纯化水微生物限度
纯化水微生物限度
滤膜法微生物检测：
将适当孔径的滤膜放入滤器，过滤样品，由于滤膜的作用而将微生物保留在膜的表面上。样品中微生物生长抑制剂可在过滤后用无菌水冲洗滤器而除去。然后，将滤膜放在培养基上培养，营养物和代谢物通过滤膜的微孔进行交换，在滤膜表面上培养出的菌落可以计数，并和样品量相关。
滤膜法的优点：
- 与直接法比较，可以检测大量的样品
- 浓缩效应使微生物检测的准确度提高
- 带有菌落的滤膜，可作为检测的永久记录存档
- 可见的菌落和样品量直接对应，得出定量结果
操作具体一点就是：薄膜过滤法检测，一个样过滤一份，就是200ml的纯化水通过滤膜，将该滤膜浸泡在灭菌好的l生理盐水中，再接种到平皿中，制成10级、100级、1000级稀释倍数的细菌、霉菌和酵母菌稀释培养皿，即可
用平皿法检测纯化水的微生物限度
摘要：目的探讨平皿法检查纯化水微生物限度的可行性。方法采用《中华人民共和国药典》2005年版二部附录平皿法和薄膜过滤法同时时纯化水进行微生物限度检壹并作出比较。结果平皿法操作简便，菌落清晰．准确可靠。结论平皿法检测纯化水微生物限度是可行的，尤其适用药厂、医院开展此项检验。关键词；纯化水；微生物限度；平皿法；薄膜过滤法
纯化水为蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其它适宜的方法制得的供药用的水，不含任何附加剂。纯化水的优劣，直接关系到药品质量。《中华人民共和国药典》2005年版规定其微生物限度检查采用薄膜过滤法。并规定其细菌、霉菌和酵母菌总数每毫升不得过100个。由于此法操作较繁，滤膜较小(直径只有50mm)，菌落多时清晰度欠佳，影响计数的准确性。笔者采用平皿法进行比较，该法操作简便，菌落清晰，计数准确，效果较为理想。
1 材料和仪器
1．1 样品来源 19批纯化水系辖区内7家制药厂生产的为微生物限度检查验证用送样检品。其中用
盐水瓶盛装的12个批次，三角烧瓶盛装的7个批次。
1．2 培养基和仪器设备
1．2．1 培养基：营养琼脂培养基批号050401，玫瑰红钠琼脂培养基批号050202，蛋白胨批号050523均为北京三药科技开发公司生产。
1．2．2 仪器设备：开放式滤器(配以滤膜孔径0．45 m，规格50mm)(上海医药工业研究院)；电动吸引器(上海医疗设备厂)；电热立式压力蒸汽消毒器(浙江绍兴医械总厂)；隔水式恒温培养箱(上海精密实验设备有限公司)；鼓风电热恒温干燥箱(浙江嘉兴电热仪器厂)；生化培养箱(广东医疗仪器厂)。
2 方法
按《中华人民共和国药典》2005年版二部附录微生物限度检查。
2．1 薄膜过滤法每批样品取灭菌薄膜过滤器2 套，每套分别加入样品lml 及pH7．0无菌氯化钠蛋白胨100ml ，经负压抽滤后，分别取出滤膜，菌面朝上，贴于营养琼脂培养基和玫瑰红钠培养基上，前者在35 C培养48h，后者在25 C培养72h，计数菌落。
2．2 平皿法取原液和1：1O供试液各lml 置直径90mm 的无菌平皿中，注入15～20ml 温度不超过45℃溶化的营养琼脂和玫瑰红钠琼脂培养基混匀，凝固，倒置培养，每个稀释级各制备2个平皿。培养温度，时间同薄膜过滤法。
3 结果
19批样品经二法对比，15批吻合，其细菌数、霉菌及酵母菌总数少于lOO个，符合规定。其中4批差异较大。
4 讨论
4．1 薄膜过滤法检测纯化水的微生物限度操作比较繁琐，除了过滤器需经灭菌外，负压抽滤的技术也相当重要，压力过大，滤膜易碎，如不抽干，取滤膜时供试液流失，都会影响结果的准确性。
4．2 纯化水的制备达不到完全灭菌，加之有时储存过久或盛器未经灭菌，可能导致染菌较多。由于薄膜的直径仅50mm，菌落多肘，重叠情况严重，模糊不清，给准确计数带来困难，导致结果判断错误。4．3 平皿法是药典规定的检查不含抑菌成分且溶于水的供试品的常规微生物限度检查法，具有操作简便，菌落清晰度好等特点，用于纯化水的微生物检查应该在情理之中。我们认为平皿法尤其适用于药厂和医院制剂室开展对纯化水的微生物限度检查工作，值得提倡。
Ⅴ、回收率的计算：
按如下公式计算试验组的菌回收率：
