甲醇蛋白 1

2国内外甲醇蛋白发展情况2.1 国外20世纪60年代后期，世界上不少国家纷纷研究甲醇蛋白，70年代初研究单位达1000多个。目前，甲醇蛋白已成为世界性的研究课题，并取得很大进展。前苏联1985年SCP产量已达1500 kt。占领先地位的首推英国，1980年已有100 kt/a的甲醇蛋白装置投产，工艺技术居世界领先地位。到1982年后，装置的年产量已达到5-7万t/a，且拥有世界上最大的连续发酵器，生产的甲醇蛋白商品名为“Pruteen”，产品中含有72％的粗蛋白，蛋氨酸和赖氨酸含量与白鱼粉非常相近。

3. 市场我国是饲料生产与消费大国，2001年全国饲料总产量达7806万t，饲料对蛋白质的年需求达1000万t以上。而国内蛋白资源严重不足，需大量进口鱼粉及豆粕。我国是世界最大的鱼粉消费国，年消费量130万t左右。全世界鱼粉年产量600万t左右，贸易量约400万t。我国每年进口鱼粉约100万t，消费量和进口量都是世界鱼粉总产量和贸易量的近1/4。全世界饲料总产量6亿t左右，我国饲料总产量约占世界饲料总产量的1/8，鱼粉用量约为世界饲料平均鱼粉用量的2倍，可见我国蛋白质市场前景较好。据中国饲料工业协会资料报道，自2000年以来，尽管每年从国外进口的鱼粉和豆粕量在190万～200万吨，蛋白饲料的实际缺口每年达1200万吨以上。

6. 投资及经济效益年产10万吨甲醇蛋白预计投资约为10亿元人民币，投资回收期约为

7.5年（含建设期二年）

沉淀蛋白质的常用方法

沉淀蛋白质的常用方法（TCA、乙醇、丙酮沉淀蛋白操作步骤） TCA-DOC For precipitation of very low protein concentration 1) To one volume of protein solution, add 1/100 vol. of 2% DOC (Na deoxycholate, detergent). 2) Vortex and let sit for 30min at 4oC. 3) Add 1/10 of Trichloroacetic acid (TCA) 100% vortex and let sit ON at 4oC (preparation of 100% TCA: 454ml H2O/kg TCA. Maintain in dark bottleat careful, use gloves!!!). 4) Spin 15min 4oC in microfuge at maximum speed (15000g). Carefully discharge supernatant and retain the pellet:

dry tube by inversion on tissue paper (pellet may be difficult to see). [OPTION: Wash pellet twice with one volume of cold acetone (acetone keep at –20oC). Vortex and repellet samples 5min at full speed between washes]. 5) Dry samples under vaccum (speed vac) or dry air. For PAGE-SDS, resuspend samples in a minimal volume of sample buffer. (The presence of some TCA can give a yellow colour as a consequence of the acidification of the sample buffer ; titrate with 1N NaOH or 1M TrisHCl to obtain the normal blue sample buffer colour.) Normal TCA To eliminate TCA soluble interferences and protein concentration

甲醇蛋白的概况及营养评价

甲醇蛋白的概况及营养评价 1.1 甲醇蛋白的概况甲醇蛋白是以甲醇为主要基质而生产的单细胞蛋白(SCP)，单细胞蛋白(Singlecel lprotein，SCP)又称微生物蛋白。通过微生物在甲醇营养源上发酵生成单细胞菌体，再精制提取为单细胞蛋白。甲醇蛋白的主要成分为粗蛋白、脂肪、赖氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、矿物质和维生素，其中，粗蛋白质量分数平均在 70%以上。甲醇蛋白营养价值极高，其粗蛋白含量至比鱼粉和大豆高得多，理论上可以代替鱼粉、大豆、骨粉、肉类和脱脂奶粉等用作动物饲料。甲醇蛋白在上世纪七八十年代首先由英国ICI公司开发生产，当时的考虑作为战备项目，预防战争导致的食物危机和潜在的食品污染危机。ICI公司甲醇蛋白生产采用的菌种为细菌性菌种，口感不好苦、腥，另外其中核酸本身虽然无毒，但是过量摄入会导致健康问题。ICI公司甲醇蛋白首先是作为作为饲料蛋白销售，但是由于饲料市场市场价格相比较甲醇蛋白生产成本，企业几乎无利可图。最后ICI放弃了在该项目上的盈利计划，并寻求技术转让。截止目前（2019年11月），ICI公司甲醇蛋白项目已经完全停产，技术研发也早已终止，目前ICI公司甲醇蛋白生产技术没有优势可言。中国农业部于2013年1月1日起施行的《饲料原料目录》里，并没有将甲醇蛋白列入其中。这意味着甲醇蛋白到目前为止还未获得市场“通行证”，不能作为饲料蛋白在市场上进行销售，甲醇蛋白生产企业在未来任重道远。

1.2 甲醇蛋白的特点及营养评价 1.2.1特征甲醇蛋白与传统蛋白相比，具有厂区占地面积少、不受环境和气候的影响、可连续生产、易于控制、污染小等优势。同时具有如下典型特征： (1)具有较高的蛋白产率和营养价值甲醇蛋白与各种蛋白源(如大豆、鱼粉、肉骨粉等)相比，具有较高的营养性，它富含80％的粗蛋白和丰富的维生素，且极易消化。大豆含蛋白45％，鱼粉含蛋白61％，大豆粕含蛋白40％，菜籽粕含蛋白32％。肉骨粉含蛋白45％。国外大量实验表明，在饲料中添加20％～30％的甲醇蛋白，其效果比单纯使用鱼粉的饲料效果要好得多。甲醇蛋白富含17种氨基酸，其中还有动物体内无法合成的氨基酸，其组成见下表。表1.1 甲醇蛋白氨基酸组成表 (2)繁殖速度快甲醇蛋白在发酵罐中的繁殖速度可达2．5～3．7g／L·而烷烃蛋白只有0．15～2．3g／L·h。 (3)原料来源丰富。当前大型甲醇装置的建成，使甲醇成本大大降低，从而也大大降低了甲醇蛋白成本。甲醇在常温下为液态，并能与水完全混合。故在培养基中

