最新2019年浙江省高考生物专题复习试题及答案

最新浙江省高考生物专题复习试题及答案

规范练1生物技术实践相关应用

1．(2018·浙江4月选考，32节选)回答与果胶、淀粉等提取和利用有关的问题：

某植物富含有果胶、淀粉、蛋白质和纤维素成分。某小组开展了该植物综合利用的研究。(1)果胶提取工艺研究结果表明，原料先经过一段时间沸水漂洗的果胶得率(提取得到的果胶占原料质量的百分率)显著高于常温水漂洗的果胶得率，最主要原因是沸水漂洗__________(A.有助于清洗杂质和去除可溶性糖B．使植物组织变得松散C．使有关酶失活D．有利于细胞破裂和原料粉碎制浆)。

(2)在淀粉分离生产工艺研究中，为促进淀粉絮凝沉降，添加生物絮凝剂(乳酸菌菌液)，其菌株起重要作用。为了消除絮凝剂中的杂菌，通常将生产上使用的菌液，采用____________，进行单菌落分离，然后将其__________，并进行特性鉴定，筛选得到纯的菌株。

(3)在用以上提取过果胶和淀粉后的剩渣加工饮料工艺研究中，将剩渣制成的汁液经蛋白酶和纤维素酶彻底酶解处理后，发现仍存在浑浊和沉淀问题。可添加________________________使果胶彻底分解成半乳糖醛酸，再添加__________________，以解决汁液浑浊和沉淀问题。

(4)在建立和优化固定化酶反应器连续生产工艺研究中，通常要分析汁液中各种成分的浓度和所用酶的活性，然后主要优化各固定化酶反应器中的________________________(答出2点即可)、反应pH和酶反应时间等因素。其中，酶反应时间可通过______________________来调节。

2．(2017·浙江11月选考，32节选)回答与酿酒和制醋有关的问题：

(1)为了获得优良的酿酒红曲霉菌株，将原菌株的孢子诱变处理后制成较稀浓度的单孢子悬液，这样做的目的是在培养时利于获得________。

(2)大米经蒸煮、红曲霉菌糖化后，用某酿酒酵母进行酒精发酵，发酵完毕后得到新鲜红曲酒，酒中乙醇浓度不超过15%。其主要原因是当发酵液中的乙醇浓度接近15%时，____________(A.乙醇氧化逐渐增强直至平衡B．葡萄糖分解逐渐增强直至平衡C．乙醇

氧化逐渐减弱直至停止D．葡萄糖分解逐渐减弱直至停止)。

(3)已知葡萄糖与蒽酮试剂反应能产生颜色。采用光电比色法测定红曲酒中的葡萄糖含量的步骤如下：

第一步，标准曲线的制作。用蒸馏水配制____________________，与蒽酮试剂反应后，用比色计测定，并制作以____________________________的标准曲线。

第二步，样品处理。将待测酒样品通过活性炭脱色，其目的是

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

第三步，样品测定与计算。

(4)影响红曲酒风味的主要因素，除了温度、pH、氧气等环境因素外，还有________________________________________________________________________

(答出2点即可)。

(5)在红曲醋生产工艺中，将适量的红曲酒、水和醋化醋杆菌等混合，再添加一定量谷壳糠等制成松散的发酵料，其主要目的是__________________________，以利于醋酸发酵。

3．(2018·杭州学军中学3月选考模拟)回答下列有关果胶、果汁和果胶酶等问题。

(1)果胶是植物细胞壁的主要成分，起着将植物细胞________在一起的作用。制作果汁时可加入果胶酶和________________以分解果胶，提高果汁出汁率和澄清度。

(2)果胶酶可从黑曲霉中提取，下列适于黑曲霉扩大培养的培养基是________(A.蛋白胨和酵母提取物培养基B．尿素固体培养基C．MS培养基D．添加蔗糖的豆芽汁培养基)。由于果胶酶溶于水，不利于重复使用，可通过物理或化学方法将果胶酶固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有________的制剂。

(3)用果汁制作果酒，以果汁为原料，加入一定比例的蔗糖目的是_________。

最后倒入酵母悬液，混匀，加盖；发酵开始时，由于微生物的需氧呼吸会使发酵瓶内出现________，原因是____________________________________________________________

________________________________________________________________________。4．(2018·稽阳联谊学校3月联考)《生物技术实践》的实验中，需对微生物进行一定的处理，请回答下列相关问题：

(1)在含哺乳动物排泄物的土壤中有较多含脲酶的细菌，在无菌条件下，将土样与________混合，制成不同稀释度的细胞悬液，进行涂布分离。制备尿素为氮源的培养基平板时，下列操作不是必需的是________(A.高压蒸汽灭菌B．过滤灭菌C．对蒸馏水灭菌D．加琼脂糖)

(2)用葡萄制作葡萄酒时，放入发酵瓶前的酵母悬液的制作方法是：用________________将适量干酵母溶解成糊状；加入极少量蔗糖，目的是___________________________。

(3)用果酒制果醋时，一定体积的酒水混合物和醋化醋杆菌附着在锯末上时，发酵瓶中几乎没有游离的液体存在，通入空气并发酵约48 h后，会流出酸性液体，原因是___________________

