地中海贫血基因检测结果判读
地中海贫血基因检测试剂结果判读
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●当β地贫复合α地贫时,患者不仅有β地贫的缺陷同时又有α地贫基因的缺失,这使得α和β珠蛋白琏的不平衡状态有所改善,表现临床症状可以较轻,实验室检查
中凸显的是β地贫特征，因此临床上要重视这种复合地贫患者的检出,避免漏诊。另外患者为复合地贫时,他无论与任何一种轻型地贫者婚配均存在1 /4生育重型地贫患儿的风险,因此,当夫妇一方为α地贫另一方为β地贫时,β地贫的一方一定要检查α地贫基因,以排除复合地贫的存在。
●当夫妇一方分别为α地贫,另一方为β地贫基因携带时，他们生育复合型地贫患儿的风险为1 /4,因此出生后子代的基因确诊对其今后的婚配指导是很有必要
的。
●地中海贫血患者多次输血后容易造成体铁的过度沉积,并可损害心脏及肝肾功能,临床上对多次输血患者需进行去铁治疗以减轻铁负荷。然而地中海贫血患者
并不是总伴体铁负荷过重，地中海贫血患儿也可能发生铁缺乏,尤其是婴幼儿及轻型β地中海贫血患儿。因此对地中海贫血患儿进行常规铁指标的测定,对伴铁缺乏者给予适当补铁治疗,可以提高Hb 浓度,减缓贫血症状。
3．地中海贫血治疗
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轻型地贫无需特殊治疗。中间型和重型地贫应采取下列一种或数种方法给予治疗。
1.一般治疗：注意休息和营养，积极预防感染。适当补充叶酸和维生素E。
2.输血和去铁治疗，此法在目前仍是重要治疗方法之一。
3.使用铁鳌合剂。
4.脾切除，脾切除对血红蛋白H 病和中间型β地贫的疗效较好，对重型β地贫效果差。脾切除可致免疫功能减弱，应在5～6岁以后施行并严格掌握适应症。
5.造血干细胞移植，是目前能根治重型β地贫的方法。如有HLA 相配的造血干细胞供者，应作为治疗重型β地贫的首选方法。
【预防】
●开展人群普查和遗传咨询，作好婚前指导以避免地贫基因携带者之间联姻，对预防本病有重要意义。
●地贫产前诊断指征：1.曾生育过重型或中间型α或β地贫患儿的夫妇。2.夫妇双方均为α地贫携带者；夫妇一方为α
地贫携带者，配偶为β地贫复合α地贫携带者。3.夫妇双方均为β地贫携带者。《2006省卫生厅地中海贫血产前诊断技术规》
●采用基因分析法进行产前诊断，可在妊娠早期对重型β和α地贫胎儿作出诊断并及时中止妊娠，以避免胎儿水肿综合
征的发生和重型β地贫患者出生是目前预防本病行之有效的方法。
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《2006广东省卫生厅地中海贫血产前诊断技术规范》
《2006卫.. .专业. .
β地中海贫血基因检测怎么做
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢β地中海贫血基因检测怎么做 导语：地中海贫血是对我们的身体危害比较大一种疾病，一般比较轻的患者，症状不怎么明显，如果严重的话，有的时候，还会出现晕倒休克等一些不好的 地中海贫血是对我们的身体危害比较大一种疾病，一般比较轻的患者，症状不怎么明显，如果严重的话，有的时候，还会出现晕倒休克等一些不好的现象出现，有很多人认为地中海贫血会遗传，这样的疾病，不仅仅影响我们的身体健康，甚至还会影响我们的下一代的身体，那么应该怎么取检查呢？ 地中海贫血相关的检查，可以做血红蛋白全套及地中海贫血基因检测，不需要空腹；但是如果根据您的病情，还需要做其他需要空腹检查的话，建议您还是空腹来检查。 如果女生这三个项目都低于正常值的话，即有90%的可能携带地贫基因；如果男士MCV和MCH都有降低的话而HGB没有降低，即有90%的可能是地贫基因的携带者.需要去医院做基因分析，约1000多元，就能明确知道自己的基因.积极行动，预防地贫，刻不容缓！x0d静止型α地中海贫血基因携带者和β地中海贫血基因携带者同健康人无异，轻型α地中海贫血和β地中海贫血仅有轻度贫血，常无明显的临床症状，在幼儿时期和孕期易误诊为缺铁性贫血，在做血液常规检查时β地中海贫血基因携带者、轻型α地中海贫血患者和轻型β地中海贫血患者会有异常的发现，他们均有平均红细胞体积(MCV)和平均红细胞血红蛋白浓度(MCH)的下降，其中的β地中海贫血经血红蛋白A2测定可明确诊断，而α地中海贫血需经基因检查才能明确诊断. 静止型α地中海贫血基因携带者常无MCV和MCH的下降.α地中海贫血复合β地中海贫血后MCV、MCH值的变化会有所改变.因此建议血 预防疾病常识分享，对您有帮助可购买打赏
地中海贫血基因检测
地中海贫血基因检测 说起地中海，你会想到什么？ 诱人的沿岸风景和美食？浪漫的地中海风格家装？ 对于作者而言，说起地中海，脑海中第一个蹦出来的词汇是地中海贫血。 地中海贫血，即珠蛋白生成障碍性贫血，是全球分布最广、累及人数最多的常染色体隐性单基因遗传病。 地中海贫血首先在地中海沿岸国家发现，因此得名。地贫好发于地中海地区、东南亚、印度次大陆和在我国南方。在我国，广东、广西、海南、等地是高发地区。 地中海贫血有哪些危害？ 地中海贫血分为α型、β型、δβ型和δ型4种，其中β和α地贫较为常见。根据病情轻重的不同，地中海贫血可分为重型、中间型和轻型三种。 重型α地贫可引起胎儿水肿，会造成胎死腹中或新生儿死亡。 重型β地贫胎儿出生时看似正常，但往往到3-6个月时会逐渐出现贫血，且贫血会越来越严重。如果不治疗，一般在5岁左右死亡。 中间型地贫患者的症状差异很大，重度的中间型地贫患者会出现肝脾肿大等明显的地贫特征。由于中间型地贫患儿需长期输血，长大后基本丧失劳动力。 轻型患者是轻度贫血或没有症状，一般也不需要治疗。 我没有贫血，会生出地贫的孩子吗？ 组成血红蛋白的珠蛋白肽链的结构和合成都是由基因控制的。地贫发生的主要原因就是基因发生缺失或者突变，使珠蛋白出现合成障碍或速率降低，导致血红蛋白产量减少、引起溶血性贫血。 地中海贫血是隐性遗传病，有些人是没有任何贫血症状、看似完全健康的地贫基因携带者。不经过血液和DNA检查，看起来健康的人根本无法判断是否地贫 ????
