现代化学分析方法(仅供参考)

SEM 和TEM 统称为电子显微镜

扫描电镜测试样品表面形貌，而透射电镜测试内部形貌观察，或者晶体结构分析，特别是微区（微米、纳米）的像观察和结构分析

SEM不能做磁性材料，TEM得是液态样品

显微镜放大倍数受所用波长限制。电子显微镜使用电子作为光束来观察物体内部或表面的结构。普通光学显微镜是用可见光来观察物体的。由于电子的波长远小于可见光的波长，所以前者的极限分辨率远高于后者的极限分辨率。

“Collect”栏设定扫描次数一般是设置16或者32都可以，多扫几次为了准确一点，一般没啥关系

为什么减小激光器的功率可以减弱荧光对拉曼散射的干扰？

减小激光功率，被激发的分子少了，产生的荧光跃迁自然就少了

产生荧光所需要的激发能量高，产生拉曼所需的激发能量低，所以降低激光功率对荧光影响更大

荧光对拉曼干扰问题

在拉曼光谱中，通常斯托克斯线的强度大于反斯托克斯线，一般我们选用斯托克斯线部分。但荧光会严重干扰斯托克斯线而不干扰反斯托克斯线，对能产生荧光的试样只能损失灵敏度选反斯托克斯线。

室温时处于基态振动能级的分子很少，Anti-stocke线也远少于stocks线。温度升高，反斯托克斯线增加。从由光学介质和荧光组成的系统来看，Stokes过程和反Stokes过程都是熵不断增大的过程。虽然在反斯托克斯荧光制冷过程中光学介质的熵要减小．但由荧光带走的熵更大。介质中熵的变化△SM是一个很重要的量。正是由于熵的符号决定了在反斯托克斯过程中不可能产生激光。

相关内容还是要掌握的，比如什么是stocks和anti-stocks等

什么类型的数据属于二维数据?

荧光分光光度计的比色皿为什么需要四面透光

如果在一条直线上那是测吸光度的

荧光分光光度计入射光源和检测器的方向是垂直的这样在垂直方向上就不可

能有入射光

而激发的荧光在四个方向上都有在垂直方向上检测干扰最小所以四面透光

荧光光谱适用低温，是为了增加驰豫作用，提高灵敏度。那么原子吸收光谱分析中火焰原子化法，为什么要尽量采用低温火焰，不是只要保证待测元素充分离解吗？这其中是什么原因啊?

因为温度较低时，激发态上的原子数与基态原子数相比非常小，故可用基态原子数代表待测元素的原子数，而原子数与被测元素的浓度成正比，这是原子吸收光谱法的定量基础。尽管火焰温度越高越有利于离子的原子化，但同时高温产生的热激发态原子增多，这对定量是不利的。所以要尽量采用低温火焰，使基态原子的激发依赖于对光的吸收。

今天做了拉曼实验，到底拉曼用来测物质的什么啊？我知道红外是用测基团，物质的结构。拉曼也是是吗？

是物质结构，可以看肖老师课件的第27页。

（1）红外和拉曼都是振动光谱，从这一点上面来说，原理是一样的。但是红外是吸收光谱，而拉曼是散射光谱。

（2）至于波长，拉曼采用的是激光作为激发源，波长范围可以从紫外-可见-红外都可以，最常见的是可见光和NIR的。而红外只能选择红外光作为光源，包括从远红外到近红外，平时最常用的是中红外，4000cm-1到400cm-1。

（3）从选择法则上面来说，也就是什么样的振动是红外活性的，什么样的振动是拉曼活性的，也是不一样的。红外活性（也就是可以被红外检测到的振动）必须是分子偶极矩发生变化，而拉曼活性的振动必须是有分子的极化性发生改变才能被检测到。

