实验室常用液体配制标准操作规程

实验室常用液体配制标准操作规程
实验室常用液体配制标准操作规程

常用液体配制标准操作规程(SOP)

国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心

二〇〇八年九月修订

目录

一、细菌培养系统(责任人:郑子峥)

二、DNA操作系统(责任人:罗文新、陈瑛炜)

三、蛋白质操作系统(责任人:李少伟、顾颖、潘晖榕)

四、细胞培养相关(责任人:程通、张涛)

五、单克隆抗体制备系统(责任人:陈毅歆、)

六、EIA系统(责任人:葛胜祥、熊君辉)

一、细菌培养系统

1、LB培养基:

每1000mL加分析纯NaCl 10g ,蛋白胨 10g,酵母粉5g,用ddH2O 配制,再用10M NaOH调pH至(1000mL一般加450ul),高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。

2、固体培养基:

LB培养基中加入琼脂至%,高压蒸汽灭菌15min后使用。

3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠(Ap):

注射用氨苄青霉素钠(粉末)50g溶于500ml无菌去离子水中,溶解后分装入4ml灭菌的EP管,全程超净工作台内操作,避免染菌,分装后-20度保存,培养细菌时做1000×使用。

注:如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的,溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。

4、%(g/V)硫酸卡那霉素(Kan)

注射用硫酸卡那霉素(液体)通常是2ml/支,内含卡那霉素。取25支药剂(50ml),加入450ml无菌去离子水中,分装入4ml灭菌的EP管,全程超净工作台内操作,避免染菌,分装后-20度保存,培养细菌时做1000×使用。

注:如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装,溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。

5、细菌培养:

配制相应抗性培养基,每试管倒入3~4ml培养基(卡那霉素抗性培养采用标记试管),无菌牙签挑取单克隆至试管中,于37℃,220rpm 培养。剩余培养基做好抗性和日期标记,置于4℃保存。

6、化学感受态制备:

1)原理::

细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态,这时的菌细胞称为感受态细胞(Competent cell)。将细菌置于0℃,低渗CaCl2 溶液中时,菌细胞壁和膜的通透性增强,菌体膨胀成球型。外源DNA与Ca2+形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物黏附于细胞表面,在经42℃短暂的热冲击处理(一般热休克90s)后能促进细胞吸收外源DNA复合物。

2)仪器、材料与试剂:

①超净工作台、低温离心机、摇床、-80℃冰箱,装液氮的泡沫盒及液氮、50ml的离心管2个,50ml的注射器及小过滤器各1个。高压灭菌的纸张、透气膜、的EP管约350-500个,两块10cm的平皿板及接种环。

②TB缓冲液:每200ml液体中含、、Kcl、PIPES。(注:在电子天平上的误差<50mg,因在PH=易溶故先将其它药品用超纯水溶解,并用KOH及HCL调PH至。在加入溶解后用超纯水定溶至相应的量,采用50ml的注射器及小过滤器过滤,一般储存在-20℃,时间<25天,否则易被氧化颜色呈粉红。)

③LB液体培养基:参见前面介绍。

④LB固体培养基:参见前面介绍。

⑤1管DH5α的菌种

3)步骤:

①倒无抗性的固体培养板,用接种环沾取感受态甘油菌画线,

置于37℃恒温培养箱中培养过夜。

②在超净台里采用小枪尖挑取培养板中的单克隆菌(菌落的大小约2~3mm)转接于200~250ml的LB液体培养基中,盖上透气膜。

③置于摇床上,18℃、200- 250rpm速度摇约需3~5天,使OD600=~(对数生长期或对数生长前期)时开始制备。

④取出TB缓冲液及无菌的50ml离心管置于4℃冰浴中,预冷低温高速离心机(4℃、2500rpm、10min)。

⑤在50ml的离心管中加入约35ml-45ml的菌液,在4℃中冰浴10min。

⑥取出后放置于离心机上离心4℃、2500rpm、10min。

⑦弃上清液,在灭过菌的吸水纸上扣干(可重复多次收集菌体),先用约5~15ml的TB缓冲液重悬,再加至35ml的量(在冰上操作)冰浴10min。

⑧重复⑥+⑦的步骤一次。

⑨在35ml的TB缓冲液重悬后缓慢加入终浓度为7%的DMSO,混匀后在冰上冰浴10min。

⑩分装成100-150ul/管(的EP管)浸入液氮中速冻,分装约300多管后转移放置于-80℃冰箱保存。

4)转化效率的评估:

①采用小量质粒快转(冰浴10min→42℃热休克90s→冰浴2min →加无抗性LB液体培养基200ul→37℃摇床复温培养30min)。

②涂Kn、AP抗性板并做阴性对照(采用ddH20代替鉴定用的大

提标准质粒),可以评价出是否有染菌、突变、转化效率。

③可以用Er2566等感受态做平行对照,评估其的生长快慢情况及转化效率的高低。

转化效率=转化子总数/质粒DNA加入量(1ug/ul),标准质粒为大提用的N31-EGFP。

5)注意事项:

①严格按照标准操作步骤,整个操作过程要注意温度(4℃冰上操作)且洁净的超净台环境防止污染。

②直接从-80℃取出的菌株培养致敏后比连续使用或4℃短期保存的细菌的转化率要高,一般是受体菌应处于对数生长期或生长前期即OD600=~。

③转化鉴定时,42℃准确热休克90s不要振荡,迅速置于冰上2min,按照标准操作步骤进行评估。一般是感受态制备好在-80℃冰箱冻存2天后再做鉴定,更准确评估。

④质粒分子量的大小对转化效率也有影响,一般来说,随着质粒分子量的增大,其转化效率会相应地降低。但当质粒在~时,所得的转化率基本一致。

7、电转感受态制备:

1)准备工作:(提前一天)

1、250ml LB液体盛于1L三角瓶中;

2、1L超纯水;500mL离心管两支;10%甘油400mL;

3、离心管和200ul枪头若干

以上物品,120℃灭菌20分钟后置于4℃保存备用

4、电转杯经纯水洗净后这置于75%乙醇浸泡

5、挑ER2738菌单克隆,接种于4mlTet抗性的LB中,于37℃190rpm过夜振荡培养。

2)感受态制备:

1、取前一夜扩增的菌液3ml接种于 250mlTet抗性LB中,37℃240rpm振荡培养,约2-3小时OD值可达(其间每1小时测一次OD,其值在之间均可,但在时效率最好);

2、将菌液置于冰水混合物中冷浴30分钟。同时将前一夜置于4℃保存的物品取出,置于冰水混合物中冷浴30分钟,同时将离心机预冷到4℃;

3、将菌液全部转入500ml离心管中,2500rpm,4℃离心10分钟;

4、弃上清,向离心管中加入约100ml预冷的无菌水,在冰水混合物中摇晃瓶身,使沉淀充分悬起,然后再补加200ml无菌水,与离心机中4000rpm,4℃下离心10分钟;

5、重复步骤4两次;

6、以10%甘油代替无菌水重复步骤4一次;在离心的过程中将离心管插入冰中预冷;

7、充分弃上清,加入200ul10%甘油,要换瓶身,使沉淀充分悬起,用预冷的枪头按100ul/支分装细胞于离心管中;

8、将分装好的细胞放入-80℃保存。

3)质量控制:

将电转杯从乙醇中取出,置于超净台中,用无菌风吹4小时

从-80℃取出一支感受态,立即放入冰盒里;

取1ul标准质粒(1ug/ml)加入感受态中,混匀后,加入预冷的电转杯中;

将电转条件设为,电击2-3秒,立即加入1mlSOC培养基并混匀;

将混合物转入离心管中于37℃,200rpm振荡恢复半小时;

用LB将培养物稀释至103涂于Amp固体培养基上,倒置于37℃温箱中,过夜培养。

计算效率:效率=菌落数×103×103。

二、DNA操作系统

1、溶液 I:

葡萄糖50mmol/L,EDTA 10mmol/L,Tris-HCl 25mmol/L,。

2、溶液 II:

NaOH L,SDS 1%,用ddH2O现配现用。

3、溶液Ⅲ:

取5mol/L NaAc 60mL,冰乙酸,混合后加ddH2O至100mL。

4、酚-氯仿-异戊醇(25:24:1)

以25:24:1的比例混匀平衡酚、氯仿、异戊醇,保存于棕色玻璃瓶中,上覆一层Tris-Cl水相,4℃储存备用。

5、TE缓冲液:

10mmol/L Tris-Cl ,1mmol/L EDTA ,灭菌后使用。实验室中配有100×的TE母液,用时可用ddH2O稀释成1×使用液,灭菌后使用。

6、L CaCl2:

