生物选修一植物组织培养花药离体培养
课题1 菊花的组织培养
一.基本概念
1.细胞分化：细胞在形态,结构,功能上出现稳定性差异的过程（基因选择性表达的结果）.
2.细胞的全能性：已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能.
3.外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段.
4.脱分化：又叫去分化,由高度分化的组织或细胞产生愈伤组织的过程.
5.愈伤组织的细胞特点：细胞排列疏松无规则,是一种高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞.
6.再分化：愈伤组织重新分化成根或芽的过程.
总结：植物组织培养过程：
脱分化再分化
外植体-------→---愈伤组织------→根.芽等---→试管苗---→移栽--→-完整的植物体二．影响因素
1.植物材料的选择：菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝.
2.培养基的选择：MS培养基（含大量元素,微量元素,有机物和植物激素）
注：微生物培养基以有机营养为主,MS培养基则需要提供大量无机营养.
3.植物激素的浓度,实用的先后顺序,用量比例,都会影响实验结果.
使用的先后顺序
先使用生长素,后细胞分裂素细胞分裂但不分化
先试用细胞分裂素,后使用生长素分裂也分化
同时使用分化频率提高
用量比例
生长素＞细胞分裂素有利于根的分化,抑制芽的形成
生长素＜细胞分裂素有利于芽的分化,抑制根的形成
生长素＝细胞分裂素促进愈伤组织的形成
4.其他影响因素：pH,温度和光照.
三.实验步骤（重点是无菌技术）
（1）制备Ms固体培养基
↓
（2）灭菌（将培养基与其它器械进行高压蒸汽灭菌）
↓
（3）外植体消毒（嫩枝→流水冲洗→无菌吸水纸吸干→70%酒精中摇晃2~3次→无菌↓水冲洗→无菌吸水纸吸干→0.1%的氯化汞溶液1~2min→无菌水洗
三次）
（4）接种（a.70%的酒精擦工作台;b.操作在酒精灯附近进行;c.火焰灼烧灭菌）
↓
（5）培养（温度：18~22℃;pH：5.8左右;光照：每日用日光灯照射12h）
↓
（6）移栽栽培
注：容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养.
课题2 月季的花药培养
一.花粉发育过程
减数分裂有丝分裂
花粉母细胞---------→四个小孢子----→1个小孢子----→1个小孢子-------→
（小孢子母细胞）（小孢子四分体时期）（单核居中期）（单核靠边期）
花粉管细胞核→营养细胞
一个小孢子
（双核期）有丝分裂
生殖细胞核→生殖细胞-------→两个精子
二.影响因素
1.主要因素：材料的选择和培养基的组成
2.其他因素：亲本植株的生长条件,材料的低温预处理,接种密度
3.材料的选择：初花期完全未开花的花蕾（花期）;单核期（时期）
单核期以前质地幼嫩极易破碎.单核期以后花瓣松动不利于消毒. 三．操作流程：
材料的选取（镜检：①醋酸洋红法：将花粉细胞核染成红色；②焙花青-铬钒法：适用↓于不易染色的,染成蓝黑色）
70%的酒精无菌水无菌吸水纸 0.1%的氯化汞溶液无菌水
材料的消毒（花蕾-------→取出----→花蕾-------→花蕾---------→取出---→完成）↓
接种（①除去萼片和花瓣；②防止损伤花药,否则会从受伤部位长出愈伤组织；③除去花丝,因为与花丝相连不利于愈伤组织或胚状体的形成）
↓
培养（①每瓶接种花药7~10个，温度25℃左右；②刚开始不需要光照，幼小植株形↓成才需要光照.）
花药开裂(20~30天后；若长出愈伤组织应该及时转移到分化培养基上；若释放出胚状体应该尽快将幼小植株分开分别移植到新的培养基)
四．通过花粉培养产生花粉植株（单倍体植株）的两种途径：
脱分化分化
1.花药中的花粉-------→胚状体-------→丛芽诱导
脱分化再分化 -------→生根-------→移栽
2.花药中的花粉-------→愈伤组织-------→丛芽
取决于激素种类和浓度配比（主要是生长素和细胞分裂素）.
选修一 植物组织培养
选修一植物组织培养 1．紫草素是紫草细胞的代谢产物，可作为生产治疗烫伤药物的原料。用植物组织培养技术可以在生物反应器中通过培养紫草细胞生产紫草素。下图记录了生物反应器中紫草细胞产量、紫草素产量随培养时间发生的变化。 (1)在生产前，需先加入紫草细胞作为反应器中的“种子”。这些“种子”是应用组织培养技术，将紫草叶肉细胞经过______________而获得的。这项技术的理论基础是______________。 (2)从图中可以看出：反应器中紫草细胞的生长呈现________________规律；影响紫草素产量的因素是________和________。 (3)在培养过程中，要不断通入无菌空气并进行搅拌的目的是________和________。 解析：因为紫草素是从大量培养的紫草愈伤组织细胞中提取的，所以生产前必须要加入离体的紫草细胞进行脱分化培养，以获得大量的紫草愈伤组织细胞，这一过程利用了植物细胞的全能性。从图中可以看出反应器中紫草细胞的数量呈“S”型增长，原因是开始生长较慢，要经过适应期，然后进入生长较快的对数期，随细胞数目的增多，食物、空间等生活条件成为限制因素，此时进入稳定期，细胞的数目相对稳定。在这个时期紫草细胞要产生大量的次级代谢产物——紫草素，所以说紫草素产量的高低与紫草愈伤组织细胞的数目和生长期有关。 答案：(1)脱分化(或脱分化形成愈伤组织) 细胞的全能性(2)“S”型增长细胞数量细胞所处的生长期(3)保证氧气供应充足使细胞与培养液充分接触2．如图所示，图Ⅰ为植物组织培养流程图，图Ⅱ为植物组织培养过程的部分示意图，请据图回答： (1)植物组织培养依据的原理是_
