丹参有效成分的分离与提取丹参有
丹参的提取纯化实验报告

一、实验目的1. 学习丹参药材的提取和纯化方法。
2. 掌握薄层色谱法、高效液相色谱法等分离纯化技术。
3. 提高对丹参药材中主要活性成分的认识。
二、实验原理丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)为唇形科植物,其根茎入药,具有活血化瘀、通络止痛、清心除烦等功效。
丹参中含有多种活性成分,如丹参酮、丹酚酸等。
本实验采用乙醇提取法提取丹参中的有效成分,利用薄层色谱法进行初步分离,再通过高效液相色谱法进行纯化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:丹参药材(干燥)、乙醇、正己烷、硅胶、薄层板、高效液相色谱仪等。
2. 仪器:电子天平、回流提取器、旋转蒸发仪、薄层色谱仪、高效液相色谱仪等。
四、实验方法1. 丹参提取(1)称取干燥丹参药材10g,置于回流提取器中;(2)加入50mL 95%乙醇,回流提取1h;(3)冷却,过滤,收集滤液;(4)将滤液旋转蒸发至近干,用正己烷溶解,备用。
2. 薄层色谱分离(1)制备薄层板:将硅胶均匀涂布在玻璃板上,晾干;(2)点样:将提取液点于薄层板上,晾干;(3)展开:将薄层板置于展开缸中,加入正己烷,展开至溶剂前沿;(4)显色:将薄层板取出,晾干,喷以10%FeCl3乙醇溶液,显色。
3. 高效液相色谱纯化(1)制备样品:将薄层色谱分离得到的化合物溶解于甲醇中,制成一定浓度的样品溶液;(2)色谱条件:色谱柱:C18柱;流动相:甲醇-水(体积比80:20);流速:1.0mL/min;检测波长:254nm;(3)进样:将样品溶液进样,记录色谱图。
五、实验结果与分析1. 薄层色谱分离结果通过薄层色谱分离,观察到丹参药材中存在多个斑点,说明丹参中含有多种活性成分。
2. 高效液相色谱纯化结果通过高效液相色谱纯化,成功分离出丹参中的主要活性成分,如丹参酮IIA、丹参酮IIB等。
六、实验结论1. 本实验采用乙醇提取法成功提取了丹参中的有效成分;2. 通过薄层色谱法对丹参中的活性成分进行了初步分离;3. 高效液相色谱法进一步纯化了丹参中的主要活性成分。
丹参有效成分的分离与提取

丹参有效成分的分离与提取(作者: _________ 单位:___________ 邮编:___________ )【关键词】丹参;隐丹参酮;丹参酮H A丹参为唇形科多年生草本植物,丹参的干燥根及根茎,主产于四川、安徽、江苏及河南等省。
春秋两季采挖,除去茎叶泥沙,须根晒干。
其根茎短粗,顶端有残留茎基,根数条,长圆柱形,略弯曲,有的分枝并有须状细根,长10-20 cm,直径0.3-1 cm,表面棕红色或暗棕红色,粗糙,具纵皱纹,老根外皮疏松,多显紫棕色,常呈鳞片状脱质硬而脆,断面疏松,有裂隙或略平整而致密,皮部棕红色,本部灰黄色或紫色,导管束黄白色,呈放射状排列,气微,味微苦涩。
丹参有效成分主要有脂溶性非醌色素类化合物,如丹参酮H A、丹参酮HB、隐丹参酮及其异构体。
水溶性酚酸类成分如原儿茶醛、丹参素。
其中,隐丹参酮是抗菌的有效成分。
1材料与方法1.1材料与试剂丹参粉末,乙醇,苯,氧化铝,丙酮。
1.2实验方法取丹参粉末,用乙醇热煮,煮沸15-20 min,用苯洗脱过滤,洗脱液经氧铝(皿级)层析,再用苯洗脱,样品呈紫色样段,橙红色样段,暗红色样段,取橙红色样段经过苯洗脱,再用丙酮洗脱,呈板状结晶,为丹参酸甲脂,呈橙红色结晶,为隐丹参酮。
将暗红色样段,氧化铝棒置容器中,经苯洗脱,再用丙酮洗脱,呈暗红色结晶,为丹参酮H A。
隐丹参酮与丹参酮H A为脂溶性成分,样品的甲醇提取液,回收溶剂至干,残渣溶于氯仿期滤,滤液加水振摇静止,取氯仿层浓缩至干,加氯仿显色。
原儿茶醛、丹参素为水溶性成分,用荧光法鉴别。
取本品粉末,置白瓷板上,于紫外灯(365 mm)下检视,呈灰色荧光,即原儿茶醛。
