蟾蜍实验1
双毁髓技术剑突取材、染色、观察
朱琪璋 121140083
一、实验目的
1.理解双毁髓技术的意义
2.观察软骨组织的形态
3.观察蟾蜍的泌尿及生殖系统
二、实验原理
1.双毁髓法麻醉蟾蜍：用金属毁髓针破坏蟾蜍的脑和脊髓，使蟾蜍处于一种麻醉状态，四肢瘫软，从而对蟾蜍进行解剖，取出泌尿及生殖系统，观察各个组成部分。
三、实验动物与器材
1.实验动物:活的蟾蜍一只／每人
2.实验试剂:亚甲基蓝试剂
3.实验器械:显微镜,解剖器具,毁髓针,剪刀,镊子，吸水纸，大头针
四、方法与步骤
1.左手食指与中指，无名指与小指分别夹着前肢，后肢，握住蛙体，拇指按住吻端使头部上下活动，两耳后腺间出现一道褶线，此线中点或用金属毁髓针沿头背中线向后移动触到一凹陷处，即枕骨大孔。拇指下压使头前俯与脊柱相连处凸起，同时将毁髓针由凹陷处垂直刺入1mm，再将针从枕骨大孔向前平行刺入颅腔并在颅腔内搅动，彻底捣毁脑组织使之成为“脊蛙”。
2.将蛙置于解剖盘上，腹部朝上，四肢伸展后用大头针固定。用镊子提起腹面皮肤，用剪刀剪开一小口，并从小口处向前将腹面皮肤剪开，至下颌前端。向后剪至两后肢基部之间，泄殖孔稍前方。然后将皮肤向两侧拉开，可见皮肤与皮下肌肉连接松散，两者之间较大间隙为皮下淋巴腔，翻看皮肤内测可见分布有丰富的血管。
3.用镊子提起腹部肌肉，用剪刀沿腹中线略偏左侧，剪开腹壁至肩带之剑突，然后向左，向右剪开，用剪刀剪取薄的剑突软骨组织，制成装片(用亚甲基蓝试剂染色效果更好），在显微镜下观察软骨组织细胞的形态。
4.小心剥离腹壁上的腹大静脉，再将腹壁向两侧分开，暴露心脏和其他器官，小心分开其他器官和系统，找到蟾蜍的泌尿和生殖系统，并用剪刀，镊子等将其完整的分离出来，放到解剖盘上，观察系统中各个器官的形态及位置，作好记录，并绘制好模拟图。
5.将蟾蜍处理掉，仪器清洁干净，整理实验台。
五、实验结果
1.剑突软骨组织细胞图
2.蟾蜍泌尿及生殖系统图
六、实验结论
1.双毁髓技术是经济而方便的麻醉蟾蜍的方法，可以让蟾蜍处于一种麻醉状态，从而在不受蟾蜍运动的情况下对蟾蜍进行解剖
2.雄性蟾蜍生殖系统由精巢，输精小管和输精管，米氏管组成。
精巢：有1对，位于肾脏腹面内侧，接近白色，长卵圆形。
输精小管和输精管:提起精巢，可见精巢内侧发出输精小管，进入肾脏前端。雄蛙的输尿管兼输精，故称精尿管。
米氏管;为退化的输卵管，体腔中细长而盘曲的白色管。
3.脂肪体：位于精巢前端的爪状形状的黄色指状体，是储存营养的结构。
七、问题解答
1.还有什么其他方法能处死蟾蜍?
答:①药物麻醉法:将蛙至于封闭容器内,用乙醚等药物麻醉处死。②敲击法：手持蛙后肢，用硬物猛击头部，使其脑震荡致死。③横断脊柱毁髓法：左手持蛙，右手用剪刀在两腋窝下横断脊柱，然后，在脊柱中呈白色的脊髓断面处向前插入探针破坏脑，再向后插入探针破坏脊髓。
2.用双毁髓法时要注意什么?
答：针尖刺入颅腔毁脑时,针的倾斜角度必须很小
3.观察剑突软骨组织细胞切片时为什么要用亚甲基蓝试剂染色？
答：用亚甲基蓝可以将细胞核染成蓝色，便于观察。
4.脂肪体的作用是什么？
脂肪体是营养物质中间代谢的场所，相当于人的肝脏。还有解毒，贮存，排泄等功能。
4.吴氏管与米氏管有什么区别？
当形成中肾时,原来的前肾管纵分为2管:一为中肾管,或称吴氏管。。吴氏管由肾脏的前端沿其腹面旋曲后通入尿殖窦，通过尿殖乳头上尿殖孔开口于泄殖腔。具有泌尿的功能
在中肾阶段，前肾导管纵裂为二，一根为中肾导管，各肾单位与中肾导管相连，在雄性动物有输精作用。另一根在雄性退化为米氏管（牟勒氏管），在雌性则为输卵管
5.毕氏器是什么，与蟾蜍性别的改变有什么关系？
答：毕氏器是位于生殖腺与脂肪体之间的肉红色圆形结构，相当于退化卵巢的残余部分，内含无数尚未分化或发育不全的卵细胞。在雄性蟾蜍体内，如果把精巢摘去，可导致毕氏器发育成具有产卵功能的卵巢，而原来存在的退化输卵管，这时在雌性激素的影响下，发展成为子宫。这种雄性转变为雌性的现象，在生物学上称为性逆转。
八、参考文献
1.《普通动物实验教程》赛道建、贾少波主编科学出版社，2010
2.《蛙体解剖学》周本湘主编科学出版社 1956
3.《普通动物学实验指导》刘凌云、郑光美主编高等教育出版社 2010
4.《脊椎动物比较解剖学实验指导》马克勤主编高等教育出版社 1986
植物生理学实验课程
《植物生理学实验》课程大纲 一、课程概述 课程名称（中文）：植物生理学实验 （英文）：Plant Physiology Experiments 课程编号：18241054 课程学分：0.8 课程总学时：24 课程性质：专业基础课 前修课程：植物学、生物化学、植物生理学 二、课程内容简介 植物生理学是农林院校各相关专业的重要学科基础课，是学习相关后续课程的必要前提，也是进行农业科学研究和指导农业生产的重要手段和依据。本实验课程紧密结合理论课学习内容，加深学生对理论知识的理解。掌握植物生理学的实验技术、基本原理以及研究过程对了解植物生理学的基本理论是非常重要的。本大纲体现了植物生理学最实用的技术方法。实验内容上和农业生产实践相结合，加强学生服务三农的能力。实验手段和方法上，注重传统、经典技术理论与现代新兴技术的结合，提高学生对新技术、新知识的理解和应用能力。 三、实验目标与要求 植物生理学实验的基本目标旨在培养各专业、各层次学生有关植物生理学方面的基本研究方法和技能，包括基本操作技能的训练、独立工作能力的培养、实事求是的科学工作态度和严谨的工作作风的建立。开设植物生理学实验课程，不仅可以使学生加深对植物生理学基本原理、基础知识的理解，而且对培养学生分析问题、解决问题的能力和严谨的科学态度以及提高科研能力等都具有十分重要的作用。 要求学生实验前必须预习实验指导和有关理论，明确实验目的、原理、预期结果，操作关键步骤及注意事项；实验时要严肃认真专心操作，注意观察实验过程中出现的现象和结果；及时将实验结果如实记录下来；实验结束后，根据实验结果进行科学分析，完成实验报告。 四、学时分配 植物生理学实验课学时分配 实验项目名称学时实验类别备注 植物组织水势的测定3学时验证性 叶绿体色素的提取及定量测定3学时验证性 植物的溶液培养及缺素症状观察3学时验证性 植物呼吸强度的测定3学时设计性 红外CO2分析仪法测定植物呼吸速率3学时设计性选修 植物生长物质生理效应的测定3学时验证性 植物种子生活力的快速测定3学时验证性