（4）从信号强度来说，拉曼的信号很弱，通常10的6次方 ~ 8次方才有一个拉曼散射的光子。而相对来说，红外的信号要强！所以在实际应用中，红外更广泛一些！

（5）两者的光谱可以作为互补来确定分子的结构！

拉曼和红外他们的特征峰都很强，其中拉曼主要是测共价键的物质，而红外则是测OH基团等。通过这点可以考证你所测的物质用哪种方法会更好。

拉曼还有一点是会受荧光干扰，天然的提取物荧光干扰很大，用拉曼的效果会很差。

拉曼光谱分析技术是以拉曼效应为基础建立起来的分子结构表征技术,其信号来源与分子的振动和转动。拉曼光谱的分析方向有：

定性分析：不同的物质具有不同的特征光谱，因此可以通过光谱进行定性分析。结构分析：对光谱谱带的分析,又是进行物质结构分析的基础。

定量分析：根据物质对光谱的吸光度的特点,可以对物质的量有很好的分析能力。

除了原理上的区别外，二者的光源不同，红外需要能量较小的光源，常见的是能斯特灯，碳化硅棒及白炽线圈；拉曼则用光源一般采用能量集中、功率密度高的激光。二者检测器也有区别，红外检测器有热检测器、热电检测器和光电导检测器等检测器，拉曼检测器用光电倍增管检测器、半导体阵检测器或多通道的电荷藕合器件。用拉曼光谱分析时，样品不需前处理。而用红外光谱分析样品时，样品要经过前处理，液体样品常用液膜法和液体样品常用液膜法，固体样品可用调糊法，高分子化合物常用薄膜法，体样品的测定可使用窗板间隔为2.5-10 cm 的大容量气体池；另外，红外光谱主要反映分子的官能团，而拉曼光谱主要反映分子的骨架主要用于分析生物大分子；拉曼光谱和红外光谱可以互相补充，对于具有对称中心的分子来说，具有一互斥规则：与对称中心有对称关系的振动，红外不可见，拉曼可见；与对称中心无对称关系的振动，红外可见，拉曼不可见。小结红外和拉曼光谱法是很重要的分析方法，它们即有共同点又有区别，它们可以相互补充，都广泛用于测定化合物的结构以及定性分析。

红外光谱测试时候的样品制备方法

(1) 固体样品的制备

a.压片法:

b.糊状法:

(2) 液体样品的制备

a.液膜法

b.液体吸收池法

c.样品滴入压好的Kbr薄片上测试

(3)气态样品的制备:气态样品一般都灌注于气体池内进行测试。

(4)特殊样品的制备—薄膜法:

a. 熔融法: 对熔点低，在熔融时不发生分解、升华和其它化学变化的物质，用熔融法制备。可将样品直接用红外灯或电吹风加热熔融后涂制成膜。

b.热压成膜法: 对于某些聚合物可把它们放在两块具有抛光面的金属块间加热，样品熔融后立即用油压机加压，冷却后揭下薄膜夹在夹具中直接测试。

c.溶液制膜法: 将试样溶解在低沸点的易挥发溶剂中，涂在盐片上，待溶剂挥发后成膜来测定。如果溶剂和样品不溶于水，使它们在水面上成膜也是可行的。比水重的溶剂在汞表面成膜。

5.奶粉、牛奶中三聚氰胺所规定的上限是多少？国家的GB是什么方法？

分子结构

化学式（分子式） C3H6N6

相对分子质量 126.15

答：人群每天耐受摄入量为0.63毫克／公斤。GB为中华人民共和国强制性国家标准，由国家标准化管理委员会执行，是原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法。关于牛奶、奶粉三聚氰胺国家标准：

婴幼儿配方乳粉中三聚氰胺的限量值为1mg/kg，高于1mg/kg的产品一律不得销售；液态奶（包括原料乳）、奶粉、其他配方乳粉中三聚氰胺的限量值为2.5mg/kg，高于2.5mg/kg的产品一律不得销售；含乳15％以上的其他食品中三聚氰胺的限量值为2.5mg/kg，高于2.5mg/kg的产品一律不得销售。

《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》GB/T22388-2008

标准规定了高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用法、液相色谱-质谱/质谱法三种方法为三聚氰胺的检测方法，检测定量限分别为2毫克/千克、0.05毫克/千克和0.01毫克/千克。标准适用于原料乳、乳制品以及含乳制品中三聚氰胺的定量测定。检测时，根据被检测对象与其限量值的规定，选用与其相适应的检测方法。

三聚氰胺的检测方法

GB/T 22388—2008包括三个方法：第一法高效液相色谱法，第二法液相色谱-质谱/质谱法，第三法气相色谱-质谱联用法，检测时，应根据检测对象及其限量的规定，选用与其相适应的检测方法。

1、HPLC法：

原理:试样用三氯乙酸溶液-乙腈提取，经阳离子交换固相萃取柱（基质为苯磺酸化的聚苯乙烯-二乙烯基苯高聚物）净化后，用高效液相色谱测定，外标法测定。pH 为3.0柠檬酸和辛烷磺酸钠离子对试剂缓冲液。色谱柱：C8柱

2、LC-MS/MS法：

原理:试样用三氯乙酸溶液提取，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用液相色谱-质谱/质谱法测定和确证，外标法定量。色谱柱：强阳离子交换与反相C18混合填料，混合比例（1：4）。

3、GC-MS和GC-MS/MS法：

原理:试样经超声提取、固相萃取净化后，进行硅烷化衍生，衍生产物采用选择离子监测质谱扫描模式（SIM）或多反应监测质谱扫描模式（MRM），用化合物的保留时间和质谱碎片的丰度比定性，外标法定量。色谱柱：5%苯基二甲基聚硅氧烷石英毛细管柱

三聚氰胺的检测方法之一

阳离子交换柱(PCX)