薄层色谱法:样品水提液,浓缩后,以80% 醇沉,用盐酸调值,pH 2,乙醚萃取,醚提取液挥去乙醚,用乙醇溶液,点于硅胶G (或H)—羧甲基纤维素钠薄层板上,先以苯一乙酸一乙甲酸(4 : 1)展开1 cm取出挥溶剂再以苯一乙酸乙酯一甲酸(80 : 50 8)展开,以三氯化铁一铁氰化钾(1 1)试剂显色。
丹参中主要成分的提取分离标准工艺简述

丹参最重要具有旳成分为脂溶性旳二萜类成分和水溶性酚酸类成分,因此在设计丹参提取分离时,重要考虑旳是这两类物质旳提取过程。
其中脂溶性成分以丹参酮ⅡA为重要有效成分,其含量也相对较高;而水溶性成分以丹参素、丹参酚酸类、原儿茶醛为重要成分,原儿茶醛虽为活性成分,但其在丹参中含量很低。
且水溶性成分对于热旳敏感性强,脂溶性成分有升华性,在长时间热解决过程中容易成分损失。
1、提取已知丹参中成分热不稳定,采用梯度渗漉法对脂溶性成分和水溶性成分进行提取。
先以95%乙醇对丹参药材进行浸泡溶胀一段时间后,再用95%乙醇进行渗漉,采用正交法选用合适旳渗漉速率,注意低温操作。
滤去渗漉液A(重要为提取丹参酮等脂溶性成分),再用8倍量水对药渣进行渗漉,滤去渗漉液B,提取水溶性成分。
两份渗漉液均需要采用减压浓缩旳方式进行合适浓缩,温度不适宜过高,时间也不适宜过长。
2、分离对渗漉液A可以采用水沉法进行精制。
由于丹参酮ⅡA等二萜醌类成分具有共轭体系,刷型作用力强,也可以选用合适旳大孔树脂吸附进行分离,再使用95%旳乙醇进行解吸附。
对渗漉液B可以采用醇沉法,查资料可以加醇使药液含醇量达50%,能减少成分旳损失,起到最佳旳分离效果。
此外,由于水溶性酚酸成分中,丹酚酸具多种酚羟基、且分子量较大,可以采用大孔吸附树脂和聚酰胺树脂吸附旳措施进行分离;而丹参素与原儿茶醛分子量不不小于丹酚酸类成分,分子间作用力相对于丹酚酸类较小,因此与水旳亲和力更大,更适合于阴离子互换树脂进行分离。
若要对丹酚酸类成分过大孔树脂进行分离,可采用先用水洗脱,再用醇洗脱旳方式进行分离纯化。
3、超临界流体萃取法超临界流体萃取法是现行以便、有效提取丹参中有效成分旳措施,同样在条件旳选择上需要控制温度、压力、时间等因素,此外可以加入合适旳夹带剂来提高提取效率。
如脂溶性成分可以加入高浓度旳乙醇来增长脂溶性成分旳溶解性,而水溶性成分也可以选用合适旳夹带剂,有文献提出可以选用10%醇和非离子表面活性如吐温旳混合体系溶液进行提取。
丹参的有效成分提取分离方法研究进展

南阳医学高等专科学校2011届毕业生毕业论文题目丹参的有效成分提取分离方法研究进展完成人刘奕心班级 09升段中药班学制二年制专业中药学指导教师吴杰完成日期 2011年3月12号丹参的有效成分提取分离方法研究进展【摘要】本文综述了丹参有效成分的各种提取分离技术,其中包括超临界流体萃取技术、微波辅助萃取法、加压液体萃取法、高速逆流色谱法和真空液相层析法等,并分别对其优缺点进行分析,为丹参药理学活性物质基础的研究提供参考。
【关键词】丹参; 有效成分; 提取分离丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎,始载于《神农本草经》,被列为上品,历代本草均有收载。
其味苦、性微寒,归心、肝二经。
具祛瘀止痛、活血通经、清心除烦之功效,是一种临床应用广泛的中药。
其现代药理作用主要包括舒张冠脉、增加冠脉血流量,具有明显的钙拮抗剂作用;提高心室的顺应性,改善心脏的舒张功能,对缺血心肌和再灌注心脏具有保护作用;抑制内源性胆固醇的合成;增加微循环流速和流量,消除局部静脉血液瘀滞,改善组织细胞缺血、缺氧所致的代谢障碍;具有抗体外血栓形成、抗血小板聚集、抗内外凝血系统功能、减少血小板、促进纤维蛋白原降解作用;具有很强的清除自由基和抗氧化作用等[1]。
随着人类疾病谱的变化,丹参作为能够预防和治疗人类面临的几大危险疾病的植物药之一,它的应用将会更加广泛。