3-2月季花药培养习题.doc
选修1专题3课题2月季的花药培券 1.在月季花药培养成单倍体植株的过程中，应选择哪个时期最易成活（） A.单核期前的花药 B.单核期后的花药 C.单核期花药 D.双核期 2.花药培养的主要因素是（） A.材料的选择与培养基的组成 B.亲本植株的生理状况 C.选择合适的花粉发育时期 D.材料的低温处理与接种密度 3.被子植物花粉发育经历的阶段顺序正确的是（） A.小抱子四分体时期一双核期一单核居中期一单核靠边期一花粉粒 B.小犯子母细胞一单核靠边期一单核居中期-双核期一花粉期 C.小泡子母细胞一小泡子四分体时期一单核居中期一＞单核靠边期一花粉粒 D.小抱子四分体时期一小抱子母细胞一双核期一单核期一花粉期 4.某高等植物体细胞内假设有6条染色体，它们是AaBbDd,那么，一个花粉管中的两个精子中的染色体是（） A. ABD 和abd B. AbD 和abd C. AaB 和Bbd D. Abd 和Abd 5.用兰花茎尖细胞可快速培养兰花苗，这种生殖方式不能叫（） A.无性生殖 B.组织培养 C.植物克隆 D.有性生殖 6.产生花粉植株的两种途径中，得到胚状体和愈伤组织都是通过下列选项中过程的是（） A.分化 B.脱分化 C.再分化 D.诱导 7.下列关于月季花药培养的叙述中，错误的是（） A.材料的选择与培养基的组成影响花药培养的成功率 B.选择花蕾通常选择完全未开放的花蕾 C.选取材料时一定要进行消毒 D.培养形成的胚状体可继续在原培养基中分化形成植株 8.关于花药培养产生花粉植株的途径，下列叙述错误的是（） A.主要由培养基中激素的种类及用量决定途径 B.花粉经脱分化形成胚状体，再分化成丛芽，然后诱导生根 C.产生胚状体是花药离体培养中特有的途径 D.花粉先形成愈伤组织再诱导分化成植株 9.下列有关花药离体培养的说法，错误的是（） A.对材料的选择最常用的方法是焙花青一一倍矶法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色 B.材料消毒时需先用酒精浸泡，然后用氯化汞或次氯酸钙溶液浸泡，最后用无菌水冲洗 0.接种花药后一段时间内不需要光照，但幼小植株形成后需要光照 D.若接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体后，要适时转换培养基，以便进一步分化成再生植株 10.接种和培养花药时应注意的事项，正确的一组是（） ①不损伤花药②彻底去除花丝③幼小植株形成后需要光照④花药开裂释放出的幼小植株会分别发育成单倍 体，无需分开 A.①②③ B.①②④ C.②③④ D.①③④ 11.下列关于花药离体培养过程的叙述中正确的是（） A.花药培养成功与否与材料选择无关 B.花药培养成幼苗后，一定不能分瓶培养 C.花药培养成幼苗的过程中，除了适宜的温度、pH等，还要注意照光 D.一般地讲，材料选在单核期时花药培养成功率最高 12.花药培养过程中，对实验材料的消毒主要有以下儿步，顺序正确的是（） ①将花蕾在酒精中浸泡约30s②放入氯化汞溶液中2?4min③无菌水清洗，然后用吸水纸吸干花蕾表面的水分 ④用无菌水冲洗3?5次 A.①②③④ B.①③②④ C.③①②④ D.②③①④ 13.污染是植物组织培养过程中的最大技术难题，可发生于不同的对象和不同阶段，某同学按照教材中的实验操作, 结果发现在培养基中出现白色晕圈或有色菌落，下列关于此项分析错误的是 A.可能是锥形瓶口处理不当 B.组织培养的每一个环节都有可能出现污染 C.可在培养基中添加生长素等物质来避免污染 D.先初培养，挑出无污染的物质再进行培养，可减少污染 14.下列关于菊花组织培养技术与月季花药培养技术的叙述错误的是（）
植物花药培养与花粉培养的不同
植物花药培养与花粉培养的不同 艾莉 绵阳师范学院生命科学与技术学院12级2班1211010219 摘要植物组织培养是研究植物生长和分化规律的重要手段，植物组织培养是指在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。花药培养和花粉培养是植物组织培养中的两大技术，且都在育种上有很大的意义，本文主要从两者的概念、培养层次、培养过程、培养难易程度来综述花药培养和花粉培养的不同。 关键词花药培养、花粉培养、不同 自从印度学者Guha和Maheshuari1964年报道从毛叶蔓陀罗花药培养中获得了单倍体植物和再生植株[1]，80年代后期到90年代期间花药培养技术迅速发展，多作物小孢子培养已经成功。到目前为止，据不完全统计，已经有200多种植物通过花药培养技术获得单倍体。花粉培养是在花药培养的基础上发展起来的技术，两者都在基因遗传、作物育种上起着很大的意义，本文主要从以下几个方面论述两种培养技术的不同。 1.概念 1.1花药培养 花药离体培养是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上，来改变花药内花粉粒的发育程序，使其分裂形成细胞团，进而分化成胚状体，形成愈伤组织，由愈伤组织再分化成植株，其培养材料是花药。 1.2花粉培养 当花粉发育到一定阶段，从花药中分出单个花粉粒，为获得单倍体植株接种到特定培养基上，诱导其长出愈伤组织，再将愈伤组织移植到另一种特定的培养基上〔含不同配比的细