在适量纯水中溶解54g ,定容至100mL,高压除菌后保存于4℃备用。

7、10×DNA上样buffer:

母液:以500ml为例:蔗糖:200g,溴酚蓝:,取去离子水定容至500ml,完全溶解后放置于4℃保存。

*该母液配制完正常颜色为棕红色,颜色与pH值有关;存储时间较长,每次使用时需摇匀,并注意是否长菌。

染料:SYBER Green I(Molecular Probe)10,000×

每次取50ul染料加入50ml母液中,充分摇匀。分装于避光管中,即为10×DNA上样buffer,配制好的buffer均需避光4℃保存。

*配制者需督促使用者及时将避光管放回4℃,并经常检查溶液存量,染料需提前订购。

8、RNase A(DNase free):

RNase A干粉(Ameresco)溶解于L的CH3COONa(pH )中,使终浓度为1mg/ml,加热至100℃,15min,室温冷却。用体积的1M Tris-Cl 调pH至后,分装,于-20℃冻存。

*500ul/管分装,供分子克隆实验使用;3ml/管分装,供大提质粒使用。RNase A干粉需提前订购,及时检查使用情况。

三、蛋白质操作系统

(一)、电泳

1、30%丙烯酰胺

将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml 的水中,于磁力搅拌器上搅拌至完全溶解。补加水至终体积为100ml。以μm孔径过滤溶液,去除不溶性杂质。查证该溶液的pH值应不大于,置棕色瓶中保存于室温。

注意事项:

丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。

2、 Tris-HCl

400ml 水中溶解Tris-Base , 浓盐酸调PH至后定容至500ml

3、 Tris-HCI

400ml 水中溶解Tris-Base , 浓盐酸调PH至后定容至500ml

4、10%SDS

900ml水中溶解100g电泳级SDS,加热至68℃助溶,加入几滴浓盐酸调节pH值至,加水定容至1L,分装备用。

5、10%过硫酸铵

称取过硫酸铵2g,适量水溶解后,定容至20mL,分装成1mL/管,于-20℃保存备用。

6、蛋白上样Buffer(6×蛋白加样缓冲液)

称取十二烷基硫酸钠12g、溴酚蓝,1M Tris-Cl (pH= 30ml、甘油60ml、β-巯基乙醇5ml,定容至100ml。

7、蛋白质电泳buffer(5×)

称取三羟甲基氨基甲烷、甘氨酸、十二烷基硫酸钠, 在水中溶解并定容至1L。

(二)染色

1、染色液(考马斯亮蓝染液)

甲醇45%,冰乙酸10%,去离子水45%,加考马斯亮蓝R-250或G-250至%,过滤后使用。

2、10×脱色液

称取KCl ,加水定容至1L

3、蛋白快速银染所需溶液

(1)固定液:400mL 甲醇,500uL甲醛,加水定容至1L;

(2)20% AgNO3溶液:20g AgNO3加水定容至100mL;

(3)Na2S2O3溶液: Na2S2O3·3H2O,加水定容至1L;

(4)显色液(未加甲醛):30g NaCO3,20mL 上述Na2S2O3溶液,加水定容至1L,(临用前加入甲醛,甲醛量如何确定)。

(5)柠檬酸: C6H8O7·3H2O,加水定容至1 L。

(三)杂交

1、电转液:称取Tris-Base ,甘氨酸,先加4L水溶解,再加甲醇1200ml, 定容至6L。

2、10×TN:称取NaCl , Tris , 加入浓盐酸调节至PH ,定容至5L 。

3、封闭液(WB用):称取5g 脱脂奶粉,加入TN,定容至100ml。

4、TNT:TN中加 Tween-20至%。

5、AP底物:氯化钠,,Tris-Base ,加水溶解,加浓盐酸320ul 调节pH至, 定容至500ml

注意事项:NBT、BCIP、N-N-二甲基甲酰胺为有毒试剂,戴乳胶手套在通风橱中操作。配制用的EP管最好采用新管子,防止漏液,用后的空管注明有毒,用PE手套或是塑料袋包好再丢弃。

6、NBT配制:500mg NBT粉末溶于7ml N-N-二甲基甲酰胺,3ml 去离子水中,颠倒混匀,溶解即可。

7、BCIP配制:

100mg BCIP粉末溶于10ml N-N-二甲基甲酰胺中,颠倒混匀,溶解即可。

(四)纯化

1、10×裂解液:50mmol/LTris-HCl(),10mmol/LEDTA,300mmol/LNaCl.。

2、Buffer I:20mmol/LTris-HCl,5mmol/LEDTA,100mM NaCl。

3、8M Urea:称取480g的尿素,用Buffer I定容至1升即可。

四、细胞培养相关

(一)胰酶的配制:(浓度为1‰,1L)

1、认真清洗配制容器,自来水20遍,去离子水5遍,超纯水润洗3遍。

2、称取牛胰蛋白酶;EDTA 2 g;

3、用超纯水溶解;

4、磁力搅拌器搅拌至胰酶完全溶解,溶液变得澄清;

5、超纯水定容至1L;

6、不锈钢滤器加滤纸两张高温灭菌后,在超净工作台过滤;

7、在血清瓶中加入少量滤好的胰酶,置于细胞培养箱中检测是否染菌,其余置于4℃待用;

8、过滤后洗净滤器再次灭菌,避免残留的胰酶降解蛋白。

(二)DMEM配制:

1、所需试剂及材料:

试剂: DMEM干粉(GIBCO 10L)、超纯水(Milli-Q)、Na2CO3 (Sigma)材料:10L玻璃瓶、 500ml盐水瓶(灭菌)、滤膜、滤器(事先放好两层滤膜并高压灭菌)、磁力搅拌器大号搅拌子蠕动泵胶塞

2、操作步骤:

(1)10L玻璃瓶洗涤,自来水20遍,去离子水5遍,超纯水润洗3遍。

(2)在10L玻璃瓶中加入超纯水,将DMEM干粉倒入,在磁力搅拌器上

搅拌溶解。

(3)按照L 加入Na2CO3 。

(4)调节pH值至~。

(5)过滤分装,并注明名称及配制日期。此过程注意无菌操作!

(6)最后用血清瓶取10ml左右置于细胞培养箱中检测是否染菌。

(7)清洗滤器,10L玻璃瓶,软管,将所有实验器具归位。

(三) 1640、MEM培养基的配制同上, Na2CO3的用量见包装说明(四)细胞间100×双抗(青霉素、链霉素)的配制

青霉素及链霉素配制的终浓度为1万单位/毫升。

配制的步骤以400ml为例:

1.认真清洗配制容器,自来水20遍,去离子水5遍,超纯水润洗

3遍。

2.准备5瓶青霉素(80万单位/瓶)、4瓶链霉素(100万单位/瓶)。

3.加入1-2ml细胞间专用PBS进入青霉素、链霉素的瓶子内,浸泡

后吹吸数次至全部溶解,溶解后的液体吸入配制容器内。用PBS 再次润洗装有青霉素及链霉素的小瓶子,将残留的青霉素及链霉素溶解,将液体并入配制容器内,重复润洗2次。

4.用细胞间专用PBS定容至400ml,搅拌均匀。

5.将配制的母液用的滤膜过滤除菌,分装到灭菌后的4ml EP管内,

2ml/ 管,冻存于-20℃。( 4mlEP管需提前一天灭菌,烘干过夜。)(五)100× L-谷氨酰胺配制(浓度200mM= L )

所需试剂及材料:L-谷氨酰胺干粉(Sigma)、超纯水(Mili-Q)、 1L 烧杯、量筒、4ml EP管(灭菌)。

步骤:

1.认真清洗配制容器,自来水20遍,去离子水5遍,超纯水润洗3

遍。

2.称取相应质量的L-谷氨酰胺干粉,用超纯水溶解后,小滤器过滤除菌。

按需要分装(如2ml/管) -20℃保存。

注:勿高压灭菌,过滤后,尽快分装,切勿放在4℃过久!

(六)100×丙酮酸钠配制(浓度100mM 11g/L)

所需试剂及材料:丙酮酸钠(Sigma)超纯水(Mili-Q) 1L烧杯,量筒, EP管(灭菌)

步骤:

1.认真清洗配制容器,自来水20遍,去离子水5遍,超纯水润洗3遍

2.称取相应质量的丙酮酸钠干粉,用超纯水溶解后,小滤器过滤除菌。

按需要分装(如1ml/管) -20℃保存。

注:勿高压灭菌过滤后,尽快分装,切勿放在4℃过久!