________________________________________________________________________(请用反应式表示)。

(4)大肠杆菌、醋化醋杆菌进行扩大培养时，培养基中相同的成分是蛋白胨、酵母提取物和________，都用摇床振荡培养的目的是___________________________________________。5．(2018·宁波市3月新高考模拟)研究小组从土壤中筛选以多环芳烃(PAHs)为碳源和能源的细菌，用以降解工业废水和生活污水中的PAHs。请回答：

(1)为了从土壤中筛选PAHs降解菌，需配制以________为唯一碳源的培养基，培养基经________[A.121 ℃(500 g/cm2压力)，15 min B．90 ℃(500 g/cm2压力)，15 min C．121 ℃(1 kg/cm2压力)，15 min D．90 ℃(500 g/cm2压力)，30 min]高压蒸汽灭菌，待冷却至60 ℃后倒平板。

(2)倒平板时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是______________________。在倒平板的过程中，如果培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，则这个平板不能用来培养PAHs降解菌，原因是________________________________________________________________________。(3)制备土壤稀释液，用________方法接种于固体培养基表面，培养时，需将培养皿________并放在37 ℃恒温培养箱中培养24 h。

(4)用划线法纯化PAHs降解菌的过程中，在第二次及其后的划线操作时，须从上一次划线的末端开始划线，原因是___________________________________________________________ ________________________________________________________________________。6．(2018·浙江五校第一次联考)某村庄有一条小溪，近几年由于上游几家乳胶厂不断向其中排放废水，小溪变得不再清澈。某同学想测定该溪水中的细菌含量情况。回答下列问题：(1)先根据所学知识制备LB培养基。制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，下列关于制备LB培养基的叙述，错误的是________。

A．培养基应先调pH再进行灭菌

B．培养基应先灭菌再分装到培养皿

C．溶化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦

D．灭菌时一般用高压蒸汽灭菌锅在121 ℃，500 g/cm2压力下灭菌15分钟

(2)该同学利用上述制备的培养基来检测水样中的细菌数量，他所选择的分离方法应是________________；该同学在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是______________________________________。接种在超净工作台上进行，工作台上实验前一段时间需打开，实验中需关闭的是________(A.酒精灯B．照明灯C．紫外线D．过滤风)。

(3)值得注意的是，他所选择的这种方法统计的结果往往比实际细菌的数目要低，这是因为：

①________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

②________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(不考虑实验操作原因引起的细菌数目的变化)

(4)该同学欲将所分离出的某种细菌临时保藏，应接种到试管的________培养基上，等菌落长成后，放入冰箱低温保藏。

答案精析

1．(1)C(2)划线分离法(或涂布分离法)扩大培养(3)果胶酶和果胶甲酯酶淀粉酶使淀粉分解(4)固定化酶的量、反应液温度控制反应器液体流量(或体积)

解析果胶酶活性受温度、pH值或酶抑制剂的影响。固定化酶就是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质(如石英砂)上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。常用方法有吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等。

2．(1)单菌落(2)D(3)一系列浓度的葡萄糖标准溶液葡萄糖浓度为横坐标，以光密度值为纵坐标排除酒原有颜色的干扰(4)不同的菌株、不同的原料(5)增加通气性

解析(1)在适当的稀释度下，可培养得到相互分开的菌落，即单菌落。(2)乙醇浓度接近15%时，抑制了酵母菌的活性，可推知葡萄糖的分解会逐渐减弱直至停止。(3)标准曲线的制作：用蒸馏水配制不同浓度葡萄糖标准溶液，与蒽酮试剂反应后，用比色计测定，并制作以葡萄糖浓度为横坐标，以光密度值为纵坐标的标准曲线。样品处理：因为要用比色杯测光密度值，所以将待测酒样品通过活性炭脱色，其目的是防止酒样品的颜色影响比色。(4)酿酒过程中，除了温度、pH、氧气等环境因素外，还有酿酒原料、菌种活性、糖含量、杂菌污染、次级代谢产物等都会影响酒的风味。(5)酿醋过程中，添加一定量谷壳糠等制成松散的发酵料，可在发酵过程中为醋化醋杆菌积存氧气，松散有利于空气流通。

3．(1)粘合果胶甲酯酶(2)D酶活性(3)提高果酒的酒精和糖的含量负压需氧呼吸消耗氧气，产生的二氧化碳比氧气易溶于水

解析(1)果胶是植物细胞壁的主要成分，起着将细胞粘合在一起的作用。制作果汁时可加入果胶酶和果胶甲酯酶以分解果胶，提高果汁出汁率和澄清度。

(2)黑曲霉是异养需氧微生物，扩大培养需要含有有机物的液体培养基，而A、B、C选项所给的培养基都是固体培养基，不适合扩大培养，而D选项所给的添加蔗糖的豆芽汁培养基是液体培养基且含有有机物蔗糖，适合扩大培养黑曲霉，故选D。由于果胶酶溶于水，不利于重复使用，可通过物理或化学方法将果胶酶固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。

