兰花的组织培养
兰花的组织培养
张婷婷20081070175
摘要: 对兰花的组织培养进行了综述。着重阐述了兰花组织培养中组织培养程序、外植体的选择、培养基与激素的选择、培养方式和培养条件的研究进展情况。
关键词: 兰花; 组织培养; 外植体; 培养基
兰科(Orchidaceae) 是有花植物中最大的一个科, 约有800 属, 25 000～30 000 种, 广泛分布于全球各地。兰花是整个兰科植物的总称, 常见的有春兰、蕙兰、建兰、蝴蝶兰、石斛、卡特兰, 文心等, 其花具有极高的欣赏价值和经济价值。有些种类如天麻等则具有极高的药用价值。兰花的组织培养始于20世纪60 年代。Morel[1]采用大花蕙兰的茎尖, 在含有细胞分裂素的KC 培养基上进行培养, 茎尖分生组织膨大形成原球茎, 并分化出根和叶, 首次获得兰花无病毒小植株。目前大约已有60 余属数百种兰花可以用组织培养的方法进行繁殖。
1 组织培养程序与外植体选择
种子、胚形态建成途径
用于兰花离体繁殖的外植体材料很多, 通常选择有新芽、幼叶、茎尖等。茎尖是最早用于兰花快速繁殖的外植体。大花蕙兰(Cymbidium) 、嘉德丽亚兰(Cattleya) 、石斛兰(Dendrobim) 蝴蝶兰( Phalaeanopsis) 、文心兰(Oncidium) 等首先在茎尖培养中取得成功[2]。侧芽的应用也很广泛, 一般认为带1～2 个叶原基的茎原椎成活率高, 中间部位侧芽成活率及生长率较高。但因为有的兰花只生一茎,摘取茎尖就有可能丧失母株, 因此, 人们在更大范围内寻找外植体。用叶片作外植体可以减轻或避免对母株的伤害。大多数以叶片为外植体的成功报道是取试管苗的幼叶为培养材料, 从成熟植株上取幼叶为外植体培养成功的报道不多。有研究指出: 蝴蝶兰试管苗幼叶原球茎发生率可达90%, 而成熟叶对诱导反应极弱[。这可能是由于成熟植物组织向培养基中释放高浓度的抑制生长物质, 严重影响兰花组织的存活。现已报道的蝴蝶兰外植体材料各异, 不同的外植体其诱导的效率也不同
表1 不同外植体原球茎的诱导效率
外植体最高诱导率/% 特点( 见参考文献)
子100 产生性状分离, 可用于育种
胚80 产生性状分离, 可用于育种
花梗节间88 保持母株性状, 取材受时间限制花梗腋芽94 保持母株性状, 取材受时间限制[ 叶片( 未切割) 90 保持母株性状, 对母株伤害不大
叶片( 切割) 61 保持母株性状, 对母株伤害不大[
根尖75 保持母株性状, 对母株无影响
茎尖100 保持母株性状, 损伤母株
原球茎( Protocorm-likebody) 是兰科植物组织培养产生的特有现象, 是兰花组织培养的
重要形式之一。自1960 年Morel 由惠兰属的象牙色惠兰、罗式惠兰、显花惠兰、达式惠兰等的茎尖培养获得无病毒兰花植株以来 , 多年来经过大量的试验与研究,得出影响原球茎
诱导的原因有: ( 1) 不同外植体间的诱导差异。如以叶尖、根尖、花梗芽等不同外植体来诱导原球茎, 其诱导率有所不同; 即使是同一叶片,采自不同部位的诱导率也不同。( 2) 不同培养基和不同激素种类及配比的影响, 从MS 和KC 培养基上均能诱导出原球茎。由MS 培养基诱导出的原球茎生长迅速, 有利于增殖, 而KC 培养基则有利于芽的分化。供试外植体在无激素空白培养基上均未诱导出原球茎, 在其他培养基上亦存在着诱导差异。最适于叶片培养的搭配是MS+ 6-BA3. 0mg/ L, 适于根尖和茎尖的激素浓度是6-BA0. 5mg/ L。NAA 对蝴蝶兰原球茎的产生无促进作用。( 3) 不同浓度的6-BA和NAA 组合对蝴蝶兰原球茎诱导率的影响。原球茎的诱导不仅取决于6-BA 和NAA 的绝对数量, 而且取决于二者的相对比例。在
6-BA/ NAA 比值最大的条件下, 诱导率处于最低状态; 在6-BA/ NAA 比值最小的条件下, 诱导率也接近最低。当6-BA/NAA 比值接近10∶1 时诱导率较大。
2 培养基与激素
适量的提取物，如在培养基中添加番茄汁、蛋白胨、酵母提取液、水解蛋白、苹果汁、香蕉汁等可促进兰花种子的萌发。附加香蕉泥对原球茎的增殖有明显的促进作用。香蕉匀浆物在KC培养基和White培养基是最适合原球茎增殖的添加物。水解酪蛋白对于原球茎的增殖有明显的促进作用。81。另外，胰蛋A胨、酵母提取物和KC培养基一起使用对原球茎的增殖有促进作用，但酵母提取物在White培养基上使用，对原球茎的增殖却有抑制作用用于兰花组织培养的培养基种类繁多, 常用培养基有: KC、MS、VW、BM及改良型。周俊辉等在对蝴蝶兰的研究中表明: 改良KC 对原球茎的增殖效果最好, 其次为1 /3MS, 原球茎增殖应以较低的无机盐浓度为好; 并且在培养中, 添加一定浓度( 2～3 g·L- 1) 活性炭时, 对原球茎的增殖有促进作用。何松林指出: 蝴蝶兰在生根过程中对矿物质盐的需求量较小, 而在长苗过程中则对微量元素和有机成分的需求量稍高一些。目前常使用的外源激素主要是生长素类( 如
IAA、2, 4- D 和NAA) 和细胞分裂素类( 如BA、ZT 和KT) 。一种认为激素能够诱导胚发育形成原球茎, 还可大大加快个体发生和形态建成的速度; 在原球茎的诱导阶段, 加生长素
如NAA 和细胞分裂素对原球茎的诱导有利, 加细胞分裂素对原球茎的分化有促进作用; 生
根诱导时只需生长素即可。Seeni 等提出, BA 在兰花组织培养中对叶诱导与芽增殖起着重要作用。何子育等则认为在增殖生根与壮苗阶段不需加任何激素。
组织培养中常用的有机添加物如椰子汁、香蕉和马铃薯等是一类含有氨基酸、激素和酶等有机成分较为复杂的天然复合物。多数研究证明, 它们对细胞和组织的增殖与分化有明显的促进作用。在对蝴蝶兰的叶片诱导原球茎的研究中发现: 添加18%的椰子汁时, 每个外植体叶块上产生的原球茎颗粒既多又健壮。Mao 等研究了建兰原球茎的增殖和分化的影响因素, 发现在液体培养基中添加活性炭、苹果汁、香蕉汁和椰子汁进行悬浮培养, 建兰原球茎的生长和发育状态可达到最佳。蔗糖作为培养基的能源物质和渗透调节剂, 对原球茎的生长影响较大, 不同浓度对兰花组培的作用不同。2%的蔗糖有利于兰属原球茎的生长; 2%～3%的蔗糖促进芽的形成, 而根的分化和生长则以5%蔗糖最适合。活性炭可减少污染, 抑制离子的吸收和防止褐变, 从而利于根系的形成; 多效唑对蝴蝶兰的生根和壮苗也有明显促进作用。pH 值影响细胞的透性、代谢和培养物生长、分化。从一些试验资料来看, 原球茎在pH 值5.0～
5.4 的环境中生长
最好, 过酸或近中性的环境都不适合。
3 培养方式
