植物细胞工程实验报告(肖峰)
植物工程实验报告
一、实验目的1. 理解植物基因工程的基本原理和方法。
2. 掌握植物基因转化技术的操作步骤。
3. 学习检测转化植物中目标基因的表达。
4. 分析实验结果，加深对植物基因工程应用的理解。
二、实验原理植物基因工程是指利用分子生物学和遗传学的方法，将外源基因导入植物细胞中，使其在植物体内表达，以达到改良植物性状或生产特定产品的目的。
主要步骤包括：目的基因的克隆、表达载体的构建、基因转化、转化植株的筛选与鉴定等。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：拟南芥（Arabidopsis thaliana）种子、农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）感受态细胞、DNA分子量标准、质粒等。
2. 试剂：限制性内切酶、DNA连接酶、T4 DNA连接酶、DNA标记酶、琼脂糖凝胶电泳试剂、植物组织培养试剂、抗生素等。
四、实验方法1. 目的基因的克隆：通过PCR技术扩增目的基因，然后用限制性内切酶进行酶切，与载体连接，构建表达载体。
2. 表达载体的构建：将目的基因克隆到植物表达载体上，构建基因转化载体。
3. 基因转化：将感受态农杆菌与表达载体混合，通过电击法使农杆菌转化，将目的基因导入拟南芥细胞。
4. 转化植株的筛选与鉴定：将转化后的拟南芥种子接种在含有抗生素的选择培养基上，筛选转化植株。
通过PCR、Western blot等方法检测转化植株中目的基因的表达。
五、实验步骤1. 目的基因的克隆：1. 设计引物，通过PCR技术扩增目的基因。
2. 将扩增的目的基因进行酶切，与载体连接，构建表达载体。
3. 通过PCR和琼脂糖凝胶电泳检测目的基因是否成功克隆。
2. 表达载体的构建：1. 设计引物，通过PCR技术扩增载体上的启动子、终止子等元件。
2. 将目的基因和载体元件连接，构建基因转化载体。
3. 通过PCR和琼脂糖凝胶电泳检测表达载体是否成功构建。
3. 基因转化：1. 将感受态农杆菌与表达载体混合，进行电击法转化。
2. 将转化后的农杆菌接种到拟南芥种子中，进行基因转化。
植物细胞工程综合设计实验的实践与思考
综合设计实验的内容和要求通常在学期初即告知学生 ， 这样
可使学生在不断深入学习理论课并积极 的进行基础实验的同时 ， 能仔细思考 自己感兴趣的题 目，并有充足 的时间查 阅相关 资料 ， 选择合适 的搭档和讨论各 自的实验方案。 了便 于教师在开题前 为 能对学生 的实验方案进行初步的指导 ， 要求学生在开题报告进行 前提交 实验方案 ， 这样既节省了时间 ， 保证在开题报告后大部分 组 的学生能正常开始实验 ， 又可以更深入地 了解每个学生对知识 的把握和创造性 ，便 于老师对不 同的学生因材施教。
组为单位进行一次开题报告 。要求所有 的学生 和参与实验 的老 师都必须参加 ，每一个组在作 开题 报告 时 ，其他 同学 和老师均 可对其实验 的各个环节提 出疑 问或建议 ，帮助其 完善方案 。实 验方案通过 以后 ， 每个组须将 自己所 需材料列一份详细的清单 ， 向实验室管理老 师申领 ，并 可利用 任何 一个 课余 时间准备并开 展 自己的实验 。在整个 实验的准备和实施过程中都有 实验教师 和实验 室管理 老师共 同协 助学生解 决实际遇到的问题 ，并对学 生错误 的操作给予及时更正 。
１２ 实 验 的 进 行 ． 所 有组 的实验方案经过指导教师 的初步审核后 ，学生需 以