近年来,丹参的临床疗效备受关注,因此,丹参有效成分的提取分离成为一个研究热点。
随着提取分离技术的发展,研究丹参有效成分的手段呈现出多样化,如超临界流体萃取技术(supercritical fluid extraction,SFE)、微波辅助萃取法(microwave-assisted extraction,MAE)、加压液体萃取法(pressurized liquid extraction,PLE)、高速逆流色谱法(high-speed counter-current chromatography,HSCCC)和真空液相层析法(vacuum liquid chromatography,VLC)等。
丹参总有效成分的提取

丹参总有效成分的提取丹参又名赤参,紫丹参,红根等。
为双子叶植物唇形科Labiatae鼠尾草属植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎。
主产于安徽、河南、陕西等地。
功效:活血调经,祛瘀止痛,凉血消痈,清心除烦,养血安神。
根主含二萜醌类色素, 丹参酮(tanshinone)Ⅰ, ⅡA, ⅡB, 隐丹参酮(cryptotanshinone), 异丹参酮(isotanshinones)Ⅰ, Ⅱ, 异隐丹参酮(1socryptotanshinone), 丹参新酮(miltirone), 丹参酸甲酯(methyl tanshinonate), 羟基丹参酮ⅡA(hydroxytanshinone), 二氢丹参酮Ⅰ(dihydrotanshinone I), 丹参新醌甲、乙、丙, 次甲丹参醌(methylenetanshinquinone)和鼠尾草酚(salviol).另报道含铁锈醇(ferruginol)、Δl-丹参新酮(Δl-dehydromiltirone)、Δl-丹参酮ⅡA (Δl-dehydrotanshinone IIA)、丹参新醌丁(danshenxinkun D)和1, 2二氢丹参醌等.除二萜醌类化合物外, 尚含原儿茶醛(protocatechuic aldehyde)、β-谷甾醇和D(+)β-(3, 4一二羟基苯基)乳酸(即丹参素, 丹参酸甲), 以及缩羧酸化合物(salvianolic acids)A, E等。
取丹参除杂,以粉碎机粉碎过20目筛。
将丹参药粉装入提取罐中,加入体积比为20:1的95%的乙醇,进行蒸煮2h浸出。
将浸出液输入到减压浓缩罐中,回收乙醇后将水溶液浓缩到小体积,成为稠浸膏状。
加入浸膏量2倍的2%氢氧化钠水溶液,边加边搅拌、放置、沉淀完全后过滤。
沉淀用蒸馏水洗到中性。
在60℃以下烘干,粉碎成细粉,过60目筛即得成品。
此产品为生产“丹参舒心片”的原料药,每片含丹参提取物0.2g。
丹参的研究进展

丹参的研究进展关键词:丹参;有效成分;提取分离;药理作用;研究进展摘要:丹参是我国应用最为广泛的中草药之一,具有多种药理作用,本文综述了丹参的有效成分、有效成分的提取分离技术和丹参的临床药理作用的研究进展。
The research progress of Slavia miltiorrhiza BungeKey words:Slavia miltiorrhiza Bunge;Effective components ;Extraction and separation ;Pharmacological action ;Research progress Abstract:Slavia miltiorrhiza Bunge is one of the most widely used Chinese traditional medicine .It has many pharmacological effects.This paper reviewed the active components of Salvia miltiorrhiza Bunge, the technology of extraction and separation of the effective ingredients and the research progress of the effect of clinical pharmacology.1 前言丹参(Slavia miltiorrhiza Bunge)为唇形科鼠尾草属多年生草本植物,药用部位主要为其干燥的根茎,是我国应用最为广泛的中草药之一。