兰花的培养方式包括固体培养、半固体培养和液体培养3 种。固液相培养基对不同种属兰花的效果不同。陈振光对蕙兰属的研究中发现, 应先将外植体接种在固体培养基上, 诱导原球茎的形成, 然后在液体培养基中震荡培养, 可快速繁殖原球茎。毛碧增等对建兰的研究中发现, 用液体悬浮培养可提高原球茎的增殖率。杨玉珍等在对大花蕙兰的研究中发现, 半固体培养基( 减少琼脂用量) 最佳, 原球茎增殖最大, 色泽深绿, 健壮。吕永杰等认为, 在兰花的整个生产过程中, 可以采用3 种培养方式相结合的方法, 即利用半固体培养或液体培养进行原球茎增殖, 利用固体培养分化和生根, 增加繁殖系数, 降低污染, 减少成本, 利于大规模生产。
4 培养条件
对蝴蝶兰的快繁中研究发现, 在蝴蝶兰的组培过程中, 不同光照时间对愈伤组织的形成所需的时间、数量、原球茎的大小、愈伤组织的颜色都有很大的影响。连续24 h 光照, 可以在短期内得到大量的直径较大的原球茎状体。在蝴蝶兰叶片诱导培养中, 光照为其他培养基反射过来的弱散射光, 光照时间为每天12 h。适当剂量的紫外光照射对兰花原球茎的增殖与分化有促进作用, 过高剂量的紫外光照射则抑制原球茎的增殖与分化。在蝴蝶兰的组培过程中, 温度过低, 形成原球茎状体所需时间较长, 生长较慢; 温度较高, 容易造成污染且易褐变, 所以选择合适的培养温度是必须的。通过研究认为, 对蝴蝶兰试管苗的培养温度为25℃
参考文献：
兰花组织培养研究进展
安运华
( 长江大学园艺园林学院, 湖北荆州434025)
兰花组织培养和分子生物学研究进展
中国分类号：Q943．1 文献标识码：B 文章编号：1008—9632(2010)02—0076—04
蝴蝶兰的组织培养和遗传转化体系的研究进展
满若君1, 2, 李杨瑞2, 3* , 卜朝阳3
( 1. 广西大学农学院, 南宁530004; 2. 广西作物遗传改良生物技术重点实验室, 南宁530007;
3. 广西农业科学院, 南宁530007)
兰花的种植方法
兰花的种植方法 兰花喜湿润,忌渍涝.盆土水分过大,易烂根和叶片发黄.浇水要见干见湿,冬季少水,最好用雨水和河水,用自来水要存放数日,浇水不要弄到叶片上.一般生长期每月施一次腐熟稀薄豆饼水,平时不施. 兰花性喜凉爽,忌高温,入冬放入室内注意通风,温度最好在10度左右,春季室外达10度时移到室外. 兰花喜阴,忌阳光直射,耐阴以墨兰最甚,秋兰次之,春兰夏兰需阳光略多一点,因此要根据品种严格控制光照量. 养兰花是一个较为复杂的过程,单靠简单述说很难凑效,需要阅读大量有关养殖和管理兰花的资料,掌握许多知识,并且通过实践,才能取得成效. 一、对栽培基质的要求: 野生兰花生长在背阴、通风、不积水的山地，因此栽培基质要求:通气、松软、漏水性好，呈微酸性。兰花唷?缁揭碎石土、红土砖碎石，也有人用带丛生杂草的土壤经火烤后成碎烤土，以上几种栽培基质都附合通气、透水、微酸等特点，且磷、钾肥丰富，可作兰花栽培基质，但要适当补充氮肥。近几年随着港台及国外养兰选进方法的传入，室内养兰得到较大推广，因此，采用水苔、珍珠岩、火山喷积石、颗粒砖块、颗粒仙土、颗粒泥炭等成为理想栽培的基质。它们的最大优点是便于水份管理和通气。 二、对温度的要求: 温度是生物生存发展的命脉。有生命的兰花，它的生存和发展与温度息息相关。温度适宜，它就生长繁茂;温度过高，它就生长停滞，甚至因闷热伤害而夭折;温度低了，它就进人休眠状态，过低了，它就会因为受到冻害而枯死。 (一) 兰花生根、发芽和正常生长的最佳生长温度为20,28度;2O?以下，虽可生长，但生长缓慢;28?以上，虽生长迅速，但也容易因气温过高而被迫进人休眠状
态。因此，每当气温高于32?时，则应采取加大遮阳密度、增加通风量和提高空气湿度的措施，以保证兰花有高速生长的生态条件。 (二)休眠的适温;兰花休眠期适温为昼温10,16?，夜温5,1O?。但春兰休眠期的适温应控制在10?以下、3?以上，才能度过春化阶段，保证正常开花。休眠期气温过高，虽可打破休眠，提高发芽率，增加发芽次数，但有容易早衰和缩短寿命的弊端。 (三)兰花可耐受的最低温度，春兰为-4?，建兰为-2?，墨兰为2?。 根据我国的地理位置，全国各地很难有全年理想的温度，各地的气温也是不一致的，因此，要根据兰花对温度的需求，应进行必要的人工调节，创造适合兰花生长、休眠的温度。当养兰场所出现不利兰花生长温度时，碰到温度较低时，就要人工加温。兰场较小的话，可用空调、电热器、暖气等加温。如兰场较大，可安装暖气设备，用暖气来加温。在夏天，兰场的温度在30多度时，注意通风一般问题也不大，兰花也能抗一定的高。碰到温度特别高，那就要采取人工降温措施，可用空调、电扇、排风扇、地上喷水、面盆里放水、冷气等等来降温。 三、对湿度的要求: 兰花原生长在深山野林中，周围环境湿度较大，一般为75,一90,之间。兰花70%时生长良好，过干或过湿都易引发兰病。因此，室内外在空气相对湿度60-- 栽培要创造一个适于兰花生长的逐部湿度小气候。兰花下山之后(尤其是种在阳台或房屋平台上，如不采取加湿措施，棚内湿度多低于60,。因此要因地制宜，采取有效方法，提高养兰场所的湿度，以达到合适兰花生长的温度要求，即75,左右，接近兰花原生地的环境湿度。这样兰花生长良好，叶色翠绿，有生气，发芽率高，叶面不起黑点，叶尾不焦黄，开花也多。
中国兰花杂交育种的研究
摘要杂交育种是兰花育种最重要的方法，利用该方法已培育出10万多个洋兰新品种。中国兰花是兰花中重要的观赏种类，但中国兰花的杂交育种工作还刚刚起步。本文根据兰花杂交育种工作环节，结合自己的研究工作，提出了兰花杂交育种程序，并对各工作环节的内容进行了论述。 关键词中国兰花；杂交育种：程序 兰花是兰科植物的总称，它以其优美的花型、丰富的花色、清幽的香气和高尚的品格，深受各国人们的喜爱，在世界花卉中占有十分重要的地位。在兰花业形成和发展的过程中，新品种的选育起着最重要的作用，比如新加坡兰花业的兴旺发达和我国台湾蝴蝶兰产业化的兴起都与其新品种选育工作的进步密不可分。 兰花新品种的选育方法有多种，目前杂交育种是最重要的育种方法。到1995年，在《兰花评论》上登录的杂交种（包括杂交属和集体杂种）已超过10万个（Hunt，1995）。目前每年全世界用杂交方法培育的兰花品种超过3000个。 兰花在我国已有1000多年的栽培历史，栽培的种类以中国兰花为主，在长期栽培过程中，也选育出一些优良品种，这些品种都是利用自然变异用选择育种的方法育成的，已命名的兰花品种在500种以上（陈心启、吉占和，1995）。近年来，不少单位已开展兰花杂交育种工作，有些单位（如四川农科院）也选育出了一些兰花新品种，但总的来说，中国兰花杂交育种工作还刚刚起步，处于探索阶段。本文结合近几年的科研结果，系统地介绍兰花杂交育种方面的知识，以推动我国兰花杂交育种工作的开展。 一、兰花杂交育种程序 兰花杂交育种和其它花卉一样，其育种程序大致包括以下几个步骤：确定育种目标，选配杂交亲本，配制杂交组合，对杂种后代进行选择，品种登录和新品种的繁育和推广。但兰花和其它花卉不同的是，其杂交种子很小，没有胚乳，在自然条件下很难萌发，因此需要通过共生萌发或试管培养的手段培养杂交种子，才能获得杂种植株。兰花的杂交育种程序见图1。 确定育种目标 l 选配杂交亲本 l 配制杂交组合 l 培养杂交种子 1 杂种后代的选择 l 优良株系的繁殖和鉴定 1 品种命名和登录