三聚氰胺呈弱碱性(弱阳离子化合物)，净化过程一般应选择阳离子交换柱。混合型的阳离子交换柱(PCX)通过将磺酸基团(-SO3H)键合在极性高聚物聚苯乙烯/二乙烯苯(PEP)吸附剂上，具有阳离子交换和反相吸附两种机理，并具有以下优点：

A．可通过两种不同溶液的洗涤(水/一定pH值的缓冲溶液和有机溶剂)，使样品更干净，提高检测的灵敏度。

B．批次重复性好。

C．回收率高，重现性好，即使小柱跑干也可以得到较高回收率

LC-MS注意事项

1.不要用洗涤剂清洗玻璃容器

2.不要用塑料容器装有机溶剂

3.不使用不挥发性缓冲盐

4.有机缓冲盐的浓度要低

5 避免无机样品进样

6 待测样品浓度要低，通常<几个ppm

7.禁止直接样品测定

原因: 1、表面活性剂的加入会导致离子化程度降低，并污染系统 2、增塑剂主要是会残留在系统中，对测定产生干扰 3、不挥发性缓冲液，如磷酸，由于离子化问题，除了降低离子化程度外,还会污染系统 4、在离子化时，溶质会与缓冲盐竞争，降低离子化程度。但少量缓冲盐加入，能有效提高离子化程度。5、无机盐除了会加合外，主要在雾化时，会污染雾化针，甚至堵塞雾化针。 6、LC-MS 灵敏度很高，所以只允许极少量物质进入。大量的物质进入MS，会污染整个系统，带来不必要的风险。

2.QQQ的6中扫描模式及特点？

答：1.全扫描：定性，寻找准分子离子峰，只有Q1工作。

2.选择离子扫描：效率高，定性不好，定量强，只有Q1工作。

3.子离子扫描：Q1Q2Q3均工作，定性，寻找碎片离子峰。

4.母离子扫描：定性，寻找同系物。

5.中性丢失：定性，寻找中性碎片峰，检测固定质量的中性碎片。

6.多反应检测：定量，最佳选择，干扰小，信噪比高。

3.GC-MS/LC-MS定性能力相比有何不同？

答：GC-MS基于EI，硬电离模式，有标准物质库相匹配。

LC-MS基于ESI，软电离，无标准库，自建，与条件有关主要看准分子离子峰。

4.LC-MS/MS的最低检测限为多少？

答：0.5-0.1μg/L-1

三重四级杆各种工作模式及其特点分析：

第一组四级杆用于质量分离，第二组四级杆用于碰撞活化，第三组四级杆用于质量分离。

由于在四级场中只允许一种质荷比的离子通过，其余离子的振幅变大，最后碰到四级杆被吸收。通过四级杆的离子到达检测器被检测。

工作模式分6类：

A—全离子扫描（Scan）——检测离子源产生的离子流中，各种离子的m/z和强度

特点:这种扫描方式得到的质谱是全谱，可以进行质谱库检索和定性分析。用来做监视，挑选需要进一步分析的离子以及定量简单的组分

缺点：m/z上限一般达不到2000，（一般在多少啊？）所以并不是所有离子都被检测出来。

B—选择离子扫描（SIM）通过设置射频电压的变化范围。当射频电压值由一个数值变化到另一个值时，检测器检测到的离子就会从m1到m2，也即得到m1到m2的质谱。

特点:这种扫描方式灵敏度高，可以通过选择适当的离子使干扰组分不被采集，消除组分间的干扰，适合定量分析。

C—多反应监测扫描（SRM & MRM）以前没有讲过，查了下，貌似三聚氰胺的LC/MS-MS检测，可以这样。

D—子离子扫描（Product Scan）得到母离子的碎片信息，区别几种m/z相同的母离子，打假。

特点：只允许母离子这一种m/z的离子通过，通过母离子碎片种类和强度的差异来区别m/z相同的母离子，了解母离子的结构

E—母离子扫描（Precursor Scan）可以知道原来种哪些母离子是我们感兴趣的。F—中性丢失扫描（Neutral Loss）扫描用于检测哪些母离子丢失了中性的基团。

GC-MS使用的电离源是EI和CI，针对易气化的有机物样品分析。由于在合适的色谱条件下，混合样品也可以被分离成单一组分并逐一进入质谱仪，最终可以得到每个化合物的质谱。然后就简单的进行计算机混合物的色谱图、单一组分的质谱图和质谱检索。见过两个数据库：NIST库和Willey库

LC-MS使用的电离源是ESI和APCI，

LC-MS分析得到的质谱过于简单，结构信息少，进行定性分析比较困难，主要依靠标准样品定性，对于多数样品，保留时间相同，子离子谱也相同，即可定性。大分子物质一般都用LC吧，GC的一般只用于低沸点稳定性好的的物质

