实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件
、实验目的
1、掌握分光光度计的原理、构造和使用方法。
2、学习分光光度计分析中如何确定最佳实验条件。
、实验原理
在可见光区分光光度法测量中，通常是将被测物质与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。显色反应的程度受显色剂用量、显色时间，显色液酸度等条件的影响，通过实验，确定合适的显色条件。
三、仪器及试剂
分光光度计；1cm 吸收池；10mL移液管；25mL 容量瓶,100ml 容量瓶
1．铁标准溶液
100μg·mL -1（即0.01 mg·mL-1）铁标准溶液：准确称取0.3511g（NH 4）2 Fe（SO4）2·6H 2O 于烧杯中，用2 mol ·L-l盐酸15 mL 溶解，移入500 mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。
用前，准确稀释10 倍成为含铁10 ug·mL -1标准溶液。
2. 1g.L -1邻二氮菲：1.0 g 邻二氮菲于小烧杯中，加入5-10ml 95%乙醇溶液溶解，再用水稀释到1000 mL 。
3. 10％盐酸羟胺水溶液：10％水溶液（现用现配，避光保存）
4. 醋酸钠溶液1mol/L
5. 0.8 mol/L 氢氧化钠溶液
四、实验步骤
1、吸收曲线的制作和测量波长的选择
用移液管吸取0.0ml、2.0mL 10 ug ·mL -1标准溶液，分别注入二个25 mL 容量瓶中，加入1.0mL10% 的盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min ；再加2 mL 邻二氮菲溶液，2.5mL 醋酸钠溶液溶液，用水稀释至刻度，摇匀。放置5min 后，用1cm 比色皿，以试剂空白为参比，在440~560nm 之间，每隔10nm 测一次吸光度，其中在500-520 nm 之间，每隔5nm 测一次吸光度。然后以波长为横坐标，吸光度A 为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。2、显色剂用量影响
在7 只25mL容量瓶中，各加2.0 mL 10 ug·mL -1铁标准溶液和1.0 mL 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min。分别加入0.1、0.25、0.5、1.0、2.0、3.0 、4.0ml 1g.L-1邻二氮菲溶液，再各加2.5mL 1mol/L 醋酸钠缓冲溶液，以水稀释至刻度，摇匀。放置5min 后，以水为参比，在510 nm 测量各溶液的吸光度。
其中，加2.0 mL 1g.L-1邻二氮菲溶液的显色溶液不要倒掉，用于时间影响的测定。
3、显示时间的影响
取上述1 中加2.0 mL 1g.L -1邻二氮菲溶液的容量瓶，在显色时间为10min 、20min 、30min 、
40min 、50min 、60min 分别测定吸光度值。
4、溶液酸度的影响
在7 只25mL容量瓶中，各加入2.0 mL 10 ug ·mL -1铁标准溶液和1.0 mL 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min ，再各分2.0ml 邻二氮菲溶液，摇匀。然后，分别用移液管准确吸取加人0.8 mol· L-1 氢氧化钠溶液0.0 、0.5 、1.0，2.0 ，3.0，4.0 、5.0ml 于容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀，放置10min 。
用精密pH试纸测定上述溶液pH值，同时在分光光度计上，波长为510 nm，以水为参比测定各溶液的吸光度。
五、数据记录
1. 最大吸收波长的确定
2、显色剂用量的影响
3、显色时间的影响
4
六、结果讨论与思考
1. 分别以波长、显色剂体积、显色时间、溶液pH 为横坐标、相应的吸光度为纵坐标，绘制曲线，确定最大吸收波长、合适的显色剂用量、显色时间、溶液pH 是多少？2．分光测定中比色皿盛放溶液的体积为多少，用手拿比色皿时应注意什么？
实验二邻二氮菲分光光度法测定微量铁的浓度
一、实验目的
1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法2．了解分光光度计的构造、性能及使用方法
二、实验原理
邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在pH=2～9 的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。配合物的lgK稳＝21.3，摩
尔吸光系数510 ＝11000 L m·ol-1·cm-1。
在显色前，用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子。
4Fe3+＋2NH2OH→4Fe2+＋N2O ＋4H＋＋H2O
测定时，控制溶液pH＝5 较为适宜，酸度高时，反应进行较慢，酸度太低，则二价铁离子水解，影响显色。
用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH 范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。
三、仪器与试剂
l mol L·-1醋酸钠、10%盐酸羟胺、0.1%邻二氮菲溶液、10 μg·mL-1铁标准溶液、分光光度计等。
四、实验步骤
1、标准曲线的绘制取25 mL 容量瓶6 个，分别准确吸取的10μ gm·L-l 铁标准溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0和5.0 mL于各容量瓶中，各加10％盐酸羟胺溶l mL ，摇匀，2 min后再各加醋酸钠溶液2.5 mL和0.1％邻二氮菲溶液2 mL，以水稀释至刻度，摇匀。10min 以后，在分光光度计上用l cm 比色皿，在最大吸收波长510 nm 处以试剂空白为参比测定各溶液的吸光度。记录实验数据。
（2）吸取未知液5 mL，按上述与标准曲线相同条件和步骤测定其吸光度。做3 个平行，记录实验数据。
五、数据记录与处理
1．以铁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，用EXCEL 绘制标准曲线、线性方程、相关系数。
2．计算未知液3 份平行样的铁浓度和平均浓度（g·L-1）。
六、思考
1. 在实验中盐酸羟胺和邻二氮菲的作用分别是什么？
2、实验中试剂空白的作用是什么？
3、简述可见光分光光度计的操作步骤。
实验三土壤中水溶性盐的提取及原子吸收光谱法测定土壤中水溶性镁
一、实验目的
1. 了解土壤中水溶性盐的提取方法
2. 了解和掌握原子吸收光谱法的原理、结构及操作方法。
二、实验原理
含金属离子的试液被雾化后并进入乙炔—空气火焰时，金属离子被原子化，产生基态原子蒸气。该蒸气能吸收相应金属元素空心阴极灯发射出来的共振发射线的辐射能，其吸收情况服从比尔定律。
样品测得的吸光度，根据标准溶液计算的标准曲线计算相应的浓度。
一、仪器与试剂
原子吸收光谱仪AA-7000 、10ug/mL镁标液、SrCl2溶液、去离子水
二、实验步骤
1、土壤水溶性盐的提取
称取20.0g过1mm筛的土壤，加去离子水100ml，在振荡机上振荡3分钟，或用手摇荡3min，然后过滤。
2、镁标准溶液的配置
分别取0、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0ml 的镁标液于6 个25ml 容量瓶中，
加1ml SrCl2 溶液，用去离子水定容至刻度，摇匀待测。
3、样品溶液的配置
分别取滤液0.5ml 于3个容量瓶中，加1ml SrCl2溶液，用去离子水定容至刻度，摇匀待测。
三、原子光谱仪测定
AA-7000 测定步骤见附件。
四、结果计算
1、标准溶液与吸光度
根据测定结果计算标准曲线和相关系数。
2、根据测定结果计算土壤提取液中镁的平均浓度、土壤中水溶性镁的百分含量。六、思考题
1、简述原子吸收光谱仪的构成与工作原理。
2、如果测水溶性钙，能不能用镁元素的空心阴极灯作光源？
附:
SHIMADZU AA-7000 原子吸收操作步骤
（一）火焰连续法
一、开机顺序：
①打开电脑；② 打开AA-7000 主机电源；③ 启动WizAArd软件，选择“操
