苏丹黑B染色试剂盒

产品简介：

脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有机溶剂(例如乙醇、乙醚等)。人体的脂肪主要有两种：1、储存脂肪，如中性脂肪，主要分布于皮下、肾、胰腺等部位。2、结构脂肪，如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等)，主要分布于细胞内。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类，呈中性。中性脂肪是储存能量的方式之一，在氧化时释放出能量。

在正常情况下，除了脂肪细胞外，其他细胞在光学显微镜下几乎看不到脂滴，如果细胞质内出现大量脂滴，即为脂肪变性。脂肪变性常见于肝细胞、心肌细胞、肾曲管上皮细胞等。

中性脂肪染色经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑B、油红O法等。传统方法中，常采用苏丹染料，其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。染料在冰冻切片内脂质的溶解度较在原溶剂中的溶解度更大，所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质，使脂质呈现出染液的颜色。

Leagene苏丹黑B染色试剂盒染色时，标本不宜采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采用10%的福尔马林)、也不宜采用石蜡切片，需用冰冻切片或碳蜡切片。主要用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着，常发生于肝、肾、心等实质脏器的脂肪变性，细胞内出现多数中性脂肪滴；鉴别和诊断脂肪组织中所发生的肿瘤及其性质。其中，脂肪瘤、脂肪肉瘤、卵泡膜瘤、肾上腺皮质腺瘤等行苏丹黑B染色后，呈阳性反应；肾透明细胞癌、卵巢纤维瘤等行苏丹黑B染色后，呈阴性反应。

产品组成：

编号名称DL0015

2×50ml

DL0015

2×100ml

Storage

试剂(A): Sudan black B stain 50ml 100ml RT 避光试剂(B): Nuclear fast red stain 50ml 100ml RT 避光使用说明书1份

自备材料：

1、载玻片

2、70%的乙醇

3、蒸馏水

4、显微镜

5、甘油明胶封固液，亦可采购Leagene的甘油明胶封固液(IH0270)

操作步骤（仅供参考）：

1、新鲜组织低温切片，一般-20℃～-25℃，如果样本为脂肪瘤，应调节到-30℃。

2、冰冻切片5～10μm，以6～8μm为佳，贴于载玻片上。

3、70%的乙醇稍微浸洗一下。

4、入Sudan black B stain中，浸染15～20min。

5、70%的乙醇洗去多余染色液。

6、蒸馏水浸洗1min。

7、Nuclear fast red stain淡染细胞核5～10min。

8、自来水稍洗后，蒸馏水稍洗一下。

9、用滤纸吸去切片及周围的水分，让其稍微干燥。

10、甘油明胶或阿拉伯糖胶封固。

染色结果:

中性脂肪黑色

磷脂灰黑色

细胞核红色

注意事项:

1、脂肪染色，标本不宜采用含有乙醇的固定液、也不宜采用石蜡切片，需用冰冻切片。

2、在染色过程中必须防止染料发生沉淀。故切片放入染液时，应密封，勿与流动空气相接

触，避免溶液挥发时发生沉淀。

3、冰冻切片较易着色，复染时应避免过染。

4、苏丹染料容易褪色，应密闭保存。

5、甘油明胶封固的样本，保存时间不长。如需长期保存，可以在盖玻片与载玻片交界的边

缘用中性树胶封闭。

6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：6个月有效。

组织及血液碱性磷酸酶试剂盒说明书

货号: QS2002 规格：50管/24样碱性磷酸酶（alkaline phosphatase ，AKP/ALP）活性测定试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。测定意义： AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白酶，在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。AKP/ALP广泛分布于人体各脏器中，以肝脏为主。测定原理：在碱性环境中，AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚；酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通过测定510 nm吸光度增加速率，来计算AKP 活性。自备仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。试剂组成和配制：试剂一：液体×1瓶，4℃保存。试剂二：液体×1瓶，4℃避光保存。试剂三：液体×1瓶，4℃避光保存。试剂四：液体×1瓶，4℃避光保存，未变成蓝绿色之前均可使用。标准品：液体×1支（EP管中），2 μ mol/mL酚标准液，4℃保存。粗酶液提取： 1.组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，4℃、8000g离心10min，取上清液待测。 2.细菌或细胞：按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。 3.血液可直接测定，或者适当稀释后测定。测定步骤： 1. 分光光度计预热30min，调节波长到510 nm，蒸馏水调零。 2. 试剂三置于37℃水浴中预热30 min。 3. 空白管：取EP管，加入20μL蒸馏水，200μL试剂二，200μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四600μL，混匀后于510 nm测定吸光度，记为A空白管。 4. 标准管：取EP管，加入20μL标准品，200μL试剂二，200μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四600μL，混匀后于510 nm测定吸光度，记为A标准管。 5.对照管：取EP管，加入20μL上清液，200μL蒸馏水，200μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四600μL，混匀后于510 nm测定吸光度，记为A测定管。 6. 测定管：取EP管，加入20μL上清液，200μL试剂二，200μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四600μL，混匀后于510 nm测定吸光度，记为A测定管。第1页，共2页

