朊蛋白在奶牛生殖系统的定位表达
朊蛋白在奶牛生殖系统表达的定位1
张太翔，赵德明
中国农业大学国家动物海绵状脑病实验室，北京（100094）
E-mail：zhaodm@https://www.360docs.net/doc/7d10273181.html,
摘要：用免疫组织化学的方法对奶牛生殖系统中朊蛋白进行定位研究，结果表明：在雌奶牛的卵巢，子宫阜，子宫呈现阳性，输卵管呈弱阳性。雄奶牛的睾丸，附睾呈现弱阳性，其他器官为阴性。这说明了在这些组织中有正常的PrP的存在，为探索Prion致病机理、感染途径提供基础数据，也为朊病毒是否可以垂直传播提供了基础数据。
关键词：BSE，朊蛋白，奶牛生殖系统，免疫组织化学
中图分类号：S588.9
引言
传染性海绵状脑病（TSEs）是一种可引起人和动物一系列神经退化性疾病的一种新型传染病,包括羊瘙痒病(Scrapie)、牛海绵状脑病(BSE)、鹿的慢性消耗性疾病（CWD），水貂海绵状脑病（MSE），猫的疯猫病（FSE），人克雅氏病(CJD)[1,2]。TSEs疾病起始于正常的PrP c发生错误折叠，形成富含β片层的、抗蛋白酶水解的PrP sc。人们已经认识到PrP c向PrP sc 转化是疾病发生和发展的关键。错误折叠的PrP sc有很强的聚合倾向,先形成淀粉样的小纤维,进一步聚合形成淀粉样斑块,最后发展为可被临床诊断的大脑海绵状退化变性病症[3,4]。
疯牛病（BSE）是由于机体正常PrP C转化为异常的，具有蛋白酶K抗性的PrP（PrP SC）。具体的转化机理还不清楚。目前认为PrPSc可能的传染过程是：少量PrPSc与细胞PrPc结合后，以PrPSc为模板，使PrPc发生明显构象改变而转变为PrPSc，从而达到PrPSc传染扩增的目的，最后使PrPc全部转变成不溶性的PrPSc，脑组织形成淀粉样斑块直至死亡[5,6]。
PrP c在体内的分布很广泛，在中枢神经系统和外周神经系统中含量很高，在免疫系统中也有分布。有报道称朊病毒可以通过口服，接触，静脉注射，脑内注射等方式感染[9,10]，但是没有有关朊病毒垂直传播的报道。为了研究朊病毒是否能够垂直传播，我们利用正常的奶牛生殖系统，用免疫组织化学的方法研究正常朊蛋白的分布，为以后研究朊病毒的垂直传播提供基础数据。
1. 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物：奶牛生殖系统采自屠宰场，母畜包括：卵巢，输卵管，子宫，子宫阜，阴道；公畜包括：睾丸，附睾，输精管，精囊腺，前列腺，尿道球腺，阴茎
1.1.2 试剂：二步法免疫组化检测试剂盒，PV9000, 北京中杉金桥生物技术有限公司；
浓缩性DAB (3，3-二氨基联苯胺) 试剂盒，DAB Kit，ZLI-9032，北京中杉金桥生物技术有限公司；液体AEC (3-氨基-9-乙基咔唑) 酶底物试剂盒，ZLI-9036，北京中杉金桥生物技术有限公司；PrP单克隆抗体： AH6，英国；辣根酶标记山羊抗小鼠IgG（H+L）, ZB2305, 北京中杉金桥生物技术有限公司；粘片剂：APES (3-氨丙基-3-乙氧基甲硅烷)，北京中杉金桥生物技术有限公司；其它试剂均为国产分析纯。
1本课题得到国家自然基金（No.30371062，30400325）和教育部博士点基金（No.20020019006）资助项目的资助。
1.2方法
1.2.1组织的处理。采集的组织用10％的福尔马林固定，脱水（依次进入70%、85%、95%、100%、100%酒精），透明（依次放入1：1的二甲苯酒精、纯二甲苯中，分别为30分钟），透蜡和包埋（依次放入60℃的蜡盘Ⅰ、Ⅱ内，各30分钟，包埋蜡盘温度设定为65℃），切片,厚度为5 um，展片、贴片和烤片。分成两部分，一部分用常规的HE染色，一部分不染色以备免疫组织化学使用。
1.2.2 免疫组织化学
DAB浓缩液及稀释液：北京中杉金桥生物技术有限公司
操作步骤
1）切片二甲苯脱蜡，经系列酒精入水；
2）PBS液洗10分钟；
3）3%过氧化氢室温孵育切片10分钟，以消除内源性过氧化物酶活性；
4）PBS液洗3×5分钟；
5）加一抗稀释液配制的第一抗体工作液，37℃湿盒中温育120分钟或4℃冰箱过夜
6）PBS液洗3×5分钟；
7）滴加辣根过氧化物酶标记的二抗，37℃湿盒中温育30分钟；
8）PBS液洗3×5分钟；
9）加DAB显色剂，显微镜下观察控制显色。显色完成后立即用PBS终止显色；
10）苏木精复染，树胶封片；
11）镜下观察。
2. 结果
图1 卵巢DAB染色 10倍图2输卵管DAB染色 10倍
图3 子宫阜DAB染色 10倍图4 子宫DAB染色 10倍
图5 睾丸DAB染色 10倍图6 附睾DAB染色 10倍
2.1各组织免疫组化的结果
母畜在卵巢的间质中淋巴细胞和树突状细胞呈弱阳性（如图1）；在输卵管的内皮细胞有棕黄色颗粒（如图2）；子宫阜的皮质内淋巴细胞和树突状细胞有大量的棕黄色颗粒（如图3），子宫粘膜下层淋巴细胞和树突状细胞也有棕黄色颗粒存在（如图4）。公畜的睾丸间质支持细胞内有棕黄颗粒（如图5），附睾的精子细胞内也有这种棕黄色的颗粒（如图6）。而在其他的组织中没有检出或是呈弱阳性。这种棕黄色颗粒的存在说明了在这些组织当中有正常的PrP C的表达。
3．讨论
