数，计算得到每毫升中酵母菌的总数。 关键词：测微尺；校正；血细胞计数板 前言：微生物细胞大小，是其形态特征重要标志之一。每一种微生物在一定条件下，有其 相对固有的大小形态。它是分类鉴定的依据之一。 微生物的大小测定可用测微尺测量，测微尺分为目镜测微尺和镜台测微尺两部分。镜台测微尺是特制的载玻片，其中央有一全长1mm的刻度标尺，等分成100小格，每格长度为10um，可用它来校正目镜测微尺每小格的长度。目镜测微尺是一块可放在目镜内的圆形薄片，其中央刻有50等分的小格，每小格的长度随目镜物镜放大倍数的大小而变动，在测量微生物菌体的大小之前，应预先用镜台测微尺来校正并计算出在某一放大倍数物镜下，目镜测微尺每小格所代表的实际长度，再以它作为测量微生物细胞的尺度，再计算出微生物的大小。 显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌器)，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。 用血细胞计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。该计数板是一块特制的载玻片，其上由四条槽构成三个平台；中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各列有一个方格网，每个方格网共分为九个大方格，中间的大方格即为计数室。每一个大方格边长为lmm，则每一个大方格的面积为lmm2，盖上盖玻片后，盖玻片与载玻片之间的高度为0.lmm，所以计数室的容积为0.lmm3。以25个中方格为例，5个中方格总菌数为A，菌落稀释倍数为B，则 1mL菌液中总菌数=A÷5×25×104×B。 1．材料和方法 1.1材料 1.1.1菌种酿酒酵母（Saccharomy cescerevisiae）枯草芽孢杆菌 （Bacillus subtilis） 1.1.2 溶液和试剂美蓝染液，蒸馏水 1.1.3 仪器和其他用品酒精灯，血细胞计数板，盖玻片，镊子，显微镜，双层瓶（内装香柏油和二甲苯），擦镜纸，滴管等。1.2方法 1.2.1 菌体大小测定 1.2.1.1 目镜测微尺的安装把目镜的上透镜旋开，将目镜测微尺轻轻放在目镜的隔板上，使有刻度的一面朝下。旋上目镜透镜，再将目镜插入镜筒内。 1.2.1.2校正目镜测微尺将镜台测微尺放在显微镜的载物台上，使有刻度的一面朝上。先用低倍镜观察，调焦距，待看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度相平行，并使两尺左边的一条线重合，向右寻找另外一条两尺相重合的直线。用同样方法校正高倍镜和油镜。目镜测微尺每个的长度（μm）=两条重合线间镜台测微尺格数×10÷两条重合线间目镜测微尺的格数 1.2.1.3菌体大小测定将镜台测微尺取下，换上细菌染色制片，先在低倍镜和高倍镜下找到目的物，然后在油镜下用目镜测微尺测量菌体的大小。先量出菌体的长和宽占目镜测微尺的格数，再以目镜测微尺每格的长度计算出菌体的长和宽。 1.2.1.4测定完毕测定完毕取出目镜测微
中国血液净化2019年9月第18卷第9期Chin J Blood Purif,September,2019,Vol.18,No.9 ·综述· 肠道微生物菌群与慢性肾脏病的研究进展 王小琪1李忠心1 中图分类号：R692.5文献标识码：A doi:10.3969/j.issn.1671-4091.2019.09.017 肠道微生物群与宿主一直互利共存的，并在宿主的新陈代谢中扮演着重要角色。正常肠道微生物群以营养、代谢、生理和免疫功能等多方面影响着人体健康，而肠道微生物群菌群失调参与多种疾病的发生发展，如肥胖、2型糖尿病、炎症性肠病、心血管疾病等。目前越来越多的证据表明，肠道菌群失调参与了导致慢性肾脏病(chronic kidney disease，CKD)的进展以及并发症的发生，而补充益生菌可能对CKD 患者具有潜在的收益，本文就肠道微生物菌群与CKD 的关系，综述如下。1肠道微生物群人类的肠道具有极为复杂的生态环境，栖息着大约30属500多种细菌，超过1013的微生物细胞构成了肠道微生物群，即肠道菌群。通常成人的肠道中存在2种优势菌群，厚壁菌门和拟杆菌；其他的一些放线菌、变形菌则占较少的比例[1]。每种细菌在肠壁的特定位置定植，不同的细菌沿着肠道有不同的分布。肠道菌群的功能多样，甚至可以被认为是一个具有代谢活性的内生“器官”，在疾病的诊断、治疗和预防等诸多方面具有重要作用。1.1参与宿主代谢及免疫调控生理状态下，肠道菌群参与了那些宿主不能独立完成的代谢活动，如代谢不易消化的植物多糖，合成特定的维生素，转化结合胆汁酸，降解草酸盐等[2]。更为重要的是，肠道菌群促进了免疫系统的发展与成熟，并降低了食物和环境抗体诱发的过敏反应[3]。机体处于应激状态时去甲肾上腺素的释放会使致病性革兰氏阴性细菌的数量和种类增加。1.2构建肠道上皮屏障肠上皮细胞是指位于固有层表面的单层柱状上皮细胞，位于肠腔与固有层间，这些柱状上皮通过紧密连接结合在一起，构成肠道上皮屏障，对抗体和病原体的转移具有隔离作用。在良好的健康状况下，肠道屏障非常有效，肠腔内的一侧被肠道细菌大量繁殖，而基底外侧则保持无菌状态。共生的肠道微生物通过多种机制维持肠道功能的完整性，包括①恢复并维持紧密连接的蛋白结构；②诱导上皮细胞的热休克蛋白；③与致病菌竞争结合肠道上皮细胞；④分泌抗菌肽[4]。另一方面，肠道菌群通过降低肠道内炎症反应来维持肠上皮屏障。TOLL 样受体(Toll-like receptor,TLR)由模式识别受体家族组成，用于识别微生物的保守分子产物。肠道菌群通过细胞壁脂质酸激活TLR2来抑制肠道炎症，有效保 护了紧密连接，从而强化了肠道屏障[5]。 2CKD 与肠道菌群 最近，人们已经证明CKD 的发生及发展与肠道微生物菌群失调有关，肠道微生物群和肾脏疾病可以相互影响，互为因果，微生物菌群失调会增加肾脏疾病的易感性，并加重肾脏疾病的进展；而肾功能恶化也会加剧肠道菌群失调。 2.1肠道微生物菌群失调 由于肠道微生物群可以很好地适应生物环境的 变化，因此早期CKD 的患者中就可以观察到肠道细 菌的定量和定性发生变化。在早期CKD 患者体内，小肠中的需氧菌和厌氧菌较正常人有所增加，而结肠内的变形菌、放线菌和厚壁菌属也有增加。在终末期肾病(end-stage renal disease，ESRD)患者中，十二指肠和空场的需氧菌和厌氧菌较正常人群均有明显升高，而乳杆菌和普雷沃氏菌的数量则明显减少。在透析人群的研究中发现，虽然在细菌总 数上血液透析患者与普通人并无明显差异，但血液 透析患者体内的需氧菌约为正常人的100倍，肠杆菌属、肠球菌属等明显增多；厌氧菌方面，血液透析患者体内的双歧杆菌含量明显下降，产气荚膜杆菌 基金项目：潞河医院中心实验平台建设研究(KJ2019CX001-09) 作者单位：101199北京，1首都医科大学附属北京潞河医院肾病中心 通讯作者:李忠心101199北京，1首都医科大学附属北京潞河医院肾病中心Email：lymtics0327@https://www.360docs.net/doc/e517723942.html, ?? 646