作”，点击“测量”；④ 在ID 栏输入“Admin”，登陆系统；⑤ 弹出“向导选择”
对话框，点击“取消” ，进入下一步。
二、仪器初始化在“仪器”下拉式菜单中，点击“连接” ，仪器进入初始化状态。弹出“气体调节”页面时，根据提示，打开通风设备，乙炔钢瓶主阀（逆时针旋转1 圈为宜）和空压机开关。（乙炔气体分压要求为0.08-0.10 MPa ，空气压力要求为0.35 MPa ）检测完成后，点击“确定” 。弹出“火焰分析日常监测项目” 页面时，请对每个项目一一进行检查并勾选，点击“确定”。
等待漏气检测结束，若不存在漏气现象，点击“确定” ，完成初始化。
三、设置参数
在“参数”下拉式菜单中，选择“元素选择向导” ，进行元素选择。
①选择“火焰连续法”、“普通灯”，单击“下一步”；输入元素灯位；点击“谱线搜素”；谱线搜素完成后，点击“关闭” 。
②校准曲线设置：输入“浓度单位”，编辑“校准曲线测量次序” 。
③样品组设置：输入“浓度单位” 、“样品数量”，点击“更新”；在样品ID 栏输入样品名称或编号，点击“下一步” 。
④点击“连接/ 发送参数”，完成参数设置。
四、点火同时按下PURGE 和IGNITE 两键，直至火焰点燃，松开。
五、测量步骤
①校零：把进样吸管放入去离子水中，雾化1min，点击页面底部的Auto Zero 。
②测量标准样品：吸入溶液，待信号稳定后，按页面底部的START ，读数完毕，START键变回绿色，换溶液，重复以上操作。
③测量空白溶液：方法同②。
④测量未知溶液：方法同②。测量过程中，每测完一种未知样品，应吸入去离子水雾化30s。每测5-6 个样品，应校零一次。
⑤所有样品测量完毕，吸入去离子水雾化2min ，取出进样吸管，按EXTINGUISH 键熄灭火焰，并关闭乙炔钢瓶主阀和空压机开关
六、关机顺序
① 在“仪器”下拉式菜单中，点击“连接” ，切断主机与电脑的通讯；
②保存或打印数据，退出WizAArd 程序；
③关闭AA-7000 主机电源；
④关闭计算机，
⑤关闭抽风设备。
实验四电位滴定法测定醋酸的含量和解离常数、实验目的
1、熟悉电位滴定的基本原理和操作技术；
2、学习电位滴定曲线确定滴定终点。
二、实验原理
醋酸为有机酸 （ K a 1.8 10 5
），与 NaOH 的反应为： HAc NaOH NaAc
用与已知浓度的 NaOH 滴定未知浓度的 HAc 溶液在终点时产生 pH （或 mV ）值的突跃， 据滴定过程中 pH （或 mV ）值的变化情况来确定滴定的终点，进而求得各组份的含量。
滴定终点可由电位滴定曲线 （指示电极电位或该原电池的电动势对滴定剂体积作图） 确定，也可以用二次微商曲线法求得。
确定滴定体积以后，从 pH ～ V 曲线上查出 HAc 被中和一半时（ 1/2Ve ）的 pH 值。此 时， pH=pKa, 从而计算出 Ka 。醋酸在水溶液中电离如下：
其离解常数为 Ka
[H ][ Ac ]
[HAc]
当醋酸被中和了一半时， 溶液中： [Ac -
]=[HAc] ，根据以上平衡式， 此时 Ka=[H +
]，即 pKa=pH 。 1 因此， pH ～V 图中 2
Ve 所处的 pH 值即为 pKa ，从而可求出醋酸的酸常数
三、仪器和试剂
1、仪器 pHS-3C 型酸度计（含复合电极）
电磁搅拌器（含搅拌子）
2、试剂 NaOH 溶液 0.1mol/L ：称取 馏
水，完全溶解后，定容至 待测定的醋酸溶液
四、实验步骤
1． 打开酸度计电源开关，预热 30min 。接好复合玻璃电极。
2． 用 pH=6.86（25℃）和 pH=4.00（25 ℃） 的缓冲溶液将 pHs-3C 型酸度计 pH 计的标定。 （1）按
“ pH/MV ”按钮，仪器进入 PH 测量状态。按“温度”按钮，调节↑或↓ 使温度显示为溶液的温度值，然后按“确定”键。
（2 ）把用蒸馏水清洗电极，插入 pH6.86 的标准缓冲溶液中，读数稳定后按“定 位”键，此时 pH 指示灯闪烁，调节↑或↓使 pH 读数为该溶液当时温度下的 pH 值，然后按“确认”键，仪器进入 pH 测量状态， PH 指示灯停止闪烁。
（ 3）把用蒸馏水清洗过电极插入 pH4.00（或 pH9.18）的标准缓冲溶液中，待读 数稳定后接“斜率”键（此时 pH 指示灯闪烁），调节↑或↓使 pH 使读数为该溶 液当时温度下的 pH 值，然后按“确认”键，仪器进入 pH 测量状态， pH 指示灯 停止闪烁，标定完成。 （ 4 ）用蒸馏水清洗电极后可对被测溶液进行测量。
3． 粗测： 准确吸取醋酸试液 10.00mL 于 100mL 小烧杯中， 再加水约 20mL 。放入搅拌磁子， 浸入 pH 复
合电极。 开启电磁搅拌器 （注意磁子不能碰到电极） ，用 0.1000mol/LNaOH 标准溶 液进行滴定， 1mL 读数一次，待到超过化学计量点，初步确定滴定终点。
4. 细测：同上，准确吸取醋酸试液 10.00mL 于 100mL 小烧杯中，再加水 20.00mL 。放入搅 拌磁子，浸入 pH
复合电极。开启电磁搅拌器， 用 NaOH 标准溶液进行滴定，滴定开始时每点 隔 1mL 读数一次，在 Vep 处和化学计量点附近时间隔 0.10mL 读数一次，记录每个点对应 的 体积和 pH 值，过了滴定终点每滴 1mL 读一次 pH 值，直至滴定至 pH12左右。
5. 滴定结束后的电极、 烧杯和搅拌子都要清洗干净。实验完毕后整理好仪器、器皿， 原处。
五、数据记录与处理
1、画表格记录滴定体积和对应的 pH 。
2、根据滴定数据作 pH ～ V 滴定曲线，
3、根据滴定终点求出试样溶液中醋酸的浓度（以
g/L 表示）。
1
H 2O 。
因此根 HAc H Ac
Ka 。
滴定管 铁架台（含滴定管夹） 100ml 玻璃烧杯 4g 固体
NaOH ，加入新鲜的或煮沸的除去二氧化碳的蒸 1L ，充分摇
匀标定。
放回
4、pH～V 图中2Ve 所处的pH 值即为pKa，从而可求出醋酸的离解常数Ka。
5、与Ka（理论）进行比较，计算相对误差。
六、问题讨论
1、电位滴定的原理和依据是什么？
2、电位法滴定测定与用酚酞为指示剂的滴定中有什么区别？
3、pH计使用中应注意什么问题？
pH计使用中注意事项：
1 复合电极在使用前浸泡活化24h。（3M氯化钾溶液中）
2 . 清洗电极后，不要用滤纸擦拭玻璃膜，而应用滤纸吸干，避免损坏玻璃膜。
3 . 严禁在强酸和腐蚀性强碱溶液中使用。
4 . 配制pH 标准溶液使用无CO2，蒸馏水一般保存2-3 个月，如发现浑浊，发霉或沉淀现象时，不能继续使用。
实验五牙膏中游离氟含量的测定
实验目的
1、掌握电位分析法基本原理
2、学习用氟离子选择性电极测定牙膏中微量游离氟的方法。
二、实验原理
采用F-选择电极法可以测定牙膏游离氟的含量。
电极电位与溶液中离子活度的对数值呈线性关系:E=K-0.0592 lga F- 若在标液与样液中加入总离子强度调节缓冲剂TISAB，控制待测溶液的离子强度与酸度恒定，电池的电动势与溶液中的F-的浓度对数值成线性关系，通过测量电动势就能求得溶液中F-的浓度。三、实验仪器与试剂
仪器：PHS-3C型酸度计，氟离子选择电极，甘汞电极，磁力搅拌器，烧杯，25mL 容量瓶8 个，100mL塑料烧杯
试剂：氟离子标准溶液100μg/mL 柠檬酸盐缓冲液（TISAB）：总离子强度调节缓冲溶液
四、实验内容与步骤
1、含氟牙膏样品的制备（佳洁士防蛀牙膏、黑人牙膏）：称取不同品牌牙膏各50g（精确至0.001g ），分别置于100mL塑料烧杯中，逐渐加入去离子水搅拌使溶解，转移至
250mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，摇匀。
2、标准溶液的配置与测定
准确量取0、0.5 、1.0 、1.5 、2.0 、2.5mL氟离子标准溶液，分别移入6个25mL 容量瓶中，各加入5mL TISAB，用去离子水稀释至刻度，摇匀。然后逐个转入
100mL塑料烧杯中，按由浓度由低到高的顺序，在磁力搅拌器下测量电位值E
（mV），并记录。
3、牙膏中游离氟的测定
准确吸取步骤1中2 种牙膏的上清液5mL，分别置于25mL容量瓶中，各加入5mL TISAB，用去离子水稀释至刻度，摇匀。转入100mL塑料烧杯中，在磁力搅拌下测量其电位值，
五、数据计算
1、根据标准溶液的浓度和测定的电位值计算E－lg[F] 线性关系方程和R值。
2、根据牙膏上清液中测定的电位值，计算上清液游离氟的浓度和牙膏中游离氟的百分含量。
六、思考题
1、本实验测定的结果是氟离子的活度还是浓度？
2、在实验中为什么要加入TISAB?
