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报告正文

（一）立项依据与研究内容

1、项目的立项依据

XXX疾病及其研究进展

XXXX疾病（XXXXXX，XXX英文名称）是XXX系统(消化、呼吸、神经等等)常见的一种疾病类型，多数是由于XXXX出现功能紊乱以及XXXX功能失调等所诱发，主要表现为XXXX（临床症状或者临床特征），致使XXX组织或者器官发生XXXX等症状，可以引起XXXX、XXXX以及XXXX等严重后果。同时，XXXX（该疾病）也是导致其他类XXXX相关疾病的主要原因之一。目前的研究表明，XXX疾病主要是由于XXXX所引起的（或者说跟XXX有关，也可以说关于该疾病的发病机制还没有研究清楚），对于该疾病的治疗，目前尚没有有效的治疗方法或者药物（或者目前已有药物有哪些不足，存在哪些问题）。

近年来，随着xxxx的改变，我国XXX疾病的发病率呈现逐年上升且年轻化的趋势。

大量的基础和临床研究表明，导致XXX疾病的危险因素主要包括：XXXXXX等。其中XXX的失调/XXX功能紊乱/XXXX异常等是引起该疾病的主要原因所在。所以，调节XXXX方面的功能是目前治疗和预防XXXX疾病发生和发展的主要关注途径。如针对XXX疾病主要动因的药物羟XXXX、XXXX以及XXXX等已经逐渐成为该疾病的主要药物。但是该类药物目前存在XXXX方面的缺点（成本高、副作用大等等），所以开发新的治疗该类疾病的靶向药物显得至关重要。

注：该部分主要内容是提出临床问题，可以是某一个疾病、或者某一个疾病过程中的一个问题等等，所以该段最好按照以下顺序来写：

1、临床现象

某某疾病是怎么回事（疾病简介），或者在某疾病的治疗或者发生、发展过程中观察到的某个临床现象。

2、该临床现象的症状、危害及严重性

主要描述该临床现象（一般是某种疾病）的临床症状、严重程度、危害性或严重性等。

3、提出临床问题

即在目前某种临床现象（疾病）存在哪些不足或者未解决的问题急需解决。

XXXX分子及其介导的信号通路在XXX疾病中的作用

已有的研究的发现，XXXXX分子及其所介导的XXX信号通路在XXX疾病发生和发展的过程中发挥着非常关键的作用。（接下来主要介绍该分子及信号通路在该疾病发生过程中的作用，可以通过相关的综述来写）

XXX分子是一个XXXX家族的蛋白，主要功能是XXX，主要介导XXX信号通路等，研究证明XXX在XXXX过程中有作用。（大概一两百字介绍该分子）XXX信号通路是什么，怎么传导，下游激活哪些基因表达，在XXX疾病或者临床问题中是否有过研究。如果有过研究，详细说明以往的研究证明XXXX信号通路是如何参与该疾病的发生过程的。

因此，提示我们XXXX可能在XXX疾病过程中发挥着重要作用/可能是XXX临床问题产生的关键机制所在等。

注：该部分内容主要是叙述你的研究将要涉及到的分子或者信号通路，比如某一个microRNA或者某条关键信号通路等，这里的介绍一定要是跟自己项目研究的内容是相关的，尽量详细介绍。

XXXX分子可能通过XXX通路进而在XXX疾病过程中发挥作用

首先介绍自己的研究基础工作

我们前期的研究发现：XXXX在XX疾病中具有什么作用。（这里可以使用条目列出自己前期的研究成果）

其次根据自己的研究成果提出科学假说

根据我们前期的研究工作，我们认为：XXXX（提出自己的工作假说）。

我们发现XXX分子在XXX中具有明确的功能，可能是这一临床问题的关键所在，然而其发挥作用的内在机制尚不清晰。所以，我们提出以下假说：XXXXX 在某某疾病的过程中，通过作用于XXXX/表达上调/表达下调等等方式，激活XXXX信号通路，调控XXXX细胞功能，最终对某某疾病起到保护或者促进的作用。

注：这里重点介绍自己前期的工作基础及研究结果，并最后根据自己的研究结果提出一个科学假说。

概括研究内容及研究价值

在我们前期研究工作的基础上，本项目拟通过XXXX的方法/方式/手段，明确/阐明/验证XXXX，为进一步理解XXXX以及XXXX疾病的药物治疗（药物开发、靶点选择）提供了理论依据（靶点、候选等）。

注：该部分主要内容就是概述自己研究的主要内容，最终可能得出的结果，以及研究的意义和价值等。

2、项目的研究内容、研究目标，以及你解决的关键问题。

（1）研究内容

1）在人类组织学水平上验证XXX分子与疾病的相关性

为了验证XXX是否与XXX疾病具有相关性，我们收集XXX例该疾病的临床样本，并使用qPCR、Western Blot、免疫组化等等方法，分别检测XXX分子在mRNA水平、蛋白质水平的表达情况以及组织中的分布等。根据所收集到的实验结果，分析该分子是否与该疾病存在显著的相关性。

