伊 斯 兰 禁 忌
伊斯兰禁忌
一、饮食禁忌
（一）畜禽肉类禁忌
1、严禁吃自死物。
2、严禁食血液。
3、严禁吃猪肉。
4、严禁食用诵非安拉之名而宰杀的动物。
5、严禁食用猛禽猛兽和不反刍的畜类。
（二）禁用致醉和有毒的植物饮料
1、严禁饮酒。
2、禁止一切与酒有关的致醉物品。
3、禁止从事与酒有关的营生。
4、禁止出席有酒的筵席。
5、严禁服用一切麻醉品和毒品。
6、禁止吸烟。
二、服饰禁忌
1、禁止男性穿戴高贵服饰。
2、禁止妇女显露美姿和装饰。
3、严禁改变人类原造的矫饰行为。
4、禁止男人佩戴黄金饰物。
5、忌讳男子模仿妇女，妇女模仿男子。
三、卫生与性生活禁忌
1、禁止在公共场所大小便。
2、禁止用右手处理污秽事物。
3、禁止在礼拜时吐痰、打哈欠、吹东西。
4、禁止吃生葱、生蒜后做去清真寺礼拜。
5、忌讳贪食。5禁止和月经期妇女或产妇发生性交。7、禁止通奸。8严禁性反常。
四、婚姻禁忌
1、严禁与有相近血缘、亲缘、婚缘和乳缘关系的人结婚。
2、严禁与外教人结婚。
3、严禁娶有夫之妇。
4、严禁把离婚视为儿戏。
五、丧葬禁忌
1、禁止喧嚣。
2、禁止在日出、日落和正午时间举行葬礼。
3、禁止殡礼的人。（①遗骸不足身体的一半、头部完全丧失者；②婴儿落地即死、或不足月流产者，只洗浴埋葬无殡礼；③自杀而亡的人不行殡礼）
4、禁止嚎啕大哭。
5、禁止妇女参加殡礼。
6、禁止设灵位、祭台和向亡人祈祷。（严禁设灵位、祭坛、悬挂遗像、上香、燃烛、供祭品；禁止立碑题词；抚摸、亲吻或把头贴在坟地上）。
7、禁止妇女为亡人超期守制。（自己丈夫为四月零十天，其他亲属守丧期不许超过三天。）
8、禁止无故迁坟。（禁止掘墓取出残骸，包裹捆载，辗转千里，迁葬故土）。
9、禁止盼望死亡。10、禁止自杀。
六、商业禁忌
1、严禁重利盘剥。
2、禁止在商品中掺假，以次充好。
3、禁止囤积财富垄断市场。
4、禁止缺斤少两。
5、禁止发售推销商品。
6、禁止购买偷窃、抢夺来的东西。
7、严禁出售违禁物品。
8、禁止经商中使用欺骗手段。
七、人际交往禁忌
1、严禁作伪证。
2、严禁说谎。
3、禁止污蔑。
4、禁止谗言。
5、禁止诽谤。
6、禁止讥笑并以浑名相称。
7、禁止恶意猜测。
8、禁止侦探他人隐私。
9、禁止嫉妒。10、禁止妄言嬉行。（说空话、大话、秽语、荒诞不经导致淫秽，或消磨人的时间和意志的一切言行）。11、禁止背后非议。
八、精神生活禁忌
1、严禁赌博。
2、严禁求签。
3、严禁占卜看相。
4、严禁妖术。
5、严禁佩戴护身符。
最优考马斯亮蓝染色Protocol
考马斯亮蓝染色 推荐选用前三种染色方法，另有传统考马斯亮蓝染色法和网上经验，染色效果不好，不推荐使用，仅供参考。（见后页比对照片） 操作步骤： 1、取出SDS-PAGE凝胶，经超纯水漂洗；（以下每步操作皆在摇床上进行。） 2、固定：将凝胶放入相应的固定液中，固定1小时； 3、染色：取出凝胶，放入相应的染色液中，过夜染色；（也可依实际情况缩短时间） 4、脱色（胶体法&改良法）：凝胶放入纯水中洗脱，换液数次； 脱色（Neuhoff法）：取出凝胶，用0.1 M Tris-H3PO4缓冲液（pH6.5）漂洗2分钟。再用25%乙醇淋洗＜1 min。然后再用10%乙酸中在室温脱色2小时即可。 试剂的配制： 1、胶体考马斯亮蓝染色法（colloidal Coomassie brilliant blue，cCBB）： 固定液：40%甲醇、10%乙酸 染色液：1.6%磷酸、8%硫酸铵、0.02% CBB-G250、20%乙醇 脱色液：H2O 2、改良考马斯亮蓝染色法（modified Coomassie brilliant blue，mCBB）： 固定液：40%甲醇、10%乙酸 染色液：10%磷酸、10%硫酸铵、0.12% CBBG250、20%乙醇（着色1小时即可）。 脱色液：H2O 3、Neuhoff染色法： 固定液：12%三氯醋酸 染色液：2%磷酸、10%硫酸铵、0.02% CBB-G250、使用前振摇。染色时，取一定体积的染色液，加入1/4体积的甲醇。 脱色所需：0.1 M Tris-磷酸缓冲液（pH6.5）、25%乙醇、10%醋酸
4、传统考马斯亮蓝染色法： 固定液：45.4%甲醇、4.6%乙酸 染色液：45.4%甲醇、4.6%乙酸、0.1% CBB-G250 脱色液：5%甲醇、7.5%乙酸 5、网上方法： 固定液：40%甲醇、10%乙酸 染色液：30%甲醇、10%乙酸、0.125% CBB-G250 脱色液：30％甲醇，10％乙酸 比对照片：每块胶左道是Marker（质量原因，未跑开( ˇ?ˇ )）上样量5μl，右道是BSA（分子量68kDa），上样量为3μg. Neuhoff法 传统法胶体法改良法网上法
常用缓冲液及培养基配方
常用缓冲液及培养基配方 LB液体培养基： Bacto-蛋白胨10g 酵母抽提物5g 氯化钠10g 加950ml蒸馏水溶解，用5N氢氧化钠调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。LB固体培养基： 每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉，高压灭菌后保存。 SOB液体培养基 Bacto-蛋白胨20g 酵母抽提物5g NaCl 0.5g 加950 ml水溶解，加入250mmol/L KCl 溶液10ml，用5 N NaOH调pH至7.0，定容至1000 ml，高压灭菌后保存。使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。 SOC液体培养基 SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。 麦康凯固体培养基 每1000ml水中加52g培养基粉，煮沸溶解后分装，高压灭菌。 NA固体培养基 牛肉浸膏3g 酵母浸膏1g 蛋白胨蔗糖琼脂粉 5g 10g 15g 加950ml蒸馏水溶解，调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。 TB培养基： 将下列组分溶解在0.9L水中： Bacto-蛋白胨12g 酵母抽提物24g 甘油4ml 各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌。 溶液Ⅰ 葡萄糖2.25 g 50mmol/L 1mol/L Tris·Cl(pH8.0) 6.25ml 20mmol/L 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml 10mmol/L 调pH至8.0后，用水定容至250 ml，高压灭菌后保存。 溶液Ⅱ 10 mol/L NaOH 2ml 10% SDS 10ml 用水定容至100 ml，现配现用。 溶液Ⅲ 5 mol/L 醋酸钾60ml
SDS-PAGE试剂配方