实验六高效液相色谱柱性能考察
一. 实验目的
掌握考察色谱柱基本特征的方法
二. 基本原理评价液相色谱柱的性能是否优良，有不同的方法和考察指标。本实验用理
论塔板数和峰对称性两个方面进行考察。
（1）理论塔板数：色谱柱的分离效率（简称柱效），可定量地用理论塔板数来表示，理论塔板数反映色谱柱本身的特性，可表明柱受填料颗粒度、柱内径、流动相流速和粘度、进
样方式等影响，是一个具有代表性的参数。
2
n = 5.54（t R/ w1/2）
= 16（t R/ w）2
H = L /n
n理论塔板数，t R组分保留时间，W1/2半高峰宽，W峰宽，L色谱柱长，H理论塔板高度。
（2）峰对称性：若色谱填充不均匀或柱子经长期使用及保存不当，都会引起色谱峰的不对称。峰不对称性用峰不对称因子（Peak Asymmtrey Factor ）表示。其计算方法见图1，由峰顶向基线作垂线，并在峰高10%处作基线平行线，得A ，C，B 三交点，则峰不对称因子可由下式计算求得：
PAF = CB/AC 一根良好的色谱柱，峰不对称因子应在
0.8---1.2 范围内。
图1 峰不对称因子计算示意图
三. 仪器和试剂
1．HP 1100高效液相色谱仪（配DAD 检测器，检测波长254 nm），超声波清洗机（流动相脱气用），50 μL平头微量注射器，不锈钢色谱柱2．流动相为甲醇：水= 85：15（体积比），实验混合物为萘—联苯（1：1）四．实验步骤1．HP1100使用步骤（1）开泵, 检测器, 柱温箱，电源
（2）开电脑，当Bootp sever 打出七行字后，打开HPLC Chematation on line （在线工作站）
（3）设置流动相的比例（二元泵），流速1.00---5.00 ml/min, 打开purge 阀，赶走气泡，打开柱温箱，打开DAD 检测器。等赶尽气泡后关闭purge 阀，流动相通过柱子。
（4）设置并保存方法，设置样品信息，文件保存路径。
（5）等基线平稳后，按Balance按钮，平衡后等Ready 出现可进样。在下一针前先按Balance平衡同上，等Ready出现后，再进样。
（6）实验完毕用水（有盐时）或甲醇分别冲洗柱子约半小时，此时柱温箱和检测器可关闭。用水或甲醇冲洗进样器，扳动进样器几次，冲洗干净，关闭泵。
（7）关闭chemstation online 后，再关闭泵，检测器，柱温箱，电源。
（8）打开chemstation offline 工作站进行数据分析，作标准曲线。测量浓度。
2．色谱柱性能检查
（1）将填好的色谱柱接入色谱系统
（2）启动仪器，待基线平稳后进样
（3）进样完毕后，出现完整的色谱图，保存记录数据五数据处理根据柱长（cm），组分保留时间tR（min），组分的半高峰宽W 1/2（min），计算每米的理论塔板数、理论塔板高度和组分的不对称因子。
六问题讨论
1．根据数据处理的结果，评价所填充的色谱柱的性能
2．简述评价液相色谱柱的方法和指标。
实验七气相色谱仪的使用及色谱柱的性能评价
、目的要求
通过本实验掌握气相色谱仪的使用方法和柱性能评价指标的计算。
二、基本原理毛细管固定相有大的相比和比渗透性以及高的柱效，因此，常用于复杂物质的分析。由于毛细管柱的性能会因涂渍方式、膜的厚度、膜的均匀性、柱子安装技术等因素而变化，因此，必须对毛细管柱的性能进行评价。柱评价通常选用k' ≥3 的组分测定其保留时间与半宽度，计算它的理论塔板数；同时选用难分离的一对物质测定其分离能力，通过观察峰的拖尾程度以评价柱壁的惰性度。
看教材P190-192 学习气相色谱仪的主要构成部分和作用。看教材P208-210 了解毛细管柱气相色谱法的特点和毛细管色谱仪的结构。三、仪器与试剂
1. 仪器毛细管气相色谱仪，FID；色谱柱：Rtx-5 柱，30 m×?0.3mm，膜厚：0.25 m
2. 试剂环己烷（bp：沸点80.74 ℃）正戊烷（bp：36℃）
3. 色谱条件：Injection temperature（ Ti）＝200o C Injection mode（进样方式）：split ，分流比：100：1；Flow control:linear velosty; 分流比50:1 ；载气（N2，99.995 ％）；线速：40cm/s；Tc＝80o C；T D＝140o C；H2：30 mL/min；尾吹气（N2）40 mL/min；空气：300 ml/min; 进样量0.2 l （液）；H2 0.4MPa；空气0.5MPa
四、实验步骤
1. 毛细管色谱仪的使用：熟悉气相色谱仪的各部分、了解GCsolution 参数设置
2. 进样练习：吸取正戊烷和环己烷上方气体0.2 L，进样练习。
3. 色谱柱性能评价：分离正戊烷和环己烷
五、数据处理
1. 理论塔板数的测定：正戊烷和环己烷的理论塔板数（theoretical plates），根据柱长计算塔板高度
2. 计算正戊烷和环己烷的分离度（resolution ）
3. 计算正戊烷和环己烷的分离度的拖尾因子（tailing factor）
T（拖尾因子）=W 0.05h/2d1
W0.05h 为5%峰高处的峰宽，d1 为峰顶点至峰前沿之间的距离
T 应该在0.95-1.05之间，低于0.95 为前延峰，高于1.05 为拖尾峰
六、问题讨论
1. 简述毛细管色谱法的优缺点。
2. 毛细管柱分析时为什么要采用分流方式？
3. 气相色谱气化室温度的设定和柱温有何要求？
附:
第一部分气相色谱分析注意事项
、载气钢瓶的使用规程
1 钢瓶必须分类保管，直立固定，远离热源，避免暴晒及强烈震动，氢气室内存放量不得超过二瓶。
2 氧气瓶及专用工具严禁与油类接触。
3 钢瓶上的氧气表要专用，安装时螺扣要上紧。
4 操作时严禁敲打，发现漏气须立即修好。
5 用后气瓶的剩余残压不应少于980 kPa。
6 氢气压力表系反螺纹，安装拆卸时应注意防止损坏螺纹。
二、减压阀的使用及注意事项
1 在气相色谱分析中，钢瓶供气压力在9.8-14.7 MPa 。
2 减压阀与钢瓶配套使用，不同气体钢瓶所用的减压阀是不同的。氢气减压阀接头为反向螺纹，安装时需小心。使用时需缓慢调节手轮，使用完后必须旋松调节手轮和关闭钢瓶阀门。
三、热导池检测器的使用及注意事项
1 开启热导电源前，必须先通载气，实验结束时，把桥电流调到最小值，再关闭热导电源，最后关闭载气。
2 稳压阀，针形阀的调节须缓慢进行。稳压阀不工作时，必须放松调节手柄。针形阀不工作时，应将阀门处于“开”的状态。
3 各室升温要缓慢，防止超温（现在的气相色谱仪一般采用程序自动控制升温）。
4 更换汽化室密封垫片时，应将热导电源关闭。若流量计浮子突然下落到底，也应首先关闭该电源。
5 桥电流不得超过允许值。
四、氢火焰检测器的使用及注意事项
1 通氢气后，待管道中残余气体排出后，应及时点火，并保证火焰是点着的。
2 使用FID 时，离子室外罩须罩住，以保证良好的屏蔽和防止空气侵入。如果离子室积水，可将端盖取下，待离子室温度较高时再盖上。工作状态下，取下检测器罩盖，不能触及极化极，以防触电。
3 离子室温度应大于100 ℃，待层析室温度稳定后，再点火，否则离子室易积水，影响电极绝缘而使基线不
稳。
五微量注射器的使用及注意事项
1 微量注射器是易碎器械，而且常用的一般是容积为1μ l 的注射器，使用时应多加小心，
不用时要洗净放入盒内，不要随便玩弄，来回空抽，否则会严重磨损，损坏气密性，降低准确度。
2 微量注射器在使用前后都须用丙酮或丁酮等溶剂清洗，而且不同种类试剂要有不同的微量注射器分开取样，切不可混合使用，否则会导致试剂被污染，最后检测结果不准确。
3 对10 μl -100 μl 的注射器，如遇针尖堵塞，宜用直径为0.1 mm 的细钢丝耐心穿通（工具箱
中备有）,不能用火烧的方法。
4 硅橡胶垫在长时间进样后，容易老化漏气，因此需及时更换。
5 用微量注射器取液体试样，应先用少量试样洗涤多次，再慢慢抽入试样，并稍多于需要量。如内有气泡则将针头朝上，使气泡上升至完全排出，再将过量的试样排出，用；滤纸吸去针尖外所沾试样。注意切勿使针头内的试样流失。
6 取好样后应立即进样，进样时，注射器应与进样口垂直，针尖刺穿硅橡胶垫圈，插到底后迅速注入试样，完成后立即拔出注射器，同时迅速按下色谱数据工作站的数据采集开关，整个动作应进行得稳当，连贯，迅速。针尖在进样器中的位置，插入速度，停留时间和拔出速度等都会影响进样的重复性。
手不要直接接触注射器的针头和有样品部位、不要有气泡（吸样时要慢、快速排出再慢吸，
反复几次， 10ul 注射器 金属针头部分体积 0.6ul ，有气泡也比较难看到，多吸 1-2ul 把注射 器针尖朝上气泡上走到顶部再推动针杆排除气泡， （指 10ul 注射器，带芯子注射器凭感觉） 进样速度要快，每次进样保持相同速度，针尖到汽化室中部开始注射样品。
7 必须在本次实验完全结束才能进样继续进行下一个实验。
第二部分 岛津气相色谱 GC-2010操作说明
、准备工作 （请参阅相关文献和《分析化学手册》第
5 卷）
一）、待测样品准备： 热稳定气体试样或易汽化液体试样（难汽化或热不稳定物质不适于
气相色谱法） ；标样，用于样品中各组分的定性与定量。
二）、色谱条件确立： 色谱柱及柱温；进样方式及温度；载气类型及流速；检测器及温度
等。
三）、定量方法选择： m i ＝ f i ×A i （h i ） f i —校正因子， A i —峰面积， h i —峰高 1. 归一化法 ，要求样品中 所有物质都能从色谱柱流出并被检测器检出 。
优点： a 、不必知道准确进样量。 b 、仪器操作条件变动影响不大。 c 、当 f 值相近或 相同时，可不必求出 f 值，因此特别适合同系物、同分异构体等的分析，此时式 （1） 可简化为式 （2）。
2. 外标法 （标准曲线法） ，配制一系列不同浓度的标样进行色谱分析，
作出峰面积对浓
度的工作曲线； 在严格相同的色谱条件下 ，对未知样进行色谱分析，根据峰面积和 工作曲线求出被
测组分的含量．
3. 内标法 ，将一种与样品互溶但不起反应的纯物质加入到待测样品中作内标进行色谱 定量。此时：
wi %
ms fi Ai
100%
m 样品 f s A S
该法具有归一化法的优点，但 必须事先测得相对校正因子 ，且要求内标物与样品各 组分很好分离。
二、上机操作
（一）、确保气源处于工作压力范围内： 载气 0.5~0.9 MPa ；使用 FID 检测器时打开空气压缩 机和氢气发生
器电源。
（二）、打开 GC-2010 和工作站电源。
（三）、点击工作站桌面
（五）、点击
检测器，点火之前检查空气和氢气是否已达到需要压力） 或Current
（六）、系统稳定（ Ready ）且基线平稳后，点击
击
八）、分析结束后，点击
下 时，方可关闭工作站、 GC 电源和载气气源。
、注意事项
一）、实验前做好所有准备工作，开机前先开气源。
二）、保证氢气发生器液面高度在 1.2~1.8 刻度之间，最好处于中间刻度。 三）、使用 TCD 检测器时注意载气类型的选择和相应最高电流的限制。 四）、新的或放置一段时间的色谱柱需在高于最高检测温度
30℃左右老化几小时使基线平
稳，老化时最好不接检测器。色谱柱实际使用温度不得超过其温度上限。
W% f i A i
f 1A 1 f 2 A 2
100%(1) W%
A i
A 1 A 2 ....................... A n
100%(2)
五）、进样口密封垫应及时更换；进样时必须采用正确的进样手法。六）、不得擅自改动GC及色谱工作站上与实验无关的参数。七）、GC 任一单元部件温度高于80℃情况下，不得关闭载气。八）、实验完毕离开实验室之前必须关闭所有仪器用气源和电源。九）实验完毕后，在实验记录本上登记使用情况。
分光光度法测定水中铁离子含量.