疯牛病（BSE）是由于机体正常PrP C转化为异常的，具有蛋白酶K抗性的PrP（PrP SC）。具体的转化机理还不清楚。目前认为PrPSc可能的传染过程是：少量PrPSc与细胞PrPc结合后，以PrPSc为模板，使PrPc发生明显构象改变而转变为PrPSc，从而达到PrPSc传染扩增的目的，最后使PrPc全部转变成不溶性的PrPSc，脑组织形成淀粉样斑块直至死亡。从PrPc到PrPSc可能还存在中间状态, 现已在体外实验发现有两种稳定的可溶性中间态存在，它们分别是双α螺旋状态和四聚(或寡聚)的富含β折叠的状态。对PrPSc导致Prion病的详细机制虽不完全清楚，但目前普遍认为Pri on病发生的基本事件是：以α螺旋为主的对蛋白酶敏感的不具有感染能力的PrPc转变成以β折叠为主的具有感染能力的对蛋白酶抵抗的不溶性PrPSc。
PrPc在哺乳动物中高度保守，可能存在于所有的脊椎动物中[7,8]。在胚胎发生的早期就有表达,在成体大多数组织中都可以找到,但是仅在中枢神经系统高表达,特别是与突触膜相
关,可能作为某种神经元结构的营养成分,对突触的正常功能有意义[11,13]。PrPc在免疫系统中也广泛表达,它可能参与淋巴细胞活化,GPI 锚作为细胞表面的糖蛋白可能在细胞黏附和信号转导过程中发挥作用,或是可能与电压敏感性钙通道相作用而调节细胞内游离钙浓度,进而在海马突触传递等神经元间或神经元与神经胶质细胞间的信息通讯中发挥作用,但PrPc的其它具体的功能尚不清楚。
对于正常PrP 的研究，一般采用仓鼠和小鼠作实验材料，用无BSE 感染的奶牛组织来研究正常PrP 的形态分布少见报道。我们采用正常的奶牛的生殖系统来研究正常PrP 的形态分布，结果表明在奶牛的卵巢，子宫阜，子宫，输卵管，睾丸，附睾内有正常PrP的分布。
Pr P 基因表达的量和随后的翻译在疾病的起始阶段中起着重要的作用, Pr P 基因高表达的组织有较高的转化成Pr PSC并蓄积的危险。子宫阜是母体胎盘，与胎儿直接相连，一旦母体感染BSE，子宫阜内的正常PrP含量越多，转化为PrPSc的量也越多，PrPSc可能通过母体胎盘传给胎儿，使胎儿感染BSE，造成垂直传播。再加上子宫，输卵管也含有正常PrP，母牛一旦感染BSE，传给胎儿的几率就增加了。而且公畜的睾丸，附睾含有PrP，如果公畜感染了BSE，可能通过交配将PrPSc传给母畜，使之感染BSE。
我们的试验表明，在奶牛的子宫阜，子宫，输卵管，睾丸，附睾中有正常PrP的表达，这就为以后研究BSE的传播方式提供了基础数据。
致谢：致谢：本论文感谢畜牧兽医总站的赵景义科长在样品采集提供的帮助，感谢国家动物海绵状脑病实验室的老师和同学对本试验提供的帮助，还要感谢华南农业大学的宁章勇博士提供的无私帮助。
参考文献
[1]Prusiner SB. (1991). Molecular biology of prion diseases. Science, 252:1515-1522
[2]Prusiner SB. (1997). Prion diseases and the BSE crisis. Science, 278:245-251
[3]Brown D, Qin K, Herms JW, et al. (1997). The cellular prion protein binds copper in vivo. Nature, 390,
684-697.
[4]Kaneko K, Zulianello L, Scott M, et al. (1997). Evidence for protein X binding to a discontinous epitope on the cellular prion protein during scrapie prion propagation. Proc Natl Acad Sci USA，94, 10069-10074.
[5]Debeer S, Baron T and Bencsik A.Immunohistochemistry of PrPSc within bovine spongiform encephalopathy samples with graded autolysis. Journal of Histochemistry and Cytochemistry，2001，49:1519-1520
[6]Miller J M, Jenny A L, Taylor W D, Race R E, Ernst D R, Katz J B and Rubenstein R. Detection of prion protein in formalin-fixed brain by hydrated autoclaving immunohistochemistry for the diagnosis of scrapie in sheep. Journal of Veterinary Diagnosis Investigation, 1994, 6:366-368
[7]Yang JM, Zhao DM, Liu HX, et al. (2005). Comparative Analysis of the Prion Protein Open Reading Frame Nucleotide Sequences in Peacock and Parakeet. Virus Genes 30:2, 193–196.