试验组的平均菌落数-供试品对照组的平均菌落数
试验组的菌回收率= ×100%
菌液组的平均菌落数
Ⅵ、结果判断：在3次独立的平行试验中，阴性对照组不得有菌生长,若试验组的菌回收率均不低于70%，则可照该供试液制备方法和计数法测定该供试品的细菌、霉菌及酵母菌数；若任一次试验中试验组的菌回收率低于70%，应采用培养基稀释法、离心沉淀集菌法、薄膜过滤法、中和法等方法或联合使用这些方法消除供试品的抑菌活性，并重新进行方法验证
庄子云：“人生天地之间，若白驹过隙，忽然而已。”是呀，春秋置换，日月交替，这从指尖悄然划过的时光，没有一点声响，没有一刻停留，仿佛眨眼的功夫，半生已过。
人活在世上，就像暂时寄宿于尘世，当生命的列车驶到终点，情愿也罢，不情愿也罢，微笑也罢，苦笑也罢，都不得不向生命挥手作别。
我们无法挽住时光的脚步，无法改变人生的宿命。但我们可以拿起生活的画笔，把自己的人生涂抹成色彩靓丽的颜色。
生命如此短暂，岂容随意挥霍！只有在该辛勤耕耘的时候播洒汗水，一程风雨后，人生的筐篓里才能装满硕果。
就算是烟花划过天空，也要留下短暂的绚烂。只有让这仅有一次的生命丰盈充实，才不枉来尘世走一遭。雁过留声，人过留名，这一趟人生旅程，总该留下点儿什么！
生活是柴米油盐的平淡，也是行色匆匆的奔波。一粥一饭来之不易，一丝一缕物力维艰。
前行的路上，有风也有雨。有时候，风雨扑面而来，打在脸上，很疼，可是，我们不能向生活低头认输，咬牙抹去脸上的雨水，还有泪水，甩开脚步，接着向前。
我们需要呈现最好的自己给世界，需要许诺最好的生活给家人。所以，生活再累，不能后退。即使生活赐予我们一杯不加糖的苦咖啡，皱一皱眉头，也要饮下。
纯化水微生物限度
纯化水微生物限度 滤膜法微生物检测： 将适当孔径的滤膜放入滤器，过滤样品，由于滤膜的作用而将微生物保留在膜的表面上。样品中微生物生长抑制剂可在过滤后用无菌水冲洗滤器而除去。然后，将滤膜放在培养基上培养，营养物和代谢物通过滤膜的微孔进行交换，在滤膜表面上培养出的菌落可以计数，并和样品量相关。 滤膜法的优点： - 与直接法比较，可以检测大量的样品 - 浓缩效应使微生物检测的准确度提高 - 带有菌落的滤膜，可作为检测的永久记录存档 - 可见的菌落和样品量直接对应，得出定量结果 操作具体一点就是：薄膜过滤法检测，一个样过滤一份，就是200ml的纯化水通过滤膜，将该滤膜浸泡在灭菌好的l生理盐水中，再接种到平皿中，制成10级、100级、1000级稀释倍数的细菌、霉菌和酵母菌稀释培养皿，即可 用平皿法检测纯化水的微生物限度 摘要：目的探讨平皿法检查纯化水微生物限度的可行性。方法采用《中华人民共和国药典》2005年版二部附录平皿法和薄膜过滤法同时时纯化水进行微生物限度检壹并作出比较。结果平皿法操作简便，菌落清晰．准确可靠。结论平皿法检测纯化水微生物限度是可行的，尤其适用药厂、医院开展此项检验。关键词；纯化水；微生物限度；平皿法；薄膜过滤法 纯化水为蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其它适宜的方法制得的供药用的水，不含任何附加剂。纯化水的优劣，直接关系到药品质量。《中华人民共和国药典》2005年版规定其微生物限度检查采用薄膜过滤法。并规定其细菌、霉菌和酵母菌总数每毫升不得过100个。由于此法操作较繁，滤膜较小(直径只有50mm)，菌落多时清晰度欠佳，影响计数的准确性。笔者采用平皿法进行比较，该法操作简便，菌落清晰，计数准确，效果较为理想。 1 材料和仪器 1．1 样品来源 19批纯化水系辖区内7家制药厂生产的为微生物限度检查验证用送样检品。其中用 盐水瓶盛装的12个批次，三角烧瓶盛装的7个批次。 1．2 培养基和仪器设备 1．2．1 培养基：营养琼脂培养基批号050401，玫瑰红钠琼脂培养基批号050202，蛋白胨批号050523均为北京三药科技开发公司生产。 1．2．2 仪器设备：开放式滤器(配以滤膜孔径0．45 m，规格50mm)(上海医药工业研究院)；电动吸引器(上海医疗设备厂)；电热立式压力蒸汽消毒器(浙江绍兴医械总厂)；隔水式恒温培养箱(上海精密实验设备有限公司)；鼓风电热恒温干燥箱(浙江嘉兴电热仪器厂)；生化培养箱(广东医疗仪器厂)。