兰花的生长要求
兰花的生长要求 一、对栽培基质的要求： 野生兰花生长在背阴、通风、不积水的山地，因此栽培基质要求：通气、松软、漏水性好，呈微酸性。兰花唷⒎缁揭碎石土、红土砖碎石，也有人用带丛生杂草的土壤经火烤后成碎烤土，以上几种栽培基质都附合通气、透水、微酸等特点，且磷、钾肥丰富，可作兰花栽培基质，但要适当补充氮肥。近几年随着港台及国外养兰选进方法的传入，室内养兰得到较大推广，因此，采用水苔、珍珠岩、火山喷积石、颗粒砖块、颗粒仙土、颗粒泥炭等成为理想栽培的基质。它们的最大优点是便于水份管理和通气?/FONT> 二、对温度的要求： 温度是生物生存发展的命脉。有生命的兰花，它的生存和发展与温度息息相关。温度适宜，它就生长繁茂；温度过高，它就生长停滞，甚至因闷热伤害而夭折；温度低了，它就进人休眠状态，过低了，它就会因为受到冻害而枯死（一）兰花生根、发芽和正常生长的最佳生长温度为20～28度；2O℃以下，虽可生长，但生长缓慢；28℃以上，虽生长迅速，但也容易因气温过高而被迫进人休眠状态。因此，每当气温高于32℃时，则应采取加大遮阳密度、增加通
风量和提高空气湿度的措施，以保证兰花有高速生长的生态条件。 （二）休眠的适温；兰花休眠期适温为昼温10～16℃，夜温5～1O℃。但春兰休眠期的适温应控制在10℃以下、3℃以上，才能度过春化阶段，保证正常开花。休眠期气温过高，虽可打破休眠，提高发芽率，增加发芽次数，但有容易早衰和缩短寿命的弊端。 （三）兰花可耐受的最低温度，春兰为-4℃，建兰为-2℃，墨兰为2℃。 根据我国的地理位置，全国各地很难有全年理想的温度，各地的气温也是不一致的，因此，要根据兰花对温度的需求，应进行必要的人工调节，创造适合兰花生长、休眠的温度。当养兰场所出现不利兰花生长温度时，碰到温度较低时，就要人工加温。兰场较小的话，可用空调、电热器、暖气等加温。如兰场较大，可安装暖气设备，用暖气来加温。在夏天，兰场的温度在30多度时，注意通风一般问题也不大，兰花也能抗一定的高。碰到温度特别高，那就要采取人工降温措施，可用空调、电扇、排风扇、地上喷水、面盆里放水、冷气等等来降温。 三、对湿度的要求： 兰花原生长在深山野林中，周围环境湿度较大，一般为75％一90％之间。兰花在空气相对湿度60--70%时生长良好，
兰花组织培养技术
兰花组织培养技术 摘要：在适宜的条件下，将兰花植株的外植体在无菌环境中应用人工培养基，通过外植体的采集与处理、培养基的制作、外植体的接种、继代增殖以及驯化移栽等操作技术，可在短期内获得大量幼小的无病毒植株，从而达到增殖扩繁的目的。组织培养技术是经济有效快速繁殖优良品种的方法，也是产生脱毒苗的重要途径。 关键词：组织培养兰花外植体试管苗 花属兰科多年生草本植物，中国兰花为兰科属中的地生兰。其香味怡人，花色淡雅，品种丰富，素有“花中君子”之称。具有很强的观赏价值和经济价值，深受人们的喜爱。此外，其也是目前世界上栽培较广的切花材料之一，兰花的切花生产，需要大批量的种苗，要获得优质高产，兰花种苗必须具备种性一致，生长齐一，长势旺盛的特点。在种苗生产上运用最广泛的是组培快繁和分株。生产实践证明，运用组织培养快繁技术生产种苗，其长势旺盛，品种复壮，抗病性强，切花质量好，对加快优良品种的培育，挽救珍惜濒危种类等起到十分重要的作用。 兰花在植物分类学上属于单子叶植物中的一个科，为多年生草本植物，附生、地生或腐生。兰花根呈圆柱状，属肉质组织，茎很短，高度约为2～3cm，兰叶大多叶边全缘，有的略有锯齿。其花属于不整齐花范畴，总状花序。兰属植物的果实为蒴果，呈三角或六角形，俗称“兰荪“。 一、无菌培养物的建立 （一）培养容器的洗涤及培养基的制作 1.培养容器的洗涤 容器的洗涤是否干净直接影响组织培养的成败，为保证培养材料在瓶内生长健壮，在培养前期一定要对容器进行彻底的洗涤与灭菌。以达到“瓶壁锃亮、水膜均匀，不挂水珠”为标准。洗涤时用洗衣粉水洗刷，再用清水冲洗3～4次，干燥后备用。 2.培养基的制作 培养基是植物组织培养的“血液”，血液的成分及其供应状况直接关系到外植体的生长于分化。组培快繁中最常用的培养基主要是MS培养基。母液要根据药剂的化学性质分别配置，一般配成大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素类母液。其配置方法是先进行大量元素的配置，称量时应注意多余的药品不能回放在瓶中，应做其它处理。电子天平在使用时先对其进行调平，然后进行微量元素母液、有机物母液的配制。 当MS母液配好以后，则可进行培养基的制作，继之对琼脂和蔗糖进行称取、溶解，琼脂呈现半透明状时将糖加入容器中溶解，再加入事先吸取好的各类母液混合均匀后转入1L容量瓶中对其进行定容，然后根据培养基的要求对PH进行调整（PH值控制在5.6～5.8测定不得少于3～4次）。进行分装时，一般以培养瓶的1/4～1/3为宜，分装后立即进行灭菌。
植物组织培养研究进展
植物组织培养研究进展 摘要 植物组织培养技术作为一种科研手段,发展异常迅猛。从组织培养的原理、培养过程中遇到的问题以及前景和展望这3方面综述了我国近几年植物组织培养的新研究。 关键词: 组织培养；存在问题；措施；发展 20 世纪后半叶，植物组织培养发展十分迅速，利用组织培养，不仅可以生产大量的优良无性系，并可获得人类需要的多种代谢物质；细胞融合可打破种属间的界限，克服远缘杂交不亲和性障碍，在植物新品种的培育和种性的改良中有着巨大的潜力；还可获得单倍体、三倍体及其它多倍体、非整倍体；组织培养的植物细胞也成为在细胞水平上分析研究的理想材料[1]。因此，植物组织培养广泛应用于植物科学的各个分支，如植物学、植物生理学、遗传学、育种学、栽培学、胚胎学、解剖学、病理学等，并广泛应用在农业、林业、医药业等多种行业，产生了巨大的经济效益和社会效益，被认为是一项很有潜力的高新技术。 1组织培养的基本原理 1.1植物组织培养的概念 植物组织培养技术是指在无菌条件下，将离体的植物器官(如根尖、茎尖、叶、花、未成熟的果实、种子等)、组织(如形成层、花药组织、胚乳、皮层等)、细胞(如体细胞、生殖细胞等)、胚胎(如成熟和未成熟的胚)、原生质体培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱发产生愈伤组织或潜伏芽等，或长成完整的植株的技术[2]。 