基因携带者或者轻型地贫患者。 父母双方各将2个α珠蛋白基因、1个β珠蛋白基因遗传给孩子。如果夫妻携带了地贫基因，这些突变就有机会遗传给孩子，让孩子成为地贫患者。 如果夫妻恰好为同型地贫血基因携带者，每一次怀上的孩子有1/4的机会为正常，1/2的机会为基因携带者，另1/4的机会为重型地贫。 如果夫妻双方携带的是不同型的地贫基因，或者其中一方携带地贫基因，孩子一般不会得重型地中海贫血。 如何预防地贫？ 对大部分中重型地贫患者来说，输血与排铁是常用的治疗方法，但这两个方法治标不治本，而且长期的治疗给病人和家庭造成很大的精神和经济负担。 暂时来说造血干细胞移植是唯一根治地贫的临床方法，但受限于费用昂贵、难以找到合适配型，所以受益者人数少。 比起治疗，预防无疑是更有效的办法。 地中海贫血是遗传病，不会传染，因此只要夫妻双方做好婚前检查和孕前检查，了解双方有无携带地贫基因，就能避免生出中间型、重型地贫的孩子。 夫妻双方可通过查血常规、血红蛋白电泳等简单方法先做初筛，如结果发现地贫可疑，则需要做地贫基因检测来确诊是否地贫以及是哪一类型地贫。 此外，准妈妈在妊娠11-14周做绒毛检查、15——24 周期间做羊水穿刺、孕24周以后做脐静脉穿刺术，或无创DNA检测，都能检测出胎儿是否有地贫基因。如果查出中间型、重型地贫胎儿，医生一般会建议引产。 ????
地中海贫血基因检测案例
地中海贫血基因检测案例 ——从罕见地贫基因到双线检测 钦州市妇幼保健院 基因科学与遗传医学诊断中心 汇报人：龚菲菲组员：龙驹、龚菲菲、施狄秋、张城鸿
引言 地中海贫血是一种单基因遗传疾病，广西人群中地贫基因携带率约为25%。 目前常规地贫基因分析试剂盒所检测的范围是4种α缺失基因、3种非缺失型α地贫和17种非缺失型β地贫。 研究表明，人群中有一定的地贫基因携带者，其携带的基因型不在常规地贫基因检测试剂盒检测范围内。 本案例将阐述一例由罕见地贫基因的检出而改进地贫基因检测分析流程，进而降低地贫基因检测漏诊风险的事例。
2015年6月，一对夫妇来我院进行地中海贫血基因检测。在检查过程中，我们发现了一些问题。 先证者（来自A家系）是一个28岁的男性个体，其妻子在孕期4个月时检出为--SEA携带者。其丈夫血液学数据如表所示。 结果显示MCH稍低，于是采用MLPA进行检测以排除罕见型。 AⅡ-1 性别-年龄M-28 MCV(fL) 82.3 MCH(pg) 26.5 Hb(g/dL) 16.1 HbF (%) 0.8 HbA2 (%) 2.4 Hb Bart’s+Hb H (%) 0 Ferritin (μg/L)306.8 α 常规基因型αα/ααβ基因型βA/βA 一例罕见地贫家系的检出 该先证者的临床表型
MLPA结果图 MLPA结果显示其缺失的断裂点位于337和142探针，以及283和310探针之间。同时采集了他们家系进行分析。此时，也发现一例患儿疑似携带该变异，合并研究。结果显示，该家系疑似携带2.4KB缺失型基因
电泳和测序验证-α2.4等位基因的确诊。 （A）家系A和一例HbH 病患者的琼脂糖电泳图 （wt表示野生型）。3个 个体检出300bp的PCR产 物。 （B）测序结果以及-α2.4等 位基因的示意图。
地中海贫血表型筛查和基因诊断的现状及展望
地中海贫血表型筛查和基因诊断的现状及展望 作者：周玉球， ZHOU Yu-qiu 作者单位：519001,珠海市妇幼保健院检验科珠海市医学遗传研究所 刊名： 中华检验医学杂志 英文刊名：Chinese Journal of Laboratory Medicine 年，卷(期)：2012,35(5) 被引用次数：3次 参考文献(22条) 1.Patrinos GP;Kollia P;Papadakis MN Molecular diagnosis of inherited disorders:lessons from hemoglobinathies 2005 2.Rund D;Rachmilewitz E Beta-thalassemia 2005 3.徐湘民地中海贫血预防控制操作指南[外文期刊] 2011 4.Weatherall DJ;Clegg JB The thalassemia syndromes 2001 5.NHS Sickle Cell and Thalassaemia Screening Programme.Handbook for laboratories 6.Ryan K;Bain BJ;Worthington D Significant haemoglobinopathies:guidelines for screening and diagnosis[外文期刊] 2010(1) 7.Galanello R;Eleftherious A;Tarager-Synodinos J Prevention of thalassemias and other haemoglobin disorders 2003 8.Old JM Screening and genetic diagnosis of haemoglobin disorders[外文期刊] 2003 9.