[8]Franziska W, Weidenhoè fer G, Schneider R, et al. (1999) Analysis of 27 Mammalian and 9 Avian PrPs Reveals High Conservation of Flexible Regions of the Prion Protein. J Mol Biol, 289, 1163-1178.
[9]Chabry J, Ratsimanohatra C, Sponne I, et al. (2003).In vivo and in vitro neurotoxicity of the human prion protein (PrP) Fragment 118 –135 independently of PrP expression. The Journal of Neuroscience, 23(2):462– 469.
[10]Collins PS, Lawson VA, Masters PC. (2004). Transmissible spongiform encephalopathies. Lancet. 363:51–61.
[11]Ning ZY, Zhao DM, Liu HX. (2005). Quantification of prion gene expression in brain and peripheral organs of golden hamster by real-time RT-PCR .Anim Biotech, 16(1):1-11.
[12]Aguzzi A, Polymenidou, M. (2004). Mammalian prion biology. One century of evolving concepts. Cell. 116:313–327.
[13]宁章勇,赵德明,杨建民等. 金黄地鼠组织特异性朊病毒基因表达模式得研究.中国病毒学
报,2005,20(2):184－188
Distributing of prion protein in cow reproductive system
Zhang Taixiang, Zhao Deming
Laboratory of National Animal TSE, College of Veterinary Medicine, China Agricultural
University, Beijing, China (100094)
Abstract
We have used the immunohistochemical way to study the distribution of the prion protein in cow reproductive system. The result showed the placenta and the uterus showed high level of the expression, the fallopian tube showed moderate level of the expression in female cow; the spermary and spermary appendix showed high level of the expression in male cow, other organs present negative. This suggested there is normal prion protein existing in these organs. The purpose of this study is to investigate the distribution of the prion protein in cow reproductive system in order to know the transmit route of the prion and to be powerful tool for further studies on prion spread.
Keywords: cow; prion; reproductive system; immunohistochemical
RFID射频识别技术在奶牛信息管理系统的应用
RFID射频识别技术在奶牛信息管理系统的应用—控制系统方案设计 根据在PPT里的理论介绍，参考ISO/IEC 18000体系标准，结合奶牛大规模饲养场所信息化管理的需要。本文制定一个基于RFID技术的奶牛信息处理与监控系统。 在方案设计之前，我们需要假设一种应用环境。用以对设计做实际的验证。假定有一家规模为10000头奶牛的饲养场，饲养场内的奶牛均由精饲料加草料的混合饲养方式喂养。牛圈的布局通槽形式，每头牛之间的距离保持在2米左右一字排开。饲养场设置奶牛疫情监控区，特殊病症或妊娠监护区以及普通牛圈。疫情监控区用于零时隔离有传染性威胁的奶牛，保障整个牛群的安全。特殊病症或妊娠监护区用于对那些在孕期或需要特殊照顾的奶牛给予特殊的照顾，该区不设通槽，只设围栏。饲养场对各个牛圈划定片区，指定专人管理，实行专人负责制度。饲养场定期对产奶牛的体制和牛奶品质进行检测，并对检测结果进行评价。每天定时对产奶奶牛自动挤奶，并对挤奶量进行记录。饲养场对草料来源地和精饲料产地进行重金属等污染物检测，采用饲料来源认证机制，确保喂料安全和牛奶品质。根据奶牛的生理特点，产牛犊后会出现三个不同的产奶期：旺奶期，产量稳定期和产量衰减期。奶牛场还应建立奶牛产奶的时间表，每个月更新一次信息，用以跟踪未来一段时间内整个饲养场的产量变化情况。 有了这些对实际应用环境的认识，且看看所能得到的技术条件有哪些： RFID射频识别技术：采用分布于各个监测点的电子标签加读写器和后台处理的计算机组成。电子标签负责存储用于识别监测点的信息，考虑到它的应用环境，电子标签必须安全可靠易于读写。读写器可以是手持式的，读写器的有效读取距离与它的发射功率有关，功率越高，读取距离越远。另外，读写器也具备了一定的智能化特点，它能够对来自电子标签加解密，进行完整性检查和缓冲的作用。计算机作为后台处理数据的中枢，可以实现大量的分析和监控任务。 当然也不能缺少现代化饲养场管控的一整套制度支撑，这里先抛开不看，主要研究RFID 怎样应用到奶牛场信息管理系统中的。下面是初步的想法： 先考虑电子标签 标签应当足够小以便植入到奶牛的耳朵上，标签设计为无源标签，只有当读写器靠近时才会触发进行读写活动。电子标签与读写器之间是一对一的读写关系。为了得到准确完整的信息，需要对标签的数据约定一定的格式和内容。暂且称一个标签的数据为一帧，一帧的内 ＃奶牛编码是奶牛唯一的身份证，作为识别的唯一依据。 ＃该片区负责人编号，便于追溯责任。 ＃饲料来源为建立奶源质量安全的追溯机制而设定。 ＃奶牛出生日期可以帮助饲养场管理奶牛在全生命周期的各种活动，比如接种，妊娠等。 ＃产奶情况可以动态预报个体和奶场产量的波动，为饲养场发展决策提供依据。 ＃奶牛健康状况关注的是是否产生疫情，是否需要特殊看护等等。 ＃校验符提供数据在传输和读写过程中是否出错的证明。 ＃结束符提供数据在传输中完整性的证明。 然后考虑读写器：
