兽用生物制品概述

兽用生物制品概述

兽用生物制品是根据免疫学原理，利用微生物、寄生虫及其代谢产物或免疫应答产物制备的一类物质。这类物质专供相应疾病的诊断、预防和治疗之用。从狭义上讲，可将用于畜禽疾病的诊断、检疫、治疗和免疫预防的诊断液、疫苗和抗血清统称为兽用生物制品。

一、生物制品简史

自11世纪起，我国就有峨嵋山人用天花病人的痂皮接种儿童鼻内或皮肤划痕以预防天花的记载，以后又相继传到日本和欧洲，这种种痘术被视为生物制品创制及主动免疫的雏型。1976年英国医生詹纳根据种痘术的启示，用牛痘浆或痘痂给人接种预防天花，发明了牛痘疫苗，在英语中也由牛痘（Vaccinia）而延伸为疫苗(Vaccine）。其后，法国免疫学家巴斯德在1881年及其之后的工作中，用理化方法以及生物学方法，减低病原微生物毒力，相继研制成了用减毒株制成的炭疽芽孢苗、连续通过兔体获得的减毒狂犬病疫苗以及减毒禽霍乱和猪丹毒，为免疫学和生物制品学奠定了基础。1889年耶森等从白喉杆菌培养物滤液中分离到白喉菌素，免疫小鼠和家兔后在血清中发现有中和白喉菌素的物质，从而创制了抗毒素血清，用于治疗感染，使之获得被动免疫，这一血清学的发现为以后制备各种被动免疫血清提供了科学依据。贝菲福和科勒在1898年提出制造灭活苗的方法。罗曼在1923年用加热或福尔马林溶液使一些细菌的蛋白毒素（如破伤风毒素）失去毒性，但免疫原性不变，并命名为类毒素，用以免疫动物获得保护。此后，又相继研制出了明矾、氢氧化铝和矿物油等作佐剂，为提高生物制品的免疫效果起到了重要作用。值得一提的是活德菲等人在本世纪30年代用鸡胚增殖鸡痘病毒获得成功，首次成功地在实验室大量增殖病毒，为病毒疫苗的研制奠定了基础。冈德氏1949年又用鸡胚组织培养技术，为生物制品的研制开辟了一个新途径。1975年科勒和密尔斯坦又创造了淋巴细胞杂交瘤技术，从而使单克隆抗体的研制得到蓬勃发展。自20世纪80年代起基因工程技术迅速发展，获得了大量基因重组疫苗和遗传工程疫苗新制品，把生物制品的研制推向了现代高新技术领域。生物制品生产工艺中应用生物发酵法大量培养细菌、细胞培养法大量增殖病毒、真空冷冻干燥技术生产活疫苗等先进技术的应用，使生物制品的生产得到了很大的发展与提高。

我国从1918年起便研制出了鼻疽菌素、牛瘟血清等，开创了我国兽医生物制品的新时代。1930年上海商检局设立了兽医生物制品研究机构，生产出了牛瘟、炭疽、猪瘟及禽霍乱等高免血清及牛痘、狂犬病组织苗等。继后南京中央农业实验所畜牧兽医系、广西家畜保育科、四川家畜保育所、兰州西北防疫处、江西农学院、中央畜牧实验所以及在全国先后建立的以生产抗血清和组织苗为主的血清厂，生产为数不多的抗血清和几种疫苗。到1950年，全国共有9个兽医生物药品厂，年生产生物制品3500余万毫升，1952年组建了国家兽医生物制品监察所，制定出了我国第一部《兽医生物药品制造及检验规程》，及至80年代末，全国已有29个兽医生物制品厂，年产量达90亿毫升以上，从业人员超过万名，截止1993年国家批准的兽医生物制品标准已达138种。

二、兽用生物制品分类

生物制品由于微生物种类、动物种类、制备方法、毒株性状、应用对象等不同而品种繁杂。按其性质、用途和制造方法可分为疫苗、类毒素、诊断制剂、抗血清、微生态制剂等几大类。我们在此只对防制动物疫病的重要生物制品——疫苗进行讨论。