蟾蜍神经反射实验
实验三（1）期前收缩和代偿间歇 实验目的：学习在体蛙心跳曲线的记录方法，并通过对期前收缩和代偿间歇的观察，了解心肌兴奋性变化特点。 实验对象：蟾蜍 实验方法： 1. 用刺蛙针破坏蛙的脑和脊髓。暴露心脏。 2. 将换能器插头插入1通道，刺激输出电缆插入刺激输出插孔。 3. 在心舒期用蛙心夹夹住心尖约1mm，将蛙心夹上的连线系于张力换能器的着力点上，使拉直的系线与着力点所在的平面垂直，张力的大小，以描记出适宜的心跳曲线为宜，并注意使心脏收缩时曲线为上升支，舒张时为下降支；连接刺激电极，使两电极与心脏充分接触，再与刺激输出电缆相接。待描记出一段心跳曲线后，开始实验。 观察项目： 1. 记录正常心跳曲线，观察心室收缩和舒张曲线。 2. 分别在心收缩期和舒张早期给予刺激，观察曲线是否有变化。 3. 分别在心舒张中、晚期给予刺激，观察曲线是否有变化 结果：曲线；文字。 注意事项： 1. 破坏蛙的脑和脊髓要完全，以免肢体的活动干扰记录。 2. 实验过程中，应经常用任氏液湿润心脏。 3. 安放在心室上的刺激电极应避免短路。 4. 不要连续刺激心脏。 检查是否有刺激输出，可用刺激电极刺激蛙腹壁肌肉或大腿肌肉。 思考题： 1. 讨论期前收缩和代偿间歇产生的原因。 2. 心肌的有效不应期长有何生理意义？ 3. 当心率过速或过缓时，期前收缩后是否会出现代偿间歇？为什么？ 实验三（2）蟾蜍心兴奋传导系统分析 实验目的：利用结扎的方法，分析蛙心起搏点及兴奋传导的顺序。 实验对象：蟾蜍 实验方法： 1.暴露蛙心：用刺蛙针破坏蛙的脑和脊髓，将蛙背位固定于蛙板上，剪开胸部皮肤及胸骨，剪开心包膜，显露心脏。
实验报告：蟾蜍坐骨神经干动作电位引导及传导速度测定
一、蟾蜍坐骨神经干动作电位引导及传导速度测定 实验目的：加强理解兴奋传导的概念，掌握测定神经干动作电位传导速度的方法。熟悉仪器设备的操作。 实验原理：通过测出示波器上动作电位传导的距离和传导所需的时间，计算传导速度。 1.潜伏期法：测量第一个通道动作电位潜伏期的时间t，输入刺激电极到第一个引导 电极间的距离s，v=s/t。 2.潜峰法：测量两个通道的动作电位波峰间的时间差和两对引导电极间的距离，v= (s2-s1)/(t2-t1)。 实验步骤：1.制备坐骨神经-腓神经标本，放入神经屏蔽盒。 2.连接仪器，引导动作电位波形。 3.剪裁编辑图形，计算传导速度。 实验结果：1.图形 2.计算 S=10mm, t=0.33ms, v=10mm/0.33ms=33m/s 分析讨论： 1. 当刺激端和记录端离得较远时，引导的复合动作电位波形会发生什么改变，为什么？ 2.用什么方法可使复合动作电位传导速度的测量更准确？ 实验结论：神经干动作电位的传导速度为33m/s.
二、兴奋性不应期的测定 实验目的：了解测定不应期的方法和原理，并加深对兴奋性在兴奋过程中的变化过程的理解。 实验原理：神经纤维受到适宜刺激后，产生兴奋，即动作电位。一次兴奋产生后，必须经绝对不应期、相对不应期、超常期等变化后，兴奋性才能恢复。本实验通过生物电放大器引导并记录神经干复合动作电位，验证和测量动作电位的不应期。先给一个条件刺激，再用另一个检验刺激在兴奋的不同时期给予刺激，检查兴奋未阈值及所引起动作电位的幅度。 实验步骤： 1．制备坐骨神经-腓神经标本，并浸在任氏液中约5分钟，待其兴奋性稳定后实验。 2.连接仪器，设置实验参数，观察并测量神经干的不应期。 实验结果：（见图） 分析讨论： 1.为什么要先引导神经纤维的单向复合动作电位，然后再测量其兴奋性的不应期？ 2.神经干不应期与单根神经纤维的不应期有何不同？ 实验结论：兴奋性的不应期包括绝对不应期、相对不应期、超常期、低常期。
生理学实验设计
生 理 实 验 设 计 实验课题:筒箭毒对神经—肌肉接头处得兴奋传递得影响 实验成员:星期五下午第四实验室第二组 筒箭毒对神经—肌肉接头处兴奋传递得影响 实验假设 筒箭毒能与乙酰胆碱竞争神经肌接头处得ｎm受体,使肌肉松弛。 实验原理与目得 神经肌肉接头处得兴奋传递过程有三个重要得环节: 一就是钙离子促进神经轴突中得囊泡膜与接头前膜发生融合而破裂; 二就是囊泡中得乙酰胆碱释放到神经肌肉接头间隙; 三就是乙酰胆碱与接头后膜上得受体结合,引发终板电位。 乙酰胆碱(Aｃetylｃholine,ACh)就是一种重要得神经递质,就是连接每个运动神经元与骨骼肌之间得信使。如果AＣh得传递受阻,肌肉就不能收缩。箭毒就是美印第安人在猎箭头部涂抹得一种毒药,它能够占用并阻塞ACh 受体得位置,能竞争性阻断AＣh得去极化作用致使神经递质不能影响肌肉、能与ＡCh 竞争神经肌接头处得nm胆碱能受体,但不激动受体,因而使骨骼肌松弛、抗胆碱酯酶药可拮抗其肌肉松弛作用,新斯得明就是胆碱酯酶抑制剂,可通过抑制胆碱酯酶增减乙酰胆碱在肌接头间隙得浓度。故筒箭毒过量可用适量新斯得明解救。筒箭毒与乙酰胆碱竞争性结合乙酰胆碱受体,注射新斯得明后使突触间隙内得乙酰胆碱浓度升高
而使竞争性增强,故乙酰胆碱与受体接触增多,从而使肌无力症状减弱。 本实验得目得就是探索筒箭毒对神经-－肌接头处兴奋传递得影响极其相关机制;观察筒箭 毒得肌松作用,分析其作用点;了解新斯得明对抗筒箭毒得作用。 实验对象 大白鼠,体重2５0g以上 实验器材与药品 Powerlaｂ一套(主机,刺激器,张力换能器),手术器械一套,小动物人工呼吸机,气管插管,棉线,大头针,铁架台,注射器0.０0１g％筒箭毒碱,０。005g％新斯得明,２5％乌拉坦,１。5％普鲁卡因,生理盐水 实验方法 1、大鼠称重,麻醉;25%乌拉坦腹腔注射０。５mｌ／100g麻醉。然后仰卧固定于鼠手术床上,分离气管及颈外静脉,分别插入气管插管与静脉插管,准备好人工呼吸机。