参 与实验的老师一致认为， 综合设计实验的开设使实验教学 效果较之以往有了很大的进步。首先 ， 学生参与实验的积极性有 很大的提高 。其次 ，学生能更主动的观察实验 ， 出问题并想办 提 法解决问题 。再次 ，加强了学生做实验 的计划性 。因为要求学生 设计方案通过后 ，要提前 向实验室管理人员提供一份试剂 、耗材 清单和仪器 的预约申请 ，一方面便于实验员准备和管理 ， 另一方 面也锻炼了学生考虑问题 的全面性和做事情的计划性。另外 ，在 很大程度上锻炼 了学生 的创新能力 。 有很多学生的实验设计很有 新意 ，并且实验工作也非常有意义 ，有些学生的想法甚至给了听 结题报告的老师很大的启发 ， 而且在学生提交的实验论文中惊喜 地发现 ， 有几个组的学生只要再稍加完善实验 内容就会成为一篇 不错 的科技论文 。 同时， 综合设计实验的开设扩展了实验教师的 教学思路 ， 启发全体教师对进一步改革完善教学 内容和教学方法 做 出新 的思考 ，真正实现 了教学相长 。 （ 下转 第 １６页 ） ７
植物细胞实验报告结果
一、实验目的1. 观察植物细胞的基本结构；2. 探究植物细胞的吸水和失水现象；3. 分析植物细胞有丝分裂过程。
二、实验材料与仪器1. 实验材料：洋葱鳞片叶、萝卜条、马铃薯条、黑藻叶、菠菜叶、月季花瓣；2. 试剂：质量分数8%的盐酸、/mL葡萄糖溶液、g/mL蔗糖溶液、清水；3. 仪器：刀片、镊子、滴管、载玻片、盖玻片、吸水纸、显微镜、烧杯、试管、酒精灯、酒精、盐酸、蒸馏水等。
三、实验方法与步骤1. 观察植物细胞基本结构（1）将洋葱鳞片叶切成薄片，制成临时装片；（2）在显微镜下观察洋葱鳞片叶细胞的细胞壁、细胞膜、细胞质、液泡、叶绿体等结构；（3）记录观察结果。
2. 探究植物细胞的吸水和失水现象（1）取两块萝卜条和马铃薯条，分别放入盛有清水和盐水的烧杯中浸泡；（2）过一段时间取出，观察萝卜条和马铃薯条的变化；（3）分析植物细胞吸水和失水的原因。
3. 分析植物细胞有丝分裂过程（1）取洋葱根尖，制成临时装片；（2）在显微镜下观察洋葱根尖细胞的有丝分裂过程；（3）记录有丝分裂各时期的特点，包括间期、前期、中期、后期和末期。
四、实验结果与分析1. 观察植物细胞基本结构通过观察洋葱鳞片叶细胞，我们发现了以下结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、液泡、叶绿体等。
细胞壁位于细胞最外层，具有保护和支持细胞的作用；细胞膜是细胞的边界，具有选择性透过性；细胞质是细胞内的基质，含有各种细胞器；液泡是储存物质和调节细胞渗透压的重要器官；叶绿体是植物细胞特有的细胞器，负责光合作用。
2. 探究植物细胞的吸水和失水现象实验结果显示，在清水中浸泡的萝卜条和马铃薯条硬挺，而在盐水中浸泡的萝卜条和马铃薯条软缩。
这表明植物细胞可以吸水，也可以失水。
吸水和失水与环境中溶液的浓度有关，当外界溶液浓度低于细胞液浓度时，细胞吸水；当外界溶液浓度高于细胞液浓度时，细胞失水。
3. 分析植物细胞有丝分裂过程在显微镜下观察洋葱根尖细胞的有丝分裂过程，我们得出以下结论：（1）间期：细胞核、染色体、纺锤体等结构逐渐消失，细胞质分裂为两个子细胞；（2）前期：染色体逐渐缩短、变厚，核膜、核仁消失，纺锤体开始形成；（3）中期：染色体排列在细胞中央，纺锤体横跨细胞；（4）后期：染色体分离，分别向细胞两极移动；（5）末期：染色体到达细胞两极，细胞质分裂为两个子细胞。
植物细胞工程总结
绪论1，细胞工程：是应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的实验方法或技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性,以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科.广义的细胞工程包括所有的生物组织、器官及细胞离体操作和培养技术。
