猪链球菌的分离鉴定
目录
中文摘要 (1)
英文摘要 (2)
前言 (3)
1.材料与方法 (4)
1.1 实验材料 (4)
1.1.1 病料 (4)
1.1.2 仪器 (4)
1.1.3 试剂及药品 (5)
1.1.4 培养基的制备 (5)
1.1.5 试验动物 (6)
1.2 试验方法 (6)
1.2.1 细菌涂片、染色、镜检 (6)
1.2.2 细菌分离培养 (6)
1.2.3 生化试验 (6)
1.2.4 血清学鉴定 (7)
1.2.5 动物致病性试验 (7)
1.2.6 药敏试验 (8)
2 结果与分析 (8)
2.1 染色结果 (8)
2.2 分离培养结果 (9)
2.3 生化试验结果 (9)
2.4 血清学试验结果 (10)
2.5 动物致病性试验结果 (10)
2.6 药敏试验结果 (10)
2.7 防治 (10)
3.结论与讨论 (11)
3.1 关于猪链球菌致病机理 (11)
3.2 关于猪链球菌病诊断 (12)
3.3 关于猪链球菌病防制 (13)
3.4 结论 (14)
参考文献 (15)
致谢 (16)
摘要
猪链球菌病是猪链球菌（Streptococcosis suis）引起的猪的一种重要的疾病，猪只不分品种和年龄阶段均容易感染，并且能够感染给人，可导致人和猪的死亡。猪链球菌主要感染3-12周龄的仔猪。近些年来，在美国、英国、荷兰、日本、加拿大、丹麦等许多国家均有猪链球菌病发生的报道，并在世界范围内造成了巨大的经济损失。在我国南方几省也曾经一度广泛流行，给我国也带来了很大的经济损失。目前已经鉴定出了35种血清型的猪链球菌，其中以2型最重要、最为常见。2004年4月，沈阳市某种猪繁育场大范围的发生仔猪的关节炎和败血症。本次试验以无菌采取患关节炎猪的关节液和患败血症猪的肝、肺、脾及肠系膜淋巴结各8份作为病料，并对这16份病料进行了病原菌分离试验、血清学鉴定、药敏试验、致病力试验。试验结果表明：该病原菌为2型猪链球菌，而且引起关节炎症状的猪链球菌较引起败血症的猪链球菌致病力弱；该菌对头孢菌素、青霉素等高度敏感，而对土霉素、链霉素等具有较强的耐药性。
关键词：猪；链球菌；分离鉴定
Absract
Streptococcosis suis disease is an important disease of pigs ,witch is caused by Streptococcosis suis.All breeds and ages are susceptible. It can infect people and may lead to the death of people or pigs. Streptococcosis suis infect piglets of the ages witch is from 3 weeks to 12 weeks usually.In the recent years ,the disease has been reported occuring in many countries such as American,England,Japan,Holand,Canada and Danmark ect. And it caused a lot of economic losses in all over the world.In some provinces in south of China the disease spread widely and caused a lot of losses too.By now 35 kinds of serum types have been appraised and the 2 serum type is most important and most common.In Shenyang the arthritis and blood pionsioning occurred in piglets widely in some hogger in May 4th,2004.As the pathological material of disease we took eight shares each of the liquid of arthrotis from the piglets sickening arthritis and liver,lungs,spleen,mesentery lymth nodes shares,and on these sixteen shares the separation experiment,the appraisal to serology ,the agile experiment of medicine and the capacity of causing disease were carried on.The result makes it known :it is the 2 serum type causing to the disease and it is lower capacity of causing to the arthritis than that of the blood poisioning; Streptococcosis suis is highly sentitive to Cephalosporin and Penicillin, but the medicine enduring of witch is greater to some such as Terramycin and Streptomycin.