有关疫苗的几个慨念

疫苗：凡具有良好免疫原性的微生物，经繁殖和处理后制成的制品，接种动物后能产生相应免疫力、能预防疾病的一类生物制剂均称为疫苗，包括细菌性疫苗、病毒性疫苗，以及寄生虫疫苗。

灭活疫苗：又称死疫苗，是以含有细菌或病毒的材料利用物理或化学的方法处理，使其丧失感染性和毒性而保持有免疫原性，并结合相应的佐剂，接种动物后能产生自动免疫、预防疫病的一类生物制品。如禽霍乱组织灭活苗，新城疫油乳剂灭活苗等。

弱毒疫苗：又称活疫苗，是微生物的自然强毒株通过物理的、化学的和生物学的方法，连续传代，使其对原宿主动物丧失致病力，或只引起亚临诊感染，但仍保持良好的免疫原性、遗传特性的毒株，用以制备的疫苗，如猪瘟兔化弱毒疫苗、传染性支气管炎弱毒苗等。此外，从自然界筛选的自然弱毒株若同样具有上述遗传特性，也同样可以制备弱毒疫苗。如鸡新城疫Ⅳ系苗、禽霍乱“1010”弱毒菌苗等。

单价疫苗：利用一种微生物菌（毒）株或同一种微生物中的单一血清型菌（毒）株的培养物制备的疫苗。如新城疫I系苗、传染性支气管炎H120弱毒苗、鸡马立克氏病CVI1988苗等。

多价疫苗：用同一种微生物中若干血清型菌（毒）株的增殖培养物制备的疫苗，如鸡马立克氏病多价苗（SB1+HVT）、口蹄疫A、O型鼠化弱毒疫苗等。

多联疫苗：凡由两种或两种以上的不同微生物培养物，按免疫学原理、方法组合而成。接种动物后能产生针对相应疾病的免疫保护，具有减少接种次数、免疫效果确定等优点，是一针防多病的生物制剂。如鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合症三联油乳剂灭活苗等。

同源疫苗：是指利用同种、同型或同源微生物株制备的，而又用于同种类动物预防疾病的疫苗。如猪瘟兔化弱毒疫苗。

异源疫苗：

①用不同种微生物制备的疫苗，接种动物后能使其获得对疫苗中不含有的病原体产生抵抗力，如火鸡疱疹病毒免疫鸡后，能够防制马立克氏病。

②用同一种中一种型（生物型或动物源）微生物种毒制备的疫苗，接种动物后能使其获得对异型病原体的抵抗力。如接种猪型布氏杆菌弱毒苗后能使牛获得对牛型布氏杆菌病的免疫力。

亚单位疫苗：

①微生物经物理和化学方法处理，除去无效的毒性成份，提取其有效抗原部分，如细菌的荚膜、鞭毛，病毒的囊膜、衣壳蛋白等，经提取后制备不同的亚单位疫苗，如大肠杆菌K88、K99疫苗等，禽巴氏杆菌荚膜多糖苗等。

②通过基因工程方法由载体表达的微生物免疫原基因产物，经提取后制备的疫苗，如鸡传染性贫血基因工程亚单位苗。

基因重组疫苗：病毒微生物的免疫原基因，通过分子生物方法将其分离，然后与载体DNA 相连接，实现遗传性状的转移与重新组合，再经载体将目的基因带进受体进行正常复制与表

达，获得增殖培养物供制苗用，或直接将活载体接种宿主动物，直接在其体内表达抗原，诱导免疫反应，如以鸡痘病毒为载体的重组新城疫活疫苗，这类疫苗是目前的主要研究方向。

基因缺失疫苗：应用基因操作技术，将病原微生物中与致病性有关的毒力基因序列除去或失性，使之成为无毒株或弱毒株，但仍保持有良好的免疫原性。这种基因缺失株稳定性好，不会因传代复制而恢复毒力，如传染性喉气管炎基因缺失苗。

核酸疫苗：是指将一种病原微生物的免疫原基因，经质粒载体DNA接种给动物，能在动物体细胞中经转录转译合成抗原物质，刺激被免疫动物产生保护性免疫应答。它能通过主要组织相容性I类和II类抗原的途径提供给动物免疫系统而激起体液免疫应答和细胞免疫应答，故既具有亚单位疫苗或灭活疫苗的安全性，又具有活疫苗的免疫全面的优点，这也是未来发展的趋势。