(3)用果汁制作果酒，以果汁为原料，加入一定比例的蔗糖的目的是提高果酒的酒精和糖的含量。最后倒入酵母悬液，混匀，发酵开始时，由于微生物的需氧呼吸会使发酵瓶内出现负压，原因是需氧呼吸消耗氧气，产生的二氧化碳比氧气易溶于水。

4．(1)无菌水C(2)小于40 ℃的温水使酵母迅速发生作用(3)C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O(4)水提供氧气和与营养物质充分接触

解析(1)要用涂布分离法分离细菌，需在无菌条件下，将土样与无菌水混合，制成不同稀释度的细胞悬液；制备尿素为氮源的培养基平板时，采用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌法、

G6玻璃砂漏斗过滤法，加琼脂糖可制成固体培养基，对蒸馏水不需灭菌，因此，C项操作不是必需的。

(2)用葡萄制作葡萄酒时，放入发酵瓶前的酵母悬液的制作方法是：用小于40 ℃的温水将适量干酵母溶解成糊状；加入极少量蔗糖的目的是使酵母迅速发生作用。

(3)用果酒制作果醋时，通入空气并发酵约48 h后，醋化醋杆菌可将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸(简化的反应式见答案)，此过程中有水生成，所以会流出酸性液体。

(4)大肠杆菌、醋化醋杆菌进行扩大培养时，培养基中相同的成分是蛋白胨、酵母提取物和水，都用摇床振荡培养的目的是提供氧气和与营养物质充分接触。

5．(1)PAHs C(2)防止杂菌污染空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生(3)涂布倒置(4)使细菌数随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而成的菌落

解析(1)从土壤中筛选PAHs降解菌，需配制以PAHs为唯一碳源的培养基，培养基经C选项所示的121 ℃(1 kg/cm2压力)、15 min的高压蒸汽灭菌，待冷却至60 ℃后倒平板。(2)倒平板时，为了防止杂菌污染，应使锥形瓶的瓶口通过火焰。在倒平板的过程中，如果培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，则可能导致空气中的微生物在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此这个平板不能用来培养PAHs降解菌。

(3)制备土壤稀释液，用涂布方法接种于固体培养基表面。培养时，需将培养皿倒置并放在37 ℃恒温培养箱中培养24 h。

(4)用划线法纯化PAHs降解菌的过程中，在第二次及其后的划线操作时，须从上一次划线的末端开始划线，原因是：使细菌数随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而成的菌落。

6．(1)D(2)涂布分离法检查平板灭菌是否彻底C(3)①该方法只能统计样品中活菌的数目，死菌无法统计②当两或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(4)斜面

解析(1)要想测定该溪水中的细菌含量情况，需先根据所学知识制备LB培养基，制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板；制备LB培养基时，培养基应先调pH 再进行灭菌，A正确；培养基应先灭菌再分装到培养皿，B正确；溶化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦，C正确；灭菌时一般用高压蒸汽灭菌锅在121 ℃，1 kg/cm2压力下维持15～30分钟，D错误。

(2)用上述制备的培养基来检测水样中的细菌数量时，选择的分离方法应是涂布分离法；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检查平板灭菌是否彻底。接种在超净工作台上进行，工作台上实验前一段时间需打开，实验中需关闭紫外线，以防止对人体造成伤害。

(3)涂布分离法检测水样中的细菌数量时，由于①该方法只能统计样品中活菌的数目，死菌

无法统计，②当两或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，导致统计的结果往往比实际细菌的数目要低。

(4)临时保藏菌种时，应将菌种接种到试管的斜面培养基上，等菌落长成后，放入冰箱低温保藏。

规范练2现代生物科技专题相关应用

1．(2018·浙江4月选考，32节选)回答与基因工程和植物克隆有关的问题：

(1)将含某抗虫基因的载体和含卡那霉素抗性基因的载体pBI121均用限制性核酸内切酶Eco RⅠ酶切，在切口处形成____________。选取含抗虫基因的DNA片段与切割后的pBI121用DNA连接酶连接，在两个片段相邻处形成____________，获得重组质粒。

(2)已知用CaCl2处理细菌，会改变其某些生理状态。取CaCl2处理过的农杆菌与重组质粒在离心管内进行混合等操作，使重组质粒进入农杆菌，完成________实验。在离心管中加入液体培养基，置于摇床慢速培养一段时间，其目的是____________________________________，从而表达卡那霉素抗性基因，并大量增殖。

(3)取田间不同品种水稻的幼胚，先进行________，然后接种到培养基中培养，幼胚发生________形成愈伤组织，并进行继代培养。用含重组质粒的农杆菌侵染愈伤组织，再培养愈伤组织，以便获得抗虫的转基因水稻。影响愈伤组织能否成功再生出植株的因素有：培养条件如光温、培养基配方如植物激素配比、以及______________________________________ (答出2点即可)。

2．(2017·浙江11月选考，32节选)回答与植物克隆和动物克隆有关的问题：

(1)利用植物愈伤组织获得再生植株主要有两条途径：一是由愈伤组织的细胞先分化产生芽和根后再形成一个完整植株的________________途径。二是由愈伤组织的细胞产生胚状体后再萌发形成完整植株的胚胎发生途径。另外，也可不通过愈伤组织阶段而直接采用带腋芽的茎段培养成丛状苗，再诱导生根获得再生植株，其原因是腋芽中存在________。