数分钟后翻正反射消失,即可进行实验; 2、分离坐骨神经;在髋关节后,坐骨结节内凹陷处切开皮肤,钝性分离肌肉,暴露一段坐骨神经,用浸有1、5%普鲁卡因得棉线围绕坐骨神经打一个结,在坐骨神经干上做传导阻滞麻醉,排除下行干扰; 3、分离腓神经;在外侧剪开皮肤,钝性分离肌肉组织,分离腓神经,神经穿线备用; 4、分离胫前肌;将大鼠两前肢固定在手术台(仰卧),从后置踝关节正前方向剪开小腿皮肤,剪断踝关节前部韧带,分离胫前肌肌腱,沿胫骨分离胫前肌(注意不要损伤血管),在踝部得胫前肌肌腱处扎线,与结扎线远端切断肌腱; 5、安装并设定powｅrlab记录肌张力得cｈarｔ设定文件;调定刺肉毒碱对神经肌肉接头处处兴奋传递得影响 6、连接仪器;手术操作完成后,将胫前肌与pｏwerlab得张力换能器向连接,腓神经处安放刺激电极。最适负荷设定为１０ｇ左右。稳定一段时间后,于给药前记录一段正常得肌肉收缩曲线; 7. 缓慢静脉注射0。001%筒箭毒碱0.1ml／10０g,从仪器上观察肌肉收缩曲线得变化情况; 8。待肌肉收缩曲线再次稳定或完全消失后,停止刺激,同时缓慢静脉注射0。005%新斯得明0、１5mｌ／1０0g,观察肌肉收缩曲线得变化情况、 预期结果 注射筒箭毒后肌肉收缩曲线幅度变小甚至消失,即肌肉处于肌无力状态,注射新斯得明后肌肉收缩曲线又基本恢复正常,即肌肉恢复正常收缩状态; 结果分析 从神经传来得兴奋,通过神经－肌肉接头传递给肌纤维膜,就是以化学递质乙酰胆碱为中介进行得,其全过程可分为:(1)接头前过程、(2)神经递质在间隙得扩散。(3)接头后过程、 如果就是筒箭毒作用于突触前膜,即不能释放乙酰胆碱,那么无论就是否有新斯得明,后膜中均无乙酰胆碱,所以在注射新斯得明后仍然就是肌无力状态,即不会出现预期结果; 如果就是筒箭毒作用于突触间隙,即与突触前膜释放得乙酰胆碱结合,抑制其发挥作用,那么无论就是否有新斯得明,后膜中均无可发挥肉毒碱对神经肌肉接头处处兴奋传递得影响作用得乙酰胆碱,所以在注射新斯得明后仍然就是肌无力状态,即不会出现预期结果; 而如果就是筒箭毒作用于突触后膜,即与乙酰胆碱竞争性结合乙酰胆碱受体,注射新斯得明后使突触间隙内得乙酰胆碱浓度升高而使其竞争性增强,使乙酰胆碱与受体接触增多,从而使肌无力症状减弱,使肌肉收缩曲线幅度增强,即会出现预期结果; 综上所述,假设成立。 注意事项
蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度和兴奋性不应期的测定实验报告
实验二蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度和兴奋性不应期的测定 一、蟾蜍坐骨神经干动作电位引导及传导速度测定 实验目的：加强理解兴奋传导的概念，掌握测定神经干动作电位传导速度的方法。 熟悉仪器设备的操作。 实验原理：通过测出示波器上动作电位传导的距离和传导所需的时间，计算传导速度，可以了解神经的兴奋状态。 1.潜伏期法：测量第一个通道动作电位潜伏期的时间t，输入刺激电极到第一个引导电极间的距离s，v=s/t。 2.潜峰法：测量两个通道的动作电位波峰间的时间差和两对引导电极间的距离，v=(s2-s1)/(t2-t1)。 实验步骤：1.制备坐骨神经-腓神经标本，放入神经屏蔽盒。 2.连接仪器，引导动作电位波形。 3.剪裁编辑图形，计算传导速度。 实验结果：1.（见图） 2.计算 S=10mm,t=0.33ms,v=10mm/0.33ms=33m/s 分析讨论： 1.我们通过对潜伏期法和潜峰法测定结果的比较，结合神经干的特性进行分析：动作电位的起点本质是神经干中传导速度最快的一类神经纤维传导兴奋到达记录点引起的，潜伏期法测量的速度本质是此类神经纤维的传导速度。而潜峰法的形成本质是各种神经纤维兴奋相互叠加后最强的部分。如果采用潜峰法
测量，由于“迁延效应”代表的时间不够准确，不能代表神经干的传导速度，故应该采用潜伏期测量才更准确。 2,.兴奋以局部电流的方式沿着神经干表面传导,兴奋传播过程中造成引导电极下电位改变,故可记录到双相动作电位.通过两对引导电极可观察到兴奋由一对引导电极下传至另一对引导电极下所需时间,根据兴奋传播的距离和所需时间即可计算出传导速度. 实验结论：本实验中测出神经干动作电位的传导速度为33m/s。由实验可知，神经纤维在静息状态下受到有效刺激可产生动作电位，同一条神经干中不同的神经纤维兴奋性不完全相同，且在一次兴奋后兴奋性发生改变，兴奋以一定的速度在神经干表面传导，神经兴奋的传导依赖于神经纤维的完整性。 二、兴奋性不应期的测定 实验目的：了解测定不应期的方法和原理，并加深对兴奋性在兴奋过程中的变化过程的理解。 实验原理：神经纤维受到适宜刺激后，产生兴奋，即动作电位。一次兴奋产生后，必须经绝对不应期、相对不应期、超常期等变化后，兴奋性才能恢复。本实验中先给一个条件刺激，再用另一个检验刺激在兴奋的不同时期给予刺 激，检查神经对检验性刺激反应的兴奋阈值及所引起动作电位的幅度。即可观察到神经组织兴奋性的变化过程。 实验步骤： 1．制备坐骨神经-腓神经标本，并浸在任氏液中，待其兴奋性稳定后实验。 2.连接仪器，设置实验参数，观察并测量神经干的不应期。 实验结果：（见图） 分析讨论：
生理实验报告蟾蜍骨骼肌生理
人体解剖及动物生理学实验报告 实验名称蟾蜍骨骼肌生理 学号 系别 组别 同组 实验室温度 实验日期2015年5月7日
一、实验题目 蟾蜍骨骼肌生理 A蟾蜍腓肠肌刺激强度与骨骼肌收缩反应的关系 B蟾蜍骨骼肌单个肌肉收缩分析（潜伏期、收缩期和舒期的确定） C蟾蜍腓肠肌刺激频度与骨骼肌收缩的关系 二、实验目的 确定蟾蜍骨骼肌收缩的 （1）阈水平和最大收缩以及刺激强度与肌肉收缩之间的关系曲线 （2）收缩的三个时期：潜伏期、缩短期、舒期 （3）刺激频度与肌肉收缩的关系 三、实验方法 1、蟾蜍坐骨神经-骨骼肌标本的制作及电路连接 1)双毁髓处死蟾蜍后，剥去皮肤，暴露腰骶丛神经，游离大腿肌肉之间的做个神 经及小腿的腓肠肌，注意不要将胫神经与腓神经分离。神经端结扎后，剪去无 关分支后游离至膝关节处；肌肉端结扎在肌腱上，将腓神经也一起结扎，结扎 线留长。保留膝关节，剪去腿骨，将标本离体。注意保持神经肌肉湿润。 2)用大头钉将标本的膝关节固定于标本盒R2和R3两记录电极之间的石蜡凹槽， 保证神经、肌肉与电极充分接触。神经中枢端接触刺激电极S1和S2，肌肉接 触记录电极R3和R4，之间接触接地电极。 3)肌肉的结扎线从标本盒中穿出，连接力换能器。注意连线尽量短，以减小阻力。 在实验过程中，注意标本的休息：将神经搭在肌肉上，用浸湿了任氏液的棉花 覆盖神经肌肉，保持湿润。但标本盒避免有过多的液体，防止短路。 4)换能器插头接RM6240通道1。刺激输出线两夹子分别连接标本盒的刺激电极 S1和S2，插头接刺激输出插口。如果需要记录肌肉的动作电位，则在肌肉所 搭置的记录电极上连接输入导线，注意接地，插头接通道2。 2、蟾蜍骨骼肌生理各项数据测定 A蟾蜍腓肠肌刺激强度和骨骼肌收缩反应的关系