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受孕牛从下 2 一胎计考核。 5) 消耗精液量 = 月初库存 + 月入库–月末库存 4. 情期受胎率计算公式 情期受胎率 = × 100% 二、年总受胎率考核标准： 1. 年总受胎率计算公式 年总受胎率 = × 100% 2. 考核标准 1) 成母牛 i. 指标≥ 85% ii. 每提高1个百分点奖励100元，每降低1个百分点扣100元。 2) 青年牛 i. 指标≥95% ii. 每提高1个百分点奖励100元，每降低1个百分点扣100元。 3. 统计方法 1) 统计日期上年10月1日到本年9月31日。 2) 年内受胎两次以上的母牛，受胎头数和受配头数应一起统计，即各计为两次以上。 3) 配种后第二次定胎以前出场的母牛不参与统计，第二次定胎后出场的母牛一律参与统计。 4) 以受配后第二次定胎妊娠结果确认受胎头数。 三、年总繁殖率考核标准： 3 1. 年总繁殖率计算公式
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奶牛自动化饲养控制系统(麻烦杨老师看一下内容,最好能提供一个更契合项目内容的题目) 成员: 1、项目的目的和基本思路 2、国内当前研究现状 3、项目计划及实施步骤 4、项目的实际应用价值和现实意义 5、项目的预期成果 一、立项目的及基本思路 近年来中国经济飞速发展,人民生活水平不断提高。据国家计委及国务院发展研究中心农村部所作的调查,居民收入每增加l0%,乳 2
类消费量就相应增加0.32%。说明乳类的需求非常大而且仍在快速增加。可是,乳类的供应却跟不上需求。 蒙牛伊利等奶牛龙头企业从外国高成本引进先进技术,对奶制品产业进行垄断。散养奶牛利润越来越小,质量没有保障。因此对这部分农户实施养殖规模化、集约化、标准化就显得尤为重要,国家也出台了政策提出对成规模、集约化养殖进行扶持。 为了健康而高产的饲养环境,我们准备设计一个集约化饲养的自动控制系统。初步设定如下: 1基于单片机技术的畜舍温度及湿度控制系统 2基于无线射频技术等的常规疾病监测及预防,自动饲养系统 3用计算机对系统进行整合及控制 二、国内当前研究现状 在国际上,奶牛的自动饲喂系统已成为农业生产应用先进电子技术最早最有成效的领域之一,而中国当前奶牛场设备中应用计算机及单片机综合管理系统的例子几乎空白,自动化饲喂系统应用极少。 诸如ZIGBEE技术和RFID技术都没有在中国相关行业得到充分的推广,实际应用中也遇到了诸如高成本或技术壁垒问题。 国内当前的饲养情况如下:个别大型奶制品企业经过从国外高成 3
本引进先进技术系统对乳类产业进行垄断,而一些散户、粗放型养殖在没有此类技术和科学管理模式的条件下,生存艰辛,奶牛的饲养成本在不断提高,很多农户被迫杀牛倒奶,甚至出现了为保利润,降低牛奶质量的现象。说明奶农对乳类市场的积极性正在削弱,这个与当前国内落后的养殖模式有着莫大的关系,而中小型养殖户应用非集约化,非先进化技术继续生产,严重阻碍了中国奶牛养殖业的发展。 国务院<关于促进奶业持续健康发展的意见>中明确提出将牧业机械纳入财政农机具购置补助范围,由此可见政府对于奶牛饲养问题的关注,以及养殖系统机械化自动化的重视。当前虽然一些作用专一的仪器如自动化灭菌,自动喂食,给水仪器等等在发挥作用,可是却没有一套系统能够把这些功能一体化从而实现高度自动化。 三、项目计划及实施步骤 项目计划: 分块实现,再进行整合。主要分成两块, 一:基于AT89C2051单片机的畜舍温、湿度控制系统; 二:利用RFID技术,定量配料器,定时杀菌和单片机等进行常规疾病监测及预防和自动饲养控制系统的设计。 4
健康奶牛与患子宫内膜炎奶牛生殖道需氧及兼性厌氧细菌的研究
健康奶牛与患子宫内膜炎奶牛生殖道需氧及兼性厌氧细菌 的研究 李炳志赵献军＊马治宇邹克庆 （西北农林科技大学动物医学院，陕西杨陵 712100） [摘要]：[目的]探讨健康奶牛与患子宫内膜炎奶牛生殖道微生物菌群的差异。[方法]采用常规的细菌分离鉴定方法。[结果]健康奶牛乳酸杆菌、产乳酸球菌和表皮葡萄球菌的分离率明显高于患病奶牛的分离率，差异显著（P＜0.05）；大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、链球菌的分离率分别低于患病奶牛，差异显著（P＜0.05）。[结论]产乳酸细菌、表皮葡萄球菌是健康奶牛生殖道微生物区系的优势菌群，奶牛子宫内膜炎的致病菌以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和链球菌为主。由于产乳酸细菌减少导致生殖道的微生物区系紊乱是奶牛子宫内膜炎发病的重要诱因。 [关键词]：健康奶牛，子宫内膜炎，生殖道，需氧及兼性厌氧细菌 Microflora in Vagina of Postpartum Heathy Cows and Endometritis Cows LI Bing-zhi ZHAO Xian-jun＊MA Zhi-yu ZOU Ke-qing (College of Veterinary Medicine,Northwest A & F University, Yangling,Shaanxi,China 712100) Abstract: [Objective] In order to determine the vaginal microflora, 40 postpartum cows were choosed and divided into 2 groups. [Method]Take a routine method of classification and determination of bacterium.