GC实验注意事项

（1）确定待测样是否符合GC要求（2）浓度尽可能低：小于10ppm （3）待测样不能含有水份(特殊柱：水样) （4）溶剂沸点尽可能低，尽量不选用丙酮（5）柱温要低于固定液使用温度（6）样品必须经过0.45μm或0.22μm的滤膜过滤这里有两个细节比较重要，确定待测样是否符合GC要求，GC的要求是：沸点低，<350oC,易挥发，热稳定样品必须经过0.45μm或0.22μm的滤膜过滤，滤膜全称微孔过滤膜，大小和一角硬币相近，价钱大概一元一个，是色谱的基本器材之一。

GC-MS/LC-MS定性能力相比有何异同？

GC-MS/LC-MS都可以进行定性分析，GC-MS用于易气化、热稳定的小分子，采用电子轰击方式（EI），有标准谱库进行比对；LC-MS基于软电离模式，要自建谱库或自行分析，用于测定大分子量的化合物。

GC-MS可利用总离子色谱图进行定性定量分析。与GC-MS类似,LC-MS也可以通过采集质谱得到总离子色谱图，此时得到的总离子色谱图与由紫外检测器得到的色谱图可能不同。因为有些化合物没有紫外吸收,用普通液相色谱分析不出峰，但用LC-MS分析时会出峰。由于电喷雾是一种软电离源,通常很少或没有碎片,谱图中只有准分子离子，因而只能提供未知化合物的分子量信息，不能提供结构信息。很难用来做定性分析。

LC-MS分析得到的质谱过于简单，结构信息少，进行定性分析比较困难，主要依靠标准样品定性，对于多数样品，保留时间相同，子离子谱也相同，即可定性，少数同分异构体例外。

GC-MS/LC-MS比较色谱质谱联用包括气相色谱质谱联用(GC-MS)和液相色谱质谱联用(LC-MS），液相联用与气相联用互为补充，分析不同性质的化合物。区别：GC- MS是最早商品化的联用仪器，适宜分析小分子、易挥发、热稳定、能汽化的化合物，用电子轰击方式（EI）得到的质谱，可与标准谱库对比； LC-MS主要解决如下几方面的问题：不挥发性化合物分析测定，极性化合物的分析测定，热不稳定化合物的分析测定，大分子量化合物（包括蛋白、多肽、多聚物等）的分析测定，没有商品化的谱库可对比查询，只能建库或自己解析谱图 GC-MS 样品预处理麻烦，要求进样严格，但是结果有质谱库可以检索但是LC-MS没有质谱库检索，要自己分析

ESI和APCI的比较

ESI APCI

生成离子方式液相离子化气相离子化

可分析样品极性化合物、大分子非极性、中等极性的小分子化合物

流动相流速

低流速（<100μL）下工作良好；高流速下（>750μL）比APCI差低流速（<100μL）下工作不好；高流速下（>750μL）好于ESI

ESI和APCI在实际应用中有各自的优势和弱点，很多仪器可以进行两者的转换我们可以根据不同的样品、不同的分析目的选用这两种接口。

硬电离和软电离？

因为离子化所需要的能量随分子不同差异很大。因此，对于不同的分子应选择不同的离解方法。认为能给样品较大能量的电离方法为硬电离方法，而给样品较小能量的电离方法为软电离方法，后一种方法适用于易破裂或易电离的样品。软

电离方式易得到准分子离子峰，硬电离方式一般只能得到碎片离子

基质辅助激光解吸离子化(软电离技术）——是一种用于大分子离子化方法，利用对使用的激光波长范围具有吸收并能提供质子的基质（一般常用小分子液体或结晶化合物），将样品与其混合溶解并形成混合体，在真空下用激光照射该混合体，基体吸收激光能量，并传递给样品，从而使样品解吸离子化。MALDI的特点是准分子离子峰很强。通常将MALDI用于飞行时间质谱和FT-MS，特别适合分析蛋白质,多肽等大分子。

硬电离质是把解吸和电离两个环节在时间和空间上分离开来，分别用二个激光器进行解吸和电离，使用红外激光器来实现整分子气化，使用可调谐的紫外激光器对电离过程实行宽范围的能量控制，从而得到从电离（只显示分子离子）到各种程度不同的谱，并成功地用于生物大分子的序列分析。

基质辅助激光解吸离子化(软电离技术）——是一种用于大分子离子化方法，利用对使用的激光波长范围具有吸收并能提供质子的基质（一般常用小分子液体或结晶化合物），将样品与其混合溶解并形成混合体，在真空下用激光照射该混合体，基体吸收激光能量，并传递给样品，从而使样品解吸离子化。MALDI的特点是准分子离子峰很强。通常将MALDI用于飞行时间质谱和FT-MS，特别适合分析蛋白质,多肽等大分子。