SDS-PAGE电泳所用溶液： 30 %聚丙烯酰胺溶液(100 mL) 丙烯酰胺(Arc) 29 g N,N’-亚甲双丙烯酰胺(Bis) 1 g 用双蒸水定容至100mL，过滤备用，4℃存放 丙稀酰胺29.2g，N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g，加入去离子水定容至100mL，pH值不能超过7.0，过滤于棕色玻璃瓶中4℃贮存。 5×Tris-甘氨酸缓冲液(1 L) Tris碱15.1 g 甘氨酸(电泳级) 94 g 10 %SDS 50 mL 使用时稀释5倍使用 2×SDS凝胶加样缓冲液(10mL) 0.5 mol/L Tris-Cl (pH 6.8) 2 mL 10％(W/V)SDS 4 mL 甘油 2 mL β-巯基乙醇 1.0 mL (DTT（二硫苏糖醇）0.31g) 溴酚兰0.02g 双蒸水0.5 mL 室温存放备用 考马斯亮蓝染色液 考马斯亮蓝R-250 （G-250） 1.0 g 甲醇450 mL 冰醋酸100 mL ddH2O 450 mL 0.2g考马斯亮蓝R250+84mL 95％乙醇+20mL冰醋酸，定容至200mL，过滤备用 考马斯亮蓝脱色液（甲醇脱色液效果好，但有毒性） 甲醇100 mL 冰醋酸100 mL ddH2O 800 mL 医用酒精：冰醋酸：水=4.5：0.5：5(V：V：V)
SDS-PAGE所需溶液: A液——30％丙稀酰胺（W/V）：丙稀酰胺29.2g，N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g，加入去离子水定容至100mL，pH值不能超过7.0，过滤于棕色玻璃瓶中4℃贮存。 B液——1.5mol/L Tris·HCl，pH8.8：18.17g（9.09g）Tirs碱，溶于80mL（40mL）去离子水中，加入约 3mL(1.5mL)以上的浓盐酸调节pH值至8.8，定容至100mL（50mL）。 C液——1.5mol/L Tris·HCl，pH6.8：12.1g（6.05g）Tirs碱，溶于80mL（40mL）去离子水中，加入约7mL(3.5mL)以上的浓盐酸调节pH值至6.8，定容至100mL（50mL）。 D液——10％SDS：10g (2g)SDS溶于去离子水中，定容至100mL(20mL)，加热至68℃助溶。 E液——10％过硫酸铵：5g(0.5g)过硫酸铵，溶于50mL(5mL)去离子水中；现配现用或分装至0.5mL离心管中冷冻备用。 F液——TEMED(N-N-N`-N`－四甲基乙二胺)原液，室温保存。
常规考马斯亮蓝染色液
常规考马斯亮蓝染色液 简介： 考马斯亮蓝染色液(Commassie Blue Staining Solution)是以考马斯亮蓝R250为染料可用于SDS-PAGE 或非变性PAGE 等蛋白电泳胶的常规染色或Western 转膜后PAGE 胶上残余蛋白的检测。采用常规染色方法需至少1h ，采用快速染色方法一般数分钟即可。本染色液经过改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性气味的乙酸。 组成： 操作步骤(仅供参考)： (一)常规染色脱色方法 1、PAGE 电泳结束后取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，确保染色液可以充分覆盖凝胶。 2、置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色1小时或更长时间。具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚，温度较低，则染色时间宜适当延长。凝胶较薄，温度较高，则染色时间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近，在染色液中几乎看不清凝胶时，可以认为已染色充分。染色小时或更长时间不会对最终的染色效果产生负面影响。 3、倒出染色液。染色液可以回收重复使用次。 4、加入适量脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶。Leagene 推荐脱色液的配方是：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸馏水。 5、置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色。期间更换脱色液2～4次，直至蓝色背景基本上全部被脱去，并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1～2h 后即可出现。 6、完成脱色后把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨，可以把胶保存在含20%甘油水溶液中，长期保存可以制备干胶。 (二)快速染色脱色方法 1、PAGE 电泳结束后取胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾，立即停止加热。 2、随后在染色液温度较高的情况下，在室温摇床上摇动。 3、倒出染色液。染色液可以回收重复使用2～3次。 编号 名称 PT0018 PT0018 Storage Commassie Blue Staining Solution 100ml 500ml RT 使用说明书 1份
丽春红(Ponceau S)染色液的配制及使用
丽春红（Ponceau S）染色液的配制及使用 丽春红（Ponceau S）也称猩红，可以用于PVDF膜、硝酸纤维素膜（nitrocellulose membrane）和醋酸纤维素膜（cellulose acetate membrane）上的蛋白的检测。丽春红带负电荷，可以与带正电荷的氨基酸残基结合，同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合，从而形成红色的条带。丽春红染色的灵敏度不及考马斯亮蓝染色。 丽春红对蛋白的染色是可逆的，染色后可以用蒸馏水，PBS或其它适当溶液洗去。因此，蛋白质N端测序时将SDS-PAGE胶上的蛋白转移到PVDF膜，用丽春红染色后将目的条带切下用于测序。 注意：丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。 使用说明 将PVDF膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜浸没在丽春红染色液中，摇动5-10分钟或更长时间；取出印迹膜，用蒸馏水，PBS或其它适当溶液漂洗2-3次，可出现清晰条带，记录结果；用蒸馏水，PBS或其它适当溶液漂洗2-3次，每次3-5分钟，去除丽春红，进行后续的WB 检测。 补充：丽春红染色液也可以直接用来染PAGE胶，不过，在染色之前最好用甲醇-乙酸溶液浸泡一下PAGE胶，起到固定蛋白的作用。 丽春红染色液的配制 常用的丽春红染色液有两种：一种用乙酸配制，另外一种用三氯乙酸（TVA）和5-磺基水杨酸（5-Sulfosalicylic acid）配制。配制方法如下： 一、用乙酸配制成分：0.1%（w/v）丽春红，5%（v/v）乙酸，ddH2O。 4 ℃保存，不要冻上。也可以配成“0.2%（w/v）丽春红，3%（v/v）乙酸，ddH2O”。
