放线菌资料

放线菌资料的总结

放线菌资料的总结

放线菌的形态比细菌复杂些，但仍属于单细胞。在显微镜下，放线菌呈分枝丝状，我们把这些细丝一样的结构叫做菌丝，菌丝直径与细菌相似，小于1微米。菌丝细胞的结构与细菌基本相同。

根据菌丝形态和功能的不同，放线菌菌丝可分为基内菌丝、气生菌丝和孢子丝三种。链霉菌属是放线菌中种类最多、分布最广、形态特征最典型的类群，其形态如下图所示。

下图：链霉菌的一般形态和构造（模式图）

正文：

放线菌是怎么生长的，需要什么条件，我指的不是培养基，而是在植物体内。植物内生放线菌在植物的韧皮部、木质部和韧皮部之间的缝隙有生长，分离植物的内生菌通常在这两个部位可以分离到。主要是靠植物组织提供营养，有很多内生菌能够分解纤维素作为炭源，无机盐和氮源可以由植物组织中的无机盐和含氮物质获得，他们在植物中生长很缓慢。

通常来说，植物或者植物的组织器官的生长时间越长内生菌的种类和数量越多，你如果要分离可以选择树龄在百年以上的树。

植物器官粉末中会有放线菌存在吗？干燥的，经辐射灭菌后的粉末会把放线菌杀死吗？适宜的条件还会长出菌吗？

辐射灭菌和50-60度的干燥都不能杀死所有的放线菌。

另外植物当中不只有放线菌，植物的内生菌大多数是真菌，有的内生真菌产生孢子能够抵御不良环境，生存能力很强。

如果你是做植物组织化学可以采用高温处理，杀死植物当中的微生物，再分析植物组织的成分。如果你要的成分不能高温处理，可以用容易挥发的消毒剂处理植物样品，杀死微生物然后，在无菌环境下使消毒剂挥发。建议你采用75%乙醇。如何分离内生菌？

目前内生菌的分离主要还是表面消毒，建议你最好不要把植物组织研磨成粉末。可以将组织用75%乙醇表面消毒，在无菌室中的超净台中将植物组织吹干，用消毒的手术刀，把植物组织切割成0.5*1cm的小块。直接把组织块接入培养基，同时将组织小块在空培养基中滚动，然后取出，作为对照平板。如果对照平板有菌长出，说明消毒不彻底，如果对照平板无菌生长，说明消毒彻底。（将菌回接以后菌能够在植物中生长，不能准确说明该菌就一定是内生菌。只是有一些人的推测，并不具有权威性。而且对于大多数植物回接不实际。）

请问在用金标法检测霍乱弧菌的时候，怎么样才能确定细菌的浓度已经达到最低检测限1000000/ml？

1.梯度稀释，平板培养，计算单菌落数

2.分光光度计测定光密度，制定标准曲线；测定某一光密度下的菌体浓度

3.比浊

荧光染色技术最准确

稀释---甲醛固定（可放置起来，以后一起分析）---过滤到核孔滤膜0.22---丫叮橙染色--荧光显微镜检测计数--或者数码相机照相---相关软件分析，可快速大量计数

缺点是所有细菌--不分死活

另外还有一种专门检测活菌数的荧光计数

我手头上的一株放线菌因暂不应用而予以保存（砂土管、液体石蜡），历时半年，现给以复活，所得菌落皆呈衰败样。试问各位高人，如何补救？

关键不知道你的放线菌是不是真的退化了，放线菌的退化表现主要有：在斜面上多次传代后产生“光秃”现象等，从而造成生产上用孢子接种的困难；还有菌种的代谢活动，代谢产物的生产能力或其对寄主的寄生能力明显下降。

如果是真的退化了，可以对其进行复壮。具体的菌种的复壮措施如下：纯种分离采用平板划线分离法、稀释平板法或涂布法均可。把仍保持原有典型优良性状的单细胞分离出来，经扩大培养恢复原菌株的典型优良性状，若能进行性能测定则更好。还可用显微镜操纵器将生长良好的单细胞或单孢子分离出来，经培养恢复原菌株性状。复壮好的菌株可以继续保存。