(2)利用植物克隆培育新品种，一方面可利用带有目的基因的________侵染植株，或将目的基因通过__________的方法导入植物细胞、组织或器官获得转基因植株。另一方面利用异源植物的________________进行融合产生杂种植株，或利用异源植物在试管内进行____________，对其产生的胚进行培养产生杂种植株。

(3)下列属于植物克隆和动物克隆共有的培养方法是________(A.悬浮培养、器官培养B．贴

壁培养、传代培养C．器官培养、愈伤组织培养D．原生质体培养、传代培养)。

3．(2018·杭州学军中学3月选考模拟)回答克隆技术和胚胎工程有关的问题：

(1)将高度分化的离体植物组织进行培养，脱分化形成________，再诱导出________的顶端分生组织，并由此可再生出新的植株。

(2)利用高度分化的动物细胞进行克隆动物，必须利用________技术形成重组细胞，这种技术需要借助精密的________________和高效率的细胞融合法。

(3)胚胎移植的途径主要有两条：一是体外受精产生受精卵，形成受精卵需经________________，才能进行胚胎移植；二是体内受精，一定时间后从生殖器官中取出早期胚胎移植到受体相应部位。这两种途径对受体动物的要求是________________________。

(4)与植物克隆相比动物难以克隆，这是由于在动物发育过程中，细胞出现了________。A．染色体畸变造成遗传物质的丢失

B．基因突变产生了等位基因

C．基因选择性表达合成了专一蛋白质

D．减数分裂过程中同源染色体配对紊乱

4．(2018·稽阳联谊学校3月联考)回答下列关于动物的克隆问题：

(1)基因型不同的细胞间的细胞融合就是____________，人－鼠细胞融合通常会丢失________的染色体，可以进行人类基因的定位。

(2)科学家将________生成细胞和瘤细胞进行杂交，形成杂交瘤细胞，对一种克隆的杂交瘤细胞进行传代培养，形成单抗________，就能长久地得到单一的单抗，单抗比一般抗血清的抗体优越得多的原因是____________________________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。(3)科学家从一个流产的雌性猕猴的胚胎中，取两个体细胞的核，并分别进行核移植，发育成双胞胎克隆猴，该双胞胎克隆猴相当于是________(填“同卵”或“异卵”)双生。克隆动物的成功说明了在胚胎发育和个体发育中，细胞质具有调控________发育的作用。5．(2018·宁波市3月新高考模拟)下图为某大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛的大致过程，请据图回答问题：

(1)图中获得赖氨酸基因常用的酶是________________，若我们已知赖氨酸基因的碱基序列，一般釆用________法获取该目的基因。

(2)黑白花奶牛乳腺组织常用________分散成单细胞，然后作为核供体。将得到的体细胞的细胞核移植到去核的未受精的卵细胞中才能发育成新个体，其原因是______(A.卵细胞大，便于操作B．卵细胞含有的营养物质多C．卵细胞的细胞质可使体细胞核全能性得到表达D．重组细胞才具有全能性)。

(3)从④到⑤的过程可获得较多的遗传同质早期胚胎，常采用的方法是进行________。

(4)克隆牛的诞生过程中涉及到的现代生物技术主要有：________________、________________等。

6．(2018·台州中学第四次通练)动物和植物都可以通过克隆进行无性繁殖。回答下列关于克隆和组织细胞培养的问题：

(1)植物克隆的技术基础是________________。某些植物在进行多次继代组织培养后，将难以从愈伤组织中分化形成从幼苗和根，这说明培养物的________________能力下降。

(2)将二倍体甘蓝和二倍体白菜的原生质体融合，再进行组织培养，形成的杂种植株为________倍体。上述过程属于________________技术。

(3)细胞杂交是指________________的细胞之间的融合。由于细胞杂交时染色体容易丢失，所以用来进行基因的________。细胞融合的一项重要应用是单克隆抗体的制备。单克隆抗体的作用之一是可作为特异性________，研究相应的抗原蛋白。

答案精析

1．(1)粘性末端磷酸二酯键(2)转化使CaCl2处理过的农杆菌恢复细胞的正常状态(3)消毒脱分化水稻的基因型、愈伤组织继代的次数

解析(1)构建重组质粒时限制性核酸内切酶剪切得到的是粘性末端，DNA连接酶连接两个DNA片段之间形成的是磷酸二酯键。

(2)目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法。Ca2＋处理方法可增加细菌细胞壁的通透性，让其处于感受态，以利于重组质粒导入。故细胞要正常表达相关基因，应让其恢复为正常状态。

(3)不同种类植物或同种植物的不同基因型个体之间存在遗传的差异，细胞全能性的表达程度大小不同，小麦水稻等作物在多次继代培养后，会丧失细胞全能性的表达能力。2．(1)器官发生分生组织(2)农杆菌显微注射原生质体受精(3)A

