设计方案(左氧氟沙星)

盐酸左氧氟沙星片

人体相对生物利用度及生物等效性试验

临床研究方案

华中科技大学同济医学院临床药理研究所

华中科技大学同济医学院国家药品临床研究基地

2004年3月

前言

左氧氟沙星（Levofloxacin）又称可乐必妥、利复星、左氧沙星、Cravit、CVFX，由日本Daiichi（第一制药株式会社）公司开发研制；1993年1月在日本首次上市。国内首次注册时间是1995年，注册号为：X950251。

【药理作用】左氧氟沙星是消旋氧氟沙星的左旋体，其抗菌活性是氧氟沙星的2倍。本品作用于细菌的DNA旋转酶（拓扑异构酶II），通过抑制DNA旋转酶的活性来阻碍DNA复制，从而杀灭细菌；它还可以溶解细菌的部分结构。本品对包括厌氧菌在内的革兰氏阳性菌和阴性菌具有广谱抗菌作用，对葡萄球菌、肺炎球菌、淋球菌、化脓性链球菌、溶血性链球菌、肠球菌、大肠杆菌、克雷白氏杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌等显示有较强的抗菌活性。另外，本品对衣原体、支原体也有抗菌作用。

【体内过程】左氧氟沙星口服吸收迅速、完全，生物利用度接近100%，同服食物不影响吸收。口服后能迅速有效地渗透到全身，在组织或体液中地药物浓度高于血浆浓度。健康成人单剂量口服本品50、100、200mg后，血浆药物浓度达峰时间为0.9~2.4h，峰浓度分别为0.6、1.2、2.0μg/ml，表观分布容积为1.09~1.26L/kg。本品在体内几乎不代谢，血浆半衰期为4.3~6.0h，在口服24h内，用药剂量的80%~85%以原形从尿液中排泄。

【用法用量】（1）口服：每次0.1~0.2g，每日2~3次，疗程为3~7天。用于淋病治疗时，可单剂量顿服0.4~0.6g。（2）静脉滴注：每次0.2~0.3g，每日2次。

【不良反应】本品的不良反应与氧氟沙星相同，但比较轻。主要

的不良反应如下。

1. 过敏反应：偶有浮肿、荨麻疹、热感，有时可出现皮疹，皮肤骚痒，当出现这些症状时应停药；

2. 肾脏：有时会出现血尿素氮升高的现象；

3. 肝脏：有时会出现ALT、AST、ALP升高的现象；

4. 消化器官：有时会出现恶心、呕吐、腹部不适、腹泻、食欲不振、腹痛和消化不良等症状；

5. 血液：有时会出现贫血、白细胞减少、血小板减少或嗜酸性粒细胞增加等现象。因此，用药期间应注意观察，出现异常时应立即停药；

6. 其他：偶有倦怠感、发热、关节痛、悸动或味觉异常等症状。【临床应用】乳腺炎，肛周脓肿，咽喉炎，急性支气管炎，肾盂肾炎，胆囊炎，细菌性痢疾，附件炎及宫内感染，牙周炎。

盐酸左氧氟沙星片人体生物等效性试验

试验设计书

南京三锐药业有限公司研制生产的盐酸左氧氟沙星片属于化学药品六类新药，经国家食品药品监督管理局批准进行临床人体生物等效性试验，批件号为2004L00570。本项研究的目的是比较性评价盐酸左氧氟沙星片在人体的相对生物利用度和生物等效性，是为证实该药在人体吸收程度和吸收速度是否合格而进行的一项试验。

1 试验目的

考察国产盐酸左氧氟沙星片的人体相对生物利用度和生物等效性。

2 药品：

2.1 试验药品（T）：盐酸左氧氟沙星片，规格：100mg/片，批号：021011，标示量：101.1%。由南京三锐药业有限公司研制提供。

2.2 参比制剂（R）：盐酸左氧氟沙星片（左福欣），规格100mg/片，批号：0305112，批准文号：国卫药准字H20010221，由湖南正清制药集团股份有限公司生产，有效期：2005年5月。