二、用三氯乙酸和5-磺基水杨酸成分：2% （w/v）丽春红，30%的三氯乙酸，30%的5-磺基水杨酸。
PH0351 考马斯亮蓝染色液脱色液实验方法
PH0351|考马斯亮蓝染色试剂盒（染色液+脱色液） Commassie Blue Stain Kit Catalog No：PH0351Size：?100mL+500mL Store at RT 考马斯亮蓝染色试剂盒(Commassie Blue Staining Kit)采用了最经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法，以考马斯亮蓝R250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。 使用本试剂盒，采用常规染色脱色方法累计时间达到2-3小时后可以观察到蛋白条带；采用快速染色脱色方法20分钟左右即可观察到蛋白条带。观察到最清晰的蛋白条带则需染色脱色更长时间。 试剂组分 Components Size 考马斯亮蓝染色液/Commassie Blue Stain100mL 考马斯亮蓝染色脱色液/Commassie Blue Decoloring Solution500mL 试剂存储 室温保存，一年有效 使用说明 1.常规染色脱色方法： a.电泳结束后，取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，确保染色液可以充分覆盖凝胶。 b.置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色1小时或更长时间。 注：具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚，温度较低，则染色时间宜适当延长。凝胶较薄，温度较高，则染色时间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近，在染色液中几乎看不清凝胶时，可以认为已染色充分。染色2-4个小 时或更长时间不会对最终的染色效果产生负面影响。 c.倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。 d.加入适量考马斯亮蓝染色脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶。 e.置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色4-24小时。期间更换脱色液2-4次，直至蓝色背景基本上全部被脱去，并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1-2小时后即可出现。 注：脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸，可以使部分染料吸附在吸水纸上，加快脱色。脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。 f.完成脱色后，可以把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨，可以把胶保存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。
考马斯亮蓝R-250及G-250染料
考马斯亮蓝R-250及G-250染料 考马斯亮兰G-250； 名称：考马斯亮兰G-250 别名：考马斯亮兰G250，酸性蓝90，考马斯亮蓝G，康美赛蓝G-250，亮蓝G 英文：COOMASSIE BRILLIANT BLUE G-250 CAS：6104-58-1 相对分子量：854.04 分子结构： 性状：暗蓝-紫-棕色结晶粉末。 水中溶解度：40 g/L （20℃），溶于甲醇、乙醇； 介绍及用途：考马斯亮兰G-250用于凝胶电泳和蛋白质染色。不用渗透到胶里就比萘酚蓝黑B1（Naphthol Blue Black B1）灵敏度高3倍，简单而又灵敏；可以进行各种蛋白检测，和劳里反应相牵连的化学物质和游离氨基酸对此蛋白染色检测无任何影响。也是P2X7嘌呤能受体激动剂。 考马斯亮兰法（Bradford法）测定蛋白浓度 （一）实验原理 双缩脲法（Biuret法）和Folin―酚试剂法（Lowry法）的明显缺点和许多限制，促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。 1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法（Bradford法），是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置（lmax），由465nm变为595nm，溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。经研究认为，染料主要是与蛋白质中碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸残基相结合。 在595nm下测定的吸光度值A595，与蛋白质浓度成正比。 Bradford法的突出优点是： （1）灵敏度高，据估计比Lowry法约高四倍，其最低蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，蛋白质－染料复合物有更高的消光系数，因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。 （2）测定快速、简便，只需加一种试剂。完成一个样品的测定，只需要5分钟左右。由于染料与蛋白质结合的过程，大约只要2分钟即可完成，其颜色可以在1小时内保持稳定，且在5分钟至20分钟之间，颜色的稳定性最好。因而完全不用像Lowry法那样费时和严格地控制时间。 （3）干扰物质少。如干扰Lowry法的K+、Na+、Mg2+离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、EDTA等均不干扰此测定法。
SDS-PAGE所有详细试剂配方