三、我国兽用生物制品目前的状况

解放后，我国曾使用疫苗消灭了牛瘟和牛肺疫。享誉世界的我国C侏猪瘟弱毒苗是我国兽医科学工作者为全世界所做出的伟大贡献之一，许多国家使用该疫苗后消灭了猪瘟，我国也因此苗的普通使用而控制信了疫情。C是China的第一个字母，是中国株的缩写。马传染性贫血弱毒苗是我国兽医科技工作者的又一创举，它是世界上第一种逆转录病毒疫苗，获国家科技进步一等全国大会战，在很短的时间里开发出了火鸡疱疹病毒疫苗，为马立克氏病的控制作出了很大贡献。进入八十年代以来，由于研究经费减少等多方面的原因，兽用疫苗特别是禽用疫苗的研究和开发成为了大热门，趋者如过江之鲫，一方面由于疫苗的开发在一定程度上缓解了科研经费的不足，另一方面工作人员也因此得到了一定的实惠，改善了生活。加上一些高等院校的研究生在学位论文选题时，通常选择素材相对便宜、经费消耗少、周期短的禽病方面的研究。一些原不具备禽病研究条件和研究基础的单位甚至一些管理部门也纷纷加入到其中来，使禽用疫苗的开发白热化，生产上、销售上的无序性和短期行为使原本相对稳定的疫苗供求关系一片混乱。

1.兽用疫苗方面

（1）常规疫苗

从数量上看，2000年仅禽苗就为397亿羽份，加上大专院校和科研单位生产车间生产的大约200亿头（羽）份，总量达到600多亿头羽份，发展速度之快令人难以想象。

在技术进步方面，主要表现为：

①生产环境有了较大改善：近10年来，农业部已相继出台了一系列兽药管理政策和技术措施，对兽用生物药厂提出了按GMP管理的要求，并规定了2005年所有生产企业必须达到GMP标准。

②活疫苗冻干工艺基本完善。

③较好的解决了灭活疫苗的配苗佐剂和乳化工艺问题。

④疫苗品种方面：从1987年到现在的近15年间，共计批准新生物制品134个品种，超过了在此之前所有生物制品的总和。

⑤在生产疫苗用原材料和检验用培养基及实验动物上逐渐实现标准化和规范化。

⑥在疫苗的质量方面：1999年以后的连续三年抽检合格率都在95％左右。

除此以外，在细胞培养技术，生物发酵工艺，抗原浓缩技术及产品质量检测技术等方面都有明显的技术进步。

（2）基因工程疫苗：由中国军事医学科学院等单位将猪致病性大肠杆菌的K88、K99柔毛质粒导入非致病性大肠杆菌，成功地制备成双价大肠杆菌疫苗。华中农业大学、四川农业大学已成功研究出猪伪狂犬病基因缺失疫苗；宁夏大学研究出的犊牛、羔羊腹泻双价基因工程疫苗已获批准生产；哈尔滨兽医研究所构建的鸡传染性喉气管炎病毒gB基因的重组禽痘病毒疫苗、上海复旦大学合成的口蹄疫多肽疫苗已进入田间安全试验阶段。此外，扬州大学农学院构建了马立克氏病毒gB基因的重组禽痘病毒。哈尔滨兽医研究所利用杆状病毒表达的禽流感病毒HS亚型血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）基因的亚单位疫苗及以脂质体转染技术构建的H7亚型禽流感病毒、血凝性基因重组的鸡痘病毒，均能使鸡产生良好的免疫保护作用。HS和H7亚型HA基因重组禽痘病毒载体疫苗也即将获得成功。

2.生物技术在诊断试剂和诊断方法上的应用

（1）单克隆抗体：我国已有20多个单位分别建立了针对哺乳动物的12种病毒、禽类的9种病毒、各种动物的12种病原细菌、10种寄生虫及一些微生物毒素和其他可能用于疫病诊断的数百个杂交瘤细胞株，单抗的种类已覆盖了大多数畜禽传染病。