主要产于安徽、山西、河北、四川和江苏等地,现全国大部分地区均有分布。
丹参始载于《神农本草经》,列为上品。
以后历代本草均有记载,《吴普本草》载:“茎华小,方如茬,有毛,根赤,三月五月采根,阴干。
”《本草图经》称:“二月生苗,高一尺许,茎干方棱,青色。
丹参的有效成分提取分离方法研究进展

丹参的有效成分提取分离方法研究进展丹参是一种常见的中药材,其有效成分主要包括丹参酮、丹酚酸B和丹酚酸A等。
这些成分具有抗炎、抗血栓、心肌保护和抗氧化等多种药理活性,因此具有广泛的临床应用前景。
为了提高丹参的药效和药品质量,开展丹参有效成分的提取与分离研究具有重要意义。
丹参有效成分的提取方法包括传统的水煎提取、超音波辅助提取、微波辅助提取、超临界流体萃取等。
水煎提取是最常用的方法,其优点是简单易行。
然而,水煎提取时间长,繁琐,且溶剂用量大,易造成有效成分的破坏和损失。
超音波辅助提取和微波辅助提取利用超声波和微波的物理效应,能够加速丹参有效成分的溶解和扩散,提高提取效率。
超临界流体萃取则是将CO2等作为溶剂,利用其溶解力和物理性质的变化,在超临界条件下进行提取,可避免传统有机溶剂对环境的污染。
丹参有效成分的分离方法主要包括液相色谱技术、薄层色谱技术、气相色谱技术和高效液相色谱技术等。
液相色谱技术是最常用的方法,如高效液相色谱、逆向离子色谱、超高效液相色谱等,其中超高效液相色谱技术由于其高分离能力和灵敏度,成为丹参有效成分分离的主流方法。
薄层色谱技术虽然简单易行,但分离能力较低,通常用于快速初步分析和鉴别。
气相色谱技术适用于揭示丹参有效成分的挥发性组分,但无法处理不挥发的成分。
此外,还可利用超滤、纳滤、离心等膜分离技术对丹参有效成分进行分离,其中超滤技术适用于分离较大的有机酸类成分,纳滤技术适用于分离较小的多酚类成分。
目前,研究人员致力于开发新的提取分离方法,如超声辅助超临界流体萃取、固相微萃取和离子交换膜萃取等。
超声辅助超临界流体萃取将超临界流体和超声波相结合,能够提高提取效率和提取选择性。
固相微萃取是将固相材料与样品接触,利用纯净水等溶剂进行脱附,可避免有机溶剂的使用。
离子交换膜萃取则是利用离子交换膜的选择性吸附特性,对丹参有效成分进行选择性分离。
总之,丹参有效成分的提取分离方法研究已取得了一定的进展。
丹参提取实验报告

一、实验目的本实验旨在通过提取丹参中的有效成分——丹参酮,了解丹参的提取方法,掌握提取过程中各步骤的操作要点,并对提取效果进行评价。
二、实验原理丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)为唇形科植物,其根茎富含多种生物活性成分,其中以丹参酮为主要的有效成分。
丹参酮具有扩张血管、降低血脂、抗凝血、抗肿瘤等药理作用。
本实验采用有机溶剂萃取法提取丹参中的丹参酮,通过薄层扫描法和高效液相色谱法(HPLC)对丹参酮进行含量测定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料- 丹参根茎:新鲜,经清洗、晾干后备用。
- 甲醇、氯仿、正己烷:分析纯。
- 石油醚:分析纯。
- 薄层层析板、硅胶G薄层板。
- 硅胶G:色谱用。
- 标准品:丹参酮IIA、丹参酮IIB、丹参酮III、丹参酮IV。
2. 实验仪器- 薄层扫描仪。
- 高效液相色谱仪。
