根据乙肝表面抗原滴度注射不同剂量乙肝免疫球蛋白
?论著?
根据乙肝表面抗原滴度注射不同剂量乙肝免疫球蛋白
降低胎儿宫内感染率的研究
汪洪,郭晓玲,梁少联,陈咏涛,张国华,刘金凤
【摘要】目的根据乙肝表面抗原(HBsAg)滴度不同,注射不同剂量的乙肝免疫球蛋白(HBIG),以降低高滴度HBsAg孕妇的宫内感染率的研究。方法选取2004年12月—2007年12月在本院系统产检分娩的乙肝表面抗原(HBsAg)阳性的孕妇及其分娩的新生儿共385例为研究对象。孕妇于孕28周前抽取静脉血查HBsAg滴度、HBeAg及HBV-DNA,观察组170例孕妇于孕28周、32周、36周分别注射HBIG400IU,对照组215例同期注射HBIG200IU。两组患者产后即时抽取胎儿脐血,查乙肝两对半及HBV-DNA,若HBsAg(+)和(或)HBeAg(+)或HBV-DNA(+),确定为胎儿宫内感染。结果单纯低滴度HBsAg患者胎儿宫内感染率为11%,10%,差异无显著性;单纯高滴度HBsAg患者胎儿宫内感染率为9%,18%,差异有显著性;低滴度HB２sAg(+)合并HBeAg(+)或(和)HBV-DNA(+)患者胎儿宫内感染率为13%,13%,差异无显著性;高滴度HBsAg(+)合并HBeAg(+)或(和)HBV-DNA(+)患者胎儿宫内感染率为15%,21%,差异有显著性。结论对HBsAg滴度较高的孕妇,尤其是合并HBeAg阳性或(和)抗HBc阳性的孕妇,注射较大安全剂量的HBIG以阻断胎儿宫内感染率是可行的。
【关键词】乙型肝炎病毒;乙肝免疫球蛋白;宫内感染
【中图分类号】R714.251 【文献标识码】 A 【文章编号】1684-2030(2009)01-0001-04
According to the titer of HBsAg injection of differ ent doses of HBIG r educed in２tr auter ine infection study.
WA NG Hong,GUO Xiao-ling,LIA NG Sha o-lia n,et al.Ma terna l and Child Health Hospita l,Fosha n528000, China
【Abstr act】Ob jective According to the titer of HBsAg,injection of different doses of HBIG,in order to reduce the high titer HBsAg intrauterine infection of pregnant women’s studies.Methods Select from December2004to December2007,seized the delivery of HBsAg-positive pregnant women and their newborn’s birth to a total of 385cases for the study.Before28weeks pregnant,Pregnant women search titer HBsAg,HBeAg and HBV-DNA, Observer Group170cases of pregnant women at28weeks pregnant,32weeks and36weeks were injected HBIG 400IU,in the control group215cases of injection HBIG200IU.Two groups of patients with post-natal fetal cord blood taken from real-time,Richard HBsAg、HBeAg and HBV-DNA,if HBsAg(+)and/or HBeAg(+)or HBV-DNA(+),identified as intrauterine infection;Results HBsAg simple low titer in patients with intrauterine infection rate was11%,10%,no significant difference;high-alone patients titers HBsAg intrauterine infection rate was9percent,18percent,a significant difference;low titer HBsAg(+)Merger HBeAg(+)and/or HBV -DNA(+)patients,intrauterine infection rate was13%,13%,no significant difference;high-titer HBsAg (+)merger HBeAg(+)or/And HBV-DNA(+)patients,intrauterine infection rate was15percent,21 percent,a significant difference.Conclusions HBsAg high titer of pregnant women,in particular the merger of HBeAg-positive and/or anti-HBc-positive pregnant women,injecting large doses of HBIG security to block the intrauterine infection rate is feasible.
【K ey words】hepatitis B virus(HBV);HBV immunoglobulin;intrauterine infection
作者单位:528000广东佛山,佛山市妇幼保健院
乙型肝炎是一种严重危害人类健康的世界性传染病,据世界卫生组织(WHO)统计,当前全世界乙型肝炎病毒(HBV)感染者约20亿,其中3.5亿为HBV慢性携带者,我国乙肝表面抗原(HBsAg)携带率平均为10%,人群中40%～50%的慢性乙肝病毒携带者主要通过母婴垂直传播。而广东地区更是乙肝高发区。我院开展了根据乙肝表面抗原(HBsAg)滴度不同注射不同剂量的乙肝免疫球蛋白(HBIG)以降低高滴度HBsAg孕妇的宫内感染率的研究,现总结报道如下。
1资料与方法
1.1研究对象选取2004年12月—2007年12月在本院系统产检分娩的乙肝表面抗原(HBsAg)阳性的孕妇及其分娩的新生儿共385例为研究对象。随机抽取同意孕期注射HBIG400IU者170例为观察组,孕期注射HBIG200IU者215例为对照组。两组分娩孕周均为孕37～41周之间,两组孕产妇的年龄、孕产次、妊娠并发症差别均无显著性(P> 0１05)。