S D S-P A G E 30%聚丙烯酰胺溶液-----30%（w/v）Acrylamide 【组分浓度】 各种组分名称配制不同体积所需各成分的体积(mL)或质量(g) 30%Acr-Bis(29:1) 1000ml 100ml 29%Acrylamide(丙烯酰胺) 290g 29g 1%BIS(N,N’-亚甲丙烯酰胺) 10g 1g 【配制方法】 将29克丙烯酰胺和1克N,N’-亚甲丙烯酰胺溶于总体积为60ml温热（37℃左右）的去离子水中，充分搅拌溶解，补加水至终体积为100ml。0.45μm微孔滤膜过滤除菌和杂质，储于棕色瓶，4℃避光（用铝箔纸包扎起来）保存。严格核实PH不得超过7.0，因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的。使用期不得超过两个月，隔几个月须重新配制。如有沉淀，可以过滤。 【保存条件】 4℃避光（用铝箔纸包扎起来）保存 【注意事项】 丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可通过皮肤吸收，其作用具有累积性。称量丙烯酰胺和N,N’-亚甲丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能含有少量未聚合材料。1MTris-HCL（pH6.8）(浓缩胶buffer) 【组分浓度】1MTris-HCL 名称用量备注 Tris 12.1g 去离子水80ml 浓盐酸9ml (36%的浓盐酸)预实验已确定 去离子水加入去离子水定容至100ml后，室温保存 【配制方法】 称量121.1gTris碱溶于800mL的去离子水，充分搅拌溶解，加>0.7mL的浓HCL调节所需要的pH 值（7.4-大约0.7mL，7.6-大约0.6mL，8.0-大约0.42mL），将溶液定容至1L，高温高压灭菌后，室温保存。应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。 【保存条件】 室温保存。 【注意事项】 对人体有刺激性，请注意适当防护。 1.5MTris-HCL（pH8.8）(分离胶buffer) 【组分浓度】1.5MTris-HCL 名称用量备注 Tris 18.17g 去离子水80ml 浓盐酸3ml (36%的浓盐酸)预实验已确定 去离子水加入去离子水定容至100ml后，室温保存 【配制方法】1L
考马斯亮蓝G250染料试剂
考马斯亮蓝G250染料试剂 简介： Bradford 法是常用的蛋白浓度检测的方法，与传统方法相比，更简单、更稳定、兼容性更好。Bradford 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度可高达1M ，DTT 的浓度可高达5mM 。但受高浓度的去垢剂的影响明显， 故在用Bradford Protein Assay Kit 进行蛋白定量时，需确保SDS 低于0.01%，Triton X-100低于0.05%，Tween 20, 60, 80低于0.015%，含高浓度去污剂的蛋白定量，建议采用BCA Protein Assay Kit 。 Leagene 考马斯亮蓝G250染料试剂由考马斯亮蓝G250、乙醇、磷酸组成，用于考马斯染料结合(Bradford)分析的总蛋白测量，其特点在于对蛋白样品中可能存在的大多数盐、溶剂、缓冲液、硫醇、金属螯合剂、还原性物质等均不排斥。检测浓度下限达到，最小检测蛋白量达到，待测样品体积为，在浓度范围内有较好的线性关系。 组成： 自备材料： 1、 酶标仪或分光光度计 2、 蒸馏水 3、 96孔板 操作步骤(仅供参考)： 1、 稀释蛋白标准(一般为BSA 5mg/ml)使其终浓度为0.5mg/ml 。注意：蛋白样品在什么溶液中，蛋白标准也应用什么溶液稀释，也可以用 NaCl 或PBS 稀释蛋白标准。 2、 将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl 加到96孔板的蛋白标准孔中，加蛋白标准稀释液补足至。 3、 加适当体积样品到96孔板的样品孔中，补加标准品稀释液。 4、 各孔加入考马斯亮蓝G250染料试剂，室温放置。 5、 酶标仪测定吸光值，560~610nm 之间的波长也可。 6、 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。 编号 名称 PT0010 PT0010 Storage 考马斯亮蓝G250染料试剂 100ml 500ml RT 避光 使用说明书 1份
染色液配方
实验室常用染色液配方 1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液 A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升 B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。 2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升 B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升 将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。将两者混合即成。 3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫 升 B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升 将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。 两液混合即成。 4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。 5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升 6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔 雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。 7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40% 甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。 8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升 9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.0 10、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸 (比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。 