1.2植物组织培养的依据 植物组织培养的依据是植物细胞“全能性”及植物的“再生作用”。1902年，德国著名植物学家GHaberlanclt根据细胞学理论[3]，大胆地提出了高等植物的器官和组织可以不断分割，直到单个细胞，即植物体细胞在适当的条件下具有不断分裂和繁殖，发育成完整植株的潜力的观点。1943年，美国人White在烟草愈伤组织培养中, 偶然发现形成一个芽, 证实了GHaberlanclt的论点[4]。在许多科学家的努力下，植物组织培养技术得到了迅速发展，其理论和方法趋于完善和成熟，并广泛应用产生了巨大的经济效益和社会效益。 1.3培养基的选择 组织培养的基础培养基有MT、MS、SH、White等[5]。由于不同植物所需要的生长条件有所不同，会对培养基做一些不同的处理，一般采用较多的是MS。组织培养采用固体培养基的较多，但只有在植物周围的营养物和激素被吸收，如果其他残留的培养基也能被利用，对工厂化生产的成本减少方面有很大的帮助。董雁等[6]利用回收转换后废弃的继代培养基，加入原继代培养基30 %浓度母液的培养基，培养效果与原继代培养基的基本相同，说明继代培养基再利用是可行的，这为规模化组培育苗开辟了新的途径。杜勤[7]等在无外源激素条件下，研究液体和固体培养基对黄瓜子叶培养器官分化的影响，结果用液体培养基直接诱导花芽率更高，分化高峰期出现的时间也更早，说明液体培养基对外植体的生长更有利，只是固体培养基更易操作而被较广泛应用。 2植物组织培养过程中存在的问题 2.1 污染问题 组织培养过程中的污染包括内因污染和外因污染。内因污染指由于外植体的表面或者内部带菌而引起的污染；外因污染则是主要由环境污染和操作不当引起，是指在接种或培养过程中病菌入侵，例如培养基、接种工具和接种室消毒不严格以及操作不规范等[8]。 针对植物组织培养中污染产生的原因，应从以下2个方而着手来控制污染。一是控制外植体自身带菌，外植体的表而带菌可以经过一系列的杀菌处理来减少；而外植体的内部带菌是不
兰花育种计划书
杂交育种报告 题目：兰花杂交育种计划书指导老师：周开兵 班级：2012级花卉一班 学号：20120203310032 姓名：于济生
兰花杂交育种计划书 一、兰花杂交育种的目标 通过市场分析和查阅资料发现，蕙兰的花型较大，色泽淡雅，花瓣圆阔丰满，多有香气，且花期长。大一品是蕙兰中八大名品之一，具有高雅的幽香，绝佳的梅瓣，优美的叶态，较高的观赏性等。但是其花芽分化能力较弱，花朵较少，花期较短，经过长期栽培表现出抗性较差，栽培困难的缺点。薛利蝴蝶兰则开花数目极多，单株可超过百朵，且抗性表现较好。本次杂交用薛利蝴蝶兰和大一品蕙兰杂交，希望可以培育出开花数目多，花色淡雅，花期长，适应性强且有香气的新品种。 二、资源收集 通过对育种目标的分析，我选择薛利蝴蝶兰和大一品蕙兰做育种亲本材料。 蕙兰（Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍｆａｂｅｒｉ）又称九子兰、九节兰、夏兰。为兰科兰属的地生种。假鳞茎不显著，根粗而长，有分支。茎直立，高约３０～８０ｃｍ，叶５～９枚，长２５～８０ｃｍ，宽０．６～１．４ｃｍ。直立性强，基部常对褶，横切面呈Ｖ形，边缘有较粗的锯齿。花常为浅黄绿色，有深紫红色的脉纹和斑点；花通常香气浓郁。一茎多花，常６～１２朵，萼片长圆披针形或带状披针形；花瓣稍小于萼片；唇瓣３裂不明显，中裂片长椭圆形，有许多透明小乳突状毛，端反卷，边缘有短缘毛，白色，有紫红色斑点［２］。花期３～５月。蕙兰原分布于秦岭以南、南岭以北及西南广大地区，是
比较耐寒的兰花品种之一。 蝴蝶兰（Phalaenopsis aphrodite Rchb. F.）为兰科蝴蝶兰属，原产于亚热带雨林地区，为附生性兰花。蝴蝶兰白色粗大的气根露在叶片周围，除了具有吸收空气中养分的作用外，还有生长和光合作用。新春时节，蝴蝶兰植株从叶腋中抽出长长的花梗，并且开出形如蝴蝶飞舞般的花朵，深受花迷们的青睐，素有“洋兰王后”之称。分布在泰国、菲律宾、马来西亚、印度尼西亚，及中国台湾。 茎很短，常被叶鞘所包。叶片稍肉质，常3-4枚或更多，上面绿色，背面紫色，椭圆形，长圆形或镰刀状长圆形，长10-20厘米，宽3-6厘米，先端锐尖或钝，基部楔形或有时歪斜，具短而宽的鞘。 花序侧生于茎的基部，长达50厘米，不分枝或有时分枝；花序柄绿色，粗4-5毫米，被数枚鳞片状鞘；花序轴紫绿色，多少回折状，常具数朵由基部向顶端逐朵开放的花；花苞片卵状三角形，长3-5毫米；花梗连同子房绿色，纤细，长2.5-4.5厘米；花白色，美丽，花期长；中萼片近椭圆形，长2.5-3厘米，宽1.4-1.7厘米，先端钝，基部稍收狭，具网状脉；侧萼片歪卵形，长2.6-3.5厘米，宽1.4-2.2厘米，先端钝，基部收狭并贴生在蕊柱足上，具网状脉；花瓣菱状圆形，长2.7-3.4厘米，宽2.4-3.8厘米，先端圆形，基部收狭呈短爪，具网状脉；唇瓣3裂，基部具长约7-9毫米的爪；侧裂片直立，倒卵形，长2厘米，先端圆形或锐尖，基部收狭，具红色斑点或细条纹，在两侧裂片之间和中裂片基部相交处具1枚黄色肉突；中裂片似菱形，长1.5-2.8厘米，宽1.4-1.7厘米，先端渐狭并且具2条长8-18
兰花常见病(图解)
兰花常见病（图解）图1：得金奖的程梅 图2：生理性焦尖症状 图3：褐斑病症状 图4：炭疽病症状 图5：黑斑病症状 图6：叶枯病症状 图7：枯尖病症状 图8：叶枯病叶上又患黑斑病 图9：炭疽病、黑斑病同时危害 图10：病叶交界处的黑色横纹
图11：生理性焦尖、褐斑病、炭疽病、枯尖病、叶枯病和黑斑病 图12：剪除病叶 二零零六年，中国首届蕙兰博览会在南京玄武湖举办，笔者送展的大叠彩和程梅双双获得金奖，其中程梅获金奖后在《中国兰花网》引发了一场《这盆程梅该不该得金奖》的争论。争论的主要焦点是：一部分兰友认为，这盆程梅是原生种，兰草茁壮，花品好，该得金奖；还有一部分兰友认为这盆程梅花品虽好，兰草虽茁壮，但兰草焦尖，不该得金奖。（图1：得金奖的程梅）我过去一直认为，兰花（尤其是蕙兰）在自然环境下养植，兰叶出现一些焦尖现象是不足为奇的，因而一直未予重视。今年春天，山东一位兰友到我苑选购兰草，执意要一盆一点不焦尖的解佩梅。这场争论和山东兰友购兰一事对我触动很大，它告诉我：兰草长得虽然壮大，但是如果焦头，仍然不能算是茁壮好草。这件事也促使我静下心来研究、思考、探索解决兰叶的焦尖问题。 （一）兰叶焦尖的主要原因 引起兰叶焦尖的原因很多，有的是自然因素引起的，有的是管理不当造成的，也有的是病害所致。其中病害引起的焦尖危害最严重。 1、自然因素引起的焦尖