解析(1)外植体经脱分化后形成愈伤组织，由愈伤组织形成再生植株主要有两条途径：一是由愈伤组织的细胞先分化产生芽和根后再形成一个完整植株，是植物组织培养的器官发生途径；二是由愈伤组织的细胞产生胚状体后再萌发成完整植株，是植物组织培养的胚胎发生途径。不通过愈伤组织阶段而直接采用带腋芽的茎段培养成丛状苗，这说明腋芽中含有分生组织，而分生组织中含较高的细胞分裂素，细胞分裂素与生长素之比较高可促进芽的生长。

(2)将目的基因导入植物细胞，可以用含有目的基因的农杆菌直接侵染，或者用显微注射法导入；异源植物可以利用植物体细胞杂交技术或者受精之后的胚胎进行培养，也可以获得杂种植株。(3)贴壁生长是动物细胞培养时的特性；愈伤组织是指植物细胞在组织培养过程中形成的一种排列疏松而无规则的无定形状态、高度液泡化的薄壁细胞，动物细胞无愈伤组织培养；传代培养应用于动物细胞培养过程中。

3．(1)愈伤组织芽和根(2)核移植显微操作仪(3)胚胎体外培养同期发情且未配种(4)C

解析(1)植物组织培养技术是在人为创造的无菌条件下将离体的植物器官(如根、茎、叶、茎段、原生质体)、组织或细胞置于培养基内，并放在适宜的环境中，进行连续培养以获得细胞、组织或个体的技术。其流程是：将高度分化的离体植物组织进行培养，脱分化形成愈伤组织，再诱导出芽和根的顶端分生组织，并由此可再生出新的植株。

(2)动物克隆是一种通过核移植过程进行无性繁殖的技术。不经过有性生殖过程，而是通过核移植生产遗传结构与细胞核供体相同的动物个体的技术。利用高度分化的动物细胞进行克隆动物，必须利用核移植技术形成重组细胞，这种技术需要借助精密的显微操作仪和高效率的细胞融合法。

(3)胚胎移植的途径主要有两条：一是体外受精产生受精卵，形成的受精卵需经胚胎体外培

养，才能进行胚胎移植；二是体内受精，一定时间后从生殖器官中取出早期胚胎移植到受体相应部位。这两种途径对受体动物的要求是同期发情且未配种。

(4)动物难以克隆的原因是由于基因的选择性表达导致动物的体细胞均已发生了分化，并合成了专一蛋白质，基因组中基因的活动很不完全，不能像受精卵那样发挥细胞的全能性。4．(1)细胞杂交人(2)抗体细胞株单抗识别抗原部位专一，而一般抗血清的抗体是一群识别不同抗原部位的抗体混合物(3)同卵细胞核

解析(1)基因型不同的细胞间的细胞融合就是细胞杂交；人－鼠细胞融合通常会丢失人的染色体，可以进行人类基因的定位。

(2)科学家将抗体生成细胞和瘤细胞进行杂交，形成杂交瘤细胞；对一种克隆的杂交瘤细胞进行传代培养，可形成单抗细胞株，就能长久地得到单一的单抗，单抗比一般抗血清的抗体优越得多的原因是单抗识别抗原部位专一，而一般抗血清的抗体是一群识别不同抗原部位的抗体混合物。

(3)用于核移植的两个细胞核都来自同一个流产的胚胎，即来自同一个受精卵有丝分裂产生的子细胞，所以该双胞胎克隆猴相当于同卵双生；克隆动物的成功说明了在胚胎发育和个体发育中，细胞质具有调控细胞核发育的作用。

5．(1)限制性核酸内切酶化学合成(2)胰蛋白酶C(3)胚胎分割(4)核移植技术胚胎分割

解析(1)图中的赖氨酸基因为目的基因，获得目的基因常用限制性核酸内切酶。若我们已知赖氨酸基因的碱基序列，一般釆用化学合成法获取该目的基因。

(2)常用胰蛋白酶处理黑白花奶牛乳腺组织，使其分散成单细胞，然后作为核供体。卵细胞的细胞质可使体细胞核全能性得到表达，所以需将得到的体细胞的细胞核移植到去核的未受精的卵细胞中才能发育成新个体。

(3)从④到⑤的过程，常采用胚胎分割技术，以获得较多的遗传同质早期胚胎。

(4)分析图示可知，克隆牛的诞生过程中涉及到的现代生物技术主要有：核移植技术、胚胎分割技术等。

6．(1)植物组织培养(胚胎发生和)器官发生/器官形成(2)(异源)四植物细胞工程(3)基因型不同定位探针

解析(1)植物克隆的技术基础是植物组织培养。植物组织培养经过脱分化和再分化，可形成根和幼苗。但在进行多次继代组织培养后，将难以从愈伤组织中分化形成从幼苗和根，这说明培养物的器官发生能力下降。

(2)二倍体甘蓝和二倍体白菜进行植物体细胞杂交，形成了异源四倍体。植物体细胞杂交属于植物细胞工程。

(3)细胞杂交是指基因型不同的细胞之间的融合。利用细胞杂交时染色体容易丢失，可以对基因进行定位。单克隆抗体的作用之一是采用抗原—抗体杂交技术，利用抗体作为特异性探