2.3 标准对照品：左氧氟沙星标准品（中国药品生物制品检定所，130455-200202，含量：97.2％）。

3 健康志愿者的选择及给药方法：

3.1 健康志愿者选择

选用20名男性，年龄22-24岁，体重应符合标准体重±10%范围，无心、肺、肝、肾、消化道、神经系统、精神异常及代谢异常等病史，

无烟酒等不良嗜好，无过敏史，无体位性低血压。经体检各项指标（如血压、心率、心电图、呼吸状况、肝肾功能、血尿常规和胸部透视）无异常。试验前两周停用任何药物，受试前一周向受试者说明研究的药物和试验内容，并签署知情同意书。

3.2 试验设计：

采用单盲、单剂量、随机、2×2交叉试验设计。即将20名健康受试者随机分为两组，每组各10名。1组先服参比药R，然后服试验药T，两次服药相隔二周，以O表示，即ROT。2组服药顺序为TOR。给药前12小时进清淡晚餐后禁食过夜，于次日早晨空腹口服受试制剂或参比制剂200mg，用200ml温开水送服。服药后2h可以饮水；服药后4h进统一标准午餐。

4 取血时间点的确定

取血时间点：服药前取静脉血一次为空白对照，分别于给药后20min（0.333h），40min（0.667h），1，1.5，2，3，4，6，8，12，24 h时取静脉血3.5ml，血标本收集于肝素化试管内，3000rpm离心10min，取血浆，-40℃保存。

5 血浆样品的处理：

于1.5ml离心管（EP管）中加入待测血浆0.5ml，混匀后加入70%高氯酸30μl，涡旋30秒，12000rpm离心10min，取上清夜20μl进HPLC检测。

6 高效液相色谱法

6.1 HPLC条件

6.1.1 仪器：高效液相色谱仪为Agilent1100系列，包括G1322A 在线脱气机，G1311A 四元泵，G1316A 温控箱，G1315B 二极管阵列检测器，G1328B 手动进样器和Agilent 化学工作站（Rev A.08.03.[847]）。 6.1.2色谱条件：色谱柱为ZORBAX Eclipse XDB-C18（4. 6×150mm ，5μm ，Agilent ，USA ），保护柱为XDB-C18保护柱（Agilent ，USA ）。流动相为乙腈：水：2%冰醋酸（20：10：70，V/V ），流速为1.0ml/min 。检测波长为294nm ，参比波长380nm ，柱温为25℃，检测灵敏度为0.1mAU 。

6.2 分析方法的指标与要求：

标准曲线与线性范围：用空白血浆配制标准溶液制备标准曲线，线性范围应覆盖全部待测浓度，不得外推。 灵敏度：最低检测限为0.1μg/ml 。

精密度：回收率重现性好，日间、日内变异均应<15%，LOQ 附近RSD 应<20%。

回收率：高、中、低三个浓度的回收率应不低于70%。 6.3 血浆样品的稳定性：对血样样品在室温、冰冻和冰融条件下以及不同存放时间进行稳定性考察。

其它各项指标均应与《药物制剂人体生物利用度指导和等效性试验指导原则》一致。 7 生物利用度的计算

100D AUC D AUC F T

R R

T ???=

%

AUC T ：试验制剂的浓度-时间曲线下面积

AUC R：参比制剂的浓度-时间曲线下面积

D R、D T：分别为参比制剂和试验制剂的给药剂量AUC用梯形面积法计算，其它药代动力学参数采用3P97程序计算。

8 试验结果提供的内容:

①F值。

②各健康志愿者的血药浓度-时间数据、均数和标准差。

③各健康志愿者的血药浓度-时间曲线。

④生物利用度有关的参数ln(AUC0-t)、ln(AUC0-inf)和ln(C max)的显著性检验，生物等效性采用等效界值法的双向单侧t检验和90%可信区间。T max的非参数秩和检验。AUC：药时曲线下面积；C max：峰浓度；T max：达峰时间。

⑤其它药代动力学参数，应尽可能提供。

9 完成时间和进度

①准备（选择健康志愿者，建立方法）1个月。

②给药，采集血样，测定血浓2个月。

③数据处理，写报告1个月。

附：试验设计书英语简写

左氧氟沙星片人体生物等效性研究

健康志愿受试者知情同意书

在参加本项研究之前，经过华中科技大学同济医学院国家药品临床研究基地的医生作出充分说明，我已了解到以下情况：左氧氟沙星属于喹诺酮类抗生素，是消旋氧氟沙星的左旋体。其抗菌活性是氧氟沙星的2倍；本品作用于细菌的DNA旋转酶（拓扑异构酶II），通过抑制DNA旋转酶的活性来阻碍DNA复制，从而杀灭细菌；它还可以溶解细菌的部分结构。对MRSA、表皮葡萄球菌、链球菌和肠球菌的抗菌活性强于环丙沙星；对厌氧菌、衣原体、支原体以及军团均也有较强的杀灭作用。对敏感细菌引起的各种急慢性感染、难治性感染均有良好的效果。临床用于乳腺炎，肛周脓肿，咽喉炎，急性支气管炎，肾盂肾炎，胆囊炎，细菌性痢疾，附件炎及宫内感染，牙周炎等感染性疾病的治疗。

该项研究是经南京三锐药业有限公司申请，国家食品药品监督管理局批准，批件号为2004L00570，进行盐酸左氧氟沙星片临床人体生物利用度和生物等效性试验的研究项目。本项研究的目的是比较性评价盐酸左氧氟沙星片在人体的相对生物利用度和生物等效性，是为证实该药在人体吸收程度和吸收速度是否合格而进行的一项试验。

本研究采用单盲、单剂量、随机、2×2交叉试验设计。即将20名健康受试者随机分为两组，每组各10名。1组先服参比试验制剂（R），然后服试验药T，两次服药相隔二周，以O表示，即ROT。2组服药顺序为TOR。给药前12小时进清淡晚餐后禁食过夜，于次日早晨空腹口服受试制剂或参比制剂200mg，用200ml温开水送服。然后在专用病房医师监护下，按规定时间服用药物，并按规定时间点

接受采血。用高效液相色谱法检测血浆左氧氟沙星的浓度，评价盐酸左氧氟沙星片的人体相对生物利用度和生物等效性。

我将接受一般体格检查和实验室检查。第一轮给药结束，休息二周后，服用第二种药物，并接受采血，采血时间点同第一次。另外，研究单位还给予一定数额的营养费。

我也了解到，本品的不良反应与氧氟沙星相同，但比较轻。按规定剂量服用左氧氟沙星片时，主要的不良反应如下。

①过敏反应：偶有浮肿、荨麻疹、热感，有时可出现皮疹，皮肤骚痒，当出现这些症状时应停药；②肾脏：有时会出现血尿素氮升高的现象；③肝脏：有时会出现ALT、AST、ALP升高的现象；④消化器官：有时会出现恶心、呕吐、腹部不适、腹泻、食欲不振、腹痛和消化不良等症状；⑤血液：有时会出现贫血、白细胞减少、血小板减少或嗜酸性粒细胞增加等现象。因此，用药期间应注意观察，出现异常时应立即停药；⑥其他：偶有倦怠感、发热、关节痛、悸动或味觉异常等症状。

同时我被告知，当出现不良反应时应立即停止试验，并到医院检查和做适当的治疗处理。同时可以在任何时间自由退出该项研究。如果在研究过程中退出，需要去医生那里进行咨询和检查。