甲醇蛋白简介

甲醇蛋白简介一、简介甲醇蛋白是以甲醇为基质生产的单细胞蛋白。单细胞蛋白(Single cell protein，SCP)又称微生物蛋白，指的是从纯培养的微生物细胞中提取的总蛋白，可作为人或动物蛋白的补充。单细胞蛋白可用制糖、造纸、乙醇、皮革、淀粉、木材加工等产生的废液来生产，但受原料限制产量太小。在单细胞蛋白中，目前能够工业化大量生产的就是甲醇蛋白，被称为第二代单细胞蛋白。甲醇蛋白相对于其它单细胞蛋白来讲，具有资源丰富、原料易得、不占耕地且生产不受气候条件影响、可大规模工业化生产、蛋白质量稳定、营养价值高等特点。二、性质用途甲醇蛋白是通过培养单细胞生物而获得的菌体蛋白质，目前主要用作畜禽饲料蛋白，与其他饲料蛋白如鱼粉、大豆等天然动植物蛋白质相比，营养价值较高。甲醇蛋白的主要成分包括粗蛋白、脂肪、赖氨酸、蛋氨酸以及胱氨酸，甲醇蛋白中的粗蛋白质质量分数平均在70％以上，而且还含有丰富的其他各种氨基酸、矿物质以及维生素等，比动植物性蛋白的营养成分高得多。甲醇蛋白是被认为可以大规模替代鱼粉、大豆、骨粉、肉类和脱脂奶粉等喂养家禽、家畜。三、研究开发概况

（一）国外概况从上世纪60年代后期，世界上不少国家相继开始研究开发甲醇蛋白，到70年代初涌现出近千个研究单位从事此项工作。其中走在前面的主要是英国，1980年已经有10万吨／年的甲醇蛋白生产装置。美国也于1983年开发出了甲醇蛋白生产的新工艺，其特点是改进了发酵罐热交换和氧化传递条件，生产出更高浓度的甲醇蛋白，并在中间试验的基础上建成了2000吨／年的工业示范装置。随后，德国、日本、瑞典和法国也相继建立了中间试验装置，俄罗斯、墨西哥、马来西亚、印尼、沙特等国也有建厂计划。（二）国内概况国内是从上世纪70年以来开始研究开发甲醇蛋白的，山西生物研究所、北京营养源研究所、中国科学院上海有机研究所等相继进行了研究开发。其中山西生物研究所与太原化肥厂于上世纪90年代合作完成了中间试验工作，但因为用水量较大而没有选到合适厂址。所以，至今国内还未建成大规模工业化的甲醇蛋白生产装置。四、生产技术甲醇蛋白生产主要是以甲醇为碳源，通过采用选择性微生物生产单细胞蛋白，即甲醇蛋白。目前生产方法有8种之多，进展快、规模大的主要有6种方法：1．英国ICI法；2．德国Hoechst-Uhde法；3．瑞典Norproteim法；4．日本NGC 法：5．法国IFP法；6．美国Provesteen法。英国ICI法、德国Hoechst-Uhde法、美国菲利浦石油和法国IFP法的工技

甲醇蛋白项目

甲醇蛋白项目一项目简介 1.1 甲醇蛋白简介甲醇蛋白是以甲醇为基质生产的单细胞蛋白。单细胞蛋白(Singlecel lprotein，SCP)又称微生物蛋白，指的是从纯培养的微生物细胞中提取的总蛋白，可作为人或动物蛋白的补充。单细胞蛋白可用制糖、造纸、乙醇、皮革、淀粉、木材加工等产生的废液来生产，但受原料限制产量太小。在单细胞蛋白中，目前能够工业化大量生产的就是甲醇蛋白，被称为第二代单细胞蛋白。甲醇蛋白相对于其它单细胞蛋白来讲，具有资源丰富、原料易得、不占耕地且生产不受气候条件影响、可大规模工业化生产、蛋白质量稳定、营养价值高等特点。甲醇蛋白是通过培养单细胞生物而获得的菌体蛋白质，目前主要用作畜禽饲料蛋白，与其他饲料蛋白如鱼粉、大豆等天然动植物蛋白质相比，营养价值较高。甲醇蛋白的主要成分包括粗蛋白、脂肪、赖氨酸、蛋氨酸以及胱氨酸，甲醇蛋白中的粗蛋白质质量分数平均在70％以上，而且还含有丰富的其他各种氨基酸、矿物质以及维生素等，比动植物性蛋白的营养成分高得多。主要成分比较如下： 1.2 国内外发展概况 1.2.1 国外市场概况随着世界人口的快速增长，食物缺少日益显著，尤其是蛋白质食品，出现短缺。2000年，蛋白质供需之间相差约2500万吨。从上世纪60年代后期，世界上不少国家相继开始研究开发甲醇蛋白，到70年代初涌现出近千个研究单位从事此项工作。其中走在前面的主要是英国，1980年已经有10万吨／年的甲醇蛋白生产装置。美国也于1983年开发出了甲醇蛋白生产的新工艺，其特点是改进了发酵罐热交换和氧化传递条件，生产出更高浓度的甲醇蛋白。并在中间试验的基础上建成了2000吨／年的工业示范装置。随后有德国、日本、瑞典和法国也相继建立了中间试验装置，以及俄罗斯、墨西哥、

常用蛋白质沉淀方法有哪些

P13三、5 、常用蛋白质沉淀方法有哪些？列举沉淀应用的实例蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象称为蛋白质沉淀(precipitation)，变性蛋白质一般易于沉淀，但也可不变性而使蛋白质沉淀，在一定条件下，变性的蛋白质也可不发生沉淀。常用蛋白质沉淀的方法有： (一)盐析(Salting Out) 在蛋白质溶液中加入大量的中性盐以破坏蛋白质的胶体稳定性而使其析出，这种方法称为盐析。常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等。例如用半饱和的硫酸铵来沉淀出血清中的球蛋白，饱和硫酸铵可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉淀出来，盐析沉淀的蛋白质，经透析除盐，仍保证蛋白质的活性。 (二)重金属盐沉淀蛋白质蛋白质可以与重金属离子如汞、铅、铜、银等结合成盐沉淀。重金属沉淀的蛋白质常是变性的，但若在低温条件下，并控制重金属离子浓度，也可用于分离制备不变性的蛋白质。如临床上利用蛋白质能与重金属盐结合的这种性质，抢救误服重金属盐中毒的病人，给病人口服大量蛋白质，然后用催吐剂将结合的重金属盐呕吐出来解毒。 (三)生物碱试剂以及某些酸类沉淀蛋白质蛋白质又可与生物碱试剂(如苦味酸、钨酸、鞣酸)以及某些酸(如三氯醋酸、过氯酸、硝酸)结合成不溶性的盐沉淀。如临床血液化学分析时常利用此原理除去血液中的蛋白质，此类沉淀反应也可用于检验尿中蛋白质。 (四)有机溶剂沉淀蛋白质可与水混合的有机溶剂，如酒精、甲醇、丙酮等，对水的亲和力很大，能破坏蛋白质颗粒的水化膜，在等电点时使蛋白质沉淀。在常温下，有机溶剂沉淀蛋白质往往引起变性。例如酒精消毒灭菌就是如此，但若在低温条件下，则变性进行较缓慢，可用于分离制备各种血浆蛋白质。