胞分裂素和生长素〕，诱导分化出根和茎、叶，成为完整的植株。其培养材料是单个的花粉粒。 故花药培养和花粉培养概念不同，其研究对象不同。 2.培养层次 花药培养是将花药接种到培养基上，其外植体为花药，花药为花的雄性器官，故花药离体培养属于器官培养。 花粉离体培养是将花药中的花粉粒接种到培养基，其外植体为花粉粒，花粉粒即雄配子体，其本质是单个细胞，故花药培养属于细胞培养。但两者其最终的目的是一样，都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞，最后发育成单倍体植株。 从培养层次上来看前者是器官培养，而后者是细胞培养，培养范畴不同。[3] 3.培养过程 3.1花药培养过程 ①选择材料 ②把花粉发育到一定阶段的花药，通过无菌操作技术，接种在人工培养基上进行离体培养 ③花粉在培养基所提供的特定条件下可以发生多次分裂，形成类似胚胎的构造（胚状体）或愈伤组织 ④诱导愈伤组织分化出芽和根，最后长成植株 培养过程简述如下：选择材料-消毒-接种培养-愈伤组织生成-分化出单倍体植株。 3.2花粉培养过程 ①选择材料 ②将花粉进行预处理预培养数天，然后再分离花粉 ③通过无菌操作技术，将分离出的花粉接种在人工培养基上进行离体培养 ④花粉在培养基上发生多次分裂，逐渐形成胚状体或愈伤组织 ⑤诱导愈伤组织分化出芽和根，最后长成植株
(浙江专版)高中生物第四章实验七植物的组织培养教学案浙科版选修1
（浙江专版）高中生物第四章实验七植物的组织培养教学案浙科版 选修 1 一、植物组织培养 1．概念：取一部分植物组织，在无菌的条件下接种在培养基上，给予一定的温度和光照，使之产生愈伤组织，或进而生根发芽，培养为成熟植株的技术。 2．理论基础：植物细胞的全能性。 3．培养基 (1)发芽培养基：细胞分裂素浓度大于生长素浓度的培养基。 (2)生根培养基：生长素浓度大于细胞分裂素浓度的培养基。 4．培养过程 外植体――→脱分化愈伤组织――生芽丛状苗―→生根幼苗――→ 植株 二、菊花的组织培养 1．材料 MS 培养基、发芽培养基、生根培养基、萘乙酸(NAA)、苄基腺嘌呤(BA)、菊花幼苗。 2．操作流程 1.植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性。 2.影响植物组织培养的因素有：植物材料、营养物质、植物激素 及pH 、温度、光照等。 3.植物组织培养的一般过程为： 离体的植物器官、组织、细胞――→脱分化愈伤组织――→发芽培养基丛状苗――→生根培养基 生根――→ 植株 4.发芽培养基中细胞分裂素相对较多而生长素相对较少；生根培 养基中生长素较多而细胞分裂素较少。
1．不同植物、不同组织的生根和生芽是否都要使用相同的生长素和细胞分裂素浓度？ 提示：不相同。 2．本实验用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，为什么？ 提示：天然激素都有相应的使之分解的酶，所以使用时间短，而人工合成的，没有分解酶，作用时间长，效果显著。 3．植物组织培养过程中，产生污染的途径有哪些？ 提示：①外植体带菌；②培养基及接种器具灭菌不彻底；③接种操作时带入；④环境不清洁。 核心要点一| 有关植物组织培养的几个问题及分析1．细胞的全能性 (1)概念：指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。 (2)原因：生物体的每一个体细胞都是由受精卵经有丝分裂而来的，含有本物种的全套遗传物质，都有发育成完整个体所必需的全套基因。 (3)植物细胞表达全能性的条件：①离体状态；②一定的营养物质；③植物激素；④其他适宜的外界条件(温度、pH、氧气、光照、无菌等)。 2．激素用量比例产生的影响 生长素与细胞分裂素比值结果
生物选修一植物组织培养花药离体培养
课题1 菊花的组织培养 一.基本概念 1.细胞分化：细胞在形态,结构,功能上出现稳定性差异的过程（基因选择性表达的结果）. 2.细胞的全能性：已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能. 3.外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段. 4.脱分化：又叫去分化,由高度分化的组织或细胞产生愈伤组织的过程. 5.愈伤组织的细胞特点：细胞排列疏松无规则,是一种高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞. 6.再分化：愈伤组织重新分化成根或芽的过程. 总结：植物组织培养过程： 脱分化再分化 外植体-------→---愈伤组织------→根.芽等---→试管苗---→移栽--→-完整的植物体二．影响因素 1.植物材料的选择：菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝. 2.培养基的选择：MS培养基（含大量元素,微量元素,有机物和植物激素） 注：微生物培养基以有机营养为主,MS培养基则需要提供大量无机营养. 3.植物激素的浓度,实用的先后顺序,用量比例,都会影响实验结果. 使用的先后顺序 先使用生长素,后细胞分裂素细胞分裂但不分化 先试用细胞分裂素,后使用生长素分裂也分化 同时使用分化频率提高 用量比例 生长素＞细胞分裂素有利于根的分化,抑制芽的形成 生长素＜细胞分裂素有利于芽的分化,抑制根的形成 生长素＝细胞分裂素促进愈伤组织的形成 4.其他影响因素：pH,温度和光照. 三.实验步骤（重点是无菌技术） （1）制备Ms固体培养基 ↓ （2）灭菌（将培养基与其它器械进行高压蒸汽灭菌） ↓ （3）外植体消毒（嫩枝→流水冲洗→无菌吸水纸吸干→70%酒精中摇晃2~3次→无菌↓水冲洗→无菌吸水纸吸干→0.1%的氯化汞溶液1~2min→无菌水洗 三次） （4）接种（a.70%的酒精擦工作台;b.操作在酒精灯附近进行;c.火焰灼烧灭菌） ↓ （5）培养（温度：18~22℃;pH：5.8左右;光照：每日用日光灯照射12h） ↓ （6）移栽栽培 注：容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养.