狭义的细胞工程是指细胞融合和细胞培养技术。
根据研究对象的不同，高等生物的细胞工程分为动物细胞工程和植物细胞工程。
动物细胞工程包括细胞培养技术(包括组织培养、器官培养），细胞融合技术，胚胎工程技术（核移植、胚胎分割等)，克隆技术（单细胞系克隆、器官克隆和个体克隆）。
植物细胞工程包括植物组织、器官培养技术，细胞培养技术，原生质体融合与培养技术,亚细胞水平的操作技术等。
2，植物细胞工程：以植物组织细胞为基本单位,在离体条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作，使细胞得某些生物学特性按人们的意愿发生改变，从而改良品种或创造新物种，或加速繁殖植物个体,或获得有用物质的过程称…植物细胞工程的应用：1，利用细胞融合技术,克服远缘杂交不亲和性。
2，利用培养变异，筛选优良的突变体。
3，倍性育种，缩短育种年限. 4, 离体种质保存.5, 细胞培养生产有用的物质.第二章一，实验室设置及内部设备实验室建设应考虑的问题: 1、实验的性质 2、实验室的规模细胞工程实验室：基本实验室：准备室、无菌操作室、培养室贮藏室辅助实验室:细胞学实验室、生化分析实验室温室1、准备室完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装及高压灭菌；器皿、材料的洗涤等工作。
主要设备纯水器工作台药品厨天平电磁炉冰箱玻璃器皿酸度计高压灭菌锅干燥箱等2、无菌操作室（接种室）用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。
接种室应用推拉门,设有缓冲间,面积2m2为宜。
进入接种室前更衣换鞋，减少带入接种室杂菌.接种室主要设备超净工作台：每次实验前要用紫外灯灭菌20min，关掉紫外灯开始工作，工作过程中注意一直开着吹风机。
细胞工程自选实验
植物细胞工程自选实验报告学院班级：农学院09级生物技术4班学号：20090101310100姓名：李晓芳开题报告研究进展：植物细胞工程是一门以植物组织培养为基础，具有广泛的应用前景和使用价值的生物技术。
随着该技术的不断完善和发展，植物细胞工程已经在部分经济植物的育种和繁殖中发挥巨大作用。
目前根据人们的需要已经相继完善和发展了一些具有特色的实用技术，包括植物细胞培养技术、单倍体育种和胚胎培养，制备转基因植物等。
致谢技术的发展应用，使得植物细胞工程在人类的现代生活中的作用更加突出，并在经济植物繁殖，植物新品种选育和有用次生代谢物的产生方面有了重大突破。
实验内容：以新鲜的洋葱为实验材料，剥去外围的鳞茎组织，留下中间2~3cm茎尖，在升汞中消毒后再剥去外层最终留下约1~2cm 的茎尖接种于灭菌培养基内繁殖生出愈伤组织，待20~30天后再将其接种于生根培养基内。
灭菌时间根据不同材料而定。
材料：市售的新鲜洋葱培养基：MS+NAA0.1mg/l+BA0.01mg/l+30g/l白糖+8.5g/l卡拉胶洋葱愈伤组织培养摘要：植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。
植物的组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
通过洋葱茎尖分生组织培养(简称茎尖培养),使感染病毒病的植物重新获得无病毒植物。
初步了解植物组织培养的基本原理和操作技术。