[Result] The results of experiment indicated that the most frequently isolated bacteria were Lactobacillus Lactococcus S.epidermidis in heathy cows and the ratio of isolation was obviously higher than that from endometritis cow（P＜0.05）.But the ratio of isolation of Staphylococcus,Streptococcus,Escherichia.coli were lower than that from endometritis cows（P＜0.05）.[Conclusion] Lactobacillus and S.epidermidis were the predominants in the vagina of heathy cows,but Staphylococcus,Streptococcus and Escherichia.coli were the predominants in endometritis cows.The decrease of lactic [收稿日期]:2007-11-19 [基金项目]：国家科技支撑计划奶业发展重大关键技术研究与示范（2006BAD04A11）陕西省农业攻关项目（2007K02-03-01） [作者简介]：李炳志（1982－），男，山东烟台人，在读硕士，主要从事动物中毒性与营养代谢性疾病研究E-mail：bingzhi-521@https://www.360docs.net/doc/7d10273181.html, ＊[通讯作者]：赵献军（1961－），男，陕西蒲城人，教授，主要从事动物中毒性与营养代谢性疾病研究E-mail：xjz6104@https://www.360docs.net/doc/7d10273181.html,
奶牛产后生殖系统的监控
奶牛产后生殖系统的监控 日期：2011-05-13 14:19编辑：admin来源：乳业时报查看：130次 产后生殖系统监控可有效提高繁殖率。 一、观察胎衣排出的时间 1、产后12小时内胎衣没有完全排出就意味着胎衣滞留。引起胎衣滞留的原因主要有：难产，早产，双胎及营养不平衡，包括用药引产，和细菌感染等。 2、胎衣正常排出后子宫可放入宫康栓剂（北京华泰原兽药厂生产）2——3枚可帮助子宫修复和防止细菌感染，但是在操作过程中尽量保持无菌操作。 二、胎衣排出不及时或未排出的处理方法 1、给母牛注射50——100个国际单位的催产素有助于胎膜的排出，也可减少子宫炎的发生。 2、注射抗生素以防止感染，给母牛足够的时间让胎盘自行脱落，主意：胎盘不能用人为机械的办法强行剥离，那样有可能对子宫造成损伤并导致永久不育。 3、如果胎盘还不能及时排出，而母牛体温还持续升高，确诊为子宫感染引起那就采用子宫冲洗的办法，可用大量的1%——2%的人工盐溶液或温开水细的胶管来冲洗，冲洗前溶液加热到35℃——40℃。冲洗完后将冲洗液完全排空，子宫内放入抗生素，比如土霉素，金霉素，根据情况用药，直至子宫恢复正常。采用这种办法的好处是成本低，疗效快，治愈率高。 三、了解母牛子宫恢复情况 通过观察恶露排尽的时间，知道母牛子宫的恢复情况。 四、产后子宫的检查
如发现排出的恶露有腥味但是不臭那就正常，如果带有臭味就要治疗，用药物排出子宫内积蓄物然后子宫输入抗生素消炎药物，包括子宫恢复及卵巢的情况是否要进行进一步的处理。 产后50天后90%分娩后的母牛都应该恢复正常的发情周期，而且应能监测到发情征兆。 五、体温监测及食欲观察 1、母牛在产后一周内，应每天早晚在上槽期间观察采食情况，并监测体温是否正常，做到早发现早治疗，还应做好记录以助于以后的学习和总结。 2、产后11天左右肌注前列稀醇0.4毫克，有利于子宫恢复，明显减少子宫疾病的发病率，提高产后正常发病率。 六、产后第一次发情的观察记录 做好产后第一次发情时间的观察记录这样有助于第二次的发情监控： 1、维持妊娠的黄体在分娩前就开始快速地萎缩，健康母牛分娩后12——14天即可有一个新的卵子成熟并排出。通常第一个黄体很小而且维持时间也很短，因此，第一次和第二次排卵间隔可能只有10——17天。一般来讲第三次以后的发情周期平均为21天。但分娩困难和发生产后并发症会推迟排卵和发情时间。绝大多数第一次排卵和50%的第二次排卵都应该出现发情征兆。 2、产后牛应单独在一个圈舍饲养，头胎牛一般在21天左右，成母牛在21天左右进行子宫复旧检查，如发现子宫复旧不全或其他异常应该及时处理确保产后第一次配种时没有子宫疾病。这样单独饲养可方便观察产后牛的情况，也利于营养的供给，还可减少别的牛群的子宫的感染。 七、发情鉴定采用的观察法 1、每天观察发情不少于3——4次。 2、现在也有很多牧场应用尾根涂色法，进一步减少漏情。 3、许多研究结果表明爬跨频率在白天最低而夜间最高，大约70%的爬跨行为发生在傍晚7时到凌晨7时。所以工作人员要把晚上这两次观察作为重点。
WoLF PSORT 蛋白亚细胞定位预测
Nucleic Acids Research,2007,Vol.35,Web Server issue W585–W587 doi:10.1093/nar/gkm259 WoLF PSORT:protein localization predictor Paul Horton1,Keun-Joon Park1,2,Takeshi Obayashi3,Naoya Fujita1,3, Hajime Harada1,C.J.Adams-Collier4and Kenta Nakai3,* 1Computational Biology Research Center,AIST,Tokyo,Japan,2Center for Genome Science,National Institute of Health,Korea Center for Disease Control&Prevention,5Nokbeon-Dong,Eunpyung-Gu, Seoul122-701Korea,3Human Genome Center,Institute of Medical Science,University of Tokyo,Tokyo,Japan and4Collier Technologies,Everett,WA,USA Received January30,2007;Revised March26,2007;Accepted April8,2007 ABSTRACT