纯化水微生物限度
纯化水微生物限度 纯化水微生物限度 纯净水一直被认为是一种非常纯洁的水，这种水通常经 过多道过滤和杀菌处理后制成，免受细菌、病毒和其他污染物的影响。然而，即使在这种精心处理下，这种水中仍然可能会存在微生物。因此，对于纯化水流出的微生物含量，需要进行严格的微生物限度检测。 微生物限度测试是指用于检测一种物质或产品中微生物 数量的方法。无论是工业领域中还是生活中，这种测试都是必须的。毕竟，微生物极易污染食品、药品等领域的产品，从而对人体健康造成风险。 在纯水的生产中，微生物的检测是非常重要的，以确保 该纯净水符合消费者的期望，并不会对人体健康造成任何影响。纯化水中的微生物通常分为条件致病菌和微生物总数两类，严格来说，测试方法也有区别。 一般情况下，微生物限度测试对微生物的检测方法通常 分为两类：定量测试和定性测试。其中，定量测试主要是通过某些方法来确定在一个单位体积的样品中存在的微生物数量。而定性测试则用于鉴定样品中存在的微生物种类。 在测试中，微生物限度是指许可的最大微生物污染限度。这个标准是通过广泛的分析研究得出的，考虑到人体健康，通常确保水中微生物的数量达到或低于限度标准。 微生物限制测试方法 微生物数量测试是通过微孔过滤或膜过滤的方法实现的。
测试前，先将其他可能影响测试结果的物质从样品中清除，如有机物、重金属等。同时，也需要确保测试环境无菌，以防止来自其他来源的污染。 有许多方法可以用来测试水中微生物的数量，包括经典 培养方法、膜滤法、逆渗透法、带电滤膜法等。其中，经典培养法基于样品中微生物的数量可以在营养琼脂平板上形成的生长菌的数量来计算微生物的数量。 另外，PCR和荧光定量PCR也是常用的微生物测试方法。PCR是利用酶处理编码基因组重复的DNA片段，这些片段往往 存在于微生物基因组中，从而得出微生物数量。荧光定量PCR 可以通过将DNA序列标记成不同的颜色来来区分不同微生物的种类。 需要注意的是，由于不同的测试方法可能具有不同的检 测灵敏度以及检测对象的差异，因此微生物限度的标准也可能会不同，这需要在测试前进行明确定义。 微生物限制标准 在一些国家和地区中，针对纯水中的微生物限度已经有 了明确的标准。例如美国疾病控制与预防中心(CDC)对于遵循 此标准的纯净水中的微生物指标如下： 总大肠菌群 排便大肠菌 总大肠埃希氏菌 非排便大肠菌 肠球菌 支链菌属 根据该标准，针对纯化水中大肠杆菌的微生物限度为100 CFU/ml，而免疫类型的大肠杆菌的限度为水中小于 1 CFU/ml。
纯化水微生物限度检测
纯化水微生物限度检测 纯化水微生物限度检测包括了对水中微生物污染程度的 评估与监测，其重要性在于确保水的纯度达到合适的标准。该检测是环境监测中的重要部分，相对于检测其他物质，水质检测需要对多种微生物进行监测。本文将从纯化水微生物限度检测的必要性、检测方法、影响因素等方面展开分析。 一、纯化水微生物限度检测的必要性 纯化水微生物限度检测是确保现代社会得到健康饮用水 供应的必要手段。水是支撑人类生产和生活不可缺少的资源，为了保障水的安全，国际水研究会提出了对水安全的三条标准：化学安全、生物学安全和物理学安全。其中生物学安全主要是指检测水体中的细菌、病毒、藻类、真菌等微生物是否达到了国家卫生标准水净化处理后的标准要求。通常情况下，对于自然水源或市政供水，人们都会采用纯水处理技术，除去其中存在的大部分异质物、有机物、无机物和微生物，但这并不意味着此时的水已经完全可供直接饮用或是直接应用于生产和科研实验等领域。因此，水质检测是必要的，并且其微生物检测部分尤为重要。 二、纯化水微生物限度检测的方法 微生物检测主要包括菌落计数法和涂布法等。菌落计数 法是确定水中菌落总数的标准方法，其主要包括直接计数法和滤膜计数法。直接计数法是指直接将样品涂在平板上，然后通过计算实现细菌数目的统计。滤膜计数法与直接计数法类似，我们可以先将样品过滤然后直接将过滤膜放在培养基上，然后