针，研究相应的抗原蛋白。

规范练3实验探究与实验设计

1．(2018·浙江4月选考，33)对下列生物学实验进行结果预测或分析与讨论。

(1)在用血细胞计数板计数兔红细胞时，见到压在方格线上的细胞只计左线和上线上的细胞，以避免__________，减少误差。

(2)①在验证胰岛素具有降低血糖浓度作用的实验设计中，若以小鼠活动状况为观察指标，注射胰岛素溶液和葡萄糖溶液的顺序应是__________________________________________。

②人体血液中胰岛素与胰高血糖素的摩尔比值，在不同生理状况下是不同的，当机体处于________状况时，该比值明显下降，此时机体物质代谢的变化是_____________________

________________________________________________________________________(答出2点即可)。

(3)某同学进行切除甲状腺对小鼠体长影响的实验，观测到切除甲状腺的幼年组小鼠体长增加明显低于未切除组，其机理是

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(4)以某种实验小鼠为材料制备抗血清。

①欲获得某一种较高浓度的抗体，在你的实验思路中，关键是需对小鼠进行

________________________________________________________________________。

为什么？________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

②预测实验结果(以坐标曲线图形式表示实验结果)。

2．(2017·浙江11月选考，33)为了研究海拉细胞的细胞增殖，以总细胞数和细胞分裂指数(细胞群体中分裂细胞所占的百分比)为测定指标，完善实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论。

(要求：细胞培养至培养液中营养物质不足。实验思路涉及的主要用具须写出，但具体操作

过程不作要求。实验条件适宜)

回答下列问题：

(1)完善实验思路：

①将已知细胞密度的海拉细胞悬液，用移液管加入到各个含培养液的培养瓶中，然后置于CO2培养箱中培养。

②________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

③对所得数据进行统计与处理。

(2)预测实验结果(以坐标曲线图形式表示实验结果)：

(3)分析与讨论：

①细胞计数时，见到压在方格线上的细胞如何计数？__________。

②若要得到大量的G1期细胞，可采用的方法是____________________________，原因是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

③若为了检测某种药物对该细胞的增殖有促进作用，可在培养液中加入同位素标记的物质是______________，原因是_________________________________________________

________________________________________________________________________。

3．(2018·杭州学军中学3月选考模拟)研究表明从母瘤分离脱落的癌细胞首先要与正常细胞粘附才能转移。

为研究物质X对癌细胞与毛细血管内皮细胞间粘附的影响，请根据以下提供的实验材料与用具，完善实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论。

材料与用具：培养瓶若干个、液体培养基、物质X、癌细胞细胞株、内皮细胞悬液、CO2培养箱、PBS溶液(用于洗去未粘附的细胞)。

(要求与说明：不考虑培养液成分变化对培养物的影响；实验条件适宜)

(1)实验思路：

①取培养瓶若干个均分为三组，

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

②________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

③________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

④________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

⑤________________________________________________________________________。

(2)下图为实验所测得的细胞粘附率，请根据图示结果，用文字描述该实验结果并得出实验结论：

结果：________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。

结论：________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。(3)分析与讨论

导致癌细胞从母瘤分离脱落的原因可能是________________________________________。根据实验可推测：物质X可能是通过减少肿瘤细胞与毛细血管内皮细胞的粘附率，来达到____________________的作用。

4．(2018·稽阳联谊学校3月联考)疟原虫是一种单细胞动物，是疟疾的病原体。青蒿素是效果好副作用少的抗疟药。然而，令人担心的是部分疟原虫对青蒿素产生了抗药性。请根据提供的实验材料及部分思路，完善不同种类的疟原虫对青蒿素抗药性情况的探究。

实验材料：培养液、疟原虫甲、疟原虫乙、3H－异亮氨酸、1.0×10－6mol/L青蒿素溶液、DMSO(用于配制青蒿素的溶液)、放射性测量仪。

(1)实验思路：

①取培养瓶若干，分成4组，分组如下：

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________，

加入的各种试剂等量且适量，每组设置若干个重复样品。

②各组样品同时加入等量的3H－异亮氨酸。在相同且适宜的条件下培养。

③________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

④统计分析各组数据，通过与对照组数据比较，计算出青蒿素溶液对疟原虫甲与乙生长的抑制率。

(2)预测实验结果：用一个坐标系和疟原虫甲、乙生长的抑制率变化曲线示意图表示(实验结果表明疟原虫甲对青蒿素溶液敏感度高于疟原虫乙)。

(3)分析与讨论：

①下列生物中，与疟原虫的结构相似的是________。

A．人成熟的红细胞B．小球藻

C．变形虫D．大肠杆菌

②实验中采用3H－异亮氨酸的原因是

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

③在上述实验的基础上，探究疟原虫乙吸收的异亮氨酸是否会分泌到细胞外，写出简要的实验思路。

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。5．(2018·宁波市3月新高考模拟)某研究小组发现药物M对人乳腺癌细胞MCF－7的增殖有抑制作用，并具有明显的浓度和时间依赖性，其实验结果如下图所示。请根据以下提供的实验材料与用具，完善实验思路，并得出实验结论。