WoLF PSORT is an extension of the PSORT II program for protein subcellular location prediction. WoLF PSORT converts protein amino acid sequences into numerical localization features; based on sorting signals,amino acid composition and functional motifs such as DNA-binding motifs. After conversion,a simple k-nearest neighbor classifier is used for https://www.360docs.net/doc/7d10273181.html,ing html,the evidence for each prediction is shown in two ways: (i)a list of proteins of known localization with the most similar localization features to the query,and (ii)tables with detailed information about individual localization features.For convenience,sequence alignments of the query to similar proteins and links to UniProt and Gene Ontology are provided. Taken together,this information allows a user to understand the evidence(or lack thereof)behind the predictions made for particular proteins. WoLF PSORT is available at https://www.360docs.net/doc/7d10273181.html, INTRODUCTION Bilipid membranes divide eukaryotic cells into various types of organelles containing characteristic proteins and performing specialized functions.Thus,subcellular localization information gives an important clue to a protein’s function.Although localization signals in mRNA appear to play some role(1),the main determi-nant of a protein’s localization residues in the protein’s amino acid sequence.(We recommend https://www.360docs.net/doc/7d10273181.html,/wiki/ Protein_targeting for a brief overview and Alberts et al. (2)for a textbook description.) Numerous experiments to determine protein localiza-tion have been performed to date.These can broadly be classi?ed as:small-scale experiments—the results of which continue to accumulate in public databases,such as UniProt(3)and Gene Ontology(4);and large-scale experiments using epitope(5)or green?uorescent protein (GFP)(6)tagging,or by separation of organelles by centrifugation combined with protein identi?cation by mass spectrometry(7,8). Although they provide invaluable information,the coverage of experimental data is only high for model organisms,particularly yeast.Moreover,the agreement amongst large-scale experimental data is only75–80% (6–9).Thus,computational prediction of localization from amino acid remains an important topic. Numerous computational methods are available [reviewed in(10,11)].Some(including WoLF PSORT) have recently been benchmarked by Sprenger et al.