普鲁士蓝染色试剂盒(核固红法)使用说明

普鲁士蓝染色试剂盒（核固红法）使用说明货号:G1422 有效期：12个月产品内容：产品名称2×50ml2×100ml Storage Perls stain A25ml50ml RT避光 Perls stain B25ml50ml RT 临用前，取A1、A2等量混合，即为试剂(A)Perls stain，不宜提前配制。试剂(B):核固红染色液50ml100ml RT避光产品说明：含铁血黄素（Hemosiderin）是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或棕黄色颗粒，因其含铁、金黄色，故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后，在溶酶体酶的作用下，血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。 Perls普鲁士蓝反应（Prussian blue reaction）又称为含铁血黄素染色，即经过亚铁氰化钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞内会间质内，主要显示三价铁盐。Perls普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应，是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法，其染色原理为：亚铁氰化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来，三价铁与亚铁氰化钾反应，生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁氰化物普鲁士蓝，所以该反应被称为普鲁士蓝反应。三价铁的亚铁氰化物是一种很稳定的化合物，在反应后可用红色染色剂进行复染，如核固红、伊红、中性红等。 Perls stain常用于显示局部组织内各种出血性病变，常见于吞噬细胞内。在判断含铁血黄素沉积时，用Perls反应可以得到证实，该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。

该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广、可以进行复染。该染色液的复染液采用核固红，是最经典、最常用的复染液。自备材料： 1.10%的中性福尔马林 2.系列乙醇 3.蒸馏水 4.4%的多聚甲醛操作步骤（仅供参考）：（一）石蜡切片染色 1、组织固定于10%中性福尔马林，常规脱水包埋。 2、切片厚度4um，常规脱蜡至水。 3、蒸馏水水洗1min。 4、切片入Perls stain（见注意事项4），浸染15-30min。 5、蒸馏水充分冲洗2-5min。 6、入核固红染色液，淡染细胞核5-10min。 7、自来水冲洗1-5s。 8、常规脱水透明，中性树胶封固。（二）冰冻切片染色 1、无需脱蜡，直接迅速用蒸馏水冲洗2～3min。 2、染色、水洗、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。（三）细胞染色 1、4%多聚甲醛固定10～20min。

碱性磷酸酶检测试剂盒(PNP微板法)

碱性磷酸酶检测试剂盒(PNP 微板法) 产品简介：碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase ，简称ALP 或AKP)为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内，其活性所需最适pH 9.2~9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜)，如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮，还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌的细胞膜。 Leagene 碱性磷酸酶检测试剂盒(PNP 微板法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用PNP 比色法，其检测原理是Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)为一种常用的磷酸酶显色底物，在酸性条件下，可在碱性磷酸酶的作用下生成p -nitrophenol 。在碱性条件下p -nitrophenol 转变成醌式结构，呈较深的黄色，产物黄色越深，说明碱性磷酸酶活性越高，反之则酶活性越低，通过分光光度比色法测定处吸光度，据此通过比色分析就可以计算出碱性磷酸酶活性水平。该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的碱性磷酸酶活性。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。产品组成：自备材料： 1、水浴锅或恒温箱 2、 96孔板 3、酶标仪操作步骤(仅供参考)： 1、配制显色工作液：取出1支pNPP ，恢复至室温后溶解于ALP Assay buffer ，混匀，冰上预冷备用。新配制的显色工作液应在6h 内用完。 2、配制标准品工作液：取出p -nitrophenol(10mM)恢复至室温后，取10μl 溶解于190μ 编号名称 TE0002 100T Storage 试剂(A): ALP Assay buffer 15ml 4℃ 试剂(B): pNPP 2支 -20℃ 避光试剂(C): p -nitrophenol(10mM) 0.1ml -20℃ 避光使用说明书 1份

HE(苏木素-伊红)染色试剂盒使用说明书

HE（苏木素-伊红）染色试剂盒使用说明书货号：L9406 规格：10ml/100ml 保存：本试剂盒常温保存，复检期至少1年。注意：环境温度低时，分化液可能会结晶析出，将分化液37℃水浴融化后即可，不影响使用。产品说明：苏木精-伊红染色法( Hematoxylin-Eosin staining )，简称HE染色法，切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。染色过程需要优化，着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。例如，很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。本产品所包含试剂均为工作液，可直接使用。操作说明：石蜡组织切片的HE染色（以下步骤仅供参考）。 1．取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，切片。 2．切片用二甲苯脱蜡，经各级乙醇至水洗：二甲苯（I）5min→二甲苯（Ⅱ）5min→100％乙醇2min→95％乙醇1min→80％乙醇1min→75％乙醇1min→蒸馏水洗2min。 3．苏木素染液染色5-20min(可以根据染色结果和要求调整时间)，自来水冲洗。 4．分化液分化30s。 5．自来水浸泡15min或温水（约50℃）5min。 6．置伊红染液2min。 7．自来水冲洗。 8．常规脱水，透明，封片：95％乙醇（I）1min→95％乙醇（Ⅱ）1min→100％乙醇（I）1min→100％乙醇（Ⅱ）1min→二甲苯石碳酸（3：1）1min→二甲苯（I）1min→二甲苯（Ⅱ）1min →中性树脂封固，镜下观察。冰冻切片不用脱蜡，可固定后直接染色，其方法与石蜡切片相同。