（2）核酸探针：该技术是80年代初期发展起来的一种基因诊断技术，与传统病原分离和血清学方法相比，它具有简便、快速、高度特异的优点。

（3）聚合酶链反应（PCR）：PCR技术是诞生于80年代的一项体外酶促扩增DNA新技术，具有特异性强、敏感性高、操作简便、节省时间等优点，现已用于生物学科的各个领域，它可以将被检样品中单拷贝基因序列扩增到毫克水平。

我国对生物制品的管理历来比较严格，早在50年代，在总结国内外研制生物制品的基础上，有关部门便组织制订了我国第一部《兽医生物制品制造及检验规程》，加强对生产用菌（毒）种的选育与管理，规范了疫苗生产，也从而促进了畜禽疫病的防制研究，各种新型活疫苗和灭活疫苗不断研制成功。至70年代，农业部原部长何康又颁发了《五号部长令》对生物制品的中试、生产和规程审定作了详尽的规定，从而规范了生物制品的研制质量要求和标准化。

兽医生物制品监察制度，是对生产过程监督、全面检验与考核制品的依据。与《规程》同时设立的中国兽药监察所，负责监督制度的执行和产品的抽检，其后又成立了农业部兽用生物制品规程委员会，负责制定兽用生物制品生产及检验的国家标准。96年5月，农业部原部长刘江又颁发了《6号部长令》针对兽医用生物制品的生产与经营又作出了许多明确规定，

从而使生物制品的管理进一步走向规范化。

四、当前我国生物制品生产与管理中存在的问题

近年来，随着我国畜牧业的不断发展，畜禽品种和数量有了很大幅度的增加，与此同时，我国畜禽疾病的种类和发生频率也大大增加，就养禽业而言，几乎是每年新增加一个病。养禽发达国家的死亡与淘汰率为8%左右，而我国的死淘率达20%，造成了巨大的经济损失，一方面老疫病未能控制，另一方面一些新病又在不断增加，其中新增加的大多为传染性疾病。

（一）就总的技术状况而言，存在的主要问题表现在以下几个方面：

1.冻干活疫苗方面

目前在技术上存在的主要问题是耐热保护剂的问题还没有完全解决。

2.灭活疫苗方面

我国目前配置油佐剂的矿物油标准不规范，存在着明显的安全问题。

3.制苗用原材料使用标准的控制方面

存在最主要的问题是禽用活病毒疫苗制苗用鸡胚的标准上。一是外源病原的污染问题。这种污染既有细菌、支原体，也有病毒。二是鸡胚中的母源抗体可干扰接种疫苗病毒的繁殖，直接影响疫苗的质量。

4.在生产环境和管理方面

距真正GMP标准还相差甚远。具备GMP生产车间是前提，良好的管理是关键。

（二）生产厂家缺乏新品开发力量，新产品开发不力

对传染性疾病而言，最好的防制方法就是疫苗接种，而我国各大生产厂家过去均偏重于生产家畜疫苗，家禽疫苗生产的品种相对较少，除了以往的常规疫苗外，新产品的品种较少，远不能适合当前养禽业的需要，这主要是由于生产厂家对新品种的研制开发力度不大，科研力量严重缺乏所致。他们在与高等院校、科研单位生物制品，并未有多少转到专业厂家生产，相反，倒是各高等院校、科研单位将其留下自主开发。对外出口的畜禽产品通常由于药物残留量过高而影响外贸，这说明在细菌疫苗和寄生虫疫苗等方面的研究亟待加强。

（三）科研单位经费严重不足，靠开发生物制品进行支撑

随着科研体制改革的不断深入，原来计划经济条件下那种靠吃皇粮生活的科研院所的事业经费正在不断减少，以致于最终将“断奶”。在这种生存难以为继的情况之下，许多单位纷纷把目光转向生物制品的开发，以往有基础的上，没有基础的也上，正是在高利润的驱使下，生物制品的开发非常“红火”，各种产品充斥市场，良莠不均，质量不够稳定，免疫失败事故频发。再看看这些单位的生产场所，绝大部分是“作坊式”的，生物制品对生产环境的高要求在这里被降低了。因此，农业部出台了《6号部长令》，目的是为了对这种无序状态进行纠正，规范生产和管理，使其走上有序的轨道。