Keywords: Pig；Streptococcus；Separation and Identification
前言
猪链球菌（Streptococcosis suis）在1956年～1963年间Demoor，首次通过生化和血清学方法，对猪的败血性感染的新的a溶血性链球菌进行了鉴定，它属于兰氏R、S、RS和T群在英国Elliott(1966)建议Demoor的S 群与纯化的PM链球菌相似，两者都归属于兰氏D群，他命名该链球菌相似，两者都归属于兰氏D群，他命名为猪链球菌荚膜2型，1型与仔猪脑膜炎有关，而2型菌株可感染任何日龄的猪，与1型和2型抗血清均有反应的菌株为荚膜1/2，1983年～1995年描述了35个菌株，共分成32个新的荚型，荚膜2型菌株，在所在国家发病猪中都是主导菌株，某些不常见的荚膜型的菌株，可以引起严重感染，如9型与断奶仔猪的败血症脑膜炎，肺炎暴发有关。
猪链球菌病是猪的一种重要疾病，养猪业发达国家如美、英、荷及爱尔兰等常有本病发生。我国于1958年就有猪链球菌病的报道，1976年我国南方几省曾一度广泛流行，给我国养猪业带来了很大危害。猪链球菌截止到目前已发现的荚膜型已超过30多种,其中以2型最重要、最为常见[1]。我国于1995年首例鉴定证实2型猪链球菌在我国的存在 [2]。猪链球菌可致2～6周龄仔猪败血症、脑膜炎、关节炎及支气管肺炎等{3～7}。本病在猪群暴发流行时,与猪经常接触的牛犬和禽类不见发病.在猪中仔猪,架子猪和怀孕母猪的发病率高。人工感染家兔最敏感,次为仓鼠,小鼠,鸽和鸡。
病原链球菌系链球菌科(Streptococcaceae)链球菌属(Streptcoccus)的细菌,种类繁多,在自然界中分布很广,是一种呈球状细菌,沿一个方向进行分裂繁殖,因而呈菌数不等和长短不一的链状排列。不形成芽胞,有的在病料中或含血清的培养基内能形成荚膜,为革兰氏阳性菌,一般为兼性厌氧菌[5]。该菌在粪便、灰尘和死尸中存活很长时间,但对去污剂和普通消毒剂敏感[6]。此菌抵抗力不强, 对干燥、湿热敏感,60℃30min即可被杀死。
按Lancefield血清学分群方法,链球菌分为20个菌群,与其有关的血清群是A、B、C、D、E(P.U.V)、Q、G、L、N、M、P、R(D)、S(D)14个菌群,目前,A、B、C、D、E、L等6个是引起发病的主要菌群[5]。
根据链球菌菌体荚膜抗原特性的不同,D群又分成35个血清型,即1～34型和1/2型,其中以2型流行最广,对猪的致死性亦最强,其次是1型,其他有致病性的3～5,7～9和11,1/2型等[3]。国外多由D群的某些血清型特别是2型引起猪的败血型和脑炎型链球菌病,而在国内以C群的兽疫链球菌为主,D 群较少,E群则引起慢性链球菌的关节炎和淋巴结炎(脓肿)。一般的猪场都有2～3个致病菌混合感染,1头猪可以同时感染2～3个菌群[7～8]。
诊断根据临床症状，年龄和肉眼病理变化及镜检即可确诊。特征性临床症状有磨牙、跛行、排干粪、空嚼，淋巴结肿大，皮肤、耳、四肢末稍有出血斑。肉眼可见急性死猪全身皮肤淤血，呈暗紫色，肺充血，肺广泛散在
小叶性肺炎，心包积液，心内膜出血，关节内有胶样的液体或纤维素性、脓性分泌物，淋巴结脓肿出血，心二尖瓣有菜花状增生物。结合涂片、染色、镜检，分离培养，生化试验，动物接种等细菌学检查即可确诊链球菌病。
防制首先严格检疫不从疫区购入病猪和带菌猪,对病猪隔离,病死猪无害化处理,深埋[1]。加强饲养管理，注意环境卫生和经常性可能污染的环境、用具消毒。为根除本病在猪群中发生最好淘汰病猪。
其次可用预防接种防治此病目前国产的疫苗主要有猪链球菌多价灭活苗、氢氧化铝甲醛苗、弱毒冻干苗,按瓶签说明使用,免疫期6个月,可达到预期效果。
再者对患病猪群要作到及时发现,尽早治疗,可通过药敏试验，确定高效药物，连续用药,加强巩固疗效是治疗本病的关键。
2004年4月，沈阳市某种猪繁育场仔猪，多为2～6周龄仔猪。出现体温时高时低,精神食欲时好时坏,一肢或多肢关节肿大,跛行或不能站应,消瘦,衰弱或突然恶化而死亡等症状。病死猪和放血致死猪均呈衰竭状，后肢皮下有淡灰色胶冻样渗出物，腹股沟、掖下淋巴结肿大，多数关节部肌肉组织化脓，脓肿局限于单块肌肉中，切开后内容物有的就较干燥，有的呈半流体状，均呈淡黄色，脓肿周围有包膜，与周围健康组织界限明确，无粘连；脓肿内容物均呈半流体或豆腐渣样。肝脾包膜稍厚无明显坏死灶，肠系膜淋巴结肿大，质度坚实，表面及切面呈黄白色。小肠及结肠的浆膜有个别小出血点，小肠粘膜有轻微渗出性。肺脏心叶和间叶出现融合，小叶性肺炎，关节和皮下脓肿。疑为猪链球菌病，为作进一步诊断，无菌采取关节炎病猪的关节液及败血症病猪的肝、脾、肺及肠系膜淋巴结，经实验室分离鉴定，证实为2型猪链球菌。现将分离鉴定结果报告如下。
1材料与方法
1.1试验材料
1.1.1 病料
无菌采取患关节炎病猪的关节液8份，编号为1～8号，无菌采取患败血症猪的肝、肺、脾及肠系膜淋巴结8份，编号为9～16号。
1.1.2 仪器
电热恒温培养箱型号 HG303-3K 南京电器三厂制造
电热鼓风干燥箱型号 HG101-1 南京电器三厂制造
电热手提高压蒸汽消毒器YXQ.SG41.280上海医用核子仪器厂
显微镜双筒型号 JENA
Anke TDL80-2B 离心机上海浦江科学仪器厂
1.1.3 试剂及药品