人教版高中生物选修1专题3植物的组织培养技术复习(教案)
选修1专题3植物的组织培养技术复习教案 复习要点 1.植物组织培养的原理和过程 2. 菊花组织培养过程 3. 月季的花药培养 4.植物组织培养和花药离体培养的比较 复习过程 一、植物组织培养的原理和过程 [知识点讲解] （一）原理：植物细胞的全能性 1.高度分化的细胞全能性表达的条件 （1）离体状态。 （2）营养物质：有机营养、无机营养。 （3）植物激素：生长素、细胞分裂素。 （4）无菌、适宜的外界条件。 2.基本过程 离体的植物细胞、组织、器官―――→脱分化愈伤组织―――→再分化试管苗――→移栽植物体 3.影响植物组织培养的主要因素 （1）培养材料 ①不同的植物组织，培养的难易程度差别很大，容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养。 ②同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短对培养也有影响。幼龄、保存时间短的植物材料容易培养成功。 (2)无菌条件 培养基上有细菌等微生物存在时，它们比植物细胞生长、繁殖得更快，而且它们会产生毒素，使培养的植物细胞很快中毒死亡，因此在培养过程中要求进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。 4. 生长素和细胞分裂素在组织培养过程中的重要作用 (1)使用先后顺序与细胞分裂和分化的关系 使用顺序 实验结果
(2) [下图为利用体细胞诱变育种技术获得抗除草剂白三叶草新品种的过程，下列叙述错误的是 ( ) γ射线 ↓照射 白三叶草组织细胞――→①愈伤组织――→②胚状体―→白三叶草幼苗――→ ③抗除草剂白三叶草 A.该育种过程所依据的原理有基因突变和植物细胞的全能性 B.过程①和②所涉及的培养基中，不同植物生长调节剂的浓度比例不同 C.白三叶草愈伤组织和胚状体的细胞中DNA 和RNA 种类相同 D.过程③通常采用的筛选方法是向白三叶草幼苗喷洒除草剂 [答案]C [解析]诱变育种所依据的原理是基因突变，植物组织培养所依据的原理是植物细胞的全能性。过程①和②所得到的产物不同，因此培养基中不同植物生长调节剂的浓度比例不同。白三叶草愈伤组织和胚状体的细胞中DNA 相同，但RNA 种类不完全相同。过程③通常采用的筛选方法是向白三叶草幼苗喷洒除草剂。 二、菊花组织培养过程 [知识点讲解] （一）影响菊花组织培养的主要因素 1.选材：一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 2.营养供应????? 培养基：常用MS 培养基营养成分：大量元素、微量元素、有机物、 植物激素 (二)实验操作过程 制备MS 固体培养基：配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌
《月季的花药培养》典型例题
课题2 月季的花药培养 例 1.某名贵花卉用种子繁殖会发生性状分离。为了防止性状分离并快速繁殖，可以利用该植物的一部分器官或组织进行离体培养，发育出完整植株。进行离体培养时不应采用该植株的（） A.茎尖 B.子房壁 C.叶片 D.花粉粒 解析：本题主要考查无性生殖特点。涉及知识点有：组织培养，体细胞，生殖细胞等。抓住无性生殖能够保持原物种特性这一特点组织培养就是无性生殖的一种方式，它是由体细胞培养而来的，含有原物种的全部基因，而花粉粒是生殖细胞。该题易陷入思维定势，联想到花粉粒的离体培养。可见，植物组织培养若取自体细胞则为无性生殖；若取自生殖细胞则为有性生殖。 答案：D 例 2. 一个初级精母细胞在减数分裂的第一次分裂时，有一对同源染色体不发生分离，所形成的次级精母细胞减数分裂的第二次分裂正常；另一个初级精母细胞减数分裂的第一次分裂正常，减数第二次分裂时，在两个次级精母细胞中，有一个次级精母细胞的1条染色体姐妹染色单体没有分开。以上两个初级精母细胞可产生染色体数目不正常的配子（以下简称不正常的配子）。上述两个初级精母细胞减数分裂的最终结果应当是（） A.两者产生的配子全部都不正常 B.前者产生一半不正常的配子，后者产生的配子不正常 C.两者都产生一半不正常的配子 D前者产生全部不正常的配子，后者只产生一半不正常的配子 解析：初级精母细胞的减数第一次分裂过程，是同源染色体分开，进入两个次级精母细胞。若此过程中同源染色体不发生分离，形成的两个次级精母细胞中，一个多了一条染色体，另一个少了一条染色体。次级精母细胞进行的减数分裂的第二次分裂，是姐妹染色单体分开，平均分配到两个精子细胞中。若此过程中姐妹染色单体不分开，形成的两个精子细胞中的染色体数目均不正常。 答案：D 例3．下图是被子植物的受精过程
人教版 选修一 月季的花药培养 作业
课题2月季的花药培养 基础巩固 1下列是被子植物花粉发育经历的各阶段排序,正确的是( ) A.小孢子四分体时期→双核期→单核居中期→单核靠边期→花粉粒 B.小孢子母细胞→单核靠边期→单核居中期→双核期→花粉期 C.小孢子母细胞→小孢子四分体时期→单核居中期→单核靠边期→花粉粒 D.小孢子四分体时期→小孢子母细胞→双核期→单核期→花粉期 解析:小孢子母细胞经减数分裂形成四个小孢子,先后经历小孢子四分体时期、单核居中期、单核靠边期、双核期,发育成花粉粒。 答案:C 2某名贵花卉用种子繁殖会发生性状分离,为了防止性状分离并快速繁殖,可以利用该植物的 一部分器官或组织进行培育,发育成完整植株。进行离体培养时不应采用该植物的( ) A.茎尖 B.子房壁 C.叶片 D.花粉粒 解析:花粉粒是由花粉母细胞经减数分裂形成的,细胞内的遗传物质与亲本相比减少了一半,培育出的植株是单倍体。所以利用植物组织培养技术繁殖名贵花卉时,不能用花粉粒。 答案:D 3下列说法错误的是( ) A.镜检选择花药时需用醋酸洋红将花粉细胞核染成红色或用焙花青—铬矾溶液染成蓝黑色 B.花期早期的花蕾营养状态及生理状态较好,可提高花粉诱导的成功率 C.用于花蕾消毒的药品有体积分数为90%的酒精、无菌水及质量分数为0.1%的氯化汞溶液等 D.除去消毒后的花药上的萼片和花瓣、剥离花药到将花药接种到培养基上,整个过程都需要在无菌条件下进行 解析:用于花蕾消毒的酒精的体积分数应为70%。 答案:C 4产生花粉植株的两种途径中,得到胚状体或愈伤组织都是通过哪个过程进行的?( ) A.分化 B.脱分化 C.再分化 D.诱导 解析:通过花药离体培养形成单倍体植株的过程中,通过脱分化得到胚状体或愈伤组织。 答案:B 5下列关于花药接种和培养的实验操作,错误的是( ) A.每瓶接种花药7~10个,20~30 d后,花药开裂形成幼小植株后才给予光照 B.花药培养至开裂后,将长出的愈伤组织及时转移到分化培养基上 C.花药培养至开裂后,将释放出的所有胚状体整体移到新的培养基上继续培养 D.对培养出来的植株作进一步鉴定和筛选
高中生物第一章无菌操作技术实践第3课时植物组织培养技术同步备课教学案苏教选修1