进行培养，统计出菌落数。涂布法是将样品涂在培养基上，通过培养时间、培养温度等环境条件来判断样品中有无微生物存在。当然根据实验需要，也可对微生物进行分离鉴定。 三、影响纯化水微生物限度检测的因素 微生物检测在水质检测中占有重要的位置，但同时在微生物检测过程中也有一些因素可能引起检测结果的偏差，例如缺氧、污染源、物种种类等因素将影响样品的真实性。使用的培养基和培养条件也会影响到微生物的生长情况。当检测样品来源于管道、水井等地下水源时，还需注意该地区自然生存的微生物种类、菌株以及排放规模等因素。这些因素可能会导致样品中含有有害的细菌、病毒等物质，影响最终检测结果。另外，在基于涂布法等培养技术检测时，每一个涂抹操作都有可能带来外界菌落的污染，因此，实验环境、试剂品质和配比、所用设备、人员操作标准化等问题也可能会影响检测结果的准确性。 四、总结 纯化水微生物限度检测是我们保障饮用水安全的必要步骤。为了确保最终检测结果的准确性，我们需要遵循权威的标准、科学的操作方法、可靠的设备和环境管理，以提高检测效果并降低误差率。此外，对于影响样品真实性的因素，我们也要认真考虑，进行必要的研究和实验措施。水质检测中的微生物检测是确保水源生态系统与人体健康安全的重要步骤，我们应当密切关注检测领域的技术进展，以实现人类社会对于水资源的全面保障。
纯化水微生物限度3篇
纯化水微生物限度 第一篇：纯化水微生物限度的意义及相关标准 纯化水作为一种高纯度水，广泛应用于制药、化妆品、食品等领域。然而，由于其生产工艺的限制以及存储条件的不同，纯化水中可能存在微生物污染，对使用后的产品品质和安全性产生极大影响。因此，为了确保纯化水质量，需要建立微生物限度标准，对纯化水中的微生物进行检测和控制。本文就对纯化水微生物限度的意义及相关标准进行探讨。 1. 纯化水微生物限度的意义 纯化水微生物限度的建立，可以保证纯化水的质量，把纯化水使用的过程中的风险控制在一定范围内。其意义如下：（1）保证产品的高质量 纯化水广泛应用于制药、化妆品、食品等行业，其质量直接影响到后续产品的质量。由于微生物的污染会导致产品品质的下降和稳定性的降低，而纯化水微生物限度的建立可以防止这种情况的发生，保证产品的高质量。 （2）营造安全的工作环境 对于制药、化妆品等高风险行业，纯化水微生物限度的建立可以在一定程度上降低员工的工作风险和安全隐患，营造安全的工作环境。 （3）切实维护客户利益 对于各个行业从业者而言，客户利益是重中之重。纯化水微生物限度的建立可以保证纯化水的质量，从而维护客户的合法权益。
2. 纯化水微生物限度的检测标准 国内外对纯化水微生物限度的检测标准均有详细规定， 主要包括药典标准和相关法规及行业标准。下面分别介绍如下：（1）药典标准 《中华人民共和国药典》（2015年版）规定了注射用水、纯化水和蒸馏水等药用水的微生物限度。其中，注射用水的微生物限度为：总细菌数（TAMC）不超过10 CFU/mL，酵母菌和 霉菌数（TYMC）不超过10 CFU/mL；纯化水的微生物限度为：TAMC不超过100 CFU/mL，TYMC不超过10 CFU/mL；蒸馏水的 微生物限度为：TAMC不超过100 CFU/mL，TYMC不超过10 CFU/mL。 （2）相关法规及行业标准 对于纯化水微生物限度的检测标准，国家卫生部于2002 年发布了《医疗机构感染管理规定》，规定了医疗机构制备药用水的质量要求及微生物限度，其中，纯化水的微生物限度为TAMC不超过100 CFU/mL，TYMC不超过10 CFU/mL。 此外，美国药典（USP）也针对纯化水微生物限度的检测 制订了若干个标准，包括监测方法、检测材料、微生物限度标准等，并将其作为药品质量控制的重要依据。 3. 结语 纯化水作为高纯度水之一，其质量直接关系到后续产品 的质量及用户的健康安全。纯化水微生物限度的建立可以防止微生物污染，维护产品的高质量和客户的合法权益，同时也有助于营造安全的工作环境。国内外相关标准的制订与完善，为纯化水微生物限度的控制与检测提供了有力的依据和保障，推动了纯化水质量的不断提升。
中国药典2020版二部纯化水微生物检查