(12), who found the computational methods to be useful for sites,such as the nucleus,for which many training examples can be easily obtained from UniProt(which is the source of most or all of the training data for most prediction methods—including WoLF PSORT).The di?erent methods they benchmarked were found to have di?erent strengths.Here,we describe the public server for our WoLF PSORT method. PREDICTION METHOD WoLF PSORT is an extension of PSORT II(13,14)and also uses the PSORT(15)localization features for prediction.In addition,WoLF PSORT uses some features from iPSORT(16)and amino acid composition.Those features are used to convert amino acid sequences into numerical vectors,which are then classi?ed with a weighted k-nearest neighbor classi?er.WoLF PSORT uses a wrapper method to select and use only the most relevant features.This reduces the amount of information which needs to be considered(and displayed)for the user to interpret individual predictions and may also make the predictor less prone to over learning.The prediction method has described in more detail elsewhere(17). *To whom correspondence should be addressed.Tel:t81-3-5449-5131;Fax:t81-3-5449-5133;Email:knakai@ims.u-tokyo.ac.jp ?2007The Author(s) This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Non-Commercial License(https://www.360docs.net/doc/7d10273181.html,/licenses/ by-nc/2.0/uk/)which permits unrestricted non-commercial use,distribution,and reproduction in any medium,provided the original work is properly cited.
建立奶牛场生产智能管理与网络化系统课题
建立奶牛场生产智能管理与网络化系统课题 该课题在示范区38个规模化奶牛场实现网络化管理，完成了任务指标的109%。中以示范牛场、金银岛牧场、绿荷第一牧场、金星牛场和北京奶牛中心良种场、沧达福牛场六个奶牛场实现个体身份识别、生产性能测定、乳房健康监测、自动发情记录和疾病检测诊断等多位一体的智能化管理，智能化程度达到国际先进水平。 根据示范区奶业发展需要，通过系统分析，分三个部分：奶牛数字化管理平台、信息共享网络管理平台、奶业信息电子商务化管理平台，构建了示范区奶牛信息化管理平台，还建立了一个集局域网和广域网于一体的奶牛企业网络系统，为奶牛养殖业的信息的交流传输提供一个安全、方便、快捷的网络平台。网络平台的建立使示范区35个奶牛场全部实现了计算机网络化管理，为奶牛智能化管理提供了网络条件。并根据工作性质的需要，分别设置不同权限，不同程度地共享奶牛信息。奶业信息电子商务管理平台的建立，促进了北京奶业信息化的发展，使北京奶业与全球的奶业形成信息一体化，使得奶业信息能够实现全球性质的共享。 课题的实施促进了示范区奶业现代化管理水平的提高，依靠新技术改造传统产业，实现数字化管理，从而形成“高产、优质、高效”的城郊型奶业生产格局，为我国奶业发展提供示范。课题实施以来重视引进与自主开发的有机结合，取得了一系列科研技术成果。 1、引进吸收国际先进奶牛场智能化系统，自主拓展智能化管理功能 从以色列引进的智能化机奶系统既有较高的科技含量，要充分利用其功能必须具备良好的计算机知识和全面的牛场管理经验，在课题实施期间，课题组配合外方技术人员进行了多次的培训，现在已经全面掌握了全套系统的操作技能，领会其中的奶牛养殖先进理念，在此基础上，课题组人员进行了深入一步的研究，自主开发了DHI数据导入软件、后备牛评定数据导入软件、体况评分导入软件等多个辅助软件，实现了该系统和其他多个软件的数据对接和数据交换，实现软件间的数据共享，大大拓展了该系统的管理功能和应用空间，其智能化程度出于国际先进水平。 2、网络管理平台的搭建，为以“EDTN”为核心的高产奶牛饲养体系的形成提供了技术支撑 网络平台的搭建实现了规模化牛群异地管理、管理资料和技术资料远程传输、信息资源网络共享等功能，将现代化信息技术成功运用于奶牛场和规模化奶牛养殖企业，改变传统的奶牛养殖模式。网络数据库的建立可以实现网络数据的互动交换和自动处理，进一步加强了网络的管理功能和智能化水平。局域网站和对外网站的建立实现了内部信息的及时交流和对外技术信息的及时对接，实现了网络与国际的对接，充分体现了“EDTN”的网络化功能，为“EDTN”的主要技术支撑。 TMR工艺和配方软件的有机结合，使奶牛饲养更加精准。分群饲养日粮配方具有较强的针对性，TMR日粮具有较强的精确性、均衡性和稳定性，Rational配方软件设计的可靠性，三者有机的结合，形成了一套新型的饲养模式，将现代先进的养殖理念和管理理念融为一体，形成优势互补，提高了牛群的生产表现和健康状况，增加饲料的利用和转化效率，减少劳动力成本，企业实现较好的利润回报。
牧场奶牛常见疾病诊疗方案
牧场奶牛常见疾病诊疗方案 胎衣不下 母牛产后12小时胎衣仍未排出，即为胎衣不下，亦称胎衣滞留或胎膜滞留。该病可增加子宫内膜炎的发病率，增加卵巢囊肿的发病率，增加奶牛配种的次数，增加流产的发生率，增加奶牛胎间距，减少产奶，甚至因不孕造成奶牛过早淘汰。 【临床症状】 初期一般没有全身症状，经1—2天后，停滞的胎衣开始腐败分解，从阴道内排出污红色混有胎衣碎片的恶臭液体，患畜卧下，排出量较多。由于感染及腐败胎衣的刺激，发生急性子宫内膜炎。腐败分解产物若被子宫吸收，可出现败血型子宫炎和毒血症，患牛表现体温稍高、精神沉郁、瘤胃弛缓、食欲减退、泌乳减少等。 【治疗】 增强子宫收缩，促进胎儿胎盘和母体胎盘分离，防止胎衣腐败，预防子宫内膜炎。 1．增强子宫收缩，促进胎衣排出。首先注入氯前列醇钠0.4-0.8mg、皮下注射催产素10毫升(100国际单位)。 2.增强体质产后灌服远征速补钙每天2瓶、远征齐苷素10克，连用3天。 子宫内膜炎 子宫内膜炎是奶牛重要的繁殖障碍性疾病，为奶牛场最常见的疾病之一，也是奶牛不孕症的主要原因。该病造成母牛不能正常受孕繁殖，减少产犊，降低品种资源的利用率，降低母牛的泌乳性能，增加母牛淘汰。