第3课时植物组织培养技术 [学习导航] 1.简述植物组织培养的原理和过程。2.了解MS基本培养基贮备液的配制方法。 3.举例说出激素及其对脱分化、再分化的作用。 [重难点击] 理解植物组织培养的原理和一般过程。 一、植物组织培养技术 1.含义：在无菌和人工控制的条件下，诱导离体的植物器官、组织等在适宜的培养条件下发育成完整植株的技术。 2.原理：植物细胞的全能性。植物细胞的全能性是指植物体的每个体细胞都携带来自受精卵的完整基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。 3.过程 4.激素与愈伤组织的再分化 (1)愈伤组织的细胞是一种具有分生能力的薄壁细胞。 (2)脱分化：已经分化的植物细胞或组织产生愈伤组织的过程。 (3)再分化：在一定条件下继续培养脱分化的愈伤组织，又可以重新诱导根、芽等器官的分化。 (4)生长素、细胞分裂素是启动生长、细胞分裂、脱分化、再分化的关键激素。 生长素和细胞分裂素的使用比例对分化结果的影响 使用的量实验结果 用量相当促进愈伤组织的生长 生长素＞细胞分裂素有利于根的形成 生长素＜细胞分裂素有利于芽的形成 5.MS基本培养基贮备液的种类 (1)大量元素贮备液：其中含有的大量元素有N、P、S、K、Ca、Mg。
(2)微量元素贮备液：其中含有的微量元素有Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、Co。 (3)铁盐贮备液：是由FeSO4·7H2O和Na2·EDTA(乙二胺四乙酸二钠)配制而成。 (4)有机物贮备液：其中有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素B6、维生素B1。 6.贮备液的贮藏备用：分别用玻璃瓶贮存配制好的MS培养基贮备液，并贴上标签，注明编号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中备用。 1.完善植物组织培养过程图并思考下列问题： (1)为什么高度分化的植物细胞还具有全能性？ 答案因为高度分化的植物细胞中含有该物种的全套遗传物质。 (2)高度分化的植物细胞发育成完整的植株需要哪些条件？ 答案①离体条件；②充足的营养条件；③恰当的激素种类及浓度配比；④适宜的环境条件； ⑤无菌条件。 2.MS培养基的成分主要有哪些？还需添加哪些成分？ 答案成分有大量元素、微量元素和有机物；还需添加植物激素及其他添加物(如甘氨酸、维生素等)。 3.植物组织培养的一般过程分析 (1)你认为植物组织培养的核心环节是什么？ 答案植物组织培养的核心环节为脱分化和再分化。 (2)你认为植物组织培养的再分化应先诱导生芽还是先诱导生根？ 答案应先诱导生芽，再诱导生根。 4.植物组织培养中应尽量选择什么样的材料作为外植体？为什么？ 答案应尽量选择幼嫩的植物组织或器官作为外植体。因为外植体的年龄越小，分化程度越低，组织培养的成功率就越高。 归纳总结(1)植物组织培养过程 (2)植物组织培养的过程分析
人教版教学教案课题2 月季的花药培养预习学案
课题2 月季的花药培养 学习目标 1.识记被子植物花粉发育的过程 2.通过学习花药培养的基本技术，培养设计试验、动手操作、分析解释实验现象的能力 学习重点难点 重点:1.被子植物花粉发育过程 2.花药离体培养过程 难点: 1.被子植物花粉发育过程 2.花药离体培养过程 自主学习 一．被子植物花粉发育过程 1．被子植物的花粉是在中由经过分裂形成的。所以，花粉是 的生殖细胞。 2．结合教材内容填下列示意图： [思考1]由此可见，被子植物的花粉的发育要经历时期，期和期等阶段。 [思考2]在正常情况下，一个小孢子母细胞可以产生个精子；在一枚花药中可以产生个花粉。二．产生花粉植株的两条途径 1．产生花粉植株（即单倍体植株）的两种途径：一是花粉通过阶段发育为植株，二是通过阶段发育为植株。这两种途径的区别主要取决于培养基中的种类及其的配比。 2．填写培育花粉植株的途径图解： 3．胚状体的结构及其发育过程与种子相似，所以把胚状体到从芽的过程称为，而把从愈伤组织到从芽的过程称为。 4.植物体细胞发育而来的胚状体又叫，花粉发育而来的胚状体叫，可发育为植物，要使其成为纯合的正常植株，可用处理发育中的幼苗。 三．影响花药培养的因素 1．影响花粉植株成功与否和成功率的主要因素：和等。 2．材料的选择： ①从花药来看，应当选择（初花期、盛花期、晚花期）的花药； ②从花粉来看，应当选择（四分体期、单核期、双核期、萌发期）的花粉，因为单核期以前的花 药，选择单核期以后的花药接种，。； ③从花蕾来看，应当选择（完全未开放、略微开放、完全盛开）的花蕾。 [思考3]除此之外，你认为影响花粉诱导成功率的因素还有哪些？ 植物的种类、亲本生长条件、材料的低温处理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件等。
人教版生物选修一专题综合测评3 植物的组织培养技术 含解析
专题综合测评(三) 植物的组织培养技术 (满分：100分时间：90分钟) 一、选择题(每题2分，共25题，共50分) 1．下列实例中能体现出细胞全能性的是() ①胡萝卜单个细胞培养成可育的植株 ②受精卵形成种子的过程 ③用烟草组织培养的单个组织培养出了可育的完整植株 ④由种子发育成植株 A．①③④B．①③ C．②③D．①②③ B[细胞全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。其中①和③都属于由分化的细胞经过培养形成可育的植株，体现了细胞的全能性。受精卵形成种子，但没有发育成完整个体。由种子发育成的植株实质上是由种子中的胚(新植物体的幼体)发育而来的。] 2．在植物种苗脱毒过程中，不涉及细胞的() A．有丝分裂B．分化 C．减数分裂D．全能性 C[种苗脱毒过程建立在体细胞组织培养的基础上，是体细胞经过脱分化和再分化形成个体的过程，表现了植物细胞的全能性。整个过程只有有丝分裂。] 3．关于影响植物组织培养的因素，说法正确的是() A．不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培养的难易程度相同B．在植物组织培养中，培养基中必须添加植物激素 C．提高生长素的比例，有利于促进生根 D．外植体形成愈伤组织的过程需要光照 C[不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料也会因年龄、保存
