胎儿持续性右脐静脉在产前诊断中的意义

心脏的胚胎发育

脏的胚胎发育分为三个阶段： （一）原始心脏的形成 （二）心脏外形的建立 （三）心脏内部的分隔 原始心脏的建立由于和我们诊断关系不大，我觉得没有必要去讲，不知道大家是否同意。我们还是先从（二）心脏外形的建立说起吧！ 图示：最初的心管 心管各段因生长速度不同，首先出现三个膨大，由头端向尾端依次称心球（bulbus cordis）、心室和心房。以后在心房的尾端又出现一个膨大，称静脉窦（sinus venosus）。 图示：静脉窦

心房和静脉窦早期位于原始横隔内。静脉窦分为左、右两角。左、右总主静脉、脐静脉和卵黄静脉分别通入两角。 心球的远侧份较细长，称动脉干（truncus arteriosus）。动脉干前端连接动脉囊（aorticsac），动脉囊为弓动脉的起始部。 心管发生过程中，由于其两端固定在心包上，而游离部（即心球和心室部）的生长速度度又远较心包腔扩展的速度快，因而心球和心室形成“U”形弯曲，称球室襻（bulboventricular loop），凸

面向右、前和尾侧。 不久，心房渐渐离开原始横隔，位置逐渐移至心室头端背侧，并稍偏左。相继静脉窦也从原始横隔内游离出来，位于心房的背面尾侧，以窦房孔与心房通连。此时的心脏外形呈“S”形弯曲，而心房受前面的心球和后面的食管限制，故向左、右方向扩展，结果便膨出于动脉干的两侧。 心房扩大，房室沟加深，房室之间遂形成狭窄的房室管（atrioventricular canal ）。心球则可分为三段：远侧段细长，为动脉干；中段较膨大，为心动脉球（bulbus arteriosus cordis）；近侧段被心室吸收，成为原始右心室。原来的心室成为原始左心室，左、右心室之间的表面出现室间沟。至此，心脏已初具成体心脏的外形，但内部仍未完全分隔。

脐动脉血流参数正常值

推荐不同孕期的脐动脉血流参数正常值: 脐动脉血流变化,反映血管阻力情况. (1)脐动脉收缩期峰值和舒张末期流速之比(S/D), S代表收缩期峰值流速,反映血流量,D代表舒张末期流速,反映胎盘血管阻力.正常妊娠脐动脉血流S/D值岁孕周增大而逐渐降低,S/D从早孕大于4,随着孕周增长可以降到小于3,甚至是2以下.这表明胎盘逐渐成熟,胎盘内血管包括母体妊娠子宫血液循环那部分的动脉/静脉逐渐增多.增粗,胎盘外周阻力下降.使脐动脉在舒张期时仍能维持足够的血流一满足胎儿的雪供. (2)测量脐动脉血流S/D值最佳测量位置是脐动脉与胎盘附着处,这里测出的值要比靠近胎儿侧段的值低,所以不要随意的见到脐动脉就测出一个比值.越是靠近胎盘侧越好. (3)脐动脉血流S/D值增高常见于妊高症引起的胎盘功能不全.脐动脉扭曲.和母亲糖尿病. (4)脐动脉血流S/D值一般在孕32周以后.....2.7加减0.5左右. 孕周脐动脉血流S/D值 20 4.73(左右) 21 4.28 22 4.14 23 4.07 24 3.86 25 3.82 26 3.76 27 3.65 28 3.59 29 3.48 30 3.42 31 3.31 32 3.19 33 3.14 34 3.08 35 2.96 36 2.85 37 2.74 38 2.74 39 2.62 40 2.51 41 2.39 超声医学》第四版资料 正常妊娠在第22孕周前，脐动脉血流频谱变化不大。收缩期血流速度波形陡而尖 舒张期血流相对较低 据国内外有关报道：脐动脉流速的A/B值在第20孕周为3.9

第30孕周前A/B值下降较迅速以后下降较平稳 至30孕周后下降至3.0以下 我们这里较多的测量脐动脉的S/D值 对于>32孕周的测量，<3视为正常，孕足月的应<2.5 测量的意义主要是看是否有胎儿宫内窘迫的情况 脐动脉 孕周 PI RI 21-24 1.08(+/-)0.22 0.64(+/-)0.08 25-26 1.02(+/-)0.20 0.65(+/-)0.06 27 1.00(+/-)0.20 0.63(+/-)0.07 28 0.95(+/-)0.19 0.63(+/-)0.07 29 1.00(+/-)0.23 0.63(+/-)0.08 30 1.01(+/-)0.26 0.62(+/-)0.07 31 1.02(+/-)0.26 0.64(+/-)0.09 32 0.95(+/-)0.21 0.62(+/-)0.08 33 0.93(+/-)0.19 0.60(+/-)0.08 34 0.90(+/-)0.21 0.58(+/-)0.09 35 0.85(+/-)0.16 0.57(+/-)0.07 36 0.86(+/-)0.48 0.57(+/-)0.07 37 0.86(+/-)0.16 0.57(+/-)0.07 38 0.86(+/-)0.20 0.56(+/-)0.08 39 0.84(+/-)0.15 0.56(+/-)0.08 40 0.84(+/-)0.15 0.55(+/-)0.08 脐动脉血流检测技术及其临床应用 Fitzgerald和Drrmn在1997年首次成功的记录胎儿脐动脉血流信号（fetal umbilicalartery tlow signal），这一技术为了解胎儿-胎盘循环的血液动力学改变提供了一种简便、有效、可重复、无创伤的检测方法，对于高危妊娠的监测及围产儿结局的预测有重要作用，是其它产前检测方法所不能代替的。 一、脐动脉血流检测的基本问题： （一）多普勒效应： 多普勒效应是自然界普遍存在的一种现象，由奥地利天体物理学家多普勒在1842年观察首次发现的，当一个波源与一个物体发生相对运动时，该物体的反射波的波长和频率会发生变化,被称为多普勒效应。也就是说，当A物体向与发生相对运动的B 物体发射一束频率为Po波长的能量波时B物体所接受并反射的能量波的频率将发生改变，这种发射频率与接受频率之间的改变称为频移，频移的大小与入射频率、波形传播速度、物体运动的速度及方向有关。当A物体远离B物体时，B物体接受的能量波的波长增长频率下降，在日常生活中的一个典型例子是：当汽车沿着道路从站立的人旁边飞速行驶过时，人的耳朵可以感受到汽车笛声（频率）的改变，多普勒效应的公式如下: fo=2fovos?; 其中： fo：频移; fo：入射波频率 ; v：物体运动的速度; c：波的传播速度; ?:波的方向与物体运动之间的夹角；因此，应用多普勒超声仪可以测量心脏或血管的血流速度 （二）脐动脉血流速度波形分析 1、血管中血流速度的分布：在血管内部的血流速度有一个较大的分布范围，管壁处为最小，血管轴心处最大，其间各处速度均不同。因此在某一个时刻血管内血流的速度是从最小值到最大值之间连续数据的集合。该集合的带宽由血管横截面积的大小和取样容积的大小以及相对位置等决定。 2、频谱上各参数的物理意义：当对血流进行取样时，由于含有许多红细胞，每