专业项目课程课例 项目十二分光光度法测定水中铁离子含量 一、项目名称：分光光度法测定水中铁离子含量 二、项目背景分析 课程目标：本课程是培养分析化学操作技能和操作方法的一门专业实践课，以定量分析的基本理论为基础，以实验强化理论，以期提高化工工作者的分析操作能力。 功能定位：在定量分析中我们常常用到分光光度分析法，它具有操作简便、快速、准确等优点，在工农业生产和科学研究中具有很大的实用价值。是仪器分析的基础实验，也是一种重要的定量分析方法。分光光度法测定水中铁离子含量的测定项目综合训练了学生分光光度计使用、系列标准溶液配制、标准曲线绘制等多个技能。 学生能力：学生通过相关基础学科的学习已经具备了相应的化学知识和定量分析知识，也具备一定的独立操作和思维能力。 项目实施条件：该项目是仪器分析的基础实验，一般中职学校具备相关的实训实习条件，学生有条件完成相应的实习任务。 三、教学目标 1、了解721可见分光光度计的构造 2、了解分光光度法测定原理 3、掌握721可见分光光度计的操作方法 4、掌握分光光度法测定分析原始记录的设计 5、掌握分光光度法测定分析报告的设计 6、掌握分光光度法测定水中铁离子含量的测定方法 7、掌握分光光度法测定水中铁离子含量的分析原始记录和分析报告的填写 四、工作任务 1
2 五、参考方案 参考方案一 1、邻二氮杂菲-Fe 2+ 吸收曲线的绘制 用吸量管吸取铁标准溶液（20μg/mL ）0.00、2.00、4.00mL ，分别放入三个50mL 容量瓶中，加入1mL 10%盐酸羟胺溶液，2mL 0.1%邻二氮杂菲溶液和5mL HAc-NaAc 缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀。放置10min ，用3cm 比色皿，以试剂空白（即在0.0mL 铁标准溶液中加入相同试剂）为参比溶液，在440～560nm 波长范围内，每隔20～40nm 测一次吸光度，在最大吸收波长附近，每隔5～10nm 测一次吸光度。在坐标纸上，以波长λ为横坐标，吸光度A 为纵坐标，绘制A 和λ关系的吸收曲线。从吸收曲线上选择测定Fe 的适宜波长，一般选用最大吸收波长λmax 。 2、标准曲线的制作 用吸量管分别移取铁标准溶液（20μg/mL ）0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL ，分别放入6个50mL 容量瓶中，分别依次加入1.00mL 10%盐酸羟胺溶液，稍摇动；加入2.00mL 0.1%邻二氮杂菲溶液及5.00mL HAc-NaAc 缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀。放置10min ，用1cm 比色皿，以试剂空白（即在0.00mL 铁标准溶液中加入相同试剂）为参比溶液，选择λmax 为测定波长，测量各溶液的吸光度。在坐标纸上，以含铁量为横坐标，吸光度A 为纵坐标，绘制标准曲线。 3、水样中铁含量的测定 取三个50mL 容量瓶，分别加入5.00mL （或10.00mL 铁含量以在标准曲线范围内为合适）未知试样溶液，按实验步骤2的方法显色后，在λmax 波长处，用1cm 比色皿，以试剂空白为参比溶液，平行
邻二氮菲分光光度法测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定微量铁 一、实验原理 邻二氮菲（1，10—二氮杂菲），也称邻菲罗啉是测定微量铁的一个很好的显色剂。在pH2—9范围内（一般控制在5—6间）Fe2+与试剂生成稳定的橙红色配合物Fe（Phen）32+lgK=，在510nm下，其摩尔吸光系数为, ）Fe3+与邻二氮菲作用生成兰色配合物，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂盐酸羟胺使Fe2+还原为Fe3+： 2 Fe3++2NH2OHHCl=2 Fe2++N2+4H++2H2O+2Cl- 二、试剂与仪器 仪器： 1．721型分光光度计 2．50mL容量瓶8个,100mL1个,500mL1个 3．移液管：2 mL1支，10 mL1支 4．刻度吸管：10mL、5mL、1mL各1支 试剂： 1．铁标准储备溶液100ug/mL：1000 mL（准确称取铁盐NH4Fe（SO4）212H2O置于烧杯中，加入3moL/LHCI20mL和30ml水，然后加水稀释至刻度，摇匀。) 2．铁标准使用液10ug/mL：用移液管移取上述铁标准储备液 mL，置于100 mL容量瓶中，加入3moL/和少量水，然后加水稀释至刻度，摇匀。 3．HCI3moL/L：100mL 4．盐酸羟胺100g/L（新鲜配制）：100mL 5．邻二氮菲溶液L（新鲜配制）：200mL 6．HAc—NaAc缓冲溶液（pH=5）500 mL：称取136gNaAc，加水使之溶解，再加入120 mL 冰醋酸，加水稀释至500 mL 7．水样配制（mL）：取2mL100ug/mL铁标准储备溶液加水稀释至500mL 三、实验步骤 1.配置mL的铁标准溶液。 1．绘制吸收曲线：用吸量管吸取铁标准溶液（10ug/mL）、、、、、分别放入50 mL容量瓶中，加入1 mL10%盐酸羟胺溶液、 L邻二氮菲溶液和5 mL HAc—NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟，用3cm比色皿，以试剂溶液为参比液，于721型分光光度计中，在440—560nm波长范围内分别测定其吸光度A值。当临近最大吸收波长附近时应间隔波长5—10nm测A值，其他各处可间隔波长20—40nm测定。然后以波长为横坐标，所测A值为纵坐标，绘制吸收曲线，并找出最大吸收峰的波长。 2．标准曲线的绘制：用吸量管分别移取铁标准溶液（10ug/mL）、、、、、、 mL依次放入7只50mL 容量瓶中，分别加入10%盐酸羟胺溶液1 mL，稍摇动，再加入%邻二氮菲溶液 mL及5 mL HAc —NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟，用3cm比色皿，以不加铁标准溶液的试液为参比液，选择最大测定波长为测定波长，依次测A值。以铁的质量浓度为横坐标，A值为纵坐标，绘制标准曲线。 3．水样分析：分别加入（或，铁含量以在标准曲线范围内为宜）未知试样溶液，按实验步骤2的方法显色后，在最大测定波长处，用3cm比色皿，以不加铁标准溶液的试液为参比液，平行测A值。求其平均值，在标准曲线上查出铁的质量，计算水样中铁的质量浓度。 四、数据记录与结果计算
实验四邻菲罗啉分光光度法测定铁的含量(精)
实验四邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁 一、实验目的： 1、掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法； 2、学会标准曲线的绘制方法及其使用。 二、原理： 亚铁离子（Fe2+）在pH=3~9时与邻菲罗啉生成稳定的橙红色络合物，应用此反应可用比色法测定铁。橙红色络合物的吸光度与浓度的关系符合朗伯-比耳定律。若用还原剂（如盐酸羟胺）把高铁离子还原为亚铁离子，则此法还可测定水中的高价铁和总铁的含量。 三、仪器： 721型分光光度计、1cm比色皿、具赛比色管（50ml）、移液管、吸量管、容量瓶等。 四、试剂： 1、铁贮备液（100μg/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵 [（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O]于100毫升烧怀中（或0.8640g分析纯的 NH4Fe(SO42·12H2O，其摩尔质量为482.18g/mol），加50毫升1+1 H2SO4，完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为 100.0μg/mL。（实验室准备好） 2、铁标准使用液（20μg/mL）：准确移取铁贮备液20.00ml于100ml 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液中Fe2+的质量浓度为20.0μg/mL。（学生配制）
3、0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积。（临用时配制） 4、10%盐酸羟胺水溶液： 5、醋酸-醋酸钠缓冲溶液（pH=4.6）：称取40克纯醋酸铵加到50毫升冰醋酸中，加水溶解后稀释至100毫升。 五、测定步骤： 1、标准曲线的绘制： （1）分别吸取铁的标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于7支50ml比色管中，加水至刻度； （2）依次分别加入10%盐酸羟胺溶液1ml，混匀，加入5ml醋酸－醋酸铵缓冲溶液，摇匀，加入0.5%邻菲罗啉溶液2ml，摇匀，（3）放置15分钟后，在510nm波长处，用1cm比色皿，以空白作为参比，测定各溶液的吸光度。 （4）以吸光度为纵坐标，铁含量（μg，50ml）为横坐标，绘制出标准曲线。 2、试样中铁含量的测定 吸取待测水样溶液10.00ml于50ml比色管中，按绘制标准曲线的操作，测得水样的吸光度Ａ，由标准曲线查得相应的铁含量，计算出试样的铁的质量浓度。做平行样。 实验四邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁原始记录表
北京理工大学-邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
北京理工大学-邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
邻二氮菲分光光度法测定铁 刘红阳 19121201 1120123063 一、实验目的 1、学习测定微量铁的通用方法； 2、掌握分光光度法分析的基本操作及数据处理方法； 3、初步了解分光光度法分析实验条件研究的一般做法。 二、实验原理 一般选择络合物的最大吸收波长为工作波长。控制溶液酸度是显色反应的重要因素。因为多数显色剂是有机弱酸或弱碱，溶液的酸度会直接影响显色剂的理解程度，从而影响显色反应的完全程度及络合物的组成。另一方面，酸度大小也影响着金属离子的存在状态，因此也影响了显色反应的程度。应当确定显色剂加入量的合适范围。不同显色反应的络合物达到稳定所需要的时间不同，且达到稳定后能维持多久也大不相同。大多数显色反应在室温下就能很快完成，但有些反应必须加热才能较快进行。此外，加入试剂的顺序、离子的氧化态、干扰物质的影响等，均需一一加以研究，以便拟定合适的分析方案，使测定既准确，又迅速。本实验通过对铁(Ⅱ)-邻二氮菲显色反应的条件实验，初步了解如何拟定一个分光光度法分析实验的测定条件。 邻二氮菲是测定铁的高灵敏性、高选择性试剂之一，邻二氮菲分光光度法是化工产品中微量铁测定的通用方法。在pH2~9的溶液中，Fe2+和邻二氮菲生成 1:3橘红色络合物，lgβ 3=21.3(20℃)，ε 508 =1.1×104L·mol-1·cm-1，其吸收曲 线如图一所示；Fe3+亦可以与邻二氮菲生成蓝色络合物，因此，在显色前需用盐酸羟胺溶液将全部的Fe3+还原为Fe2+。反应式如下（和图二）： 2Fe3++2NH 2OH===2Fe2++N 2 ↑+2H 2 O+2H+