11动物组织石蜡切片染色方法 苏木精-伊红(HE)染色：二甲苯Ⅰ, Ⅱ各10 min，依次进入无水乙醇、950 mL/L, 900 mL/L, 800 mL/L及700 mL/L的酒精各5 min，蒸馏水洗；入苏木精染液10 min，盐酸酒精分色4 s，自来水洗10 min；依次入700 mL/L, 800 mL/L及900 mL/L酒精各5 min，入伊红染液染色10 min；入950 mL/L及无水乙醇Ⅰ, Ⅱ各5 min, 以二甲苯透明，中性树脂封片. 一、常用染色液的配制 ⒈碘-碘化钾（I2-KI）溶液能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测 定的重要试剂。 配方：碘化钾2g ；蒸馏水300ml ；碘1g 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL，保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍，这样染色不致过深，效果更佳。 ⒉苏丹Ⅲ（sudanⅢ或Ⅳ）能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红 色或淡红色，是著名的脂肪染色剂。 配方：（1）苏丹III或苏丹Ⅳ干粉0.1g ；95％酒精10ml ；过滤后再加入10ml甘油
考马斯亮蓝快速染色液
考马斯亮蓝快速染色液 简介： 考马斯亮蓝快速染色液(Commassie Blue Fast staining solution)是以考马斯亮蓝G250为染料可用于SDS-PAGE 或非变性PAGE 等蛋白电泳胶的快速染色，亦可用于Western 转膜后PAGE 胶上残余蛋白的检测。 Leagene 考马斯亮蓝快速染色液采用Leagene 自主研发的技术，在传统考马斯亮蓝快速染色液的基础上进行改良，是一种无毒的染色液，快速染色液，可以检测低达蛋白电泳条带。其核心优点在于：无需对凝胶进行固定，无需煮沸，无需脱色，染色时间短，操作更加简单。 组成： 自备材料： 1、 水平摇床或侧摆摇床 2、 蒸馏水 3、 (可选)加热装置 4、 20%甘油水溶液 操作步骤(仅供参考)： 1、PAGE 电泳结束后取凝胶放入约蒸馏水中，在摇床上摇动，弃液，重复上述步骤1次。 2、弃蒸馏水，加入Commassie Blue Fast staining solution ，使染色液能盖住凝胶。 3、(可选)凝胶置于考马斯亮蓝快速染色液中，在水浴锅或微波炉内加热至95～100℃，立即从加热装置中取出。(此步骤可以使染色提高灵敏度或加快染色进程，亦可省略。) 4、在摇床上摇动染色，蛋白量大的条带10～15min 左右会出现，大部分蛋白条带会在30～60min 左右出现。一般情况下，5h 能获得极佳效果。 5、出现清晰的目标蛋白条带即可停止染色，弃染色液。 6、加入适量的蒸馏水停止染色反应。亦可以在摇床上摇动脱色，以便减少背景干扰。 7、把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨，可以把胶保存在含20%甘油水溶液中，长期保存可以制备干胶。 编号 名称 PT0013 PT0013 Storage 考马斯亮蓝快速染色液 100ml 500ml 4℃ 使用说明书 1份
常规考马斯亮蓝染色液
常规考马斯亮蓝染色液 货号：P1310 规格：100mL/500mL 保存：室温保存，有效期12个月。 产品说明： 考马斯亮蓝染色液(Commassie Blue Staining Solution)是以考马斯亮蓝R250为染料可用于SDS-PAGE 或非变性PAGE等蛋白电泳胶的常规染色或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。采用常规染色方法需至少1h，采用快速染色方法一般数分钟即可。本染色液经过改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性气味的乙酸。 自备材料： 水平摇床或侧摆摇床、蒸馏水、20%甘油水溶液、(可选)加热装置 操作步骤(仅供参考)： (一)常规染色脱色方法 1、PAGE电泳结束后取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，确保染色液可以充分覆盖凝胶。 2、置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色1小时或更长时间。具体的染色时间取决于凝胶的厚度 和染色时的温度。凝胶较厚，温度较低，则染色时间宜适当延长。凝胶较薄，温度较高，则染色时间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近，在染色液中几乎看不清凝胶时，可以认为已染色充分。染色2～4个小时或更长时间不会对最终的染色效果产生负面影响。 3、倒出染色液。染色液可以回收重复使用2～3次。 4、加入适量脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶。推荐脱色液的配方是：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸馏 水。 5、置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色4～24h。期间更换脱色液2～4次，直至蓝色背景基本 上全部被脱去，并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1～2h后即可出现。 6、完成脱色后把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨，可 以把胶保存在含20%甘油水溶液中，长期保存可以制备干胶。
Western Blot相关试剂配方及详细实验步骤
Western Blot详细实验步骤及试剂配方 1. 溶液配置 1.1 5×SDS-PAGE上样缓冲液（Loading buffer） 药品用量 1 M Tris-HCl (PH=6.8) 1.25 mL SDS 0.5 g BPB（溴酚蓝，有毒）25 mg 甘油 2.5 mL 去离子水up to 5 mL 分装至1.5 mL离心管中，每管500 μL，室温保存，使用前每管加入25 μL的β-巯基乙醇。 1.2 10×SDS-PAGE电泳缓冲液（Running buffer 母液） 药品用量 Tris 30.3 g Glycine (甘氨酸) 144.2 g SDS 10 g ddH2O up to 1 L 室温保存即可，使用时稀释为1×的工作液，可回收反复使用4~5次。 1.3 Tris-HCl缓冲液 （1）1.5 M Tris-HCl (PH=8.8)→制分离胶 Tris (MW: 121.14) 45.43 g H2O up to 250 mL 浓盐酸调PH 8.8 （2）1.0 M Tris-HCl (PH=6.8)→制浓缩胶 Tris (MW: 121.14) 30.29 g H2O up to 250 mL 浓盐酸调PH 6.8 二者高压灭菌后，置于室温保存即可。