人脐静脉内皮细胞的培养及鉴定

本课题为安徽省自然科学基金安科医药专项资助项目(01043708)作者单位:230001 合肥 安徽省立医院普外科 安徽医科大学2001级硕士研究生(傅斌生) 人脐静脉内皮细胞的培养及鉴定 余继海 许戈良 汪 建 荚卫东 傅斌生 [摘 要] 目的 探讨新生儿脐静脉内皮细胞的培养及鉴定方法,建立血管内皮细胞培养模型,为体外研究血管内皮细胞提供实验手段。方法 采用胶原酶 灌流消化法培养人脐静脉内皮细胞,当原代培养细胞80%以上汇合后,用胰蛋白酶消化传代;根据细胞生长特点、形态特征、细胞表型和分泌蛋白流式细胞术(F M 术)免疫荧光检查对细胞进行鉴定。结果 种植在培养瓶中的内皮细胞12小时贴壁生长,48~72小时生长最快,7~10天汇合。内皮细胞呈接触抑制生长、呈鹅卵石样外观,FM 术检测CD31和V -R-Ag 均为阳性表达。结论 消化酶灌注脐静脉消化内皮细胞是获取血管内皮细胞的一种好方法,可靠性大,成功率高,可以构建体外研究血管内皮细胞的模型。 [关键词] 内皮细胞;培养 C ulture and identif ication of human endothelial cells derived f rom umbilical veins Y u Jihai ,Xu Geliang,W ang J ian,et al A nhui Prouincial H osp ital,H ef ei 230001 [Abstract] Objective T o extablish the methods of culturing human endothelial cells (EC)and identifing the cells ac cording to t he antigens expressed and their morpholog ical aspect.Methods A fter digestion w ith t ype collagenase at 37!for 10minutes,the cells were centrifuged,and the cell pellet was resuspended in DEM E medium containing fetal bovine serum (10%vol/vol),seeded on gelatin(0.1%w t/vol)procoated dishes at aconcentr at ion of 10,000per square centimeter.T he medium was changed 1days later when the cells w er e attached and every 2days,until the cells reached confluence.Phase con trast microscopy and flow cy tometry with specific antisera against von willebrand factor and CD31were used to obser ve and i dentify the culturedcells.Results At confuluence (7~9days),the cultured cells had a cobbestone appear ance wit h a strict monolayer grow th and contact inhibition.T he mean fluorescence intensity of the cells was similar w ith both antibodies for the cultured cells vs controls.C onclusion T he cultured cells are endothelial cells,and the method of identification is practical and convenient. [Key words] Endot helial cells;Culture 我们采用胶原酶 灌流消化法成功培养人脐静脉内皮细胞,根据细胞生长特点、形态特征、细胞表型和分泌蛋白流式细胞术免疫荧光检查对细胞进行鉴定,从而构建体外研究血管内皮细胞的模型,现报告如下。 材料与方法 一、材料与培养用液的配制 CK 型倒置显微镜(日本Olympus Tokyo 公司),流式细胞仪(Coulter 公司),BB 5060型CO 2培养箱(美国Heraeus),Cryfuge500S 型低温离心机,胎牛血清(FBS,100ml/瓶,H yclone 公司),人血管内皮生长因子(VEGF,10 g/支,Pepro Tech 公司),CD31PE 购自Becton Dickison 公司(编号:340297)。 培养用液:(1)PBS 液:Nacl 8.5g 、Kcl 0.2g 、NaH 2PO 4H 2O 2g 、KH 2PO 40.2g 溶于1000三蒸水中,120!灭菌20m in,分装备用。(2)胶原酶(Gibco 公司,10mg/支)和胰蛋白酶(上海华美公司)分别溶于100ml PBS 中,浓度分别为0.1%和0.25%,抽滤消毒备用。(3)DMEM 培养基(购自BRL-Gibco 生命技术公司):按照说明书操作,将一袋干粉溶于1000ml 三蒸水中,抽滤消毒,加入胎牛血清终浓度为10%,4!贮存备用。 二、方法 1.内皮细胞原代培养:无菌获取新生儿脐带,立即用生理盐水冲洗血迹,剪去钳痕和血肿部位,再用PBS 液冲净脐静脉内血迹。将脐带一端用丝线结扎固定,用注射器向脐静脉另一端内注满0.1%胶原酶液,止血钳钳夹后放入水浴锅内孵育15min 。取出脐带松开血管钳释放酶细胞混合液于离心管中,再用PBS 液冲洗脐静脉后一并收集于离心管中,1000rpm ?8min 。弃去上清液,转移至35cm 2 培养瓶(Falcon 公司)中,加入DM EM 培养液(内含10%胎牛血清,青霉