通常可将离子源分为硬电离源和软电离源。硬电离源有足够的能量碰撞分子，使它们处在高激发能态。其驰豫过程包括键的断裂并产生质荷比小于分子离子的碎片离子。由硬电离源所获得的质谱图，通常可以提供被分析物质所含功能基的类型和结构信息。由软电离源获得的质谱图中，分子离子峰的强度很大，碎片离子峰较少且强度低，但提供的质谱数据可以得到精确的相对分子质量。

加Na，加H，具体是什么？

加Na，加H，是为了带电~~

貌似说法有问题，是加了H+，Na+才会带电，才能被MS检测到。

那为什么会产生加Na呢？

质谱一般有正离子模式和负离子模式，不同性质的化合物在离子源里形成正离子和负离子的难易程度不同；

可以先用两种都全扫描下，看看要测的物质在那种模式下更利于测定再选；

正离子：带正电的离子附在了你的物质之上让你的物质带电了，得到[M+H]+,[M+Na]+等准分子离子峰，主要的正离子有氢离子、钠离子

负离子：物质中的一个氢被打掉了，得到[M-H]-准分子离子峰

这里的Na+，网上说法最多的是玻璃容器溶解下来的

核磁常用的是碳谱和氢谱，如果样品中没有碳和氢，就不能测核磁了啊，核磁要纯物质检测，如果是混合物的话会很多峰混在一起，根本分辨不清，GC-MS在合适的条件下可以把混合物分开来，用质谱把每个组分都测出来

质谱可以准确测定分子量和化学式，而且灵敏度也比核磁要高，测蛋白质的时候比较多的大展身手吧。国内可以测蛋白质核磁的地方好像不太多，而且又贵，维护成本也比质谱高得多。

不过最主要的还是GC-MS测混合物时候的在线联用，快速分离和定性。

高效液相色谱双泵比单泵好在哪里啊？

多种流动相混合更加均匀。

在高效液相色谱中，为什么要对流动相脱气？

（1）脱气是为了防止流动相从高压柱内流出时，释放出气泡。这些气泡进入检测器后会使噪声剧增，甚至不能正常检测。

（2）溶解氧会与某些流动相与固定相作用，破坏它们的正常功能。对水及极性溶剂的脱气尤为重要，因为氧在其中的溶解度较大。

拉曼的光源在做样品时是不是就一个频率？各种物质对单一频率的光源都有响应，而不像紫外红外只对特定的波长？

有关积分球

漫反射光：指从光源发出的光进入样品内部，经过多次反射、折射、散射及吸收后返回样品表面的光．漫反射光是分析与样品内部分子发生作用以后的光，携带有丰富的样品结构和组织信息．

积分球：是漫反射测量中的常用附件之一．入射光进入样品后，其中部分漫反射光回到积分球内部，在积分球内经过多次漫反射后到达检测器．由于信号光从散射层面发出后，经过积分球的空间积分，因此可以克服漫反射测量中随机因素的影响，提高数据稳定性和重复性。

紫外分光光度计与紫外漫反射的区别？

前者：采用透射方式，所测样品的为溶液，后者：漫反射方式（积分球），样品为固体，粉末，乳浊液和悬浊液。

请问，为什么气相色谱分析中样品不能含水？还有样品的PH值要低于多少，同样的，如果PH高了，为什么会损坏柱子？

主要是极性太大，伤害柱子，造成固定液流失，降低柱效率等因素。进水样做ＧＣ，要采用特殊的柱子。但如果是顶空进样，带有一些水汽，问题不大。

前者的影响有毛细柱和填充柱，简单地说就是可能改变填料（因定液）结构、弱化分离性质，影响分离效能；后者容易与化合物溶解，影响检测极性，污染检测器。

关于ｐＨ

也是说HPLC的，普通柱子，常3-9左右。碱性损柱，固定相流失。 GC通常是有机溶剂或其他，一般不提pH的。

气相色谱仪的构成？

1.载气系统。气相色谱中常用的载气有氢气，氮气，氦气和氩气。

2.进样系统。其包括进样器和气化室。

3.分离系统。分离系统包括色谱柱，色谱炉和温度控制装置。色谱柱是色谱仪的心脏。

4.检测系统。包括热导检测器，氢火焰离子化检测器，电子捕获检测器和火焰光度检测器。

5.记录系统。

GC需要你掌握的问题：1：分流比 2：溶剂延迟 3：适用对象

色谱中采用分流技术进样，主要是柱容量小。如果是痕量组分分析，就不需要分流。

GC适用易挥发的，热稳定的，分子量比较低的有机物。进样量0.1微升。

分流比。因为不太清楚，查了些，大家一起学习 GC中分流比的测定是很简单的，只要在分流出口用皂膜流量计测定分流流量，再测定柱内流量(因为柱内流量很小，用皂膜流量计测定时误差较大，故常用测定死时间的办法进行流量计算)。二者之比即为分流比（即分流流量/柱内流量）。严格地讲，两个流量值应校正到相同的温度和压力条件下，才能获得准确的分流比。分流比的大小会影响分流歧视.一般地讲，分流比越大，越有可能造成分流歧视.所以，在样品浓度和柱容量允许的条件下，分流比小一些有利。实际工作中人们更关心的是分流比的重现性，分流比则常用整数之比表示，故一般不需要很准确地测定。记得上课时老师说GC常采用20/1的分流比