中国药典2020版二部纯化水微生物检查 【原创实用版】 目录 1.概述 2.中国药典 2020 版二部纯化水微生物检查的标准 3.微生物检查的方法 4.微生物检查的注意事项 5.结论 正文 1.概述 纯化水是制药工业中常用的一种水质，其微生物质量对于药品的质量和安全性至关重要。为了保证纯化水的微生物质量，我国制定了一系列的标准和方法。本文将介绍中国药典 2020 版二部纯化水微生物检查的相关内容。 2.中国药典 2020 版二部纯化水微生物检查的标准 中国药典 2020 版二部对于纯化水的微生物检查有严格的标准。其中，纯化水的微生物限度要求如下： - 细菌总数：≤10cfu/ml - 霉菌和酵母菌：≤1cfu/ml - 细菌内毒素：≤0.25EU/ml 3.微生物检查的方法 微生物检查通常包括以下几个步骤： - 采样：在纯化水的生产过程中随机采样，保证样品具有代表性。
- 培养：将样品在适当的培养基中进行培养，以便微生物生长和繁殖。 - 计数：在适当的时间点对培养基中的微生物进行计数，以了解样品中微生物的数量。 - 鉴定：通过显微镜观察和生化试验等方法，对微生物进行鉴定，以确定其种类。 4.微生物检查的注意事项 在进行纯化水微生物检查时，应注意以下几点： - 采样时应保证样品的无菌性，避免样品被污染。 - 选择适当的培养基和培养条件，以保证微生物的生长和繁殖。 - 在进行微生物计数时，要保证计数方法的准确性和精度。 - 定期对纯化水微生物检查的设备和方法进行验证，以确保检查结果的可靠性。 5.结论 通过对中国药典 2020 版二部纯化水微生物检查的研究，我们可以了解到，我国对于纯化水的微生物质量有着严格的要求。微生物检查的方法和注意事项也需要我们在实际操作中严格遵守，以保证药品的质量和安全性。
纯化水微生物限度检查方法
纯化水微生物限度检查方法 1. 纯化水微生物限度检查方法 纯化水是指经过特殊处理后去除了多种杂质和微生物的水，主要用于实验室、制药、电子工业等领域。为确保纯化水的质量，需要进行微生物限度检查。以下为纯化水微生物限度检查方法及其详细描述。 2. 样品采集 要选择好样品采集点。在采集前要将取样的操作员的手洗净，然后用70%的酒精或其他消毒剂在取样点上喷洒并擦拭，等待其干燥。样品可以用无菌的容器，如无菌烧杯或无菌注射器采集。 3. 检查项目 常规情况下，对于纯化水的微生物限度检查主要包括大肠杆菌、菌落总数和霉菌的检测。 4. 大肠杆菌检测 大肠杆菌是一种重要的致病菌，其检测可以反映样品是否受到粪便污染。根据GMP规定，1毫升纯化水中的大肠杆菌不应超过10个。 5. 菌落总数检测 菌落总数是指在一定条件下，菌落形成的总数。对纯化水进行菌落总数检测，可以评估其细菌含量及其污染情况。普遍认为，1毫升纯化水中的细菌菌落总数不应超过100CFU （菌落形成单位）。 6. 霉菌检测 霉菌是一种常见的微生物，常常伴随着水污染。过多的霉菌会对人体健康造成危害。对于纯化水，检测霉菌可以评估其存在程度和可能的污染源。GMP规定，1毫升纯化水中的霉菌不应超过10CFU。 7. 检测方法 目前，常用的检测方法有培养法、分子生物学方法和流式细胞仪法。培养法是一种较为传统的方法，通常通过在培养基上进行菌落总数检测，可以获得较为准确的结果。分子生物学方法则是一种新兴的技术，可以通过检测DNA、RNA或蛋白质，进行微生物的检测。流式细胞仪则是一种高通量的技术，可以进行密集的细胞计数和分类。
8. 注意事项 在进行微生物限度检查时，要特别注意以下几点。所有的操作应当严格按照GMP要求进行，确保检测的结果准确可靠。其次要加强检测设备的维护及保养，确保设备的准确性和稳定性。最后需要注意的是，纯化水的质量与检测方法密切相关，应根据不同领域的需求，选择相应的检测方法和标准。 9. 结论 纯化水微生物限度检查是保证纯化水质量不受微生物污染的重要手段，其检测结果直接影响实验和制药的效果和质量。需要采用合适的检测方法和标准，保证检测结果的准确性和可靠性。 10. 参考文献 1. 吴权友. 微生物检验技术[M]. 化学工业出版社, 2006. 2. 刘泽琨. GMP质量体系中微生物限度检查的监督[J]. 实验生物学教育, 2006(02): 10-1 3. 3. 王红宇, 吴星星, 程燕,等. 纯化水微生物限度检查方法的比较分析[J]. 中华现 代应用医学杂志, 2015, 05(02): 83-85.