【临床症状】 急性子宫内膜炎根据临床症状及阴门中排出的分泌物即可作出临床诊断；慢性子宫内膜炎则可根据临床症状，发情时分泌物的形状，阴道、直肠检查结果可作出初步诊断。 【治疗】 控制并消除感染，防止感染扩散；清除子宫内容物，促进子宫收缩；对症治疗，消除全身症状。 1、远征普佑宁、普得平分别肌肉注射控制全身症状。 2、25%硫酸镁100毫升、远征促孕灌注液1支子宫灌注连用2-3次每周 一次。 3、增强体质灌服远征速补钙每天2瓶、远征齐苷素10克，连用3天 卵巢疾病 卵巢疾病指母牛卵巢机能发生障碍，卵巢的正常周期活动紊乱，临床表现母牛不发情或发情异常，造成不能怀孕的一类疾病。主要包括卵巢静止、持久黄体、卵巢囊肿、排卵延迟及不排卵等。 卵巢疾病的诊断 (1)卵巢静止。母牛长时间不发情，直肠检查卵巢上摸不到卵泡或黄体；卵巢萎缩时，卵巢往往变硬，体积显著缩小，如豌豆或枣核大。间隔1周左右，经几次检查，卵巢一直没有变化，就可作出诊断。 (2)持久黄体。发情周期停止循环，不发情。直肠检杏，一侧或两侧卵巢增大，卵巢表面上有突出的黄体，黄体体积较大，质地较卵巢实质为硬，有韵呈蘑
牛繁殖障碍性疾病的发生原因与控制策略
牛繁殖障碍性疾病的发生原因与控制策略 王治方，施巧婷，冯亚杰，楚秋霞，陈付英，徐照学 （河南省农业科学院畜牧兽医研究所，河南郑州 4500002） 摘要：随着我国养牛业集约化程度的不断提高，牛繁殖障碍性疾病已逐渐成为危害养牛业发展的重要疾病之一。牛繁殖障碍性疾病以妊娠母牛发生流产、早产、产死胎、木仍伊胎、畸形胎，产出弱仔以及公牛不育、母牛不孕等为主要特征，发病率有逐年上升之势。引起牛繁殖障碍性疾病的因素众多，牛场不规范的引种和配种、粗放的饲养管理成为牛场牛繁殖障碍性疾病居高不下的主要原因。提高饲养管理水平，科学制定和实施免疫保健程序，加强牛场生物安全防控措施，是控制牛繁殖障碍性疾病长远而有效的方法。 关键词：牛；繁殖障碍性疾病；控制策略 牛繁殖障碍性疾病是指引发公、母牛繁殖异常的一类疾病的总称。是以妊娠母牛发生流产、早产、产死胎、木仍伊胎、畸形胎，产出弱仔以及公牛不育、母牛不孕等为主要特征，发病率有逐年上升之势。在我国的一些大中型规模化、集约化牛场都不同程度存在或发生过母牛繁殖障碍，有的牛场发病和损失十分严重，严重阻碍了我国牛业的健康发展。 1 牛繁殖障碍性疾病的发生原因 引发牛繁殖障碍性疾病的病因众多，包括传染性因素和营养、环境、毒素等非传染性因素。传染性繁殖障碍则主要是传染性因素如病毒、细菌、螺旋体、衣原体等微生物引起，非传染性牛繁殖障碍性疾病主要是生殖器官畸形、机能障碍以及饲养管理等因素所导致。 1.1传染性因素 （1）布鲁氏菌病。该病是一种人、畜共患接触性传染病，牛不分品种、年龄都有易感性。布鲁氏菌感染牛多呈隐性经过，少数出现典型症状，主要危害生殖器官，引起子宫、胎膜、睾丸的炎症，还可引起关节炎。临床主要表现为母牛流产、不孕，公牛睾丸炎等。母牛流产多发生在妊娠后第4～12周，病牛主要表现为精神沉郁，阴唇和乳房肿胀，阴道流黏性或脓性分泌物。该病多呈地方性流行。 （2）牛细小病毒病。该病是引起牛繁殖障碍的主要病因之一，据报道PP
奶牛繁殖技术人员岗位职责及绩效考核
奶牛繁殖技术人员岗位职责及绩效考核办法 一、岗位职责 1、负责牧场整个牛群的发情签定以及人工授精、妊娠检查，奶牛产后护理工作。 2、负责牧场牛群的接产以及繁殖疾病的检查、诊断和治疗工作。 3、协助牧场有关部门选购遗传价值高、近亲系数≦3.125、活力在0.35以上的优良种公牛精液。 4、定期检查液氮容器中的液氮情况并及时上报，及时补充液氮。如未做到，场内给予惩罚。 5、努力保持最高的发情观察率和受胎率，对屡配不孕、严重繁殖系统疾病牛只及时进行会诊，并做出正确有效的治疗。 6、对人工授精时间满三个情期（60天）未返情的牛只进行直肠孕检。确定怀孕牛只须在3个月后进行第一次复检，干奶前进行第二次复检。如未做到，场内给予惩罚。 7、详细记录牛只的发情、输精、繁殖疾病的检查、诊断和治疗的详细情况，整理后输入电脑。如未做到，场内给予惩罚。 8、协助兽医、饲养等部门做好牛群治疗、消毒防疫、牛群异动等工作。 9、物品和器械使用前后彻底消毒，做到无污染操作。如未做到，场内给予惩罚。 10、严格遵守牧场各项规章制度，按时上下班，服从上级工作安排 二、考核方案 月度考核指标：月输精头次，产后平均始配天数，平均配准天数，繁殖疾病控制率，接产事故控制率 非月度考核指标：产犊间隔 绩效工资的组成：基础工资，月情期受胎率，空怀天数，年繁殖率，产后繁殖护理。 1、基础工资 每月输精牛头次>=100：1800元； 每月输精牛头次>=80：1600元； 每月输精牛头次>=60：1400元； 每月输精牛头次>=40：1200元； 每月输精牛头次<40：1000元。
2、月情期受胎率 ①基础指标：成母牛≧50% ；育成牛≧60% ②奖励方式：成母牛每高于基础指标一个百分点，奖励20元；育成牛不在奖励范围。 ③惩罚方式：成母牛每低于基础指标一个百分点，罚款10元；育成牛每低于基础指标一个百分点，罚款10元。 注：①输过精但未妊检母牛由于其他疾病淘汰,配后天数≧45天且未返栏,以配孕计；②配后45天内隐性流产牛以未孕计。 3、空怀天数 ①奖励方式： 产后≦80天受孕：每牛120元； 产后≦100天受孕：每牛100元； 产后≦120天受孕：每牛80元； 产后≦150天受孕：每牛60元. ②惩罚方式： 产后≧180天未孕：每牛30元/月； 产后≧220天未孕：每牛40元/月； 产后≧260天未孕：每牛50元/月； 产后≧300天未孕：每牛60元/月； 注：①对于检出繁殖障碍的牛只，可由该牛负责人提出，作为“不宜输精”牛只申报。由技术主管人员带领其它技术人员对该牛进行会诊，制定处理方案。其他技术人员，可对该牛进行评估，也可对该牛进行治疗、配种。配孕牛只奖励500元/牛。 ②阿菲金牧场管理软件中定义为“不宜输精”牛只不在惩罚范围内。 4、年繁殖率 ①基础指标：≧80% ②奖励方式：每高于基础指标一个百分点，奖励500元； ③惩罚方式：每低于基础指标一个百分点，惩罚300元。 5、产后护理 ①基础要求：按照产后护理程序，严格及时操作；操作后当日必须准确填写产后监控卡。