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法) 简介：碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase ，简称ALP 或AKP)为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内，其活性所需最适pH 9.2~9.8。碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)是采用偶氮偶联法(又称同时偶联法)，细胞内碱性磷酸酶可使AB-BI 磷酸盐水解，释放出磷酸与萘酚，后者与偶联重氮盐生成有色产物，定位于细胞质中, 碱性磷酸酶活性部位呈红色，位于胞桨。组成：操作步骤(仅供参考)： 1、血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片入ALP 固定液固定，水洗。 2、滴加配制好的ALP 孵育液，放入湿盒中，避光孵育，水洗。 3、Lea 苏木素染色液复染或甲基绿染色液复染。 4、水洗、镜检或甘油明胶封固后镜检。染色结果：临床意义： 1、类白血病反应积分明显增高，未经治疗的慢性粒细胞白血病积分明显减低。 2、急性细菌性感染积分明显增高，病毒性感染积分多正常或减低。 3、再生障碍性贫血积分常增高，PNH 、MDS 积分常减低。编号名称 DE0004 4×2ml DE0004 4×10ml DE0004 4×20ml Storage 试剂(A): ALP 固定液 2ml 10ml 20ml RT 避光试剂(B): ALP 孵育液 B1: AS-BI 染色液 1ml 5ml 10ml -20℃ 避光 B2: FBB 染色液 1ml 5ml 10ml -20℃ 避光临用前，按B1:B2=1:1比例混合，即为ALP 孵育液，即配即用。试剂(C): Lea 苏木素染色液 2ml 10ml 20ml 4℃ 避光试剂(D): 甲基绿染色液 2ml 10ml 20ml RT 避光使用说明书 1份 ALP 活性部位红色细胞核蓝色(苏木素)或绿色(甲基绿)

Masson三色染色试剂盒说明书

Masson三色染色试剂盒说明书 Masson 三色染色试剂盒说明书（南京森贝伽生物科技有限公司）【产品介绍】 Masson 染液是显示组织中纤维染色的主要方法之一，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关。分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。淡绿分子量最大。因此Masson 染色肌纤维红色，胶原纤维绿色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。【用途】主要用于胶原纤维染色。【产品特点】 ①染色稳定；②分化时间短，1～2 分钟；③色彩清晰鲜艳；④适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；⑤所染切片保存时间长且不易褪色。固定：甲醛升汞或甲醛盐溶液。切片：所有类型。【产品组成】编号名 SBJ0126 （7×50ml）SBJ0126 （7×100ml） SBJ0126 （7×500ml） Storage 试剂（A） A1：苏木素染色液25ml 100ml 500ml RT A2：三氯化铁水溶液25ml 100ml 500ml RT 临用时取A1、A2 等量混合，成为试剂（A），不可预先配制后放置，因染色液的色素根与铁会化合，形成不容性沉淀，等量混合后，一般24h 后失去染色力。试剂（B）: 盐酸乙醇分化液50ml 100ml 500ml RT 试剂（C）: 氨水水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（D）: 丽春红酸性品红染色液50ml 100ml 500ml RT 试剂（E）: 乙酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（F）: 磷钼酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（G）: 苯胺蓝染色液50ml 100ml 500ml RT 【参考操作步骤】 1、切片脱蜡至水。 2、试剂（A）染色5min～10min。 3、试剂（B）分化、水洗，试剂（C）返蓝、水洗。 4、蒸馏水或者去离子水洗1min。 5、试剂（D）染色5～10min。 6、试剂（E）洗1min。 7、试剂（F）洗1～2min。 8、试剂（E）洗1min。

碱性磷酸酶显色剂使用方法

5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl Phosphate (5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸盐), BCIP/NBT （四唑硝基蓝）是碱性磷酸酶底物, 产物为深蓝色, 在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP被水解, 水解产物与NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。使用方法 1. 在膜或组织切片，最后一次洗涤完毕后，加入适量BCIP/NBT染色工作液 2. 室温避光孵育5-30分钟或更长时间(可长达24小时)，直至显色至预期深度. 3. 用蒸馏水洗涤1-2次即可终止显色反应 4. 膜标本可干燥后避光保存；组织切片或细胞样品，显色反应终止后，可以用中性红复染染色干细胞成骨诱导的常用染色方法有几种碱性磷酸酶（ALP）是成熟成骨细胞的标志性酶，同时成骨细胞形成的钙结节也是成骨细胞的标记物。成骨细胞染色方法以ALP为目标物的检测方法： 1 Gomori钙钴法【染色原理】 ALP在pH值9.4的环境下，以镁离子作为激活剂，能够把β-甘油磷酸钠水解出磷酸，磷酸与高浓度的钙盐结合形成无色的磷酸钙，再与硝酸钴作用形成磷酸钴，经硫化胺处理形成黑色的硫化钴沉淀在酶活性处。【孵育液配制】 3%β-甘油磷酸钠5ml 2%巴比妥钠5ml 蒸馏水10ml 2% CaCl2 10ml 2% MgSO4 1ml 【步骤】（1）将无菌的玻片放入培养皿中，传代时加入适量的细胞悬液，作细胞爬片，呆细胞长满玻片后取出。（2）PBS冲洗后用冷丙醇固定10min，蒸馏水冲洗数次。（3）入孵育液中，37℃孵育4-6h。自来水冲洗数次。（4）2%硝酸钴中浸3-5min，蒸馏水洗数次。（5）1%的硫化铵中2min，自来水冲洗，自然干燥，封固。【结果】胞质中阳性反应呈现灰黑色颗粒或块状沉淀。 2偶氮偶联法：【孵育液配制】萘酚AS-BI磷酸盐20mg DMSO 0.5ml 0.2mol/L巴比妥醋酸缓冲液（PH 9.2）50ml 六偶氮副品红0.5ml