001纯化水微生物限度检查法操作规程
001纯化水微生物限度检查法操作规程操作规程：001纯化水微生物限度检查法 一、目的和适用范围 本操作规程适用于纯化水微生物限度检查法的操作流程。检查目的是为了评估纯化水中微生物的数量和种类，确保纯化水的质量符合相关法规和标准。 二、设备和试剂 1.无菌工作台 2.显微镜 3.火焰消毒器 4.纯化水样品 5.温度控制设备 6.无菌试剂瓶 7.营养基培养物 8.细菌计数板 三、操作步骤 1.检查前准备 1.1确保工作区域干净整洁，并进行必要的消毒。 1.2准备所需的设备和试剂。
1.3校验设备的准确性和完整性。 2.样品取样 2.1使用无菌容器取样纯化水样品。 2.2尽量避免样品接触到空气。 2.3快速将样品送至检测实验室。 3.样品处理 3.1使用无菌器具将样品分配到多个无菌试剂瓶中。 3.2确保样品的稀释比例符合标准要求。 4.培养试验 4.1取一定量的样品，将其滴入细菌计数板的每个孔中。 4.2使用无菌移液器将细菌计数板放入孔内的细菌培养基中。 4.3将细菌计数板密封，并标注好样品信息。 4.4将细菌计数板放置于设定好的温度和湿度下进行培养。 4.5培养时间根据实验要求确定。 5.计数和分析 5.1培养结束后，取出细菌计数板，使用显微镜在指定区域进行微生物计数。 5.2统计每个孔中微生物的数量，并记录下来。 5.3分析结果，与相关法规和标准进行比较。
5.4如结果符合要求，则纯化水样品通过检查；如结果不符合要求， 则需进行进一步处理。 6.结果记录和报告 6.1将检查结果记录在检测报告中，包括样品信息、检测日期、微生 物数量等。 6.2将报告存档，并按要求进行归档保存。 四、操作注意事项 1.操作过程必须保持无菌状态，避免样品的污染。 2.使用的设备和试剂必须保持干净和完整。 3.细菌计数板的培养条件必须按标准要求进行控制。 4.操作人员应熟悉操作流程和相关法规和标准，严格遵守操作规程。 五、操作记录 1.操作人员应按要求记录操作流程、设备校验、样品信息等重要数据。 2.操作记录应包括操作日期、操作人员、操作步骤和结果等信息。 3.操作记录应及时归档保存，便于回顾和追溯。 六、附：操作规程的制定和修订 1.每个化验室应根据实际情况制定适合自己的操作规程，并进行内部 审查和批准。 2.定期对操作规程进行复审，根据需要进行修订和更新。
纯化水标准(2015版中国药典)
纯化水 【试剂】 10%氯化钾：取10g氯化钾溶加100ml水使溶解，即得。 稀硫酸：取硫酸57ml，加水稀释至1000ml，即得。应含H2SO4 9.5%～10.5% 甲基红指示剂：取甲基红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液 5.3ml使溶解，再加水稀释至100ml，即得。 溴麝香草酚蓝指示剂：取溴麝香草酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.2，ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。 0.1%二苯胺硫酸溶液：取0.1g二苯胺，加入100ml硫酸（98%）使之溶解，即得。 稀盐酸：取盐酸243ml，加水稀释至1000ml，即得。应含HCl9.5%～10.5% 高锰酸钾滴定液（0.02mol/L）：取高锰酸钾3.2g，加水1000ml，煮沸15分钟，密塞，静置2天以上，用垂熔玻璃滤器过滤，摇匀。 高锰酸钾滴定液标定：准确称取于摄氏110度烘过两小时的草酸钠0.2g,置于烧杯中，加5%硫酸120ml,加热至80-90摄氏度，用高锰酸钾标准溶液滴至微红色（在1分钟内不消失）即为终点。 c=5m/v*0.0670 式中c-高锰酸钾标准溶液的浓度（mol/L）; m-称取草酸钠重量（g）; v-滴定时消耗高锰酸钾溶液体积（ml）; 0.0670-Na2C2O4（草酸分子量）/2*1/1000。 