关键词：洋葱茎尖组织培养愈伤组织洋葱又名球葱、圆葱、玉葱、葱头，荷兰葱，属百合科蒜属，为2年生草本植物。
洋葱由于原产于大陆性气候区，其独特的口味已经被千千万万人接受。
近年来对洋葱的组织培养技术成为一个热门的研究领域。
洋葱组织培养可以由鳞茎培养获得，也可以由茎尖培养获得。
而茎尖培养已成为最为广泛使用的方法.为什么会使用茎尖呢?茎的生长点培养，实际就是茎尖培养茎尖培养脱毒的原理是茎尖几乎不含病毒，采用旺盛分裂的茎尖组织培养，就有可能去除病毒。
植物细胞工程实验报告
植物细胞工程实验报告学院：农学院班级： 07生物技术（2）班姓名：袁峰学号： B0704091时间： 2009年11月指导老师：莫庭辉老师目录实验一、培养基母液的配制实验二、培养基的配制与灭菌实验三、香蕉吸芽的组织培养实验四、烟草叶片的消毒、接种和培养实验五、柱花草外植体的消毒、接种和培养实验六、木薯外植体的消毒、接种和培养实验七、桉树外植体的消毒、接种和培养实验八、玉米不成熟胚的消毒、接种和培养实验九、花生成熟胚的消毒、接种和培养实验十、水稻盾片的消毒、接种和培养实验十一、洋葱的组织培养（自选实验）植物细胞工程实验一、实验目的1、了解植物组织培养技术的基本原理。
2、掌握植物材料灭菌、接种和培养。
3、学习培养基的配制与灭菌。
二、实验原理根据植物细胞具有全能性的特点，在人工的控制条件下，将植物的任何器官、组织或细胞，放在人工合成的培养基中进行培养，使其生长、分化并形成完整植株。
实验一、培养基母液的配制一、实验目的掌握培养基母液的配制。
在配置培养基之前，为了方便和用量准确，常常将大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素类分别配制成比培养基配方需要量大若干倍的母液。
当配置培养基时，只需按预先计算好的量吸取母液。
二、实验试剂与仪器设备1、药品试剂：母液、蔗糖、卡拉胶（或琼脂）、NaOH溶液、HCl溶液、无菌水、NAA、BA、IAA、2，4-D等。
2、仪器设备：电子天平、量筒、PH试纸、培养瓶、解剖刀、酒精灯、高压灭菌锅、移液管、洗耳球、玻璃棒、药勺、超净操作台、铁架、镊子等。
三、实验内容（一）母液的配制1、大量元素母液的配制无机盐中大量元素母液，按照培养基配方的用量，把各种化合物扩大20倍，用感量为0.01g的扭力天平，分别用50mL烧杯称量，用重蒸馏水溶解.溶解时在每只烧杯中加入30-40mL重蒸馏水，置于酒精灯上,加热使其溶解(注意温度不可过高，60-70℃)。
溶解后，在1000mL量筒中，混合后用重蒸馏水定容到1000mL。
生物技术细胞工程实验报告
课程学习报告课程名称：细胞工程大实验实验一培养基母液和培养基的配置实验二胡萝卜再生体系的建立实验三水稻再生体系的建立实验四水稻悬浮细胞系的建立及胚状体的诱导与观察实验五水稻遗传转化实验六烟草的组织培养实验七百合组织培养实验八原生质体游离、融合与培养实验九玉米幼胚再生系统的建立实验十植物快速繁殖实验1 培养基母液和培养基的配制摘要：培养基是供植物离体培养组织或细胞赖以生存的营养基质，相当于人公配制的“土壤“，在植物组织培养过程中，外植体生长所必需的营养成分、生长因子、理化环境等主要由培养基提供。
为了避免每次配制培养基都要对几十种化学药品进行称量，应该将培养基中的各种成分，按原量10倍、100倍或1000倍称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做母液。
这样，每次配制培养基时，取其总量的1/10、1/100、1/1000，加以稀释，即成培养液。