（1）、湿度太低。兰叶焦尖与水分供应密切相关，尤其是蕙兰叶片较长，如水分供应不上势必引起兰叶焦尖。兰叶的水分供应一是靠根部输送，二是从空气中吸收。因此兰花的焦尖的原因，除盆土过分干燥外，与空气湿度过低有很大关系。空气中如果湿度太低，过于干燥，而引起兰株蒸腾作用加强，兰叶水分供需失衡致使兰叶焦尖。一般说来室内养兰空气湿度较大，兰叶焦尖情况不严重，而室外养兰由于空气湿度难以控制，兰叶焦尖的情况就要严重些。 （2）、气候骤变。以2007年为例，人们刚将兰花从湿度较高的兰房搬出，即遇到了数十年一遇的干旱，河流干涸见底，空气湿度极底，因而兰花焦尖情况较为严重。梅雨季节来得虽晚，但时间却很长，达50天左右，久不见阳的兰叶既薄又软，刚出梅雨季节随即遇上高温烈日，于是焦尖情况愈加严重。笔者走访了几个室外兰苑，蕙兰的焦尖情况都比较严重。 （3）、空气污染。兰苑临近污水区、工业区，或有人在兰苑附近焚烧有害物质，致使空气中弥漫了有害气体危害兰叶而引起焦尖。 2、管理不当引起的焦尖 ⑴、光照过强。夏季疏于遮荫或遮荫力度不够，致使光照太强，造成兰叶焦尖。 ⑵、长期阴养。兰花在生长过程中遮荫过度，光照过弱，长
蝴蝶兰组织培养研究进展_综述_
2006,35(1):71-74. Subtropical Plant Science 蝴蝶兰组织培养研究进展(综述) 郑玉忠，张振霞，陈泽华 (韩山师范学院生物系, 广东潮州 521041) 摘要：本文从蝴蝶兰外植体的选择、不同基本培养基、激素及添加物对其增殖与分化的影响，外植体褐变的防治以及生根壮苗方法等，概述蝴蝶兰组培快繁方面的研究进展，为其组培技术研究提供参考。 关键词：蝴蝶兰；组织培养；原球茎 中图分类号：Q943.1；S682.31 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2006)01-0071-04 Progress in Tissue Culture of Phalaenopsis spp. ZHENG Yu-zhong, ZHANG Zhen-xia, CHEN Ze-hua （Department of Biology, Hanshan Teachers College, Chaozhou 521041, Guangdong China） Abstract: The research progress of tissue culture of Phalaenopsis, including the effects of explants sources, culture mediums, hormones and nutrition compositions on multiplication and differentiation of protocorm-like body, the inhibition on browning of explants and methods of rooting and seedling strengthening before transplanting, are reviewed. Some reference materials are also provided for further study in tissue culture of phalaenopsis. Key words:Phalaenopsis spp.; tissue culture; protocorm-like body 蝴蝶兰（Phalaenopsis spp.）属热带或亚热带的兰科植物，其花形奇特，姿态优雅，色彩鲜艳，花期长久，素有“兰花皇后”之美誉，观赏价值极高，深受人们的喜爱，国内外市场的需求量越来越大。蝴蝶兰的传统繁殖方式为分株繁殖，繁殖系数低，速度慢，不能满足日益增长的市场需求。因此，研究和开发蝴蝶兰具有重要的意义。 组织培养是蝴蝶兰快速繁殖的有效途径，主要通过两条途径：一是利用种子无菌发芽，二是从离体器官诱导产生原球茎，通过原球茎的增殖培养，得到大量幼苗[1]。早在1949年，Potor[2]利用无菌培养技术成功地促使蝴蝶兰花梗上的休眠芽发育成完整植株，该方法经过其他研究人员改进后，曾一度成为蝴蝶兰的主要无性繁殖方式。1974年，Intuwong等[3]利用蝴蝶兰茎尖诱导产生了原球茎状体，再由原球茎分化成植株，为实现蝴蝶兰工厂化生产奠定了基础。原球茎是一类呈珠粒状的幼嫩器官，在兰科植物中多以这种器官发育、增殖和分化。 蝴蝶兰的组织培养中有几个关键的时期：原球茎的诱导、原球茎的继代增殖、壮苗的培育。根据这几个重要的时期及其组织培养的外界条件，国内外研究人员对蝴蝶兰组织培养进行了广泛的研究，并取得了一定的成效。本文就近年来蝴蝶兰组培快繁技术的研究现状进行综述，包括外植体的选择，不同基本培养基、激素、添加物对其增殖与分化的影响，外植体褐变的防治，以及生根壮苗的方法等。同时展望未来的发展趋势，为该研究领域今后的发展提供有益的信息。 1 外植体的选择 诱导蝴蝶兰原球茎采用的外植体主要有根段[4]、花梗苗根尖[5]、花梗腋芽[6]、茎尖[7]、叶片[8-10]、胚 收稿日期：2005-08-03 基金项目：韩山师范学院青年基金项目（QN200503）资助 作者简介：郑玉忠(1977-), 男, 广东潮阳人, 硕士, 从事植物生物技术研究。 注：张振霞为通讯作者。
植物组织培养的研究进展和发展趋势
植物组织培养的研究进展和发展趋势 （甘肃农业大学生命科学技术学院植物生物技术，甘肃兰州730070） 摘要:植物组织培养是根据植物细胞具有全能性的原理而发展起来的一门生物技术。本文简要概述了植物组织培养的概念及研究进展，较全面的综述了植物组织培养新技术以及在快繁脱毒、育种、种质资源保存、次生代谢物提取、基因转化等方面的研究现状，最后展望了植物组织培养的发展趋势。 