材料与用具：培养瓶若干，不同浓度的药物M溶液，生理盐水，人乳腺癌细胞MCF－7细胞悬液，含10%胎牛血清的细胞培养液，CO2培养箱，酶标仪(测定细胞培养液的吸光度值)等。

[要求与说明：细胞数量通过测定相应培养液的吸光度值表示，细胞抑制率＝(1－相应组吸光度值)/对照组吸光度值]

请回答：

(1)实验思路：

①取若干培养瓶均分成四组，编号A、B、C、D，均加入等量的____________________________ ________________________________________________________________________。

②分组处理：_________________________________________________________

________________________________________________________________________。

③细胞培养：________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

④数据收集与处理：_____________________________________________________________ _______________________________________________________________________。

(2)实验结果：请你绘制一张用于记录实验数据的表格。

(3)实验结论：

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。6．(2018·台州中学第四次通练)研究发现，海胆卵细胞受精后的5小时内蛋白质合成量迅速增加，而放线菌素D溶液能抑制mRNA的合成。请完成下面的探究实验：

实验目的：探究卵细胞受精后的5小时内合成蛋白质的模板(mRNA)的来源。

实验材料：刚受精的卵细胞(若干)、放线菌素D溶液、生理盐水、卡氏瓶(若干)、二氧化碳恒温培养箱、细胞培养液等(蛋白质合成量的测定方法不作要求)。

(1)实验思路：

①取等量的两组卡氏瓶，分别编号为A、B，往A、B组卡氏瓶中加入适量且等量的细胞培养液；

②A组加入

________________________________________________________________________，

B组加入

________________________________________________________________________，

③________________________________________________________________________，

每隔相同时间

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________，并对实验所得数据进行处理分析。

(2)设计一个表格用以记录实验数据。

(3)结果预期及分析：

①若A、B两组蛋白质合成量大致相等，则说明合成蛋白质的模板来源是________________；

②若A组比B组蛋白质合成量明显减少，则说明合成蛋白质的模板来源是

________________________________________________________________________；

③若A组__________________________________________________，

而B组蛋白质合成量增加，则说明合成蛋白质的模板是DNA新转录合成的。

答案精析

1．(1)重复计数

(2)①先注射胰岛素溶液，后注射葡萄糖溶液

②低血糖肝糖元(糖元)分解加强、脂肪分解加速

(3)切除甲状腺后，甲状腺激素浓度下降，导致物质代谢与能量转换下降

(4)①两次或多次注射相同抗原因第二次或更多次注射相同抗原，会使小鼠产生更多的效应B细胞，从而产生更多的抗体

②如图所示

解析(1)血细胞计数板计数，只计左线和上线上的细胞，这样是为了避免重复计数。(2)①给小鼠注射胰岛素溶液，出现血糖降低的症状，再注射一定浓度的葡萄糖溶液，症状得以恢复。所以注射胰岛素溶液和葡萄糖溶液的顺序应是先注射胰岛素溶液，后注射葡萄糖溶液。

②当机体处于低血糖状况时，胰高血糖素增多，人体血液中胰岛素与胰高血糖素的摩尔比值下降，此时机体物质代谢的变化是肝糖元分解加强、非糖物质转化为葡萄糖，如脂肪分解加速。(3)甲状腺分泌的甲状腺激素有促进新陈代谢和发育、提高神经系统的兴奋性的作用；切除甲状腺后，甲状腺激素浓度下降，导致物质代谢与能量转换下降。(4)小鼠血清中含抗体，想要升高某种抗体浓度，则需两次或多次注射相同抗原，因为二次免疫比初次免疫强，多次刺激后血清中的特定抗体会维持较高水平。

2．(1)②每隔一段时间，用血细胞计数板在显微镜下计数并记录，同时制作临时装片，在显微镜下观察与计数分裂相细胞并记录

(2)如图所示

(3)①只计左线和上线及其夹角的细胞

②减少培养液中的营养物质成分由于原料缺少使细胞合成有关物质如RNA和蛋白质等受阻，而停滞于G1期

③胸腺嘧啶脱氧核苷胸腺嘧啶脱氧核苷是DNA合成的原料，其进入细胞的量可反映细胞的增殖情况

解析(1)本实验难度不大，题目已经指出实验目的是为了研究海拉细胞的细胞增殖，测定指标以总细胞数和细胞分裂指数(细胞群体中分裂细胞所占的百分比)来表示，因此只需要在实验思路中实现以下内容即可：将细胞培养至培养液中营养物质不足，每隔一段时间，用血细胞计数板在显微镜下计数并记录总细胞数，同时制作临时装片，在显微镜下观察与计数分裂相细胞并记录。(2)实验过程中要将细胞培养至培养液中营养物质不足，由于营养物质的消耗和有害代谢产物的积累，肿瘤细胞也会出现绝大部分细胞停止分裂的现象，预期实验结果要考虑到这种情况。由于题目要求用坐标曲线图形呈现可能的实验结果，所以需要先建立坐标系，横坐标标注培养时间，纵坐标标注总细胞数和细胞分裂指数(具体参见答案)。(3)①细胞计数时，当遇到压在方格线上的细胞，一般只计数左线和上线及其夹角的细胞。②若要得到大量的G1期细胞，可减少培养液中的营养物质成分，由于原料缺少使细胞合成有关物质如RNA和蛋白质等受阻而停滞于G1期。③若为了检测某种药物对该细胞的增殖有促进作用，可在培养液中加入同位素标记的胸腺嘧啶脱氧核苷，由于胸腺嘧啶脱氧核苷是DNA 合成的原料，其进入细胞的量可反映细胞的增殖情况。