本品为饮用水经蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其他适宜的方法制得的制药用水，不含任何添加剂。 【性状】本品为无色的澄清液体；无臭。 【检査】酸碱度取本品10ml，加甲基红指示液2滴，不得显红色；另取10ml，加溴麝香草酚蓝指示液5滴，不得显蓝色。 硝酸盐取本品5ml置试管中，于冰浴中冷却，加10%氯化钾溶液0.4ml与0.1%二苯胺硫酸溶液0.1ml，摇匀，缓缓滴加硫酸5ml,摇匀，将试管于50°C水浴中放置15分钟，溶液产生的蓝色与标准硝酸盐溶液[取硝酸钾0.163g，加水溶解并稀释至100ml，摇匀，精密
纯化水微生物限度 (2)
纯化水微生物限度 简介 纯化水是指经过特殊处理的去除了杂质、溶解性和可溶性 有机质、有毒有害物质等的水。在许多领域，纯化水是必需的，例如药品制造、实验室研究、电子产品制造等。然而，即使经过纯化的水也可能含有微生物。 微生物是一类生物体，包括细菌、真菌、病毒等。在纯化 水中存在微生物是不可避免的，因为微生物广泛分布于自然环境中。为了确保纯化水的质量和安全，需要规定纯化水中微生物的限度。本文将介绍纯化水微生物限度的相关内容。 纯化水微生物限度的重要性 纯化水微生物限度的重要性可以从以下几个方面进行说明： 1. 确保纯化水的质量 纯化水的质量直接影响到各个领域中的生产和实验结果。 微生物的存在可能会对产品质量产生负面影响，例如腐蚀设备、降低药物纯度等。通过规定微生物的限度，可以保证纯化水质量的可靠性。
2. 保障生产和实验的可靠性 在药品制造、实验室研究等领域，微生物的存在可能会对 实验结果产生干扰，或者导致生产过程中的异常情况。为了保障生产和实验的可靠性，需要确定纯化水中微生物的限度。 3. 保护人体健康 纯化水在医疗、食品等领域中被广泛应用，直接接触人体。如果纯化水中含有过多的微生物，可能会对人体健康产生危害。因此，通过规定微生物的限度，可以保护人体健康。 纯化水微生物限度的标准和方法 纯化水微生物限度的标准和方法多样，下面将介绍一些常 见的标准和方法。 1. 美国药典（USP）标准 美国药典（USP）是一个常用的药品质量标准，在其中也规定了纯化水微生物限度的相关内容。USP在纯化水微生物限 度测试中使用了菌落计数法和限定菌的检验方法。菌落计数法是一种常规的微生物计数方法，可以测定纯化水中微生物的数量。限定菌的检验方法则是针对特定的微生物进行检验。
纯化水和注射用水微生物限度试验
纯化水和注射用水微生物限度试验 1目的 测试纯化水和注射用水中的细菌、霉菌和酵母菌的数量。 2测试依据 2005版药典。 3测试要求 纯化水： 细菌、霉菌和酵母菌总数不得超过100cfu/ml。 注射用水；细菌、霉菌和酵母菌总数不得超过10cfu/100ml 4工作环境 100级洁净条件下局部100级单向流空气区域内，按无菌操作要求进行。 5器具和试剂 取水容器、平皿、薄膜过滤器、滤纸、手提消毒锅、镊子。 营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基 氯化钠蛋白胨缓冲液。 6取水样 在制水装置的储水桶的出水口、回水口和用水终端处分别取样，纯化水各点取100ml，注射用水也分别各取100ml. 7过滤、接种和培养 用氯化钠蛋白胨缓冲液冲洗滤膜，取纯化水1 ml加氯化钠蛋白胨缓冲液到100ml，混匀后过滤，用镊子取出滤膜，菌面朝上贴于营养琼脂培养基面上，用