40％KOH；肌酐（Creatine）蛋白胨琼脂；氯化钠胆盐；葡萄糖；KH2PO4；
0.2％酚红；0.2％溴麝香草酚蓝；纯乙醇；浓盐酸；１０％硫代硫酸钠；１０％醋酸铅
微量糖发酵管（上海化学试剂二厂）分别为：蔗糖；山梨醇；棉实糖；葡萄糖；甘露糖；蕈糖；乳糖；菊糖；水杨苷；马尿酸钠
药敏纸片（上海伊华医学科技有限公司生产）分别为：
头孢菌素；庆大霉素；洁霉素；青霉素；卡那霉素；链霉素；土霉素；复方新诺明；万古霉素；红霉素；利福平；氯霉素；恩诺沙星；痢特灵猪链球菌诊断血清与平板凝集抗原（中国兽药鉴察所）
1.1.4 培养基的制备
兔鲜血平板：将灭菌的营养琼脂加热融化，冷至45～50℃时，加入无菌鲜血达5%（即每100毫升营养琼脂中加入鲜血5～6毫升）倾注于平皿，待凝固后，置37℃培养1～2日，有污染者废弃，无菌者保存于冰箱备用。
牛血清肉汤：向灭菌的营养肉汤中加入牛血清，每100毫升加20毫升牛血清，分装试管，置37℃培养1～2日，有污染者废弃，无菌者保存于冰箱备用。
麦康凯培养基：取成品50克加入1000毫升冷蒸馏水，混合放置20分钟，隔石棉铁丝网微火煮沸至全部溶解，高压灭菌（115℃）15分钟后冷却至50℃左右，倾入无菌平皿内，凝固后冷藏备用。
营养琼脂：取成品41克加入1000毫升冷蒸馏水混合放置20分钟，隔石棉铁丝网微火煮沸，至全部溶解，分装入适当容器中高压灭菌（121℃）15分钟，凝固后冷藏备用。
Christenrsen氏培养基：1升含蛋白胨1克，葡萄糖1克，氯化钠5克，KH2PO4 2克0.2％酚红溶液6ml，琼脂20克，调整pH至6.9。在121℃高压灭菌15分钟，使冷到55℃时加入十分之一的20％尿素液（经滤过法除菌的）使尿素含量为2％（即每1000ml中有20克），做成短斜面。
邓亨氏蛋白胨溶液：蛋白胨水溶液（蛋白胨1克，氯化钠0.5克，水100ml,pH7.6）按0.5％～1％的比例加入葡萄糖（或其他各种糖），每100ml 加入1.2ml的0.2%溴麝香草酚蓝（或用1.6％溴甲酚紫酒精溶液0.1ml）作指示剂。分装于试管（每一个试管事先加有一枚倒立的小发酵管），10磅高压灭菌10分钟。
甲基红试验培养基：含葡萄糖、K2HPO4、蛋白胨各5克，完全溶解于1000ml 水中后，分装试管内，间歇灭菌或10磅10分钟灭菌。
欧立希氏吲哚试剂：对位二甲基苯甲醛1克，纯乙醇95ml，浓盐酸25ml,先以乙醇溶液试剂后加盐酸，要避光保存[21]。
1.1.5 试验动物
健康小白鼠（30～35g）10只，购自沈阳医科大学实验动物中心。
1.2 试验方法
1.2.1 染色镜检
将所采病料分别涂片，用革兰氏染色镜检抹片的制备及染色：先用灭菌接种环取少量生理盐水或蒸馏水，置于玻片中央，然后再用灭菌接种环取少量菌落在液滴中混合，均匀涂布成适当大小的薄层。让其然干燥。固定用火焰固定法。将干燥好的抹片使涂面向上，以其背面在洒精灯火焰上来回通过数次，略作加热（但不能太热，以不烫手为度）进行固定。染色用革兰氏染色法。
革兰氏染色法：
（1）在已干燥、固定好的抹片上，滴加草酸铵结晶紫染色液，经1-2分钟，水洗。
（2）加革兰氏碘溶液于抹片上媒染，作用1-3分钟，水洗。
（3）加95%酒精于抹片上脱色，约30秒至1分钟，水洗。
（4）加稀释石炭酸复红（或沙黄水溶液）复染10-30秒钟，水洗。
（5）吸干或自然干燥，镜检。革兰氏阳性菌呈蓝色，革兰氏阴性菌呈红色。
1.2.2 细菌分离培养
将所采病料，分别接种鲜血琼脂平板，麦康凯平板，营养琼脂平板。37℃需氧培养24h后，挑取可疑菌落接种于改良马丁肉汤，37℃培养24h后，革兰氏染色，显微镜检查，再接种血清肉汤，纯化后放置4℃，冷藏备用。
1.2.3生化试验
随机抽取上述分离菌血清肉汤培养物3#、8#、13#、15#，分别作以下生化试验。
糖发酵试验：用灭菌接种针将待检菌分别接种于微量糖发酵管中（分别为蔗糖山梨醇棉实糖葡萄糖甘露糖蕈糖乳糖菊糖水杨苷马尿酸钠），然后将其倒置于烧杯中，在恒温箱中37℃培养，24小后观察。凡发酵管中有变色者表示此菌产酸，凡培养基变色并产气者为此糖产酸产气，凡培养基不变色者表示该菌不发酵此糖。
维培（V-P）二氏试验：
原理：某些细菌能从葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇（Acetyethyl carbinol）→2，3-丁烯二醇（2，3-bytaylene cylycol）,在有碱存在时氧化成二乙酰，后者和胨中的胍基化合物起作用，产生粉红色的化合物。
方法：（O′Mearaa′s试剂法） 40％KOH 5ml、肌酐1小刀尖加入于5ml （即与培养基等量）的培养物中，猛烈摇振混合。37℃培养24～48小时，加数滴试剂，略加摇匀半分钟，待试剂上浮液面，试剂呈红色为阳性反应。
硫化氢产生试验：
方法：用接种针将待试菌穿刺接种于醋酸铅培养基或硫酸亚铁培养基
中。37℃卵育1～4天，每天检查，沿穿刺线或其周围变为黑色为阳性反应。
甲基红（M.R）试验：
方法：接种细菌于培养液中，在37℃培养2～7天后。于培养物中加入几滴试剂，变红者为阳性反应，（从葡萄糖产酸，培养液的pH低于4.2）。
吲哚（靛基质）试验：
原理：细菌能分解蛋白质中的色氨酸生成吲哚，后者与对位二甲基氨基苯甲醛作用，形成玫瑰吲哚而呈红色。
方法：以接种环接种待检细菌的新鲜斜面培养物于邓亨氏蛋白胨溶液中，在37℃培养24～48小时（可延长4～5天）。于培养液中加入戊醇或二甲苯2～3ml,摇匀，静置片刻后，沿试管壁加入试剂2ml。在戊醇或甲苯下面的液体变红色者为阳性反应。