甲醇基础知识

甲醇基础知识一、产品介绍： 1.1 物化性质：纯甲醇为无色透明略带酒精气味的易挥发液体，甲醇分子式：CH4O，分子量32.04，沸点64.5℃，熔点-97.8℃，和水相对密度0.7915(20/4℃)，闪点12.22℃，自燃点463.89℃。甲醇能和水以任意比相溶，但不形成共沸物，能和多数常用的有机溶剂(乙醇、乙醚、丙酮、苯等)混溶，并形成恒沸点混合物。甲醇能和一些盐如CaCl2、MgCl2等形成结晶化合物，称为结晶醇如CaCl2·CH3OH、MgCl2·6CH3OH，和盐的结晶水合物类似，甲醇遇热、明火或氧化剂易着火。遇明火会爆炸，蒸汽与空气混合物爆炸下限6%~36.5%（体积）。燃烧时无烟，火焰呈蓝色。甲醇具有脂肪族伯醇的一般性质,连有羟基的碳原子上的三个氢原子均可被一一氧化,或脱氢生成甲醛,再氧化成甲酸,甲酸氧化的最终产物是二氧化碳和水。试剂甲醇常密封保存在棕色瓶中置于较冷处。 1.2 生产方法工业上合成甲醇几乎全部采用一氧化碳加压催化加氢的方法，工艺过程包括造气、合成净化、甲醇合成和粗甲醇精馏等工序。粗甲醇的净化过程包括精馏和化学处理。化学处理主要用碱破坏在精馏过程中难以分离的杂质，并调节pH值；精馏主要是脱除易挥发组分如二甲醚，以及难挥发组分职乙醇、高碳醇和水。粗馏后的纯度一般都可达到98%以上。

1.3 用途：甲醇是一种重要的有机化工原料，主要用于生产甲醛，消耗量要占到甲酵总产量的一半。目前用甲醇合成二甲醚、乙二醇、乙醛、乙醇也日益受到重视。甲醇是一种重要的有机溶剂，其溶解性能优于乙醇，可用于调制油漆。一些无机盐如碘化钠、氯化钙、硝酸铵、硫酸铜、硝酸银、氯化铵、氯化钠都或多或少地能溶于甲醇。作为一种良好的萃取剂，甲醇在分析化学中可用于一些物质的分离，还用于检验和测定硼。甲醇还可以做防冻剂。甲醇经微生物发酵可生产甲醇蛋白，富含维生素和蛋白质，具有营养价值高而成本低的优点，是颇有发展前景的饲料添加剂，能广泛用于牲畜、家禽、鱼类的饲养。甲醇是一种优良燃料可作能源，甲醇和汽油（柴油）或其它物质可混合成各种不同用途的工业用或民用的新型燃料，甲醇和汽油混合可作为燃料用于运输业。 1.4 包装及贮运：工业甲醇应用干燥、清洁的铁制槽车、船、铁桶等包装，并定期清洗和干燥。工业甲醇应贮存在干燥、通风、低温的危险品仓库中，避免日光照射并隔绝热源、二氧化碳、水蒸汽和火种，贮存温度不超过30℃，贮存期限6个月。槽车、船、铁桶在装运甲醇过程中应在螺丝口加胶皮垫密封，避免漏损，运输工具应有接地设施。公路运输，目前汽车运输槽车型号比较复杂，普遍大型槽车为43.5吨（按照安全充装标准，充装量应该为容积的85％，受季节因素影响，冬季47吨，夏季40吨）；铁路运输，铁路运输槽车为国

沉淀蛋白题库

1、去除蛋白质的方法有哪些答：(1) 加入与水混溶的有机溶剂； (2).加入中性盐； (3).加入强酸; (4).加入重金属盐; (5).超滤法; (6).酶水解法; (7).加热法. 2、去除蛋白质的意义是什么答：使结合型药物释放出来，以便测定药物的总浓度；得到较“干净”的提取液，减少乳化；消除对测定的干扰；保护仪器，延长使用期限。 3、: 4、沉淀蛋白中加入甲醇或乙腈的目的是什么答：加入水溶性的有机溶剂甲醇或乙腈，可使蛋白质的分子内及分子间的氢键发生变化而是蛋白凝聚，是蛋白质结合的药物释放出来。 5、，有机溶剂沉淀蛋白的原理是什么答：原理是降低水的介电常数，导致具有表明水层的生物大分子脱水，相互聚集，最后析出。 6、用强酸沉淀蛋白的原理是什么答：酸沉试剂（高氯酸等）原理是，在低于蛋白质等电点的pH条件下，蛋白质阳离子与沉淀剂的阴离子形成难溶性盐而沉淀，蛋白变性而沉淀。 7、常见蛋白沉淀剂的试剂有：甲醇、乙腈、乙醇、丙酮、高氯酸、四氢呋喃、三氯乙酸。（至少写三种） 8、沉淀蛋白的操作步骤：血浆样品解冻，涡流混匀备用。在EP管中，依次加入内标、血浆样品、沉淀试剂，之后涡流混匀，15000 rpm离心5 min，取上清进样分析。 9、用甲醇、乙腈作为沉淀试剂时，血浆与沉淀剂的比例是多少答：一般用血浆与沉淀剂的比例为乙腈最低1:2（一般1:3以上），甲醇最低1:3（一般1:5以上）。 10、（