农业部曾规定，只有获得新兽药证书的新产品的单位方能建立自己的中试车间，生产者应执行GMP标准。GMP是Good Manufacturing Practice的缩写，即“良好的生产规范”，是兽药企业管理生产和质量控制的基本准则，适用于兽药生产的全过程，着重对兽药的生产过程进行质量控制，目的在于消灭生产过程中任何影响兽药质量的隐患，确保产品的一致性，使之符合规定的质量标准。

GMP的内容包括硬件方面：如厂房建设、设备、仪器、环保设施、仓库、实验动物、原材料等；软件方面：如管理、生产工艺、规章制度、档案记录、检验程序与规程、人员素质和培训制度等诸如此类都有非常明细的要求。

目前不少高等院校、科研单位都已经建成或正在准备建设GMP标准的中试车间，目的是为了保住生物制品开发这一块。但从各个单位的实际情况看，动用数丰万元建一间厂房，不管对于谁来讲都是一种不轻松的负担，然而现在已通过农业部验收的那些单位，若是按照GMP 标准进行生产操作，又能生产几种规程产品？生产用原料也必须符合GMP的要求，如禽苗，必须用SPF鸡蛋来生产，这种高成本必将使产品的价格飙升，在市场上的竞争力又将如何？现今的我国畜禽疫病情势是否一定要用GMP标准产品？我国老百姓是否能够接受高价位的疫苗？这些问题都是不可避免的。按GMP标准来生产为数不多品种的做法，这本身是不经济的做法，高的投入未必有高的回报，那么为什么又有那么多单位趋之若鹜呢？说白了，目的是想“打擦边球”，是想以GMP车间之名，搭车生产其它产品，这也许是其真实目的。

（四）目前生物制品统一管理所遇到的问题

按照《6号部长令》的要求，生物制品的销售应由各省畜牧兽医系统进行统一管理、统一进货、统一发放，这对于规范管理具有积极意义。但原先那种无序生产阶段所形成的供求关系也非一日所能打断的，况且目前生物制品的单价普遍较低，再回到统管时那种较高的价位可能有一定的难度，这也是目前管理中的难度之一。另外，有些省在执行《6号令》的过程中存在一些偏差，认为本省生产或某些部属单位生产的为“合法的”产品，其它则视同“非法”，予以没收，更有一些部门将没收的产品再次出售来获取“无本之利”，这不能不使人想到地方“保护主义”这一概念。因此，笔者认为管理应该加强，但不可偏废，应该使那些高质的、符合标准的产品有一个比较顺畅的市场环境，这也是符合社会主义商品经济的原则的。

（五）国外产品的大量流入，严重冲击着民族工业

自80年代中后期以来，几乎全世界各大兽用生物制口品制造公司均打入了中国市场，他们看到了中国这个全世界最大的禽用生物制品市场，不遗余力地销售他们的各种产品。凭心而论，国外公司特别是一些著名公司生产的生物制品，在其质量及售后服务上确实可靠，用户的信任度也比较高，但国外产品的价格并非所有的养殖单位所能承受得起的。例如，鸡败血霉形体油乳剂苗，国外公司市场零售价为0.80元/只，而国内开发的只有0.15元/只，价格殊异。从正常渠道进口的疫苗国内尚能接受，但期间也充斥着大量走私货，这给国家带来的经济损失巨大，也严重冲击了民族工业的发展，在这方面，我们的管理部门应花大力气整治。

（六）兽用生物制品方面的低水平重复研究

目前，特别是前几年，在国内的一些科研院所、高等院校，纷纷立题进行禽用疫苗的研制，

特别是在灭活苗方面似乎形成一定的模式，新制品“层出不穷”，虽然不乏高水准的产品，但大多数并无新意，功利之心，溢于言表。随手翻看专业杂志，有关这方面的研究报道不时跃然于目。这种低水平的重复一方面为了创收，一方面也是为了竞争“新兽药证书”，当然也与研究者对我国目前已经有哪些疫苗已有新兽药证书，而哪些没有并不清楚有很大关系，能否请兽药监察部门将这些疫苗品种进行公布，这样也许会减少一些不必要的重复研究。低水平的重复研究也是一种对资源的严重浪花费。