邻二氮菲分光光度法测定铁的含量(精)
实验二 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量 一、实验目的 1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法; 2．了解分光光度计的构造、性能及使用方法。 二、实验原理 邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在pH=2～9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。配合物的稳K lg ＝21.3，摩 尔吸光系数510 ＝11000 L·mol -1·cm -1。 在显色前，用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子。 4Fe 3+＋2NH 2OH →4Fe 2+ ＋ N 2O ＋ 4H ＋＋ H 2O 测定时，控制溶液pH ＝3较为适宜，酸度高时，反应进行较慢，酸度太低，则二价铁离子水解，影响显色。 用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH 范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。 三、仪器与试剂 1．醋酸 钠：l mol·L -1； 2．氢氧化钠：0.4 mol·L -1； 3．盐 酸：2 mol·L -1；、 4．盐酸羟胺：10％（临时配制）； 5．邻二氮菲（0.1%）：0.lg 邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中。 6．铁标准溶液 (1)10-4mol·L -1铁标准溶液：准确称取0.1961g （NH 4）2 Fe （SO 4）2·6H 20于烧杯中，用2 mol·L -1盐酸15 mL 溶解，移至500 mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀；再准确稀释10倍成为含铁10 - 4mol·L -l 标准溶液。 (2)10 μg·mL -1（即0.01 mg·mL -1）铁标准溶液：准确称取0.3511g （NH 4）2 Fe （SO 4）2·6H 20于烧杯中，用2 mol·L -l 盐酸15 mL 溶解，移入500 mL 容量瓶中，
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁 实验目的和要求 1．掌握紫外可见分光光度计的基本操作； 2．掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法； 3．掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长选择； 4．掌握标准曲线绘制及应用。 实验原理 邻二氮菲（1,10—邻二氮杂菲）是一种有机配位剂，可与Fe2+形成红色配位离子： Fe2++3 N N N N 3 Fe 2+ 在pH=3～9范围内，该反应能够迅速完成，生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为1.1×10-4，反应十分灵敏，Fe2+ 浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。 实验中，老师我们又见面了采用pH=4.5～5的缓冲溶液保持标准系列溶液及样品溶液的酸度；采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的Fe3+并防止测定过程中Fe2+被空气氧化。 实验仪器与试剂 1．752S型分光光度计 2．标准铁储备溶液（1.00×10-3mol/L） 3．邻二氮菲溶液（0.15%，新鲜配制） 4．盐酸羟胺溶液（10%，新鲜配制） 5．NaAC缓冲溶液 6．50ml容量瓶7个 7．1cm玻璃比色皿2个 8．铁样品溶液 实验步骤 1．标准系列溶液及样品溶液配制，按照下表配制铁标准系列溶液及样品溶液。
2．吸收曲线绘制用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，测定4号溶液在各个波长处的吸光度，绘制吸收曲线，并找出最大吸收波长。 3．标准曲线制作
在选定最大吸收波长处，用1cm 比色皿，以1号溶液作为参比溶液，分别测定2至7号溶液的吸光度，平行测定3次，计算吸光度平均值，绘制标准曲线。 实验数据处理 1、 样品中铁的计算 2.50 50.00 C C X ? =读取值 Cx=4.65×10-5 ×50.00/2.50=9.30×10-4 mol/L 2、 摩尔吸光系数计算 在标准曲线的直线部分选择量两点，读取对应的坐标值，计算邻二氮菲配位物在最大吸收波长出的摩尔吸光系数： 1 21 2c -c A A ε-= ε=(0.460-0.233)/(0.00006-0.00004)=2.00×10-5 7 样品溶液 4.65×10-5 mol/ml
邻二氮菲分光光度法测定水中微量铁
邻二氮菲分光光度法测定微量铁 一、实验目的 １、学会吸收曲线及标准曲线的绘制,了解分光光度法的基本原理。 ２、掌握用邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。 3、学会721型分光光度计的正确使用，了解其工作原理。 ４、学会数据处理的基本方法。 5、掌握比色皿的正确使用。 二、实验原理 根据朗伯-比耳定律:Ａ=εbc，当入射光波长λ及光程ｂ一定时,在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。只要绘出以吸光度A 为纵坐标,浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值,即未知样的含量。同时,还可应用相关的回归分析软件，将数据输入计算机,得到相应的分析结果。 用分光光度法测定试样中的微量铁,可选用显色剂邻二氮菲(又称邻菲罗啉),邻二氮菲分光光度法是化工产品中测定微量铁的通用方法,在pH值为2-9的溶液中,邻二氮菲和二价铁离子结合生成红色配合物： 此配合物的lｇK 稳＝2１．3，摩尔吸光系数ε 510 = 1.１×１０4L·mｏl-1·cm- １，而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶１配合物,呈淡蓝色,lｇK 稳 =１4.１。所以在加 入显色剂之前，应用盐酸羟胺（NH ２ OH·HCl)将Fｅ３+还原为Fe2+，其反应式如下：２Fe3＋+ 2NH2OH·HCl → 2Ｆｅ2+＋N2+ H2O ＋4H++ ２ Cl- 测定时酸度高,反应进行较慢；酸度太低,则离子易水解。本实验采用HAc－NａAc缓冲溶液控制溶液pH≈5.0,使显色反应进行完全。
为判断待测溶液中铁元素含量,需首先绘制标准曲线,根据标准曲线中不同浓度铁离子引起的吸光度的变化,对应实测样品引起的吸光度,计算样品中铁离子浓度。 本方法的选择性很高,相当于含铁量4０倍的Sn2＋、Ａl3+、Ｃa2＋、Mｇ２+、Zn2+、 SｉO 32-；2０倍的Cr3+、Ｍｎ2+、VO 3 -、PO 4 3-;5倍的Co2＋、Ni2+、Cu２+-等离子不干扰 测定。但Bi3+、Cd2＋、Hｇ２+、Ｚn2+、Aｇ+等离子与邻二氮菲作用生成沉淀干扰测定。 三、实验仪器与试剂: 721型分光光度计、酸度计、50ml比色管、吸量管（１mL、2mL、5ｍL、10 mL）、比色皿、洗耳球。 1.１×10-3mol·L-1铁标准溶液、100ug·ml-1铁标准溶液、盐酸、盐酸羟胺、醋酸钠、０.15%邻二氮菲水溶液。 四、实验步骤 (一）准备工作 打开仪器电源开关,预热，调解仪器。 （二）测量工作(以通过空白溶液的透射光强度为Ｉ0,通过待测液的透射光 强度为I,由仪器给出透射比T,再由T值算出吸光度A值） １、吸收曲线的绘制和测量波长的选择 用吸量管吸取２．00 mＬ1.0×1０－3mol．L-1标准溶液，注入50 mL比色管中,加入1．００mL 10％盐酸羟胺溶液，摇匀，加入２.00 mL０.15％邻二氮菲溶液，5.0 mＬ NａＡc溶液，以水稀释至刻度。在光度计上用１ｃm比色皿,采用试剂溶液为参比溶液，在44０－560 nm间，每隔1０ｎm测量一次吸光度，以波长为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制吸收曲线,选择测量的适宜波长。一般选用最大吸收波长λ max 为测定波长。 2、显色剂条件的选择(显色剂用量) 在6支比色管中，各加入２.00mL 1．0×１0－3ｍｏｌ·Ｌ－1铁标准溶液和１.00mL 10%盐酸羟胺溶液，摇匀。分别加入0．1０，０．50,１．00,2.00 ，3.0０及４．0０mL 0．15％ 邻二氮菲溶液，5．０ｍL ＮａAc溶液，以水稀释至刻度,摇匀。在光度计上用
水中铁离子测定方法 二氮杂菲分光光度法
水中铁离子含量测定方法-- 二氮杂菲分光光度法 铁在深层地下水中呈低价态,当接触空气并在pH大于5时, 便被氧化成高铁并形成氧化铁水合物(Fe2O3?3H2O)的黄棕色沉淀,暴露于空气的水中, 铁往往也以不溶性氧化铁水合物的形式存在。当pH值小于5时,高铁化合物可被溶解。因而铁可能以溶解态、胶体态、悬浮颗粒等形式存在于水体中, 水样中高铁和低铁有时同时并存。 二氮杂菲分光光度法可以分别测定低铁和高铁,适用于较清洁的水样;原子吸收分光光度法快速且受干扰物质影响较小。水样中铁一般都用总铁量表示。 1 、二氮杂菲分光光度法 应用范围 本法适用于测定生活饮用水及其水源水中总铁的含量。 钴、铜超过5mg/L,镍超过2mg/L,锌超过铁的10倍对此法均有干扰,饿、镉、汞、钼、银可与二氮杂菲试剂产生浑浊现象。 本法最低检则量为μg, 若取50ml 水样测定, 则最低检测浓度为L。原理 在pH3～9的条件下,低铁离子能与二氮杂菲生成稳定的橙红色络合物,在波长510nm处有最大光吸收。二氮杂菲过量时,控制溶液pH为～,可使显色加快。 水样先经加酸煮沸溶解铁的难溶化合物,同时消除氰化物、亚硝酸盐、多磷酸盐的干扰。加入盐酸羟胺将高铁还原为低铁,还可消除氧化剂的干扰。水样不加盐酸煮沸,也不加盐酸羟胺,则测定结果为低铁的含量。仪器 100ml三角瓶。 50ml具塞比色管。分光光度计。试剂铁标准贮备溶液:称取硫酸亚铁铵[Fe(NH4)2(SO4)2?6H2O],溶于70ml 20+50硫酸溶液中,滴加L 的高锰酸钾溶液至出现微红色不变,用纯水定容至1000ml。此贮备溶液含铁。铁标准溶液(使用时现配):吸取铁标准贮备溶液移入容量瓶中,用纯水定容至100ml。此铁标准溶液含μg铁。％二氮杂菲溶液:称取氮杂菲(C12H8N2?H2O) 溶解于加有2滴浓盐酸的纯水中,并稀释至100ml。此溶液1ml可测定100μg以下的低铁。注:二氮杂菲又名邻二氮菲、邻菲绕啉,有水合物(C12H8N2?H2O)及盐酸盐 (C12H8N2?HCl)两种,都可用。 10％盐酸羟胺溶液:称取10g盐酸羟胺 (NH2OH?HCl),溶于纯水中,并稀释至100ml。乙酸铵缓冲溶液: 称取250g乙
实验分光光度法测定铁
实验分光光度法测定铁 The following text is amended on 12 November 2020.