关键词：培养基母液、培养基、无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质、有机附加物培养基实际一是一个人工模拟的植物生长、发育环境。
在植物组织培养过程中，外植体生长所必需的营养万分生长因子、理化环境等主要同培养基提供。
在植物组织培养中，选用适当的培养基，是组织培养成功与否至关重要的因素。
不同植物材料对培养基的要求不尽相同，进行一系列的预培养和筛选是很必要的。
由于离体的培养材料不像完整植物体那样具有自我平衡的能力，所以在配制培养基时，离子失衡或某种物质过量都可能导致培养物生长不良或导致死亡。
另外，组织培养物的脱分化、分化等状态的调控，次生代谢物的产出等都要通过调节培养基成分来实现。
本实验的目的是要学习并掌握培养基母液和培养基配制的方法，掌握不同物质浓度按比例稀释和转化的计算方法。
1 材料与方法步骤1.1试剂培养基母液（以MS 为例）：NH 4NO 3；KNO 3 ；CaCl 2.2H 2O ；MgSO 4.7H 2O ；KH 2PO 4；(NH4)2SO 4；H 3BO 3；KI ；MnSO 4.H 2O ；ZnSO 4.7H 2O ；NaMoO 4.2H 2O ；CuSO 4.5H 2O ；CoCl 2.6H 2O ；Na 2EDTA.2H 2O ；FeSO4. 7H2O ；甘氨酸；盐酸吡哆醇；盐酸硫氨素；烟酸；肌醇；2，4—D ；6—BA ；NAA培养基：1N HCl ；1N KOH ； 标准pH 溶液（25℃下，pH4.01和pH6.08的标准溶液各100ml ）；蔗糖；琼脂；水解蛋白酶；谷氨酰胺；脯氨酸。
植物细胞工程总结
植物组织培养(plant tissue culture)指植物的离体部分(包括任 何器官、组织、细胞或原生质体)，在人工控制的培养基及环境条 件(温度及光照)下，得以生长和分化的一种无菌培养技术。该词 最早仅局限用于离体部分增殖形成愈伤组织，现在一般通用于所 有类型的植物无菌培养技术。包括：
幼苗及较大的植株的培养(植物培养)； 离体器官的培养(器官培养)； 成熟或未成熟的胚胎的离体培养(胚胎培养)； 离体部分增殖形成愈伤组织的培养(愈伤组织培养，即狭义的组织培养)； 离体花药的培养(花药培养)； 能保持较好分散性的离体细胞或很小的细胞团的液体培养(悬浮培养)； 对脱壁的裸露细胞即原生质体的培养(原生质体培养)等。
细胞生物学和 应用的原理和方法 分子生物学 细胞整体水平 研究的水平 或细胞器水平 研究的目的 按照人们的意愿来改变细胞内 的遗传物质或获得细胞产使后代细胞形成完整个体
的潜能的特性。
2、原理： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有
的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所 必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每 一个活细胞都应该具有全能性。
2、固定化细胞培养优点：
一、可以较容易地控制培养系统的理化环境，从而可以研究特定的代 谢途径，并便于调节； 二、由于细胞固定在支持物上，培养基可以不断更换 ，节约生产时间； 三、可以从培养基中不断提取产物，因此，它可以进行连续生产。
植物体细胞杂交: 用两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种 细胞，且把杂 种细胞培育成新的植物体的方法。优势：（与 有性杂交方法比较）打破了不同种生物间的生殖隔离限制，大大 扩展了可用于杂交的亲本组合范围。 过程： 植物A细胞 原生质体A
去壁