单脐动脉2例报告及分析

单脐动脉2例报告及分析 【摘要】通过回顾性分析2例单脐动脉病例，了解单脐动脉胎儿常伴有先天性畸形，产前发现的单脐动脉胎儿的临床处理及预后应根据是否合并畸形以及畸形的严重程度而定。对于合并致死性畸形应及时终止妊娠。对于单纯性单脐动脉者可考虑继续妊娠，但应密切关注其妊娠过程。结论是常规检测对于提高人口素质、优生优育，有着重要的临床意义。 【关键词】单脐动脉；病例报道；分析 正常脐带有3条血管，即2条动脉1条静脉。如果仅有一条脐动脉就称为单脐动脉(single umbiliealartery，SUA)，属于脐带结构和发育异常，它与新生儿出生缺陷及生长受限有关。常规检测对于提高人口素质、优生优育，有着重要的临床意义。因国内报道并不多，易被产科工作人员及超声检查人员所忽视。我院2010年1月至4月分娩248例，发现的2例单脐动脉，报告如下： 1临床资料 病例1：孕妇，29岁，孕1产0，护士，丈夫警察。孕期无呼吸道感染史，无毒物及放射线接触史、无流产等病史，既往无病史。孕26周产检彩超检查发现单脐动脉，未发现胎儿畸形，多次到上级医院复查结果一致。患者拒绝引产故孕期定期产检，未发现异常。查血常规、肝肾功能、乙肝两对半正常，HA V(-)，HCV(-)，HIV(-)，TP-Ab(-)。于2010年1月5日2时因“孕40周先兆临产”入院。胎心监护正常。于6日22时临产，7日10时58分经阴道顺娩一男活婴，外观无畸形。产后取近胎儿侧脐带，长约3cm肉眼观，发现为两条血管，血管壁厚，华通胶少，长70cm，检查胎盘未发现异常。病理检查（T20100064）报告：组织内见两根血管，血管壁厚，中膜平滑肌丰富，符合单脐动脉。新生儿出生后彩超心脏、双侧肾脏无异常，肺部及头颅CT均未发现异常。婴儿随访4月体检未发现异常。 病例2：孕妇，28岁，孕1产0，农民，丈夫农民。孕期无呼吸道感染史，无毒物及放射线接触史、无流产等病史，既往无病史。孕25周彩超检查：胎盘Ⅰ-Ⅱ级，羊水正常，单脐动脉可能，未发现胎儿畸形。患者拒绝引产。孕期曾多次产检，彩超报告单脐动脉，未发现其它异常。于2010年4月2日16时因“停经39+1周待产”入院。胎心监护正常。入院后彩超：单活胎，胎盘Ⅱ+级，双顶径99mm，股骨长68mm，胎儿心脏四腔心切面可显示，左右房室大小基本对称，胎心123 bpm，律齐，胎儿四肢仅部分切面可见，胎儿腹壁连续无明显中断声像。胎儿腹部内脏：肝胃双肾膀胱可见，双肾盂未见明显扩张。胎儿脐带横断面呈“吕”字形。查血常规、肝肾功能、乙肝两对半正常，HA V(-)，HCV(-)，HIV(-)，TP-Ab(-)。于2010年4月6日行子宫下段剖宫产术（无异常分娩因素），术中娩出一男活婴，新生儿外观无畸形，取近胎儿侧脐带，长约3cm肉眼观，发现为两条血管，血