实验十四邻二氮菲分光光度法测定铁的含量 一、实验目的 1．学习吸光光度法测量波长的选择方法; 2．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理及方法; 3. 掌握分光光度计的使用方法。 二、实验原理 分光光度法是根据物质对光选择性吸收而进行分析的方法，分光光度法用于定量分析的理论基础是朗伯比尔定律，其数学表达式为：A=εb C 邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在pH=2～9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。摩尔吸光系数ε＝11000 L·mol-1·cm-1。在显色前，用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+。 2Fe3+＋2NH 2OHHCl→2Fe2+＋N 2 ＋4H＋＋2H 2 O＋2Cl- Fe2+ + Phen = Fe2+ - Phen (橘红色) 用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。 三、仪器与试剂 1．醋酸钠：l mol·L-1； 2．盐酸：6 mol·L-1； 3．盐酸羟胺：10％（用时配制）； 4．邻二氮菲（%）：邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中； 5．铁标准溶液。 (1)100μg·mL-1铁标准溶液：准确称取（NH 4） 2 Fe（SO 4 ） 2 ·12H 2 0于烧杯中， 加入20 mL 6 mol·L-1盐酸及少量水，移至1L容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀. 6．仪器:7200型分光光度计及l cm比色皿。 四、实验步骤 1.系列标准溶液配制 (1)用移液管吸取10mL100μg·mL-1铁标准溶液于100mL容量瓶中，加入2mL 6 mol·L-1盐酸溶液, 以水稀释至刻度，摇匀. 此溶液Fe3+浓度为10μg·mL-1. (2) 标准曲线的绘制: 取50 mL比色管6个，用吸量管分别加入0 mL，2 mL，4 mL, 6 mL, 8 mL和10 mL10μg·mL-l铁标准溶液，各加l mL盐酸羟胺，摇匀; 经再加2mL邻二氮菲溶液, 5 mL醋酸钠溶液，摇匀, 以水稀释至刻度，摇匀后放置 10min。 2.吸收曲线的绘制 取上述标准溶液中的一个, 在分光光度计上，用l cm比色皿，以水为参比溶液，用不同的波长，从440～560 nm，每隔10 nm测定一次吸光度，在最大吸收波长
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
邻二氮菲分光光度法测定微量铁 课程名称：仪器分析 指导教师：李志红 实验员：张丽辉李国跃崔凤琼 刘金旖普杰飞赵宇 时间: 2003年5月12日
一、实验目的： （1）掌握研究显色反应的一般方法。 （2）掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法。 （3）熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长。 （4）学会制作标准曲线的方法。 （5）通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁在未知式样中的含量，掌握721型，723型分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。 二、原理： 可见分光光度法测定无机离子，通常要经过两个过程，一是显色过程，二是测量过程。为了使测定结果有较高灵敏度和准确度，必须选择合适的显色条件和测量条件，这些条件主要包括入射波长，显色剂用量，有色溶液稳定性，溶液酸度干扰的排除。 （1）入射光波长：一般情况下，应选择被测物质的最大吸收波长的光为入射光。 （2）显色剂用量：显色剂的合适用量可通过实验确定。 （3）溶液酸度：选择适合的酸度，可以在不同PH缓冲溶液中加入等量的被测离子和显色剂，测其吸光度，作DA-PH曲线，由曲线上选择合适的PH范围。 （4）有色配合物的稳定性：有色配合物的颜色应当稳定足够的时间。 （5）干扰的排除：当被测试液中有其他干扰组分共存时，必须争取一定的措施排除干扰。 邻二氮菲与Fe2+在溶液中形成稳定橙红色配合物。配合无的ε = ×104 L· mol ·cm-1。 配合物配合比为3：1，PH在2-9（一般维持在PH5-6）之间。在还原剂存在下，颜色可保持几个月不变。Fe3+与邻二氮菲作用形成淡蓝色配合物稳定性教差，因此在实际应用中加入还原剂使Fe 3+还原为Fe2+与显色剂邻二菲作用，在加入显色剂之前，用的还原剂是盐酸羟胺。此方法选择性高Br3+、Ca2+、Hg 2+、Zn2+及Ag+等离子与邻二氮菲作用生成沉淀，干扰测定，相当于铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Sio32-，20倍的Cr3+、Mn2+、VPO3-45倍的Co2+、Ni2+、Cu2+等离子不干扰测定。 三、仪器与试剂： 1、仪器：721型723型分光光度计 500ml容量瓶1个，50 ml 容量瓶7个，10 ml 移液管1支 5ml移液管支，1 ml 移液管1支，滴定管1 支，玻璃棒1 支，烧杯2 个，吸尔球1个，天平一台。 2﹑试剂：（1）铁标准溶液100ug·ml-1,准确称取铁盐NH4Fe(SO4)2·12H2O置于烧杯中，加入盐酸羟胺溶液，定量转依入500ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度充分摇匀。 （2）铁标准溶液10ug·ml-1.用移液管移取上述铁标准溶液10ml，置于100ml容量瓶中，并用蒸馏水稀释至刻度，充分摇匀。 （3）盐酸羟胺溶液100g·L-1(用时配制) （4）邻二氮菲溶液·L-1先用少量乙醇溶液，再加蒸馏水稀释至所需浓度。 （5）醋酸钠溶液·L-1μ 四、实验内容与操作步骤： 1.准备工作 (1) 清洗容量瓶，移液官及需用的玻璃器皿。 (2) 配制铁标溶液和其他辅助试剂。 (3) 开机并试至工作状态，操作步骤见附录。
实验5 分光光度法测定微量铁的条件试验
实验5 分光光度法测定微量铁的条件试验 一、目的要求 1. 通过本实验学习确定实验条件的方法； 2. 学习Vis-723G型分光光度计的使用方法。 二、基本原理在可见光分光光度测定中，通常是将被测物质与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测量其吸光度，进而求得被测物质的含量。因此，显色反应的完全程度和吸光度的物理测量条件都影响到测定结果的准确性。显色反应的完全程度取决于介质的酸度，显色剂的用量、反应的温度和时间等因素。在建立分析方法时，需要通过实验确定最佳反应条件。为此，可改变其中一个因素(例如介质的pH值)，暂时固定其它因素，显色后测量相应溶液的吸光度，通过吸光度－pH曲线确定显色反应的适宜酸度范围。其它几个影响因素的适宜值，也可按这一方式分别确定。本实验以邻二氮菲为显色剂，找出测定微量铁的适宜显色条件。 三、仪器及试剂 1. 仪器 Vis-723G型分光光度计(上海分析仪器厂)；容量瓶50mL，250mL；吸量管5mL，10mL； 吸量管25mL，10 mL，5 mL，2 mL；pH计；玻璃复合电极。 2.试剂 ①铁盐标准溶液 准确称取若干克(自行计算)优级纯的铁铵矾NH4Fe(SO4)2·12H2O于小烧杯中，加水溶解，加入6mo1·L －1 HCl溶液5mL，酸化后的溶液转移到250mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，所得溶液每毫升含铁0．100mg。然后吸取上述溶液25．00mL置于250mL容量瓶中，加入6mo1·L－1 HCl 溶液5mL, 用蒸馏水稀释至刻度，描匀，所得溶液含铁0．0100mg·mL—1。 ②0．1％邻二氮菲(又称邻菲咯啉)水溶液③1％盐酸羟胺水溶液 ④HAc－NaAc缓冲溶液(pH=4．6) 称取136g优级纯醋酸钠，加120mL冰醋酸，加水溶解后，稀释至500mL。⑤0．1mo1．L－1NaOH溶液⑥0．1mo1．L－1HCl溶液⑦广泛pH试纸和不同范围的精密pH 试纸注上述试剂中，有特殊说明的除外，其余均为分析纯试剂或由分析纯试剂所配制。 四、实验步骤 1．吸收曲线的绘制 用吸量管吸取0.0，5.0 mL的0．0100mg·mL—1的铁标准溶液分别注入三个50mL的容量瓶中，各加入1mL盐酸羟胺溶液、2mL邻二氮菲、5mL NaAc，用水稀释至刻度，摇匀。放置10分钟后，用1cm比色皿、以试剂空白（即0.0mL铁标液）为参比溶液，在440~560nm之间，每隔5nm测定一次吸光度。 2．酸度影响 于9只50mL容量瓶中，用吸量管各加入5.0mL 0.0100mg/mL的铁标准溶液，2.5mL盐酸羟胺溶液和5.0mL邻二氮菲溶液，然后按下表1分别加入HCl或NaOH溶液。 表1 HCl、NaOH溶液加入量
邻二氮菲分光光度法测量微量铁的方法
邻二氮菲分光光度法测量微量铁的方法？具体的计算过程怎么算？ 不能。 加入的试剂的作用分别是：盐酸羟铵是还原剂、邻二氮菲是显色剂、NaAc溶液是缓冲溶液用来控制溶液的PH值（测定时，若酸度较高反应进行较慢，酸度太低则二价铁离子水解，影响显色）。 加还原剂是为了把Fe3+还原为Fe2+，必须先加，这是因为Fe2+与邻二氮菲可生成稳定的桔红色配合物[Fe(phen)3]2+，Fe3+也能与邻二氮菲生成淡蓝色[Fe(phen)3]3+，盐酸羟胺作为还原剂把三价铁还原成二价铁离子，让其与邻二氮菲形成稳定络合物，若在还原剂前先加显色剂邻二氮菲，邻二氮菲会与Fe3+络合，其与三价铁的络合物不如与二价铁的络合物稳定，也就是络合不够完全，不能准确得出铁的含量。 用邻二氮菲法测定铁时,为什么在测定前需要加入还原剂盐酸羟胺 答:因为在通常情况下,铁以三价存在,而只有二价铁才能和邻二氮菲发生反应,所以要将三价铁用盐酸羟胺还原到二价. (2)参比溶液的作用是什么在本实验中可否用蒸馏水作参比 答:参比溶液的作用是扣除背景干扰,不能用蒸馏水作参比,因为只有参比和试液成分尽可能相近,测量的误差才会越小. 用邻二氮菲测定铁时，为什么要加入盐酸氢胺？其作用是什么？试写出有关的化学反应方程式. 答：加入盐酸氢胺是为了将Fe3+全部转化为Fe2+，有关的反应如下： 2 Fe3+ + 2 NH2OH·HCl = 2 Fe2+ + N2 ↑+ 2 H2O + 4 H+ + 2 Cl— 2.在有关条件实验中，均以水为参比，为什么在测绘标准曲线和测定试液时，要以试剂空白溶液为参比？答：扣除实验背景干扰。（详细内容自己想）
水中铁离子测定方法二氮杂菲分光光度法
水中铁离子测定方法二氮 杂菲分光光度法 Last revision date: 13 December 2020.