(七)Verson配制

1.洗净容器:自来水10遍,去离子水5遍,超纯水3遍。

2.配制Verson(超纯水配制):

Verson (1×)(g/L)

KCl

KH2PO4

NaCl

NaHCO3

Na2HPO4·12H20

EDTA

3.分装到500ml盐水瓶,盖上胶塞(不用灭菌,煮过即可),插上针

头(10mL以下的注射器针头),包上铝箔纸。

4.120℃,20min高压湿热灭菌,灭菌后,摆放至细胞间指定位置。(八)细胞间PBS配液

PBS 缓冲液配方:【1L体系】

NaCl g,KCl g,Na2HPO4·12H2O g,KH2PO4 g

调整pH 至

具体步骤:

1. 清洗配液瓶,自来水10遍,去离子水5遍,超纯水3遍。(一般使用细胞间配液瓶10 L 体系);

2. 按上述配方准确称量物品,倒入配液瓶(注意:若药品潮解,应更换);

3. 加入超纯水(细胞间配液用,R206),定容至准确体系,溶解完全;

4. 使用细胞间pH计,调配pH至;

5. 使用细胞间灭菌过的500mL 盐水瓶进行分装,标记,加橡胶塞

针头,120℃,20min高压湿热灭菌;

6. 灭菌完,摆放至细胞间相应位置。

(九)磷酸钙转染试剂

配制试剂前,认真清洗配制容器,自来水10遍,去离子水5遍,超纯水3遍。

CaCl2 M (500ml)

(MW 147) SigmaUltra C5080 g

溶解于500ml超纯水,小滤器过滤除菌。50ml样品管分装后,冻存于-20°C 。

HeBS 2x (1000ml)

NaCl (MW SigmaUltra S7653 g M final)

HEPES (MW SigmaUltra H7523 g final)

Na2HPO4, anhydrous (MW 142) SigmaUltra S7907 g mM final) 800 ml超纯水溶解后,用1Mol NaOH溶液调PH值至,然后定容至1000ml。(准确的PH值对转染效率非常重要,请用细胞间内的精密PH计测量PH值,测量前要校正PH计,线型要在99%~101%)

小滤器过滤除菌。50ml样品管分装后,冻存于-20°C 。

(十)酸液配制(1L):

重铬酸钾 120g

浓硫酸 200ml

去离子水补至 1000ml

具体步骤:

1 在通风橱中架好塑料桶和搅拌器,确保稳定,不会侧翻。

2 在塑料桶中10L、15L、20L的位置划好刻度线,以利于后续步骤的定容。

3 在塑料桶中加入半桶去离子水,开动磁力搅拌器,缓慢倒入浓硫酸(硫酸遇水放热,倒太快会导致液体飞溅)。

4 缓慢倒入重铬酸钾,定容后,搅拌至完全溶解。

注意事项:废酸液应先用工业级的NaOH中和后方可倒往下水道,否则会腐蚀水管、污染环境,中和过程中会大量放热。

五、单克隆抗体制备系统

1、PRMI 1640HT培养基(10L):

PRMI 1640干粉10包(10L),称取丙酮酸钠(Sodium Pyruvate,S)10L,适量ddH2O溶解后加入。称取黄嘌呤(hypoxanthn,H) 10L +胸腺嘧啶核苷(thymidine,T)10L +谷氨酰胺(L-Glutamine,L-Glu)10L,置适量ddH2O 中在45~50℃条件下溶解后加入。加ddH2O至10L,补加NaHCO320g/10L。用1mol/L HCl调节pH至~(经验值是3ml/10L)。过滤除菌。取少量的培养液置培养瓶中并放入 CO2培养箱中,一周后,如培养中未长菌,同一期配制的基础培养液方可使用。

2、PRMI 1640培养基:

PRMI 1640HT培养基配制时不加H(黄嘌呤)和T (胸腺嘧啶核苷)即可。

3、过氧乙酸:

100ml的H2O2加入到200ml的乙酸中,再加入6ml浓H2SO4,放置过夜即可。

4、细胞冻存液:

90mL胎牛血清+10mL DMSO(二甲亚砜),4℃冻存。

EIA系统

六、EIA系统

(一)常用溶液:

1、20×(1L):Na2CO3;NaHCO3

2、10×(1L):Na2HPO4·7H2O ;NaH2PO4

3、2×ED:1XPBS+%酪蛋白+2%明胶+%防腐剂(proclin-300)

(二)基本操作:

1、标本的采取和保存

大部分ELISA检测均以血清为标本。血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。

2 试剂的准备

按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。

3 加样

在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。需稀释的样品可在板孔中加入稀释液,再在其中加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。若每孔所加样品不同,每板的加样时间不宜超过7分钟,另一方面要注意不要造成孔间污染;加酶结合物和底物时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。

4 保温

常见的ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育。 ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有最贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个

有机化学实验室安全标准操作规程(新编版)

( 操作规程 ) 单位:_________________________ 姓名:_________________________ 日期:_________________________ 精品文档 / Word文档 / 文字可改 有机化学实验室安全标准操作 规程(新编版) Safety operating procedures refer to documents describing all aspects of work steps and operating procedures that comply with production safety laws and regulations.

有机化学实验室安全标准操作规程(新编 版) 1职责 1.1实验室主任对安全全面负责。经常进行安全督察,组织安全检查,负责处理安全事故。 1.2实验员负责水、电线路、消防器材的配置和设施安全检查。 1.3各科实验老师负责本科的化学药品、水电气、门窗的安全。 1.4实验员负责试剂、药品,特别是有毒有害,易燃、易爆物质的管理。 2.工作程序 2.1安全操作规范 2.1.1检测人员在工作中要严格按照操作规程,杜绝一切违章操作,发现异常情况立即停止工作,并及时登记报告。

2.1.2禁止用嘴、鼻直接接触试剂。使用易挥发、腐蚀性强、有毒物质必须带防护手套,并在通风橱内进行,中途不许离岗。 2.1.3在进行加热、加压、蒸馏等操作时,操作人员不得随意离开现场,若因故须暂时离开,必须委托他人照看或关闭电源。 2.1.4各种安全设施不许随意拆卸搬动、挪作他用,保证其完好及功能正常。 2.1.5操作人员要熟悉所使用的仪器设备性能和维护知识,熟悉水、电、燃气、气压钢瓶的使用常识及性能,遵守安全使用规则,精心操作。 2.2有毒有害物质的管理 2.2.1化学试剂、药品中凡属易燃易爆,有毒(特别是剧毒物品)、易挥发产生有害气体的均应列为危险物品,严格分类,加强管理,专人负责。 2.2.2建立详细帐目,帐、物、卡相符,专人限量采购,入库检查。 2.2.3危险物品、易燃易爆物品单独存放,有毒物品放入专用加

2015版滴定液配制、标定实用标准操作规程

制药企业用滴定液的配制及标定标准操作规程 1.目的 建立滴定液的配制及标定标准操作规程,并按规程进行操作,保证操作规范性与正确性。 2. 依据 《中华人民共和国药典》2015年版四部通则8006。 3.范围 本标准适用于本公司滴定液的配制及标定。 4.责任 配制者、标定者、复核者、QC主任监督 5. 内容 5.1 概述 滴定液系指在容量分析中用于滴定被测物质含量的标准溶液,具有准确的浓度(通常取4 位有效数字)。 5.2 仪器与用具 分析天平其分度值(感量)应为0.l m g或小于0.lmg;毫克组砝码需经校正,并列有校正表备用。 滴定管 10、25和50 ml 应附有该滴定管的校正曲线或校正值。 移液管 10、15、20和25 ml 其真实容量应经校准,并附有校正值。 5.3 试液试剂 5.3.1 均应按照《中国药典》2015年版四部通则8006项下的规定取用。 5.3.2 基准试剂应有专人负责保管与领用。 5.4 配制 滴定液的配制方法有间接配制法与直接配制法两种,应根据规定选用,并应遵循下列有关规定。 5.4.1所用溶剂“水”,系指蒸馏水或去离子水,在未注明有其他要求时,应符合《中国药典》“纯化水”项下的规定。 5.4.2采用间接配制法时,溶质与溶剂的取用量均应根据规定量进行称取或量取,并