枸橼酸盐利用试验：
方法：用灭菌的接种针蘸取待检液，在枸橼酸盐培养基的斜面上划线接种，再穿刺接种。在37℃培养2～3天，观察培养基上是否有细菌生长，并观察颜色变化。如果有细菌生长，并且颜色变为天蓝色，则为阳性反应，说明此菌能利用枸橼酸盐。
硫化氢试验：
原理：细菌能分解含硫氨基酸，产生硫化氢（H2S）者，其所产生的H2S 会使培养基中的醋酸铅或FeCl3形成黑色的硫化氢或硫化铁。
方法：在融化的琼脂内加入硫代硫酸钠溶液（先煮沸灭菌），待凉至60℃，再加入醋酸铅溶液，混合均匀，无菌分装灭菌试管达三指高，立即浸入冷水中，使冷凝成琼脂高层。用接种针蘸取纯培养物，沿试管壁作穿刺，孵育于37℃经１～２天后观察，必要可延长５～７天。培养基变为黑者为阳性[6]。
1.2.4血清学鉴定
将3#、8#、13#、15#菌经缓冲肉汤培养8h，通过3000r/min离心10min，PBS洗涤2次，用pH7.2 的0.01mol/L PBS制成1/10000～1/20000细菌悬液[11]。取1滴上述细菌悬液与适当的抗血清在洁净玻片上混匀，立即观察凝集现象。同时，设立细菌悬液对照及血清对照。
1.2.5动物致病性试验
小白鼠感染实验：用5只20克左右重的小白鼠腹腔接种分离菌血清肉汤培养物0.2毫升，另设5只分别腹腔注射0.2毫升血清肉汤作对照。对注射后的小白鼠隔离饲养，观察其发病及死亡情况，对死亡的小白鼠立即解剖，无菌采取肝脏，脾脏病料，涂片，革兰氏染色，镜检。并在鲜血琼脂平板上划线分离培养[12]。
1.2.6药敏试验
采用纸片扩散法，用无菌棉签蘸取分离菌的血清肉汤培养物，均匀涂布于9cm鲜血平板；待稍干后，用无菌镊子将各种药敏纸片分别平贴在培养基表面，4℃2h使药物扩散，然后置37℃培养20～24h，观察结果。结果按抑菌圈直径大小和各抗菌药的具体标准，评定为高度敏感、中度敏感或耐药[13]。结果评定参照表1。
表 1 各种抗菌药物的抑菌圈与敏感标准
抗菌药物名称
耐药中度敏感高度敏感
青霉素土霉素洁霉素链霉素庆大霉素卡那霉素头孢菌素万古霉素红霉素利福平呋喃妥因氟哌酸复合磺胺氯霉素<10
<10
<10
<10
<12
<12
<10
<10
<14
<16
<15
<13
<11
<13
10～12
10～14
10～14
10～14
13～14
13～14
10～15
10～11
14～22
16～20
15～17
13～17
11～16
13～18
>13
>15
>15
>15
>15
>15
>15
>12
>22
>20
>17
>17
>16
>18
2 结果与分析
2.1涂片、染色、镜检结果
关节液、鲜血琼脂、改良马丁肉汤及血清肉汤培养物涂片、革兰氏染色、显微镜检查为革兰氏阳性，在关节液、鲜血琼脂培养物中多呈单个、双球或短链状排列，在改良马丁肉汤及血清肉汤培养物中多呈长链状。
2.2分离培养结果
37℃培养24h后，所采的16份病料在鲜血琼脂平板上形成表面光滑、隆起的灰绿色小菌落，外层有明显的β溶血环。在麦康凯琼脂平板上不生长。在营养琼脂上生长不好。该菌在改良马丁肉汤中底部有沉淀，在血清肉汤中
先均匀浑浊，后在试管底部形成沉淀，上部澄清，不形成菌膜。
2.3生化试验结果（见表2、表3）
表2 糖发酵试验结果
菌号项目
蔗糖山梨醇棉实糖葡萄糖甘露糖蕈糖乳糖菊糖水杨苷马尿酸钠
3# + - - + + + + + + -
8# + - - + + + + + + -
13# + - - + + + + + + -
15# + - - + + + + + + -
表3 其它生化试验结果
项目菌号
3# 8# 13# 15#
维培（V-P）二氏试验 - - - -
靛基质（吲哚）试验 - - - -
甲基红（M.R）试验 - - - -
枸橼酸盐利用试验 - - - -
硫化氢试验 - - - -
判定标准：“+”表示大多数（90%～100%）菌株为阳性；“-”表示大多数（90%～
100%）菌株为阴性。
表2表明分离的3#、8#、13#、15#菌的生化反应结果均符合猪链球菌的生化特性，
说明分离的菌均为猪链球菌。
2.4 血清学鉴定结果
将3#、8#、13#、15#细菌悬液与1/2及2型抗血清混合，立即可见明
显的凝集现象，但不与1型及其他型抗血清出现凝集。直接挑取细菌菌落与
血清混匀，也能得到一致结果。阴性对照均未见凝集现象。
2.5动物致病性试验结果
分离菌对小白鼠致病性：小白鼠于感染后5小时开始死亡，至24小时全部死亡。死亡后解剖小数可见肝、脾、肾肿大，膀胱高度充血，胸腔集液，用心血及胸腔积液涂片，革兰氏染色镜检，发现有大量单个、成对或4-20个左右的短链革兰氏阳性球菌。对照组小白鼠未见异常。
2.6药敏试验结果（见表4、表5）
表4 药敏试验结果
菌号
抑菌环直径（mm）
头孢菌素青霉素洁霉素卡那霉素土霉素链霉素庆大霉素
3# 8# 13# 15# 平均值
19
18
19
19
18.75
15
16
16
15
15.5
14
13
14
13
13.5
13
13
13
14
13.25
8
8
7
8
7.75
7
6
7
8
7.0
7
7
8
8
7.5
表5药敏试验结果
菌号
抑菌环直径（mm）
万古霉素利福平红霉素复合磺胺氟哌酸氯霉素恩诺沙星
3# 8# 13# 15# 平均值10
10.5
11
10
10.37
9
7
8
7
7.75
14
13
14
13
13.5
16
15
16
17
16.0
8