关键词：组织培养；研究进展；发展趋势 Research Progress in Plant Tissue Culture and trends (College of life science and technology of plant biotechnology of Gansu Agricultural University,gansulanzhou 730070) Abstract: Plant tissue culture plant cells are totipotent under the principle and developed a biotechnology. This article provides a brief overview of the concepts and plant tissue culture research, a more comprehensive overview of plant tissue culture propagation of new technologies as well as in detoxification, breeding, germplasm conservation, extraction of secondary metabolites, and other aspects of gene transfer research status , Finally, the future trends in plant tissue culture. Key words: organizational culture; research status; trends 引言 植物组织培养是20世纪之初，以植物细胞全能性为理论基础发展起来的一门新兴技术，是指在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体，在人工配制的环境里培养成完整的植株，也称离体培养或植物克隆。自1902年德国科学家Haberlandt提出植物细胞具有全能性理论, 到1934 年美国White 等用番茄根进行离体培养证实这一观点以来,植物离体培养技术在基础理论和应用研究，已广泛应用到植物生理学、病理学、药学、遗传学、育种以及生物化学 等各个研究领域, 成为生物学科中的重要研究技术和手段之一[1]。近年来，随着 科学技术的不断发展，植物组织培养新方法和新技术不断涌现，研究重点也由器官、细胞水平向分子、基因方向转移。21世纪，生物技术是最有生命力的一门学科，而植物组织培养作为一种基本的试验技术和基础的研究手段，被认为具有巨大的潜力，现就植物组织培养技术研究进展做一简单综述。 1在植物育种上的应用 植物组织培养技术对培养有粮作物品种开辟了全新的途径。目前，国内外已
兰花试管开花
目前全世界兰科（Orchidaceae）植物约有800 属，25000~30000 种。在中国，习惯把兰花分为国兰和洋兰。其中，国兰主要有春兰（Cymbidium goeringii）、蕙兰（Cymbidium faberi）、建兰（Cymbidium ensifolium）、寒兰（Cymbidium Kanran）、墨兰（Cymbidium sinensis）五大类；与之相对，洋兰则主要有：卡特兰属（Cattleya）、蝴蝶兰属（Phalaenopsis）、石斛兰属（Dendrobiun）、文心兰属（Oncidium）、万代兰属（Vanda），拖鞋兰属（Paphiopedilum）等[1]。花的形成是一个高度复杂的生物学过程，植物生理学和遗传学的研究已表明花的形成是高等植物所特有的一种生理现象，受到许多因子的调控[2]。而采用试管开花的技术，对于弄清各因子对花形成的作用具有一些显著的优点。目前，试管开花的研究主要围绕2 个方面：开花诱导和成花决定的表达。开花诱导是通过控制培养条件和培养基组成，诱导处于营养生长期的试管苗开花。成花决定的表达是从处于生殖生长的植株上采取花序、花柄、苞叶等作外植体，研究外部因子对花芽再生的影响[3]。在兰花离体培养中，常有试管开花现象的报道；离体培养开花系统，是研究兰花花的分化和发育的理想系统，可以用来探明兰花从营养生长向生殖生长的转变机制。通过研究各种因素对兰花试管开花的影响，进而阐明其调控机理，这在理论和应用上都具有重要的意义。 1 兰科植物试管开花概述 最早进行兰科植物试管开花研究的是法国的Julien Costantin[4]，他发现兰花在离体培养条件下缺少 菌根可以促进开花。利用激素调控兰花试管开花方面，一直是研究的突破口，Goh C J[5]在研究单茎型杂种兰花整体植株花芽诱导和发育的调节作用时，发现了石斛兰整体植株的花芽发端，而且通过添加6-BA还可以促使花芽发育成熟并开花。冯莹等[6]在研究适宜春石斛开花的培养基中同样认为6-BA 有促进花芽的诱导，但是不能正常开放。随后李璐等[7-8]对春石斛试管开花进一步研究证实了冯莹的观点，并认为N、P、K 比例、NH+-N：NO3--N、TDZ、PP333、椰汁对春石斛开花有显著影响；而且在铁皮石斛成花诱导率上获得显著提高。这与王再花等[9]的研究结果一致。在光周期途径诱导成花中，Kerbauy G B10]以文心兰为材料进行试管开花试验，结果表明不同的光强和光周期有可能加快其开花进程[。王熊等[11]探讨了素心建兰生长发育及花芽形成规律，并成功诱导出素心建兰的试管开花。Duan J X等[12]在离体条件下诱导了Doriella Tiny （五唇兰属Doritis pulcherrima × Kingiella philippinensis）花芽的形成。随后，陆续有兰科植物试管开花的研究报道出现。目前为止，已成功诱导试管开花的兰科植物有：建兰[11]、寒兰[13-14]、春兰×大花蕙兰杂种[15]、大根兰、蝴蝶兰[16-17]、Doriella Tiny[12]、文心兰[10]、Psygmorchispusilla[18-19]、Epipogium roseum[20]、Cymbidiumniveo-marginatum Mak.[21]、Bulbophyllum auricomum Lindl[22]、Doritaenopsis and Phalaenopsis[23]以及石斛属中的部分品种（如春石斛[7-8,24-25]、铁皮石斛[8,26]、细茎石斛[9]、金钗石斛[27]、霍山石斛[28]、叠鞘石斛[29]、报春石斛[30]、Dendrobium Madame Thong-In[31-32]、Dendrobium Sonia17[33]、Dendrobium Chao Praya Smile[34]、Friederick’s Dendrobium[35]等）。 2 兰科植物试管开花的成花调控 2.1 植物生长调节剂对试管开花的影响 植物生长调节剂是一类由人工合成的具有类似植物激素生理活性的化合物。植物花芽的分化与内源激素水平关系密切，因此可通过施用外源激素解除休眠、促进花芽分化达到提早开花。 2.1.1 细胞分裂素的影响 细胞分裂素具有诱导器官分化的作用。在研究兰科植物试管开花时，通过调节细胞分裂素比例，诱导其花芽形成和开放。Duan J X等[12] 在研究Doriella Tiny ( 五唇兰属Doritispulcherrima×Kingiella philippinensis)的试管开花中，发现6-BA对花芽的形成有重要作用，在VW培养基中通过添加适量的BA 和蔗糖比例，可促进花芽的形成。另外，研究还发现在没有添加6-BA 的H培养基中，花芽能正常开放，而加入了6-BA后，花芽则不能开放；随后，Duan J X[16]在蝴蝶兰的试管开花中也得出类似结论。说明6-BA 可诱导花芽形成，但对其开花起抑制作用。朱国兵等[13]在对寒兰的快繁和试管成花研究中发现，随着6-BA 浓度的提高其花芽的诱导率呈抛物线状变化，当6-BA 浓度为2.0 mg/L 时，且蔗糖浓度为3.5%时，花芽诱导率达最高。冯莹等[6-8]在对春石斛离体开花研究中发现，6-BA必须在高浓度下才可以促进春 石斛顶端花芽发育成熟并开花，但是高浓度6-BA会导致培养基出现不同程度的褐化，从而影响植株的各种代谢活动，间接影响试管苗开花；随后，进一步研究发现TDZ可高频诱导铁皮石斛试管开花；同时对春石