1.4 10% SDS (十二烷基硫酸钠) SDS 10 g ddH2O up to 100 mL 室温保存即可。 1.5 10% AP (过硫酸铵)→1.5 mL 离心管配制 过硫酸铵（刺激性，腐蚀性） 0.1 g 超纯水up to 1 mL 混匀后，锡箔纸包住，避光处理，置于-20℃保存。 1.6 30% 丙烯酰胺溶液 丙烯酰胺 150 g 甲叉双丙烯酰胺 4 g Milli-Q水 30 mL 滤纸过滤，Milli-Q水定容至500 mL，装入棕色瓶子中，4℃保存。 1.7 10×转膜缓冲液(Trans buffer 母液) Tris (MW: 121.14) 30.3 g Glycine (甘氨酸) 144 g 去离子水 up to 1 L 室温保存即可，其1×的工作液配制为：100 mL母液+200 mL甲醇（有毒）+700 mL水。 1.8 脱色液（蛋白胶考染后脱色） 甲醇 30 mL 冰醋酸 10 mL ddH2O up to 100 mL 注意：甲醇具有挥发性，对人体的神经系统和血液系统影响最大，它经消化道、呼吸道或皮肤摄入都会产生毒性反应，甲醇蒸气能损害人的呼吸道粘膜和视力，使用过程中最好戴口罩。脱色液常温放置即可。
考马斯亮蓝快速染色液使用说明
考马斯亮蓝快速染色液 产品编号产品名称包装 P0017 考马斯亮蓝快速染色液 250ml 产品简介： 考马斯亮蓝快速染色液(Commassie Blue Fast Staining Solution)是以考马斯亮蓝G250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳胶的快速、高灵敏染色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。 本考马斯亮蓝快速染色液是一种无毒，无刺激性气味的高度环保型染色液。普通的常规方法需使用剧毒的甲醇及强刺激性的乙酸，而碧云天生产的考马斯亮蓝快速染色液则采取全新配方，实现了无毒和无刺激性气味。 本考马斯亮蓝快速染色液只需一小时或更短时间就可以检测到低达100ng的蛋白电泳条带，而常规方法需3小时以上。 本试剂盒可以进行高灵敏染色，最低可以清楚检测到10ng的蛋白电泳条带，参考图1。 蛋白上样量： 10μg 5μg 2μg 1μg 500ng 200ng 100ng 50ng 20ng 10ng 5ng 2ng 1ng 图1. 使用碧云天的考马斯亮蓝快速染色液对不同上样量的BSA蛋白样品用10% SDS-PAGE胶电泳后的两次染色结果。 无需对蛋白和凝胶进行固定，可以不进行脱色，操作更加简单。 本染色液和质谱分析兼容，即经过本染色液染色的蛋白条带或蛋白点可以用于后续的质谱分析。 包装清单： 产品编号产品名称包装 P0017 考马斯亮蓝快速染色液250ml —说明书1份 保存条件： 4℃保存，一年有效。 注意事项： 本染色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。 如果使用微波炉加热，请特别注意避免沸腾。以免因暴沸而导致凝胶碎裂。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 1. 电泳结束后，取胶放入约50-100ml蒸馏水中，在摇床上摇动5分钟，倒弃液体，再重复两次，共洗涤三次。 注：本步骤的目的是为了洗去凝胶中的SDS等干扰物质。如果不能充分去除SDS会导致背景较高，如果胶非常厚，每次的洗涤时间需适当延长并且洗涤次数也需适当增加。蒸馏水洗涤去除凝胶中的杂质时，如果使用经过加热至接近沸腾的蒸馏水，每次洗涤1-2分钟即可。 2.弃蒸馏水，加入适当体积的考马斯亮蓝快速染色液，使染色液能盖住凝胶，且液面至少高出三个胶的厚度为宜，在侧摆 摇床或水平摇床上进行染色。 3.根据蛋白量的多少，蛋白量大的条带10-30分钟左右会出现，大部分蛋白条带会在1-2小时左右出现。如果希望获得染色灵 敏度更高的结果或希望加快染色进程，可以把凝胶放置在考马斯亮蓝快速染色液中在95-100℃水浴或烘箱中加热或使用微波炉加热。加热至约95-100℃后，在摇床上进行染色。染色液稍冷或冷至近室温后可以继续同前进行加热和摇床染
常规考马斯亮蓝染色洗脱液
常规考马斯亮蓝染色洗脱液 简介： 考马斯亮蓝染色脱色液(Commassie Blue staining destaining solution)是用于蛋白凝胶考马斯亮蓝染色后脱色的溶液。采用常规脱色方法至少脱色可以观察到蛋白条带，采用快速脱色方法不足30min 内即可观察到蛋白条带。观察到最清晰的蛋白条带则需脱色更长时间。 Leagene 常规考马斯亮蓝染色脱色液经过改良，不含甲醇，含有刺激性气味的乙酸，减少了对人体的伤害。 组成： 自备材料： 1、水平摇床或侧摆摇床 2、蒸馏水 3、20%甘油水溶液 操作步骤(仅供参考)： (一)常规染色脱色方法 1、凝胶染色后倒出染色液。染色液可以回收重复使用。 2、加入适量脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶。 3、置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色。期间更换脱色液2～4次，直至蓝色背景基本上全部被脱去，并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1～2h 后即可出现。 4、完成脱色后把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨，可以把胶保存在含20%甘油水溶液中，长期保存可以制备干胶。 (二)快速染色脱色方法 1、凝胶染色后倒出染色液。染色液可以回收重复使用。 2、加入适量脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶。 3、微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾，立即停止加热。 4、随后在脱色液温度较高的情况下，在摇床上摇动。此时通常可以观察到比较清楚的蛋白 编号 名称 PT0019 PT0019 Storage 常规考马斯亮蓝染色洗脱液 100ml 500ml RT 使用说明书 1份