8
7
8
7.75
15
16
16
17
16.0
21
20
20
20
20.25
表3表明，结果敏感的药物是：头孢菌素、青霉素、恩诺沙星；中度敏感的是：复合磺胺、氯霉素、红霉素、洁霉素和卡那霉素；而对万古霉素、利福平、氟哌酸、土霉素、链霉素、庆大霉素不敏感。
2.7 防治
通过上述试验结果确定该种猪繁育场发生的猪链球菌病为猪链球菌2型所引起，对头孢菌素、青霉素、恩诺沙星高度敏感，考虑到经济因素选用用青霉素3000～4000单位／公斤体重，每日4次，肌肉注射，连续注射3～5日病猪病情得到好转。同时对所有的未发病仔猪用灭活疫苗免疫接种，并将病猪和健康猪隔离。另外，注意卫生管理，对圈舍、厂区、各种用具进行消毒。目前该病已得到有效的控制。
3 结论与讨论
3.1 关于猪链球菌致病机理
猪链球菌（Streptoccus suts）是危害养猪业的一种重要病原菌。80年代初，加拿大由猪链球菌引起的疾病开始增加。那时仅检出9种夹膜血清型，到目前为止已经鉴定出了35种血清型的猪链球菌，其中2型是最常见的[1]。我国于1991年在广东省首次证实此菌存在[2]，1998年在江苏的人群和猪群中爆发由2型所致的链球菌病[14]。
毒力因子及其致病机理是猪链球菌病防治的理论基础，国内外均已对猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白进行过大量研究[15，16]。发现猪链球菌2型溶菌酶释放的蛋白具有诱导上皮细胞融合和凋亡功能，此作用可使本来致密的细胞结构破坏，从而使上皮细胞结构失去其屏障，是猪链球菌2型感染过程中突破扁桃体和大脑血脑屏障的关键机制之一。血脑屏障有两条主要通路：血-脑通路由脑微血管内皮细胞构成，血-脑脊液屏障由脉络从上皮细胞构成。通过曾巧英等人的试验结果推断，脉络丛应该是猪链球菌2型致脑膜炎时突破大脑屏障的通路之一。有报道猪链球菌2型致脑膜炎时，大脑实质并没有发现有病变，而无论是自然感染还是试验感染猪，经长期的菌血症后，均有脉络丛刷状缘的细胞损伤，脑室中也有纤维素和炎性细胞浸润[17]。
猪链球菌2型溶血素是一种溶细胞性蛋白质毒素,其溶血活性受温度、pH值等的影响,具有酶的典型特征。试验用酶学试验方法,对其侧链氨基酸基团进行了化学修饰,探明其活性基团,尚未见报道。尽管猪链球菌2型的溶血素可被巯基等还原剂活化,但本试验显示,PCBM等对该溶血素的溶血活性均无抑制作用,表明巯基等不是该溶血素活性必需基团。猪链球菌2型溶血素经NBS、DEPC和2,3 Ｄiacetyl修饰后,其溶血活性显著降低,表明色氨酸、组氨酸和精氨酸残基才是该溶血素的活性必需基团。二硫键的断裂,使其疏水基团充分暴露,有利于溶血素与细胞膜相结合。作者推测猪链球菌2型溶血素可能是一种磷脂酶,能水解细胞膜上的脂质双分子层,进而达到溶血的功能。ＮＢＳ强烈地抑制了猪链球菌2型溶血素的溶血活性,其原因是在酸性条件下(ｐＨ4 0),ＮＢＳ选择性氧化色氨酸残基侧链吲哚为氧化吲哚,而使其丧失活性,另外,还可能引起肽键断裂,导致溶血活性的丧失。通过ＳＤＳＰＡＧＥ,结果为一条带,因此可排除因肽键断裂而引起溶血活性降低的可能性。这一点与嗜水气单胞菌的胞外蛋白酶的修饰相一致[4]。通过9种蛋白质侧链残基修饰剂对猪链球菌2型溶血素进行化学修饰,初步确定了色氨酸、组氨酸、精氨酸残基及二硫键与其溶血活性相关,但究竟哪个基团或哪些基团参与了溶血作用,或哪些基团参与了其结合作用,还需进一步深入研究[18]。
3.2关于猪链球菌病的诊断
猪链球菌病在兽医临床上可通过临床症状、剖检症状来进行诊断。
3.2.1临床症状
最急性型：无任何前驱症状,突然发病后于次日早晨死亡,或倒地不起,
口鼻流白沫。触摸时惊叫,全身皮肤蓝紫色, 体温42℃以上,多在12～18h 死亡。
急性败血型：此型主要由C、D、L链球菌引起,常为暴发流行。突然发生,全身症状明显,精神沉郁,食欲不振或废绝,体温40.5～43℃,多集中在41.3～41.6℃间,稽留热,眼结膜潮红,有泪迹,鼻盘微红但仍湿润,流鼻液或浆液性鼻漏,有的从口角流出少量黏液;便秘、粪干硬,有的表面上附有黏膜;尿黄或赤褐色。两耳、鼻腔、颈、背部、整个下腹皮肤、四肢内侧呈广泛性充血、潮红或紫斑;数小时内可见后驱软弱,两后肢交叉或并在一起支撑,难以站立,甚至后躯麻痹,四脚运动不协调,运步强拘跛行、后期有的呈犬坐姿势,呼吸短促或困难,可听到喘息声,人为驱赶或触诊尖叫,有的出现抽搐、空嚼或昏睡等神经症状。病程经过急,治疗不及时,2～3d内死亡,死前天然孔流出暗红色血液,病死率达80%～90%。
脑膜脑炎型：主要由R、C群引起,但L、S群等也可引起发病。常见于仔猪因断乳、去势、转群、气候骤变等诱发。体温40.5～42.5℃,不食、便秘、震颤,有浆液性或粘性鼻漏。病猪表现出神经症状,如角弓反张、抽搐、共济失调、失明、耳聋。继而后肢麻痹,前肢爬行,四肢作游泳状或昏迷不醒等。个别病猪出现多发性关节炎,关节肿大,跗关节外侧及上、下方见1～3个鸽蛋大小肿胀。最急性者几小时或1～2d内死亡。病程达3～5d者,有部分猪的头、颈、背等部位出现水肿,指压凹陷。
亚急性或慢性：由上述2、3两型因治疗不及时或药效不足转化而来或在流行的中、后期也会出现亚急性或慢性病例。主要表现为关节炎,心内膜炎、化脓性淋巴结炎、脓肿、子宫炎(流产)、包皮炎、乳房炎、咽喉炎及皮炎等。呈散发性或地方流行性,其特点是病程长(十几天至一个多月),症状比较缓和。