AB-PAS染色试剂盒操作步骤及注意事项

AB-PAS 染色试剂盒操作步骤及注意事项 AB-PAS 染色试剂盒货号:G1285 有效期：6个月有效。产品简介: 糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus 在1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该染色液不仅能够显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质。阿利新蓝和PAS 技术联合使用可鉴别同一组织切片中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。这种技术也常用作广泛检测黏蛋白的手段。该技术染色阴性，可明确断定该物质不是黏蛋白。在大多数方法中，切片先经标准的阿利新蓝（pH 值为2.5）染色，在使用PAS 技术。阿利新蓝可将唾液黏蛋白、硫黏蛋白和蛋白多糖染成蓝色。PAS 技术可将中性黏蛋白染成深红/红紫色，同时将既含中性黏蛋白有含酸性黏蛋白的组织和细胞染成深浅不同的紫色，这是有于阿利新蓝与Schiff 试剂结合并反应。上述染色常可出现在含有中性黏蛋白和唾液黏蛋白的小肠杯状细胞中。阿利新蓝是类铜钛花青染料，这种阳离子染料与酸性基团结合，也即阿利新蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。分子中带正电荷的盐键与酸性黏蛋白多糖物质中带负电荷的酸性基团结合形成不溶性的复合物而呈蓝色，再于PAS 进行复合染色，就编号名称 6×50ml 6×100ml Storage 试剂（A ）阿利新蓝染色液50ml 100ml 4℃避光试剂（B ）过碘酸溶液50ml 100ml 4℃避光试剂（C ）Schiff Reagent 50ml 100ml 4℃避光试剂（D ）苏木素染色液50ml 100ml 4℃避光试剂（E ）酸性分化液50ml 100ml RT 试剂（F ）Scott 蓝化液50ml 100ml RT

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求beiken

碱性磷酸酶测定试剂盒（NPP底物-AMP缓冲液法）适用范围：本品用于体外定量测定人血清中碱性磷酸酶的活性。 1.1包装规格 1.2产品组成成分试剂盒由试剂A 、试剂B 组成，各组分见表2。表2 试剂组成 2.1外观试剂为澄清、透明溶液，无沉淀及絮状悬浮物，外包装完整无破损。 2.2净含量用通用量具量取，试剂的净含量应不少于标示量。 2.3试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度

用试剂盒测试生理盐水，在405nm的波长下测试，1cm光径下试剂吸光度值不大于0.80。 2.3.2试剂空白吸光度变化率用试剂盒测试生理盐水，试剂空白吸光度变化率ΔA/min，应不大于0.005。 2.4分析灵敏度测试一定浓度的碱性磷酸酶，120U/L的碱性磷酸酶引起的吸光度变化率ΔA/min 大于0.024。 2.5线性区间试剂线性在[25，750] U/L区间内，线性相关系数│r│应不小于0.990，当检测范围在[25，100）U/L区间内，绝对偏差不超过±10U/L；当检测范围在[100，750]U/L区间内，相对偏差不超过±10%。 2.6精密度 2.6.1重复性用质控品重复测试所得结果的变异系数CV应不大于5%。 2.6.2批间差用同一水平浓度的质控品分别测试3个不同批号的试剂盒，其相对偏差不大于10%。 2.7准确度进行比对试验（与国内批准上市的试剂盒进行比对），用线性回归方法计算两组结果的相关系数（│r│应不小于0.990）及每个浓度点的偏差。当测试值在[25，40）U/L区间内，偏差不超过±4 U/L；当测试值在[40，750]U/L区间内，偏差不超过±10%。 2.8稳定性试剂贮存在2℃～8℃条件下，有效期为18个月。有效期满后，分别检测2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7项，结果符合各项要求。