时间的长短等导致实验难易程度不同；在植物组织培养中，培养基中常常要添加植物激素，但不是都必须添加植物激素；提高生长素的比例，有利于生根；经脱分化形成愈伤组织的过程不需要光照，试管苗形成后才需要见光培养。] 4．植物组织培养过程中发生脱分化时，可能发生变化的有() ①植物细胞的形态结构②细胞内遗传物质③细胞内表达的基因④细胞分裂能力 A．①②③④B．①②③ C．①③④D．①②④ C[脱分化是由高度分化的具有特定形态、结构和生理功能的细胞，在激素的诱导下，恢复到未分化状态的过程。在该过程中，细胞原有的形态结构和功能丧失，而其细胞分裂能力增强，全能性表达能力增加，细胞内遗传物质不变。] 5．下列关于植物组织培养的说法错误的是() A．一般来说进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养 B．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 C．在培养过程中要先让愈伤组织生根后再使其生芽 D．移栽生根的试管苗之前，先打开瓶口，让试管苗在培养间生长几日 C[在培养过程中要先让愈伤组织生芽后再使其生根。] 6．在制备MS固体培养基的过程中，操作有误的是() A．提前配制的母液，一般在4 ℃条件下保存 B．配制母液时，无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍 C．配制培养基时，琼脂要及早加热熔化 D．MS培养基的pH要求不太严格，可控制为5～7 D[MS培养基的pH直接影响到细胞对离子的吸收，过酸或过碱都对植物材料有很大的影响，所以pH一般应控制在5.8左右。] 7．菊花的组织培养需要严格的无菌操作，下列说法不正确的是() A．对分装好的培养基需进行高压蒸汽灭菌 B．用酒精对外植体进行消毒时，持续的时间不能太长
月季的花药培养过程
课题2月季的花药培养 教材内容解读 要点1植物的花药培养的育种意义 育种工作者采用花药培养的方法，使花粉粒发育为单倍体植株，再经过人工诱导使染色体数目加倍，重新恢复到正常植株的染色体数目。这样的植株不仅能够正常生殖，而且每对染色体上的成对的基因都是纯合的，自交产生的后代不会产生性状分离。单倍体育种不仅缩短了育种周期，也为新品种的培育开辟了新途径。 要点2被子植物的花粉发育 （1）被子植物的雄蕊通常包含花丝、花药两部分。花药为囊状结构，内部含有许多花粉。花粉是由花粉母细胞经过减数分裂而形成的。 （2）被子植物花粉的发育要经历四分体时期、单核期和双核期等阶段。 ①在四分体时期，4个单倍体细胞连在一起。 ②进入单核期时，四分体的4个单倍体细胞彼此分离，形成4个具有单细胞核的花粉粒。这时的细胞含浓厚的原生质，核位于细胞的中央（单核居中期）。随着细胞不断长大，细胞核由中央移向细胞一侧（单核靠边期）。 ③进入双核期时，靠近细胞一侧的细胞核，分裂成1个生殖细胞核和1个花粉管细胞核，进而形成两个细胞，一个是营养细胞，一个是生殖细胞。生殖细胞将再分裂一次，形成两个精子。 要点3产生花粉植株的两种途径 通过花药培养产生花粉植株（即单倍体植株）一般有两种途径： 一种是花粉通过胚状体阶段分化发育成为植株；另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，将其诱导再分化成植株。 这两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。 要点4影响花药培养的因素 （1）不同植物的诱导成功率很不相同。 （2）就同一植物来说，亲本植株的生理状况对诱导成功率也有直接影响。 （3）花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素。 花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。
新人教版高中生物选修1植物的组织培养技术
植物的组织培养技术 课时安排：1课时 课题目标： 1．说明植物组织培养的基本原理和影响花药培养的因素。 2．说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径。 3．学习植物组织培养的基本技术，进行菊花或其他植物的组织培养。 4．学习花药培养的基本技术，尝试用月季或其他植物的花药进行培养。 课题重点： 1．植物组织培养过程中使用的无菌技术。 2．选取适宜的培养材料和培养基。 课题难点： 1．植物组织培养过程中使用的无菌技术。 2．选取适宜的培养材料和培养基。 考点点拨： 一、相关知识 （一）基本概念 植物组织培养、细胞分化、俞伤组织、脱分化、区分化、再分化、植物激素、外植体、接种；被子植物、月季、花药、花粉、雄蕊、雌蕊 （二）知识网络 菊花的组织培养 基础知识 实验操作：制备MS 固体培养基→外植体消毒→接种→培养 →移栽→栽培 结果分析与评价 课题延伸 植物组织培养的基本过程 影响植物组织培养的因素 离体的植物组织或细胞———→ 愈伤组织——→根、茎、叶 脱分化 再分化 1．不同的植物组织培养难易程度差别很大 2．离体的植物组织和细胞对营养、环境的要求相对特殊，需要配置特殊的培养基 3．植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素 4．温度、光照和PH 对植物组织培养影响和很大 基础知识 被子植物的花粉发育 产生花粉植株的两种途径 途径1：花药中的花粉——→胚状体—→丛芽→生根 →移栽 途径2：花药中的花粉——→愈伤组织——→丛芽 →生根→移栽 脱分化 分化 脱分化 再分化
月季的花药培养 （三）疑难解析 1．细胞分化、细胞全能性 细胞分化指细胞后代在形态、结构和功能等发生变化的过程，归根结底是某些功能基因的开启或者关闭。一般说来，终端分化细胞已经失去分化潜能，只具有单能性；而大部分细胞只保留了部分分化潜能，称为多能性。植物体的任何一个细胞都具有生长分化成为一个完整植株的能力，称为植物细胞的全能性。 2．植物组织培养技术 是植物细胞工程学、遗传学、植物生理学、生物化学与分子生物学研究的重要基本技术。也就是说，植物组织培养技术不仅仅用于快速繁殖，而是有着相当广泛的用途。例如：单倍体育种、种质保存、生理学研究和基因转化等等。近年来，组织培养技术日趋完善，但仍然存在很大的不足和有待改善的方面，这就需要广大的科学工作者和组织培养的爱好者的共同努力。目前，组培快繁技术在兰花等观赏花卉中基本实现了工厂化育苗，由此可见其应用前景的光明。考虑到技术与产业之间的距离，切忌盲目建立大规模的组织培养室，在某一种植物工厂化育苗系统的建立之前一定要充分审视各相关要素，权衡利弊后再行建设，以减少无谓的投入。 植物组织培养就是利用植物的全能性进行离体无菌植物培养的一门技术。植物组织培养最原始的意义是指愈伤组织培养，但发展至今，其范围已经扩展至植物和它的离体器官、组织、细胞和原生质体的离体无菌培养： （1)植株培养。指以具备完整植株形态的材料（如幼苗和较大的植株）作为外植体的无菌培养。 （2）胚胎培养。指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养。 （3)器官培养。指以植物的根，茎，叶，花，果等器官为外植体的离体无菌培养，如根的根尖和切段，茎的茎尖，茎节和切段，叶的叶原基，叶片，叶柄，叶鞘和子叶，花器的花瓣，雄蕊（花药，花丝），胚珠，子房，果实等的离体无菌培养。 （4)组织培养。指以分离出植物各部位的组织（如分生组织，形成层，木质部，韧皮部，表皮，皮层，胚乳组织，薄壁组织，髓部等），或已诱导的愈伤组织为外植体的离体无菌培养。这是狭义的组织培养 ．．．．．．．。 （5)细胞培养。指以单个的游离细胞（如用果酸酶从组织中分离的体细胞，或花粉细胞，卵细胞）为接种体的离体无菌培养。 （6)原生质体培养。指以除去细胞壁的原生质体为外植体的离体无菌培养。 植物组织培养的成功与否取决于外植体的制备、无菌操作和人工培养环境。外植体的制备是能否建成离体繁殖系要过的第一关。所谓的外植体是指将外界生长的植物的细胞和组织经过一系列的无菌处理形成的有活性的无菌组织和细胞。习惯上我们经常使用化学药剂处理，例如氯化汞、次氯酸盐或者抗生素等。将从母株上取下的组织进行一定的剥离和分割，经过