1.2研究方法首先根据本院检验科近3年来的检验资料,找出HBsAg阳性者的浓度值,算出浓度的中位数(M),规定低滴度HBsAg患者滴度值 观察组按单纯低滴度HBsAg患者,单纯高滴度HBsAg患者,低滴度HBsAg(+)合并HBeAg(+)或(和)HBV-DNA(+)患者,高滴度HBsAg(+)合并HBeAg(+)或(和)HBV-DNA(+)患者,分a、c、e、j4个小组,于孕28周、32周、36周分别注射HBIG 400IU,共170例孕妇;对照组同孕周注射HBIG 200IU,同样分b、d、f、h4个小组,共215例孕妇。两组患者产后即时抽取胎儿脐血,查乙肝两对半及HBV-DNA,若HBsAg(+)和(或)HBeAg(+)或HBV-DNA(+),确定为胎儿宫内感染。 1.3统计学处理根据4个小组感染率,将a与b 小组,c与d小组,e与f小组,g与h小组分别对照分析,计数资料采用卡方检验。确定宫内感染率是否差异有显著性,得出结论。 2结果 2.1 单纯低滴度HBsAg患者胎儿宫内感染情况 单纯低滴度HBsAg患者胎儿宫内感染率为10１00%,10１90%,差异无显著性(P>0.05),见表1。 表1 单纯低滴度HBsAg患者胎儿宫内 感染情况例(%) 组别例数胎儿宫内感染观察组(a)556(11) 对照组(b)606(10) P>0.05 2.2 单纯高滴度HBsAg患者胎儿宫内感染情况 单纯高滴度HBsAg患者胎儿宫内感染率为16１36%,11.11%,差异有显著性(P<0.05),见表2。 表2 单纯高滴度HBsAg患者胎儿宫内 感染情况例(%) 组别例数胎儿宫内感染观察组(c)455(9) 对照组(d)559(18) P<0.05 2.3 低滴度HBsAg(+)合并HBeAg(+)或(和) HBV-DNA(+)患者胎儿宫内感染情况低滴度HBsAg(+)合并HBeAg(+)或(和)HBV-DNA (+)患者胎儿宫内感染率为20.83%,19.44%,差异无显著性(P>0.05),见表3。 表3 低滴度HBsAg(+)合并HBeAg(+)或(和) HBV-DNA(+)患者胎儿宫内感染情况例(%) 组别例数胎儿宫内感染观察组(e)367(13) 对照组(f)245(13) P>0.05 2.4 高滴度HBsAg(+)合并HBeAg(+)或(和) HBV-DNA(+)患者胎儿宫内感染情况高滴度 HBsAg(+)合并HBeAg(+)或(和)HBV-DNA (+)患者胎儿宫内感染率为28.95%,20.03%,差异有显著性(P<0.05),见表4。 表4 高滴度HBsAg(+)合并HBeAg(+)或(和) HBV-DNA(+)患者胎儿宫内感染情况例(%) 组别例数胎儿宫内感染观察组(j)7215(15) 对照组(h)3811(21) P<0.05 3讨论 乙型肝炎病毒可垂直传播感染新生儿,其传播途径有宫内感染、产道感染、母乳感染、羊水感染、产妇唾液感染5条途径,宫内感染主要是子宫内经胎盘传播,是母婴传播中的重要途径[1]。资料显示,乙型肝炎宫内感染强弱与孕妇HBsAg浓度有关:浓度越低,感染力越弱;浓度越高,越易感染[2]。我国观察HBsAg滴定度≤1:28婴儿阳性率45.5%,≥1:256则为70%,认为高滴定度即使在微量血液交流中足以有充足量的HBsAg传播[3]。据文献报道,宫内感染的发生与HBeAg有关,贾青青等[4]对HBsAg阳性的孕妇于孕28周检测HBeAg及HBV-DNA,发现HBeAg阳性孕妇中HBV-DNA阳性率明显高于HBeAg阴性孕妇。Sharma等[5]报道单纯HBsAg阳性的孕妇胎儿受感染率约50%～60%,合并HBeAg阳性和抗HBc阳性孕妇宫内感染率可达88%～90%[6]。李小毛等[7]研究指出,定量检测母血中的HBV-DNA可准确反映孕妇传染性的强弱,宫内感染随孕妇血清HBV-DNA含量增加而增高,当母血HBV-DNA在108Copy/ml以上时,即使使用HBIG仍有可能高达40%的宫内感染率。所以,可对携带乙肝病毒的孕妇了解其浓度,浓度越高,宫内感染机会越大;同时HBsAg阳性和(或)HBV-DNA阳性,孕妇发生宫内感染机会也增加。 通过研究,多数学者认为于孕中晚期应用HBIG可有效阻断HBV宫内感染[8],通过对感染HBV的孕妇肌注乙肝免疫球蛋白(HBIG),可阻断HBV宫内传播,已得到证实[9]。HBIG是乙肝疫苗免疫健康人后采集的高效价免疫球蛋白制剂,属被动抗体,其中抗HBs抗体与HBsAg结合,激活补体系统,增强体液免疫,同时清除乙型肝炎病毒(HBV)降低母血中的病毒含量,以减少正常细胞感染及病毒复制。妊娠20周后胎盘具有主动输送抗体的功能,孕妇注射HBIG,HBsAb可通过胎盘到达胎儿体内,使其获得被动免疫,预防HBV感染。孕晚期又是HBV宫内感染机会最多的时期,故此时注射HBIG可减低感染率。 资料证实,HBIG每次注射200～400IU是安全剂量,一般不会出现不良反应,少数人有红肿、疼痛感,无须特殊处理,可自行恢复。目前通常的阻断方法是采用乙肝免疫球蛋白(HBIG),从28周开始,连续3个月,每月肌注HBIG200IU。对浓度低、感染性弱的孕妇,低剂量的HBIG(200IU)效果比较理想,可以减少60%～80%胎儿宫内感染率[10];本研究中,单纯低滴度HBsAg患者胎儿宫内感染率为10１00%,10.90%,差异无显著性;低滴度HBsAg (+)合并HBeAg(+)或(和)HBV-DNA(+)患者胎儿宫内感染率为20.83%,19.44%,差异无显著性;对滴度低的孕妇,建议采用常规低剂量HBIG进行阻断,减少不良反应的可能;单纯高滴度HBsAg 患者胎儿宫内感染率为16.36%,11.11%,差异有显著性;高滴度HBsAg(+)合并HBeAg(+)或(和)HBV-DNA(+)患者胎儿宫内感染率为28１95%,20.03%,差异有显著性;说明HBsAg滴度较高的孕妇,尤其是合并HBeAg阳性或(和)抗HBc 阳性的孕妇,大剂量HBIG更能有效清除乙型肝炎病毒(HBV),降低母血中的病毒含量,以减少正常细胞感染及病毒复制,从而达到降低阻断胎儿宫内感染率。因此,HBsAg滴度较高的孕妇,尤其是合并HBeAg阳性或(和)抗HBc阳性的孕妇,注射较大安全剂量的HBIG以阻断胎儿宫内感染率是可行的。 通过研究,尽管于孕中晚期应用HBIG阻断HBV宫内感染,但其阻断率仍没有达到100%,仍有10%～20%的阻断失败率,与相关资料一致[11]。可能与以下几点有关:(1)HBeAg感染及HBsAg高滴度、HBV-DNA高浓度,由此说明HBV传染性强,母婴传播与母血清高病毒血症相关,现有的HBIG 接种剂量尚未能完全中和孕妇血中的HBV抗原。HBIG对HBeAg无明显影响,可能与其存在于Dane 颗粒之外,还有游离的HBeAg和IgG-HBeAg两种形式存在,HBIG无法与之结合而清除有关。(2) HBV基因变异。(3)宫内感染免疫耐受。(4)基因传播。(5)“肝外库”激活学说[2,11]。 【参考文献】 1 闫永平,徐德忠,王文亮,等.胎盘乙型肝炎病毒感染与宫内传播 的关系.中华妇产科杂志,1999,34:392-395. 2 F Gary Cunninghan.威廉姆斯产科学.北京:科学出版社,2001, 1217-1221. 3 乌云其格格,葛冬梅,祁晓琴.乙型肝炎病毒母婴传播途径与阻 断方法.内蒙古医学杂志,2005,37(5):436-438. 4 贾青青,顾扬.乙型肝炎免疫球蛋白阻断HBV宫内感染的疗效 及其适应证研究.新生儿杂志,2001,16(5):196-197.5Sharma R,Malik A,Rattam A,et al.Hepatitis B virus infection pregn２net w omen and its transmission toinfants.J Trop Pebiantr,1996,42 (6):352-355. 6姚珍薇,吴味辛.妊娠合并病毒性肝炎.实用妇产科杂志,1999, 15:185-187. 7李小毛,施敏凤,杨越波,等.孕妇注射乙肝免疫球蛋白阻断HBV宫内传播的研究.中国优生与遗传杂志,2002,10(1):63- 64. 8刘艳庚,陈萱.乙肝孕妇应用乙肝免疫球蛋白(HBIG)阻断母婴传播的研究.中国优生与遗传杂志,2005,13(9):121-122. 9乐杰.妇产科学,第6版.北京:人民卫生出版社,2004,154. 10 陈敏,朱坤仪,宋华,等.乙肝病毒携带孕妇被动免疫阻断母婴 传播的研究.中国优生与遗传杂志,2003,11(3):65,79. 11 张振洪.我国乙肝病毒垂直传播及其预防的研究现状.中国优 生与遗传杂志,2001,9(6):1. (编辑:石岚) ?经验交流? 小剂量氟哌啶醇用于防治剖宫产术中术后恶心呕吐 的麻醉体会 朱玉珍,于含清,王均涛 【中图分类号】R719.8 【文献标识码】 B 【文章编号】1684-2030(2009)01-0004-02 恶心、呕吐是剖宫产手术常见并发症之一,尤其是急诊的产妇,由于术前未行常规禁食水准备,术中恶心、呕吐发生率较高。