条带。 5、更换新鲜的脱色液，重复步骤3和步骤4，直至蓝色背景基本上全部被脱去，蛋白条带染色效果达到预期。 6、完成脱色后把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨，可以把胶保存在含甘油水溶液中，长期保存可以制备干胶。 注意事项： 1、染色时，如果把凝胶和染色液一起放置在微波炉中适当加热，可以大大加快染色速度。但加热时宜尽量避免沸腾，以免出现因暴沸而导致的凝胶碎裂。 2、脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸，可以使部分染料吸附在吸水纸上，加快脱色。脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。 3、如果希望染色的背景更低，希望获得更加清晰的蛋白条带，可以加入适量的室温蒸馏水进行洗涤。通过蒸馏水洗涤可以进一步降低背景。在4℃蒸馏水中浸泡过夜可以获得背景更低，条带更清晰的条带。在次日对4℃蒸馏水浸泡过夜的已经进行了染色的凝胶再同前一天一样进行染色和洗涤可以进一步改善染色效果，获得更好的考染蛋白条带。 4、微波炉加热导致的高温会引起染色液和脱色液中的乙酸的挥发，最好能在通风橱中进行。 5、本染色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。 6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期：12个月有效。 相关： 编号名称 DC0032 Masson三色染色液 PS0013 RIPA裂解液(强) PT0001 BCA蛋白定量试剂盒 PW0040 Western blot一抗稀释液 PW0053 Western抗体洗脱液(碱性) TC1243 甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP单试剂比色法)
常用western blot 试剂配方
Western blot常用试剂配方 1. 丙烯酰胺-双丙烯酰胺储存液：30% AB（100ml） 丙烯酰胺29 g 双丙烯酰胺1g 加蒸馏水至100ml，过滤，棕色瓶保存。 2. 10% SDS：（10ml） 电泳级SDS 1 g 蒸馏水9 ml 初始PH约为7.85，用针尖蘸少许浓盐酸调PH 至7.2，定容至10ml。 3.TEMED（四甲基乙二胺）（成品） 4. Lower-buffer （1.5M Tris-Cl PH 8.8）：50ml Tris-base 9.085 g 蒸馏水45 ml 加浓盐酸（约0.4ml）调PH至8.8后定容至50ml，4℃保存。 5. upper buffer（1.0M Tris-Cl，PH 6.8）：50ml Tris-base 6.055 g 蒸馏水44 ml 加3.5ml浓盐酸调PH至6.8后定容至50ml，4℃保存。 6. 10%过硫酸铵（10% AP）：0.5ml 新鲜配制 称取0.05g AP于1.5ml EP管中，储存于-20℃，用时溶于0.5ml蒸馏水7. 5 × loading buffer：（1ml）50ml upper buffer 0.312 ml 15.6ml 甘油（丙三醇）0.5 ml 25ml
SDS 0.1 g 5g DTT 0.0385 g 溴酚蓝0.005g 0.25g 加蒸馏水溶解后定容至1ml。取0.2ml加0.8ml蒸馏水配成工作液。 8. 5 × running buffer：（1000ml） Tris-base 15.1 g 甘氨酸（Glycine）94 g SDS 5 g 加蒸馏水溶解后定容至1000ml。用时加4000 ml蒸馏水。 9. 考马斯亮蓝染液：100ml（可重复利用） 甲醇30 ml 冰乙酸10 ml 蒸馏水60 ml 考马斯亮-250 0.05 g 10. 考马斯亮蓝脱色液500ml：现用现配 乙酸（10%）50ml 甲醇（30%）150ml 加蒸馏水定容至500ml。 11. Transbuffer（PH 8.5）：100ml 现用现配 Tris-base 0.3028 g 甘氨酸 1.4872 g 甲醇20 ml 加蒸馏水定容至100ml。 12. 10 x 丽春红染液（储存液）：（可重复利用） （用时用蒸馏水稀释为1 X 的）染色后用纯水脱色
考马斯亮蓝染色液(常规法)
考马斯亮蓝染色液(常规法) 产品简介： 本考马斯亮蓝染色液(Commassie Blue Staining Solution)是以考马斯亮蓝R250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE 等蛋白电泳胶的常规染色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。 本染色液可以和碧云天的考马斯亮蓝染色脱色液(P0017C)配套使用。 使用本染色液进行染色，采用常规染色方法需至少1小时可以完成染色；采用快速染色方法数分钟即可完成染色。 本染色液经过改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性气味的乙酸。 保存条件： 室温保存，至少一年有效。 注意事项： 需自备脱色液。脱色液可以选购碧云天的考马斯亮蓝染色脱色液(P0017C)。 可以使用枪头盒或适当大小的培养皿作为染色和脱色的容器。 本染色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 1. 常规染色脱色方法： a. 电泳结束后，取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，确保染色液可以充分覆盖凝胶。 b. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色1小时或更长时间。 注：具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚，温度较低，则染色时间宜适当延长。凝胶较薄，温度较高，则染色时间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近，在染色液中几乎看不清凝胶时，可以认为已染色充分。染色2-4个小时或更长时间不会对最终的染色效果产生负面影响。 c.倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。 d.加入适量脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶。 注：脱色液可以选购碧云天的考马斯亮蓝染色脱色液(P0017C)；如果希望自行配制，推荐的脱色液配方为：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸馏水。也可以使用其它适当的脱色液。 e.