志愿者应与研究单位密切配合，按照研究单位的要求进行服药、抽血等试验。试验前两周以及试验过程中不服用其他任何药物，不吸烟、饮酒。在试验时，志愿者有可能被分到不同的组别。

研究结果仅因科学目的而发表但不会泄露本人身份，除非法律需要。申报单位，研究单位和国家药政部门将获得在这项研究中的全部记录。

在签此份知情同意书之前，作为受试者我已详细了解上述内容，

并询问伦理，法律及其他信息，得到完整，明确解答。如果我不参加或在此项研究过程中退出，医生会尊重我的决定，我也不会丧失任何合法权利。

鉴于此，我表明自愿参加该项研究，并愿意按照试验要求与研究者密切配合。

志愿受试者（签名）：

医生（签名）：

华中科技大学同济医学院临床药理研究所

华中科技大学同济医学院国家药品临床研究基地

年月日

盐酸左氧氟沙星片人体生物利用度试验

健康志愿者体格检查表

姓名（拼音简写）______________ 性别__ 男____ 编号___________ 年龄______ 岁身高_______ 米体重________公斤体重指数

一、个人史

既往史_________

现病史_______________

药敏史_________

二、体格检查

呼吸__________次/分体温__________℃血压__________mmHg

心率__________次/分心律__________

胸部____________________ 肺部___________

三、实验室检查

血常规：Hb_______g/L WBC________x109/L （N___ % L___ %）PLT________x109/L

尿常规：尿蛋白_______ 管型_______ 上皮_______

红细胞_______ 白细胞_______

肝功能：TBil__________umol/L AST__________U/L ALT__________U/L

肾功能：BUN__________mmol/L Scr__________umol/L

四、特殊检查

心电图__________________________________________

胸透__________________________________________

负责医生（签名）__________

年月日

盐酸左氧氟沙星片人体生物等效性试验

病历观察表首页

受试者姓名（拼音简写）：编号：

性别：男

通讯地址联系电话

剂量：200mg 给药时间：2004年月日am ：时分人选时间：年月日

试验单位：

观察地点：

观察时间：年月日～月日

负责医生（签名）__________

表1 盐酸左氧氟沙星片给药及给药后具体操作表

编号：

剂量：200mg 给药时间：2004年月日am ：时分

取血量若不足3ml，则如实填写。

操作者

表2 盐酸左氧氟沙星片给药前后生命体征检查表

编号：

剂量：200mg 给药时间：2004年月日am ：时分

体温：药前，药后1、8、24小时测定；除非有自觉发热或脉搏加快，其余时间一般不测。

观察者：（医师签名）

表3盐酸左氧氟沙星片给药后不良反应观察表

编号：

剂量：200mg 给药时间：2004年月日am ：时分

备注：（-）表示无反应；（+）表示轻微反应；（++）（+++）表示症状相应加重

不良反应的处置：

严重不良反应及处置：

观察者：（医师签名）

盐酸左氧氟沙星片人体生物等效性试验

研究者名单

课题负责人：代宗顺教授

试验设计人：代宗顺邱相君

样品采集人员：吴立

分离血清人员：吴立

样品保管人员：吴立

临床监护人员：周际安

试验测试人员：邱相君胡国新

数据分析人员：邱相君胡国新

研究方案的评价

【用药剂量】本试验设计的给药剂量为单剂量口服200mg的左氧氟沙星片，属于常规用量。

【分析方法】本试验设计采用的血浆药物浓度分析方法为高效液相色谱法，为经典的检测方法。文献报道，单剂量口服200mg左氧氟沙星片的峰浓度为2μg/ml左右。最低检测限为0.1μg/ml，已经达到峰浓度的1/20；符合生物等效性指导原则的要求。

【不良反应观察】在本临床研究设计采用的不良反应观察指标是盐酸左氧氟沙星常见的不良反应，且在整个试验过程中由临床医生负责监护和观察；保证了受试者的安全。

参考文献

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