11、简述沉淀蛋白的注意事项（答案开放，仅供参考）答：（1）涡流混匀一定要充分，至少30 S 以上；（2）沉淀试剂量一定要足，沉淀要充分。（3）有时需要考虑溶剂效应，对峰型的影响（4）热不稳定的药物，离心时需要冷冻离心。（5）注意操作，防止污染。 12、比较下面沉淀试剂的沉淀效率：甲醇、乙腈、乙醇、高氯酸。答：高氯酸>乙腈>乙醇≥甲醇。表1常见沉淀试剂的蛋白沉淀效率 13、与液液萃取和固相萃取相比，沉淀蛋白的优缺点是什么（答案开放，仅供参考）答：优点：简单、方便、迅速、提取回收率高、成本低、易于操作缺点：杂质多，对特殊的药物基质效应强。沉淀剂 · 上清液pH 值沉淀 mL 血浆中95%以上蛋白时所需沉淀剂体积（mL ）三氯乙酸（10%，W/V ） ~ 高氯酸（6%，W/V ） < 钨酸】焦磷酸（5%,W/V ）硫酸铜、钨酸钠氢氧化锌 $ 硫酸铵（饱和）乙腈丙酮 9-10 乙醇 { 9-10 甲醇

甲醇蛋白 1

甲醇蛋白 1. 概况甲醇蛋白目前主要作为饲料添加剂，补充蛋白资源。甲醇蛋白是以甲醇为碳源生产的单细胞蛋白，被称为第二代单细胞蛋白，简称SCP。其主要成分为粗蛋白、脂肪、赖氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、矿物质和维生素，其中，粗蛋白质量分数平均在70％以上。营养价值高，其粗蛋白含量甚至比鱼粉和大豆高得多,见下表。甲醇蛋白主要用于动物饲料，可以代替鱼粉、大豆、骨粉、肉类和脱脂奶粉。在国外，甲醇蛋白已广泛用作仔猪、肉鸡、小牛和鱼的饲料，甲醇蛋白具有资源丰富、生产不受气候条件影响、合成速度快、蛋白质量稳定等特点。以甲醇为原料合成甲醇蛋白用作高能量的精饲料，每10 kt可节省粮食25 kt，可配制100 kt饲料，是解决我国养殖业及食品工业蛋白质短缺问题的重要途径之一。 2国内外甲醇蛋白发展情况2.1 国外20世纪60年代后期，世界上不少国家纷纷研究甲醇蛋白，70年代初研究单位达1000多个。目前，甲醇蛋白已成为世界性的研究课题，并取得很大进展。前苏联1985年SCP产量已达1500 kt。占领先地位的首推英国，1980年已有100 kt/a的甲醇蛋白装置投产，工艺技术居世界领先地位。到1982年后，装置的年产量已达到5-7万t/a，且拥有世界上最大的连续发酵器，生产的甲醇蛋白商品名为“Pruteen”，产品中含有72％的粗蛋白，蛋氨酸和赖氨酸含量与白鱼粉非常相近。

2.2 国内20世纪70年代以来，我国开始大力开展甲醇蛋白的研究，主要研究单位包括中国科学院微生物研究所等单位。尽管我国甲醇蛋白仍未实现工业化生产，但全国约有40多家工厂主要以酒精、糖、味精、纸张、淀粉、豆制品、屠宰场等的废弃物为原料，生产了单细胞蛋白质，以部分填补我国市场对其迫切需求.并仍在积极研究开发甲醇蛋白项目,与此同时,已有若干家企业已在准备新建大型甲醇蛋白生产装置。 3. 市场我国是饲料生产与消费大国，2001年全国饲料总产量达7806万t，饲料对蛋白质的年需求达1000万t以上。而国内蛋白资源严重不足，需大量进口鱼粉及豆粕。我国是世界最大的鱼粉消费国，年消费量130万t左右。全世界鱼粉年产量600万t左右，贸易量约400万t。我国每年进口鱼粉约100万t，消费量和进口量都是世界鱼粉总产量和贸易量的近1/4。全世界饲料总产量6亿t左右，我国饲料总产量约占世界饲料总产量的1/8，鱼粉用量约为世界饲料平均鱼粉用量的2倍，可见我国蛋白质市场前景较好。据中国饲料工业协会资料报道，自2000年以来，尽管每年从国外进口的鱼粉和豆粕量在190万～200万吨，蛋白饲料的实际缺口每年达1200万吨以上。

蛋白质沉淀浓缩方法原理及详细解析

蛋白质沉淀浓缩方法原理及详细解析在生化制备中，沉淀主要用于浓缩目的，或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制备中常用的有以下几种沉淀方法和沉淀剂： 1．盐析法多用于各种蛋白质和酶的分离纯化。 2．有机溶剂沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化，有时也用于蛋白质沉淀。 3．等电点沉淀法用于氨基酸、蛋白质及其它两性物质的沉淀。但此法单独应用较少，多与其它方法结合使用。 4．非离子多聚体沉淀法用于分离生物大分子。 5．生成盐复合物沉淀用于多种化合物，特别是小分子物质的沉淀。 6．热变性及酸碱变性沉淀法用于选择性的除去某些不耐热及在一定PH值下易变性的杂蛋白。第一节盐析法一般来说，所有固体溶质都可以在溶液中加入中性盐而沉淀析出，这一过程叫盐析。在生化制备中,许多物质都可以用盐析法进行沉淀分离，如蛋白质、多肽、多糖、核酸等，其中以蛋白质沉淀最为常见，特别是在粗提阶段。盐析法分为两类，第一类叫Ks分段盐析法，在一定PH和温度下通过改变离子强度实现，用于早期的粗提液；第二种叫Kb分段盐析法，在一定离子强度下通过改变PH和温度来实现，用于后期进一步分离纯化和结晶。一．影响盐析的若干因素 1．蛋白质浓度高浓度蛋白溶液可以节约盐的用量，但许多蛋白质的b 和Ks常数十分接近，若蛋白浓度过高，会发生严重的共沉淀作用；在低浓度蛋白质溶液中盐析，所用的盐量较多，而共沉淀作用比较少，因此需要在两者之间进行适当选择。用于分步分离提纯时，宁可选择稀一些的蛋白质溶液，多加一点中性盐，使共沉淀作用减至最低限度。一般认为%%的蛋白质浓度比较适中。 2．离子强度和类型