兰花种植心得
兰花种植心得 一.简介 别名幽兰、山兰、芝草、山兰等。 为兰科兰属植物兰花Cymbidium spp.，兰花是我国传统爱好的名花，多行多种栽植。此外，一些兰花还可全草入药。原产于热带、亚热带以及我国华南、台湾地区等。 兰花是多年生草本，按其生态习性的不同，可分为地生兰和气生兰两大类，根为肉质，皮层细胞发达，并与菌类共生形成菌根。茎有花茎和根茎，节间短形成球茎，又称假鳞茎，花芽也在假鳞茎上分化。叶带形，全缘。有平行叶脉，总状花序。我国普遍栽培兰花，属地生兰，按其开花时间可分为：春兰（Cymbidim cirescens L.） 又名草兰，根肉质，粗大圆形白色，叶狭线形，长20～40厘米，叶缘具细脱锯齿，叶脉明显，花茎直立，较叶短，花色为黄绿色，也有近似白色，淡香，花期2～3月。 夏兰（C．faberi Rolfe） 又名蕙兰，九节兰，根肉质，浅黄色，卵形，浅形，比春兰宽而长，直立，总状花序着花5～13朵，花浅黄色，浓香，花期4～5月。 秋兰 又称建兰（C．ensifolium SW．），叶宽线形，长30-50厘米，叶缘光滑，多直立。总状花序，着花6～12朵，花浅绿色，有暗紫色条纹，香味浓烈，花期8～9月。 寒兰（C．kamran Makino） 叶狭而直立，花茎细而直立，着花5-7朵，花小，花色紫，红白\青、黄，有花香，花期冬季至早春。 兰花属兰科，是单子叶植物，为多年生草本。高20一40厘米，根长筒状。叶自茎部簇生，线状披针形，稍具革质，2至3片成一束。兰花是中国传统名花，是一种以香著称的花卉。兰花以它特有的叶、花、香独具四清（气清、色清、神清、韵清），给人以极高洁、清雅的优美形象。古今名人对它品价极高，被喻为花中君子。在古代文人中常把诗文之美喻为“兰章”，把友谊之真喻为“兰交”，把良友喻为“兰客”。 由于地生兰大部分品种原产中国，因此地生兰又称中国兰，并被列为中国十大名花之首。中国兰花主要为春兰、蕙兰、建兰、寒兰、墨兰五大类，有上千种园艺品种。中国文化先师孔子曾说：“芷兰生幽谷，不以无人而不芳，君子修道立德，不为穷困而改节”。他还将夫兰（夫兰：蕙兰和白芷称为一对，合名：蕙芷）称之为“王者之香”这句话流传至今，足以证明中国兰和伞形科白芷在历史文化上所占的地位。 中国兰花从玩赏角度分，一般分为赏花品香的“花兰”和赏叶斑的“艺兰”两大类。“兰花”栽培的要点在于如何使兰株按时盛开、花朵艳丽。“艺兰”的栽培要点则是在于如何使叶片的线艺分明，兰株壮健叶色光泽明亮。只要掌握各自的栽培要点，及时满足其生长所需条件，养兰便可得心应手。 花兰、艺兰特性以赏花为目的的花兰，栽培管理应特别注意各种养分的供应，才能使其花繁叶茂，而赏叶类的艺兰，注重叶艺的变化，栽培管理应注意供应养分不宜过多，但光照要比花兰强，湿度比花兰要少，才有利于叶艺的出现。 兰花对环境条件的要求兰花喜通风、空气湿度高的半荫环境，忌阳光直射和曝晒，在兰棚栽种，兰株才能保持健美。遮光率夏季约在20—40%，生长最适温度为摄氏15—30c。适宜的空气湿度对兰生长有利，相反兰叶容易脱水枯黄：合适的湿度为70—90%，遇过湿天气应注重通风。 兰花栽培用的植料。栽培兰花用的植料，其配方很多，一般就地取材，因地制宜。但原则上都要求植料排水通气性能良好、具有保水保肥能力、显微酸性为佳。一般的塘坭栽兰花，淋水后易成糊状和板结，不利于兰花生长。 二.盆土 兰花系肉质根，与兰菌共生。栽培植料或称基质、培养土，要求疏松肥沃，透气排水。无病虫，无污染，忌发热，忌干燥，忌渍水与盐碱。可作植料的材料．土质类有腐叶土。泥炭土；植物类有锯末、刨花、水苔、树皮、谷壳；无机类有煤渣、砖粒等等。可根据当地资源，选用数种粉碎。进行二合一、三合一，甚至多合一配制．pH值以5．5-6．5为宜。使用前还须日晒，用药物灭菌更好
组培的研究进展及发展趋势
组培的研究进展及发展趋势 植物组织培养是根据植物细胞具有全能性的原理而发展起来的一门生物技术。简要概述了植物组织培养的概念及研究进展，较全面的综述了植物组织培养新技术以及在快繁脱毒、育种、种质资源保存、次生代谢物提取、基因转化等方面的研究现状，最后展望了植物组织培养的发展趋势。 关键词：组织培养；新技术；应用现状；发展趋势 植物组织培养是20世纪之初，以植物细胞全能性为理论基础发展起来的一门新兴技术，是指在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体，在人工配制的环境里培养成完整的植株，也称离体培养或植物克隆。自1902年德国科学家Haberlandt提出植物细胞具有全能性理论, 到1934年美国White 等用番茄根进行离体培养证实这一观点以来,植物离体培养技术在基础理论和应用研究，已广泛应用到植物生理学、病理学、药学、遗传学、育种以及生物化学等各个研究领域, 成为生物学科中的重要研究技术和手段之一。近年来，随着科学技术的不断发展，植物组织培养新方法和新技术不断涌现，研究重点也由器官、细胞水平向分子、基因方向转移。21世纪，生物技术是最有生命力的一门学科，而植物组织培养作为一种基本的试验技术和基础的研究手段，被认为具有巨大的潜力。 一、植物组织培养新技术的研究 随着科学技术的发展和对植物组织培养技术的不断深入研究，一些新的培养方法和技术不断出现，为植物组织培养技术的不断优化和发展提供了新的途径。 1.新型光源的应用 光是植物生长发育必不可少的重要因素之一，光照长短、光质、光周期对植物的生长、形态建成、光合作用、新陈代谢以及基因表达均有调控作用。传统的组织培养光源灯普遍存在寿命短、发热量大且不均以及发光效率不理想等缺点。LED作为植物组织培养光源早在1991年就有栽培试验。研究发现, 光质比例和光照强度可调的LED 光源比通常植物组织培养使用的荧光灯更能有效地促进试管苗的光合作用和生长发育。蒋要卫利用LED作为大花蕙兰组培苗光源的研究发现, LED光源可以显著改善大花惠兰试管苗的生长状况和提高其品质。日本的田中道男等运用阴极荧光灯( CCFL)作为文心兰试管苗光源, 结果表明其地上部干、鲜重和试管苗的高度都有显著提高。另外田中道男等利用SILHOS 作为生菜组织培养光源, 获得了高质量的组织培养苗。目前LED是组织培养中最有效的人工照明光源，而CCFL等新型光源是未来发展的主要方向。 2.开放组织培养技术 传统的植物组织培养属于严格的封闭式培养，因而造成灭菌成本偏高、培养基易污染、外界环境调控难度大等缺点。而开放组织培养新技术是在外加抗菌剂的条件下，使植物组织培养脱离严格无菌的操作环境，在自然开放的有菌环境中进行，恰好弥补了这些不足。赵青华等采用开放式组培技术，在培养基中添加抑菌剂，克服了非灭菌条件下魔芋组织培养污染问题，有效地简化了实验步骤，降低了生产成本。何松林的研究表明在添加抗菌剂的开放式组培中，文心