凯基7-AAD染色试剂盒说明书

7-AAD染色试剂盒凯基7-AAD染色试剂盒 (Cell Apoptosis 7-AAD Detection Kit) Cat number：KGA For Research Use Only Store at4℃for one year Expire date： A．试剂盒说明 7-AAD （7-amino-actinomycin D）是一种核酸染料，它不能通过正常质膜，随着细胞凋亡、细胞死亡过程，质膜对7-AAD的通透性逐渐增加，结合细胞凋亡中DNA的有控降解，在合适波长激发光的激发下可发出明亮的红色荧光，通过7-AAD标记DNA的强弱，将细胞分为三群：7-AAD强为死亡细胞，7-AAD弱是凋亡细胞，7-AAD-为正常活力细胞。7-AAD同PI 有着相似的荧光特性，但其发射波谱较PI窄，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI 的最佳替代品，可与Annexin V-EGFP/FITC/PE联合使用。本试剂盒适用于培养的细胞染色，可应用于荧光显微镜、激光共聚焦计或流式细胞仪检测。二、试剂盒组份 1×10倍。三、试剂盒以外自备仪器和试剂流式细胞仪、激光共聚焦或荧光显微镜：激发波长546nm，发射波长647 nm 微量移液器、1.5m L Microtube、载玻片四、使用注意事项 1．微量试剂取用前请离心集液。 2．7-AAD避光保存及使用。 3．7-AAD为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。 4．本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。五、操作方法 1．悬浮细胞离心（2000rpm离心5min）收集；贴壁细胞用胰酶消化收集用PBS洗涤细胞二次（2000rpm离心5min）收集1~5×105细胞； 2．加入5μL 7-AAD染液，混匀；室温、避光、反应5～15min； 3．加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞； 4．请在1 hour内，进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。 A．荧光显微镜观察 1．滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞； 2．对于贴壁细胞来说，也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡；（1）将细胞于盖玻片上生长，用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，并设立阴性对照组；（2）用PBS洗涤细胞两次；（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混匀；（4）将上述溶液滴加于盖玻片表面，使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖；（5）避光、室温反应5 min。 3．将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下观察激发波长546nm，发射波长647nm，7-AAD 荧光信号呈红色。 B．流式细胞仪分析用流式细胞仪检测，激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。 7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。

HE(苏木素-伊红)染色试剂盒

HE（苏木素-伊红）染色试剂盒货号：G1120 规格：3×10ml/3×100ml 保存：常温保存，复检期至少1年。产品内容G1120-10G1120-100 苏木素染液10ml100ml 分化液10ml100ml 伊红染液10ml100ml 注意：环境温度低时，分化液可能会结晶析出，将分化液37℃水浴融化后即可，不影响使用。产品说明：苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-Eosin staining)，简称HE染色法，是病理学常规制片中最基本的染色方法。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。染色过程需要优化，着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。例如，很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。本产品所包含试剂均为工作液，可直接使用。操作说明（以下步骤仅供参考）：（一）石蜡组织切片染色。 1．取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，切片。 2．石蜡切片脱蜡水化：

①二甲苯（I）中脱蜡5min。 ②换用新鲜的二甲苯（Ⅱ），再脱蜡5min。 ③无水乙醇5min。 ④95%乙醇2min。 ⑤80％乙醇2min ⑥70%乙醇2min。 ⑦蒸馏水2min。 3．苏木素染液染色5-20min(具体时间根据染色结果和实验要求调整)，自来水冲洗。4．分化液分化30s。 5．自来水浸泡15min或温水（约50℃）5min。 6．置伊红染液几秒-2min(具体时间根据染色结果和实验要求调整)，自来水冲洗。7．自来水浸泡2-5min。 8．脱水，透明，封片： ①95％乙醇（I）2-3s ②95％乙醇（Ⅱ）2-3s ③100％乙醇（I）2-3s ④100％乙醇（Ⅱ）1min ⑤二甲苯石炭酸（3：1）1min ⑥二甲苯（I）1min ⑦二甲苯（Ⅱ）1min ⑧中性树胶封固，镜下观察。

碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒使用说明

碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(磷酸苯二钠微板法) 货号：G5610 有效期：6个月有效。产品内容：产品规格试剂(A):ALP Assay buffer 2.5ml 试剂(B):ALP显色液 2.5ml 试剂(C):显色基液7.5ml 试剂(D):Phenol标准(1mg/ml)1ml 试剂(E):ddH2O1ml 产品说明：碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内，其活性所需最适pH9.2~9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜)，如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮，还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌的细胞膜。碱性磷酸酶检测试剂盒(磷酸苯二钠微板法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用磷酸苯二钠比色法，其检测原理是磷酸苯二钠在碱性条件下，可在碱性磷酸酶的作用下生成游离酚和磷酸。在碱性条件下酚与氨基安替比林结合，并经氧化生成红色醌式结构物，呈深浅不一的红色，产物红色越深，说明碱性磷酸酶活性越高，反之则酶活性越低，通过酶标仪测定510nm处吸光度，据此通过比色分析就可以计算出碱性磷酸酶活性水平。该试

剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的碱性磷酸酯酶活性。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。自备材料： 96孔板、水浴锅或恒温箱、酶标仪操作步骤(仅供参考)： 1、配制标准品工作液：取出Phenol标准(1mg/ml)恢复至室温后，取0.1ml溶解于1.9ml ddH2O，使浓度达到0.05mg/ml，即为标准品工作液-Phenol(0.05mg/ml)。按照下表稀释系列标准品溶液。 012345 010******** Phenol(0.05mg/ml)(μ l) ddH2O(μl)55453525155 相当于金氏单位(U/L)010******** 2、准备样品：（1）细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-80℃冻存，用于碱性磷酸酯酶的检测。（2）血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-80℃冻存，但为了消除样品本身颜色的干扰，需设置加了血浆或血清但不加底物的对照。（3）高活性样品：如果样品中含有较高活性的碱性磷酸酶，可以使用原有的裂解液或PBS 等进行稀释，如鸡血清、血浆可稀释5～10倍后检测。

细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒

细胞凋亡-Hoechst 染色试剂盒简介：细胞凋亡-Hoechst 染色试剂盒(Hoechst Staining Kit)是一种采用经典的Hoechst33258进行细胞凋亡检测的快速简便的试剂盒。当细胞发生凋亡时，染色质会固缩，Hoechst33258染色后在荧光显微镜下观察，正常细胞的细胞核呈正常的蓝色，而凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染，颜色有些发白。Hoechst Staining Kit 经常用于培养的贴壁或悬浮细胞以及组织切片的细胞凋亡检测。该试剂盒检测细胞含量范围一般为0.1～1×106之间。组成：操作步骤(仅供参考)： (一)贴壁细胞 1、取洁净盖玻片在70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间，无菌超净台内吹干或用无菌的PBS 或生理盐水洗涤3次，再用细胞培养液洗涤1次。 2、加入干预条件使细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入Hoechst 固定液0.5ml 。 3、去除固定液，用PBS 或生理盐水洗，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手动晃动。 4、加入Hoechst 33258染色液0.5ml 孵育。也宜用摇床，或手动晃动数次。 5、弃染色液，用PBS 或生理盐水洗，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手动晃动。 6、滴一滴抗荧封片剂于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，让细胞接触封片剂，尽量避免气泡。 7、荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。激发波长350nm 左右，发射波长460nm 左右。 (二)悬浮细胞 1、离心收集细胞样品于1.5ml 离心管内并弃液，加入Hoechst 固定液0.5ml ，缓缓悬起细胞固定。 2、低速离心去除固定液，用PBS 或生理盐水洗。洗涤时手动晃动数次。 3、低速离心离心后吸去大部分液体保留约50μl 液体，再缓缓悬起细胞，滴加至载玻片上，编号名称 DA0032 100T Storage 试剂(A): Hoechst 固定液 50ml RT 试剂(B): Hoechst 染色液 50ml -20℃ 避光试剂(C): 荧光封片剂 5ml 4℃ 避光使用说明书 1份

BCIP NBT碱性磷酸酶显色试剂盒

仅供科研使用版本号：180718 BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒【产品组成】【保存条件】 4℃,避光,12个月。【产品概述】 BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒(BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit)是一种用于免疫组化显色、Western等膜显色和诱导多功能干细胞iPS鉴定等的试剂盒。BCIP/NBT是碱性磷酸酯酶的常用底物，在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP会被水解产生强反应性的产物，该产物会和NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。 BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit可用于细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色包括诱导多功能干细胞iPS的鉴定，也可用于Western等结合有碱性磷酸酯酶的膜的显色检测\细胞或组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。【使用方法】 1、对于组织切片或细胞样品或膜，在与碱性磷酸酯酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后，用适当洗涤液洗涤3～5次，每次3～5min。 2、对于检测内源性碱性磷酸酯酶的组织或细胞样品，在适当固定后，也用适当洗涤液洗涤3～5次，每次3～5min。 3、按照如下比例依次加入各溶液，混匀后即配制成BCIP/NBT染色工作液： 4、洗涤完毕后，去除洗涤液。 5、加入适量BCIP/NBT染色工作液，确保能充分覆盖样品。 5、室温避光孵育5～30min或更长时间(可长达24小时)，直至显色至预期深浅。 6、去除BCIP/NBT染色工作液，用蒸馏水洗涤1～2次即可终止显色反应。 7、对于组织切片或细胞样品，显色反应终止后，如有必要可以用中性红染色液(neutral red staining solution)染色，以便于观察。对于膜，显色反应终止后，可以室温晾干避光保存。