所以,既能有效防治恶心呕吐,又要最大限度地保护胎儿、新生儿,是剖宫产手术麻醉管理的难题之一。近年来,国内外文献相关而且具体的报道较少。2007年1—6月,笔者将200例在腰麻-硬膜外联合麻醉(腰-硬联合麻醉)下行剖宫产术患者随机分为两组,即用药组、对照组各100例,进行双盲对照研究,观察发现小剂量氟哌啶醇不仅能很好地防治术中术后恶心、呕吐,而且对胎儿及新生儿无任何影响。现报告如下。 1资料与方法 1.1一般资料选择年龄25～30岁,无妊高征等其他合并症的急诊剖宫产患者200例,随机分为用 作者单位:014010内蒙古包头,包头市包钢三医院麻醉科药组(n=100)及对照组(n=100)。手术时间均60 ±20min。 1.2 麻醉方法术前30min苯巴比妥钠0.1g肌肉注射。入手术室后,开放静脉,取右侧卧位,选L 2～3椎间隙为麻醉穿刺点。采用一次性腰-硬联合穿刺包,常规无菌操作下,硬膜外穿刺成功后,穿入腰麻针,见脑脊液流出即蛛网膜下腔缓慢(15s)注入0. 75%布比卡因1ml+10%葡萄糖1ml混合液2ml。退出腰麻针,置入硬膜外导管并固定,患者取仰卧位。1min后用药组予氟哌啶醇2.5mg(0.5ml)小壶滴入,对照组予生理盐水0.5ml小壶滴入。同时,调 整手术床使麻醉平面固定在T 6 以下。手术结束时硬膜外腔注入吗啡2mg用于术后镇痛。 1.3 指标观察观察两组术中及术后6h内恶心、呕吐发生率,以及新生儿出生后1min、5min Apgar 评分情况。同时监测患者术中生命(下转第7页) 1、乙肝表面抗原（HBsAg）阳性：代表被乙肝病毒感染。（病毒数量） 2、乙型肝炎表面抗体（HBsAb或抗-HBs）阳性：代表机体对乙肝病毒有抵抗力，能够杀灭乙肝病毒。（对病毒的抗体） 3、乙肝e抗原（HBeAg）阳性：代表乙肝病毒复制活跃，传染性强。（病毒复制性强弱） 4、乙肝e抗体(HBeAb或抗HBe)阳性：代表病毒复制相对减少，传染性弱。（同上） 5、乙肝核心抗体（HBcAb或抗HBc）阳性：代表感染了乙肝病毒或曾经感染过乙肝病毒已经痊愈。乙肝病毒血清标志物的临床意义（乙肝两对半） HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc 意义 + - - - - 急性HBV感染潜伏期 + - + - - 急性肝炎早期，传染性强 + - + - + 急性或慢性感染传染性强 + - - + + 急性或慢性感染后期传染性低 + - - - + 急性或慢性乙型肝炎HBV携带者 + + + - + HBsAg免疫复合物，新的不同亚型感染 + + + + + ①一种亚型的HBsAg及异型的抗HBs（常见） ②血清从HBsAg转化为抗HBs的过程（少见） - + - - + HBV感染，恢复期 - - - + + ①HBV感染已过 ②抗HBs出现前的窗口期 - + - + + HBV感染恢复期 - + - - - ①注射疫苗后 ②遥远的过去感染 ③假阳性 乙肝“两对半”化验结果对照表 检查乙型肝炎病毒（HBV）感染最常用的血清学标志是乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(抗-HBs)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(抗-HBe)及乙肝核心抗体(抗-HBc)共5项指标，故称“乙肝两对半”，其作用有三：1.判断有无HBV感染；2.判断HBV感染者传染性的大小；3.作为慢性乙肝患者抗病毒治疗及疗效判断的依据之一，以下是几种常见的结果及意义。 模式HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc 诊断结果临床意义 1 ＋- + －+ “大三阳” 表明有HBV感染且病毒复制活跃，传染性较强 2 ＋- - + + “小三阳” 表明有HBV感染但病毒复制相对静止，传染性相对较弱 3 ＋- - - + 恢复初期表明有HBV感染但病毒复制相对静止，传染性相对较弱 4 - + - - + 恢复后期表明曾感染过HBV，但已产生保护性抗体，不具有传染性，也不需注射乙肝疫苗 5 - - - - + 恢复后期表明曾经感染过HBV 6 - + - - - 完全恢复表明注射乙肝疫苗后产生的保护性抗体，若未注射乙肝疫苗，则表明曾经感染过HBV，现已产生保护性抗体，不具有传染性，也不需要再注射乙肝疫苗。 说明：“乙肝两对半”仅反映HBV感染及复制情况并不能完全反映病情轻重，如“大三阳”病情不一定重，而“小三阳”病情不一轻。若要判断乙肝病情的轻重，除要检查“乙肝两对半”外，还应结合肝功能试验、肝纤维化指标及B超、CT表现才能准确判断当前病情。另外，若要更准确地判断HBV的复制状态及病人的传染性，还应做乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV DNA）的定量检查。 这个也可以看一下。 联合免疫阻断乙肝母婴传播：规范使用乙肝免疫球蛋白 主动+被动联合免疫（乙肝疫苗+乙肝免疫球蛋白）方法是目前公认的阻断乙型肝炎母婴传播最主要且有效措施，已由我国《慢性乙型肝炎防治指南》推荐。但在我国不同地区甚至不同医院所采用的免疫程序，尤其是乙肝免疫球蛋白的应用各不相同。作者参考国内外文献，回答乙肝母亲所生婴儿使用乙肝免疫球蛋白中的几个常见问题。 联合注射乙肝免疫球蛋白效果更佳 世界卫生组织认为，对于e 抗原阴性的乙肝病毒感染母亲所生婴儿，单独接种乙肝疫苗已达到免疫效果，联合乙肝免疫球蛋白并未明显增加疫苗效果。考虑成本或乙肝免疫球蛋白所带来的安全问题，联合使用乙肝免疫球蛋白并不必要。因此，有些国家和地区对 e 抗原和乙肝病毒DNA 均阴性的乙肝母亲所生后代只接种乙肝疫苗。乙肝母亲所生后代单用乙型肝炎疫苗阻断母婴传播的阻断率为87.8%，若同时使用乙肝免疫球蛋白，阻断率可明显提高，达95%以上。 乙肝免疫球蛋白先于疫苗注射 为更好地发挥乙肝免疫球蛋白效果，避免与乙肝疫苗相互作用造成抗原抗体中和反应，影响各自效果，目前公认婴儿出生后12 h内先注射乙肝免疫球蛋白，再于不同部位接种乙肝疫苗。多数专家特别强调乙肝免疫球蛋白注射时间，建议不要超过出生后12 h，若超过出生后48 h，免疫效果明显降低。乙肝免疫球蛋白注射后多长时间接种乙肝疫苗并无特别强调，乙肝免疫球蛋白和第一针乙肝疫苗注射间隔可从当日同时注射至3个月不等。我国《慢性乙型肝炎防治指南》推荐两种方案，一种为当日同时使用，另一种为间隔1个月。为避免乙肝疫苗漏种，大多数医院采用前者。但当日同时使用也应乙肝免疫球蛋白在先，乙肝疫苗在后，并注意不同部位注射，以间隔数小时为宜。我国主推剂量为100 IU在制备过程中，不同厂家生产的乙肝免疫球蛋白制剂所含乙肝病毒表面抗体（抗HBs）滴度通常有所差异，为统一剂量标准，要求所有厂家的制剂均按世界卫生组织制定的国际标准计量单位（IU）。在最初一些研究中，新生儿乙肝免疫球蛋白的剂量根据其出生体重计算，一般使用剂量为0.2~0.5 ml/kg，约为145 IU/ml。即出生体重为3 kg 的婴儿使用乙肝免疫球蛋白约87~217.5 IU。后来为求简便，大部分研究中新生儿使用的乙肝免疫球蛋白剂量为100 IU 或200 IU，少数研究为400 IU。 我国《慢性乙型肝炎防治指南》推荐剂量应≥100 IU。从理论上及某些研究结果显示，200 IU乙肝免疫球蛋白产生的保护效果更佳。但结合成本效益综合考虑，我国目前主要推广使用100 IU 剂量的乙肝免疫球蛋白，在许多地区，乙肝母亲所生后代可免费使用100 IU 剂量的乙肝免疫球蛋白。 不建议同时注射两针乙肝免疫球蛋白 从理论上讲，同时注射两针100 IU 剂量的乙肝免疫球蛋白等于注射了1 针200 IU剂量的乙肝免疫球蛋白。