五、21世纪兽用生物制品发展趋势

1.改善和提高现有传统疫苗的质量，改进品种结构

（1）由于超强毒和变异毒株的出现，用目前的鸡MD、IBD、IB等传统疫苗预防接种难以起到很好的免疫保护作用，常常造成免疫失败。因此，根据疾病流行特点，研制新一代更有效的多血清型或亚型的疫苗将是发展的方向。另一方面是一些毒力偏强的疫苗将严格限制使用或禁止使用。需要通过新技术研制出毒力更弱、更为安全稳定的疫苗。

（2）多联高效灭活疫苗将越来越受欢迎。迫切需要研究开发多联多价疫苗，以达到一针防多病的目的。多联高效灭活疫苗生产的关键技术是提高抗原浓度（包括提高培养物中抗原产量或解决抗原浓缩技术）、提高佐剂质量、优化乳化技术等。如何应用现代技术解决灭活疫苗中存在的问题是当前面临的一个重要课题。

（3）新型的细菌疫苗、寄生虫虫苗及调节体内正常菌群及免疫机能的微生态制剂的研制开发将成为新的热点。为了有效解决动物体内药物残留的问题，市场上迫切需要安全有效的疫苗用于预防接种，以此取代不必要的大量滥用药物。另外，为了减少耐药菌株的产生及药物治疗对细菌性活疫苗免疫效力的影响，在加强生物安全控制的同时，应积极研制和大力提倡使用能调整动物肠道正常菌群，提高机体抗病力的微生态制剂。

2.新品种疫苗的研究与开发是当务之急

近些年来，一些严重危害养殖业的传染病，如鸡传染性贫血、网状内皮组织增生病、鸡淋巴细胞白血病（特别是以侵害肉鸡为主的I型白血病）、传染性腺胃炎、猪繁殖与呼吸障碍综合症、传染性脑脊髓炎、猪细小病毒病以及断奶仔猪多系统衰竭综合症等相继传入我国，已给我国养殖业造成了巨大的经济损失。为了预防控制这些疾病和更多的新病，根据各种疾病的流行特点和免疫机理研制出安全有效的疫苗，将成为当前和今后相当一段时间的主要研究任务。

3.以现代分子生物学和免疫学技术为基础，研究开发兽用新型疫苗是21世纪的主导方向

随着生物技术的不断进步，分子生物学、分子免疫学、分子遗传学的研究取得进展与基因工程技术的应用，21世纪我国疫苗研制将会发生革命性的变化。以分子生物学技术为基础的新一代兽用疫苗将会大范围投放市场，这些疫苗以基因工程疫苗为主体，包括亚单位疫苗、合成肽苗、抗独特型抗体疫苗、基因缺失疫苗、活载体疫苗、转基因植物可食疫苗以及核酸疫苗。

（1）重组亚单位疫苗。直接从病原提取纯化的亚单位疫苗的制作成本较高，生产的抗原有限，通过基因重组技术，利用异源宿主系统高效表达外源基因为亚单位疫苗的开发提供了一条可行的途径。将具有免疫原性的抗原决定簇的基因编码片段插入到合适的表达质粒中，并在病毒、细菌、酵母、昆虫细胞中高效稳定表达，以基因工程技术生产大量抗原，而以此制备成只含免疫原性的亚单位疫苗。该类疫苗不含致病因子的核酸成分，安全可靠。

（2）合成多肽疫苗。应用当今飞速发展的计算机软件分析和生物信息学技术，从蛋白的一级结构结合单克隆抗体分析等技术可以推导出该蛋白的主要表位，并用化学方法合成这一多肽作为抗原，它们的特点是纯度高、稳定。由于它只能线性表达，不能折叠，因此只适应于线性病毒病。

（3）抗独特型抗体疫苗。抗独特型抗体疫苗的优点是安全、稳定，不存在其它类型疫苗抗原来源困难，也没有合成多肽基因克隆表达抗原的缺陷型构像等问题，在某种程度上可以弥补重组疫苗和合成肽疫苗的不足。由于只针对单一抗原决定簇，所以不会有其它副作用，但这也是此种疫苗的缺点。