2）在动物水平上验证XXX对XXX疾病动物模型的保护性作用及可能的作用机制为了验证XXX是否能够影响XXX疾病的发生、发展过程，我们使用XXX诱导XXX疾病动物模型，并检测XXX在不同疾病动物中的变大差异。同时给予动物XXX 相关的治疗，然后分别收集不同组动物的哪些样本，使用什么方法做哪方面的相关等。

分离XXX疾病动物相关细胞，检测XXXX的变化是否影响细胞的相关功能，如增殖、迁移、分化等。

3）在细胞水平上明确XXX在该疾病过程中可能的机制

为了进一步明确XXXX在XXX疾病过程中的详细机制，我们使用XXX细胞（细胞系或者分离的原代细胞），给予细胞什么处理或者怎么分组，培养多久后做哪些相关方面的检测。如收集细胞总蛋白，检测蛋白表达；收集细胞总RNA检测基因表达变化；收集细胞做细胞功能检测等。最终通过该部分实验明确XXX是通过什么机制在XXX 疾病过程中发挥作用的。

4）在动物水平上验证XXX作为XXX疾病治疗的可行性

为了明确XXX分子或者其调控的XXX信号通路是否可以作为XXX疾病药物治疗的靶点，我们使用XXX（可以是蛋白分子或者信号通路的抑制剂等）作为药物给予疾病动物治疗，治疗后收集不同的样本，检测相关的疾病指标，最终明确是否XXXX或者其调控的XXX信号通路可以作为XXX疾病治疗的靶点。

（2）研究目标：

1）明确XXX是否与XX疾病的发生和发展具有临床上的相关性；

1）明确XXX是否对XX疾病具有保护性或促进性作用；

2）确定XXXX调控XXX功能可能的信号通路或关键性的靶点分子；

3）验证XXX作为XX疾病药物治疗靶点的可行性。

（3）你解决的关键科学问题

1）明确XXX是否与XX疾病在临床上存在相关性；

2）成功构建XXX实验检测系统/实验方法等；

3）明确XXX是如何通过参与XXX信号通路来发挥其对疾病的影响作用的。

3、拟采取的研究方案及可行性分析

（1）研究方案

1）在人类组织水平上验证XXX与XX疾病是否具有相关性

临床样本的收集

主要包括收集的样本数目，收集样本的标准，哪些样本需要排除在外，样本中相关物质或成分的分离、处理以及保存等等

临床样本的检测

使用XXX方法（方法一），检测XXXX；

使用XXX方法（方法二），检测XXXX；

使用XXX方法（方法三），检测XXXX。

2）在动物水平上验证XXX对XXX疾病动物模型的保护性作用及可能的作用机制动物实验

使用什么方法构建XX疾病动物模型，动物模型如何构建，如何分组，每组如何处

理等。在什么时间做哪些相关处理。如给药处理X天后，使用XXX试剂麻醉动物，分别取XXX、XXX、XXX等组织进行相关检查。

体外实验

使用XXX方法（方法一），检测XXXX；

使用XXX方法（方法二），检测XXXX；

使用XXX方法（方法三），检测XXXX。

3）在细胞水平上明确XXX在该疾病过程中可能的机制

细胞的分离、培养及处理

使用什么方法（如何操作），获取什么细胞（如何获取），该细胞如何培养（培养基、培养条件、细胞密度等），如何处理（处理剂量、时间），处理多长时间，如何分组等。处理方式有：过表达、基因抑制、药物处理、相关抑制剂处理、相关激动剂处理等。根据处理不同对细胞进行分组。

细胞功能检测

细胞增殖情况检测：MTT法、CCK-8、流式细胞术、CFSE染色等；

细胞凋亡检测：DNA ledder、caspase-3、Annexin V/PI染色等

细胞迁移功能检测：细胞划线实验、Transwell实验、过继转移实验，凝胶迁移实验等

细胞分泌因子浓度检测：Western Blot、FACS、ELISA等

细胞分化检测：qPCR、WB检测关键因子、流式检测关键蛋白、镜下细胞表型观察等。

4）在动物水平上验证XXX作为XXX疾病治疗的可行性

动物实验

构建动物模型，不同剂量给药分组（给药可以是该分子的重组蛋白、功能性抑制剂、中和性抗体以及该分子所调节的信号通路的抑制剂等），不给药组作为阳性对照，健康组作为阴性对照。

疾病指标检测

检测疾病相关指标，具体根据研究的疾病不同而定。

（2）研究技术