但是，医生不仅要考虑乙肝免疫球蛋白的剂量，还应考虑药物规格。 200 IU 剂量的乙肝免疫球蛋白针剂一般为2 ml/ 支，而100 IU 剂量的乙肝免疫球蛋白针剂有1 ml/支，也有2 ml/支。若使用了两支2 ml/ 支、100 IU 剂量的乙肝免疫球蛋白，新生儿注射部位注射 4 ml 液体，肯定会形成较大的注射包块，难以吸收。另外，两针药物同时注射也会增加注射污染机会。如果是不同批号的两针药物同时注射，可能增加过敏反应和其他不良反应发生率。因此，不建议同时注射两针100 IU 的乙肝免疫球蛋白以达到200 IU 的剂量要求。 第一剂乙肝免疫球蛋白可有效免疫 1 个月 乙肝母亲所生婴儿出生时立即注射乙肝免疫球蛋白可在两方面预防乙肝母婴传播：一是直接中和乙肝母亲分娩时污染到新生儿体内的乙肝病毒；二是婴儿出生后接种的乙肝疫苗尚未起效时，帮助婴儿抵御日常生活中与乙肝母亲密切接触而感染。但注射一次乙肝免疫球蛋白可在体内维持多长时间的免疫作用？ 研究显示，乙肝免疫球蛋白一般在注射后15~30 min 即开始发挥作用，其血药浓度一般在注射后3~7 d 达高峰，半衰期17.5~25 d，对新生儿的有效保护作用可维持42~63 d，4 个月后基本清除。因此，乙肝母亲所生婴儿在出生时注射一剂乙肝免疫球蛋白足以保护新生儿 1 个月内免受乙肝病毒感染。出生 1 个月时，婴儿体内检测到的乙肝病毒表面抗体并非均是乙肝疫苗刺激下免疫系统主动免疫产生，部分抗体仍为体内残留的被动免疫抗体。1 个月后，所注射的乙肝免疫球蛋白产生的被动免疫逐渐减少，此时新生儿的免疫系统在两针乙肝疫苗刺激下逐渐产生对乙肝病毒的主动免疫。 乙肝免疫球蛋白注射1~2 次足矣 乙型肝炎病毒表面抗原检测（ELISA） 1原理： 在微孔板上预包被被纯化的乙肝表面抗体（HBsAb），配以酶标记抗体（HbsAb-HRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清（或血浆）中乙肝表面抗原（HBsAg）。2试剂： 2.1试剂名称：乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒（酶联免疫法） 2.2试剂生产厂家：英科新创（厦门）科技有限公司 2.3包装规格：96Test/Kit 2.4试剂盒组成：HbsAb预包被微孔板（包被HbsAb），HbsAg 酶标抗体（含HRP标记HbsAb）, HbsAg阳性对照（含基因工程HbsAg），HbsAg阴性对照（正常人血清），HbsAg样品稀释液（含BSA缓冲液），浓缩洗涤液（PBS-T缓冲液），底物A（含H2O2），底物B（含TMB），终止液（含H2SO4），封板膜，自封袋，说明书。 2.5试剂储存条件及有效期：2~8℃避光保存，有效12个月。 3样本采集： 取静脉血3-4ml于干净容器中分离出血清或血浆标本，如不及时测定可置于4℃冰箱保存，如长期保存需置于-15至-20℃冻存，并避免样本反复冻融。高脂血、高胆红素及溶血样本可能会影响试验结果的准确性，建议不使用。 4所需仪器 4.1全自动酶免分析仪 4.2新鲜蒸馏水或去离子水 4.3酶标仪（单波长450nm或双波长450nm/630nm） 4.4微量移液器 4.5 37℃恒温箱或水浴箱 4.6洗板机或洗瓶 5检验方法 5.1平衡：将试剂盒各组分从盒中取出，平衡至室温（18~25℃），微孔板板开封后，余者即时以自封袋封存。 5.2配液：浓缩洗涤液配置前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水去离子水按1：19稀释后使用。 5.3编号：取所需数量微孔条固定于支架，按序编号。 5.4稀释：每孔加入20ul样品稀释液。 5.5加样：分别在相应孔中加入100ul阴、阳性对照血清或待测样本。 5.6温育：置37℃温育60min。 5.7加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体50ul。 5.8温育：置37℃温育30min。 5.9洗涤：用洗涤液充分洗涤5次、洗涤后扣干（每次应保持30~60s的浸泡时间）。 5.10显色：每孔加入底物A、B各50ul，轻拍混匀，37℃暗置30min。 5.11终止：每孔加入终止液50ul，混匀。 5.12测定：用酶标仪单波长450nm或双波长450nm/630nm 新生儿免费注射乙肝疫苗球蛋白记录单 （注射后此记录单由病房保存） NO: 一、家庭情况 母亲姓名：住院号： 家庭住址：联系电话： 二、新生儿情况 新生儿姓名：性别：（ 男 女） 出生体重：KG 出生日期：年月日时分 三、新生儿乙肝免疫球蛋白注射情况 第一针乙肝免疫球蛋白：100U 注射日期：年月日时分 生产单位：生产批号： 注射者（签字）： 四、注射单位及科室： 监护人（签字）：日期：年月日 免费注射乙肝免疫球蛋白知情同意书 各位孕妇及家属： 乙型肝炎病毒可通过母亲传播给婴儿，及时注射乙肝免疫球蛋白是有效预 防母婴传播的方法之一，针对乙肝表面抗原阳性产妇所生婴儿，政府免费提供 注射乙肝免疫球蛋白，为做好这项工作，现将有关事宜告知如下： 【注射原则】知情同意，免费，自愿注射。 【产品】人乙肝免疫球蛋白。 【注射程序】出生24小时内，接种1剂次，肌肉注射。 【注射剂量】每人每剂注射100国际单位。 【不良反应】一般不会出现不良反应，少数人有红肿、疼痛感，无需特殊 处理，可自行恢复。 【禁忌症】1.对人免疫球蛋白过敏或有其他严重过敏者；2.选择性IgA 缺乏者。 如需了解更多的与产品的相关信息，请查看乙肝免疫球蛋白说明书。若本 知情同意书的内容与乙肝免疫球蛋白说明书发生冲突的，则以乙肝免疫球蛋白 说明书为准。 如需了解更多乙肝预防，治疗信息，请咨询所在地卫生机构。 本人已认真阅读并理解本知情同意书内容，确认无上述任何禁忌症，自愿 予婴儿注射乙肝免疫球蛋白。免费100U 婴儿父（母）签名： 联系电话：签名日期：年月日 本人已认真阅读并理解本知情同意书内容，拒绝予婴儿注射乙肝免疫球蛋 白，并愿意承担可能会导致的不良后果。 婴儿父（母）签名： 联系电话：签名日期：年月日 助产单位（签章）：签名日期：年月日 乙型肝炎表面抗体定量检测 1．检验目的 检测HBsAb主要是用于监测乙型肝炎疫苗是否有效，HBsAb的出现表明机体具有针对乙肝病毒感染的免疫力和抵抗乙肝病毒的侵入，同时定量检测HBsAb还可以观察急性乙肝恢复的动态情况以及乙型肝炎的流行病学调查（以往是否暴露接触过乙肝病毒）。 2．方法原理 采用了美国雅培公司的专利技术——微粒子酶免疫分析（MEIA），即以rHBsAg包被微粒子（M-Ag）与标本中的HBsAb形成M-Ag-Ab 复合物，当复合物被转移到纤维杯上时，微粒子就不可逆地结合到纤维杯表面的玻璃纤维上，加入生物素化HBsAg（Ag-B）形成M-Ag-Ab-Ag-B复合物，再与加入的碱性磷酸酶标记的抗生物素抗体结合，洗去未结合的游离物质，加入底物——四甲基伞形酮磷酸盐，碱性磷酸酶脱去底物的磷酸基而发出荧光，通过MEIA光路元件检测而得到定量结果。 3．性能指标 MEIA定量检测HBsAb在0.00-1000mIU/ml的范围内呈线性关系，不精密度CVs为3-8%，检出限>0.1mIU/ml，灵敏度0.1mIU/ml。 4．标本收集 4．1标本类型：静脉血或动脉血的血清或血浆标本均可作为检测标本（抗凝剂可用肝素钠、枸橼酸钠、ACD、CPDA-1或EDTA，抗凝剂的质量应符合化试药品要求——化学纯或分析纯，使用的比例以厂家推荐为准）；其他体液如尿液、唾液、精液、羊水、胸水、腹水、乳汁等体液可以作为检测标本，但加热灭活的血清和血库的库存血则不宜作为检测标本。 4．2标本留取：以空腹为宜，收到标本后最好立即离心留取血清或血浆（凝固血应待其充分凝固后收集血清），不能有残留的红细胞、纤维蛋白丝，使用肝素治疗的病人宜在肝素治疗前抽血。4．