为什么溶剂延迟?在气相色谱质谱中，由于溶剂量大，如果一进样就打开质谱灯丝，大量的溶剂可能会造成炽热的灯丝烧断，所以一般设定溶剂延迟来避免此种可能发生。溶剂延迟对延长灯丝寿命有好处！

这些讨论很不错。分流比还要是在实践工作中确定。不过讨论中没提及分流的目的，其实就是减少了进样量。用流动相做溶剂，就是溶解样品时候采样实际流动相来溶解样品而已，也许是80%甲醇-20%水。如果用纯水相(有机)做溶剂，而HPLC 系统是高比例有机(水)相作流动相，就有可能导致水(有机)溶性物质析出，产生堵柱。

分流比问题再讨论分流原因：柱容量小，微量注射器无法准注入nl级体积的试样。而且对于一些相对"脏"的样品,更应采用分流进样,因为分流进样时大部分样品被放空,只有一小部分样品进入色谱柱,这在很大程度上防止了柱污染. 分流过程：液体试样通过注射器进入分流试样器的气化室，试样和溶剂迅速气化，并与载气混合均匀后，在气化室出口处进行分流，使绝大部分试样放空，极小部分引入毛细管。分流比：分流流量/柱内流量，常采用20/1的分流比另外在分流进样不能满足分析要求时(灵敏度太低),还可考虑其他进样方式,如不分流进样和柱头进样等. 分流进样优点是灵敏度高，特别适用于痕量分析；缺点是易引起峰展宽，柱头进样优点是可以消除“歧视”现象，定量准确；缺点是进样装置较为复杂。

毛细管气相色谱进样系统中的无分流进样以及其优缺点？

无分流进样指试样进入进样器后，全部迁移进入毛细管柱进行分离，可在分流进样器上实施。其优点是把全部试样注入色谱柱中，灵敏度大大提高，特别适用于痕量分析。但易产生因进样引起的峰展宽，包括因进样时间拖长引起的时间性谱带展宽和由于试样占据色谱柱较大长度所引起的空间性谱带展宽。这需要优化仪器的操作参数加以克服。

毛细管气相色谱进样系统中对进样系统的基本要求是什么？

毛细管柱因内径很细，固定液的液膜厚度很薄，柱容量很小，对进样技术要求极为严格：第一：要求瞬间进入极小量的试样。第二：要求通过进样系统引入色谱柱中的试样组成必须与实际试样的组成一致，即无歧视现象。第三：要求尽量减小有进样系统带来的谱带展宽。

反相键合色谱法的优点？

反相键合色谱应用非常广泛，反相色谱具有通用型液相色谱的特点。常规反相色谱技术，不仅可以分离不同类型的化合物，尤其适于分离同系物，非极性及极性较弱的化合物，例如多环芳烃等低级性化合物。

液相色谱的流动相必须符合的要求是什么？

1.能溶解试样，但不能与试样发生反应；

2.与固定相不互溶，也不发生不可逆反应;

3.黏度要尽可能小，这样才能有较高的渗透性和柱效;

4应与所用检测器相匹配；

5.容易精制，纯化，毒性小，不易着火，价格尽量便宜等。

一种物质在在紫外区有一个特征吸收波长，但它又不能配成溶液，你会用什么仪器来确定这个波长呢？

我们需要在紫外区检测，而样品不能配成溶液时，可选用紫外-漫反射，也可以说紫外吸收和紫外漫反射是互补的。紫外吸收样品主要是溶液，气体也可。其它的固态，粉末，悬浊液，及活体样品在紫外区有吸收，就可以用紫外-漫反射。

如果要测的样品以水做溶剂，但是测的时候有水会对仪器产生影响，该怎么办呀 ?

1 有机溶剂提取

2 用可以进水样的特殊柱

紫外和原子吸收的单色器所处的位置为什么不同?

紫外的单色器是将光源发射的复合光分解成单色光并从中选出任一波长单色光。而原子吸收的单色器则是将待测元素的共振线与邻近线分开。

在原子吸收光谱中，单色器的作用是把特征谱线与临近谱线分开，所以得在进入检测前，火焰之后：而在紫外分光中是把光源的光在通过试样之前使其转变成特征光然后检测。

什么原因导致基线不稳和干扰？

1.进样针受污染。清洗进样针；做一浓缩试验，载气线路可能也要清洗。

2.色谱柱受污染。烘焙色谱柱，限定时间1-2h。

3.检测器不平衡。检测器一般需要24h才能得到平衡。

4.在程序升温的时候改变载气流速(在很多情况下为正常现象)。

电化学

在电化学领域常用的三电极系统是：工作电极，参比电极，辅助电极或对电极。工作电极是我们的研究对象，参比电极提供电位标准，对电极是和工作电极组成回路以通过电流。

常用工作电极：汞电极（滴汞电极，悬汞电极），金属电极（如金电极，铂电极）和碳电极（如石墨电极，玻碳电极）。常用参比电极：标准氢电极，饱和甘汞电极，Ag-AgCl电极。对电极一般是铂电极。