超声诊断胎儿永存右位脐静脉一例

超声诊断胎儿永存右位脐静脉一例 王波（辽宁省大连市中山区妇幼保健所超声科，大连116013） 中图分类号：R445.12文献标识码：B文章编号：1006－9534（2011）11－0102－01病例：患者女，30岁。孕1产0。无特殊病史，孕妇本人 及其丈夫、父母均身体健康。孕24w时，来我院做常规产前筛查。超声检查所见：胎头位于耻骨联合上方，双顶径60mm，头围221mm，腹围197mm，股骨长44mm，胎心140次/分，羊水深度48mm。胎儿腹部横切时门静脉窦呈管状弧形弯曲指向无回声胃泡（图1）。仔细检查胎儿其他结构无畸形。超声诊断：1）单活胎，头位，2）永存性右脐静脉。孕40w，顺产一健康男婴。 讨论：脐静脉畸形较罕见，正常情况，胚胎早期脐静脉有左右两条，随着胚胎的发育，整个右脐静脉和左脐静脉的近心段逐渐萎缩消失，只有左脐静脉的远心段保留并增粗，入肝与左门静脉相连形成正常脐静脉。如果某些原因导致左脐静脉阻塞并萎缩而保留右脐静脉，则形成永久性右脐静脉。永久性右脐静脉胎儿几乎均伴有其他结构畸形。对于不伴其他结构畸形者预后较好，而伴有其他结构畸形者，其预后取决于伴发畸形的严重程度 。图1 收稿日期： 櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀 2011－02－23 （上接第89页） 及耐药性对新生儿肺炎的治疗十分重要。 从表1可以看出，目前我院新生儿肺炎呼吸道病原体培养阳性率为49.06%，以革兰氏阴性菌为主，占69.47%，检出前3位为以大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌、铜绿假单胞菌。革兰氏阳性菌检出率为26.72%，以金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性的葡萄球菌为主，革兰氏阴性菌感染多于革兰氏阳性菌感染，与国内其他报道相符［3］。但阳性检出率较相关报道低，我们认为与呼吸道分泌物采取的方法有关。对呼吸道分泌物病原学检测，既往研究中常采用经口普通痰培养或咽拭子培养，但阳性率低，可靠性差，新生儿咳嗽反射弱或无，无法配合深咳取痰，目前临床上多采用咽喉深部吸痰培养法。本文采用喉镜直视下声门处取痰培养对新生儿肺炎进行病原学检查，可有效防止口咽部寄居菌的污染。 关于细菌的耐药性，革兰氏阴性菌对多种常用的抗生素有较高的耐药性。从表2可以看出，革兰氏阴性菌对第三代头孢菌素的耐药性已达50%左右。相反，除肠杆菌属外的其他革兰氏阴性菌对哌拉西林/他唑巴坦的耐药性在25%以内，这与近年来第三代头孢菌素的广泛应用，出现产超广谱β－内酰胺酶的革兰氏阴性菌不断增多有关，他唑巴坦能抑制ESBLs，因此添加β－内酰胺酶抑制剂的β－内酰胺类抗生素对革兰氏阴性菌的耐药性明显降低。表2同时提示，左氧氟沙星对革兰氏阴性菌的耐药性也较低，亚胺培南几乎全敏感。由于氟喹诺酮类抗生素在儿科，特别是新生儿科用药属于禁忌，没有临床指导意义，因此碳青霉烯类抗生素是目前临床上抢救严重革兰氏阴性菌感染最有价值的抗生素。 葡萄球菌是引起新生儿肺炎最常见的阳性菌。表3提示，本组葡萄球菌对苯唑西林、头孢唑啉的耐药率在60%以上，而对阿奇霉素和左氧氟沙星相对较敏感，对万古霉素高度敏感。我们认为这与近年来MRS的比例不断增加有关［4］，本组资料显示MRS达到葡萄球菌的59.3%。同样由于氟喹诺酮类抗生素在新生儿科没有临床指导意义。我们认为阿奇霉素可以作为革兰氏阳性菌感染新生儿肺炎的一线治疗，而万古霉素是其他药物耐药下抢救严重革兰氏阳性菌感染新生儿肺炎最有效的药物。 随着细菌谱的不断变化，细菌耐药性的不断增加，监测分析本地区、本单位呼吸道分泌物病原菌的分布和细菌耐药情况，可有效地指导临床合理用药。 参考文献 ［1］张玉琼．392例小儿细菌性呼吸道感染及其耐药研究［J］．广东医学院学报，2004，22（3）?268． ［2］金汉珍，黄德珉，官希吉．实用新生儿学［M］．第3版．北京：人民卫生出版社，2002．435－443． ［3］周毅虹，敖当，李作敏，等．558例新生儿肺炎痰培养病原菌及耐药性分析［J］．广东医学院学报，2009，27（6）?634－637． ［4］李卫光，祝筠，朱其凤，等．山东省医院感染监测网葡萄球菌属耐药性分析［J］．中华医院感染学杂志，2008，18（9）?1317－1319． 收稿日期：2011－01－02 · 201 ·中国优生与遗传杂志2011年第19卷第11期

实验室常用实验方法-人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养

人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养 1.将15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的PBS 溶液中储存。 （注：4℃下最多贮存24 小时，室温下不超过6 小时，否则废弃） 2.用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的PBS 溶液冲洗3-5 次，将污 血冲洗干净为止。 3.用手术钳夹紧脐带下端，加入15m l的胶原酶（1m g/ml）室温下消化15-20 分钟，并不时上下摇动脐带。 4.消化完后，将下端手术钳松开，消化液流入一个50 m l无菌离心管中，用无 菌的PBS 溶液冲洗脐带2-3 次。 5.将收集液离心（2000 转/分）3 分钟。 6.倒去上清，加入10m l M199培养基（加入10U/m l的bF G F），用弯管吹散细 胞，将所有液体转入一个用明胶包被好的培养瓶中，37℃培养。 （注：每个培养瓶中加入3-4ml 无菌的1%的明胶溶液，摇匀使得明胶溶液完全铺满瓶底，放入37℃孵育，最少2 小时，用前将明胶溶液倒了即可，明胶包被有利于细胞贴壁。） 7.培养24 小时后，倒掉培养基，并用无菌的PBS 溶液清洗2-3 次，洗掉红细 胞和死细胞，加入10 m l新鲜的M199培养基。 8.以后每2 天换一次培养基（每次换掉2/3 的培养基）。 9.一般培养5-7 天，细胞可长满至80-90%单层，这时可以传代。 10.倒掉培养基，用无菌的PBS溶液清洗2-3 次，加入2-3m l消化液（0.25%胰酶 +0.1%EDTA）消化细胞，在显微镜下观察，一旦细胞变圆，即加入2-3 倍的——————————————————————————————————————————————

右脐静脉的胎儿能要吗【医学养生常识】

右脐静脉的胎儿能要吗 文章导读 右脐静脉属于一种畸形情况，也叫做持续性的右脐静脉，出现这种情况的时候 也要对症分析，一般情况下都不会导致合并胎儿畸形的情况，对于这样的的胎儿来说，在 出生以后健康也不会导致问题，但是要了解和警惕的是有少数的胎儿可能会合并胎儿畸形，比如说可能会引起脑积水，引起单脐动脉等等。 右脐静脉的胎儿能要吗 胚胎4周末，脐静脉有左右两条，并直接与静脉窦相连。以后脐静脉与肝血窦吻合，便失去了与静脉窦的连接。胎儿肝脏的发育增长使肝内的脐静脉纠缠、打结，最终退化。但是，左脐静脉并不退化，反而集中了所有从胎盘回流至胎儿的静脉血。当左脐静脉与门静 脉左支相连进入肝脏后，一部分血液经门静脉右支进入右肝，大部分血液经静脉导管直接 回流入下腔静脉及右心房。 如果右脐静脉不退化，反而左脐静脉退化了，此时，右脐静脉进入肝脏后经吻合支再进入左肝叶。同时，它还直接与静脉导管相连，这样就形成了持续性右脐静脉。造成这一过 程的原因尚不清楚。极少数右脐静脉还可越过肝脏直接与下腔静脉或右心房相连，引起血 流动力学异常。 绝大多数持续性右脐静脉不合并胎儿畸形 仅少数可能会合并胎儿畸形，例如脑积水，单脐动脉，短肢，房间隔缺损，室间隔缺损，主动脉缩窄，气管食管瘘，尿道下裂，肾移位，内脏反位，肠旋转异常，无肛畸形等。如果右脐静脉直接与下腔静脉或右心房，甚至髂静脉相连，声像图上就不能显示脐静脉在肝 内与静脉导管相连，这样静脉导管根本就是缺如。仔细跟踪脐静脉，能发现异常的连接部位，彩超可帮助诊断。这种情况往往可合并多发性畸形，如房室通道、心律失常、单脐动脉、肾盂积水、肾缺如、脉络膜囊肿、胸腔积液、半锥体、指趾异常等，甚至是染色体 畸形。 单纯持续性右脐静脉，无其他部位异常，往往为良性变异，预后较好。一旦合并其他畸形，预后往往视畸形情况而定。因此，超声发现持续性右脐静脉，就应仔细检查静脉导管，跟踪脐静脉及静脉导管的走向，了解其是否连接于下腔静脉。同时也应仔细检查其它部位。有畸形者需检查染色体，若核型异常就应中止妊娠。