3标本保存：留取的标本最好在3小时内检测，不能立即检测的应放臵于2-8℃最长达14天（可以含有凝块但要密闭以防蒸发），或者-10℃最长达14天（不能反复冻融也不能含有凝块和红细胞）。 4．4标本容器：盛放标本的容器必须为洁净的一次性真空采血管、玻璃试管、一次性的不同规格的塑料离心管 4．5标本外送：如涉及到需要外送的标本，必须以规定的容器（0.5ml塑料离心管）存放并密封，并根据邮寄规则和要求进行包装，运送时还要放入冰袋（2-8℃）或干冰（-10℃）由专人运送至指定地点指定接收人。 4．6拒收标本：凡与4.1-4.5所述内容不符的标本，检验人员应向临床或就诊者说明拒收标本的原因，并提出解决的方案或建议。 5．分析系统 5．1分析仪器：为美国雅培公司提供的AXSYM全自动免疫分析仪，仪器校准请参见仪器操作规程。 5．2分析试剂：为美国雅培公司提供的配套的HBsA b试剂盒，规格为100test/盒，2-8℃贮存，有效期6个月；在效期内使用试剂。 5．3定标试剂：为美国雅培公司提供的配套的HBsAb试剂盒中所附带，2-8℃贮存，有效期6个月；每换一次不同批号试剂均应进行重新定标。 5．4质控试剂：为美国雅培公司提供的配套的质控品，分为高、低二个浓度，2-8℃贮存，有效期6个月；每天随常规工 测定乙肝抗体滴度的临床意义 乙肝抗体指的是乙肝保护性抗体，即乙肝表面抗体，而乙肝抗体滴度指的是乙肝表面抗体的浓度。当乙肝表面抗体浓度达到一定程度时才能够更有效的保护人体免受乙肝病毒的入侵。 产生乙肝表面抗体一般有两种途径： 1、曾经感染的乙肝病毒，但是由于自身的免疫功能强大，消灭了乙型肝炎病毒并且产生了乙肝表面抗体。 2、注射乙肝疫苗后产生的。所以在打完乙肝疫苗后检查乙肝抗体滴度主要是看其浓度，乙肝抗体滴度的值越大，那就说明患者抵御乙肝病毒的能力越强。 抗体滴度的正常值 一般情况下，乙肝抗体滴度的正常值为10mIU/ml，当乙肝抗体滴度大于这数值时，乙肝表面抗体便能够有效的保护人体。一旦乙肝抗体滴度小于此数值时，乙肝表面抗体的保护能力减弱，此时，一旦患者接触到含有乙肝病毒的血液，或者与携带乙肝病毒的患者亲密接触时，便有感染乙肝的可能。这个时候，最好还是要到医院注射一支乙肝疫苗加强针，以增强保护力。 测定抗体滴度注意事项 乙肝抗体滴度会随之时间的推移而逐渐下降的，乙肝抗体的维持时间，根据患者自身的免疫力来决定的，大多数患者的乙肝抗体能够维持长达5年之久，但有的患者仅能够维持2-3年，因此为了避免感染乙 肝，患者最好在2-3年后到医院做一个检查。 1、乙肝抗体滴度最高值仅为10～100mIU/ml，最好在6个月后复测1次； 2、乙肝抗体滴度最高值为101～1000mIU/ml时，应于第一次注射后1～2年内复测乙肝表面抗体； 3、乙肝抗体滴度在1001～10000mIU/ml时，应于2～4年内复测； 4、乙肝抗体滴度大于10000mIU/ml时，可以在4～6年内复测； 5、乙肝抗体滴度低于10mIU/ml时应复种，复种仍按初种的剂量和时段办法进行。 判断方法 乙肝抗体滴度可以通过乙肝标志物定量检测来获得，那么乙肝抗体滴度怎么看呢？在化验单上可以显示的是乙肝抗体滴度，通过查看滴度就可以判断滴度的大小。可以有效保护人体不受病毒感染的最小值是10mIU/mL，当检测结果显示乙肝抗体滴度小于10mIU/mL说明滴度比较低，还需要注射乙肝疫苗。如果大于10mIU/mL，说明可以有效的保护人体不受感染。 当注射乙肝疫苗后，大部分人都会产生乙肝抗体，并且滴度相对较高，但还有些人产生的滴度比较低，甚至不产生抗体。所以注射乙肝疫苗以后，不要万事大吉，要到医院检查乙肝抗体的滴度。但是滴度会随着时间的推移而降低，专家建议在注射乙肝疫苗3-5年内应到医院再注射一次乙肝疫苗，特别是新生儿。 乙肝五项的检查及临床意义 乙肝两对半即乙肝五项，是确诊和了解乙肝(又称B型肝炎)病情的重要依据。包括：乙肝表面抗原HBsAg、乙肝表面抗体HBsAb、乙肝e抗原 HBeAg、乙肝e抗体HBeAb、乙肝核心抗体HbcAb。正常情况下五项指标全部阴性或乙肝表面抗体HbsAb阳性。其中乙肝两对半检查中的“乙肝大三阳、乙肝小三阳”是了解乙肝(又称B型肝炎)病情最为重要的综合性指标。 一、乙肝两对半（包括了乙肝大三阳、乙肝小三阳）的检查及临床意义 HBV（乙肝病毒）感染后病毒产生的蛋白释放入血导致相应的血清标志物，主要有三对，即即表面抗原（HBsAg）和表面抗体（抗HBs或HBsAb）、e 抗原（HBeAg）和e抗体（抗HBe或HBeAb）、核心抗原（HBcAg）和核心抗体（抗HBc 或HBcAb），但核心抗原在血清中一般不易检出，仅其余两对半在血液中可检测出。 1、乙肝两对半（乙肝五项）的简要临床意义 2、乙肝五项各指标的常见变化与简要临床意义： 以上简单罗列了感染乙肝（B型肝炎）病毒后两对半的常见的一些表现形式，针对个体，可能仍存在其它不同的表现组合，或在转归中。所以碰到不典型的组合，不必担心，建议过段时间再次复检，一般不典型的情况不会持续太久。 3、乙肝两对半检测中乙肝大三阳、小三阳以及部分指标的临床意义及对策 （１）乙肝大三阳（乙肝五项135阳性）--是指两对半检查中，表面抗原（HBsAg）、e抗原（HBeAg）和核心抗体（HBcAb）为阳性。乙肝大三阳，说明乙型肝炎病毒在人体内复制活跃，传染性较强．这类患者体内的血液、唾液、精液、乳汁、宫颈分泌液都可有传染性，如果同时有转氨酶增高者，首先就应注意隔离，在家庭内患者的碗筷等餐具可单独与家人分开，定期消毒。 ★ 专家对策：患者应到专科医院就诊采用抗病毒，提高机体免疫力和对症降酶保肝措施。建议做肝功能和肝B超检查。如果都正常，不要乱治疗，定期每半年做一次肝功能和肝B超检查。可以服用中草药，比较安全有效，服用中草药调节肝脏免疫功能，促进肝细胞修复再生，增强肝的抵抗力，阻止肝脏纤维化。抗HBV-免疫疗法辩证治疗“大三阳”>>> （２）乙肝小三阳（乙肝五项145阳性）--是指在乙肝（又称B型肝炎）的“两对半”检查的五项指标中，表面抗原(HBsAg)、E抗体(HBeAb)和核心抗体(HBcAb)检测均是阳性。提示急性或慢性乙型肝炎，体内病毒复制，为乙型肝炎病毒复制状态。乙肝小三阳通常是由“乙肝大三阳”转变而来，是人体针对E 抗原产生了一定程度的免疫力。 ★ 专家对策：乙肝小三阳（乙肝五项145阳性）应检查HBV-DNA及肝功能，根据具体情况进行综合分析。如果HBV-DNA（+）且肝功能异常，说明病毒复制，传染性强，应该采取以抗病毒为主的综合治疗。如果HBV-DNA（-）且肝功能、B 超及AFP等均长期正常，则说明病毒已复制不活跃，传染性很低，所以已无需隔离与治疗。乙肝小三阳全面解析>>> （3）乙肝五项（2、5项为阳性），其余阴性。既往感染，急性HBV感染已恢复。其中第二项阳性说明已经产生抗体，不用打疫苗。第五项阳性只提示曾被乙肝病毒感染过，现已恢复。 ★ 专家对策：这种情况患者不需要治疗，只要保持好生活规律，劳逸结合，注意加强锻炼，增强体质，做好定期复查即可。 （4）乙肝五项（2、4、5项为阳性），其余阴性。2、4、5阳性表示的意思是：1、急性乙肝感染恢复期；2、既往感染过乙肝；3、注射乙肝疫苗等产生了表面抗体。第二项HBsAb、第五项HBcAb阳性是既往感染并产生抗体的证明，因第四项HBeAb可存在较长时间才被清除，固常可出现2、4、5阳性。 ★ 专家对策：此时是感染乙肝（B型肝炎）病毒以后的恢复期，虽然已经产生了乙肝表面抗体，对乙肝也已经有了免疫力，但是还是必须了解自身表面抗 乙肝免疫球蛋白管理制度 根据xx市卫生局《关于印发xx市预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播项目实施方案的通知》（穗卫妇社[2011]18号）精神，xx市从2011年10月1日起对乙肝表面抗原阳性的孕产妇所生的新生儿，在出生后即刻为其免费注射乙肝免疫球蛋白（100IU）。为规范开展免费乙肝免疫球蛋白接种工作，特制定本管理制度。 