一般说来，离子强度越大，蛋白质的溶解度越低。在进行分离的时候，一般从低离子强度到高离子强度顺次进行。每一组分被盐析出来后，经过过滤或冷冻离心收集，再在溶液中逐渐提高中性盐的饱和度，使另一种蛋白质组分盐析出来。离子种类对蛋白质溶解度也有一定影响，离子半径小而很高电荷的离子在盐析方面影响较强，离子半径大而低电荷的离子的影响较弱，下面为几种盐的盐析能力的排列次序：磷酸钾>硫酸钠>磷酸铵>柠檬酸钠>硫酸镁。 3．PH值一般来说，蛋白质所带净电荷越多溶解度越大，净电荷越少溶解度越小，在等电点时蛋白质溶解度最小。为提高盐析效率，多将溶液PH值调到目的蛋白的等电点处。但必须注意在水中或稀盐液中的蛋白质等电点与高盐浓度下所测的结果是不同的，需根据实际情况调整溶液PH值，以达到最好的盐析效果。 4．温度在低离子强度或纯水中，蛋白质溶解度在一定范围内随温度增加而增加。但在高浓度下，蛋白质、酶和多肽类物质的溶解度随温度上升而下降。在一般情况下，蛋白质对盐析温度无特殊要求，可在室温下进行，只有某些对温度比较敏感的酶要求在0-4℃进行。二．硫酸铵的使用硫酸铵中常含有少量的重金属离子，对蛋白质巯基有敏感作用，使用前必须用H2S处理：将硫酸铵配成浓溶液，通入H2S饱和，放置过夜，用滤纸除去重金属离子，浓缩结晶，100℃烘干后使用。另外，高浓度的硫酸铵溶液一般呈酸性（PH=左右），使用前也需要用氨水或硫酸调节至所需PH。硫酸铵的加入有以下几种方法：1）加入固体盐法用于要求饱和度较高而不增大溶液体积的情况；2）加入饱和溶液法用于要求饱和度不高而原来溶液体积不大的情况；3）透析平衡法先将盐析的样品装于透析袋中，然后浸入饱和硫酸铵中进行透析，透析袋内硫酸铵饱和度逐渐提高，达到设定浓度后，目的蛋白析出，停止透析。该法优点在于硫酸铵浓度变化有连续性，盐析效果好，但手续烦琐，需不断测量饱和度，故多用于结晶，其它情况少见。使用固体硫酸铵时：1）必须注意饱和度表中规定的温度，一般有0℃或室温两种，加入固体盐后体积的变化已考虑在表中；2）分段盐析中，应考虑每次分段后蛋白质浓度的变化。一种蛋白质如经二次透析，一般来说，第一次盐析分离范围（饱和度范围）比较宽，第二次分离范围较窄。3）盐析后一般放置半小时至一小时，待沉淀完全后才过滤或离心。过滤多用于高浓度硫酸铵溶液，因为此种情况下，硫酸铵密度较大，若用离心法需要较高离心速度和长时间的离心操作，耗时耗能。离心多用于低浓度硫酸铵溶液。第二节有机溶剂沉淀法有机溶剂的沉淀机理是降低水的介电常数，导致具有表面水层的生物大分子脱水，相

甲醇MSDS

甲醇甲醇系结构最为简单的饱和一元醇，CAS号有67-56-1、170082-17-4，分子量32.04。又称“木醇”或“木精”。是无色有酒精气味易挥发的液体。有毒，误饮5～10毫升能双目失明，大量饮用会导致死亡。用于制造甲醛和农药等，并用作有机物的萃取剂和酒精的变性剂等。通常由一氧化碳与氢气反应制得。目录 1基本信息 2理化性质 3发展应用 4甲醇的存储 5生产方法 6安全风险 7注意事项 8法规信息

物理性质物态液体颜色透明，无色气味纯品清淡，类似乙醇；粗品刺激难闻熔点-98 °C(lit.) 沸点64.5~64.7 °C(lit.) 密度0.791 g/mL at 25 °C 闪点52 °F（约11°C）蒸气密度 1.11 (大气压=1) 蒸气压127 mm Hg(25°C)[3] 410 mm Hg(50°C) 折射率n20/D 1.329(lit.) 爆炸上限%(V/V)：44.0 爆炸下限%(V/V)： 5.5 沾染量<10(APHA) 水溶解性易溶储存条件室温化学性质 NIST化学物质信息Methyl alcohol(67-56-1) EPA化学物质信息Methanol(67-56-1)