坐骨神经腓肠肌实验--教案
课程名称：坐骨神经腓肠肌实验教研室：生理学教研室任课教师：朱亮授课章节：细胞的基本功能授课专业和年级：医疗06级 授课学时：4学时授课时间： 坐骨神经腓肠肌实验 一、坐骨神经腓肠肌标本制备 【实验原理与目的】 蛙类的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似，而其离体组织所需的生活条件比较简单，易于控制和掌握。因此在实验中常用蟾蜍或蛙的坐骨神经腓肠肌标本来观察兴奋和兴奋性、刺激与肌肉收缩等基本生理现象和过程。所制备坐骨神经腓肠肌标本是生理学实验中必须掌握的一项基本技能。 本实验目的在于学习破坏蛙类脑脊髓法，掌握坐骨神经腓肠肌标本的制备技术、并获得兴奋性良好的标本，为以后有关实验打下基础。 【实验对象】 蛙或蟾蜍。 【实验器材和药品】 1．器械蛙类动物手术器械一套，包括普通剪刀、小手术剪刀、镊子、探针、锌铜弓、玻璃分针、蛙板、玻璃板、固定针等。 2．药品任氏液。 3．其它瓷盘、培养皿、小烧杯、棉花、棉线、纱布、滴管等。 【实验步骤和观察指标】 1.破坏脑和脊髓取蟾蜍一只，用布包裹蟾蜍四肢躯干露出头部，用左手握住蟾蜍，并用食指按压头部前端，拇指按压背部，使头部前俯；右手持金属探针由头前端沿中线向尾方划触、触及凹陷处即枕骨大孔的所在。将探针由凹陷处垂直刺入，刺破皮肤即入枕骨大孔，这时将探针尖端转向头方，向前探入颅腔内，然后向各方搅动探针，以捣毁脑组织。如探针确在颅腔内，术者可感觉出针在四面皆壁的腔内。脑组织捣毁后，将探针退出；再由枕骨大孔刺入，并转向尾方，与脊髓平行刺入脊管，以破坏脊髓。脑和脊髓是否完全破坏，可检查动物四肢肌肉的紧张性是否完全消失。拔出探针后，同一干棉球压迫针孔，以止其出血（见图3-1-1-1）。另一方法是去脑后再捣毁脊髓。
实验13蟾蜍心室期前收缩和代偿间歇
实验13 蟾蜍心室期前收缩和代偿间歇 浙江中医药大学第二临床医学院 【目的】 1.学习蛙在体心脏舒缩活动和心电图记录方法和技术。 2.通过在心脏活动的不同时期给予刺激，观察心肌兴奋性阶段性变化的特征。 【原理】 心肌每兴奋一次，其兴奋性就发生一次周期性的变化。心肌兴奋性的特点在于其有效不应期特别长，约相当于整个收缩期和舒张早期。因此，在心脏的收缩期和舒张早期内，任何刺激均不能引起心肌兴奋而收缩，但在舒张早期以后，给予一次较强的阈上刺激就可以在正常节律性兴奋到达以前，产生一次提前出现的兴奋和收缩，称之为期前兴奋和期前收缩。同理，期前兴奋亦有不应期，因此，如果下一次正常的窦性节律性兴奋到达时正好落在期前兴奋的有效不应期内，便不能引起心肌兴奋和收缩，这样在期前收缩之后就会出现一个较长的舒张期，这就是代偿间歇。 【材料】 蟾蜍或蛙；RM6240多道生理信号采集处理系统，刺激电极，心电图引导电极，张力换能器。 【方法】 1．系统连接和仪器参数设置张力换能器输出线接微机生物信号采集处理系统的第1通道，心电图引导电极导联线接2通道。系统参数设置(RM6240系统)：点击“实验”菜单，选择自定义实验项目”菜单中的“期前收缩—代偿间歇”。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：1通道时间常数为直流、滤波频率10Hz、灵敏度3g；2通道时间常数 0.2～1s、滤波频率100Hz、灵敏度1mV；采样频率 800Hz，扫描速度 1s/div。单刺激模式，阈上刺激强度（2～5V），刺激波宽5ms。 2．蟾蜍毁脑和脊髓，将其仰卧固定于蛙板上。从剑突下将胸部皮肤向上剪开（或剪掉），然后剪掉胸骨，打开心包，暴露心脏。 3．将心电图电极（6号注射针头）插入蟾蜍右前肢、左下肢和右下肢皮下引导Ⅱ导联心电图。张力换能器连线上的蛙心夹在心室舒张期夹住心尖记录心搏曲线。固定刺激电极，使其两极与心室相接触。 4.实验观察 4.1描记正常蛙心的搏动曲线和ECG，分清曲线的收缩相、舒张相、ECG各波。 4.2用中等强度的单个阈上刺激分别在心室收缩期、舒张早期和心室舒张早期之后刺激心室，连续记录心搏曲线和ECG。观察有无期前收缩出现，期前收缩出现后是否出现代偿间歇。
蛙心起搏点观察实验报告
蛙心起搏点观察实验报告 篇一：蛙心起搏点 蛙心起搏点 实验报告 20081217 01:15:25 阅读175 评论0 字号：大中小 【实验目的】 1 了解在体内观察器官生理特点的方法，并确定蛙心起搏点及传导途径 2 理解内环境稳态的重要性 【实验原理】 哺乳动物心脏的特殊传导系统具有自动节律性，但各部分的节律性高低不同。正常情况下，窦房结的自律性最高，它自动产生的兴奋向外扩布，依次激动心房肌、房室交界、房室束、心室内传导组织和心室肌，引起整个心脏兴奋和收缩。由于窦房结是主导整个心脏兴奋和跳动的正常部分，故称之为正常起搏点；其他部位自律组织受窦房结的“抢先占领或超速驱动压抑”控制，并不表现出它们自身的自动节律性，只是起着兴奋传导作用，故称之为潜在起搏点。一旦窦房结的兴奋不能下传时，则潜在起搏点可以自动发 生兴奋，是心房或心室依从节律性最高部位的兴奋节律而跳动。