人脐静脉内皮细胞的体外分离培养及鉴定.

人脐静脉内皮细胞的体外分离培养及鉴定 作者：秦明春，王若光，秦莉花，刘小丽，李春梅，刘惠萍，叶赞 【摘要】目的探讨人脐静脉内皮细胞的原代培养方法，提高体外分离培养血管内皮细胞的成功率。建立血管内皮细胞培养模型，为体外研究血管内皮细胞提供实验基础。方法取2根脐带（至少20 cm）冲净淤血，采用加工穿刺针固定脐静脉灌注消化液, 一根用0.2％胶原酶Ⅱ，另一根用0.1％胶原酶Ⅰ和0.25％胰酶等比混合消化液，比较两种酶的消化效果。收集细胞并用含有10 ng/mL的VEGF的培养基中培养，观察细胞的生长及传代。并在倒置显微镜下观察细胞的形态学特点，同时用免疫组织化学的方法对所得细胞进行鉴定。用流式细胞术观察细胞周期。结果两种消化酶方法均获得了相当数量的人脐静脉内皮细胞，胶原酶Ⅱ的消化效果稍优于混合消化酶，且比较理想的消化时间均为13 min，细胞接种后4～5 h开始贴壁生长，1周左右可生长成单层，光镜下呈多角形，“铺路石”样排列，免疫组织化学法可见内皮细胞胞浆中人第Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应。细胞周期显示约有50.6%的细胞处于G0/G1期。结论胶原酶Ⅱ和胶原酶Ⅰ与胰酶等比混合消化液灌注法是获得脐静脉内皮细胞的一种可取方法，而胶原酶是分离培养脐静脉内皮细胞的首选消化液，成功率高，可靠性大，可成功构建体外研究血管内皮细胞的模型。 【关键词】人脐静脉内皮细胞；细胞培养；流式细胞术；细胞周期；分离；鉴定 Cultivation and in vitro identification of endothelial cells from human umbilical vein 〔Ａｂｓｔｒａｃｔ〕Ｏｂｊｅｃｔｉｖ ｅTo explore the primary culture method of human vascular endothelial cells(ECs) from umbilical vein, enhance the succes s rate of separating and culturing ECs in vitro, establish the model of human vascular ECs, and provide an experimental method for research of ECs. Methods The umbilical veins in human umbilical cords, 20 cm long, were fixed and filled the digestive fluids, 0.2% collagenenaseⅡin one cord and t he complex enzyme of 0.25% trypsin and 0.1% collagenaseⅠin an other, and the digestive results were compared. All the cells were collected and cultured in fluid with 10 mg/mL VE GF, their procreation and generation were observed, the morph ologic characteristics of ECs were observed with light micros copy and immunohistochemistry under inverted microscope, and t he cell cycle was observed by flow cytometer. Results Enough

心脏的胚胎发育

二、心脏的发生 心脏发生于生心区。生心区是指胚盘前缘脊索前板（口咽膜）前面的中胚层，此区前方的中胚层为原始横隔（图24－3）。 图24－3 原始心脏的发生 （一）原始心脏的形成 人胚第18～19天，生心区的中胚层内出现围心腔（pericardiac coelom），围心腔腹侧的中胚层（即脏层）细胞密集，形成前后纵行、左右并例的一对长索，称生心板（cardiogenic plate），板的中央变空，逐渐形成一对心管（cadiac tube）。由于出现头褶，胚体头端向腹侧卷屈，原来位于口咽膜头侧的心管和围心腔便转到咽的腹侧，原来在围心腔腹侧的心管则转至它的背侧（图24－4）。当胚体发生侧褶时，一对并列的心管逐渐向中线靠拢，并从头端向尾端融合为一条。与此同时，心管与周围的间充质一起在心包腔（即围心腔）的背侧渐渐陷入，于是在心管的背侧出现了心背系膜（dorsal mesocardium），将心管悬连于心包腔的背侧壁。心背系膜的中部很快退化消失，形成一个左右交通的孔道，即心包横窦（图24－5）。心背系膜仅在心管的头、尾端存留。当心管融合和陷入心包腔时，其周围的间充质逐渐密集，形成一层厚的心肌外套层（myoepicardial mantle），将来分化成为心肌膜和心外膜。内皮和心肌外套层之间的组织为较疏松的胶样结缔组织，称心胶质（cardiac jelly），将来参与组成心内膜。