3.是制造农药、医药、塑料、合成纤维及有机化工产品如甲醛、甲胺、氯甲烷、硫酸二甲酯等的原料。其他用作汽车防冻液、金属表面清洗剂和酒精变性剂等； 4.是重要的燃料，可掺入汽油作替代燃料使用。20世纪80年代以来，甲醇用于生产汽油辛烷值添加剂甲基叔丁基醚、甲醇汽油、甲醇燃料，以及甲醇蛋白等产品，大大促进了甲醇生产的发展和市场需要；甲醇已经作为F1赛车的燃料添加剂使用，也广泛应用于甲醇燃料电池中 5.用作分析试剂，如作溶剂、甲基化试剂、色谱分析试剂。还用于有机合成； 6.甲醇为清洗去油剂，MOS级主要用于分立器件，中、大规模集成电路，BV-Ⅲ级主要用于超大规模集成电路工艺技术。 4甲醇的存储 1.甲醇存储甲醇最合适的储存容器为不锈钢容器和塑料储罐，塑料储罐以纯聚乙烯(线性低密度聚乙烯LLDPE、高密度聚乙烯HDPE)为原料，甲醇塑料储罐采用特殊的滚塑工艺整体成型。具有无焊接、不渗漏、无毒性、重量轻、抗老化、抗冲击、耐腐蚀、一体成型整体性、长寿命优点尤为突出。能储存和反应绝大多数无机酸、碱、盐类溶液和大部分有机溶剂，能部分替代不锈钢钛、镍、高级合金钢等材料，产品符合危险品储运条例，是储存甲醇及反应化工腐蚀溶液、洁净溶液理想储存容器。本产品符合国家卫生标准，可替代不锈钢容器装运食品级溶液。 2.甲醇储罐的进出液口甲醇储罐的进出液口必须采用和塑料储罐一样材质的PE法兰作为出液口，这样就不会因为其它材质的接口引起渗漏。甲醇的用途甲醇用途广泛，是基础的有机化工原料和优质燃料。主要应用于精细化工，塑料等领域，用来制造甲醛、醋酸、氯甲烷、甲氨、硫二甲酯等多种有机产品，也是农药、医药的重要原料之一。甲醇在深加工后可作为一种新型清洁燃料，也加入汽油掺烧。甲醇和氨反应可以制造一甲胺。主要用于制造甲醛、醋酸、氯甲烷、甲胺和硫酸二甲酯等多种有机产品。也是农药(杀虫剂、杀螨剂)、医药(磺胺类、合霉素等)的原料,合成对苯二甲酸二甲酯、甲基丙烯酸甲酯和丙烯酸甲酯的原料之一。 [4] 甲醇的来源[1] 甲醇可从煤制取，特别是可利用劣质高硫煤和焦炉气回收制取。也可自生物质（如林木、有机垃圾等）提取。甲醇生产是我国化工行业中的成熟产业，生产工艺简单，投资和生产成本都较低。2012年我国甲醇年产能力有5074万吨，年产量约2640万吨，产能过剩情况严重。新建一个年产60万吨的装置，投资约20亿元，其生产工艺路线和装备完全可立足国内，并拥有自主知识产权。 5生产方法工业上合成甲醇几乎全部采用一氧化碳加压催化加氢的方法，工艺过程包括造气、合成净化、甲醇合成和粗甲醇精馏等工序；（粗甲醇的净化过程包括精馏和化学处理。化学处理主要用碱破坏在精馏过程中难以分离的杂质，并调节pH值；精馏主要是脱除易挥发组分如二甲醚，以及难挥发组分职乙醇、高碳醇和水。粗馏后的纯度一般都可达到98%以上。）

沉淀蛋白质的常用方法

沉淀蛋白质的常用方法（TCA、乙醇、丙酮沉淀蛋白操作步骤） 2010-08-18 15:19 TCA-DOC For precipitation of very low protein concentration 1) To one volume of protein solution, add 1/100 vol. of 2% DOC (Na deoxy cholate, detergent). 2) Vortex and let sit for 30min at 4oC. 3) Add 1/10 of Trichloroacetic acid (TCA) 100% vortex and let sit ON at 4oC (preparation of 100% TCA: 454ml H2O/kg TCA. Maintain in dark bottle at 4oC.Be careful, use gloves!!!). 4) Spin 15min 4oC in microfuge at maximum speed (15000g). Carefully discharge supernatant and retain the pellet: dry tube by inversion on tissue paper (pellet may be difficult to see). [OPTION: Wash pellet twice repellet samples 5min at full speed between washes]. 5) Dry samples under vaccum (speed vac) or dry air. For PAGE-SDS, resuspend samples in a minimal volume of sample buffer. (The presence of some TCA can give a yellow colour as a consequence of the acidification of the sample buffer ; titrate with 1N NaOH or 1M TrisHCl pH8.5 to obtain the normal blue sample buffer colour.) Normal TCA To eliminate TCA soluble interferences and protein concentration 1) To a sample of protein solution add Trichloroacetic acid (TCA) 100% to get 13% final concentration. Mix and keep 5min –20oC and then 15min 4oC; or longer time at 4oC without the –20oC step for lower protein concentration. Suggestion: leave ON if the protein concentration is very low. (preparation of 100% TCA: 454ml H2O/kg TCA. Maintain in dark bottle at 4oC.Be careful, use gloves!!!). 2) Spin 15min 4oC in microfuge at maximum speed (15000g). Carefully discharge supernatant and retain the pellet: dry tube by inversion on tissue paper (pellet may be difficult to see). 3) For PAGE-SDS, resuspend samples in a minimal volume of sample buffer. (The presence of some TCA can give a yellow colour as a consequence of the acidification of the sample buffer ; titrate with 1N NaOH or 1M TrisHCl pH8.5 to obtain the normal blue sample buffer colour.) Acetone Precipitation To eliminate acetone soluble interferences and protein concentration

甲醇 MSDS

甲醇 MSDS 基本信息中文名：甲醇；木酒精木精；木醇英文名： Methyl alcohol；Methanol 分子式：CH4O 分子量： 32.04 CAS号： 67-56-1 外观与性状：无色澄清液体，有刺激性气味。主要用途：主要用于制甲醛、香精、染料、医药、火药、防冻剂等。物理化学性质熔点： -97．8 沸点： 64．8 相对密度(水=1)：0．79 相对密度(空气=1): 1．11 饱和蒸汽压(kPa)：13．33／21．2℃ 溶解性：溶于水，可混溶于醇、醚等多数有机溶剂临界温度(℃)：240 临界压力(MPa)：7．95 燃烧热(kj/mol)：727．0 甲醇由甲基和羟基组成的，具有醇所具有的化学性质。[3] 甲醇可以在纯氧中剧烈燃烧，生成水蒸气(I)和二氧化碳(IV)。另外，甲醇也和氟气会产生猛烈的反应。[4] 与水、乙醇、乙醚、苯、酮、卤代烃和许多其他有机溶剂相混溶，遇热、明火或氧化剂易燃烧。燃烧反应式为： CH3OH + O2 → CO2 + H2O 具有饱和一元醇的通性，由于只有一个碳原子，因此有其特有的反应。例如：① 与氯化钙形成结晶状物质CaCl2·4CH3OH，与氧化钡形成B aO·2CH3OH的分子化合物并溶解于甲醇中；类似的化合物有MgCl2·6CH3OH、CuSO4·2CH3OH、CH3OK·CH3OH、AlCl3·4CH3OH、AlCl3·6CH3OH、AlCl3·10CH3OH等；② 与其他醇不同，由于-CH2OH基与氢结合，氧化时生成的甲酸进一步氧化为CO2；③ 甲醇与氯、溴不易发生反应，但易与其水溶液作用，最初生成二氯甲醚(CH2Cl)2O，因水的作用转变成HCHO与HCl；④ 与碱、石灰一起加热，产生氢气并生成甲酸钠；CH3OH+NaOH→HCOONa+2H2；⑤与锌粉一起蒸馏，发生分解，生成 CO和H2O。[2] 产品用途 1.基本有机原料之一。主要用于制造甲醛、醋酸、氯甲烷、甲胺和硫酸二甲酯等多种有机产品。也是农药（杀虫剂、杀螨剂）、医药（磺胺类、合霉素等）的原料，合成对苯二甲酸二甲酯、甲基丙烯酸甲酯和丙烯酸甲酯的原料之一。还是重要的溶剂，亦