（4）基因缺失疫苗。缺失与毒力相关的基因是发展活疫苗的理想途径之一，其突出的优点是疫苗毒力不会返强而免疫原性不发生变化，这一领域十分活跃，具有广泛的发展前景。为了提高常规疫苗的安全性，新一代人工基因定位缺失弱毒疫苗的研究已取得重大进展，有的疫苗已投放市场使用。

（5）重组活载体疫苗。以病毒或细菌为载体导入外来病原的保护性抗原基因，制成的重组活载体疫苗可同时启动机体细胞免疫和体液免疫，克服了亚单位疫苗和灭活疫苗的不足，同时也不存在毒力返强的问题。另一最大优点是活载体疫苗可以同时表达多种抗原，制成多价或多联疫苗，既解决了现有多联疫苗的制造工艺难题，又能一针防多病。该疫苗的不足是如果使用的是同一载体，在进行第二次免疫时，第一次免疫产生的抗体对第二次接种的抗原有很强的中和作用，因此不宜进行两次免疫。解决这一问题的办法是将两次免疫使用的载体加以区别。

（6）转基因植物疫苗。转基因植物疫苗实际上是重组DNA疫苗的一种，但是由于生产疫苗的系统由大肠杆菌和酵母菌换成了高等植物，这就有了重大意义。特别是转基因植物口服疫苗的优势非常明显，如有的植物是可以生食的，例如黄瓜、胡萝卜和番茄等，有的植物可以作为饲料，如玉米、大豆等，合适的抗原基因只要在该植物可食用部位的器官特异表达的启动子的驱动下，经转化得到的转基因植物即可直接用于畜禽的口服免疫。转基因的植物疫苗具有效果好、成本低、易于保存和免疫接种方便等优点，因此特别适合于包括中国在内的发展中国家的需要。

（7）核酸疫苗。也称基因疫苗或DNA疫苗，是随着基因治疗而发展起来的第三代疫苗。它是将外源病原的保护性抗原基因与细菌的DNA或病毒的DNA连接后直接导入动物体内，在机体内表达相应抗原，诱导机体免疫系统产生对相应抗原的免疫保护作用。核酸疫苗有许多优点，如：制造简便、生产速度快、成本低、客易控制质量、免疫期长、热稳定性好、便于贮藏和运输，能同时刺激B细胞产生体液免疫、刺激T细胞产生细胞，无感染因子等。

4.与疫苗直接相关的新型佐剂、免疫增强剂、活疫苗耐热保护剂的研究开发将成为热门

优良的免疫性剂和免疫增强剂是提高传统疫苗和基因工程疫苗免疫效力必不可少的，特别是基因工程疫苗，因其免疫原性相对弱些，更需要好佐剂予以辅之。

（1）新型佐剂。

①脂质体。

②MF59佐剂。

③免疫刺激复合物佐剂。

④油佐剂。

(2）免疫增强剂。

免疫增强剂根据其来源可分为生物产物和人工合成化合物两大类，进一步可细分为生理产生、微生物来源的物质、植物来源物质及人工合成的化合物。

（3）活疫苗耐热保护剂。

最近，中国兽药监察所已成功地研究出猪瘟、鸡新城疫、马立克氏病等病毒活疫苗的耐热保护剂。这一重大突破为我国活疫苗实现在2℃-10℃下保存运输提供了可靠的保证。

5.随着新技术、新材料、新方法的出现，诊断制品的研制将进入异常活跃的时代

（1）以杂交瘤技术生产的鼠原单克隆抗体滴度高、特异性强，因此，对某些常规血清学难以检测的致病因素的单克隆抗体要进行系统开发，以区别疫苗接种和野毒感染；以鉴别多联多价疫苗中的各不同毒（菌）株，对兽用生物制品的质量检测和流行病学的调查都具有重要的意义。

（2）以分子生物学为基础的DNA探针，聚合酶链反应（PCR）等高度灵敏的检测方法简单化、实用化、商品化，也是疾病诊断的发展方向。

（3）细胞免疫的快速诊断方法将广泛应用于试验检测。