还有一种可能会不会是培养基和培养条件的问题，如果培养基中缺少某中元素，

也可能导致放线菌产孢子量减少，颜色改变；当然培养条件如温度，pH等也会影响放线菌的生长。还需要搞清楚到底是什么原因使所的菌落呈衰败样。

我现在做的是筛选一株放线菌，这株菌的代谢产物与生物碱的显色很相似，我就用生物碱的显色方法来检测，但是不直观，我暂时也没想出很好的方法，谢谢各位高人指点，这株放线菌与食品保鲜有关。

筛选放线菌的方法很多呀，为什么会用代谢产物来筛选呢？因为不同的菌种也会产生相同或相似的代谢产物；如果你筛选的是一株已知的放线菌，你可以先查阅一下相关的菌种资料，设计合适的培养条件进行筛选，然后再结合菌丝形态、孢子形状、色素特征进行初步鉴定，也可以通过16sRNA技术进一步鉴定。

关于菌种的筛选，我也做过很久，确实是很痛苦！你筛选的是一株能产生特定代谢物的菌，所以你首先要确定产生的这种代谢物的性质、形态，有哪些特殊的性能，最好是能将与产生的代谢物反应并可用肉眼看到反应结果（如透明圈）的物质加入到筛选培养基中，这样就只需要做重复的筛选工作就行了。不过，如果运气不好，那可是一种难以想象的高度重复，要有心理准备！

有谁做过放线菌的生长曲线的,我想问一下:一般放线菌的对数生长期是几天?有谁能告知?如何测?

由于不同的放线菌在不同的培养基和培养条件下，生长情况会有很大的不同，一般来说，放线菌的对数生长期一般在第三天开始；而且放线菌在液体培养的时候形成小菌球所以不能通过比色的方法来测，你可以通过测定放线菌在不同培养时间的菌体干重来绘制放线菌的生长曲线，你如果做平行实验的话，接种量要均匀！第一次独立做实验，不知能否成功。

大家帮我看看

已经两天了，培养基上啥都没有……

首先不要急，放线菌生长比较慢，很多时候至少需要三天才能长出可见菌落，你才培养两天。

其次，你的培养基中加的重铬酸钾似乎有点多，重铬酸钾对放线菌是有一定抑制作用的，我在培养时，假如50就生长很慢啦！

另外，你的激活温度是不是有点高，我看得很多材料都认为干热110度比较好，湿热120独已经是灭菌温度啦！

我从土壤分离到一株产蓝色色素的放线菌（高氏一号固体培养基），是水溶性的色素。当我用液体发酵培养的时候，放线菌却未产生色素。这是怎么回事呢？？？？？

放线菌产生的色素是其次级代谢产物，次级代谢产物的产生过程是一个复杂且很难控制的过程，这是个和放线菌生长发育密切相关的过程。放线菌在固体介质上的生长发育行为和液体中一定有许多不同，那么其产生次级代谢产物的行为也将发生变化。因此，你实验中的现象属于一种正常现象，为了使菌株能在液体培养条件下也能产生色素，首先你需要做的就是进一步优化液体发酵培养基，争取使其在液体生长条件下也能产生色素。

放线菌酮在培养细胞中加入有何意义？

放线菌酮是一种蛋白质合成抑制剂，主要抑制细胞质蛋白质合成，在细胞培养中的目的在于细胞生长代谢缓慢。

我在做微球菌培养时感染了放线菌，怎么也除不掉，请大家帮帮忙，有什么好办法才能除掉呀！

老兄，你应该对你的目前的情况介绍的再具体一点。

首先，如你所说，你在做微球菌时感染了放线菌，不知道开始的时候是否已经得到过纯的微球菌，如果你以前得到过纯的微球菌，能不能找到你的最开始的菌种，再活化转接一下；

其次，我的印像中微球菌好像也是革兰氏阳性，而且放线菌都是革兰氏阳性，你可以重新转接你的微球菌，在不同的培养时期做片子镜检观察菌体形态，是不是你这个菌在开始的时候是有菌丝体形态，而生长到了一定时期后菌丝断裂出现了球菌呢；

最后也是最关键的，如果你微球菌确实是污染了，1、就需要找出一种选择性培养基，能够将其纯化（我目前也没有想出来，其实说的就是废话，呵呵），2、采用最传统的稀释平板法用尽可能大的稀释度来稀释分离，3、根据你微球菌菌体的大小选择合适的滤膜，将有菌丝体的放线菌用滤膜除去。