水中铁离子含量测定方法-- 二氮杂菲分光光度法 铁在深层地下水中呈低价态,当接触空气并在pH大于5时, 便被氧化成高铁并形成氧化铁水合物(Fe2O3?3H2O)的黄棕色沉淀,暴露于空气的水中, 铁往往也以不溶性氧化铁水合物的形式存在。当pH值小于5时,高铁化合物可被溶解。因而铁可能以溶解态、胶体态、悬浮颗粒等形式存在于水体中, 水样中高铁和低铁有时同时并存。 二氮杂菲分光光度法可以分别测定低铁和高铁,适用于较清洁的水样;原子吸收分光光度法快速且受干扰物质影响较小。水样中铁一般都用总铁量表示。 1 、二氮杂菲分光光度法 应用范围 本法适用于测定生活饮用水及其水源水中总铁的含量。 钴、铜超过5mg/L,镍超过2mg/L,锌超过铁的10倍对此法均有干扰,饿、镉、汞、钼、银可与二氮杂菲试剂产生浑浊现象。 本法最低检则量为μg, 若取50ml 水样测定, 则最低检测浓度为L。 原理 在pH3～9的条件下,低铁离子能与二氮杂菲生成稳定的橙红色络合物,在波长510nm处有最大光吸收。二氮杂菲过量时,控制溶液pH为～,可使显色加快。 水样先经加酸煮沸溶解铁的难溶化合物,同时消除氰化物、亚硝酸盐、多磷酸盐的干扰。加入盐酸羟胺将高铁还原为低铁,还可消除氧化剂的干扰。水样不加盐酸煮沸,也不加盐酸羟胺,则测定结果为低铁的含量。 仪器 100ml三角瓶。 50ml具塞比色管。 分光光度计。 试剂 铁标准贮备溶液:称取硫酸亚铁铵[Fe(NH4)2(SO4)2?6H2O],溶于70ml 20+50硫酸溶液中,滴加L 的高锰酸钾溶液至出现微红色不变,用纯水定容至1000ml。此贮备溶液含铁。
总铁离子的测定邻菲罗啉分光光度法
总铁离子的测定——邻菲罗啉分光光度法 本方法适用于循环冷却水和天然水中总铁离子的测定，其含量小于1mg/L。 1．0 原理 亚铁离子在PH值3~9的条件下，与邻菲罗啉（1，10—二氮杂菲）反应，生成桔红色络合离子： 3C12H8N2+Fe2+→[Fe（C12H8N2）3]2+ 此铬合离子在PH值3~时最为稳定。 水中三价铁离子用盐酸羟胺还原成亚铁离子，即可测定总铁。 2．0 试剂 2．1 1+1盐酸溶液。 2．2 1+1氨水。 2．3 刚果红试纸。 2．4 10%盐酸羟胺溶液。 2．5 %邻菲罗啉溶液。 2．6 铁标准溶液的配制 称取0.864g硫酸铁铵[FeNH4（SO4）2·12H2O]溶于水，加硫酸，移入1000mL容量瓶中，稀释至刻度。此溶液为1mL含铁标准溶液。 吸取上述铁标准溶液10mL，移入100mL容量瓶中用水稀释至刻度，此溶液为1mL含铁标准溶液。 3．0 仪器 3．1 分光光度计。 4．0 分析步骤 4．1 标准曲线的绘制 分别吸取1mL含铁标准溶液0，，，，，于6只50m容量瓶中，加水至约25mL，各加1毫米长的刚果红试低，在试纸呈蓝色时，各瓶加1mL10%盐酸羟胺溶液，%邻菲罗啉溶液，混匀后用1+1氨水调节使刚果红试纸呈紫红色，再加1滴1+1氨水，使试纸呈红色，用水稀释至刻度。10分钟后于510nm处，用3cm 比色皿，以试剂空白作参比，测其吸光度，以吸光度为纵坐标，铁离子毫克数为横坐标，绘制标准曲线。 4．2 水样的测定 取水样50mL于150mL锥形瓶中，放入1毫米长的刚果红试纸，用1+1盐酸溶液调节使水呈酸性，PH＜3，刚果红试纸显蓝色。加热煮沸10分钟，冷却后移入50mL容量瓶中，加10%盐酸羟胺溶液1mL，摇匀，1分钟后，再加%邻菲罗啉溶液2mL，用1+1氨水调节PH，使刚果红试纸呈紫红色，再加1滴氨水，试纸呈红色后用水稀释至刻度。10分钟后于510nm处，以3cm比色皿，以试剂空白作参比，测其吸光度。 5．0 分析结果的计算 水样中总铁离子含量X（毫克/升），按下式计算： X= A ×1000 Vw 式中：A—从标准曲线查得的铁离子的含量，毫克； Vw—水样体积，毫升。 6．0 注释 6．1 循环冷却水中铁含量常以三氧化二铁和氢氧化铁沉淀形式存在，加盐酸煮沸以使其溶解。 6．2 分析步骤中溶液的PH控制也可采用加2mL 2mol/L盐酸，在加邻菲罗啉后，再加5mL 22%醋酸铵溶液，但醋酸铵溶液应不含铁离子，否则，更换试剂时应重新绘制标准曲线。 7．0 允许差 水中总铁离子含量小于1mg/L时，平行测定两结果差不大于L。
北京理工大学邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
邻二氮菲分光光度法测定铁 刘红阳 63 一、实验目的 1、学习测定微量铁的通用方法； 2、掌握分光光度法分析的基本操作及数据处理方法； 3、初步了解分光光度法分析实验条件研究的一般做法。 二、实验原理 一般选择络合物的最大吸收波长为工作波长。控制溶液酸度是显色反应的重要因素。因为多数显色剂是有机弱酸或弱碱，溶液的酸度会直接影响显色剂的理解程度，从而影响显色反应的完全程度及络合物的组成。另一方面，酸度大小也影响着金属离子的存在状态，因此也影响了显色反应的程度。应当确定显色剂加入量的合适范围。不同显色反应的络合物达到稳定所需要的时间不同，且达到稳定后能维持多久也大不相同。大多数显色反应在室温下就能很快完成，但有些反应必须加热才能较快进行。此外，加入试剂的顺序、离子的氧化态、干扰物质的影响等，均需一一加以研究，以便拟定合适的分析方案，使测定既准确，又迅速。本实验通过对铁(Ⅱ)-邻二氮菲显色反应的条件实验，初步了解如何拟定一个分光光度法分析实验的测定条件。 邻二氮菲是测定铁的高灵敏性、高选择性试剂之一，邻二氮菲分光光度法是化工产品中微量铁测定的通用方法。在pH2~9的溶液中，Fe2+和邻二氮菲生成1:3 橘红色络合物，lgβ 3=(20℃)，ε 508 =×104L·mol-1·cm-1，其吸收曲线如图一所 示；Fe3+亦可以与邻二氮菲生成蓝色络合物，因此，在显色前需用盐酸羟胺溶液将全部的Fe3+还原为Fe2+。反应式如下（和图二）： 2Fe3++2NH 2OH===2Fe2++N 2 ↑+2H 2 O+2H+
Fe2++3 N N Fe 2+ 图一图二 用分光光度法测定物质的含量，一般采用校准曲线法（又称工作曲线法），即配制一系列浓度有小到大的标准溶液，在选定条件下依次测量各标准溶液的吸光度A，在被测物质的一定浓度范围内，溶液的吸光度与其浓度呈线性关系（邻二氮菲测Fe2+，浓度在0~μg·mL-1范围内呈线性关系）。以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制出校准曲线。测绘校准曲线一般要配制3~5 个浓度递增的标准溶液，测出的吸光度至少要有三个点在一条直线上。作图时，坐标选择要合适，使测量数据的有效数字位数与坐标的读数精度相符合。 测定未知样时，操作条件应与测绘校准曲线时相同。根据测得的吸光度从校准曲线上查出相应的浓度，就可计算出试样中被测物质的含量。通常应以试剂空白溶液为参比溶液，调节仪器的吸光度零点。 三、实验试剂与仪器 试剂：·L-1乙酸钠溶液，·L-1柠檬酸(H 3C 6 H 5 O 7 ·H 2 O)溶液,%盐酸羟胺(NH 2 OH·HCl) 溶液，%邻二氮菲溶液，μg·mL-1标准铁溶液。
分光光度法测定邻二氮菲一铁_络合物的组成_