植物B细胞 杂种植株 去壁的常用方法：
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姓名：肖峰学号： B0704002班级： 07生物技术（1）班指导老师：莫廷辉时间： 2009年11月目录实验一、培养基母液的配制实验二、培养基的配制与灭菌实验三、香蕉吸芽的组织培养实验四、烟草叶片的组织培养实验五、柱花草的组织培养实验六、木薯的组织培养实验七、桉树的组织培养实验八、玉米不成熟胚的培养实验九、花生成熟胚培养实验十、水稻盾片的培养实验十一、芦荟的组织培养（自选材料实验）实验一、培养基母液的配制一、实验目的掌握培养基母液的配制。
在配置培养基之前，为了方便和用量准确，常常将大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素类分别配制成比培养基配方需要量大若干倍的母液。
当配置培养基时，只需按预先计算好的量吸取母液。
二、实验原理培养基是植物细胞、组织和器官吸取营养的场所。
在植物细胞的分裂和分化过程中，需要各种营养物质，这些营养物质包括无机营养成分、有机营养成分、植物生长调节物质等。
在对植物的器官、组织和细胞进行离体培养时，只是切取植物体的一小部分，它们无法象整体植株那样合成生长发育所需的全部物质。
而自然界的植物千差万别，每一种植物都有自己独特的生理代谢过程和各自的营养需求，没有哪一种培养基能够适用于所有植物。
因此，对培养基组成成分的筛选是非常重要和必不可少的程序。
目前对植物进行组培时，人们所使用的培养基只几十种，其中MS培养基应用最为广泛。
说明MS 培养基的无机盐成分对许多植物种均是适宜的，它的无机盐含量较高，微量元素种类较全，浓度也较高。
三、实验试剂与仪器设备1、药品试剂：母液、蔗糖、卡拉胶（或琼脂）、NaOH溶液、HCl溶液、无菌水、NAA、BA、IAA、2，4-D等。
2、仪器设备：电子天平、量筒、PH试纸、培养瓶、解剖刀、酒精灯、高压灭菌锅、移液管、洗耳球、玻璃棒、药勺、超净操作台、铁架、镊子等。
四、实验内容（一）母液的配制MS培养基母液方案配制如下表：具体配制步骤如下：1、大量元素母液的配制无机盐中大量元素母液，按照培养基配方的用量，把各种化合物扩大20倍，用感量为0.01g的扭力天平，分别用50mL烧杯称量，用重蒸馏水溶解.溶解时在每只烧杯中加入30-40mL重蒸馏水，置于酒精灯上,加热使其溶解(注意温度不可过高，60-70℃)。
溶解后，在1000mL量筒中，混合后用重蒸馏水定容到1000mL。
其中CaCl2单独配制。
在加入母液时CaCl2应最后加入，以免形成沉淀。
将配好的混合液倒入细口瓶中，贴好标签保存于冰箱中。
配制培养基时，配1000mL培养基取此母液50mL。
2、微量元素母液的配制无机盐中微量元素母液，按照培养基配方用量的200倍，用微量0.0001g的电光分析天平，分别用50mL烧杯称量，用重蒸馏水溶解。
混合定容于100ml容量瓶中保存于冰箱中,配制培养基时，每配制1000mL培养基取此母液5mL.3、铁盐母液的配制无机盐中铁盐母液，按照培养基配方用量的100倍，用感量0.01g的扭力分析天平，分别用50mL 烧杯称量，用重蒸馏水溶解，混合定容，倒入细口瓶中，每配制1000mL培养基取此母液10mL。
4、有机元素的配制无机盐中有机元素母液，按照培养基配方用量的100倍，用感量0.01g的扭力天平，分别用50mL 烧杯称量，用重蒸馏水溶解，混合定容，倒入细口瓶中，每配制1000mL培养基取此母液10mL。
五、实验结果经过大家的集体分工，很快就配制好了母液。
母液澄清，无沉淀，说明配制成功，可以储存起来。