兰花杂交育种技术
兰花杂交育种技术 长期以来，兰花的育种以自然选种为主，自种子无菌萌发成功后，开展了兰花品种间、种间及属间的杂交育种。选育新品种在附生兰的品种改良上已获得了巨大成功。 据有关记载，人工杂种兰花约在4万种以上，而且还以每年1000种以上的速度增加。仅远缘杂交就已育成由7个属杂交产生的集体杂种。 利用杂交育种，可创造出新的株型、花色、花型、花序排列及分叉性、花朵寿命（切花及盆花）、增强香气、抗病虫性等。 兰花杂交育种程序 确定育种目标 选配杂交亲本 配制杂交组合 培养杂交种子 杂种后代的选择 优良株系的繁殖和鉴定 品种命名和登录 新品种的繁育和推广? 2.2育种目标 育种目标是指要选育的新品种应该具有什么样的性状。它是新品种选育工作的首要环节，是选配杂交亲本和选择杂交方式的主要根据。因此，育种目标是否可行直接关系到杂交育种工作的成败。 兰花的香味，花色、花型、株型、叶部性状、抗性等都是重要的育种目标。 同时，兰花育种的目标也应根据市场需求而定。 2.3亲本选配 亲本选配是兰花杂交育种最重要的环节之一。 亲本选配一般应遵循以下原则： （l）选配的亲本应具有育种目标所需要的优良性状，且遗传传递力强。 （2）杂交双亲在地理上较远，在生态类型上有所不同。
（3）选配的亲本遗传传递力要强。 （4）选择亲本一般配合力要高。 在兰花亲本选配过程中，除了要遵循上述原则外，还应注意以下几点： （l）选择种子易于萌发的品种作亲本，对那些种子萌发比较困难的兰花（如拖鞋兰），尤其需要注意。 （2）亲本应落实到具体的品种，而不是集体杂种。 （3）选择可育的兰花作亲本。 （4）避免选用第一次开花的兰株作亲本。 2.4杂交种子的培养 杂交种子的培养是兰花育种工作最重要的环节之一，它关系到兰花杂交育种工作的效率和成败。中国兰杂交种子培养比洋兰困难，杂交种子萌发需要的时间长，种子萌发率低，植株再生困难。 张志胜等对中国兰花远缘杂交种子培养结果表明：杂交种子萌发的难易随杂交组合的不同有很大差异，墨兰和大花蕙兰的杂交种子萌发容易，种子萌发后形成原球茎，而国兰种间和品种间的杂交种子萌发难，种子萌发后形成根状茎。 兰花杂交育种始于１９世纪５０年代，是以基因型不同的品种进行交配形成杂种，通过培育选择，获得新品种的较为常用、效果较好的途径之一。１８５６年，英国兰花种植者ＪｏｈｎＤｏｍｉｎｙ成功地将一杂交植株培养开花，揭开了兰花杂交育种新篇章［１］，至２００４年在英国皇家园艺学会（ＲＨＳ）上登陆的杂交种已超过１１万个［４］，而收稿日期：２００７－１１－２８基金项目：广东省科技攻关项目（２００７Ａ０２０２００００４－１０）作者简介：张孟锦（１９８０－），男， 研究实习员广东农业科学２００８年第２ 期 １２０ 且每年以１０００种以上的速度增加。目前，常见的洋兰栽培品种几乎全是杂交种，包括了品种间杂交、种间杂交和属间杂交，其中卡特兰（Ｃａｔｔｌｅｙａ）３０９１０个，蝴蝶兰（Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ）２４１２８个，兰属（Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍ）１１５３８个［４］。中国兰花有２０００多年的栽培历史，但其育种起步较晚，品种改良缓慢，直到
兰花的养殖方法和5个注意事项
兰花的养殖方法和5个注意事项 兰花与梅花、水仙、菊花并成为花草四雅，是我国十大名花之一。兰花自古以来被人们认为是“正气的化身”，是人间吉祥、美好食物的象征。想养好一盆兰花也不是很容易的事情，想养兰花的朋友看看吧! 兰花的养殖须知 温度 最佳生长温度是18--30摄氏度，5摄氏度以下，35摄氏度以上生长缓慢，生殖生长期为5--18摄氏度。在冬季则要放在室内。 湿度 兰花在空气相对湿度60--70%时生长良好，过干或过湿都易引发兰病。因此，室外栽培要创造一个适于兰花生长的逐部湿度小气候，室内安装喷雾器和湿度计。 光照 兰花喜阴畏阳,夏天七时前可让阳光直射兰叶，七时后用50%--90%的遮光网遮挡阳光。清明前后可让兰花多晒太阳，促使发根，多发叶芽，白露以后，天气转凉，新草大多长成，亦可多照阳光，促使花蕾饱满，使兰株积蓄更多养分，以利来年生长。
浇水 兰花是喜雨而畏潦，喜润而畏湿。在6-7月当兰花叶芽伸长约1.5厘米时，可施用1-2次稀薄腐熟的液肥(不宜用化肥)。到8-9月再施1-2次腐熟稀薄的液肥。素心种的兰花，可施用1-2次草木灰浸出液，效果非常好。施肥时间在傍晚进行最好，第二天清晨再浇一次清水。 肥料 兰花喜欢清淡，施肥宁淡勿浓。如其他植物一样，氮能促进茎、叶生长茂盛。磷能促进兰根发达，促进繁殖器官的发育健壮，茎叶舒展。镁、硫、铁及其他微量元素能使叶绿、花壮。 兰花生长旺期时要多施肥，休眠期或弱生长期可不施肥。若过度施肥，将烧伤根叶，造成无可挽回的损失。 养兰花的注意事项 1、盆子勿太大——小株栽大盆，植料用量多，容易导致通气不良，浇水也不易控制。若浇水吸水太多，植料不易干燥，细菌侵入引起烂根。 2、兰花要浅植——种植兰株不可太深，否则长期潮湿会腐烂。种植时，将植料填充根部、基部或假球茎必须露出。 3、根部要展开——种植兰花时根部要均匀展开，不可挤压在一起，这样每条根才能接触植料，通气也好。 4、数天不浇水——新种植的兰花，根部可能受伤，伤口涂了杀菌剂，3～5天不浇水，才能达到药效，也能促进新芽新根生长。 5、避免强光照——新种植兰花，都必须避免强光直射，以防脱水，应置于暖和而荫蔽的地方，可以用喷雾来提高空气中的湿度，直到兰花恢复正常生长。 对于养殖兰花还有更为确切的记载，更是形象生动。 养兰三字经 兰养好在植料要栽兰就近找腐殖土烂木屑塘泥块用火烧泥炭土