周玉球;商璇;尹保民1998-2010年珠海市地中海贫血大规模人群的遗传筛查和产前诊断结果分析 2012 10.Demir A;Yarali N;Fisgin T Most reliable indices in differentiation between thalassemia trait and iron deficiency anemia[外文期刊] 2002 11.Stephens AD;Angastiniotis M;Baysal E ICSH recommendations for the measurement of Haemoglobin A2 2012 12.Stephens AD;Angastiniotis M;Baysal E ICSH recommendations for the measurement of Haemoglobin F 2012 13.Joutovsky A;Hadzi-Nesic J;Nardi MA HPLC retention time as a diagnosis tool for hemoglobin variants and hemoglobinopathies:a study of 60000 samples in a clinical diagnosis laboratory 2004 14.Van Delft P;Lenters E;Bakker-Verweij M Evaluating five dedicated automatic devices for haemoglobinopathy diagnostics in multi-ethnic populations 2009 15.Higgins T;Mack M;Khajuria A Comparion of two methods for the quantification and identification of hemoglobin variants 2009 16.Waneesorn J;Panyasai S;Kongthai K Comparison between capillary electrophoresis and high performance liquid chromatography for detection and quantification of Hh constant spring[Hb CS; α142,Term → Gln (TAA 》 CAA IN α2)] 2011 17.Munkongdee T;Pichanun D;Butthep P Quantitative analysis of Hb Bart's in cord blood by capillary electrophoresis system 2011 18.Chan LC;Ma SK;Chan AYY Should we screen for globin gene mutations in blood samples with mean corpuscular volume (MCV) greater than 80 fl in areas with a high prevalence of thalassemia 2001
地中海贫血基因检测试剂结果判读
地中海贫血基因检测试剂结果判读 亚能生物技术（深圳）有限公司 1.α-地中海贫血基因检测试剂结果判读 病理生理改变非常轻微，临床一般无症状。红细胞形态正常，出生时脐带血中Hb Bart's含量为～ 但3个月后即消失（少部分可见MCV＜79fl，MCH＜27pg，红细胞脆性试验阳性)。 遗传学：父母中至少一方为α地中海贫血。 左缺失涉及整个α2－珠蛋白基因缺失，要比右缺失贫血程度要严重。 轻型地贫无需特殊治疗。 尚能代偿性地合成相当数量的α链，临床上亦无症状或有轻度贫血症状，肝脾无肿大。红细胞形 态有轻度改变，血液学检查可呈现平均红细胞体积和平均红细胞血红蛋白的降低 (如大小不等、中央 浅染、异形等；红纽胞渗透脆性降低；变性珠蛋白小体阳性； HbA2和HbF含量正常或稍低。患儿脐 血Hb Bart's含量为～，于生后6个月时完全消失。) 实验室检查：出生时Hb Bart’s可占5%～15%，几个月后消失，红细胞有轻度形态改变，可见 靶形红细胞，血红蛋白稍降低或正常，MCV＜79fl，MCH＜27pg，红细胞脆性试验阳性。 遗传学：父母一方或双方为α地中海贫血。 一般不需要治疗。 慢性溶血性贫血，此型临床表现差异较大，出现贫血的时间和贫血轻重不一（少数患者血红蛋白可 低于60g/L或高于100g/L）。大多在婴儿期以后逐渐出现贫血，疲乏无力，肝脾大，轻度黄疽；年 龄较大患者可出现类似重型β地贫的特殊面容。合并呼吸道感染或服用氧化性药物，抗疟药物等可诱
发急性溶血而加重贫血，甚至发生溶血危象。 实验室检查：红细胞渗透脆性减低；变性珠蛋白小体阳性；HbA2及HbF 含量正常。红细胞形态基 本同重型β地中海贫血所见，红细胞内可见包涵体。骨髓中红细胞系统增生极度活跃。血红蛋白电泳 出现HbH 区带，HbH 成分占5%～30%(个别患者HbH 成分可小于5%或高达40%)，也可出现少量Hb Bart ’s （出生时Hb Bart ’s 可达15%以上）。随年龄增长，HbH 逐渐取代Hb Bart's ，其含量约为 ～。包涵体生成试验阳性。非缺失型血红蛋白H 病可出现微量Hb Constant Spring 。 遗传学：父母双方均为α地中海贫血。 胎儿常于30～40周时流产，死胎或娩出后半小时内死亡，胎儿呈重度贫血，黄疽，水肿，肝脾肿大，腹水，胸水。体腔积液，胎盘巨大且质脆。孕妇可有妊娠高血压综合征。 实验室检查：脐血血红蛋白明显降低，红细胞中心浅染、形态不一、大小不均，有核红细胞显著增多，靶形红细胞增多。血红蛋白电泳：Hb Bart ’s 成分＞70%，少量Hb Portland ，可出现微量 HbH 。无HbA 、HbA2和HbF 。 2．β-地中海贫血基因检测试剂结果判读
地中海贫血的诊断方法.doc