一、用于乙肝母婴阻断的乙肝免疫球蛋白（100IU）及注射乙肝免疫球蛋白所需的注射器由财政拨专款、xx市疾病预防控制中心向xx省疾病预防控制中心采购，xx市疾病预防控制中心负责组织分发到各区（县级市）疾病预防控制中心。 二、各区（县级市）疾病预防控制中心每季第3个月15日前完成辖区内助产机构下季度免费乙肝免疫球蛋白需求统计，填写“母亲表面抗原阳性新生儿免费乙肝免疫球蛋白需求计划”（见附件1），并及时汇总上报到xx市疾病预防控制中心；各区（县级市）疾病预防控制中心负责通知辖区内助产机构及时到所在的区（县级市）疾病预防控制中心领取乙肝免疫球蛋白（100IU）及注射器。 三、助产机构要加强免费乙肝免疫球蛋白的管理，建立健全免费乙肝免疫球蛋白和注射器管理制度，准备充足的冷藏设备，专人负责免费乙肝免疫球蛋白和注射器的储存和运输工作，确保乙肝免疫球蛋白在2～8℃的条件下避光保存和运输。 助产机构应在每季第3个月10日前估算下一季度乙肝表面抗原阳性的产妇数，填写“母亲表面抗原阳性新生儿免费乙肝免疫球蛋白需求计划”（见附件1），及时报告到辖区（县级市）疾病预防控制中心。如具体实施过程中发现需调整免费乙肝免疫球蛋白的数量，须及时报告给辖区（县级市）疾病预防控制中心，以便修改供应计划。 助产机构应严格按照“xx省国家免疫规划疫苗出入库账簿”（见附件2）及“xx省国家免疫规划用注射器出入库账簿”（见附件3）进行出入库登记，对于报废的乙肝免疫球蛋白、注射器应做好报废原因记录。记录应当保存至超过乙肝免疫球蛋白有效期2年备查。定期核对免费乙肝免疫球蛋白进出账目，日清月结，每半年盘查1次，做到账、物相符。免费乙肝免疫球蛋白库存量不可以超过3个月。 助产机构应在乙肝表面抗原阳性孕产妇的新生儿出生后，即刻免费为其注射乙肝免疫球蛋白（100IU），同时将所注射乙肝免疫球蛋白的厂家、剂量填写在儿童预防接种证上，并填写 乙肝免疫球蛋白在预防乙肝病毒母婴传播中的应用目的研究乙肝免疫球蛋白在預防乙肝病毒母嬰传播中的作用。方法选取 2013年10月～2016年5月我院疾控中心180例产前检查发现乙肝表面抗原阳性， 即HbsAg阳性的孕妇及其新生儿作为观察组，选取同期没有接受乙肝免疫球蛋白预防的HbsAg阳性的孕妇及其153例，作为对照组。观察组孕妇及新生儿均使用乙肝免疫球蛋白，并对新生儿进行常规乙肝疫苗注射。对照组只对新生儿进行常规新生儿乙肝疫苗注射。统计两组新生儿出生后1、3、6个月时HbeAg、HbsAg及抗HBs的阳性率以及宫内感染率。结果观察组的宫内感染率与对照组相比无明显差异，差异无统计学意义（χ2=0.769，P>0.05）。观察组出生1、3、6个月的HbeAg的阳性新生儿人数与对照组差异无统计学意义（P>0.05）。观察组婴儿出生3个月及出生6个月后抗HBs阳性率明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论乙肝免疫球蛋白并不能有效降低宫内感染及出生后乙肝感染的发生，在预防乙肝病毒母婴传播中并无显著效果。 [Abstract] Objective To study the effect of hepatitis B immunoglobulin in the prevention of mother to child transmission of hepatitis B virus. Methods 180 cases of hepatitis B surface antigen in prenatal examination，that was，HbsAg positive pregnant women and their newborns examined in CDC of our hospital from October 2013 to May 2016 were selected as observation group. At the same time，153 cases of HbsAg positive pregnant women，who did not receive hepatitis B immunoglobulin prophylaxis，were selected as control group. Pregnant women and newborns in observation gorup were treated with hepatitis B immunoglobulin，and the newborns were given routine hepatitis B vaccine injection. In control group，only newborns were treated with routine injection of hepatitis B vaccine. The positive rates of HbeAg，HbsAg and anti HBs and intrauterine infection rate were recorded in two groups of neonates after birth in January，March and June. Results There was no significant difference in the intrauterine infection rate between the observation group and the control group （χ2=0.769，P>0.05）. There were no significant differences in the number of HbeAg positive newborns between January and March，and those born in June and the control group （P>0.05）. The positive rate of anti HBs in the infants born in March and June after birth in the observation group was higher than in the control group，the difference was statistically significant （P＜0.05）. Conclusion Hepatitis B immunoglobulin can not effectively reduce intrauterine infection and hepatitis B infection after birth. There is no significant effect in preventing mother to child transmission of hepatitis B virus.[Key words] Hepatitis B immunoglobulin；Hepatitis B vaccine；Mother to child transmission；Intrauterine transmission 乙型病毒性肝炎是我国导致肝硬化及肝癌的主要原因之一，其给患者个人和国家均增添了许多医疗负担。母婴传播是乙肝感染的重要途径之一，我国感染乙肝的孕妇高达10%[1]，因此，对母婴传播过程进行阻断干预已经成为医生们关注的焦点。近年来，乙肝免疫球蛋白联合乙肝疫苗成为了预防母婴传播的重要手段，但一些研究提出，乙肝免疫球蛋白并不能有效控制母婴传播[2]。本研究选 乙型肝炎病毒抗体诊断（胶体金法SOP） 测定标准操作程序 编写者：宿金涛 日期：2012年3月1日 一.原理：乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶体金法）采用胶体金免疫层析分析技术、将五个诊断意义相关的试剂通过一个包装组合在一起，同时进行乙型肝炎病毒五项标志物的检测，在不影响各自性能的情况下，便于客户的储存和使用。 