1.3 植物组织培养技术 教案 (苏教版选修1)
1.3 植物组织培养技术教案（苏教版选修1） ●课标要求 1．结合植物组织培养的过程理解植物组织培养的含义、原理。 2．结合天竺葵的组织培养掌握植物组织培养的操作过程。 ●课标解读 1．掌握培养基的配制。 2．掌握植物组织培养过程中各项技能。 3．掌握合理利用激素诱导愈伤组织脱分化、再分化。 ●教学地位 本节涉及到植物组织培养的概念、原理、过程、培养基的配制、组织培养的操作技术等内容，是该章的核心内容之一，是高考中常考的内容。 ●教法指导 1．植物组织培养的过程可用多媒体课件展示。 2．天竺葵的组织培养可直接进入实验室进行实际实验操作。 ●新课导入建议 利用课件向学生展示花卉生产过程，感知组织培养给人们带来的便利。 ●教学流程设计 学生课前预习：阅读教材P25－32，填写【课前自主导学】，完成“思考交流”。?步骤1：情景导课：以【新课导入建议】引出本节课题。?步骤2：根据创设的情景，引出基因工程的概念，并通过【课堂互动探究】探究1分析、理解植物组织培养的过程。通过例1巩固、提高。?步骤3：结合植物组织培养的条件和实际操作过渡至MS培养基的配制和实验操作中的注意事项的教学。? 步骤7：通过【当堂双基达标】进行当堂检测验收。?步骤6：引导学生通过合作，整理本节重点、难点内容，利用【本课知识小结】进行总结，建立知识网络。理解并记忆【结论语句】。?步骤5：回扣基础知识，将检查、批阅【课前自主导学】时学生出错较多的部分进行强化，重点对【正误判断】部分进行辨析。?步骤4：通过【课堂互动探究】探究2帮助学生认识MS培养基配制和组织培养的实验操作。利用例2验收、巩固。
1.含义指在无菌和人工控制条件下，诱导离体的植物器官、组织等在适宜的培养条件下发育成完整植株的技术。 2．原理 植物细胞的全能性，是指植物体的每个体细胞都携带着一套来自受精卵的完整基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。 3．植物茎尖组织培养的主要过程 优良母株――→分离接种 诱导形成愈伤组织―→诱导芽的分化 ―→ 试管
人教版 选修一 植物的组织培养技术 作业
人教版选修一植物的组织培养技术一、选择题(每小题2分,共40分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的) 1以下实验不能说明细胞具有全能性的是( ) A.胡萝卜韧皮部细胞培育成植株 B.紫色糯性玉米种子培育成植株 C.转入抗虫基因的棉花细胞培育成植株 D.利用马铃薯的茎尖培育无病毒植株 答案:B 2在植物组织培养过程中,先使用细胞分裂素,后使用生长素,实验结果是( ) A.有利于细胞分裂,但细胞不分化 B.细胞既分裂也分化 C.分化频率提高 D.有利于分化,但不分裂 答案:B 3细胞分化是生物界普遍存在的一种生命现象,下列叙述错误的是( ) A.分化发生在生物体的整个生命进程中 B.分化是基因在特定时间和空间条件下选择性表达的结果 C.未离体的体细胞不会表现出全能性 D.分化过程中遗传物质发生了改变 解析:分化是基因的选择性表达,发生在整个生命进程中;分化过程中遗传物质没有发生改变;而细胞全能性的表现必须在离体条件下进行。 答案:D 4下列有关植物细胞与组织培养的叙述,错误的是( ) A.花药、胚不能作为组织培养的材料 B.大多植物细胞具有全能性 C.外植体是指用于培养的植物组织或器官 D.外植体可诱导出愈伤组织 解析:花药和胚均可作为外植体用于植物组织培养。但不同的是由胚培育而成的植物体含有本物种正常数目的染色体,而由花药培育而成的植物体为单倍体。其原因是花药离体培养的实质是花粉粒经过有丝分裂,直接发育成植物体。 答案:A 5下列对产生花粉植株的途径的叙述,错误的是( ) A.花粉可通过胚状体阶段发育成植株 B.花粉可先形成愈伤组织再诱导分化成植株 C.通过花粉培养产生花粉植株的途径主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比 D.花粉经脱分化形成胚状体,再分化出根,然后诱导生芽 解析:产生花粉植株有两种途径:一是花粉通过胚状体阶段发育成植株;二是花粉在诱导培养基上
高中生物 3.2《月季的花药培养》教学设计 新人教版选修1
课题2 月季的花药培养 教材内容解读 要点1 植物的花药培养的育种意义 育种工作者采用花药培养的方法，使花粉粒发育为单倍体植株，再经过人工诱导使染色体数目加倍，重新恢复到正常植株的染色体数目。这样的植株不仅能够正常生殖，而且每对染色体上的成对的基因都是纯合的，自交产生的后代不会产生性状分离。单倍体育种不仅缩短了育种周期，也为新品种的培育开辟了新途径。 要点2 被子植物的花粉发育 （1）被子植物的雄蕊通常包含花丝、花药两部分。花药为囊状结构，内部含有许多花粉。花粉是由花粉母细胞经过减数分裂而形成的。 （2）被子植物花粉的发育要经历四分体时期、单核期和双核期等阶段。 ①在四分体时期，4个单倍体细胞连在一起。 ②进入单核期时，四分体的4个单倍体细胞彼此分离，形成4个具有单细胞核的花粉粒。这时的细胞含浓厚的原生质，核位于细胞的中央（单核居中期）。随着细胞不断长大，细胞核由中央移向细胞一侧（单核靠边期）。 ③进入双核期时，靠近细胞一侧的细胞核，分裂成1 个生殖细胞核和1个花粉管细胞核，进而形成两个细胞，一个是营养细胞，一个是生殖细胞。生殖细胞将再分裂一次，形成两个精子。 要点3 产生花粉植株的两种途径 通过花药培养产生花粉植株（即单倍体植株）一般有两种途径： 一种是花粉通过胚状体阶段分化发育成为植株；另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，将其诱导再分化成植株。 这两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。 要点4 影响花药培养的因素 （1）不同植物的诱导成功率很不相同。 （2）就同一植物来说，亲本植株的生理状况对诱导成功率也有直接影响。 （3）花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素。 花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。 （4）亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度等对诱导成功率都有一定影响。 要点5 实验操作 （1）材料的选取 要通过镜检来确定花药中的花粉是否处于适宜的发育期。 （1）花药中的花粉 胚状体 丛芽 （2）花药中的花粉 愈伤组织 丛芽 脱分化 分化 脱分化 再分化 生根 移栽 诱导