酸碱反应，用pH 玻璃电极做工作电极，氧化还原反应，用铂电极做工作电极，络合反应和沉淀反应要根据实际情况确定工作电极。比如银量法测氯离子可用氯离子选择性电极做工作电极。工作电极又成为指示电极。

工作电极又称为指示电极。固体电极制作好后要进行表面预处理，目的是使表面清洁。清洁方法很多有物理方法，化学方法，电化学方法。预处理的效果可以用循环伏安法来确定。来测一个氧化还原电对，看在此电极上测得氧化还原电位与理论值的符合程度。符合的越好，说明预处理的效果越好。

在电化学中，三电极系统是常见的，但符合一定条件也可用两电极系统（工作电极和参比电极），即：It is only used in solutions of low resistance and microelectrode.

在电化学测量中，人们把电极区分为极化电极和去极化电极。电极的电位随着外加电压的改变而改变，这样的电极称为极化电极：具有这种性质的指示电极又称为工作电极。当电极的电位完全保持恒定的数值，在电化学测量过程中始终不变，这样的电极称为去极化电极。在电位分析中使用的两个电极都是去极化电极。有关循环伏安发的一点知识

一种常用的电化学研究方法。该法控制电极电势以不同的速率，随时间以三角波形一次或多次反复扫描，电势范围是使电极上能交替发生不同的还原和氧化反应，并记录电流-电势曲线。根据曲线形状可以判断电极反应的可逆程度，中间体、相界吸附或新相形成的可能性，以及偶联化学反应的性质等。常用来测量电极反应参数，判断其控制步骤和反应机理，并观察整个电势扫描范围内可发生哪些反应，及其性质如何。对于一个新的电化学体系，首选的研究方法往往就是循环伏安法，可称之为“电化学的谱图”。本法除了使用汞电极外，还可以用铂、金、玻璃碳、碳纤维微电极以及化学修饰电极等。

为什么较长波长的激光光源，荧光干扰比较少？

短波的能量比较高，所得到的拉曼信号比较强，与此同时荧光的干扰也比较强，主要表现为基线的偏离和信噪比下降，与拉曼散射相比，荧光通常是一种量子效率更高的过程，甚至很少量不纯物质的荧光也可以导致显著的拉曼信号降低，因此，使用长波长的激发光可使荧光显著减弱。当然也会伴随着拉曼信号有所减弱，所以在消除荧光干扰的时候，要在一定程度上选择长波长的激发光，即能保证有拉曼信号，又可以最大限度的减少荧光的干扰。

拉曼强度通常与辐射光频率的四次方成正比，而荧光是光致发光现象，先要吸收才有可能发射，而物质对较短波长的紫外光的吸收概率通常高得多。

关于空心阴极灯的优缺点

优缺点：（1）辐射光强度大，稳定，谱线窄，灯容易更换。（2）每测一种元素需更换相应的灯。

AAS为什么要用空心阴极灯？

因为空心阴极灯提供理想的锐线光源，它用一个与待测元素相同的纯金属制成。灯内是低电压，压力变宽基本消除；灯电流仅几毫安，温度很低，热变宽也很小。锐线光源需要满足的条件： a.光源的发射线与吸收线的ν0一致。 b.发射线的Δν1/2小于吸收线的Δν1/2。

原子吸收光谱与分子吸收光谱的主要差异。

第一、产生光谱的基本粒子不同。原子吸收光谱是由原子的外层电子受到了辐射后，当光的频率刚好符合其跃迁的能级差时，一个电子吸收该光子进行不同能级

的之间的跃迁，进而产生一条谱线。原子的能级跃迁只是简单的跃迁。而分子吸收光谱是由分子受到了辐射光的作用，电子在分子轨道上跃迁。由于分子结构的复杂，跃迁方式分振动跃迁和转动跃迁。

第二、光谱形状不同。原子吸收光谱是由电子云状态发生变化时吸收的有特定频率的电磁频谱。有较高的单一性，所以形成的是线状光谱。而分子吸收光谱由于分子不但原子个数，种类都较多，还含有集团和结构单元，所以其能量结构也很复杂，进而能级跃迁也有多种，不具有单一性。所以形成带状光谱。

第三、光谱的用途不同。原子吸收光谱可以测70多种元素，多为金属元素。每测一种元素要更换相应的空心阴极灯。而分子光谱根据分子光谱可以确定分子的转动惯量、分子的键长和键强度以及分子离解能等许多性质，从而可推测分子的结构。