关节及心内膜炎：病猪体温时高时低,精神食欲时好时坏或吃半饱,一肢或多肢关节肿大,跛行或不能站应,逐步消瘦,衰弱或突然恶化而死亡,或逐渐好转而恢复。
化脓性淋巴结炎：以颌下淋巴结化脓性炎症为最常见,咽、耳下、颈部等淋巴结发炎肿胀、硬、热、痛,皮肤坏死。由于局部的压迫或疼痛,可影响采食、咀嚼、吞咽,甚至使呼吸产生障碍。当化脓成熟,破溃之后流出脓汁,全身症状也显著好转,长出肉芽组织,结疤愈合,病程3～5个星期,一般不引起死亡。
3.2.2剖检症状
最急性型：主要病变是脑膜明显充血,脑室不同程度的积水;心包积液增多,淋巴结肿大,充血,血凝固不良,其他脏器无明显变化。
急性败血型：以出血性败血症病变和浆膜炎为主,血凝不良,皮肤有紫斑,黏膜,浆膜下出血。浆膜腔积液含有纤维素。鼻腔有黏液和泡沫,鼻黏膜紫红色、充血及出血。喉头、气管充血,常见大量泡沫。肺充血肿胀,切面出血,
有的肺表面有散在淤血斑。心包增厚,表面粗糙,心内外膜有出血斑点,心耳及冠状沟脂肪有豌豆大小出血点,心脏色淡。少数心包腔、胸腔、腹腔有淡黄色积液,部分病例有纤维素性渗出。脾多数肿大呈紫黑色、暗红色或紫蓝色,边缘有出血性梗死灶,少数增大1～3倍,柔软而易脆裂。胃和小肠黏膜有不同程度的充血和出血。
肾脏轻度肿大,充血和出血,表面和切面均有小点出血,尤以肾乳头多,在皮质、髓质交界处有黑红色出血点。肝肿大、胆囊充盈,呈深黄色,肝表面有散在的芝麻大、黄豆大和蚕豆大化脓灶,切面外翻,肝实质淤血。膀胱粘膜充血或有点状出血。胰腺充血、浆膜与间质炎性水肿。全身淋巴结有不同程度的肿大、充血和出血,有的肠系膜淋巴结为甚。少数病例在颈、背部等部皮肤潮红,经热水浸泡刮毛后特别清楚,如“刮痧状”。
脑膜脑炎型：脑膜充血、出血,严重者溢血,少数脑膜下充满积液,脑切面可见白质和灰质有明显的小点出血。部分病猪在头颈、背、胃壁、肠系膜及胆囊壁有胶样水肿。其他与败血症型变化差异不大。
亚急性或慢性型：心内膜炎时,心瓣膜增厚,表面粗糙,在瓣膜上有菜化样赘生物,常见于二尖瓣或三尖瓣,有时还见于心房、心室和血管内。关节炎时关节红肿,切开关节囊,滑膜充血,有出血点,滑液稍混浊呈红黄色,关节面粗糙。严重者,关节囊内外有黄色胶冻样液体或纤维素性脓性物质[8，9]。
3.2.3类症鉴别
败血症型猪链球菌病易与急性猪丹毒、猪瘟相混淆，应注意区别。
急性猪丹毒：采取脾、肾、血液涂片，染色镜检，可见到革兰氏阳性（呈紫色）小杆菌。
猪瘟：皮肤和肾有密集的小出血点，有脓性结膜炎，无跛行状，病程较长，各种治疗无效。
3.3 关于猪链球菌病防制
病猪和带菌猪是本病的重要传染源。病猪的鼻液、尿液、肌肉、内脏和关节内均带有病原体，所以，首先应加强对健康猪的免疫。链球菌是条件性致病菌,加强生猪饲养管理,合理搭配饲料,加强环境卫生管理体制,粪便发酵等,定期消毒,畜舍用消毒药品交替使用,防止细菌的耐药性。如畜舍用“百毒威”高效广谱消毒剂１∶５０００～６０００常饮水消毒,１∶５００～６００喷雾２０毫升／米３,工作服、器皿等１∶５００浸泡洗涤。１%过氧乙酸喷雾消毒,消毒池１∶８００稀释,每２天消毒液换１次,过道用２%氢氧化钠每周消毒１次［20］。另一方面，在发病后，加强病猪和健康猪的隔离，根据实验室所做的药敏试验结果，配合药物治疗，建议用头孢菌素、青霉素、洁霉素等药物治疗。并且可选用中草药治疗也有很好的疗效。如猪群选用:二花、连翅、知母、沙参、陈皮、花粉、云苓、生地、甘草,一剂二煎一次
灌服,日服一剂,连用二剂[21]。千里光、紫花地丁、金鸡凤尾草、板兰根、枫杨、大叶桉、野菊花等对本菌有较强的抑制作用,可选用煎服[22]。
免疫预防:４５日龄苗猪５０头份猪链球菌苗５０ｍＬ生理盐水,每头猪肌肉注射１ｍＬ,间隔２个月再免疫１次,种公猪每年免疫２～３次。对未发病的猪口服0.07～0.1克,服药间隔时间８～１２小时,连服７天为一个疗程。病猪隔离,病死猪无害化处理,深埋[20]。
自家灭活疫苗预防:为了确保种猪场的安全,用本场分离的链球菌菌株制造灭活菌苗进行预防接种。具体方法是用分离的链球菌接种于含牛血清的缓冲肉汤中,培养２４小时,镜检无杂菌,活菌数为１５０～２００亿／ｍＬ,然后按常规制成灭活菌苗,免疫仔猪。经过１５天后,用同源菌攻击,结果能抵抗等量同源菌的攻击。然后猪场用该灭活菌苗进行了预防接种,猪场的猪群再无发病,猪群生长正常[23]。做好生产种公、母猪的链球菌菌苗接种工作。病仔猪的母猪及可疑病猪及时淘汰。
3.4结论
3.4.1 从沈阳市某种猪场发病仔猪中分离出一株链球菌，经细菌学诊断和血清学诊断确诊该链球菌病为猪链球菌2型。
3.4.2 药敏试验结果表明，该分离菌对头孢菌素、青霉素、恩诺沙星敏感，对复合磺胺、氯霉素、红霉素洁霉素和卡那霉素中度敏感，而对万古霉素、利福平、氟哌酸、土霉素、链霉素、庆大霉素不敏感。
3.4.3 对发病的猪用青霉素等敏感药物进行治疗，同时配合应用灭活苗，使病情得到有效的控制。
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致谢
本论文是在沈国顺副教授的悉心指导下完成的，从选题到资料的收集，实验阶段的指导和论文的写作和修改等个方面给予精心指导。
在实验过程中刘丽霞老师给予了热情的指导和大量的帮助，特此感谢。同时感谢杨墅，周远斌在材料的整理过程中给予了热情的帮助。
猪链球菌病的诊断与防治论文(终审稿)
猪链球菌病的诊断与防 治论文 公司内部档案编码：[OPPTR-OPPT28-OPPTL98-OPPNN08]