蛋白质提取常用试剂及操作方法

蛋白质提取常用试剂及操作方法一、原料选择和前处理（一）原料的选择早年为了研究的方便，尽量寻找含某种蛋白质丰富的器官从中提取蛋白质。但至目前经常遇到的多是含量低的器官或组织且量也很小，如下丘脑、松果体、细胞膜或内膜等原材料，因而对提取要求更复杂一些。原料的选择主要依据实验目的定。从工业生产角度考虑，注意选含量高、来源丰富及成本低的原料。尽量要新鲜原料。但有时这几方面不同时具备。含量丰富但来源困难，或含量来源均理想，但分离纯化操作繁琐，反而不如含量略低些易于获得纯品者。一般要注意种属的关系，如鲣的心肌细胞色素C 较马的易结晶，马的血红蛋白较牛的易结晶。要事前调查制备的难易情况。若利用蛋白质的活性，对原料的种属应几乎无影响。如利用胰蛋白酶水解蛋白质的活性，用猪或牛胰脏均可。但若研究蛋白质自身的性质及结构时，原料的来源种属必须一定。研究由于病态引起的特殊蛋白质（本斯.琼斯氏蛋白、贫血血红蛋白）时，不但使用种属一定的原料，而且要取自同一个体的原料。可能时尽量用全年均可采到的原料。对动物生理状态间的差异（如饥饿时脂肪和糖类相对减少），采收期及产地等因素也要注意。（二）前处理 1.细胞的破碎材料选定通常要进行处理。要剔除结缔组织及脂肪组织。如不能立即进行实验，则应冷冻保存。除了提取及胞细外成分，对细胞内及多细胞生物组织中的蛋白质的分离提取均须先将细胞破碎，使其充分释放到溶液中。不同生物体或同一生物体不同的组织，其细胞破坏难易不一，使用方法也不完全相同。如动物胰、肝、脑组织一般较柔软，作普通匀浆器磨研即可，肌肉及心组织较韧，需预先绞碎再制成匀桨。 ⑴机械方法主要通过机械切力的作用使组织细胞破坏。常用器械有：①高速组织捣碎机（转速可达10000rpm，具高速转动的锋利的刀片），宜用于动物内脏组织的破碎；②玻璃匀浆器（用两个磨砂面相互摩擦，将细胞磨碎），适用于少量材料，也可用不锈钢或硬质塑料等，两面间隔只有十分之几毫米，对细胞破碎程度较高速捣碎机高，机械切力对分子破坏较小。小量的也可用乳钵与适当的缓冲剂磨碎提取，也可加氧化铝、石英砂及玻璃粉磨细。但在磨细时局部往往生热导致变性或pH 显著变化，尤其用玻璃粉和氧化铝时。磨细剂的吸附也可导致损失。 ⑵物理方法主要通过各种物理因素的作用，使组织细胞破碎的方法。 Ⅰ.反复冻融法于冷藏库或干冰反复于零下15～20℃使之冻固，然后缓慢地融解，如此反复操作，使大部分细胞及细胞内颗粒破坏。由于渗透压的变化，使结合水冻结产生组织的变性，冰片将细胞膜破碎，使蛋白质可溶化，成为粘稠的浓溶液，但脂蛋白冻结变性。 Ⅱ.冷热变替法将材料投入沸水中，于90℃左右维持数分钟，立即置于冰浴中使之迅速冷却，绝大部分细胞被破坏。 Ⅲ.超声波法暴露于9～10 千周声波或10～500 千周超声波所产生的机械振动，只要有设备该法方便且效果也好，但一次处理量较小。应用超声波处理时应注意避免溶液中气泡的存在。处理一些

甲醇蛋白

甲醇蛋白 1. 概况甲醇蛋白目前主要作为饲料添加剂，补充蛋白资源。甲醇蛋白是以甲醇为碳源生产的单细胞蛋白，被称为第二代单细胞蛋白，简称SCP。其主要成分为粗蛋白、脂肪、赖氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、矿物质和维生素，其中，粗蛋白质量分数平均在70％以上。营养价值高，其粗蛋白含量甚至比鱼粉和大豆高得多,见下表。甲醇蛋白主要用于动物饲料，可以代替鱼粉、大豆、骨粉、肉类和脱脂奶粉。在国外，甲醇蛋白已广泛用作仔猪、肉鸡、小牛和鱼的饲料，甲醇蛋白具有资源丰富、生产不受气候条件影响、合成速度快、蛋白质量稳定等特点。以甲醇为原料合成甲醇蛋白用作高能量的精饲料，每10 kt可节省粮食25 kt，可配制100 kt饲料，是解决我国养殖业及食品工业蛋白质短缺问题的重要途径之一。甲醇蛋白与鱼粉、大豆营养成份比较 2. 国内外甲醇蛋白发展情况 2.1 国外 20世纪60年代后期，世界上不少国家纷纷研究甲醇蛋白，70年代初研究单位达1000多个。目前，甲醇蛋白已成为世界性的研究课题，并取得很大进展。前苏联1985年SCP产量已达1500 kt。占领先地位的首推英国，1980年已有100 kt/a的甲醇蛋白装置投产，工艺技术居世界领先地位。到1982年后，装置的年产量已达到5-7万t/a，且拥有世界上最大的连续发酵器，生产的甲醇蛋白商品名为“Pruteen”，产品中含有72％的粗蛋白，蛋氨酸和赖氨酸含量与白鱼粉非常相近。国外主要甲醇蛋白装置千吨/年 2.2 国内 20世纪70年代以来，我国开始大力开展甲醇蛋白的研究，主要研究单位包括中国科学院微生物研究所等单位。尽管我国甲醇蛋白仍未实现工业化生产，但全国约有40多家工厂主要以酒精、糖、味精、纸张、淀粉、豆制品、屠宰场等的废弃物为原料，生产了单细胞蛋白质，以部分填补我国市场对其迫切需求.并仍在积极研究开发甲醇蛋白项目,与此同时,已有若干家企业已在准备新建大型甲醇蛋白生产装置。 3. 市场