且制成后滴定液的浓度值应为其名义值的0.95~1.05;如在标定中发现其浓度值超出其名义值的0.95~1.05范围时,应加人适量的溶质或溶剂予以调整。当配制量大于1000ml时,其溶质与溶剂的取用量均应按比例增加。 5.4.3采用直接配制法时,其溶质应采用“基准试剂”,并按规定条件干燥至恒重后称取,取用量应为精密称定(精确至 4 ~5 位有效数字),并置1000ml量瓶中,加溶剂溶解并稀释至刻度,摇匀。配制过程中应有核对人,并在记录中签名以示负责。 5.4.4配制浓度等于或低于0.02 mol / L的滴定液时,除另有规定外,应于临用前精密量取浓度等于或大于0. l mol / L的滴定液适量,加新沸过的冷水或规定的溶剂定量稀释制成。 5.4. 5 配制成的滴定液必须澄清,必要时可滤过;并按药典中各该滴定液项下的[贮藏]条件贮存,经下述标定其浓度后方可使用。 5.5标定 “标定”系指根据规定的方法,用基准物质或已标定的滴定液准确测定滴定液浓度(mol/L )的操作过程;应严格遵照药典中各该滴定液项下的方法进行标定,并应遵循下列有关规定。 5.5.1 工作中所用分析天平及其砝码、滴定管、量瓶和移液管等,均应经过检定合格;其校正值与原标示值之比的绝对值大于0.05 %时,应在计算中采用校正值予以补偿。 5.5.2标定工作宜在室温(10~30°C)下进行,并应在记录中注明标定时的室内温度、湿度。 5.5.3所用基准物质应采用“基准试剂”,取用时应先用玛瑙乳钵研细,并按,规定条件干燥,置干燥器中放冷至室温后,精密称取(精确至 4 ~5 位数);有引湿性的基准物质宜采用“减量法”进行称重。如系以另一已标定的滴定液作为标准溶液,通过“比较”进行标定,则该另一已标定的滴定液的取用应为精密量取(精确至0. 01ml),用量除另有规定外应等于或大于20ml,其浓度亦应按药典规定准确标定。 5.5.4根据滴定液的消耗量选用适宜容量的滴定管,滴定管应洁净,玻璃活塞应密合、旋转自如,盛装滴定液前,应先用少量滴定液淋洗 3 次,盛装滴定液后,宜用小烧杯覆盖管口。 5.5.5标定中,滴定液宜从滴定管的起始刻度开始;滴定液的消耗量,除另有特殊规

盐酸滴定液配制标准操作规程

1.目的: 建立本规程旨在为盐酸滴定液的配制、标定提供操作标准。 2.范围: 本规程对本公司的中心化验室盐酸滴定液的配制,标定有效。 3.责任: 中心化验室滴定液配制人、标定人。 4.检验依据: 《中国药典》2015年版四部 5.内容: 分子式:HCl 分子量:36.46 5.1 配制 ◆盐酸滴定液(1mol/L):取盐酸90ml,加水适量使成1000ml摇匀。 ◆盐酸滴定液(0.5、0.2或0.1mol/L)照上法配制,但盐酸的取用量分别为45 ml、18 ml、或9.0ml。 5.2 标定 ◆盐酸滴定液(1mol/L):取在270-300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约 1.5 g,精密称定,加水50ml使溶解,加甲基红—溴甲酚绿混合指示液10滴,用本液滴定至溶液由绿色转变为紫红色时,煮沸2分钟,冷却至室温,继续滴定至溶液由

绿色变为暗紫色。每1ml的盐酸滴定液(1mol/L)相当于53.00mg的无水碳酸钠。根据本液的消耗量与无水碳酸钠的取用量,算出本液的浓度,即得。 ◆盐酸滴定液(0.5mol/L)照上法标定,但基准无水碳酸钠的取用量改为约 0.8g。每1ml的盐酸滴定液(0.5mol/L)相当于26.50 mg的无水碳酸钠。 ◆盐酸滴定液(0.2mol/L)照上法标定,但基准无水碳酸钠的取用量改为 0.3g。每1ml的盐酸滴定液(0.2mol/L)相当于10.60 mg的无水碳酸钠。 ◆盐酸滴定液(0.1mol/L)照上法标定,但基准无水碳酸钠的取用量改为约 0.15g。每1ml的盐酸滴定液(0.1mol/L)相当于5.30 mg的无水碳酸钠。 ◆如需用盐酸滴定液(0.05mol/L、0.02mol/L、或0.01mol/L)时,可取盐酸滴定液(1mol/L或0.1mol/L)加水稀释制成。必要时标定浓度。 5.3 原理 Na 2CO 3 +2HCl 2NaCl+CO 2 +H 2 O 5.4 计算公式 m×1000 盐酸滴定液的浓度(mol/L):= V×T 式中:m为基准无水碳酸钠的称取量(mg); v 为本滴定液的消耗量(ml); T为与每1ml的盐酸滴定液相当的无水碳酸钠的毫克数。 5.5 试剂与仪器。 ◆试剂:盐酸、基准无水碳酸钠、甲基红—溴甲酚绿混合指示液。 ◆仪器:锥形瓶250ml、量筒(1000ml、100ml)100ml烧杯、碱式滴定管、电热恒温干燥箱、电子天平、干燥器、扁形称量瓶、胶头滴管、研钵、坩埚。 5.6 注意事项 ◆配制中,盐酸的取用量如按药典的规定量取,则配制成的滴定液的F值常为1.05-1.10;因此,在加水稀释并摇匀后,首先与已知浓度的氢氧化钠滴定液作比较试验,求得其粗略浓度,再加水适量稀释,以调节其浓度使其F值为0.95-1.05,而后再进行标定; ◆基准无水碳酸钠应在270-300℃干燥至恒重,以除去水分和碳酸氢钠。具

有机化学实验室安全标准操作规程

编号:SM-ZD-72796 有机化学实验室安全标准 操作规程 Through the process agreement to achieve a unified action policy for different people, so as to coordinate action, reduce blindness, and make the work orderly. 编制:____________________ 审核:____________________ 批准:____________________ 本文档下载后可任意修改

有机化学实验室安全标准操作规程 简介:该规程资料适用于公司或组织通过合理化地制定计划,达成上下级或不同的人员之间形成统一的行动方针,明确执行目标,工作内容,执行方式,执行进度,从而使整体计划目标统一,行动协调,过程有条不紊。文档可直接下载或修改,使用时请详细阅读内容。 1职责 1.1实验室主任对安全全面负责。经常进行安全督察,组织安全检查,负责处理安全事故。 1.2实验员负责水、电线路、消防器材的配置和设施安全检查。 1.3各科实验老师负责本科的化学药品、水电气、门窗的安全。 1.4实验员负责试剂、药品,特别是有毒有害,易燃、易爆物质的管理。 2. 工作程序 2.1 安全操作规范 2.1.1检测人员在工作中要严格按照操作规程,杜绝一切违章操作,发现异常情况立即停止工作,并及时登记报告。 2.1.2禁止用嘴、鼻直接接触试剂。使用易挥发、腐蚀性

强、有毒物质必须带防护手套,并在通风橱内进行,中途不许离岗。 2.1.3在进行加热、加压、蒸馏等操作时,操作人员不得随意离开现场,若因故须暂时离开,必须委托他人照看或关闭电源。 2.1.4各种安全设施不许随意拆卸搬动、挪作他用,保证其完好及功能正常。 2.1.5操作人员要熟悉所使用的仪器设备性能和维护知识,熟悉水、电、燃气、气压钢瓶的使用常识及性能,遵守安全使用规则,精心操作。 2.2 有毒有害物质的管理 2.2.1化学试剂、药品中凡属易燃易爆,有毒(特别是剧毒物品)、易挥发产生有害气体的均应列为危险物品,严格分类,加强管理,专人负责。 2.2.2建立详细帐目,帐、物、卡相符,专人限量采购,入库检查。 2.2.3危险物品、易燃易爆物品单独存放,有毒物品放入专用加锁铁柜内,注意通风。

混凝土搅拌站试验室安全操作规程(正式)

编订:__________________ 单位:__________________ 时间:__________________ 混凝土搅拌站试验室安全操作规程(正式) Standardize The Management Mechanism To Make The Personnel In The Organization Operate According To The Established Standards And Reach The Expected Level. Word格式 / 完整 / 可编辑

文件编号:KG-AO-3143-72 混凝土搅拌站试验室安全操作规程 (正式) 使用备注:本文档可用在日常工作场景,通过对管理机制、管理原则、管理方法以及管理机构进行设置固定的规范,从而使得组织内人员按照既定标准、规范的要求进行操作,使日常工作或活动达到预期的水平。下载后就可自由编辑。 一、试验仪器设备 1大型试验设备必须按照相关设计要求进行合理安置。 2试验设备安装应稳固,按规定要求搭设相应操作平台,保证仪器设备的正常运转。 3试验设备安装或检修完毕,必须经试运转正常后,办理交接班签证手续后方准使用。 4一切机械、电器设备的金属外壳和行车轨道必须接零、接地线,电阻不大于10欧。在同一供电系统中不准有的设备接零有的设备接地。 5所有的试验设备都应安装漏电保护器。特别是移动型机具,不安装漏电保护器不得使用。 6实行一机一闸制,所有机械都应设独立的开关