两栖类动物心脏的正常起搏点是静脉窦，在正常情况下，其 心房和心室在静脉窦冲动作用下依序搏动，只有当正常起搏点的冲动受阻时，“超速压抑”解除，心脏的自律性次之的部位才可能显示其自律性。 本实验利用结扎阻断传导通路的方法来确定蛙心起搏点和传导途径。 【实验对象】蟾蜍或蛙 【实验器材和药物】蛙板、蛙类手术器械、刺蛙针；线、小烧杯、滴管、任氏液 【实验方法和步骤】 1 暴露心脏蟾蜍或蛙一只，用刺蛙针破坏脑和脊髓后，将其仰卧固定在蛙板上。用剪刀剪开胸骨表面皮肤并沿中线剪开胸骨，可见心脏包在心包中，仔细剪开心包，暴露出心脏，在窦房沟、房室沟处各预 置一段手术用的丝线 2 观察正常心跳频率 观察它们的跳动次序并计数它们在单位时间内的跳动次数 3 结扎窦房沟，并观察心跳的变化 找到静脉窦和心房交界的半月行白线（窦房沟）。然后将预先穿入的丝线沿着
生理学设计性实验
不同pH值对牛蛙离体心脏收缩活动的影响 2008231144 赖泽红生科一班 摘要：本实验主要是采用斯氏蛙心插管法，在保持灌流液高度恒定的情况下，分别以不同pH值的溶液对牛蛙离体心脏进行灌流，经张力换能器、RM6240D型生物信号采集处理系统与处理系统记录心肌的活动过程，探讨不同pH对离体心脏活动的影响，以揭示酸碱度与心脏收缩活动的关系。 关键词：pH值；离体心脏；收缩活动 生理状态下，血液pH值保持在7.35—7.45，这是保证细胞惊醒正常代谢和机能活动的基本条件。在生命活动的过程中，体内不断生成酸性或碱性产物，机体通过多方面的调解活动，使血液pH值保持在正常范围内。然而，一旦机体酸碱调节失衡，会导致体内酸中毒或碱中毒，对机体造成影响。心脏直接与血液接触，心肌细胞的收缩活动容易受血液pH值的影响。本实验通过用不同PH值的灌流液灌流牛蛙离体心脏，观察其对心脏某些功能的影响，以揭示酸碱度与心脏收缩活动的关系，用离体牛蛙心脏，排除了在体时的神经体液干扰，故实验结果更为可靠。 一、实验材料： 1、实验仪器：RM6240D型生物信号采集处理系统、张力换能器、pH酸度计。 2、常用器械：蛙板或蜡盘，蛙心夹、蛙心套管，滴管，培养皿或小烧杯，玻璃板、容量瓶，移液管、量筒、污物缸，纱布，棉线，
常用手术器械。 3、药品：任氏液， HCL溶液，NaOH溶液。 4、实验动物：牛蛙2-4只（雌雄不限）。 二、实验步骤与方法 1、药品配制 （1）任氏液配制 母液及容量成分 NaCl、 KCl 、CaCl2 、NaH2PO4 、NaHCO3 、葡萄糖、蒸馏水，注: 表内各成分除葡萄糖以 g 为单位外，均以 ml 为单位. 任氏液的配制方法：一般先将各成分分别配制成一定浓度的母液，而后按所要的容量混合。需要注意的是：CaCl2 应在其他母液混合并加入蒸馏水后，再边搅拌边加入，以防钙盐生成。另外，葡萄糖应在用前临时加入，否则不宜久置。两栖类的为PH6.5-7.0 （2）不同PH浓度的任氏液配制。 不同PH值灌流液的配制。首先，校整酸度计。先将酸度计“PH-mv”开关拨到位置。打开电源开关，指示灯亮，预热30分钟。取下放蒸馏水的小烧杯，并用滤纸轻轻地吸去玻璃电极上多余水珠，在小烧杯内放入选择好的已知的PH值准确的缓冲溶液。将电极浸入。根据标准缓冲液的PH，将量程开关拧到 0～7 或 7～14 处。调节控温钮指示的温度与室温相同，调节零点，使指针在PH为7.0处。轻轻按下或稍许转动读数开关使开关卡住。调节定位旋钮，使指针恰好指在标准缓冲溶液的PH值处。放开读数开关，重复操作，直到数
人体机能 蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度和兴奋性不应期的测定实验报告
神经干双向动作电位的引导传导速度及不应期的测定作者：2011222681宋利婷组员：2011222702曾惜2011222709张芮2011222698杨袁虹 一、实验对象：蟾蜍 二、实验目的：观察蟾蜍坐骨神经动作电位的基本波形，掌握坐骨神经制备方法与引导动作电位的方法，理解与刺激和最大刺激强度的概念测定潜伏期时程和波幅，学会通过潜伏期法和潜峰法测定神经冲动的传导速度，通过测定神经干不应期理解兴奋性在兴奋过程中的变化过程。 三、实验内容 图一：阈刺激和最大刺激强度的测定 由上图可知，以0.100v为起始刺激强度，在0.100到0.300v的刺激时，不产生动作电位，
逐渐增大强度，一直到当刺激强度为0.4V时，刚好引产生动作电位，即阈刺激为0.4V，当刺激强度达到1.4V后，即使再增加刺激强度，动作电位的幅也不再改变，即最大（适）刺激强度为1.4V. 图二：潜伏期波幅时程及速度的测定 由在最适刺激强度时动作电位原图上进行区间测量可知，潜伏期为0.60ms，时程t1为2.84ms ，波幅为2.72mV，输入刺激电极到第一个引导电极间距离s＝1.3cm,以传导速度和根据速度的公式计算传导速度v1=s/t1,求得的速度v1=45m/s 图三：潜峰法测量速度
如图是通过测量两个通道的动作电位波峰间的时间差，为（t1-t2）,测量并输入两对引导电极间的距离为（s2-s1），s2=4.7cm,s1=3.8cm,t1-t2=0.28ms,由传导速度和用公式计算传导速度：v2=(s2-s1)/(t1-t2),v2=321m/s 图四：绝对不应期和相对不应期的测定
蟾蜍心脏传导系试验报告
一．实验目的练习双毁髓法，熟练掌握双毁髓技术。1.熟练使用手术器械。尤其是手术剪。2. 辨认和心脏相连的血管，并学会画和心脏相连的血管的图。 3.观察蟾蜍的心脏，学习双穿线手法使心脏游离，辨认与心脏相连的血管，心脏传导系、起搏点 4.，斯氏结扎-2。分析，了解并操作斯氏结扎-1 5.学会心脏搏跳的技术方法。 6.观察蟾蜍的心血管系统，了解两栖类心脏的构造、循环途径及其特点 二、实验原理心脏的特殊传导系统内含有自律细胞，因此具有自动节律性，但各部分的1.，自律性自律性高低不同。两栖类动物心搏起点是静脉窦（哺乳动物是窦房结）也以静脉窦（窦房结）为最高。正常的心脏搏动每次都由静脉窦（窦房结）发出冲动，沿心房传至房室结，再由房室结经房室束传至心室肌，引起心肌收缩。如给心搏起点一个刺激，则心跳频率发生变化；如阻断心搏冲动的正常传导，则出现不同的收缩障碍。原来由静脉窦传导的自律性收缩斯氏结扎是阻碍了心脏传导系，斯氏第一结扎以后，2.由于心房心室的自律性细胞一开始都是有静舒张被切断，致使心房成为其收缩舒张的开始。脉窦传导，所以刚开始结扎会有5~30min的停跳，之后自律性恢复，开始跳动。 