地中海贫血的诊断方法 B-地中海贫血的筛查和诊断主要依赖实验室检查，方法主要有： 1 血常规检测 地中海贫血的重要特征之一是小细胞低色素性贫血，如MCV≤80 fl，MCH≤25．0 Pg，则可疑为地中海贫血患者或基因携带者，可同时测定血清铁和铁蛋白，以排除缺铁性贫血。 2 红细胞渗透脆性试验(一管法) 其原理是地中海贫血红细胞膜表面粗糙、凹陷、折叠和浆膜扩展，膜与内容物之比增大，对渗透溶解的抗性增加，在0．32％(或0．36％)NaC1中溶解度降低(脆性降低)。一管法可用于地中海贫血群体筛查。 3 血红蛋白(Hb)电泳Hb电泳 是检测地中海贫血、异常血红蛋白最常用的方法，可观察到HbE、HbH等异常血红蛋白区带，同时可定量检测HbF、HbA2的含量并区分常见类型的地中海贫血。有研究显示MCV、Hb电泳和红细胞脆性实验三者联合检测的灵敏度可达100％，阴性预告值达100％，联合特异度可达100％，阳性预告值达100％DS。 4 高效液相色谱技术(HPLC) 原理：采用微柱法离子交换层析和梯度洗脱技术，全自动分析仪可分离血红蛋白的变异体与亚型，容易发现重型和轻型B地中海贫血。在操作上，HPLC采用的是全血标本，不需要制备Hb液，只要将全血标本直接放在仪器上，通过电脑操作便能实现HbA、HbA2、HbF等定
量检测。优点：所需样本量少，自动化程度高，操作简单，快速，能消除人为误差，结果准确。HPLC也可用于胎儿脐带血的产前诊断，可诊断出重型B地中海贫血，但不能区分正常胎儿和杂合子胎儿。近年来，地中海贫血高发地区也采用此法进行携带者检测。 5 基因诊断 近年来，随着分子生物学研究领域的不断发展，从最初的B珠蛋白基因簇限制性酶切多态性检测至目前的聚合酶链反应(PCR)技术结合其他分子生物学方法，B地中海贫血的诊断已逐步改进和完善。基因诊断方法有下列几种： 5．1 限制性片段长度多态性连锁分析(RFLP连锁分析) 原理：DNA限制性内切酶可识别并切割DNA上特定的核苷酸序列，得到一定长度的DNA片段，而碱基的突变可导致酶切位点的丢失或形成，从而改变酶切片段的大小。突变基因在经过相应的限制性内切酶水解后，其电泳条带的数量和大小就会发生改变，根据这些改变可判断出突变是否存在。缺点：由于单独使用该方法，不能直接测出受试者突变基因的类型，必须结合寡核苷酸探针等技术，故其应用范围有一定限制，且操作繁琐。如果母亲或父亲在所有的多态性位点上都为纯合子，无法用此方法进行产前诊断，或者患儿和父母所有位点上都是杂合状态，只能进行50％的排除性诊断。 5．2 探针斑点杂交技术(allele—specific oligonucleotide ASO)应用引物扩增珠蛋白基因，同时合成与正常序列和突变序列完全互补的寡核苷酸探针。将PCR扩增产物点在尼龙膜上，分别与
地中海贫血基因检测结果判读
地中海贫血基因检测结果 判读 Prepared on 22 November 2020
地中海贫血基因检测试剂结果判读 亚能生物技术（深圳）有限公司 1．α-地中海贫血基因检测试剂结果判读
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●当β地贫复合α地贫时,患者不仅有β地贫的缺陷同时又有α地贫基因的缺失,这使得α 和β珠蛋白琏的不平衡状态有所改善,表现临床症状可以较轻,实验室检查中凸显的是β地贫特征，因此临床上要重视这种复合地贫患者的检出,避免漏诊。另外患者为复合地贫时,他无论与任何一种轻型地贫者婚配均存在1 /4生育重型地贫患儿的风险,因此,当夫妇一方为α地贫另一方为β地贫时,β地贫的一方一定要检查α地贫基因,以排除复合地贫的存在。
●当夫妇一方分别为α地贫,另一方为β地贫基因携带时，他们生育复合型地贫患儿的 风险为1 /4,因此出生后子代的基因确诊对其今后的婚配指导是很有必要的。 ●地中海贫血患者多次输血后容易造成体内铁的过度沉积,并可损害心脏及肝肾功能, 临床上对多次输血患者需进行去铁治疗以减轻铁负荷。然而地中海贫血患者并不是总伴体内铁负荷过重，地中海贫血患儿也可能发生铁缺乏,尤其是婴幼儿及轻型β地中海贫血患儿。因此对地中海贫血患儿进行常规铁指标的测定,对伴铁缺乏者给予适当补铁治疗,可以提高Hb 浓度,减缓贫血症状。 3．地中海贫血治疗 轻型地贫无需特殊治疗。中间型和重型地贫应采取下列一种或数种方法给予治疗。 1.一般治疗：注意休息和营养，积极预防感染。适当补充叶酸和维生素E。 2.输血和去铁治疗，此法在目前仍是重要治疗方法之一。 3.使用铁鳌合剂。 4.脾切除，脾切除对血红蛋白 H 病和中间型β地贫的疗效较好，对重型β地贫效果差。脾切除可致免疫功能减弱，应在5～6岁以后施行并严格掌握适应症。 5.造血干细胞移植，是目前能根治重型β地贫的方法。如有 HLA 相配的造血干细胞供者，应作为治疗重型β地贫的首选方法。 【预防】 ●开展人群普查和遗传咨询，作好婚前指导以避免地贫基因携带者之间联姻，对预防本病有重要意义。
地中海贫血基因检测
地中海贫血基因检测 *导读：地中海贫血基因是引起地中海贫血的直接原因，地中海贫血是一组遗传性肽链合成障碍导致的血红蛋白异常性疾病。地中海贫血病人父母往往是轻型地贫病人，也可以说病理基因携带者，父母各自有一个病理基因，如果父母各自的病理基因同时遗传给子女，即子女有两个病理基因。那么地中海贫血基因检测？…… 地中海贫血基因是引起地中海贫血的直接原因，地中海贫血是一组遗传性肽链合成障碍导致的血红蛋白异常性疾病。地中海贫血病人父母往往是轻型地贫病人，也可以说病理基因携带者，父母各自有一个病理基因，如果父母各自的病理基因同时遗传给子女，即子女有两个病理基因。那么地中海贫血基因检测？ 地中海贫血是一组因珠蛋白肽链合成障碍而导致的遗传性 溶血性贫血，是我国南方最常见、危害最大的遗传病之一。据WHO估计，全世界约有4.5%的人携带有血红蛋白病致病基因，每年出生的各类重型地贫患儿数至少有20 万。目前尚无治疗地贫的有效方法，且医疗费用昂贵，患者及家庭承受着巨大的经济负担和精神痛苦。基因诊断能直接针对致病基因进行诊断，准确的揭示重型患者和没有临床症状的静止型患者的病因，并应用于产前诊断中，能有效防止严重地贫患儿的出生，降低地贫发生率，对提高新生人口遗传素质具有极重要的意义。