箱,箱内不得存放杂物。开关距所控设备水平距离不宜超过3m。 7各种试验设备不准超载运行,运行中发现有异声、杂音或电机过热(超过电机铭牌规定温度)应停机检修、或降温,严禁在运行中检修、保养。 8按时做好各种试验设备的维修、保养工作,按规定加注润滑油。严禁试验设备带病运转,中途停电,应切断电源。 9检修机械、电气设备时,应拉闸断电锁箱,并挂"有人检修禁止合闸警示牌",最好设监护人,停电牌应谁挂谁取。 二、站内检验活动 1试验人员要事先经过培训,严禁违章作业,严格执行操作规程,实行定机定人定责任制。 2试验设备操作人员应做到"四懂""三会"即,懂构造、原理、性能、用途、会操作、会维修保养、会排除故障。 3工作前试验人员必须按规定穿戴好防护用品,

实验室常用液体配制标准操作规程

常用液体配制标准操作规程(SOP) 国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心 二〇〇八年九月修订

目录 一、细菌培养系统(责任人:郑子峥) 二、DNA操作系统(责任人:罗文新、陈瑛炜) 三、蛋白质操作系统(责任人:李少伟、顾颖、潘晖榕) 四、细胞培养相关(责任人:程通、张涛) 五、单克隆抗体制备系统(责任人:陈毅歆、) 六、EIA系统(责任人:葛胜祥、熊君辉)

一、细菌培养系统 1、LB培养基: 每1000mL加分析纯NaCl 10g ,蛋白胨10g,酵母粉5g,用ddH2O 配制,再用10M NaOH调pH至7.4(1000mL一般加450ul),高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。 2、固体培养基: LB培养基中加入琼脂至1.5%,高压蒸汽灭菌15min后使用。3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠(Ap): 注射用氨苄青霉素钠(粉末)50g溶于500ml无菌去离子水中,溶解后分装入4ml灭菌的EP管,全程超净工作台内操作,避免染菌,分装后-20度保存,培养细菌时做1000×使用。 注:如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的,溶解后需用0.22滤膜过滤除菌后再分装。 4、2.5%(g/V)硫酸卡那霉素(Kan) 注射用硫酸卡那霉素(液体)通常是2ml/支,内含0.5g卡那霉素。取25支药剂(50ml),加入450ml无菌去离子水中,分装入4ml灭菌的EP管,全程超净工作台内操作,避免染菌,分装后-20度保存,培养细菌时做1000×使用。 注:如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装,溶解后需用0.22滤膜过滤除菌后再分装。 5、细菌培养: 配制相应抗性培养基,每试管倒入3~4ml培养基(卡那霉素抗性

PCR实验室标准操作规程

PCR实验室作业指导书 文件编号: 第1版 编制: 审核: 批准: 生效日期:2015年*月*日 质管部

PCR实验室公正性声明 1、坚持公正立场认真对待每一例检测,不受任何对检测工作质量有不良影响得、来自实验室 内部或外部得不正当得商业、财务与其她方面得压力与影响。避免卷入任何可能会降低技术能力、公正性、判断或运作诚实性得信任得活动。 2、严格遵循实验室认可依据得国际标准,严格按标准得管理要素与技术要素得要求建立自我 完善得管理体系与控制检测全过程各环节得机制,所有与检测有关得人员熟悉与之相关得质量文件,并在工作中执行这些政策与程序,真正把标准作为科学管理检测实验室得先进管理模式,尽可能把差错降到最低限度,确保检测数据准确可靠,检测结果与技术判断正确有效。 3、坚持以“客户为中心、质量第一”得服务宗旨,严格保护客户得机密与所有权,热忱提供优 质服务,努力实现让上级放心、客户满意得服务标准。 4、主动开展实验室得比对实验与其她有效地检测质量监控方案,并通过日常检测得监督机制, 持续改进、不断完善管理体系,从而保证其充分性与有效性。 修订页

目录 前言 (1) 质量方针 (2) 质量管理体系组织结构图 (3) 一、工作制度?4 PCR实验室得设置及管理规程 (4) PCR实验室内务管理规程.................................................................................................................................... 5PCR实验室人员得配置及管理规程?6 PCR实验室管理规程 (8) PCR实验室生物安全防护措施? 11 12 PCR实验室废弃物得处理管理规程? PCR实验室清洁消毒管理规程? 13 PCR实验室仪器设备得管理规程 (14) 试剂管理规程 (15) 16 清洁剂、消毒剂管理规程? 异常情况应急处理管理规程?17 采购管理规程 (20) 23 仓库管理制度? 26 临床标本得管理规程? PCR实验室记录管理规程 (27) 检验报告单发放、保密管理规程?28 PCR实验室岗位责任制 ....................................................................................................................................... 29二、操作指导书.................................................................................................................................................... 30PCR实验室得清洁消毒操作规程....................................................................................................................... 30 31 冰箱、冷藏柜得使用操作程序? 冰箱、冷藏柜得维护保养操作程序 (32) 34 洁净工作台使用操作规程? 洁净工作台维护、清洁操作规程........................................................................................................................ 35 ABI 7500实时跟踪荧光PCR仪使用操作规程? 37 38 ABI7500实时跟踪荧光PCR仪维护保养操作规程? 高速冷冻离心机使用标准操作规程 (39) 40 高速冷冻离心机维护保养操作规程? 41 生物安全柜使用操作规程? 生物安全柜得维护保养操作规程 (42) 加样器得使用操作规程 (43) 加样器得维护保养操作规程 (44) 干式恒温箱得使用操作规程 (45) 干式恒温箱得维护保养操作规程 (46) 47 紫外灯得使用操作规程?

实验室岗位安全操作规程

实验室岗位安全操作规程 1、在实验室工作当中存在化学灼伤、气体中毒、火灾触电、机械伤害等风险。 2、实验人员在实验室内必须穿戴工作服装,取样人员必须佩戴好相应的劳保用品与安全防护用具。 3、所有药品、标样、溶液都应有标签,绝对不要在容器内装入与标签不相符的物品。 4、不准穿拖鞋进入实验室,注意保持实验室的清洁卫生。 5、有毒、腐蚀、易燃、易爆的物品应妥善保管。贮存和使用应遵守?化学危险物品安全管理条例?。 6、实验室内严禁吸烟、饮水、进食。 7、开启易挥发液体试剂之前,先将试剂瓶放在自来水流中冷却几分钟,开启时,瓶口不要对人,最好在通风厨中进行。 8、易燃溶剂加热时,必须在水浴或沙浴中进行。 9、装过强腐蚀性、可燃性、有毒或易燃物品的器皿必须由使用者亲自洗净。 10、实验时若发现仪器设备出现故障或异常情况(如:有异味、冒烟等)时,应立即关闭电源开关,拨掉电源插头,并及时向实验室管理人员报告。 11、取下正在沸腾的溶液时,应用瓶夹摇动后取下以免溅出伤人。 12、玻璃棒、玻璃管、温度计等插入或拔出胶管时,均应垫有棉布且不可强行插入或拔出,以免折断刺伤人。

13、实验完毕,要关闭设备的电源、关好通风橱、整理好仪器设备,并打扫卫生。 14、配制药品或试验中能放出HCN、NO2、H2S、SO2、NH3及其它有毒和腐蚀性气体时,应在通风厨中进行,并带好必要的劳保用品。 15、实验室内应备有急救药品,消防器材和劳保用品。 16、化验室内应保持空气流通,环境清洁、安静。 17、易燃性气体不可与有助燃性的气体放到一个气瓶间,气瓶间内一定要有相应的防爆防倾设施。 18、样品的取样、接受、贮存和处置等要符合国家和公司的相关规定。 19、对实验产生的废液、废油、废物要分类存放并定期处置,禁止随意倾倒和储存。 20、实验室使用及存储的化学药剂或化学危险品都应备有相对应的化学品安全技术说明书(即MSDS),包括电子版和纸质版,并存放于实验室工作人员易于查找阅读的地方。同时实验室工作人员在使用化学药剂(特别是危险化学品)之前要对MSDS进行阅读学习,了解其危险特性及应急措施。 21、化学烧伤事故应急措施:当浓酸溅到眼睛或皮肤上时,应立即用大量清水冲洗,再用0.5%的碳酸氢钠溶液清洗;当强碱溅到眼睛或皮服上时,应迅速用大量清水冲洗再用2%的稀硼酸溶液清洗眼睛或用1%的醋酸溶液清洗皮肤。 当酸和碱滴溅到眼睛或皮肤上时,除经过上述处理外,还应马上送往医院进行救护。