A处为斯氏第一次结扎部位，B为斯氏第二次结扎部位 三、动物与器材 实验材料：蟾蜍一只 实验设备：手术器械：解剖盘、大头针、骨剪、直头解剖剪、眼科剪、镊子、眼科镊、动物探针，吸水纸 四．方法与步骤 1.双毁髓麻醉蟾蜍：左手食指与中指、无名指与小指分别夹着前肢、后肢，握住蛙体，拇指按住吻端使头部上下活动，两耳后腺间出现一道褶线，此线中点或用金属毁髓针沿头背中线向后移动触到一凹陷处，即枕骨大孔。拇指下压使头前俯与脊柱相连处凸起，同时将毁髓针由凹陷处垂直刺入1mm，再将针从枕骨大孔向前平行刺入颅腔并在颅腔内搅动，彻底捣毁脑组织使之成为“脊蛙”。 2.用镊子提起胸部中央的皮肤剪一小口，然后向左右两侧肩关节连接线处剪掉。用镊子捏起剑状软骨，在腹肌上剪一小口（注意不要伤及内脏器官），沿皮肤切开的位置剪下一块三角形肌肉，即可看到心包内跳动的心脏。小心用镊子夹起心包膜并剪开，暴露心脏。． 3.实验观察 （1）认识蟾蜍心各部分的构造和名称 自心脏腹面认识心室、心房、动脉圆锥（动脉球）和主动脉，然后用镊子把蟾蜍
生理学实验设计
实验设计影响骨骼肌收缩的因素 [实验原理] 蛙类的一些生理活动规律与温血动物相似，而维持其离体组织正常活动所需的理化条件较简单，易于建立和控制。坐骨神经和腓肠肌是可兴奋组织，将其置于人工配置的任氏液中，兴奋性在几小时内可保持不变。因此在实验中常用蛙类的坐骨神经-腓肠肌标本来观察和研究兴奋、兴奋性、刺激与肌肉收缩等基本的生理现象和过程。 神经受到一次阈刺激或阈上刺激，先产生一次动作电位，通过神经-肌肉接头处兴奋的传递，引起受支配的骨骼肌产生动作电位，然后通过兴奋-收缩耦联机制引起骨骼肌收缩。在一定范围内，随着刺激强度的增加，骨骼肌的收缩强度也随着增加。 整块骨骼肌或单个肌细胞受到一次短暂而有效的刺激时，可产生一次机械收缩，称为单收缩。若给肌肉相继两个有效刺激，且使两个刺激的间隔时间小于该肌肉单收缩的总时程。则引起肌肉的收缩可以总和起来，出现一连续的收缩，称为复合收缩。当骨骼肌受一串有效刺激时，若刺激频率较低，则肌肉的反应表现为一连串单收缩，若刺激频率逐渐增加，肌肉收缩反应可表现为不完全强直收缩和完全强直收缩 [实验对象] 蟾蜍或蛙。 [实验药品与器材] 青蛙或蟾蜍、常用手术器械（包括粗剪刀、手术剪、手术镊、眼科剪、眼科镊、金属探针、玻璃分针）、固定针、锌铜弓、蜡盘、培养皿、污物缸、棉线、纱布、滴管、任氏液 RM6240计算机采集系统、JZ100型张力换能器(50 g)、支架、一维位移微调器、肌槽、双针型露丝电极 [实验方法与步骤] 1. 制备蛙的坐骨神经—腓肠肌标本 1) 毁脑和脊髓 取青蛙一只，用纱布包裹青蛙的四肢和躯干，露出头部。用左手握住青蛙，并用食指压其头部前端使其尽量前俯，拇指按压背部，使头部前俯；右手持金属探针由头前端沿中线向尾方划触，触及凹陷处即枕骨大孔处转向头方，向前探入颅腔内，然后向各个方向搅动探针，以捣毁脑组织。如探针确实在颅腔内，可感觉出针在四面皆壁的腔内。脑组织捣毁后，将探针退出，再由枕骨大孔刺入,并转向尾方,与脊髓平行刺入椎管,以确坏脊髓，要确定脑和脊髓是否完全破坏，可检查动物四肢肌肉的紧张性是否完全消失。 2) 剥制后肢标本 自青蛙的两侧腋部以下完全剥离皮肤（注意：可事先剪去尾椎末端及汇殖腔附近的皮肤，使剥离更容易）。而后倒提蛙腿，使其头部向下，用手术剪横向剪开腹部肌肉，看清脊神经后,用粗剪刀剪断脊柱(注意铁损伤坐骨神经)。把标本浸泡于盛有任氏液的培养皿中，将手及用过的剪刀、镊子等全部手术器械洗净，再继续下面的步骤。
蟾蜍的消化系统生物技术实验报告
蟾蜍的消化系统生物技术实验报告 蟾蜍的消化系统生物技术实验报告1，观察蟾蜍肠系膜毛细血管 2，观察蟾蜍的消化系统 1，蟾蜍的正确握拿方法，动物探针的正确使用 2，蟾蜍的“双毁髓”手术技术 3，两栖类动物的解剖技术及手术剪的使用 实验动物：雄性蟾蜍一只 实验器械：显微镜，手术剪，骨剪，镊子，吸水纸，大头针，解剖针，解剖盘，有孔的蜡板。 1，左手食指与中指、无名指与小指分别夹着前肢、后肢，握住蟾蜍，拇指按住吻端使头部上下活动，两耳后腺间出现一道褶线，此线中点或用金属毁髓针沿头背中线向后移动触到一凹陷处，即枕骨大孔。拇指下压使头前俯与脊柱相连处凸起，同时将毁髓针由凹陷处垂直刺入~1mm，再将针从枕骨大孔向前平行刺入颅腔并在颅腔内搅动捣毁脑，然后再将毁髓针撤回至枕骨大孔，反向插入脊椎管破坏脊髓，检查蟾蜍四肢肌肉完全松驰后处死成功 2，将蟾蜍置于有孔的蛙板上，腹部朝上，四肢伸展后用大头针固定。左手用镊子提起腹部皮肤，用手术剪前端1/3处剪开一小口，并从小口处向前将腹部皮肤剪开至下颚前端。向后剪至两后肢基部之间，泄殖孔稍前方再将皮肤向两
侧拉开。 3，用镊子提起腹部肌肉，用剪刀沿腹部中线剪开腹壁，拉出一段小肠，用大头针将肠系膜展开并固定在有孔的蜡板上。将肠系膜置于显微镜下观察，找到毛细血管，观察血液的流动并拍摄照片。 4，向两侧拉开蟾蜍的腹部肌肉找到蟾蜍的消化系统，小心地用剪刀和手术剪将其分离，置于解剖盘上并拍摄图片。 5，处理掉蟾蜍，洗净解剖盘和实验器械，将显微镜收好放入柜中。 1， 2， 1，毛细血管是体内分布最广、管壁最薄、口径最小的血管，仅能容纳1个红细胞通过。其管壁主要由一层内皮细胞构成，在内皮外面有一薄层结缔组织。毛细血管血流很慢，通透性大。这些特点有利于血液与组织之间充分进行物质交换。 2，蟾蜍的肝脏在体腔的前部，呈红棕色，不完全地环绕着心包，一般蛙类至少有中，右，左三叶。在中叶的腹面靠近右叶的一边有一颗黄绿色或墨绿色椭圆形的胆囊，具有导管引入胆总管而与小肠相通。 3，消化道的各个部分，在外形和构造上，都有很多变
生理学实验