地中海贫血根据合成障碍的肽链不同，将其分为α地贫和β 地贫。a珠蛋白基因的缺失是a地中海贫血致病的主要原因，b 珠蛋白基因突变是β地中海贫血致病的主要原因。地贫危害最严重的类型有Hb Bart’s 胎儿水肿综合征、重型β地中海贫血和血红蛋白H 病等。静止型或轻型地贫患者虽然没有严重的临床 症状，但夫妇携带的异常α、b珠蛋白基因可以遗传给子代，有时会产生严重的后果。α地贫和β地贫基因产前诊断，能有效防止严重α地贫和β地贫患儿的出生。 因此，在产前对地中海贫血基因检测进行筛查显得十分有必要。控制地中海贫血，预防是关键，婚检、孕检和产检是降低地贫儿出生率的三道防线。 目前地贫有多种筛查方法，但基因检测是诊断地贫的金标准，基因检测能够大大提高地贫检测的准确性，减少地贫的漏检率，从而降低重型地贫的发病率。
地中海贫血筛查及地贫基因分型在产前诊断中的应用
地中海贫血筛查及地贫基因分型在产前诊断中的应用 发表时间：2019-03-22T15:03:58.803Z 来源：《健康世界》2019年第01期作者：柏芹[导读] 地中海贫血诊断在产前诊断中具有重要意义，血常规参数与血红蛋白电泳相结合，地贫的筛查率和检出率均会提高。 深圳市罗湖区妇幼保健院检验科 518001 摘要：目的探讨血常规筛查、血红蛋白电泳、地贫基因诊断在孕产妇中的应用。方法随机抽取2018年1月至2018年6月来我院产检的1000名孕妇，以地贫基因诊断结果为金标准，对血常规指标（MCV、MCH）以及血红蛋白电泳对诊断地中海贫血的检出率进行比较，并且分析地中海贫血的基因类型。结果 1000份标本中，确诊为地中海贫血的有71例，其中缺失型α地贫基因：-SEA缺失型杂合子31例，-α3.7缺失型杂合子19例，-α4.2缺失型杂合子2例；β地贫基因：CD41-42突变杂合子9例，IVS-Ⅱ-654突变杂合子3例，-28突变杂合子3例，CD17突变杂合子1例；非缺失型α地贫基因：QS突变杂合子1例，WS突变杂合子1例。αβ复合型地中海贫血1例，为-SEA/CD41-42基因型。血常规指标（MCV、MCH）异常，地贫检出率为63%；血红蛋白电泳异常，地贫检出率为49%；二者联合，地贫检出率为91%。结论地中海贫血诊断在产前诊断中具有重要意义，血常规参数与血红蛋白电泳相结合，地贫的筛查率和检出率均会提高。关键词地中海贫血；血常规参数；血红蛋白电泳；地贫基因地中海贫血是由于血红蛋白的珠蛋白链有一种或几种的合成受到部分或完全抑制所引起的一组遗传性溶血性贫血【1】。其中，α珠蛋白基因缺失或缺陷，导致α珠蛋白链合成减少或缺乏，称为α地中海贫血。β珠蛋白基因缺陷导致β珠蛋白链合成减少或缺乏，称为β地中海贫血。α地中海贫血根据发生的不同程度分为静止型或标准型α地中海贫血、血红蛋白H(HbH)病、血红蛋白Bart胎儿水肿综合征。β地中海贫血是常染色体显性遗传，可分为轻型、中间型、重型三种。广东是地中海贫血的高发地区之一，因此，对孕妇进行地贫筛查，对地中海贫血的早期预防具有重要意义。1资料、方法1.1对象 2018年1月-2018年6月来我院产检的1000名孕妇，年龄在21-40岁之间，平均年龄31岁，对其血常规参数(MCV、MCH)，血红蛋白电泳，地贫基因结果进行分析。 1.2血常规采集研究对象2ml外周静脉血，EDTA-K2抗凝。用Sysmex XE-5000全自动血液分析仪进行检测，MCV<80fl和/或MCH<27pg 者，进行基因检测。 1.3血红蛋白电泳分析采集研究对象外周静脉血2ml，肝素钠抗凝。用Sebia capillary2毛细管电泳及其配套试剂（法国sebia公司）对外周静脉血进行血红蛋白电泳分析。质控品及标本检测均按仪器及试剂说明书操作。HbA2< 2.5%，HbA2> 3.5%判定为阳性【2】，进行基因检测。1.4地贫基因检测采集研究对象2ml外周静脉血，EDTA-K2抗凝。用地贫基因试剂盒（深圳亚能生物技术公司）检测外周静脉血地贫基因。用Gap-PCR和PCR-RDB方法检测常见的3种缺失型α-地贫（--SEA、-α 4.2、-α3.7）和3种非缺失型α-地贫（HbCS、HbWS、HbQS）以及17种常见的β-地贫基因突变类型：-28（HBB:c.-78A>G）、-29（HBB:c.-79A>G）、CD17(HBB:c.-52A>T、CD41-42(HBB:c.126-129delTTC、CD43(HBB:c.130G >T)、CD43(HBB:c.130G>T)、ΒE(HBB:c.79G>A)、CD71-72(HBB:c.216＿217insA)、IVS-Ⅱ-654（HBB:c.316＿197C>T）、-32（HBB:c.-82C>A）、-30（HBB:c.-80T>C）、CAP(HBB:c.-11＿-8delAAAC)、Initiation condon (HBB:c.2T>G)、CD14-15（HBB:c.45＿46insG）、CD27-28(HBB:c.84＿85insC)、IVS-Ⅰ-1(HBB:c.92+1G>T)、IVS-Ⅰ-5（HBB:c.92+5G>C）、CD31(HBB:c.94delC)。质控品及标本检测均按仪器及试剂说明书操作【3】。 1.5统计方法经SPSS 19.0分析数据，利用[n(%)]表示全部计数资料，进行χ2检验，对照结果有显著差异，P<0.05。2结果 2.1 红细胞参数筛查，筛查阳性者有99例，筛查率为9.9%，确诊为地贫的有63例，确诊率为49%；红细胞电泳筛查，筛查阳性者有97例，筛查率为9.7%，确诊为地贫的有48例，确诊率为49%；红细胞参数及血红蛋白电泳均为阳性的有55例，确诊为地贫的有50例，确诊率为91%。见表1 2.2 α-地中海贫血基因分布本组1000例孕妇种检测出54例α-地中海贫血，其中aa/--SEA地中海贫血占的比例最大，有31例，具体分布见图1：