几株真菌（降解有机磷农药）的生长曲线

真菌的生长曲线确实被很多人忽略了，包括我，不过我想你是不是可以通过定时测量真菌菌丝在平板培养基上的菌落直径，然后算出一定时间内菌丝的生长速度

来作的它的生长曲线呢，不知可否，共同期待大侠们更好的解决方法！

我们以前做过黑曲霉的生长曲线，是直接取一定量的菌体培养液，离心收集沉淀，然后用烘干称量菌丝体干重的方法来做的，效果还可以，而且以前是看见相关的文献中有这麽做的，所以才采取了这种办法，不知对你有没有用？

用打孔的方法，不过我觉得我的方法虽然简单，但是好像没有acui和waterstill 战友的方法合理，根据你菌的特点（真菌），我觉这两种方法比较好：

一、直接法：有粗放的测体积法（在刻度离心管中测沉降量）和精确的称干重法（如acui)

二、间接法：与微生物生长量平行的生理指标很多，可以根据实验目的和条件适当选用。如测含氮量（一般霉菌的含氮量为其干重的6.5%，含氮量乘以6.25为粗蛋白含量），还有如测含碳量以及测磷、DNA、RNA、ATP、DAP、几丁质或N-乙酰胞壁酸等含量等。

具体测定时你还要得查点相关资料。

请问放线菌生长曲线该怎么测呢?

三角瓶摇床生长发酵，加入足量的玻璃珠不让菌体长成团状，使菌体均匀分布在液体培养基中！然后每隔一定时间取样分析。用分光光度计测定OD值即可。如果菌体浓度过大可先稀释后在测OD值！波长大概在600nm左右！

一般情况下，形成菌丝的微生物的生长曲线，是取培养液离心收集沉淀（工业上通常3000~4000rpm，10min），测沉淀占总体积的百分比，也有称量菌丝体干重的。

楼上的说的方法不能符合发酵过程的真实情况。

另外不同的菌测定OD使用的波长不同。大肠杆菌是600nm。使用波长的选择应该跟菌的大小及形态有关。这方面有一篇文献，大家感兴趣的话可以查询一下。其实放线菌要看哪些属了，有些属容易产生菌丝，而有些属不产生菌丝球。本人在做课题的时候就筛选得到一株放线菌，属于北里孢菌属，在摇瓶发酵和发酵罐中发酵时，就没有菌丝球的产生，所以我在实验时就采用测量OD660的方法来测定生长情况的。但我也做过链霉菌菌的发酵，链霉菌很容易产生菌丝球，我所采用的是称干重法做的。所以我觉得楼主应该根据实际情况来具体确定你的实验应该采用哪种测量方法了。

此外，我觉得测量放线菌的生长应该在罐子上做，如果在摇瓶上做的话很麻烦，也不准确，一般起伏很大，而在罐子上做的话，可以得到非常漂亮的曲线，如果楼主有足够的精力的话，取样点密集点就更好，不过放线菌的生长较慢，不像细菌那样1~2天就可以结束，而放线菌基本在3天以上，有些更长，所以楼主就要根据你自己的菌株的实际情况来决定了。

说的如果有不到之处，还望各位大虾指正。

请问生产黄霉素的放线菌对身体的危害有多大？谢谢大家回答，越具体越好！！！黄霉素Flavomycin ( Flavophospholipol ) 是1955 年Lindner , wallhausser 等由链霉菌青色类群的Streptomyces bambergiensis（班堡链霉菌）、Streptomyces ghanaersis（加纳链霉菌）, Streptomyces geysiriensis（喷泉链霉菌），Streptom yces ederensis（埃德尔链霉菌）及其他变异株所分离到的一种含磷多糖类抗生素。

链霉菌属于需氧放线菌纲链霉菌素，链霉菌虽然经常在临床标本中发现（如皮肤及呼吸道分泌物），但很少与临床疾病有关。目前国内发现的主要有金色类群链霉素引起败血症，浑圆链霉菌引起脓肿，白淡黄链霉菌引起败血症，热吸水链霉菌引起喘息性呼吸道感染。