实验三：影响神经冲动传导的因素观察 实验目的： 1．继续学习蟾蜍坐骨神经-腓神经标本制备方法，掌握坐骨神经标本的制备方法。 2．引导蟾蜍坐骨神经动作电位，并观察其基本波形（包括双相和单相动作电位）。 3．学习和掌握神经干动作电位传导速度测定的原理和方法。 4．设计改变细胞外液的某些因素会对动作电位在神经干上传导的速度产生何种影响？ 实验原理： 蛙类的一些基本生命活动和生理功能与恒温动物相似，若将蛙的神经-肌肉标本放在任氏液中，其兴奋性在几个小时内可保持不变。若给神经或肌肉一次适宜刺激，可在神经和肌肉上产生一个动作电位，肉眼可看到肌肉收缩和舒张一次，表明神经和肌肉产生了一次兴奋。在生理学实验中常利用 如果将两个引导电极置于正常完整的神经干表面，当神经干的一端兴奋之后，兴奋波会先后通过两个引导电极(r1r1’,图5坐骨神经干包括多种类型的神经纤维成分，因此记录到的动作电位是它们电位变化的总和，因此神经干动作电位是一种复合动作电位。由于各类神经纤维的兴奋阈值各不相同，所以记录到的动作电位幅值在一定范围内可随刺激强度的变化而改变，这一点不同于单根神经纤维的动作电位。
动作电位在神经纤维上的传导有一定的速度。不同类型的神经纤维动作电位传导速度各不相同。蛙类坐骨神经干中以Aα类纤维为主，传导速度(V)大约为35～40 m/s。测-腓肠肌标本的制备，但无需保留股骨和腓肠肌。坐骨神经干要求尽可能长些。在脊椎附近将神经主干结扎，剪断。提起线头剪去神经干的所有分支和结缔组织，到达腘窝后，可继续分离出腓神经或胫神经，在靠近趾部剪断神经。将制备好的神经标本浸泡在任氏液中数分钟，待其兴奋性稳定后开始实验。 3．仪器及标本的连结 （1）用浸有任氏液的棉球擦拭神经标本屏蔽盒上的电极，标本盒内放置一块湿润的滤纸片，以防标本干燥。用滤纸片吸去标本上过多的任氏液，将其平搭在屏蔽盒的刺激电极、接地电极和引导电极上，并且使其近中端置于刺激电极上，远中，频率8～16 Hz，波宽0.1～0.2 ms，强度根据标本兴奋性而定，由小增大(一般可选2V)。示波器灵敏度0.1～0.5 V/cm，扫描速度1～2 ms/cm。外触发输入接刺激器的触发输出端。触发选择置于外触发同步。开启电子刺激器时，调节触发电平旋钮，使示波器扫描与刺激输出同步。将扫描线调至荧光屏中间。 （3）若使用计算机生物信号采集处理系统进行实验则参照图5.5-2连接仪器。两对记录电极分别连接到CH1、CH2通道，刺激电极连接到刺激输出。打开计算机，启动生物信号采集处理系统，进入“神经干动作电位”模拟实验菜单。 4．观测和测定双相值时的阈刺激。 （2）增大刺激强度的过程中，伪迹和动作电位均随之加大，但当强度加大到某一程度后(此刺激强度称为最大刺激)，动作电位就不再增大，而伪迹仍随之加大。这是区别刺激伪迹与动作电位的可靠方法之一。
浙江大学生理学实验坐骨神经
蟾蜍坐骨神经干复合动作电位特性 目的：应用微机生物信号采集处理系统记录蟾蜍坐骨神经干复合动作电位（compound action potention，CAP），观察刺激、神经损伤、药物对神经兴奋性、兴奋传导的影响并探讨其机制。 1.材料和方法(materials and methods) 1.1 实验动物： 蟾蜍（中华蟾蜍指名亚种，Zhuoshan Toad） 1.2 药品： 任氏液、3 mol/L 氯化钾 1.3器材： RM6240微机生物信号处理系统（成都仪器厂）、神经干标本盒、包括器械方盘、蛙板等实验器械材料一套。 1.4 坐骨神经干制备： 蟾蜍毁脑脊髓，去上肢和内脏，下肢剥皮浸于任氏液中。 蟾蜍下肢背面向上置于蛙板上，剪去尾椎；标本腹面向上，用玻璃分针分离脊柱两侧神经丛，用线在近脊柱处结扎，剪断神经；将神经干从腹面移向背面。标本背面向上固定，从大腿至跟腱分离坐骨神经。 坐骨神经标本置任氏液中备用。 1.5 仪器连接和参数： 神经干标本盒两对引导电极分别接微机生物信号处理系统1、2通道。 仪器参数：1、2通道时间常数0.02s、滤波频率3KHz、灵敏度5mV，采样频率：100KHz，扫描速度：0.2ms/div。单刺激激方式，刺激幅度1.0V，刺激波宽0.1ms，延迟2ms，同步触发。 1.6 动作电位引导： 神经干标本置于标本盒的电极上，神经与电极接触良好，调节刺激电压，记录动作电位。 2.观察（observations） 2.1 中枢端引导的双向动作电位（biphasic action potential，BAP）： 用1.0V电压，波宽0.1ms方波刺激神经干末梢端，观察动作电位波形。 2.2 测定末梢端引导的双向动作电位： 用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波刺激神经干中枢端，测定动作电位正、负向振幅和时程。 2.3 兴奋传导速度测定： 用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端，测定第1和第2对引导电极引导CAP起点的时间差Δt ，根据υ＝S R1- R2- / Δt 计算出AP的传导速度。 2.4 测定单相动作电位（monophasic action potential，MAP）： 用镊子夹伤对1对引导电极间的神经干，然后用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波刺激神经干中枢端，测定末梢端MAP振幅和时程。 2.5观察刺激强度（U）与动作电位振幅的关系：
生理学期末设计性实验终稿
研究不同因子对肠道平滑肌生 理特性的影响实验 一实验原理 取离体兔肠段置于台氏液中，用计算机采集 系统扫描其收缩曲线，假如滴加不同的因子，观 察他们对于离体肠段平滑肌收缩的影响。通过这 种观察，学习离体肠段平滑肌的实验方法，分析 酸和碱环境下以及不同中药试剂下消化管的收 缩作用。 二、试剂配制 1000ml 台氏液：NaCl 8.0g 、 KCl 0.2g 、 10% MgCl 2 0.1g NaH 2PO 2 0.05g 、NaHCO 3 1.0g 、 CaCL 2 0.2g 、葡萄 糖 1.0g 。蒸馏水加至1000ml 。 配制Ph 分别为6.0,7.0,8.0的试剂，以盐酸和氢氧化钠为原料。 并且分别准备好10ml 的王老吉，菊花茶，凉茶王，藿香正气水。 三、材料与器材 家兔两只 计算机BL-310生物机能系统、HU-I 型力换能器、麦氏浴皿、恒温水浴锅、温度计、手术器械、注射器、缝针、大小烧杯、滴管、丝线。 四、实验步骤 1．如右图装好实验装置，麦氏浴槽外的水浴温度为37℃，浴槽内调温至37±0.5℃.