HBsAg检测试剂采用双抗体夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的抗体。 测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的抗HBsAg抗体反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先于标本中的HBsAg结合，随后家何物会被固定在膜上的抗HBsAg抗体结合，在测试区内（T）会出现一条紫红色带。这条带是HBsAg抗体-HBsAg-HBsAg抗体金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如是阴性，则测试区内（T ）将没有紫红色带。无论HBsAg是否存在于标本中，一条紫红色带都会出现在指控内（C）。质控区内（C）所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。 HBsAb检测试剂双抗原夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的乙肝表面抗体。 测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的HBsAg反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先于标本中的HBsAg结合，随后结合物会被固定在膜上的HBsAg抗体结合，在测试区内（T）会出现一条紫红色条带。这条带是HBsAg-HBsAb-HBsAg金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如果阴性，则测试区内（T）将没有紫红色条带。无论HBsAg是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内（C）。质控区内（C）所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。 HBeAg检测试剂采用双抗体夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的乙肝e抗体。 测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的HBeAg抗体反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先于标本中的HBeAg结合，随后结合物会被固定在膜上的HBeAg抗体结合，在测试区内（T）会出现一条紫红色条带。这条带是HBeAg抗体-HBeAg-HBeAg抗体金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如果阴性，则测试区内（T）将没有紫红色条带。无论HBeAg抗体是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内（C）。质控区内（C）所显现的 紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。 HBeAb,HBcAb检测试剂才有竞争抑制法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的抗体。 测试时，血清或血浆标本滴入试剂加样处，随之标本在毛细效应下向上层析。如标 本中含有相应的抗体，贝U同膜上测试区（T）的抗体竞争与预包被在金标粒子的相应抗体反 乙肝免疫球蛋白 【导读】乙肝免疫球蛋白是什么？为什么有的人在注射了乙肝疫苗后还需要注射乙肝免疫球蛋白？今天我们就来说说乙肝免疫球蛋白的有关知识，了解乙肝免疫球蛋白的作用和适用人群，看看我们自己是否需要注射乙肝免疫球蛋白。 乙肝免疫球蛋白是一种浓缩的预防乙肝病毒入侵复制的被动免疫制剂。是从健康人的血浆中筛选出来的，通过对这些血浆进行超免疫后，采集滴度较高的乙肝表面抗体血浆，再用低温乙醇方法提纯而制得的血液制剂。 乙肝免疫球蛋白可用于预防具有感染HBV危险的乙肝易感者，临床主要用于预防医务人员以及接触HBV感染者前血清表面抗原滴度小于10IU/L的人群，例如医生、护士和检验人员等。 乙肝易感者在某种场合意外地遇到乙肝病毒感染的危险时，可以单独使用乙肝免疫球蛋白。乙肝免疫球蛋白让人体被动地接受这种高效价的外源性抗体，可使机体迅速获得被动保护免疫力，能短期内迅速起效，中和并清除血清中游离的乙肝病毒，避免乙肝病毒定位感染。 乙肝免疫球蛋白的作用 在注射乙肝免疫球蛋白后，血液表面的抗体水平会迅速增高，在剂量充分的条件下，保护功能是立即开启的。不过乙肝免疫球蛋白的作用的短暂的，多在特定时期用到。 乙肝免疫球蛋白的作用主要有： 1、阻断母婴传播。 2、肝移植前后，防止乙肝病毒的感染和复发。 3、预防特殊情况下的意外暴露于乙肝病毒的感染危险者。 需要说明的是，乙肝免疫球蛋白只能清除血清中游离的乙肝病毒，对肝细胞内寄生的乙肝病毒，特别是cccDNA的乙肝病毒复制模板是起不到任何治疗作用的，对孕妇减少宫内感染的预防和阻断效果也可能是无效的。对机体长久持续的保护，还必须靠自动免疫的乙肝疫苗预防注射。 乙肝免疫球蛋白的价格 目前市场上主要有两种规格的乙肝免疫球蛋白，一种是100IU/ML的剂量，价格在135元作用，另一种是200IU/ML的剂量，价格在250元左右。 由于乙肝免疫球蛋白在市场上还是比较稀缺的，所以价格会比较贵，另外乙肝免疫球蛋白的价钱跟产地有关，一般可以分为华兰生物产的，上海产，深圳产和进口。 并且，乙肝免疫球蛋白的价格目前尚未统一，由于地域差异，医院规模的大小等众多因素，免疫球蛋白价格可能有所不同，具体价格以当地医院为准。另外，根据市场供求关系，乙肝免疫球蛋白的价格也会有所调整。 哪些人需要打乙肝免疫球蛋白 在对乙肝免疫球蛋白有一定的了解之后，最让人关心的就是哪些人群有必要打了，因为它毕竟不同于乙肝疫苗，不是每个人都需要打的。 需要注射乙肝免疫球蛋白蛋白的人群有： 1、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性以及HBsAg和e抗原双阳性的母亲和其所生婴儿。 2、意外感染HBV的人群。 3、与乙型肝炎患者或HBsAg携带者密切接触者。 4、免疫功能低下者。 一般来说，打乙肝疫苗是预防乙肝的最有效方法，那么为什么有些人需要打乙肝免疫球蛋 血清乙型肝炎病毒HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc检测作业指导书 1.目的：建立乙型肝炎病毒HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc定性检测标 准操作规程，确保检测结果的准确。 2.范围：适用于检验科免疫实验室。 3.规程： 3.1标本的收集与准备： 3.2用未加抗凝剂的真空抽血管抽取静脉血2ml。 3.3标本完全凝固后才能离心，并分离血清。 3.4如试验8小时内不能完成，血清标本放2~8℃保存。 3..5标本拒收标准：严重脂血、溶血、黄疸。 4、测定原理： 本试剂盒采用胶体金标记免疫层析技术，将HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc单项胶体金标记免疫层析检测条组装成联合检测卡。样品加到检测卡各项加样孔后,再借助毛细作用移行至层析区,于检测区和对照区,胶体金标记颗粒由于抗原抗体反应形成富聚,形成或不形成肉眼可见的胶体金颗粒反应带,从而实现对HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc的检测，并作出存在与否的判定。 