实验2 分光光度法测定邻二氮菲一铁(Ⅱ)络合物的组成 一、实验原理 络合物组成的确定是研究络合反应平衡的基本问题之一。金属离子M和络合剂L形成络合物的反应为 M + nL====MLn 式中，n为络合物的配位数，可用摩尔比法(或称饱和法)进行测定，即配制一系列溶液，各溶液的金属离子浓度、酸度、温度等条件恒定，只改变配位体的浓度，在络合物的最大吸收波长处测定各溶液的吸光度，以吸光度对摩尔比c L/c M作图，如图2-1所示。 图2-1 摩尔比法测定络合物组成 将曲线的线性部分延长相交于一点，该点对应的c L/c M值即为配位数n。摩尔比法适用于稳定性较高的络合物组成的测定。 二、仪器与试剂 1．仪器721或722s型分光光度计。 2．试剂10-3 mol·L-1铁标准溶液；100 g·L-1盐酸羟胺溶液；10-3 mol·L-1邻二氮菲水溶液；1.0 mol·L-1乙酸钠溶液。 三、实验步骤 取9只50 mL容量瓶，各加入1.0 mL10-3 mol·L铁标准溶液，1 mL100 g·L-1。盐酸羟胺溶液，摇匀，放置2 min。依次加入1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，3.5，4.0，4.5，5.0 ml。10-3 mol·L-1邻二氮菲溶液，然后各加5 mL 1.0 mol·L-1叫乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在510 nm处，用1 cm吸收池，以水为参比，测定各溶液的吸光度A。以A对c L/c M作图，将曲线直线部分延长并相交，根据交
点位置确定络合物的配位数n。 四、思考题 1．在什么条件下，才可以使用摩尔比法测定络合物的组成? 2．在此实验中为什么可以用水为参比，而不必用试剂空白溶液为参比?
邻菲罗啉分光光度法测铁离子
邻菲罗啉分光光度法测铁离子 一、主要仪器及试剂 1．邻菲罗啉溶液：0.12%水溶液； 2．盐酸羟胺溶液：10%水溶液； 3．1+1氨水 4．1+1盐酸 5．铁标准溶液：准确称取0.216g 硫酸铁胺(NH4Fe(SO4)2·12H2O)置于烧杯中，加少量水溶解，加0.625 mL 硫酸，定量转移到250ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液为1ml含0.1mg铁标准溶液。吸取上述溶液10ml，移入100ml 容量瓶中用水稀释至刻度，此溶液为1ml含0.01mg铁标准溶液。 6．分光光度计带有厚度为3cm的比色皿。 7．1+1盐酸 8．刚果红试纸 二、测定步骤 1．绘制标准曲线： 分别吸取浓度为0.01mg/mL铁标准溶液为0.0、1.0、2.0、3.0、4 .0 、5.0mL 于6只50mL容量瓶中，加水至约25ml，各加1毫米长的刚果红试纸，在试纸呈蓝色时，各瓶加10%盐酸羟胺1mL，0.12%邻菲罗啉2ml,混匀后用1+1氨水调节使刚果红试纸呈紫色，再加一滴1+1氨水，使试纸呈红色，用水稀释至刻度，混匀。10min后于510nm处，以空白溶液为参比，测定各溶液的吸光度。以吸光度为纵坐标、铁的毫克数为横坐标绘制标准曲线。 2．总铁离子的测定： 吸取50mL水样于150mL锥形瓶中，放入1毫米长的刚果红试纸，用1+1盐酸调节使水呈酸性，P H＜3，刚果红试纸呈蓝色。加热煮沸10分钟，冷却后移入50ml容量瓶中，加10%盐酸羟胺溶液1mL，摇匀，1分钟后再加0.12%邻菲罗啉2ml，用1+1氨水调节PH，使刚果红试纸呈紫色，再加一滴氨水，使试纸
呈红色后用水稀释至刻度，混匀。10min 后于510nm 处，用3cm 比色皿，以试剂空白溶液为参比，测定溶液的吸光度。 三、计算 水样中总铁离子的含量X 为 X=1000 V m mg/L 式中：m ——从标准曲线上查得的试样中含铁的毫克数，mg ； V ——所取水样的体积，mL 。 循环冷却水中磷含量的测定方法 ZB/T G76 002-90 钼酸铵分光光度法 本标准参照采用国际标准ISO6878/1《水质、磷的测定、钼酸盐分光光度法》 一、主要仪器与试剂 1．分光光度计：带有厚度为1cm 的吸收池 2．硫酸：1+1、1+35、1+3溶液 3．抗坏血酸，20.0g/L 溶液 称取10g 抗坏血酸，精确至0.5g ，称取0.2g 乙二胺四乙酸二钠·2H 2O ，精确至0.01g ，溶于200mL 水中，加入8mL 甲酸，用水稀释至500 mL ，混匀，贮存于棕色瓶中（有效期一个月）； 4．钼酸铵：26g/L 溶液 称取13g 钼酸铵，精确到0.5g ，称取0.5g 酒石酸锑钾（KSbOC 4H 4O 6·1/2H 2O ）精确至0.01g ，溶于200mL 水中，加入230mL 硫酸溶液（1+1），混匀，冷却后用水稀释至500mL ，贮存于棕色瓶中（有效期二个月）； 5．过硫酸钾：40g/L 溶液 称取20g 过硫酸钾，精确至0.5g ，溶于500mL 水中，摇匀，贮存于棕色瓶中（有效期一个月）；
邻二氮菲分光光度法测定微量铁
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件 一、实验目的 1、掌握分光光度计的原理、构造和使用方法。 2、学习分光光度计分析中如何确定最佳实验条件。 二、实验原理 在可见光区分光光度法测量中，通常是将被测物质与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。显色反应的程度受显色剂用量、显色时间，显色液酸度等条件的影响，通过实验，确定合适的显色条件。 三、仪器及试剂 分光光度计；1cm吸收池；10mL移液管； 25mL容量瓶,100ml容量瓶 1．铁标准溶液 100μg·mL-1（即0.01 mg·mL-1）铁标准溶液：准确称取0.3511g（NH4）2 Fe（SO4）2·6H2O 于烧杯中，用2 mol·L-l盐酸15 mL溶解，移入500 mL容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。 用前，准确稀释10倍成为含铁10 ug·mL-1标准溶液。 2. 1g.L-1邻二氮菲：1.0 g邻二氮菲于小烧杯中，加入5-10ml 95%乙醇溶液溶解，再用水 稀释到1000 mL。 3. 10％盐酸羟胺水溶液：10％水溶液（现用现配，避光保存） 4. 醋酸钠溶液1mol/L 5. 0.8 mol/L氢氧化钠溶液 四、实验步骤 1、吸收曲线的制作和测量波长的选择 用移液管吸取0.0ml、2.0mL 10 ug·mL-1标准溶液，分别注入二个25 mL容量瓶中，加 入1.0mL10%的盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min；再加2 mL邻二氮菲溶液，2.5mL醋酸钠 溶液溶液，用水稀释至刻度，摇匀。放置5min后，用1cm比色皿，以试剂空白为参比，在 440~560nm之间，每隔10nm测一次吸光度，其中在500-520 nm之间，每隔5nm测一次吸 光度。然后以波长为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。 2、显色剂用量影响 在7只25mL容量瓶中，各加2.0 mL10 ug·mL-1铁标准溶液和1.0 mL 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min。分别加入0.1、0.25、0.5、1.0、2.0、3.0 、4.0ml 1g.L-1邻二氮菲溶液，再各加2.5mL 1mol/L醋酸钠缓冲溶液，以水稀释至刻度，摇匀。放置5min后，以水为参比，在510 nm测量各溶液的吸光度。 其中，加2.0 mL 1g.L-1邻二氮菲溶液的显色溶液不要倒掉，用于时间影响的测定。 3、显示时间的影响 取上述1中加2.0 mL 1g.L-1邻二氮菲溶液的容量瓶，在显色时间为10min、20min、30min、40min、50min、60min分别测定吸光度值。 4、溶液酸度的影响 在7只25mL容量瓶中，各加入2.0 mL 10 ug·mL-1铁标准溶液和1.0 mL 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min，再各分2.0ml邻二氮菲溶液，摇匀。然后，分别用移液管准确吸取加人0.8 mol·L-1氢氧化钠溶液0.0、0.5、1.0，2.0，3.0，4.0、5.0ml于容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀，放