图24－4 原始心脏的位置变化（人胚头部纵切）

图24-5 原始心脏的发生 （二）心脏外形的建立 心管的头端与动脉连接，尾端与静脉相连，两端连接固定在心包上。心管各段因生长速度不同，首先出现三个膨大，由头端向尾端依次称心球（bulbus cordis）、心室和心房。以后在心房的尾端又出现一个膨大，称静脉窦（sinus venosus）。心房和静脉窦早期位于原始横隔内。静脉窦分为左、右两角。左、右总主静脉、脐静脉和卵黄静脉分别通入两角（图24－6）。心球的远侧份较细长，称动脉干（truncus arteriosus）。动脉干前端连接动脉囊（aorticsac），动脉囊为弓动脉的起始部。

脐动脉血流参数正常值

推荐不同孕期得脐动脉血流参数正常值: 脐动脉血流变化,反映血管阻力情况。 ?(1)脐动脉收缩期峰值与舒张末期流速之比(S/D), S代表收缩期峰值流速,反映血流量,Ｄ代表舒张末期流速,反映胎盘血管阻力.正常妊娠脐动脉血流S/D值岁孕周增大而逐渐降低,Ｓ／D从早孕大于4,随着孕周增长可以降到小于3,甚至就是2以下。这表明胎盘逐渐成熟,胎盘内血管包括母体妊娠子宫血液循环那部分得动脉／静脉逐渐增多.增粗,胎盘外周阻力下降、使脐动脉在舒张期时仍能维持足够得血流一满足胎儿得雪供. ? (2)测量脐动脉血流S/D值最佳测量位置就是脐动脉与胎盘附着处,这里测出得值要比靠近胎儿侧段得值低,所以不要随意得见到脐动脉就测出一个比值。越就是靠近胎盘侧越好. ?(３)脐动脉血流S/D值增高常见于妊高症引起得胎盘功能不全、脐动脉扭曲、与母亲糖尿病.? (4)脐动脉血流S/D值一般在孕3２周以后、.。、。２.7加减０.5左右。 ?孕周脐动脉血流S/Ｄ值?２0 ４。73(左右) 21 4.２8 23 4.０7 22 ４、14? ２4 ３、8６ 25 3.82?26 3、76 ２7 3.65 28 3、59 ? 32３、19?3３3。１4 29 3、４８? 3.31 31 30 3.42? 35 2、９6 34 ３。０8? 36 ２、85 2、6２? 2、51?４1 2、39 ? 39 40 37 2、7４? 38 2。74? 超声医学》第四版资料 正常妊娠在第22孕周前,脐动脉血流频谱变化不大。收缩期血流速度波形陡而尖舒张期血流相对较低 据国内外有关报道:脐动脉流速得A/B值在第20孕周为3、９?第30孕周前A/B 值下降较迅速以后下降较平稳 至30孕周后下降至3.0以下 我们这里较多得测量脐动脉得S／Ｄ值?对于>３２孕周得测量,〈3视为正常,孕足月得应＜２.5?测量得意义主要就是瞧就是否有胎儿宫内窘迫得情况?? 脐动脉?孕周 PI RI 21—24 1.０8(+／－)0。２2 0.64(+/-)０.08?２5—26 1、02(+/－)0.20 ０。6５(＋／-)0。06?2７ 1。00(+/－)０。20 0。６3(+/－)0、07?２8 0。 29１。00(+／－)0。2３ 0。63(+/—)0。95(＋／—)0。1９ 0.63(+/—)0。07? 0８?３0 1、01(+／—)0。26 ０.62(＋/－)0.07?３1 1。０2(＋／－)０、26 330、 0.95(+／－)0。２1 0、６2(＋/—)0。08? 0.６4(+／－)0、09? 32 93(+/—)0、１9 0、６0(＋/-)0。0８ ３4 0.90(+/—)0。21 ０。5８(+/－)0.0９ 3５０、85(+／-)0.16 0.５7(+/—)０、０7?3６０、８6(+/—)０、4８ 0.57(+/—)0。０7 ３7 0。86(＋/—)0.１６ 0。５7(＋/－)0。07