TCA 蛋白沉淀方法

100％（w/v）三氯乙酸的配制方法： 500g三氯乙酸用227ml水来溶解，所得溶液即100％三氯乙酸溶液。避光，4度保存。(preparation of 100% TCA: 454ml H2O/kg TCA. Maintain in dark bottleat 4oC.Be careful, use gloves!!!). 培养基上清直接电泳跑出来的条带经常很难看，可以TCA沉淀浓缩后跑电泳，一般表达量大于1mg/ml可以看到明显条带，这是我用的TCA沉淀方法，效果很好： 1.菌液10000g,离心5分钟，收集表达上清。 2.取500-1000ul上清于EP管中，加入1/9体积的100％TCA，颠倒10次混匀。 3.样品置于冰浴中大于0.5小时，过夜效果更好。 4.15000g,离心10－20分钟,可见有棕黑色沉淀，倒掉上清，将EP管倒扣在吸水纸上轻轻控几下，除去残余在管口的液体。 5.将EP管倒置于吸水纸长，37度烘箱10－20分钟，待管底无明显液体残留，如果管壁还残留有液体，可以吸水纸吸掉。可以改成室温或用电吹风，关键是除去管底和管壁残余液体。 6.15000g,离心10－20分钟,用20ul枪头尽量吸去管底残余的液体，此步骤要快，不然沉淀容易散开，降低蛋白回收率，一般最多几ul或者没有，注意不要吸到沉淀。 7.EP管倒置于吸水纸长，37度烘箱5分钟，确认管壁和管底没有液体残留。 8.加入20－50ul Loading buffer，95度加热10nim，一般沉淀会自动溶解，如果不溶，用手指轻弹管壁或用20ul枪头轻轻吸打，注意整个操作尽量不要碰到管壁，因为管壁可能沾有残余TCA。如果蓝色的Loading buffer不变成黄色，说明残余TCA吸弃了干净，如果变黄，一般不影响电泳。此方法连丙酮洗这一步都省了，而且不影响电泳效果。

蛋白质沉淀法

蛋白质沉淀法在生化制备中，沉淀主要用于浓缩目的，或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制备中常用的有以下几种沉淀方法和沉淀剂： 1．盐析法多用于各种蛋白质和酶的分离纯化。 2．有机溶剂沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化，有时也用于蛋白质沉淀。 3．等电点沉淀法用于氨基酸、蛋白质及其它两性物质的沉淀。但此法单独应用较少，多与其它方法结合使用。 4．非离子多聚体沉淀法用于分离生物大分子。 5．生成盐复合物沉淀用于多种化合物，特别是小分子物质的沉淀。 6．热变性及酸碱变性沉淀法用于选择性的除去某些不耐热及在一定PH值下易变性的杂蛋白。第一节盐析法一般来说，所有固体溶质都可以在溶液中加入中性盐而沉淀析出，这一过程叫盐析。在生化制备中,许多物质都可以用盐析法进行沉淀分离，如蛋白质、多肽、多糖、核酸等，其中以蛋白质沉淀最为常见，特别是在粗提阶段。盐析法分为两类，第一类叫Ks分段盐析法，在一定PH和温度下通过改变离子强度实现，用于早期的粗提液；第二种叫b分段盐析法，在一定离子强度下通过改变PH和温度来实现，用于后期进一步分离纯化和结晶。一．影响盐析的若干因素 1．蛋白质浓度高浓度蛋白溶液可以节约盐的用量，但许多蛋白质的b 和Ks常数十分接近，若蛋白浓度过高，会发生严重的共沉淀作用；在低浓度蛋白质溶液中盐析，所用的盐量较多，而共沉淀作用比较少，因此需要在两者之间进行适当选择。用于分步分离提纯时，宁可选择稀一些的蛋

白质溶液，多加一点中性盐，使共沉淀作用减至最低限度。一般认为2.5%-3.0%的蛋白质浓度比较适中。 2．离子强度和类型一般说来，离子强度越大，蛋白质的溶解度越低。在进行分离的时候，一般从低离子强度到高离子强度顺次进行。每一组分被盐析出来后，经过过滤或冷冻离心收集，再在溶液中逐渐提高中性盐的饱和度，使另一种蛋白质组分盐析出来。离子种类对蛋白质溶解度也有一定影响，离子半径小而很高电荷的离子在盐析方面影响较强，离子半径大而低电荷的离子的影响较弱，下面为几种盐的盐析能力的排列次序：磷酸钾>硫酸钠>磷酸铵>柠檬酸钠>硫酸镁。 3．PH值一般来说，蛋白质所带净电荷越多溶解度越大，净电荷越少溶解度越小，在等电点时蛋白质溶解度最小。为提高盐析效率，多将溶液PH值调到目的蛋白的等电点处。但必须注意在水中或稀盐液中的蛋白质等电点与高盐浓度下所测的结果是不同的，需根据实际情况调整溶液PH值，以达到最好的盐析效果。 4．温度在低离子强度或纯水中，蛋白质溶解度在一定范围内随温度增加而增加。但在高浓度下，蛋白质、酶和多肽类物质的溶解度随温度上升而下降。在一般情况下，蛋白质对盐析温度无特殊要求，可在室温下进行，只有某些对温度比较敏感的酶要求在0-4℃进行。二．硫酸铵的使用硫酸铵中常含有少量的重金属离子，对蛋白质巯基有敏感作用，使用前必须用H2S处理：将硫酸铵配成浓溶液，通入H2S饱和，放置过夜，用滤纸除去重金属离子，浓缩结晶，100℃烘干后使用。另外，高浓度的硫酸铵溶液一般呈酸性（PH=5.0左右），使用前也需要用氨水或硫酸调节至所需PH。硫酸铵的加入有以下几种方法：1）加入固体盐法用于要求饱和度较高而不增大溶液体积的情况；2）加入饱和溶液法用于要求饱和度不高而原来溶液体积不大的情况；3）透析平衡法先将盐析的样品装于透析袋中，然后浸入饱和硫酸铵中进行透析，透析袋内硫酸铵饱和