β-地中海贫血基因检测标准操作规程
某医院检验科 作业指导书 WORK INSTRUCTOR 标题：β-地中海贫血基因检测标准操作规程 β-地中海贫血基因检测标准操作规程 1原理
采用PCR 体外扩增和DNA 反向点杂交相结合的DNA 芯片技术：。 2 器材 2.1 试剂 2.1.1 全血基因组提取试剂：深圳亚能全血DNA 快速提取试剂盒（25人份/盒）。 有效期：1年。 2.1.2 亚能β-地中海贫血基因诊断试剂盒（25人份/盒）。 主要组成： 储存条件：试剂盒Ⅰ保存在﹣18℃以下；试剂盒Ⅱ保存在2～8℃。 有效期：6个月。 2.1.3 自备试剂： 2.1. 3.1 20×SSC （pH 7.0） NaCl 175.3g 柠檬酸钠 88.2g 加蒸馏水 750mL 溶解，用pH 计调pH 至7.0，最后定容至1000mL ，并高压灭菌保存。 试剂盒Ⅰ PCR 反应液 25管 23L 试剂盒Ⅱ 膜条 25张 POD 母液 1管 75L TMB 1瓶 10mL 矿物油 1管 1mL 30％ H 2O 2 1管 75 L
2.1. 3.210% SDS（pH 7.0） SDS 20g 加蒸馏水 180mL溶解，用pH计调pH至7.0，最后定容至200mL。 2.1. 3.31M柠檬酸钠（pH 5.0） 柠檬酸钠294g 加蒸馏水 700mL溶解，用浓HCl调pH至5.0，最后定容至1000mL。 2.1. 3.4A液（2×SSC，0.1%SDS， pH 7.4） 20×SSC 100mL 10% SDS 10mL 加蒸馏水定容至1000mL 2.1. 3.5B液（0.5×SSC，0.1%SDS， pH 7.4） 20×SSC 25mL 10% SDS 10mL 加蒸馏水定容至1000mL 2.1. 3.6C液（0.1M柠檬酸钠，pH 5.4） 1M柠檬酸钠 100mL 加蒸馏水定容至1000mL 2.1. 3.7显色液（新鲜配制使用，按顺序加入以下溶液） C液 19 mL TMB 1 mL 30% H2O2 2μL 2.2仪器 某公司某型移液器 某公司某型离心机
地中海贫血单基因突变遗传病检测的新方式
姓名 身份证号 专业技术 职务 所在单位名称 项目中 的分工 签字 项目全面 负责 实验设计，荧光能量转移设计 实验设计， PCR 扩增PCR 扩增 主要成员(不含申请者) －1－ 地中海贫血单基因突变遗传病检测的新方法 二、立论依据 （包括项目的研究意义、国内外研究现状分析，并附主要参考文献及出处） 、管路敷设技术管路高中资料试卷连接管口处理高中资料试卷设技术中包含线槽、管架等多项方式，为解决高中语文电气课件中管壁薄、接口不严等问题，合理利用管线敷设技术。线缆敷设原则：在分线盒处，当不同电压回路交叉时，应采用金属隔板进行隔开处理；同一线槽内强电回路须同时切断习题电源，线缆敷设完毕，要进行检查和检测处理。课件中调试常工作；对于继电保护进行整核对定值，审核试卷试验方案以及系统启动方案；对整套启动过程中高中资料试卷电气设备进行调试工作并且进行过关运行高中资料试卷技术指导。对于调试过程中高中资料试卷技术问题，作为调试人员，需要在事前掌握图纸资料、设备制造厂家出具高中资料试卷试验报告与相关技术资料，并且了解现场设备高中资料试卷布置情况与有关高中资料试卷电气系统接线等情况 ，然后根据规范与规程规定，制定设备调试高中资料试卷方案。 中资料试卷技术故障高中资料试卷破坏范围，或者对某些异并且拒绝动作，来避免不必要高中资料试卷突然停机。因此，电力高中资料试卷保护装置调试技术，要求电力保护装置做到准确灵活。对于差动保护装置高中资料试卷调试技术是指发电机一变压器组在发生内部故障时，需要进行外部电源高中资料试卷切除从而采用高中资料试卷主要保护装置。
对基础研究，着重结合国际科学发展趋势，论述项目的科学意义； 对应用基础研究，着重结合学科前沿、围绕国民经济和社会发展中的重要科技问题，论述其应用前景。 地中海贫血是一种遗传性血液病，1925年意大利首次报道了此病，目前该病已散布全世界范围。它是一类由于常染色体遗传性缺陷，引起珠蛋白链合成障碍，使一种或几种珠蛋白数量不足或完全缺乏，因而红细胞易被溶解破坏的溶血性贫血。如人体血液中，正常人的红细胞寿命为120天左右，而重型地中海贫血患者的红细胞寿命有些仅为一个多月， 红细胞较早遭到破坏，使人体造血机能缺失。病人要维持生命必须进行长期输血。对家庭 和社会造成了很大的压力。国内外对地中海贫血的治疗尚无有效的根治方法，只能规律性输血来维系生命。治愈重型地中海贫血的唯一办法就是造血干细胞移植。但由于在技术上还有待改进，加之昂贵的费用，致使这种方法仅停留在实验阶段。目前，为彻底防治地中海贫血病的发生，根本的出路在于预防。 我们知道，如果夫妇双方都携带有地中海贫血基因，由于没有贫血症状，往往不易被人们发现。但他们的子女就会有２５％的可能性是重型地中海贫血；如果只有一方携带地中海贫血基因，他们不会有重型地中海贫血小孩。所以，杜绝重型地中海贫血小孩的出生，成年人地中海贫血的检测格外重要，这也是提高我国人口素质的有效措施。 目前，在基因水平上对单碱基突变引起的地中海贫血病的检测有多种方法。如聚合酶链反应结合斑点杂交技术是目前最常用的地中海贫血基因诊断方法，该方法具有准确性高，重复性好等优点，但需要放射性同位素标记和繁琐的分子杂交技术，难以在临床推广应用。近年，Efremov 等报道了一种突变引物延伸扩增(MOEA)的新技术，无需放射性同位素标记。