- 分析天平。
- 热水浴锅。
- 漏斗、滤纸、滴管、试管等。
四、实验方法1. 丹参酮的提取(1)称取一定量的干燥丹参根茎,用甲醇回流提取2小时,过滤,滤液减压浓缩至干,残渣用石油醚溶解,转移至分液漏斗中。
(2)将分液漏斗中的溶液与氯仿混合,静置分层,取氯仿层,再用少量氯仿洗涤水层,合并氯仿层。
(3)将氯仿层减压浓缩至干,残渣用甲醇溶解,转移至容量瓶中,定容至刻度。
2. 薄层扫描法测定丹参酮含量(1)制备薄层层析板:将硅胶G均匀涂布于薄层板上,晾干后备用。
(2)点样:取丹参提取液适量,点于薄层板上,重复3次。
(3)展开:将薄层板放入展开缸中,用氯仿-甲醇(体积比8:2)为展开剂,展开至距底边2cm处。
(4)显色:取出薄层板,晾干后,喷以10%硫酸乙醇溶液,于105℃烘箱中加热5分钟。
(5)扫描:将薄层板放入薄层扫描仪中,进行扫描,测定丹参酮的含量。
3. 高效液相色谱法测定丹参酮含量(1)色谱条件:色谱柱:C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇-水(体积比80:20);流速:1.0ml/min;检测波长:272nm。
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丹参有效成分的分离与提取【关键词】丹参;隐丹参酮;丹参酮IIA丹参为唇形科多年生草本植物,丹参的干燥根及根茎,主产于四川、安徽、江苏及河南等省。
春秋两季采挖,除去茎叶泥沙,须根晒干。
其根茎短粗,顶端有残留茎基,根数条,长圆柱形,略弯曲,有的分枝并有须状细根,长10-20 cm,直径0.3-1 cm,表面棕红色或暗棕红色,粗糙,具纵皱纹,老根外皮疏松,多显紫棕色,常呈鱗片状脱质硬而脆,断面疏松,有裂隙或略平整而致密,皮部棕红色,本部灰黄色或紫色,导管束黄白色,呈放射状排列,气微,味微苦涩。
丹参有效成分主要有脂溶性非醌色素类化合物,如丹参酮IIA、丹参酮IIB、隐丹参酮及其异构体。
水溶性酚酸类成分如原儿茶醛、丹参素。
其中,隐丹参酮是抗菌的有效成分。
1材料与方法1.1材料与试剂丹参粉末,乙醇,苯,氧化铝,丙酮。
1.2实验方法取丹参粉末,用乙醇热煮,煮沸15-20 min,用苯洗脱过滤,洗脱液经氧铝(I I I级)层析,再用苯洗脱,样品呈紫色样段,橙红色样段,暗红色样段,取橙红色样段经过苯洗脱,再用丙酮洗脱,呈板状结晶,为丹参酸甲脂,呈橙红色结晶,为隐丹参酮。
将暗红色样段,氧化铝棒置容器中,经苯洗脱,再用丙酮洗脱,呈暗红色结晶,为丹参酮IIA。
隐丹参酮与丹参酮IIA 为脂溶性成分,样品的甲醇提取液,回收溶剂至干,残渣溶于氯仿期滤,滤液加水振摇静止,取氯仿层浓缩至干,加氯仿显色。
原儿茶醛、丹参素为水溶性成分,用荧光法鉴别。
取本品粉末,置白瓷板上,于紫外灯(365 ram)下检视,呈灰色荧光,即原儿茶醛。
薄层色谱法:样品水提液,浓缩后,以80%醇沉,用盐酸调值,pH 2,乙醚萃取,醚提取液挥去乙醚,用乙醇溶液,点于硅胶G(或H) —羧甲基纤维素钠薄层板上,先以苯一乙酸一乙甲酸(4 :4 :1)展开1 cm取出挥溶剂再以苯一乙酸乙酯一甲酸(80 :50 :8)展开,以三氯化铁一铁氰化钾(1 : 1)试剂显色。
0. 2. 1指纹图谱参照高效液相色谱法(《中国药典》2000版1部VID)测定。
系统适用性试验十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,流速0.5mL/min,检测波长为281 nm,理论板数按原儿茶醛峰计算,应不低于5000,见表1、表2。
表 1 二元梯度洗脱参数表2特征峰相对保留时间表3特征峰标准相对峰面积1.2.2对照品溶液的制备取原儿茶醛对照品适量,精密称定,加甲醇制成相当于每2 mL含原儿茶醛0.01 mg的溶液,摇匀,即得。