大侠们，我最近在养海洋放线菌，用其发酵液筛选抗肿瘤活性，但是用了几种培养基它们都不愿意长，半个月还只是长不到铺瓶底，哪位大侠有经验分析一下是什么原因，用什么培养基既能使放线菌长得快，而且不影响活性。

你可以优化培养基，首先选择不同的碳源、氮源做单因素试验，如果有时间可以做正交实验。海洋放线菌我不了解，但是一般放线菌在以黄豆饼粉、蛋白胨等为氮源，淀粉、糊精等为碳源的液体培养基中长得比较好。

我觉得你应该首先考虑菌体的生长，如果菌不能很好的生长就更谈不上获得抗肿瘤的产物，就像20世纪70年代最早从高羊茅草中分离产生麦角碱的内生菌，要发酵3-7周菌体才能达到一定的生长数量，那么产物的获得就很困难。发酵时间太长，这是微生物制药的大忌。

放线菌的基生菌丝体和气生菌丝体应该怎么区分呢？有什么方法可以看出他们的区别？还有气生菌丝体的分支是怎样看的。

放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。常见放线菌大多能形成菌丝体，紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝(简称“基丝”)，基丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生菌丝(简称“气丝”)，并进一步分化产生孢子丝及孢子。基生菌丝体和气生菌丝体的区分方法有液体培养法，插片法等多种方法，具体可以参考以下两篇文献：

１液体培养法观察放线菌的形态生物学通报，1996,31(11):21

2 插片法观察放线菌霉菌效果好实验教学与仪器，1995,2:28

希望对你有帮助！

”插片法观察放线菌霉菌效果好“能不能提供一个PDF,本人一直在用这个方法，但是观察气生菌丝不能很好的聚焦，较长的菌丝不好观察！

一般来将气生菌丝比基质菌丝要粗一些，而且气生菌丝比较有刚性，在显微镜下，很容易区分。

你可以用显微镜来插片观察,很容易的,气生菌丝较粗,基内菌丝较细,不过不是很明显.同时还可以看到孢子丝,注意一点:操作要柔和,而且不能破坏空间结构

我们常见的二倍稀释法测定MIC，一般常用于细菌，利用液体培养，肉眼观察。可否将药物浓度配制成不同梯度，制成固体平板，放线菌菌株孢子涂布培养，然后计数。有没有高水平的文章利用此方法？

你测定的是MIC，MIC的定义是什么，最小抑菌浓度，就是可以抑制微生物生长的最低抗生素（或抗菌物质）的浓度。采用平板稀释法，是一种国际公认的标准方法，适合于测定大量菌株对同一种抗菌物质的MIC，你只要把所有的菌滴种在含不同浓度的抗生素平板上，然后看最低在哪个浓度下你的菌被抑制了，这个浓度即为MIC，不知道为什么还要进行菌落计数。

我培养的一株产胞内抗生素放线菌，菌株的孢子成熟时呈现出有白色到烟灰色的过程，成熟的孢子就是烟灰色的。但是，最近出现这种情况，就是孢子成熟的过程中，开始出现的都是白色，过了两天有部分白色变成了黄色，再过一天，黄色的部分也变成了烟灰色，只是比正常的孢子的烟灰色还是要淡一点，不知道是什么原因，本人怀疑是不是染菌了，只是时间紧张，没有做镜检和发酵实验，就在这里给大家讨论先了？

有一个简单的办法，先将你认为已经染菌的菌株在平板上划线，再看会不会出现有差异的菌落形态。如果有，就是染菌了；如果没有，就应该不是。

有时候，由于伴生菌的过度生长，会照成得不到纯培养放线菌的情况，估计你的情况，可能是污染了一些伴生菌，可以采用oldflying 战友的方法，来看看是不是污染有杂菌，如果有，可以对杂菌做一个生化鉴定，以确定是何杂菌；然后，可以在培养基中选择使用一些抗生素药物纸片来抑制伴生菌的生长。

菌种的产孢和培养条件、培养基和培养温度等密切相关，如果培养条件不同的话，产孢的时间和数量以及颜色都会有所改变，所以不妨重复一下；同时如果污染的话最好采用单孢分离的方法进行纯化！