支原体染色试剂盒

支原体染色检测试剂盒简介：支原体染色检测试剂盒(Mycoplasma Stain Assay Kit)是一种经典的利用DNA 荧光染色法检测支原体污染的试剂盒，其原理是当细胞发生凋亡时，染色质会固缩，Hoechst 染色后在荧光显微镜下观察，正常细胞的细胞核呈正常的蓝色，而凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染，颜色有些发白。 Leagene Hoechst Staining Kit 经常用于培养的贴壁或悬浮细胞以及组织切片的细胞凋亡检测。该试剂盒检测细胞含量范围一般为0.1～1×106之间。组成：自备材料： 1、可观察蓝光的荧光显微镜或激光共聚焦显微镜 2、 PBS 或生理盐水 3、载玻片、盖玻片 4、预冷固定液：预冷的70%乙醇或4%多聚甲醛操作步骤(仅供参考)： (一)贴壁细胞 1、取洁净盖玻片在乙醇中浸泡，无菌超净台内吹干或用无菌的PBS 或生理盐水洗涤3次，再用细胞培养液洗涤。将盖玻片置于6孔板或其他培养皿内，接种细胞培养过夜，使融合率约为50%～80%。 2、加入干预条件使细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入Hoechst 固定液，固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。 3、去除固定液，用PBS 或生理盐水洗，每次3min ，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手动晃动。 4、加入Hoechst 染色液，孵育。也宜用摇床，或手动晃动数次。 5、弃染色液，PBS 或生理盐水洗2次，每次3min ，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手编号名称 DA0140 100T Storage 试剂(A): Hoechst 固定液 50ml RT 试剂(B): Hoechst 染色液 50ml -20℃ 避光试剂(C): 荧光封片剂 5ml 4℃ 避光使用说明书 1份

组织及血液碱性磷酸酶(AKP ALP)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法

组织及血液碱性磷酸酶（AKP/ALP）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。货号：BC2140 规格：50T/24S 产品内容：提取液：液体30mL×1瓶，4℃保存。试剂一：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。试剂二：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。试剂三：液体30mL×1瓶，4℃避光保存，变成蓝绿色不能使用。标准品：液体0.5mL×1支，2μmol/mL酚标准液，4℃保存。产品说明： AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白酶，在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。AKP/ALP 广泛分布于人体各脏器中，以肝脏为主。在碱性环境中，AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚；酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通过测定510nm吸光度增加速率，来计算AKP活性。试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰和蒸馏水。操作步骤：一、粗酶液提取：称取约0.1g组织，加提取液1mL充分研磨，4℃，10000rpm离心10min，取上清液待测。血液可直接用于测定，或者适当稀释后用于测定。二、测定步骤： 1.可见分光光度计预热30min以上，调节波长到510nm，蒸馏水调零。 2.操作表

试剂名称（μL）测定管对照管空白管标准管蒸馏水--20-2μmol/mL标准品---20 上清液20--- 试剂一200200200200 试剂二200200200200 混匀后置于37℃水浴中保温15min 试剂三600600600600 上清液-20--混匀后于510nm测定吸光度，分别记为A测定管、A对照管、A空白管、A标准管。三、AKP/ALP活性计算： 1.按蛋白浓度计算活性单位定义：37℃中每毫克蛋白每分钟催化产生1μmol酚为一个酶活力单位。 AKP/ALP(U/mg prot)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样]÷(Cpr×V样)÷T =0.133×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr 2.按样本鲜重计算活性单位定义：37℃中每克组织每分钟催化产生1μmol酚为一个酶活力单位。 AKP/ALP活力(U/g鲜重)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样]÷(W÷V提取×V 样)÷T=0.133×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷W 3.血液中ACP活性计算活性单位定义：37℃中每毫升血液每分钟催化产生1μmol酚为一个酶活力单位。 AKP/ALP活力(U/mL)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样]÷V样÷T =0.133×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管) C标准品：2μmol/mL；V反总：反应体系总体积，1020μL=1.02mL； V样：加入反应体系中上清液体积，0.02mL；T：反应时间，15min； V提取：加入提取液体积，1mL；W：样本鲜重，g； Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL。

细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)

细胞自噬染色检测试剂盒(MDC 法) 简介：自噬(autophagy)是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器，最终将吞食物在溶酶体内降解的过程，自噬体(autophagosome)为双层膜包被的圆形或椭圆形结构，内含细胞质、长寿蛋白质和异常蛋白聚集物，损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、病毒和细菌等。单丹磺酰尸胺(Dansylcadaverine,MDC )是一种荧光色素，是嗜酸性染色剂，通常被用于检测自噬体形成的特异性标记染色剂，其检测激发滤光片波长355nm 。阻断滤光片波长512nm 。Leagene 细胞自噬染色检测试剂盒(MDC 法)，适用于培养细胞的自噬染色，又称为MDC 染色液，可与EB 合用双染。组成：操作步骤(仅供参考)： (一)、MDC 单独染色： 1、用去离子水稀释1×Wash buffer 至1×。 2、离心，收集细胞，用1×Wash buffer 清洗细胞1次，弃上清。 3、加入适量的1×Wash buffer 重悬细胞，计数并调节细胞浓度至106/ml 。 4、取适量细胞悬液至新的EP 管中，加入MDC Stain ，轻轻混匀。 5、室温避光染色。 6、离心收集细胞，用1×Wash buffer 清洗细胞2次，弃上清。 7、加入Collection buffer 重悬细胞，滴加于载玻片上并加盖玻片。 8、荧光显微镜下观察(激发滤光片波长355nm ，阻断滤光片波长512nm)，计数并拍照。 (二)、与EB 双染色： 1、用去离子水稀释1×Wash buffer 至1×。 2、离心收集细胞，用1×Wash buffer 清洗细胞1次，弃上清。 3、加入适量的1×Wash buffer 重悬细胞，计数并调节细胞浓度至106/ml 。 4、取适量细胞悬液至新的EP 管中，分别加入MDC Stain 和 EB 染色液，轻轻混匀。 5、滴加于在玻片上，室温避光染色，加盖玻片。编号名称 DA0041 Storage 试剂(A): MDC Stain 1ml -20℃ 避光试剂(B): 10×Wash buffer 20ml 4℃ 试剂(C): Collection buffer 10ml 4℃ 使用说明书 1份