培养基配制标准操作规程

1.目的: 建立本规程旨在为培养基配制提供操作标准。 2.范围: 公司培养基配制 3.责任: 质量管理科、菌检员对实施本SOP负责。 4.检验依据: 《中国药典》2015年版四部。 5.内容: 5.1 营养琼脂 ◆称本品34g,置三角烧瓶中,加1升纯化水,加热溶解、分装,用牛皮纸包扎好,高压灭菌121℃30分钟,室温下冷却至45℃(PH应为7.2±0.2范围内),放于冰箱内保存,备用。 5.2 玫瑰红钠琼脂培养基 ◆用于霉菌总数测定。 称本品30g,置三角烧瓶中,加1升纯化水,加热溶解、分装,用牛皮纸包扎好,高压灭菌121℃30分钟,室温下冷却至45℃(PH应为6.4±0.2范围内),放于冰箱内保存,备用。

5.3 普通琼脂斜面培养基 ◆称本品33g,置三角烧瓶中,加1升纯化水,加热溶解、分装,用牛皮纸包扎好,高压灭菌121℃30分钟,室温下冷却至45℃(PH应为8.0~8.2),放入冰箱内保存、备用。 5.4 胆盐乳糖培养基 ◆称本品36g,置三角烧瓶中,加1升纯化水,加热溶解、分装,用牛皮纸包扎好后高压灭菌121℃30分钟,室温下冷却至45℃(PH应为7.2~7.4),放入冰箱内保存、备用。 5.5 营养肉汤培养基 ◆适用于一般细菌的培养。 称取本品19g,加纯化水1000ml,煮沸到完全溶解后分装,高压灭菌121℃ 30分钟备用。 5.6 伊红美兰琼脂培养基 ◆用于大肠杆菌及肠道致病菌的分离鉴别。 称取本品36g,加纯化水1000ml,浸泡10分钟,煮沸至完全溶解,高压灭菌115℃30分钟,冷至55℃左右,振摇培养基,倾注灭菌平皿备用。 5.7 室温菌种保存培养基 ◆用于常用菌种的保存。 称取本品28g,加纯化水1000ml,浸泡10分钟,加热煮沸,高压灭菌121℃30分钟,备用。 6.文件变更历史:

实验室安全标准操作规程

编号:SM-ZD-85177 实验室安全标准操作规程Through the process agreement to achieve a unified action policy for different people, so as to coordinate action, reduce blindness, and make the work orderly. 编制:____________________ 审核:____________________ 批准:____________________ 本文档下载后可任意修改

实验室安全标准操作规程 简介:该规程资料适用于公司或组织通过合理化地制定计划,达成上下级或不同的人员之间形成统一的行动方针,明确执行目标,工作内容,执行方式,执行进度,从而使整体计划目标统一,行动协调,过程有条不紊。文档可直接下载或修改,使用时请详细阅读内容。 1职责 1.1实验室主任对安全全面负责。经常进行安全督察,组织安全检查,负责处理安全事故。 1.2实验员负责水、电线路、消防器材的配置和设施安全检查。 1.3各科实验老师负责本科的化学药品、水电气、门窗的安全。 1.4实验员负责试剂、药品,特别是有毒有害,易燃、易爆物质的管理。 2. 工作程序 2.1 安全操作规范 2.1.1检测人员在工作中要严格按照操作规程,杜绝一切违章操作,发现异常情况立即停止工作,并及时登记报告。 2.1.2禁止用嘴、鼻直接接触试剂。使用易挥发、腐蚀性

强、有毒物质必须带防护手套,并在通风橱内进行,中途不许离岗。 2.1.3在进行加热、加压、蒸馏等操作时,操作人员不得随意离开现场,若因故须暂时离开,必须委托他人照看或关闭电源。 2.1.4各种安全设施不许随意拆卸搬动、挪作他用,保证其完好及功能正常。 2.1.5操作人员要熟悉所使用的仪器设备性能和维护知识,熟悉水、电、燃气、气压钢瓶的使用常识及性能,遵守安全使用规则,精心操作。 2.2 有毒有害物质的管理 2.2.1化学试剂、药品中凡属易燃易爆,有毒(特别是剧毒物品)、易挥发产生有害气体的均应列为危险物品,严格分类,加强管理,专人负责。 2.2.2建立详细帐目,帐、物、卡相符,专人限量采购,入库检查。 2.2.3危险物品、易燃易爆物品单独存放,有毒物品放入专用加锁铁柜内,注意通风。

(完整word版)生物实验室安全操作规程

初中生物实验操作规程、安全预案 为了顺利地做好生物实验,保证实验成功,保护实验仪器设备,维护每个师生的安全,防止一切实验事故,特制订本安全守则。 一、未进实验室时,就应对本次实验进行预习,掌握操作过程及原理,弄清所有仪器、药品的性质。估计可能发生危险的实验,在操作时注意防范。 二、实验开始前,检查仪器是否完整无损,装置是否正确稳妥。严禁在实验室内吸烟或饮食。实验完毕要细心洗手。 三、水、电、灯一经使用完毕,就应立即关闭。离开实验室时,应检查水、电、门窗是否关好。 四、绝对不允许任意混合各种化学药品,以免发生意外事故。不能用手接触药品,不要把鼻孔凑到容器口去闻药品的气味,不得品尝任何药品的味道。 五、实验剩余的药品既不能放回原瓶,也不能随意丢弃,更不能拿出实验室,要放回指定的容器内。 六、灯火加热时要注意安全在酒精灯快烧尽、灯火还没熄灭时千万不能注入燃料,酒精灯熄灭时要用灯帽来罩,不要用口来吹,防止发生意外,不要用一个酒精灯来点燃另一个酒精灯,以免酒精溢出引起燃烧,点燃的火柴用完后立即熄灭,不得乱扔。 七、倾注药剂或加热液体时,不要俯视容器,以防溅出。试管加热时不要把试管口朝着自己或别人同时要来回移动试管使试管受热

均匀防止液体喷出口外也不要把烧烫的试管接触冷的灯芯。 八、不得挥动锋利的解剖器以免伤人 九、温度计要轻取轻放如有破损立即报告老师,不得用手触摸以免割伤或中毒。汞洒落时应尽快收集起来并用硫磺粉盖在洒落的地方。 十、使用玻璃器皿要注意安全。以免划伤。用玻璃棒搅和器皿里的液体时,玻璃棒转动的方向必须跟器皿底部平行。 十一、水和浓酸混合时,必须把酸慢慢地注入水中,边注入边搅和,才有消除高温、避免液体溅散的可能。若酸、碱溶液溅到皮肤上,立即用水冲洗皮肤 十二、取固体药品时,可以用药匙,块状的可以用镊子。用过的药匙要马上擦干净。 十三、解剖动物时,乙醚很容易挥发变成气体,人如果吸入过多的乙醚蒸气会头疼、恶心,实验时应使动物迅速麻醉,并打开窗户,让空气流通。 巴里坤县第二中学

稀盐酸配制标准操作规程规程

稀盐酸配制标准操作规程 1目的 制定稀盐酸配制标准操作程序和方法,确保稀盐酸配制过程的规范化和标准化。 2适用范围 本标准操作方法适用配制稀盐酸。 3依据 《中国药典》2010年版 4职责 提取操作人员按照本规程进行操作,提取工班长、QA人员、前提车间工艺员、前提车间主任、生产部负责对本标准操作规程的执行情况进行监督检查。5内容 5.1配制前的准备 5.1.1由操作人员检查配制现场应有“清场(清洁)合格”的状态标志,并在3天有效期限内,若超过有效期应重新进行清场。 5.1.2检查磅秤,是否正常,有检定证书,并在检定效期内。 5.1.3报工班长检查合格,并在渗漉记录上签字认可后,方可进行生产。生产时,换上“正在生产”状态标志。 5.1.4准备好洁净的盛装容器。 5.1.5由操作人员核对现存盐酸的品名、数量,并检查盐酸的澄明度。 5.1.6用盐酸配制成稀盐酸应提前备好足够的蒸馏水。 5.2操作法 5.2.1将盐酸配制成稀盐酸 配制比例 水:盐酸=4:1(每1kg盐酸应加水4kg稀释) 配制流程:准备洁净容器,加水4份,再加入盐酸1份,混合均匀。 5.2.2由于盐酸具有挥发性,配制后应及时密封,贴上状态标示,并填写稀盐酸配制使用台账。 5.3质量检查