置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色4-24小时。期间更换脱色液2-4次，直至蓝色背景基本上全部被脱去，并 且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1-2小时后即可出现。 注：脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸，可以使部分染料吸附在吸水纸上，加快脱色。脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。 f．完成脱色后，可以把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨，可以把胶保存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。 2. 快速染色脱色方法： a. 电泳结束后，取胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾，立即停止加热。 通常对于胶浓度大于10％的胶比较坚韧，在发生煮沸时不易破损；对于胶浓度小于10%的胶，宜尽量避免煮沸，以免出现胶碎裂的情况。 b.随后在染色液温度较高的情况下，在室温摇床上摇动5-10分钟。 c.倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。 d.加入适量脱色液，确保染色液可以充分覆盖凝胶。 注：脱色液可以选购碧云天的考马斯亮蓝染色脱色液(P0017C)；如果希望自行配制，推荐的脱色液配方为：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸馏水。也可以使用其它适当的脱色液。
SDS-PAGE所有详细试剂配方
SDS-PAGE 30%聚丙烯酰胺溶液-----30%（w/v ）Acrylamide 【组分浓度】 【配制方法】 将29克丙烯酰胺和1克N,N’ -亚甲丙烯酰胺溶于总体积为60ml 温热（37℃左右）的去离子水中，充分搅拌溶解，补加水至终体积为100ml 。μm 微孔滤膜过滤除菌和杂质，储于棕色瓶，4℃避光（用铝箔纸包扎起来）保存。严格核实PH 不得超过，因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的。使用期不得超过两个月，隔几个月须重新配制。如有沉淀，可以过滤。 【保存条件】 4℃避光（用铝箔纸包扎起来）保存 【注意事项】 丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可通过皮肤吸收，其作用具有累积性。称量丙烯酰胺和N,N’-亚甲丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能含有少量未聚合材料。 1MTris-HCL （）(浓缩胶buffer) 【组分浓度】1MTris-HCL 【配制方法】
称量碱溶于800mL的去离子水，充分搅拌溶解，加>的浓HCL调节所需要的pH值（大约，大约，大约），将溶液定容至1L，高温高压灭菌后，室温保存。应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低个单位。 【保存条件】 室温保存。 【注意事项】 对人体有刺激性，请注意适当防护。 （）(分离胶buffer) 【组分浓度】 【配制方法】1L 称量碱溶于800mL的去离子水，充分搅拌溶解，加浓HCL调节所需要的pH值=，将溶液定容至1L，高温高压灭菌后，室温保存。（LTris-HCL:和48ml1mol/LHCL混合，加水稀释到100ml终体积。过滤后40C 保存。） 【保存条件】 室温保存 【注意事项】 应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低个单位。 10%十二烷基硫酸钠SDS溶液-----10%(w/v)SDS 【组分浓度】10%(w/v)SDS
常用染色液的配制
一、常用染色液的配制 ⒈碘-碘化钾（I2-KI）溶液能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂。 配方：碘化钾2g ；蒸馏水300ml ；碘1g 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL，保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍，这样染色不致过深，效果更佳。 ⒉苏丹Ⅲ（sudanⅢ或Ⅳ）能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色，是著名的脂肪染色剂。 配方：（1）苏丹III或苏丹Ⅳ干粉；95％酒精10ml ；过滤后再加入10ml甘油 （2）先将苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。 （3）苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。 ⒊1％醋酸洋红（aceto carmine）酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红色，细胞质成浅红色。 配方：洋红1g ；45％醋酸100ml 煮沸2h左右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量，然后冷却过滤，加入4％铁明矾溶液1～2滴（不能多加，否则会发生沉淀），放入棕色瓶中备用。 ⒋改良苯芬品红染色液（Carbol fuchsine）核染色剂。 配制步骤：先配成三种原液，再配成染色液。 原液A：3g碱性品红溶于100ml 70％酒精中。 原液B：取原液A10ml加入到90ml 5％石炭酸水溶液中。 原液C：取原液B 55ml，加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林（38％的甲醛）。 （原液A和原液C可长期保存，原液B限两周内使用） 染色液：取C液10～20ml，加45％冰醋酸80～90ml，再加山梨醇1~，配成10％～20％浓度的石炭酸品红液，放置两周后使用，效果显著（若立即用，则着色能力差）。 适用范围：适用于植物组织压片法和涂片法，染色体着色深，保存性好，使用2～3年不变质。山梨醇为助渗剂，兼有稳定染色液的作用，假如没有山梨醇也能染色，但效果较差。 ⒌中性红（neutral red）溶液用于染细胞中的液泡，可鉴定细胞死活。 配方：中性红；蒸馏水100ml 使用时再稀释10倍左右。 ⒍曙红Y（伊红，eosin Y）酒精溶液常与苏木精对染，能使细胞质染成浅红色，起衬染