土壤碱性磷酸酶活性测定试剂盒

货号: QS2902 规格：50管/48样土壤碱性磷酸酶活性测定试剂盒分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。测定意义：土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷化合物矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响。通常按照其最适pH范围，分为碱性、中性和酸性三种类型磷酸酶。测定原理：碱性环境中，S-AKP/ALP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，通过测定酚的生成量即可计算出S-AKP/ALP活性。自备实验用品及仪器：可见分光光度计、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、蒸馏水、无水乙醇和甲苯。试剂组成和配制：试剂一：液体×1瓶，4℃避光保存。试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。用前加50mL蒸馏水充分溶解。试剂三：液体×1瓶，4℃保存。试剂四：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加1152μL无水乙醇（自备），48 μL蒸馏水充分溶解。（变褐色后不能再使用）标准品：液体1.5mL×1瓶，0.5μmol/mL苯酚标准液，4℃保存。催化反应：称取风干混匀土壤约0.1g，加入50μL甲苯（自备），轻摇15min；加400μL试剂一并且摇匀后，置于37℃恒温培养箱，开始计时，催化反应24h；到时后迅速加入1mL试剂二充分混匀，以终止酶催化的反应。8000g，25℃离心10min，取上清液置于冰上待测。显色反应： 1. 分光光度计预热30 min，调节波长到660 nm，蒸馏水调零。 2. 空白管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL蒸馏水，100 μL试剂三，20 μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830 μL，混匀后25℃静置30 min，于660 nm测定吸光度，记为A 空白管。 3. 标准管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL标准液，100 μL试剂三，20 μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830 μL，混匀后25℃静置30 min，于660 nm测定吸光度，记为A 标准管。 4. 测定管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL上清液，100 μL试剂三，20 μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830 μL，混匀后25℃静置30 min，于660 nm测定吸光度，记为A 测定管。注意：空白管和标准管只需测定一次。第1页，共2页

细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)操作步骤及注意事项

细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)操作步骤及注意事项货号：G0170 规格：100T 有效期：12个月有效。产品内容：产品名称规格Storage 试剂(A):MDC Stain1ml-20℃避光试剂(B):10×Wash buffer20ml4℃ 试剂(C):Collection buffer10ml4℃ 产品说明：自噬(autophagy)是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器，最终将吞食物在溶酶体内降解的过程，自噬体(autophagosome)为双层膜包被的圆形或椭圆形结构，内含细胞质、长寿蛋白质和异常蛋白聚集物，损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、病毒和细菌等。单丹磺酰尸胺(Dansylcadaverine,MDC)是一种荧光色素，是嗜酸性染色剂，通常被用于检测自噬体形成的特异性标记染色剂，其检测激发滤光片波长355nm。阻断滤光片波长512nm。细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)，适用于培养细胞的自噬染色，又称为MDC染色液，可与EB合用双染。自备材料：荧光显微镜、低速离心机、EB、载玻片、盖玻片操作步骤(仅供参考)： (一)、MDC单独染色：

1、用去离子水稀释10×Wash buffer至1×。 2、800g离心5min，收集细胞，用300～400μl的1×Wash buffer清洗细胞1次，弃上清。 3、加入适量的1×Wash buffer重悬细胞，计数并调节细胞浓度至106/ml。 4、取适量90μl的细胞悬液至新的EP管中，加入10μl的MDC Stain，轻轻混匀。 5、室温避光染色15～45min。 6、800g离心5min，收集细胞，用300～400μl的1×Wash buffer清洗细胞2次，弃上清。 7、加入100μl的Collection buffer重悬细胞，滴加于载玻片上并加盖玻片。 8、荧光显微镜下观察(激发滤光片波长355nm，阻断滤光片波长512nm)，计数并拍照。 (二)、与EB双染色： 1、用去离子水稀释10×Wash buffer至1×。 2、800g离心5min，收集细胞，用300～400μl的1×Wash buffer清洗细胞1次，弃上清。 3、加入适量的1×Wash buffer重悬细胞，计数并调节细胞浓度至106/ml。 4、取适量90μl的细胞悬液至新的EP管中，分别加入10μl的MDC Stain和0.2μM EB 染色液，轻轻混匀。 5、滴加于在玻片上，室温避光染色15～30min，加盖玻片。 6、荧光显微镜下观察(激发滤光片波长512nm)，计数并拍照。染色结果：正常细胞细胞被均匀染成黄绿色荧光凋亡细胞染色质浓缩，细胞核碎裂成点状，被染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