胎儿脐静脉穿刺术的护理_叶彩眉

常的情绪反应及行为障碍[3]。进行认知干预,提高患者的认知水平,消除了错误认识,减轻了焦虑、恐惧,并愿意接受腰椎穿刺术。本组干预前有20例缺乏腰椎穿刺的相关知识,12例担心腰椎穿刺后会变傻或发生瘫痪,其中20例拒绝腰椎穿刺术,经认知干预后能积极配合。 3.2　良好的心态是配合操作的前提　检查或手术作为一种负性生活事件常使患者产生焦虑、恐惧等负性情绪反应,它是个体面临潜在性威胁而产生的一种复杂、消极的心理应激反应,能引起机体的痛苦体验,并借一定的生物机制影响个体的生理平衡,表现为交感神经活动功能亢进,如心跳加快、呼吸加速、脉搏增快、面色苍白、烦躁、坐卧不安[4] 。本组40例在干预前存在不同程度的焦虑、恐惧心理,经过心理干预,35例情绪转稳定,5例焦虑、恐惧心理较干预前明显减轻,为腰椎穿刺术中的配合提供了有利条件,如1例女性患者害怕行腰椎穿刺时疼痛,担心操作过程有风险,当得知要做腰椎穿刺后即表现手脚发抖、打颤、小便频繁,护士主动与患者沟通,给予疏导、安慰和鼓励,让患者到治疗室熟悉环境,减轻其恐惧心理,腰椎 穿刺时护士在旁陪伴,及时询问其感觉,并给予心理疏导,使患者在整个穿刺过程情绪稳定,配合主动,顺利完成腰椎穿刺检查。 3.3　行为训练有利于提高腰椎穿刺成功　腰椎穿刺是一项创伤性操作,患者由于惧怕疼痛,在穿刺前和穿刺中可产生恐惧心理,致使穿刺时全身肌肉紧张,给操作造成困难[5] 。操作前给予行为训练,操作过程让患者进行握拳放松、深呼吸,转移了患者的注意力,从而降低肌肉紧张度,有利于操作的顺利进行。本组患者经行为干预后均能主动进行体位配合,穿刺成功率达到了100%。 参考文献: [1]王爱玲,赵青华,袁欣可.全程护理干预在患儿腰椎穿刺中的 应用[J ].护理学杂志,2005,20(5):35-36. [2]李瑞华.心理干预在门诊局麻手术中的应用[J ].解放军护理杂 志,2004,21(7):19. [3]曾文星,徐静.心理治疗:理论与分析[M ].北京:北京医科大 学、中国协和医科大学联合出版社,1994.4. [4]刘燕,吴兰笛,周红.急诊手术患者焦虑对生命体征的影响[J ]. 中华护理杂志,1998,33(11):661. [5]匡裕玖.经皮穿刺活检患儿配合程度分析和对策[J ].护理学杂 志,2004,19(7):29. 　作者简介:叶彩眉(1963-),女,本科,副主任护师,护士长.　收稿日期:2006-12-21 　通讯作者:胡文胜,浙江大学医学院附属妇产科医院. 胎儿脐静脉穿刺术的护理 叶彩眉,胡文胜,徐凌燕 (浙江大学医学院附属妇产科医院,浙江杭州　310006) 摘　要: 总结B 超引导下胎儿脐静脉穿刺术的护理。认为脐静脉穿刺前做好孕妇心理护理、健康教育及穿刺准备,穿刺后并发症观察,对提高胎儿脐静脉穿刺术的成功、减少并发症的发生起到重要的作用。 关键词:胎儿;脐静脉穿刺术;护理 中图分类号:R473.71 文献标识码:B 文章编号:1671-9875(2007)07-0461-02 胎儿脐静脉穿刺对快速胎儿染色体核型分 析、胎儿基因异常诊断、胎儿血液、免疫及内分泌系统疾病、遗传代谢缺陷、胎儿宫内感染(TORCH )等有着不可替代的诊断价值,是其他方法无法比拟 的[1] 。随着围产医学、超声影像学、分子细胞遗传学 等领域的不断发展,超声引导下经皮胎儿脐静脉穿刺术已成为产前诊断及宫内治疗的重要手段。2004年1月至2005年12月,本院产科对87例孕妇实施胎儿脐静脉穿刺术,现报告如下。1　临床资料 1.1　一般资料　本组87例孕妇,年龄21～39岁,孕龄17～38周。B 超发现可疑胎儿畸形48例,

永久性右脐静脉对胎儿的影响

永久性右脐静脉对胎儿的影响 永久性右脐静脉也叫做持续性右脐静脉，这是一种胎儿畸形的表现，指的是应该退化的右脐静脉没有完全的退化，或者是本来不应该退化的左奇静脉，却完全的退化了，这对于胎儿的影响也是比较大的，在胚胎期间容易引起胎儿出现畸形的情况，容易导致胎儿出现心律失常，引起肾盂积水等情况。 ★什么是右脐静脉 永久性右脐静脉（persistent right umbilical vein）：在胎儿腹部同时显现胃泡和脐静脉的横切，脐静脉转向胎体左侧（指向胃泡），胆囊位于脐静脉的左侧，胃泡的右侧，而正常情况胆囊应位于脐静脉的右侧。大多数右脐静脉可在肝内与静脉导管相连，这一变异预后往往较好。极少数右脐静脉越过肝脏直接与下腔静脉或右心房相连，引起血流动力学的改变，这一变异，往往可合并多发畸形，因此，发现有脐静脉，因利用CDFI仔细跟踪脐静脉，是否存在异常的连接。

★右脐静脉对胎儿的影响 永久性右脐静脉也叫持续性右脐静脉，只是一种解剖结构变异而不是胎儿畸形，是指本来应该退化的右脐静脉没有退化，而本来不应该退化的左脐静脉却退化了。发生率约为0.2%~1%。胚胎4周末，脐静脉有左右两条，并直接与静脉窦相连。以后脐静脉与肝血窦吻合，便失去了与静脉窦的连接。胎儿肝脏的发育增长使肝内的脐静脉纠缠、打结，最终退化。但是，左脐静脉并不退化，反而集中了所有从胎盘回流至胎儿的静脉血。当左脐静脉与门静脉左支相连进入肝脏后，一部分血液经门静脉右支进入右肝，大部分血液经静脉导管直接回流入下腔静脉及右心房。如果右脐静脉不退化，反而左脐静脉退化了，此时，右脐静脉进入肝脏后经吻合支再进入左肝叶。同时，它还直接与静脉导管相连，这样就形成了持续性右脐静脉。造成这一过程的原因尚不清楚。极少数右脐静脉还可越过肝脏直接与下腔静脉或右心房相连，引起血流动力学异常。 绝大多数持续性右脐静脉不合并胎儿畸形，仅少数可能会合并胎儿畸形，例如脑积水，单脐动脉，短肢，房间隔缺损，室间隔缺损，主动脉缩窄，气管食管瘘，尿道下裂，肾移位，内脏反位，

右脐静脉胎儿的影响有哪些-

右脐静脉胎儿的影响有哪些? 右脐静脉是胎儿在母体当中比较常见的一种疾病，同时也被称为永久性右脐静脉，出现右脐静脉会对胎儿导致畸形的情况，还会导致胎儿出现腹部出现凸出等，而右脐静脉与胆囊链接，会导致硬到胆囊，引发内脏畸形等，对胎儿的身体会产生很大的危害。 ★右脐静脉对胎儿的影响 ★概述 永久性右脐静脉，在胎儿腹部同时显现胃泡和脐静脉的横切，脐静脉转向胎体左侧(指向胃泡)，胆囊位于脐静脉的左侧，胃泡的右侧，而正常情况胆囊应位于脐静脉的右侧。大多数右脐静 脉可在肝内与静脉导管相连，这一变异预后往往较好。极少数右脐静脉越过肝脏直接与下腔静脉或右心房相连，引起血流动力学的改变，这一变异，往往可合并多发畸形，因此，发现有脐静脉，因利用CDFI仔细跟踪脐静脉，是否存在异常的连接。 ★病理生理