3．(1)①分别加入等量且适量的液体培养基和内皮细胞悬液，置于37 ℃的CO2培养箱中恒温培养24 h，使培养瓶中铺满单层内皮细胞。

②加入用液体培养基配制的不同浓度的物质X(浓度为100和300 μg/mL)，对照组加入等体积的液体培养基。

③同时分别取等量的癌细胞转入上述培养瓶中(取等量的癌细胞转入铺满单层内皮细胞的培养瓶中)，置于37 ℃的CO2培养箱中恒温培养一段时间。

④用PBS溶液洗去未粘附的细胞，测定相关值并计算细胞粘附率。

⑤对实验数据进行分析与处理。

(2)结果：与正常对照组相比，加入物质X后，癌细胞与内皮细胞间的粘附率明显降低，剂量越高癌细胞与内皮细胞间的粘附率下降越明显。

结论：物质X可降低癌细胞与内皮细胞间的粘附率而且作用效果与物质X的浓度有关。(3)癌细胞膜表面粘连蛋白(糖蛋白)减少抑制癌细胞转移

解析(1)实验思路：①取培养瓶若干个均分为三组，分别加入等量且适量的液体培养基和内皮细胞悬液，置于37 ℃的CO2培养箱中恒温培养24 h，使培养瓶中铺满单层内皮细胞。

②加入用液体培养基配制的不同浓度的物质X(浓度为100和300 μg/mL)，对照组加入等体积的液体培养基。③同时分别取等量的癌细胞转入上述培养瓶中(取等量的癌细胞转入铺满单层内皮细胞的培养瓶中)。置于37 ℃的CO2培养箱中恒温培养一段时间。④用PBS溶液

洗去未粘附的细胞，测定相关值并计算细胞粘附率。⑤对实验数据进行分析与处理。(2)结果：与正常对照组相比，加入物质X后，癌细胞与内皮细胞间的粘附率明显降低，剂量越高癌细胞与内皮细胞间的粘附率下降越明显。结论：物质X可降低癌细胞与内皮细胞间的粘附率而且作用效果与物质X的浓度有关。

(3)分析与讨论：导致癌细胞从母瘤分离脱落的原因可能是癌细胞膜表面粘连蛋白(糖蛋白)减少。根据实验可推测：物质X可能是通过减少肿瘤细胞与毛细血管内皮细胞的粘附率，来达到抑制癌细胞转移的作用。

4．(1)①A组：培养液中加入疟原虫甲、1.0×10－6 mol/L青蒿素溶液；B组：培养液中加入疟原虫甲、DMSO；C组：培养液中加入疟原虫乙、1.0×10－6 mol/L青蒿素溶液；D组：培养液中加入疟原虫乙、DMSO③每隔一段时间，用放射性测量仪测定各组疟原虫的细胞内放射性强度并记录

(2)如图所示

(3)①C②3H－异亮氨酸是疟原虫合成蛋白质的原料，可根据放射性强度变化来判定疟原虫的生长(繁殖)情况

③取上述实验后的疟原虫乙放入含有(无放射性的)异亮氨酸的培养液中进行培养，离心后检测上清液和沉淀物的放射性强度

解析(1)实验思路：本实验为探究不同种类的疟原虫对青蒿素抗药性的情况，故自变量是疟原虫的种类和青蒿素的有无，因此可设置4组实验，操作步骤如下：

①取培养瓶若干，分成4组，分组如下：A组培养液中加入疟原虫甲、1.0×10－6 mol/L青蒿素溶液；B组培养液中加入疟原虫甲、DMSO；C组培养液中加入疟原虫乙、1.0×10－6 mol/L 青蒿素溶液；D组培养液中加入疟原虫乙、DMSO。加入的各种试剂等量且适量，每组设置若干个重复样品。

②各组样品同时加入等量的3H－异亮氨酸。在相同且适宜的条件下培养。

③每隔一段时间，用放射性测量仪测定各组疟原虫的细胞内放射性强度并记录。

④统计分析各组数据，通过与对照组数据比较，计算出青蒿素溶液对疟原虫甲与乙生长的抑制率。

(2)预测实验结果：可以时间为横坐标、抑制率为纵坐标，绘制青蒿素对疟原虫甲和乙生长抑制率变化曲线。若实验结果表明疟原虫甲对青蒿素溶液敏感度高于疟原虫乙，则青蒿素对疟原虫甲生长的抑制率高于乙，且青蒿素对两种疟原虫生长的抑制率随处理时间的延长而逐