1.2.3供试品溶液的制备取含量测定项下供试品溶液。
1.2.4测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10 mL,注入液相色谱仪,根据色谱峰面积,按照指纹图谱技术要求测定,即得。
1.2.5确定10个特征峰1号峰为丹参,2号峰为原儿茶醛(参照物S),10号峰为丹酚酸B。
指纹图谱见图1。
图1丹参HPLC指纹图谱1.2.6丹参素的鉴别0. 2. 6. 1取本品粉末5 g,加水50 mL,煎煮15-20 min,放冷,滤过,滤液置水浴上浓缩至粘稠状,放冷后,加乙醇3-5 mL使溶解,滤过,取滤液数滴,点于滤纸上。
午后,置紫外线灯(365 nm)下观察,显亮蓝灰色荧光,将滤红悬挂在浓氨溶液瓶中(不接触液面),20 min后取出,置紫外灯(365 nm) K观察,显亮蓝灰色荧光。
0.2. 6. 2取前项下的滤液0.5 mL,加三氯化铁液1-2滴,显污绿色。
1. 2. 6. 3取本品粉末1 g加乙醇0. 5 mL,置具塞试管中,振摇,放置1 h,滤过,滤液挥干,残渣加醋酸乙酯 1 mL溶解作为供试品溶液。
另取,丹参对照药材 1 g,同法制成对照液药材溶液再取丹参酮IIA对照品加醋酸乙酯制成每 1 raL含2 mg的溶液,作为对照品溶液。
照薄层色谱法(《中国药典》2000年版的1部附录VIB)试验,吸取上述3种溶液各5 mL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以苯一醋酸乙酯(19 : 1)为展开剂,展开,取出,晾干。
供试品色谱中,在与对照药材色谱相应位置上,显相同颜色斑点;在与对照品色谱相应的位置上,显相同的暗红色斑点。
1.2.7原儿茶醛的鉴别1.2. 7.1样品的水提液浓缩用盐酸调至pH 2,乙醚萃取,醚提液挥去乙醚,用乙醇溶解,点于硅胶G(或H) CMC板上,以苯乙酸乙酯甲醇(80:50: 8)展开。
以氯化铁铁氰化钾(1 : 1)试剂显色。
1.2. 7.2样品前项下的制备点样液。
点于硅胶H CMC板上,以(I)苯乙酸乙酯甲酸(80 : 70 : 8)或(II)氯仿丙酮甲醇甲酸(70 : 20 : 15 : 5)展开,紫外灯下检视后喷三氯化铁、铁氰化钾(1:1)试剂,再将薄板置0. 1MHCL中泡数分钟,流水冲去酸液显色。
2实验结果2.1化学结构见图2。
图2参照高效液相色谱法(《中国药典》2000版1部VID)测定。
2.2系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相;甲醇水醋酸(8 :91 :1)为流动相;检测波表为281 nm。
理论板数按丹参素峰计算,应低于2000。
2.3对照品溶液的制备精密称定丹参素钠对照品适量,加甲醇制成相当于每1 mL含丹参0. 15 mg的溶液(1 mL丹参素钠相当于0. 900 mg丹参素),摇匀,即得。
2. 4供试品溶液的制备精称丹参药材 5. 0 g加入30 mL,水浴回流 2 h,放冷,过滤精取滤液2 mL,甲醇定容25 mL,摇匀,即得。
1. 5测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 mL,注入液相色谱仪,根据色谱图的峰面积,以外标法进行计算,即得。
本品含丹参素(C9H1005)不得少于1%;按《中国药典》2000版丹参中丹参酮IIA含量测定法测定,丹参酮IIA(C9H1803)不得少子0. 20%。
3讨论中药的提取应该严格按照具体药品品种的提取工艺而进行。
得到的成品必须按标准进行检验,符合持量标准的才能用于药品制剂的生产。
丹参的分离提取要注意原料的选择,原料要优质,测量光密度选择原料较可靠。
丹参的得取生产现场内选题保证部门应派现场质量管理员进行现场控制。
做好生产现场监控记录,转序、药品检验、取样、异常情况处置及现场物品定置、定位等的管理,从而保证最终产品检验合格,保证产品质量和稳定性。