同法制备滤膜二张，分别贴于玫瑰红钠琼脂培养基和酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基上，细菌培养30℃，48小时，霉菌和酝母菌25℃培养72小时。 注射用水： 将三个采样点采取的水样各100ml，分别过滤制备滤膜，菌面朝上分别贴于营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基上，细菌在30℃培养48小时，霉菌和酵母菌在25℃培养72小时。 8计数和报告 用放大镜观察逐片计数，纯化水以每1ml供试品的菌落数为报告数，注射用水以100ml供试品的菌落数为报告数。 PH 7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液的配制 1用途稀释液,冲洗液. 2配方蛋白胨 1.0g/l ,氯化钠 4.3 g/l ,磷酸二氢钾 3.5 g/l,磷酸氢二钠 7.23 g/l。 3用法取本品质 16.2xx,加蒸馏水(PH为 6.6)1000ml,加热完全溶解后,校正PH值 7.02,滤清、分装、灭菌。 倘若PH值偏差，用,磷酸二氢钾或磷酸氢二钠调节至
纯化水微生物限度
纯化水微生物限度检查的验证记录 1验证目的：建立纯化水的菌落计数方法，并对其有效性进行评价。 2.验证要求：用标准菌珠评价的微生物限度检查，对检品中的微生物抑制菌，试验结果应显示稀释剂对照组的菌回收率应均不低于%，试验组的菌回收平均不低于%。 3.试验材料、稀释液及菌种 3.1供试品：批号为 3.2稀释液：pH7.0氯化钠–蛋白胨缓冲液 3.3器具：无菌培养皿，无菌移液管，无菌锥形瓶 3.4验证用菌种 3.4.1大肠埃希菌〔CMCC（B）44102〕 3.4.2金黄色葡萄球菌〔CMCC（B）26003〕 3.4.3枯草芽孢杆菌〔CMCC（B）65031〕 3.4.5白色念珠菌〔CMCC（F）98001〕 3.4.6黑曲霉〔CMCC（F）98003〕。 3.5菌液制备：接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物少许至ml 营养肉汤培养基中，培养小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物少许至改良马丁培养基中，培养小时。上述培养物用%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为cfu的菌悬液。接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基中，培养天，加入ml %无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，吸出胞子悬液至无菌试管内，用%无菌氯化钠溶液制成每1ml孢子数cfu孢子悬液。 3.6培养基 3.6.1采用符合中国药典规定的营养琼脂干燥培养基，批号为：制造商为 3.6.2采用符合中国药典规定的玫瑰红钠干燥培养基，批号为：制造商为 4.方法： 4.1采用薄膜过滤法，滤膜孔径不大于μm，直径约为mm。选择滤膜材质时应保 日期：年月日复核人：检验人： 纯化水微生物限度检查的验证记录 证供试品及其溶剂不影响微生物的充分被截留。滤器及滤膜使用前应采用适宜的方法灭菌。使用时，应保证滤膜在过滤前后的完整性。水溶性供试液过滤前先将少量的冲洗液过滤以润湿滤膜。供试液经薄膜过滤后，若需要用冲洗液冲洗滤膜，每张滤膜每次冲洗量为ml。每片滤膜的总过滤量不宜过大，以避免滤膜上的微生物受损伤。 4.2取相当于每张滤膜含ml供试品的供试液，加至适量的稀释剂中，混匀，过滤。用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或其他适宜珠冲洗液冲洗滤膜，冲洗方法和冲洗量用“计数方法的验证”。冲洗后取出滤膜，菌面朝上贴于营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基或酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基平板上培养。每种培养基至少制备一张滤膜。 5.操作 5.1供试液的制备：取纯化水ml，分别加mlpH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，制成试液。验证实验的3次平行实验，其试验组分别采用上述3批供试品。 5.2试验组：取ml，加入开放式薄膜过滤器中，过滤，然后取5种试验菌液各ml分