永久性右脐静脉也叫持续性右脐静脉，只是一种解剖结构变异而不是胎儿畸形，是指本来应该退化的右脐静脉没有退化，而本来不应该退化的左脐静脉却退化了。发生率约为0.2%~1%。 胚胎4周末，脐静脉有左右两条，并直接与静脉窦相连。以后脐静脉与肝血窦吻合，便失去了与静脉窦的连接。胎儿肝脏的发育增长使肝内的脐静脉纠缠、打结，最终退化。但是，左脐静脉并不退化，反而集中了所有从胎盘回流至胎儿的静脉血。当左脐静脉与门静脉左支相连进入肝脏后，一部分血液经门静脉右支进入右肝，大部分血液经静脉导管直接回流入下腔静脉及右心房。 如果右脐静脉不退化，反而左脐静脉退化了，此时，右脐静脉进入肝脏后经吻合支再进入左肝叶。同时，它还直接与静脉导管相连，这样就形成了持续性右脐静脉。造成这一过程的原因尚不清楚。极少数右脐静脉还可越过肝脏直接与下腔静脉或右心房相连，引起血流动力学异常。 绝大多数持续性右脐静脉不合并胎儿畸形，仅少数可能会合并胎儿畸形，例如脑积水，单脐动脉，短肢，房间隔缺损，室间隔缺损，主动脉缩窄，气管食管瘘，尿道下裂，肾移位，内脏反

人脐静脉内皮细胞的原代传代冻存复苏及鉴定

人脐静脉内皮细胞的原代培养和传代、 冻存、复苏及鉴定 1人脐静脉内皮细胞的分离及培养 1.1 原代血管内皮细胞的获取与培养 在细胞的获取方法上，有机械刮取、组织块移植和酶消化法3种。前两种易混杂其他血管壁细胞,近年已逐渐被酶消化法取代。其中胰蛋白酶灌注法及胶原酶消化法获取原代人脐静脉血管内皮细胞的方法。 1.1.1胰蛋白酶消化法 在无菌条件下取新生儿脐带，剪去钳痕和凝血块阻塞部分，找到脐静脉。一端插上带有胶管的玻璃管后结扎固定，经胶管接注射器，用生理盐水灌洗。待脐静脉内的残血除净后，用37℃磷酸盐缓冲液(浓度0.01 mol/L，pH=7.6)冲洗2次，将另一端用铁夹夹闭，向脐静脉内灌注0.25%胰蛋白酶8~10 mL，夹闭胶管放入已灭菌的大平皿中。37℃孵育12 min，在此期间经常翻动脐带，使酶溶液在血管内流动，促使内皮细胞与酶均匀接触。取出脐带轻轻挤压管壁，将含有内皮细胞的胰蛋白酶注入50 mL锥形离心管中，加入小牛血清2 mL终止酶反应，再以30 mL磷酸盐缓冲液冲洗管腔，流出液一并入离心管，1000 r/min离心10 min，弃上清(小牛血清及磷酸盐缓冲液)，加入含有10%小牛血清的IMDM培养液，充分混合制成细胞悬液。取0.1mL细胞悬液在血细胞计数板计数。最后调细胞数，以1×105mL接种至24孔培养板中，每孔1mL。置于5% CO2，37℃静止培养24 h更换培养液，以除去未贴壁的细胞。以后每隔2天换液1次，维持细胞的营养和内环境稳定。 1.1.2胶原酶消化法 在无菌条件下取新生儿脐带，剪去钳痕和凝血块阻塞部分，用磷酸盐缓冲液

初步清洗，找到脐静脉后，用50 mL注射器吸取磷酸盐缓冲液反复灌注冲洗，洗净残留的血液后用止血钳封住一端，用注射器从另一端灌入15mLⅡ型胶原酶。超净台内温度一般高于室温，此条件下胶原酶作用15min，期间可不时晃动。消化完毕打开止血钳，将消化液流入事先准备好的离心管中，用注射器吸取1倍于消化液体积的内皮细胞培养基灌洗消化后的血管，收集并与消化液合并，900 r/min离心10min，弃去上清，加入事先孵育至37℃的细胞培养液，吹打均匀。取明胶包被的六孔细胞培养板，吸去明胶，每孔加入内皮细胞悬液2.5mL，置于5% CO2饱和度的37℃孵箱中静置培养，24 h后更换培养液以除去未贴壁的细胞。然后每隔3d换液1次至生长汇合。 1.2 传代内皮细胞的培养 原代内皮细胞融合后用培养液冲洗2次，然后用0.25%胰酶和0.25%乙二胺四乙酸以1：1的比例充分混匀后加入到内皮细胞中，每孔0.3 mL。边消化边在倒置显微镜下观察。细胞出现皱缩、边缘略变圆、彼此分离或呈大片状分离，此时即可吸弃消化液终止消化。加入含有10%小牛血清的培养液，用吸管吹打，制成细胞悬液，计数后按10个细胞/mL，并置于5% CO2饱和度的37℃孵箱中继续静置培养。每隔2~3d换液1次。 1.3 人脐静脉内皮细胞的冷冻和复苏 传代细胞贴壁80%后0.25%胰酶消化，离心1200 r/min，5min，弃上清，加入冻存液(含10%甘油、90%细胞外基质)重悬后置4℃30 min，-20℃2 h，-80℃过夜后置入液氮中保存。复苏时在37.2℃水浴中迅速轻摇解冻，胎盘蓝染色，计算细胞存活率。 1.4 影响脐静脉内皮细胞体外生长的因素 影响脐静脉内皮细胞体外生长的因素包括： 1培养液的pH值。最适pH值为7.0~7.2，脐静脉内皮细胞耐酶不耐碱，pH 值为7.4时贴壁困难，pH值7.6以上贴壁细胞脱落受损失去活力。