由工班长对配好后稀盐酸的数量及性状进行复核检查。 5.4配制完毕后,操作人员应按《清场管理制度》及时清洁、清场,报工班长检查合格,发放“清场(清洁)合格”状态标志。 5.5注意事项 因盐酸是强酸,腐蚀性强,故生产操作中操作人员应做好安全防护措施,佩戴护目镜,口罩及塑胶手套,以免发生安全事故。 6.培训 前提车间操作人员、班/组长、工艺员、QA、物料员、车间主任及副主任。 7.相关文件 《一般生产区物料卫生管理规程》

盐酸滴定液配制和标定标准操作规程

盐酸滴定液配制和标定标准操作规程 目 的:制订盐酸滴定液配制和标定的标准操作规程。 适用范围:盐酸滴定液(1、0.5、0.2或0.1 mol/L )的配制和标定。 责 任:检验室人员按本规程操作,检验室主任监督本规程的实施。。 规 程: 1.仪器及用具 十万分之一分析天平、干燥箱、电炉、容量瓶、锥形瓶、刻度吸管、量筒、滴定管等。 2.试剂及试液 盐酸、蒸馏水、基准无水碳酸钠、甲基红-溴甲酚绿混合指示液。 3.配制 3.1盐酸滴定液(1 mol/L)取盐酸约90ml ,加水适量使成1000ml ,摇匀。 3.2盐酸滴定液(0.5 mol/L 、0.2 mol/L 或0.1 mol/L )照上法配制,但盐酸的取用量分别为45ml ,18ml 及9ml 。 4.标定 4.1盐酸滴定液(1 mol/L ):取在270-300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约1.5g ,精密称定,加水50ml 使溶解,加甲基红-溴甲酚绿混合指示液10滴,用本液滴定至溶液由绿色转变紫红色时,煮沸2分钟,冷却至室温,继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色。每1ml 的盐酸滴定液(1mol/L )相当于53.00mg 的 无水碳酸钠的取用量,算出本液的浓度,即得。 4.2盐酸滴定液(0.5 mol/L ): 照上法标定,但基准无水碳酸钠的取用量改为0.8g 。每1ml 的盐酸滴 定液(0.5mol/L )相当于26.50mg 的无水碳酸钠。 4.3盐酸滴定液(0.2 mol/L ): 照上法标定,但基准无水碳酸钠的取用量改为0.3g 。每1ml 的盐酸滴 定液(0.2 mol/L )相当于10.60mg 的无水碳酸钠。 4.4盐酸滴定液(0.1 mol/L ): 照上法标定,但基准无水碳酸钠的取用量改为0.15g 。每1ml 的盐酸滴 定液(0.1 mol/L )相当于5.30mg 的无水碳酸钠。 4.5如需用盐酸滴定液(0.05 mol/L 、0.02 mol/L 或0.01 mol/L )时,可取盐酸滴定液(1 mol/L 或0.1 mol/L ),加水稀释制成,必要时标定浓度。 5.结果计算: 323 2/CO Na HCl CO Na HCl T V W F ?= 式中:F 表示滴定液的校正因子。

临床实验室室内质控标准操作规程

临床实验室室内质控标准操作规程 (SOP文件) 一、目的:为了检测标本结果的准确、可靠、科学、有效,更 好的服务于临床。 二、使用范围:血液分析仪、尿液分析仪,血质控品、尿质控 品。 三、质控物的选择:尽量选择稳定性好、甁间差异小、无传染 性和基质、与检测样本一样、效期长的质控品。 四、浓度水平:中值 五、质控数量:足够量 六、质控频率:每天开机检测一次,每半年进行室间质量评价 活动的仪器进行对比一次。 七、质控规则:采用多规则质控方法:12s/13s/22s/R4S/10X 八、环境温度:室温15-20 九、质控操作 1.血质控品 (1)、质控品从冰箱取出,与室温平衡20-30分钟,将血质控品充分混匀。混匀方法:①质控品管口朝上置于操作者双手掌心,双手来回搓动10次,动作要连贯。②颠倒试管,试管口朝

下,将质控品样本置于操作者双手掌心,来回搓动10次。③重复①和②的步骤8次(共计2分钟左右)。④轻轻颠倒混匀1分钟左右。⑤管底朝上:确认管底无沉积物则说明己充分混匀。⑥要保证质控结果的准确性,首先要做好质控品的混匀操作,请特别注意混匀的操作方法。 (2)、立即上机,留存质控原始数据。 (3)、绘制质控图,每天的质控数据上质控图,根据先用的质控规则判断检查结果的有效性,如有失控发生,填写失控报告。 (4)、血液分析仪校准:在室内质控失控时进行仪器校准。方法:用原仪器厂家校准品进行校准,校准步骤:①将从冰箱 中取出校准物,室温放置15分钟,勿摇动。②在测定校准物前, 先测定两份正常人新鲜血液。③校准物瓶口朝上置双手掌心,双手来回搓动8次。④颠倒小瓶,使瓶口朝下置于双手掌心,来回 搓动8次。⑤重复3和4步骤8次(计2分钟左右)。⑥瓶底朝上, 确认瓶底无沉积物,说明己充分混匀。⑦用软纸拭净瓶口,轻轻打开瓶塞。⑧取瓶校准物在仪器上连续测定11次,放弃第一

实验室安全操作规程

实验室安全操作规程 安全管理管理程序 1. 目的 实验室是用水、用电及使用易燃易爆、有毒试剂集中的场所,必须制定严格管理程序,保证人身和财产的安全。 2. 适用范围 实验室及技术中心部门各个场所及设施。 3. 职责 3.1技术总监对安全全面负责。经常进行安全教育,组织安全检查,处理安全事故。 3.2公司安全员负责水、电线路、消防器材的配置和设施安全检查。 3.3技术中心技术员负责实验室的化学药品、水电气、门窗的安全。 3.4技术中心研发员负责试剂、药品,特别是有毒有害,易燃、易爆物质的管理。 4. 工作程序 4.1 安全操作规范 4.1.1在实验室进行实验的所有人员在工作中要严格按照操作规程,杜绝一切违章操作,发现异常情况立即停止工作,并及时登记报告。 4.1.2禁止用嘴、鼻直接接触试剂。使用易挥发、腐蚀性强、有毒物质必须带防护手套,并在通风橱内进行,中途不许离岗。 4.1.3在进行加热、加压、皂化、蒸馏等操作时,操作人员不得随意离开现场,若因故须暂时离开,必须委托他人照看或关闭电源。 4.1.4各种安全设施不许随意拆卸搬动、挪作他用,保证其完好及功能正常。 4.1.5操作人员要熟悉所使用的仪器设备性能和维护知识,熟悉水、电、燃气的使用常识及性能,遵守安全使用规则,精心操作。

4.2 有毒有害物质的管理 4.2.1化学试剂、药品中凡属易燃易爆,有毒(特别是剧毒物品)、易挥发产生有害气体的均应列为危险物品,严格分类,加强管理。 4.2.2危险物品、易燃易爆物品单独存放,有毒物品放入专用加锁铁柜内,注意 通风。 4.2.3实验室内不宜大量贮存有机溶剂,不许存放剧毒试剂。 4.2.4实验结束后,及时整理卫生,保证实验室的干净、整洁。 4.3 三废处理 4.3.1在实验过程中产生的废液中若具有腐蚀性和毒性。这类废液直接排放于下水管道将会污染环境,必须统一收集,进行有效的处理后再排放。 4.3.2实验室产生的废液贮存到一定数量后,集中处理。用于回收的废液的容器应分类盛装,禁止混合贮存,以免发生剧烈化学反应而造成事故。 4.3.3沾附有害物质的滤纸、称量纸、药棉等应与生活垃圾分开,单独处理。 4.4 安全管理 4.4.1安全工作人人有责,应杜绝人身伤亡事故,保证实验工作顺利进行。4.4.2经常检查安全隐患,防微杜渐,出现问题及时上报,迅速认真整改。 4.4.3实验室配备的安全设施和消防器材,要放在具有醒目标志的地方,不得挪动,有关人员应掌握消防器材的正确使用方法。公司安全员负责定期检查,及时更换过期、失效消防器材。 4.4.4由公司安全员定期检查电路,防止元器件老化、损坏造成事故。移动、检修带电设备应切断电源。电路(线)电器设备故障应由专人检修。 4.4.5实验室设不脱产安全负责人,负责本室水、电、气、门、窗的安全,部门负责人对本部门安全负责并经常督促检查。 4.4.6一旦发生事故,应立即采取有效措施,防止事态扩大,抢救伤亡人员,并保护现场,通知有关人员处理事故。