辽宁职业学院 毕业论文（设计） 题目猪链球菌病的诊断与防治 系（分院）动物科学系 专业班级牧医0651 姓名李红阳 指导教师姓名王丽娟 职称 日期 2010/3/18 辽宁职业学院 毕业论文（设计）任务书
专业班级：牧医0651 学生姓名：李红阳 题目：猪链球菌病的诊断与防治 上交论文（报告）日期：年月日 答辩日期：年月日 指导教师：王丽娟 2011年月日 辽宁职业学院 毕业论文（设计）评审与答辩材料 题目：猪链球菌病的诊断与防治 指导教师：王丽娟 成绩： 系（分院）：动物科学系 专业班级：牧医0651 学生姓名：李红阳
附带材料：表1 毕业论文（设计）指导老师评阅表 表2毕业论文（设计）答辩成绩登记表 表3毕业论文（设计）成绩评定表 2010 年 3 月 18 日 本人声明 我声明：本论文及其设计工作是由本人在指导教师的指导下独立完成的，在完成论文时所利用的一切资料均已在参考文献中列出。
学生姓名：李红阳 2011年 3 月 18 日 目录 1流行病学 2病原 3 临床症状 4 病理变化 5 诊断 6 综合防治 7 分析讨论 8 参考文献
“摘要 摘要：猪链球菌病是猪的一种重要传染病，人也可感染该病，它能引起猪的败血症、脑膜脑炎、关节炎、化脓性淋巴结炎（淋巴结脓肿）等，该病在我国已流行多年，近年有上升趋势，给我国养猪业带来严重损失，本文结合我市养猪现状，从流行病学，临床变化，即诊断于治疗等方面作了详细的综述，逐步探讨了猪链球菌病的诊断和治疗方法。 ” “关键词”猪链球菌临床诊断实验室诊断生化试验药敏试验
猪链球菌病应急防治技术规范
猪链球菌病应急防治技术规范 有效状况：已实施发布部门：农业部 代号：农医发[2005]20号———————————————————————————农业部文件 农医发[2005]20号 各省、自治区、直辖市及计划单列市畜牧兽医(农牧、农业、动物卫生监管)厅（局、办），新疆生产建设兵团农业局： 为做好猪链球菌病防控工作，及时控制和扑灭疫情，根据《中华人民共和国动物防疫法》和《国家突发重大动物疫情应急预案》，我部组织制定了《猪链球菌病应急防治技术规范》，现印发给你们，请遵照执行。 附件：猪链球菌病应急防治技术规范 二〇〇五年七月二十八日
附件： 猪链球菌病应急防治技术规范 猪链球菌病（Swinestreptococosis）是由溶血性链球菌引起的人畜共患疾病，该病是我国规定的二类动物疾病。 为指导各地猪链球菌病防治工作，保护畜牧业发展和人的健康安全，根据《中华人民共和国动物防疫法》和《国家突发重大动物疫情应急预案》等有关规定，制定本规范。 1适用范围 本规范规定了猪链球菌病的诊断、疫情报告、疫情处理、防治措施。 本规范适用于中华人民共和国境内的一切从事生猪饲养、屠宰、运输和生猪产品加工、储藏、销售、运输，以及从事动物防疫活动的单位和个人。 2诊断 根据流行特点、临床症状、病理变化、实验室检验等作出诊断。 2.1流行特点
猪、马属动物、牛、绵羊、山羊、鸡、兔、水貂等以及一些水生动物均有易感染性。不同年龄、品种和性别猪均易感。 猪链球菌也可感染人。 本菌除广泛存在于自然界外，也常存在于正常动物和人的呼吸道、消化道、生殖道等。感染发病动物的排泄物、分泌物、血液、内脏器官及关节内均有病原体存在。 病猪和带菌猪是本病的主要传染源，对病死猪的处置不当和运输工具的污染是造成本病传播的重要因素。 本病主要经消化道、呼吸道和损伤的皮肤感染。 本病一年四季均可发生，夏秋季多发。呈地方性流行，新疫区可呈暴发流行，发病率和死亡率较高。老疫区多呈散发，发病率和死亡率较低。 2.2临床症状 2.2.1本规范规定本病的潜伏期为7天。 2.2.2可表现为败血型、脑膜炎型和淋巴结脓肿型等类型。 2.2.2.1败血型：分为最急性、急性和慢性三类。
题目：乳酸中嗜热链球菌的分离及鉴定
分类号： 2011届本科生毕业论文 题目：乳酸中嗜热链球菌的分离及鉴定 Title：Lactic acid streptococcus thermophilus cultured in the separation and identification 系别：化学与生命科学学院 专业：07级生物技术 学生姓名：邵志国 学号：2007090223 指导老师：郭志华 职称：讲师 2011年4月17号
摘要 [目的]从乳酸中将嗜热链球菌分离出并进行鉴定。[方法] 利用MRS培养基将乳酸中的菌种培养，经过革兰氏染色、镜检分离出嗜热链球菌，最后选出7株，对它进行菌落形态的观察。最后对其进行各种理化鉴定。[结果]镜检结果该菌为革兰氏阳性，经过生化鉴定该菌为嗜热链球菌。 关键词：乳酸；嗜热链球菌；分离；鉴定。
ABSTRACT [objective] the streptococcus thermophilus cultured from lactic acid will isolate and evaluations. [method] Use the media will lactic acid bacteria MRS cultivation, and after gram's staining, isolated anti-bma streptococcus thermophilus cultured, finally chosen for it, seven strains colony morphology observation. Finally the various physical and chemical identification. [result] microscopy results this for gram-positive bacteria, after biochemical identified the bacteria for streptococcus thermophilus cultured. Keywords: lactic acid; Streptococcus thermophilus cultured; Depart; appraisal