本实验中,从中药丹参中提取得到多种菲醌衍生物,丹参醌结构己具有菲醌母核,但生源都属于二萜类,丹参中有效成分之间溶解各不相同,故提取方法也多种多样。
一般选用甲醇、乙醇作为提取溶剂,把不同的有效成分提取出来,浓缩后再进行提取分离。
它的质谱特征是分子、离子峰为基峰;游离醌依次脱去2个分子C0,得到M CO及M 2C0的强峰以及它们的双电荷峰,见图3。
图3由于丹参的有效成分都在酚羟基,故具有酸性,易溶于碱性溶剂。
分子中酚羟基的数目及位置不同,酸性强弱也不一样。
羟基数目越多,酸性越强。
如用碱性不同和水溶液;15%碳酸氢氧钠溶液、5%碳酸钠溶液、1%氢氧化钠溶液、5%氢氧化钠溶液,依次提取,其结果为酸性较强的化合物被碳酸氢钠提取,酸性较弱的合物被酸钠提取,酸性更弱的化合物被1%的氢氧化钠提取,酸性最弱的化合物只能溶于5%的氢氧化钠。
由于氧原子的存在,其它具有微弱的碱性,能溶于H2S04,成盐后再转迈出有离子,并伴有颜色的改变。
在本实验中,成功提取了丹参的有效成分隐丹参酮和丹参酮IIA。
通过薄层层析法,先用苯洗脱丹参粉末,呈现出3种不同和颜色样段;再用丙酮洗脱后,呈现出橙红色结晶的部分即为隐丹参酮,呈暗红色结晶的为丹参酮IIA。
二者均为脂溶液性成分。
提取出的原儿茶酸和丹参素为水溶性成分。
在紫外灯下显灰色荧光和即为原儿茶酸,其含有较多酚羟基,可与体内的葡萄糖醛酸和硫酸发生体内药物代谢和第II相反应,生成丹参素硫酸结合物与原儿茶醛葡萄糖醛结合物。
利用荧光法可鉴别丹参又一有效成分丹参素。
先在紫外线灯下显亮蓝色荧光,滤纸悬挂在浓氨溶液瓶中,20 min后紫外灯下显亮蓝绿色荧光,其滤液加三氯化铁后显污绿色。
以上2种水溶性成分当遇水或乙酸时易溶解、分离。
本实验中提取和分离了丹参中的有效成分原儿茶醛、丹参素、丹参酮IIA、隐丹参酮。
临床上提取有效成分制剂的药物主要有丹参注射液、冠心宁、复方丹参片、复方丹参滴丸等。
其有效成分的成功提取与分离加快了利用丹参类药物医治心脑血管疾病和步伐,以此理论精制的有关药物也相继问世。
这类药物可以经口腔粘膜及舌下粘膜吸收,直接进入人体血液循环。
同时减少了胃肠道消化液和肝脏首过效应对其有效成分的降解和破坏,大大提高了人体生物利用度,充分体现高效之特点。
用丹参制成的药物直接或间接降低血小板凝聚性、血液中和甘油三酯和胆固醇的含量,抑制低密度脂蛋白的形成,有效地抑制内原性胆固醇的合成,从而降低了总胆固醇的含量,扩张血管保护内膜,改善供血供氧,增强心肌收缩力,有效减少冠脉血管堵等症状,使冠心病得到良好的控制和减轻[1-4]。
丹参有效成分提取与分离的先进技术还有待于进一步的讨论和研究。
笔者从接触丹参有效成分的文献整理到研究总结过程中,深深的体会到丹参制剂在临床上获得充分的验证,获得医生和病人的一致高度评价。
又反过来,对其进行更深入的研究,这一过程本身,已经形成对中药有效成分和分离与提取研究的一条通道,也使中药现代化之途具有更深远的意义。
研究中药的有效成分,既要注意发掘、整理中国医药学遗产,又要运用现代科学知识和方法,通过对中药有效成分和研究,可以发现结构新颖或新的用机理的活性物质,并以此为先导化合物进行结构改造或修饰,从中找出高效、低毒的新药;也可为原药材的适时采集、正确加工、控制质量、安全使用等方面提供科学依据;还可以通过植物科属亲缘关系,为扩大药源、寻找新药源提供有效和途径。
【参考文献】[1]郑国墀,柿泽宽.丹参化学顾分的研究概括[J].中国药学杂志,1989,24(1): 6.[2] 孔得云.丹参化学成分[J].中国医学工杂志,1989,20(6):279.[3] 衷敬柏,王阶.复方丹参研究的文献分析[J].中国中医药信息杂志,2001,8(6): 10.[4]李承珠,杨诗春,赵凤娣.丹参素养抗凝血作用的研究[J].中西医结合杂志,1983,3:29-299.。