实验六：草莓花药离体培养
实验六：草莓花药离体培养 一、实验目的 了解草莓花药离体培养的原理，初步掌握花药离体培养的方法。 二、实验器材和用具 材料：草莓花瓣 试剂：V/V为70%的酒精、无菌水、0.1%的氯化汞溶液、醋酸洋红试剂 器具：显微镜、胶头滴管、吸水纸、培养皿等 草莓花药培养基配方 1 刘浩，阮玉妹，陈丽君MS＋6-BA 2mg/L＋NAA 0.2mg/L＋糖30g/L+琼脂8% 2 李丕海，蒋英军MS+2,4-D 2mg/L+6-BA 0.2mg/L +蔗糖30g/L+琼脂8% 3 廖璐莎，施洁燕MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8% 4 黄健，黄忠，梁幸MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L+糖30g/L+琼脂8％ 5 谢蜜蜜，林珍珍MS+KT 1.5mg/L+6-BA 0.2mg/L+NAA 1.5mg/L+糖25g/L+琼脂8% 6 梁嘉麟梁新榜MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.3mg/L +蔗糖30g/L+琼脂8% 7 覃佳，林秋萍，陈甘霖MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+糖30g/L+琼脂8％ 三、实验步骤 1、材料的选取 用醋酸洋红法确定花粉发育时期，通过镜检来确定其中的花粉是否处
于单核期。 注：花粉细胞核内有染色体，染色体主要由DNA和蛋白质组成，醋酸洋红为碱性染色剂，色体容易被染色。通过染色，可以确定细胞核为单核期还是双核期，是单核居中期还是单核靠边期。一般单核靠边期的花药培养成功率最高。 2、材料的消毒 1、花蕾用V/V为70%的酒精浸泡30秒 2、无菌水清洗 3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟（也可质量分数为 1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液） 5、无菌水冲洗3~5次 用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即。 3、接种和培养 灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。通常每瓶接种花药7-10个，温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。
人教版生物选修一讲义：专题3 课题1 菊花的组织培养 含答案
课题1 菊花的组织培养 学习目标：1.知道细胞分化、细胞的全能性、组织培养流程及影响组织培养的因素。(重点) 2.识记MS培养基的营养要素及功能。(重点) 3.尝试植物组织培养的实验操作过程。(难点) 1．植物组织培养的基本过程 (1)理论基础：植物细胞的全能性。 (2)细胞分化：在植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。 (3)基本过程 离体的植物器官、组织或细胞――→ 脱分化愈伤 组织 ――→ 再分化 根、芽―→ 完整 植株 ①愈伤组织：由离体的植物组织或细胞经脱分化形成的一团排列疏松而无规则、高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。 ②脱分化：又叫去分化，是由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。 ③再分化：愈伤组织继续培养，重新分化成根或芽等器官的过程。 2．影响植物组织培养的因素 (1)植物材料 ①不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。 ②同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。菊
花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 (2)营养物质 ①大量元素，如N 、P 、K 、Ca 、Mg 、S 。 ②微量元素，如B 、Mn 、Cu 、Zn 、Fe 、Mo 、I 、Co 。 ③有机物，如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素，以及蔗糖等。 (3)植物激素：生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，二者的浓度、使用的顺序及用量的比例等都会影响实验结果。 (4)环境条件：如pH 、_温度、光照等，进行菊花的组织培养一般将pH 控制在5.8左右，温度控制在18～22 ℃，并且每日用日光灯照射12 h 。 3．菊花组织培养的实验操作 制备MS 固体培养基→外植体消毒 →接种→培养→移栽→栽培 (1)制备MS 固体培养基： 配制各种母液―→配制培养基―→灭菌。 (2)外植体消毒：取菊花嫩枝―→流水冲洗―→加洗衣粉刷洗―→流水冲洗20 min ――→吸干体积分数为70%的酒精消毒6～7 s ―→无菌水清洗――→吸干质量分数为0.1%的氯化汞溶液消毒1～2 min ―→无菌水清洗(至少3次)。 (3)接种：菊花茎段插入培养基时注意方向，不要倒插。每瓶接种6～8块外植体。 (4)培养：最好放在无菌箱中培养，并定期消毒。培养温度控制在18～22_℃，并且每日用日光灯照射12_h 。 (5)移栽：移栽前应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日。然后用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中。 (6)栽培：将幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花。 1．判断对错 (1)一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养。 ( )