但这种方法实验周期长，操作繁琐，同样难以在临床上推广使用。所以迫切需要发展一种高效、简便的地中海贫血的检测方法。基于此，本项目利用分子探针技术，拟发展一种灵敏、高效简便的单基因突变地中海贫血疾病的检测方法。参参考文献： ErEfremov, D.G., Dimouxki, A.J. 1991. Mutant oligonucleotide extension amplification: a nonlabeling polymerase-chain-reaction-based assay for the detection of point mutations. Acta Haematol . 85: 66-70. 刘敬忠, 吴冠芸, 姜哲. 1991. 地中海贫血的快速产前基因诊断. 中国医学科学院学报. 13: 372-375. 、管路敷设技术通过管线不仅可以解决吊顶层配置不规范高中资料试卷问题，而且可保障各类管路习题到位。在管路敷设过程中，要加强看护关于管路高中资料试卷连接管口处理高中资料试卷弯扁度固定盒位置保护层防腐跨接地线弯曲半径标等，要求技术交底。管线敷设技术中包含线槽、管架等多项方式，为解决高中语文电气课件中管壁薄、接口不严等问题，合理利用管线敷设技术。线缆敷设原则：在分线盒处，当不同电压回路交叉时，应采用金属隔板进行隔开处理；同一线槽内强电回路须同时切断习题电源，线缆敷设完毕，要进行检查和检测处理。、电气课件中调试对全部高中资料试卷电气设备，在安装过程中以及安装结束后进行 高中资料试卷调整试验；通电检查所有设备高中资料试卷相互作用与相互关系，根据生产工艺高中资料试卷要求，对电气设备进行空载与带负荷下高中资料试卷调控试验；对设备进行调整使其在正常工况下与过度工作下都可以正常工作；对于继电保护进行整核对定值，审核与校对图纸，编写复杂设备与装置高中资料试卷调试方案，编写重要设备高中资料试卷试验方案以及系统启动方案；对整套启动过程中高中资料试卷电气设备进行调试工作并且进行过关运行高中资料试卷技术指导。对于调试过程中高中资料试卷技术问题，作为调试人员，需要在事前掌握图纸资料、设备制造厂家出具高中资料试卷试验报告与相关技术资料，并且了解现场设备高中资料试卷布置情况与有关高中资料试卷电气系统接线等情况 ，然后根据规范与规程规定，制定设备调试高中资料试卷方案。 、电气设备调试高中资料试卷技术电力保护装置调试技术，电力保护高中资料试卷配置技术是指机组在进行继电保护高中资料试卷总体配置时，需要在最大限度内来确保机组高中资料试卷安全，并且尽可能地缩小故障高中资料试卷破坏范围，或者对某些异常高中资料试卷工况进行自动处理，尤其要避免错误高中资料试卷保护装置动作，并且拒绝动作，来避免不必要高中资料试卷突然停机。因此，电力高中资料试卷保护装置调试技术，要求电力保护装置做到准确灵活。对于差动保护装置高中资料试卷调试技术是指发电机一变压器组在发生内部故障时，需要进行外部电源高中资料试卷切除从而采用高中资料试卷主要保护装置。
新增及修订α地中海贫血基因检测等医疗项目及价格
新增和修订“α地中海贫血基因检测”等医疗项目及价格 编码项目名称 项目 内涵除外 内容 计价 单位 价格 说明三甲 医院 三乙 医院 二甲 医院 二乙 医院 二乙 以下 医院 乡镇 卫生 院 250700021 α-地中海贫血基因 检测 含试剂 元/人 /次 171 162 153 144 136 129 250700022 β-地中海贫血基因 检测 含试剂 元/人 /次 190 180 170 160 150 142 250404025 尿核基质蛋白 （NMP22）测定 项190 180 170 150 142 135 不得分解项 目收费 HPB65601 经电子内镜食管十 二指肠黏膜剥离术 咽部麻醉，润滑，消泡，经 口插入电子胃镜，胃镜检查， 寻查肿物，于肿物基底部注 射肾上腺素甘油果糖（或高 渗盐水及美蓝或靛胭脂）以 抬举病变黏膜部分，采用电 刀等进行剥离，切除治疗。 图文报告。不含监护、病理 学检查。 血管 夹 次3610 3430 325 300 294 279 3 HM559301 大隐静脉腔内激光 闭合术 消毒铺巾，踝内侧切口，切 开大隐静脉，经套管针插入 激光光纤，至大隐静脉根部 单侧1710 1620 154 146 139 132 - 1 -
开通激光，边后退边加压，小切口剥除小腿曲张静脉团，皮内缝合切口，绷带加压包扎。 250303022 脂蛋白相关磷脂酶 A2检测 ＥＬＩＳＡ次361 342 324 307 351 333 CGSE1000 人附睾分泌蛋白 （HＥ４）测定 样本类型：血液。样本采集、 签收、处理，加免疫试剂， 温育，检测，质控，审核结 果，录入实验室信息系统或 人工登记，发送报告；按规 定处理废弃物；接受临床相 关咨询 次95 90 85 80 76 72 250503003- 2 CJCR9000 B族链球菌检测 分离株去，观察结果，人工 判读结果，录入实验室信息 系统或人工登记，发送报告； 实验室消毒，按规定处理废 弃物；接受临床相关咨询 次133 126 119 113 107 101 250310076 抗谬勒管激素检测次323 306 290 275 261 248 HAP0590 麻醉深度电生理监 测 连续电极或传感器，使用神 经电生理监测仪，根据脑电 图，双频谱指数，诱发电位 等图形数据的变化调节麻醉 深度 脑电 双频 谱电 极 2小 时 95 90 85 80 76 72 2小时后每 增加1小时 加收30元， 不足1小时 按1小时计 算 CCEF5000 阴道分泌物白细胞 酯酶检测 阴道分泌物、样本采集，加 入试剂，检测，录入实验室 次 5.5 5.0 5.0 4.5 4.5 4.0 - 2 -