六、注意事项1、配制时注意一些离子之间易发生沉淀，如Ca2+和S042-，Ca2+、Mg2+和PO43-一起溶解后，会产生沉淀，一定要充分溶解再放入母液中。
2、配制母液时要用蒸馏水或重蒸馏水。
3、药品应选取等级较高的化学纯或分析纯。
4、药品的称量及定容都要准确。
各种药品先以少量水让其充分溶解，然后依次混合。
5、一般配成大量元素、微量元素、铁盐、维生素等母液，其中维生素氨基酸类可以分别配制，也可以混在一起。
5、母液配好后放入冰箱内低温保存，用时再按比例稀释。
实验二、培养基的配制与灭菌一、各培养基配制1、香蕉培养基：诱导培养基：MS＋BA 3.0 mg／L继代培养基： MS＋BA 3.0 mg／L生根培养基： MS＋NAA0.5mg／L2、烟草叶片培养基：诱导培养基： MS＋BA 1.0 mg／L继代培养基： MS＋BA 1.0 mg／L＋NAA 0.5 mg／L生根培养基： MS＋NAA 0.2 mg／L3、柱花草培养基叶片愈伤组织诱导培养基：M S+BA4mg/L+NAA1.0mg/ml继代培养基：M S+ BA4 mg/L+ NAA0.01mg/ml芽伸长培养基：M S+BA0.4+ NAA 0. 1mg/ml4、木薯外植体培养基：诱导培养基：MS + GA3 0.02 mg/L + NAA 0.02 mg/L继代培养基：MS + GA3 0.02 mg/L + NAA 0.02 mg/L生根培养基：MS + NAA 0.02 mg/L5、桉树外植体培养基：芽的诱导培养基：1／2 MS＋BA 0.5 mg／L＋IBA 1.0 mg／L芽的增殖培养基：MS＋BA 0.5 mg／L＋IBA 0.2 mg／L生根培养基： 1／2 MS＋NAA 0.2 mg／L6、花生胚培养基：1／2 MS7、玉米胚培养基：1／2 MS8、水稻盾片培养基：水稻发芽培养基：MS诱导培养基：MS＋2，4-D 2.0 mg／L＋BA 1.0 mg／L分化培养基：MS＋BA 2.0 mg／L生根培养基：MS＋NAA 1.5 mg／L9、自选材料—芦荟培养基芽诱导培养基：MS+ BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L继代增殖培养基：MS+ BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L生根培养的培养基配：1/2MS+NAA0.1mg/L二、培养基的配制及消毒：（1）按照MS培养基的配方（以配制1LMS培养基为例）取大烧杯加入先前配制好的母液其中包括：大量元素50ml、微量元素5ml、铁盐10ml、有机元素10ml，最后加钙盐50ml充分混匀。
再加入30g食用白糖，加入适量的去离子水使总量将近1L，混匀后调PH值（调至5.8-6.2），用1000ml量筒定容，最后向培养基中添加8.0g卡拉胶混匀。
注意事项：○1配制MS时，钙盐一定要最后加入；○2调好PH值后再加卡拉胶（或琼脂）。
（2）培养基配制好后分装到培养瓶中每瓶约30ml，盖好瓶盖帖上标签。
需要加入激素的培养基在定容到1000ml后加入所需的激素。
混匀后调PH值（调至5.8-6.2），用1000ml容量瓶定容，最后向培养基中添加8g卡拉胶，混匀后进行分装，然后装入高温高压灭菌锅进行灭菌（一般培养基用0.1MPa，121.5℃，15～30分钟可达到彻底灭菌的目的）。
灭菌好后取出冷却备用。
（3）培养环境条件：培养温度为28（-1、+1）℃，光照强度2000—3000LX，光照时间为12h/d，每隔7天观察一次。