正相色谱与反相色谱的本质区别是什么？

本质区别----柱子极性问题。具体：正相色谱用的固定相通常为硅胶，以及其他具有极性官能团，如胺基团和氰基团的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基或其他团的极性较强，因此，分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小，即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如：正乙烷、氯仿、二氯甲烷等。反相色谱填料常是以硅胶为基础，表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色色谱所使用的流动相极性较强，通常为水，缓冲液与甲醇，已腈等混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出，而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。常用的反相填料有C18、C8、C4、C6H5等。

核磁内容总结

原理：核磁共振主要是由原子核的自旋运动引起的。

具有奇数原子序数或奇数原子质量（或两者都有）的元素，如1H、13C、15N、17O、31P等，在磁场的作用下会发生核磁共振现象（NMR）。

通常以四甲基硅烷Si(CH3)4（简称TMS）为标准物。将其化学位移值定为零，其它质子的化学位移与其对照，取相对值。

影响化学位移的因素：

1.电负性与质子相连接的原子，其电负性较大，质子就在低场发生共振，化学位移δ值就大。

2.氢键键合在电负性大的元素上的氢原子，如O—H、N—H等易形成氢键，在较低场发生共振，质子的化学位移就越大。

激发光束与观察的荧光光束成直角，目的在于减少被散射的入射光进入检测器”（引自吴性良等复旦大学《分析化学原理》357页），其次是避免毛玻璃比色皿面可能造成的漫反射光的干扰。

色谱柱不用时为什么要充满有机溶剂？

防止空气中的水分进入柱子，造成柱子损害

总结几个仪器的基本部件

气相色谱：流程：载气系统、进样系统、色谱柱、检测器、记录系统

HPLC：高压泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录与处理系统

质谱：进样口→离子源→质量分析器→检测器→数据分析

紫外分光光度法：光源→单色器→样品室→检测器→显示系统

AAS：（锐线）光源（空心阴极灯）→原子化系统→单色器→检测系统

荧光分光光度计：光源→单色器→样品池→单色器→检测器→放大与记录

GC常用检测器：热导检测器（TCD）火焰光度检测器（FPD）氢火焰离子检测器（FID）质谱检测器（MSD）电子捕获检测器（ECD）

LC常用检测器是：紫外吸收检测器二极管陈列检测器荧光检测器电化学检测器化学发光检测器

什么是分子的同步荧光光谱，如何获得？有什么特点和作用？

答：荧光物质既具有发射光谱又具有激发光谱，如果采用同步扫描技术（两个单色器同步转动），同时记录所获得的谱图，称为同步荧光光谱。特点和作用：同步荧光光谱的谱图简单，谱带宽，减小了谱图重叠现象和散射光的影响，提高了分析测定的选择性，但同步荧光光谱损失了其他光谱带，提供的信息量减少。

简述原子吸收光谱俞分子吸收光谱的主要差异。

1、分子光谱远比原子光谱复杂，原子光谱为线状光谱，而分子光谱为带状光谱。

2、分子吸收可使用连续光源，而原子吸收只能使用线状光源。

3、分子能级：电子能级，振动能级，转动能级；而原子能级：电子能级。

4、所有能级量子化。从理论上说，所有吸收均应该是线状吸收，但由于分子能级的交叉及仪器分辨率的限制，测出的分子吸收成了带状吸收。

ＸＲＤ

原理： X射线是原子内层电子在高速运动电子的轰击下跃迁而产生的光辐射，主要有连续X 射线和特征X射线两种。晶体可被用作X光的光栅，这些很大数目的原子或离子/分子所产生的相干散射将会发生光的干涉作用，从而影响散射的X射线的强度增强或减弱。由于大量原子散射波的叠加，互相干涉而产生最大强度的光束称为X射线的衍射线。满足衍射条件，可应用布拉格公式：应用已知波长的X射线来测量θ角，从而计算出晶面间距d，这是用于X射线结构分析；另一个是应用已知d的晶体来测量θ角，从而计算出特征X射线的波长，进而可在已有资料查出试样中所含的元素。

方法：测定X射线衍射的方法主要有两类，一是粉末法，二是单晶旋转法。粉末法，是利用单色化的X射线被多晶粉末试样衍射的结果，从衍射图测量衍射相片线条的位置和相对强度，从而确定试样的化学组成和结晶状态。样品必须是结晶的粉末，所需试样量少，试样不被破坏，广泛应用于多晶物质混合物的物相分析。如晶体鉴定，对同一物质的不同晶状，含水物与无水物以及结晶水不同的化合物都可进行鉴定。

目的：测定晶体结构和某些结晶性质。

TRISTAR 3000自动气体吸附仪可以测定固体样品中微孔、中孔和大孔的孔径分布。这个是错的，并不能大孔。