OOS实验室调查标准操作规程

OOS实验室调查标准操作规程 编号:CB-ZC-156-X00 制定:日期:年月日 审核:日期:年月日发布日期:年月日批准:日期:年月日实施日期:年月日 颁发部门: 质量保证部分发部门: 物料部、化验室 1. 目的:制订详尽的超标结果、超趋势结果调查操作规程,保证超标结果、超趋势结果得到全面分析和正确处理。 2. 范围:适用于本公司原辅料、包装材料、中间产品、成品及稳定性考察数据等出现的超标、超趋势检验结果。 3. 责任:化验室检验人员、化验室主任、QA主管及质量部负责人对本制度的实施负责。 4. 内容 4.1 职责的确定 4.1.1 化验室检验人员职责 4.1.1.1 化验室检验人员首先由责任得到准确的实验结果,并且必须警惕可能出现的问题。 4.1.1.2 如果系统适应性试验结果不令人满意,所有的数据必须判定为无效。 4.1.1.3 化验室检验人员经核对质量标准确认实验结果符合要求后,方可报废试验溶液。 4.1.1.4 发现OOS/OOT结果,及时保留原检测样品以及配制的溶液,并及时报告化验室主任(发现问题的第一个工作日内)。不得私自隐瞒或自行处理。 4.1.2 化验室主任 4.1.2.1 在接到检验人员报告后,必须客观、及时公正的进行实验室调查。可能性的实验室差错必须立即确认。 4.1.2.2 确保在调查过程中清晰、完整地记录每一步。 4.1.2.3 化验室主任应追踪调查进程并推动进展,如无特殊情况,应在两个工作日内开始原样复验(或再取样)操作,并保证全阶段实验室调查报告在20个工作日完成。 4.1.2.4 当实验室调查确认后,应告知和培训所有相关的实验者。 4.1.2.5 负责实验室调查的趋势分析与追踪,制定相应的改进措施。 4.1.3 QA主管职责

实验室仪器标准操作规程的编写规范

适用范围 本规范适用于本单位仪器设备标准操作规程的编写。 操作规程编写的基本要求 1格式要求 1.1文件名称及编码 1.1.1文件名称命名方式为“生产厂家(或者品牌)简称+型号+仪器名称+标准操作规程”,例如:安捷伦1200高效液相色谱仪标准操作规程。 1.1.2编码方式为“ZY+序号-5.5-2013”,例如:ZY12-5.5-2013。 1.1.3字体均为宋体小四,并加粗。 1.2实施日期 1.2.1实施日期格式参照“2013.01.01”,字体均为宋体小四,并加粗。 1.3规程内容格式 1.3.1全部字体均为宋体小四,行距为1.5倍,内容小标题加粗。规程中的层次划分及编号,一律采用阿拉伯数字,层次的划分,一般不超过4部分,且首行不缩进。 2内容要求 2.1依据仪器设备使用说明、培训教程和上级已发布的标准操作规程编写,且与有关规定相协调。 2.2文字表达应准确、简明、通俗易懂,逻辑严谨,避免产生不易或不同理解的可能。 2.3规程中的图样、表格、数值、公式和其他技术内容应正确无误。 2.4规程中的术语、符号、代号应统一,与有关标准相一致,同一术语应表达同

一概念。 3规程一般由以下部分构成 3.1操作程序 3.1.1操作前准备 3.1.1.1核对和确认所用设备与检测目的所要求的一致性。 3.1.1.2识别设备计量检定状态标志和技术状态标志应符合规定;需要时,应标明对设备进行检定(自验)与检定周期的要求。 3.1.1.3设备使用技术条件和工作环境条件的检查与确定。 3.1.1.4安全与劳动保护条件的检查与确认。 3.1.1.5设备正确停机状态的检查与确认。 3.1.1.6检查并加油、加水、加燃料(必要时),达到规定要求。 3.1.2开机与运行 3.1.2.1接通电源,观察指示信号的要求与规定。 3.1.2.2必要时,仪器的预热或预置的要求与规定。 3.1.2.3校准或调零的要求与规定。 3.1.2.4设备自身系统误差的测定。 3.1.2.5必要时(如长时间停机后初次运行时)开机空运行,观察运行的稳定性。 3.1.2.6对样品的要求与规定 3.1.2.7上样和运行的操作步骤,要求与规定 3.1.2.8读取检测数据的方法。 3.1.2.9必要时(如长期停机,初次运行)在首次运行前,采用非检验试样做试验,观察设备运行的稳定性、可靠性。 3.1.3停机与保养 3.1.3.1检测完毕,停机状态的要求与规定。 3.1.3.2切断电源,观察指示信号的要求与规定。

实验室安全操作规程

实验室安全操作规程 1、化验室安全操作规程 (1)实验前应做好准备,必须对所用药品与设备性能有充分的了解,熟悉每个具体操作中的安全注意事项。 (2)实验前必须熟悉实验室及其周围的环境和水龙头、电闸门的位置 (3)实验时应保持安静,思想要集中,遵守操作规程,切勿粗心大意,马马虎虎,更不准在实验室内开玩笑。 (4)严禁在实验室内饮食或煮食,或者把食具带劲实验室。 (5)每次实验完毕后应把手洗净,并检查水、电、气等安全措施完善后才能离开实验室(6)每个实验室都必须备有灭火器或砂土,并尽可能放在显眼的地方,能同事备有消防用的消防栓或水缸则更好 (7)实验室应保持空气流通,并设有专用的卫生箱,以供及时治疗的需要。常备药品有:红汞药水:供一般破伤使用 酒精:轻微的灼烧伤可用进过酒精的脱脂棉擦拭 5%硼酸氢钠溶液:受酸性物灼伤可用作冲洗 3%硼酸溶液:受碱性物灼伤可用作冲洗 还需要备有碘酒:紫药水及绷带和药棉 2、火和电的安全预防 (1)在使用中电气动力时,必须事先检查电开关,马达以及机械设备各部门是否安置妥善(2)开始工作时和停止工作时,必须将开关彻底扣严和拉下 (3)在更换保险丝时,要按负荷量,不得加大或以铜丝代替使用。 (4)严禁用湿手、湿布或铁柄毛刷等去清扫或擦拭电闸刀、点插销等,防止触电 (5)凡电气动力设备过热时,应立即停止运转 (6)定碳、定硫电炉或其他高温炉,其硅碳棒露出部分应设有安全罩,严禁将安置妥善的安全罩随意撤掉,以免发生触电事故。 (7)禁止洒水在电气设备和电线路上,以免漏电 (8)凡使用110伏以上电源装置,仪器的金属部分必须安装地线 (9)电热设备,例如马弗炉、烘箱、电炉和电热板等,所用电源的导线应经常注意检查其各接触处是否妥当,导线有无损坏和被腐蚀等 (10)马弗炉、烘箱等用电设备,使用时必须要有人负责照管,以防发生事故 (11)马弗炉需放在水泥等不燃物砌成的坚固台子上,不要靠近木板墙或木质门窗。(12)使用易燃物时,必须在距离火源较远的地方进行,绝不可靠近火源,尤其是乙醚着火的危险性极大,用时必须小心,用完后的剩余部分也应及时的存放到专门的安全地方。(13)绝不可以将氧气钢瓶存放在靠近电源的地方,并需防止强烈震动,气体出口活门处绝不可涂油和与有机物接触,以免发生爆炸的危险。 3、化学药品的安全预防 (1)距度星的药品,例如KCN、AS2O3等等,必须制定保管使用规则,并严格遵守,及时工作人员很少,也不可例外的有所忽视。这类药品不能与一般药品同样的存放和任意使用,即使用过后的余量已经很少也应及时送保管员及时查收,不应任意放在工作台上。 (2)内服有毒药品,如氰化物、铅化物、汞及汞化物、络酸盐、氧化砷钡盐等,应装在坚固的瓶中保管,禁止入口,与手接触用后要洗手。 (3)接触皮肤有毒的药品,例如氰化物、氟氢酸、溴水、过氯酸等,要装在严禁坚固的瓶中保管,使用时要特别小心,不得与皮肤接触。 (4)呼吸有毒药品(及有毒气体和蒸气)如氰化氢、氮的氧化物、氯化氢、硫化氢、溴、

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