三、超净操作台的消毒消毒时先用75%的酒精对超净台的各处进行消毒，点燃酒精灯放于超净台右侧，再对实验工具进行灼烧灭菌，后放于架上冷却待用。
并依次将实验中所用培养基瓶及所需试剂瓶进行消毒，置于超净台左侧，注意实验中要用75%的酒精对手进行消毒。
实验三、香蕉吸芽的组织培养摘要：香蕉是热带、亚热带地区的重要水果，也是华南四大名果之一，在果树栽培中占有相当的比重。
香蕉栽培具有速生快长、投产早、产量高、效益好、供应期长等优点。
传统的繁殖方法多是采用吸芽分株法，这种方法的繁殖系数低，速度慢，难以满足当前大规模的栽培生产，且容易传播疾病。
利用组织培养的技术来对香蕉优质品种进行无性繁殖，这样不但可以保持香蕉的优良性状，加快繁殖速度，而且，试管苗不带病虫害和病毒病，并且，利用组织培养技术得到的幼苗生长比较一致，有利于田间的管理和采收。
本实验利用香蕉的吸芽作为外植体，诱导培养基为MS＋BA 3.0 mg／L，继代培养基为MS＋BA 3.0 mg／L，生根培养基为MS＋NAA0.5mg／L。
关键词：香蕉吸芽诱导继代生根培养外植体1、材料和方法:1.1材料(1)香蕉吸芽：从农学院基地挖取品种优良无病虫害的香蕉吸芽(2)实验采用MS基本培养(3)诱导培养基： MS＋BA3mg／L(4)继代培养基： MS＋BA3mg／L(5)生根培养基： MS＋NAA0.5mg／L(6)PH： 5.8-61.2方法1.2.1外植体消毒方法用自来水冲洗吸芽表面的泥土，剥离外假茎，只留下茎和假茎各2-3cm长，假茎的的直径有2-3cm，然后，用洗衣粉清洗一遍，用自来水冲洗，转入0.1%升汞浸泡15-20min，其间不断搅拌，弃去升汞用无菌水洗3遍（无菌水漂洗：将从升汞中取出的香蕉吸芽组织块转入无菌水中漂洗，不断摇动使漂洗干净）留在瓶中备用。
1.2.2诱导培养将香蕉吸芽放到无菌工作台的无菌纸上，用消毒刀将外植体的假茎的最外层剥掉，以及有消毒刀将已经变色的茎外面一小层也切掉，然后从外植体茎中间一分为四，接入诱导培养基，共8瓶。
7天后观察，发现诱导培养基中香蕉吸芽组织裂开并且有转绿现象。
1.2.3继代培养14天后，将已经启动培养的香蕉材料从培养室内取出，在超净工作台上将生长良好的香蕉芽丛分开，切去顶部叶片部分，削去底部褐化部分，将芽丛接种于香蕉继代增殖培养基中。
继代增殖培养中每瓶培养基的接种香蕉芽丛数2代内可为1-2块，3-4代可为3-4块。
继代增殖培养代数视整个细胞工程实验时间而定，一般每2-3周继代一代，可继代增殖培养3-4代。
1.2.3根的诱导等到分化出来的芽长到1-2cm长后，将其从香蕉吸芽组织中切下来，接入生根培养基中，诱导其生根。
1.2.4炼苗和移栽（略）1.2.5培养条件：培养温度为28（-1、+1）℃，光照强度2000—3000LX，光照时间为12h/d（注意香蕉吸芽诱导期无需光照）,每个星期观察一次。
2、实验结果与分析：2.1 对香蕉的吸芽进行诱导培养时，共接种了8瓶，褐化现象不是很严重，诱导率为100%，污染率为0，说明用0.1%的升汞对香蕉的吸芽消毒15-20min的时间控制比较合理，消毒的效果也很好。
2.2 第一次继代培养时获得了7瓶香蕉苗，有1瓶香蕉苗由于褐化现象比较严重而死去。
可能是因为在继代的培养过程中，用刀切去褐化部分时切去的过多，使香蕉基部受伤严重而死亡。
第二次继代培养获得了7瓶香蕉苗，污染率为0，生长状况良好，其中1瓶已经分化出2个芽。
第三次继代培养时，将其中明显分出多个芽的香蕉苗进行分割，共获得了10瓶香蕉苗，污染率为0。
附录2、继代培养实验结果统计表2.3将增殖后的香蕉幼苗接种至生根培养基中，培养7天后观察，发现没瓶中的香蕉苗都有不同长度的根产生，生根率达100%，根的平均长度约为2cm。