2．制备离体兔肠段 兔耳缘静脉注射乌拉坦，致其昏迷后立即剖开腹腔，找到胃幽门与十二指肠交界处。在十二指肠起始端扎一线，剪取十二指肠、空肠，放入冷台氏液内。先用20m1注射器冲洗肠内容物，冲洗干净后剪成若干约1．5cm长的小肠段(每一实验小组一段)。在其两端结扎，一端做一短线环固定在通气的L管下方或浴皿内，另一端扎线与张力传感器相连。将肠段完全浸浴在调好温度的麦氏浴槽中，并调整好台氏液充气量(小气泡接连不断)。游离及取出肠段时，动作要快，取兔肠及兔肠穿线时，尽可能不用金属及手指触及。为保持离体肠段的活性，可先预冷充氧的营养液，游离肠段及穿线在预冷的营养液中进行。 3．开启计算机采集系统，接通与张力传感器相连的通道。固定L管并调节扎线与张力传感器，使肠段运动自如又能牵动传感器(注意：扎线不可贴壁或过紧过松)。实验项目-消化实验-肠道平滑肌生理特性的不同影响因素。调节增益与扫描速度，使肠段的运动曲线清晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。
坐骨神经-腓肠肌标本实验报告
华南师范大学实验报告 一、实验题目：坐骨神经-腓肠肌标本制备、 骨骼肌单收缩及其总和以及Powerlab实验系统的使用 二、实验目的： 1. 学习蛙类动物单毁髓与双毁髓方法，并掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。 2. 了解电刺激的极性法则和方法，学习肌肉收缩的记录方法。 3. 观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系、骨骼肌的单收缩过程和肌肉收缩的总和以及强直收缩现象, 了解肌肉收缩过程的时相变化以及刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响。 三、实验原理： 腓肠肌由许多肌纤维组成，刺激腓肠肌时，不同的刺激强度会引起肌肉的不同反应。当刺激强度过小时，不引起肌肉发生收缩反应，此时的刺激为阈下刺激。而能引起肌肉发生收缩反应的最小刺激强度，为阈刺激。当全部肌纤维同时收缩时，则出现最大的收缩反应。这时，即使再增大刺激强度，肌肉收缩的力量也不再随之加大，该刺激强度为最适刺激强度。 肌肉组织对于一个阈上强度的刺激，发生一次迅速的收缩反应，称为单收缩。单收缩一般要经历潜伏期、收缩期和舒张期三个过程。 当同等强度的连续阈上刺激作用于标本时，则出现多个收缩反应的叠加，叫做强直收缩。当后一收缩发生在前一收缩的舒张期，即发生不完全强直收缩；当后一收缩发生在前一收缩的收缩期，各自的收缩则完全融合，肌肉出现持续的收缩状态，即产生完全强直收缩。 四、实验材料：青蛙 五、实验步骤： 1. 制备坐骨神经-腓肠肌标本： 1)洗干净实验动物 2)双毁髓，剥制后肢，分离两后肢 3)分离坐骨神经 4)游离腓肠肌 5)分离股骨头 6)标本检验
7)电刺激极性法则的验证 2. 连接实验装置： 将换能器的输出线接至RM6240生理记录装置的2通道，电刺激信号接至肌槽的电极上。然后把制备好的坐骨神经-腓肠肌标本股骨固定在肌槽上。将固定肌肉的棉线另一端接在张力换能器上，保持适度松紧，将坐骨神经搭在肌槽的电极上。 3. 设置通道放大器和刺激器： 1)打开PowerLab电源，检查USB线连接 2)打开Chart5中文版 3)设置通道数为2 4)设置通道2-桥式放大器：量程5mV,低通10Hz，调零 5)设置刺激器：刺激方式选脉冲，脉冲数1，手动方式，量程10V,振幅100mV,标记通 道1，频率1Hz,持续时间1mS, 4. 开始测试： 1)打开刺激器面板和点右下角”开始“按钮 2)点右上角调节采样速度（“走纸速度”） 3)菜单打开设置刺激器的脉冲数2个或5个，重新打开刺激器面板 4)调节走纸速度为400 六、实验结果： （一）坐骨神经-腓肠肌标本制备 股骨 脊柱骨 坐骨神经 腓肠肌 图1. 蛙坐骨神经—腓肠肌标本图 （二）坐骨神经-腓肠肌标本在Powerlab实验系统中所记录下的数据 1.通过不断调整刺激强度，使肌肉收缩的幅度适中，记录单收缩的曲线（图2-1 ）。当
蟾蜍实验1
双毁髓技术剑突取材、染色、观察 朱琪璋 121140083 一、实验目的 1.理解双毁髓技术的意义 2.观察软骨组织的形态 3.观察蟾蜍的泌尿及生殖系统 二、实验原理 1.双毁髓法麻醉蟾蜍：用金属毁髓针破坏蟾蜍的脑和脊髓，使蟾蜍处于一种麻醉状态，四肢瘫软，从而对蟾蜍进行解剖，取出泌尿及生殖系统，观察各个组成部分。 三、实验动物与器材 1.实验动物:活的蟾蜍一只／每人 2.实验试剂:亚甲基蓝试剂 3.实验器械:显微镜,解剖器具,毁髓针,剪刀,镊子，吸水纸，大头针 四、方法与步骤 1.左手食指与中指，无名指与小指分别夹着前肢，后肢，握住蛙体，拇指按住吻端使头部上下活动，两耳后腺间出现一道褶线，此线中点或用金属毁髓针沿头背中线向后移动触到一凹陷处，即枕骨大孔。拇指下压使头前俯与脊柱相连处凸起，同时将毁髓针由凹陷处垂直刺入1mm，再将针从枕骨大孔向前平行刺入颅腔并在颅腔内搅动，彻底捣毁脑组织使之成为“脊蛙”。 2.将蛙置于解剖盘上，腹部朝上，四肢伸展后用大头针固定。用镊子提起腹面皮肤，用剪刀剪开一小口，并从小口处向前将腹面皮肤剪开，至下颌前端。向后剪至两后肢基部之间，泄殖孔稍前方。然后将皮肤向两侧拉开，可见皮肤与皮下肌肉连接松散，两者之间较大间隙为皮下淋巴腔，翻看皮肤内测可见分布有丰富的血管。 3.用镊子提起腹部肌肉，用剪刀沿腹中线略偏左侧，剪开腹壁至肩带之剑突，然后向左，向右剪开，用剪刀剪取薄的剑突软骨组织，制成装片(用亚甲基蓝试剂染色效果更好），在显微镜下观察软骨组织细胞的形态。 4.小心剥离腹壁上的腹大静脉，再将腹壁向两侧分开，暴露心脏和其他器官，小心分开其他器官和系统，找到蟾蜍的泌尿和生殖系统，并用剪刀，镊子等将其完整的分离出来，放到解剖盘上，观察系统中各个器官的形态及位置，作好记录，并绘制好模拟图。 5.将蟾蜍处理掉，仪器清洁干净，整理实验台。 五、实验结果 1.剑突软骨组织细胞图