HBsAg用双抗体夹心法检测，胶体金标记抗HBs(鼠单抗)与样品中的HBsAg结合形成复合物,再借助毛细作用复合物沿层析条向前移行,与检测线区预包被的抗HBs(鼠单抗)形成“Au-抗HBs(鼠单抗)-HBsAg-抗HBs(鼠单抗)-固相材料”夹心物而凝聚显色。游离胶体金标记抗HBs(鼠单抗)则在对照线处与羊抗鼠IgG抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色。结果于30分钟内判定。 抗HBs用双抗原夹心法检测胶体金标记HBsAg与样品中的抗HBs结合形成复合物,再借助毛细作用复合物沿层析条向前移行,与检测线区预包被的HBsAg形成“Au-HBsAg-抗HBs-HBsAg-固相材料”夹心物而凝聚显色。游离胶体金标记HBsAg则在对照线处与羊抗HBs结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色。结果于30分钟内判定。 HBeAg用双抗体夹心法检测胶体金标记抗HBe(鼠单抗)与样品中的 乙肝五项要称为乙肝两对半，包括乙肝表面抗原(用HBSAg表示)、乙肝表面抗体(用抗-HBS表示)、e抗原(用HBeAg表示)、e抗体(用抗-HBe表示)、核心抗体(用抗-HBc表示)。乙肝五项检查，便是抽出患者静脉血，检测血液中乙肝病毒的血清学标志。但是，很多人看不懂乙肝五项检查结果。那么，乙肝五项检查结果该怎么看呢? 乙肝五项指标详解： 1、HBsAg(乙肝表面抗原) 它是乙肝病毒的外壳物质，本身没有传染性。它的阳性往往提示有完整的病毒颗粒存在。 2、抗一HBs(乙肝表面抗体，HbsAb) 它是HBV自然感染人恢复期出现的抗体，此时HBsAg自然消失了。它的存在提示人对乙肝有了抵抗力，不会再得乙型肝炎了。我国有27.42%的人口有此抗体。 3 、HBeAg(乙型肝炎e抗原) 它产生于病毒内部，可分泌血液中，e抗原阳性提示病毒有活动，乙肝病毒复制速度很快，而且是具有传染性的指标。 4 、抗～HBe(乙肝e抗体，HBeAb) 是人体针对e抗原产生的一种蛋白物质，阳性结果提示病毒的传染性变弱，病情已处于恢复阶段。但另一种情况可能是乙肝病毒发生了变异，此时血清中无HBeAg，但可产生抗一HBe，出现这种情况就需要查HBV—DNA来判定是否还有病毒存在。 5 、抗一HBc(乙肝核心抗体，HbcAb) 这种抗体分IgM和lgG两种：抗HBc—IgM阳性提示病毒活动，有传染性;抗HBc—IgG阳性提示为以往感染，无传染性，不需抗病毒治疗。 乙肝五项指标阳性的含义： 1、乙肝五项指标第1阳性：表示是乙肝病毒感染者，伴有第35项阳性就是大三阳，伴有45项阳性就是小三阳。但不论上述何种情况，只要伴有第2项阳性就表示乙肝在恢复期，趋于痊愈。 2、乙肝五项指标第2项阳性：表示乙肝已痊愈或有效接种乙肝疫苗后。伴第5项阳性意思差不多。 3、乙肝五项指标第3、4项阳性：极少见，建议重新复查。伴有第1项和第5项表示大三阳或小三阳。 4、乙肝五项指标第5项阳性：在潜伏期肝炎患者，隐匿性肝炎患者，乙肝病毒携带者，痊愈患者，接种疫苗后的健康人中都可能出现单五阳，单五阳不可大意，建议去查查有无肝炎、丙肝，是否是病毒携带者等。第五项阳性代表的意义没有针对性，所以伴有其他阳性时可以忽略不看，多作为其他项的辅助判断项。 乙肝五项指标全阴性说明机体没有被乙肝病毒感染过。但是人体也没有对乙肝病毒的免疫力。这类人群在流行病学中被称为“乙肝易感人群”，即一旦接触或被病毒感染就很容易发病。所以乙肝五项全阴性者应积极地接种乙肝疫苗，使体内产生乙肝抗体(抗-HBs),就不怕乙肝传染了。 乙肝五项检查的正常结果： 乙肝五项检查有很多结果，正常的结果有以下三种： 一、乙肝五项全部阴性 血清乙型肝炎病毒表面抗体检测（ELISA） 1. 原理 在微孔条上预包被被纯化乙肝表面抗原，配以酶标记抗原（HBsAg-HRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清（或血浆）中乙肝表面抗体（HBsAb）。 2. 标本采集 2.1 采集前病人准备：随机采血 2.2 标本种类：血清或血浆 2.3 标本要求：生化管采集病人静脉血3ml（也可用EDTA抗凝），室温放置不超过4小时，分离血清备用。 3. 标本储存：2-8℃保存不应超过1周，-20℃不应超过3个月，-70℃长期保存，应避免反复冻融。 4. 标本运输：密封，室温运输。 5. 标本拒收标准：污染、标本量不足、严重溶血或叠氮钠防腐标本不宜作此项检测。 6. 试剂 6.1 试剂名称：乙型肝炎病毒表面抗体诊断试剂盒 6.2 试剂生产厂家：珠海丽珠试剂股份有限公司。 6.3 包装规格：96Test/Kit 6.4 试剂盒组成： HBsAb微孔板，HBsAb酶标记抗原，HBsAb阳性对照血清，HBsAb阴性对照血清，浓缩洗涤液，底物A，底物B，终止液，封口膜，自封袋。 6.5 试剂储存条件及有效期：2-8℃避光保存，有效期一年。 7.仪器设备 7.1自动酶标仪 7.1.1仪器型号：RT-6000 7.1.2仪器厂家：深圳雷杜生命科学股份有限公司 7.2洗板机 7.2.1仪器型号：RT-3100 7.2.2仪器厂家：深圳雷杜生命科学股份有限公司 8.操作步骤 8.1平衡：将试剂盒各组分取出，平衡至室温（18-25℃），微孔板开封后，余者及时以自封袋封存。 8.2配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：20稀释后使用。 8.3备板：按需(待测样本数+3)取出微孔条,将微孔条固定于支架,不足一条的部分以废孔补足为一条，注意底部在同一水平。 8.4加样：所有样本均用加样器加50ul。具体如下：从A1孔开始，依次加临床样本、阳性对照、阴性对照各一孔，最后一孔不加样本，为空白对照。 8.5加酶：除最后一孔外，分别在每孔中加入酶标记抗体50ul（或一滴，下同），轻拍混匀。 8.6温育：用封片纸覆盖反应板（无封片纸亦可不封）后，将反应板置37℃水浴箱温育30分钟。 8.7洗涤：（1）手洗：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。（2）机洗：选择程序1，板洗模式，双吸，重复6次，选择要清洗的板条数，注液量400ul,浸泡30s,吸液时间2s,按开始键清洗。 8.8显色：在所有孔内加入底物A、B各50ul，轻拍混匀10秒，或在微孔震荡器上震荡10秒，用封片纸覆盖反应板后，置37℃水浴箱30分钟。 8.9终止：在所有孔内加终止液50ul，混匀。 8.10测定：按酶标仪作业指导书测量。 9. 结果判断与分析 9.1 临界值（C.O.）的计算：临界值=阴性对照孔OD值N×2.1，阴性对照OD 值小于0.05按0.05计算，大于0.05按实际值计算。若阴性对照OD值大于0.1或空白值>0.08或阳性对照OD值<0.5应重新试验。 9.2 结果判定：样品OD值S/C.O>=1者为HBsAb阳性 样品OD值S/C.O<1者为HbsAb阴性 10. 质量控制 以阴阳性对照进行质控。阴阳性对照结果无误，本批测试结果才可发出。如失控，则要检查试剂效期、储藏温度、试验温度是否正常、操作步骤是否正确，直至重新试验使其在控。 11. 参考范围 阴性或阳性 12. 临床意义乙肝检查结果对照表
联合免疫阻断乙肝母婴传播：规范使用乙肝免疫球蛋白
乙肝表面抗原检测操作规程
乙肝免疫球蛋白告知书
乙型肝炎表面抗体定量检测
测定乙肝抗体滴度的临床意义
乙肝五项的检查及临床意义
乙肝免疫球蛋白管理制度
乙肝免疫球蛋白在预防乙肝病毒母婴传播中的应用
乙型肝炎病毒抗体诊断(胶体金法SOP)标准操作程序
乙肝免疫球蛋白
乙型肝炎病毒标志物表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒(胶体金法)
乙肝五项对照表
2血清乙型肝炎病毒表面抗体检测(丽珠)