地中海贫血的几大详细分类
地中海贫血的几大详细分类 *导读：海洋性贫血基因型和表现型均多样化，差异很大。 临床上常根据症状及体征的轻重分为轻型、中间型和重型；而基因型又可分为纯合子和杂合子型。…… 海洋性贫血是溶血性贫血中的一大类型。由于最早在意大利、希腊和其他地中海区域的民族及其移民的后裔中发现此病，所以当时叫“地中海贫血”。后来发现除地中海地区之外，其他临接 海洋的地区也是本病的高发区，所以又叫“海洋性贫血”。 海洋性贫血是由于常染色体遗传性缺陷，引起珠蛋白肽链 合成障碍，使一种或几种珠蛋白肽链数量不足或完全缺乏，从而造成这种珠蛋白链参与的血红蛋白的合成量减少。各珠蛋白链本身的氨基酸顺序并无异常。其中α珠蛋白链合成受抑者，叫做“α 海洋性贫血”；β珠蛋白链合成受抑者，叫做“β海洋性贫血”。地中海、中东、阿拉伯、印度、东南亚地区β海洋性贫血发病率最高；东南亚，包括我国南方是α海洋性贫血的高发区。我国广东、广西、四川、台湾诸省α和β海洋性贫血都较常见，长江以南省市如浙江、福建、江苏、上海、贵州、江西、湖北等都有散在病例报道。由于遗传缺陷不同，本病表现轻重程度非常不同，有在胎儿及婴幼儿即因极重的溶血性贫血致死的，也有虽有血红蛋白异常而一生无任何临床症状的。
*临床表现 海洋性贫血基因型和表现型均多样化，差异很大。临床上常根据症状及体征的轻重分为轻型、中间型和重型；而基因型又可分为纯合子和杂合子型。一般重型肯定为纯合子，轻型肯定为杂合子，而中间型则包含着许多遗传基础不同的疾病，包括较轻的纯合子及较重的杂合子β海洋性贫血、血红蛋白H病及α与β海洋性贫血杂合子等。 *（1）纯合子海洋性贫血 婴儿期（生后6～9月）发病，进行性贫血，面色苍白，黄疸，消瘦，腹部逐渐隆起，肝、脾进行性肿大。因为发育迟缓可形成特殊外观：头大，额、顶、枕骨隆起，两颊突出，鼻梁低平，两眼距离增宽。骨骼改变遍及全身，主要由于骨髓长期显著增生，使骨髓腔变宽，骨皮质变薄。多数患者于幼年即死亡，死亡原因多为感染、晚期血色病所致脏器损害。如能存活在性发育期，常因发育障碍而无第二性征，其他内分泌功能障碍亦较常见。患者常因脾肿大、脾功能亢进而有白细胞、血小板减少，出现各种感染及出血症状。 *（2）杂合子海洋性贫血 多数患者无症状，少数患者常感乏力，可有轻度贫血，脾肿大。生长发育正常，无骨骼改变，一般在家族调查或普查时发现。低色素贫血。血片中可见到靶形细胞，红细胞渗透脆性减低，嗜碱性点彩细胞增多，HbA2轻度增高。骨髓红系细胞增生轻度增
【CN110195102A】一种β地中海贫血基因分型方法【专利】
(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910365366.1 (22)申请日 2019.04.30 (71)申请人 广州普世利华科技有限公司 地址 510320 广东省广州市海珠区仑头路 78号自编A01号楼自编402、403、406号 房屋(仅限办公) (72)发明人 刘华勇 陈翀 黄嘉恩 (74)专利代理机构 广州粤高专利商标代理有限 公司 44102 代理人 单香杰 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12N 15/113(2010.01) (54)发明名称 一种β地中海贫血基因分型方法 (57)摘要 本发明公开了一种β地中海贫血基因分型 方法。并基于该方法构建了基于CRISPR/Cas12a 的β地中海贫血基因分型检测试剂盒。该技术对 β地中海贫血基因分型检测特异性好、灵敏度 高、精度高，还能够实现多位点同时检测，对β地 中海贫血的检测及筛查具有重要的意义。同时该 方案检测成本低廉、操作方便快捷，具有广阔的 应用前景。权利要求书1页 说明书8页 附图1页CN 110195102 A 2019.09.03 C N 110195102 A
权 利 要 求 书1/1页CN 110195102 A 1.一种基于CRISPR/Cas12a检测β地中海贫血基因突变位点的gRNA组合，其特征在于，所述gRNA组合包括SEQ ID NO.4-8任一个或任几个所示gRNA。 2.一种基于CRISPR/Cas12a的β地中海贫血基因突变位点检测方法，其特征在于，利用Cas12a蛋白和gRNA进行CRISPR检测，检测靶标位点的核苷酸序列如SEQ ID NO.1-3任一个或任几个所示。 3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述gRNA的序列如SEQ ID NO.4-8任一所示。 4.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述Cas12a蛋白为LbCas12a、SsCas12a、ScCas12a、FnCas12a或AsCas12a。 5.根据权利要求2所述方法，其特征在于，检测体系包括：2μl RPA产物，45nM Cas12a，22.5nM gRNA，100nM在Cas12a切割时可发出荧光的报告DNA链，0.5μl RNase抑制剂，及核酸酶检测缓冲液。 6.根据权利要求2所述方法，其特征在于，检测程序为：在37℃下反应1.5小时，荧光动力检测5分钟一次。 7.一种基于CRISPR/Cas12a的β地中海贫血基因分型检测试剂盒，其特征在于，包括Cas12a蛋白和gRNA，所述gRNA的序列如SEQ ID NO.4-8任一所示。 8.根据权利要求7所述检测试剂盒，其特征在于，所述Cas12a蛋白为LbCas12a、SsCas12a、ScCas12a、FnCas12a或AsCas12a。 9.根据权利要求7所述检测试剂盒，其特征在于，还包括非特异单链DNA荧光探针、RNase抑制剂和核酸酶检测缓冲液。 2