猪链球菌问题集
猪链球菌问题集 2005年6月24日以来，四川省资阳市、内江市等地连续发生人的猪链球菌感染病例，党和政府对此十分关注，集中了大量的人力、物力和财力对该病进行了及时有效的控制。 为了普及猪链球菌、猪链球菌病及人的猪链球菌感染的相关知识，消除广大读者认识上的一些疑虑和误区，本人参阅相关资料编写了这个问题集，供广大读者参考。 1. 何为链球菌？ 链球菌最初是在1884年由Rosenbach用来描述一种从人的化脓性病灶中分离出来的长成链状的圆形球菌。自此以后，已发现了几十种不同种类的链球菌。链球菌呈革兰氏染色阳性，不能运动、无芽孢，直径大约为1微米的细菌，有些细菌可能有荚膜。大部分为兼性厌氧菌。 在这些链球菌中，有些能引起人与动物的多种疾病，它们常常寄生在动物的粘膜和肠道中，在适宜条件下趁机致病。 猪链球菌也有很多种，在临床上健康猪的扁桃体、肠道和粪便中都能分离到多种链球菌，其中有些链球菌是潜在的病原菌，也就是说，这些链球菌在一定条件下才可以使猪只发病。当然，也有些分布在肠道内的链球菌是一种有益菌，
可以帮助消化，帮助机体拮抗其它有害微生物。存在于猪肠道内的链球菌有肠链球菌、猪肠链球菌、猪链球菌、非解乳糖链球菌、牛链球菌等。存在于猪扁桃体的正常链球菌有猪链球菌、E群链球菌和停乳链球菌等。 2. 猪链球菌如何分型？ 可以根据细菌的溶血特性将链球菌分为α溶血、β溶血和非溶血群（以前称为γ型，现在已经不用这个名称），在这三型中，β型的溶血最明显。Lancefield根据血清学特性将链球菌分为A-H，K-V等群。在1956~1963年期间，曾将引起猪的败血性感染的链球菌归于R、S、RS和T群。也可以根据细菌表面的抗原蛋白（M，T和R）进行分类，其中M是非常重要的抗原蛋白，据此分为60多个不同的类型，分别称为血清1型、2型、3型……。在1963年又将S群和D群命名为猪链球菌血清1型，1975年又将R群的链球菌命名为猪链球菌血清2型。1型与仔猪的脑膜炎有关，2型菌可感染任何日龄的猪。总之，链球菌的分类还没有最后统一，交叉的情况依然存在，如A群可以分为60多个血清型，B 群可以分为4个血清型，C群可以分为13个血清型。 在1983 ~1995年期间，描述了35个菌株，增加了32个新的血清型。在这其中，血清14型来源于人，17、18、19和21型来源于健康的猪，20型和30型来源于病牛，33型来源于病羔羊。分离于病猪的多数猪链球菌属于1~8型。
猪链球菌病防治知识问答
1.什么是猪链球菌病？ 答:猪链球菌病是人畜共患的、由多种致病性链球菌感染引起的急性、热性传染病，常见的有猪败血性链球菌病和猪淋巴结脓肿两种类型。其主要特征是急性出血性败血症、化脓性淋巴结炎、脑膜炎以及关节炎。其中，以败血症的危害最大，在某些特定诱因作用下，发病猪群的死亡率可以达到80%以上。猪链球菌还可以感染特定人群发病，严重的可导致死亡。 根据《中华人民共和国动物防疫法》及其有关规定，把该病列为二类动物疫病。 2.猪链球菌病的潜伏期有多长？ 答:猪链球菌病的潜伏期一般为1~3天，长的可达6天以上。但其长短受多种因素影响，如菌株的毒力、猪群的抵抗力、猪只日龄大小、营养状况、饲养管理情况、环境卫生及应激因素等等。 3.猪链球菌病在猪群间的传播途径是什么？ 答:猪链球菌自然感染部位是猪的上呼吸道（特别是扁桃体和鼻腔）、消化道和生殖道。病猪和带菌猪是该病的主要传染源，其排泄物和分泌物中均有病原菌。病猪和未经无害化处理的死猪、内脏及废弃物，以及污染的饲料、饮水和运输工具等器物是本病传播的重要原因。 该病主要经呼吸道和消化道感染，以及损伤的皮肤、黏膜感染。病猪或带菌猪与健康猪接触，病死猪处置不当，或被污染的饲料、饮水和运输工具等均可引起猪只大批发病而造成流行。 4.猪链球菌是一种什么样的细菌？ 答:链球菌种类很多，在自然界分布广泛。猪链球菌属于链球菌属中的一类，菌体呈圆形或椭圆形，直径小于2.0微米，一般呈链状或成双排列，革兰氏染色呈阳性。菌落小，呈灰白色透明。多数致病菌株具有溶血能力。 猪链球菌有多种型（1～34、1/2）以及一些无法定型的菌株。引起猪发病的链球菌以2型为主。溶菌酶释放蛋白（MRP）和细胞外蛋白因子（EF）是猪链球菌2型的两种重要的毒力因子。 5.猪链球菌病有哪些主要临床表现和肉眼病变？ 答:依据临床表现不同，猪链球菌病可分为猪败血性链球菌病（败血型）、猪链球菌性脑膜炎（脑膜炎型）、猪淋巴结脓肿（淋巴结脓肿型）三种类型。 败血型分为最急性、急性和慢性三种。其中最急性病例主要见于流行初期，发病急，病程短，往往不见任何异常症状猪就突然死亡。发病猪突然减食或停食，精神萎顿，体温升高到41～42℃，呼吸困难，便秘，结膜发绀，卧地不起，口、鼻流出淡红色泡沫样液体，多在6～24小时内死亡。 急性型病猪表现为精神沉郁，体温升高达43℃，出现稽留热，食欲不振，眼结膜潮红，流泪，鼻腔中流出浆液性或脓性分泌物，呼吸急促，间有咳嗽，颈部、耳廓、腹下及四肢下端皮肤呈紫红色，有出血点，出现跛行，病程稍长，多在1～3天内死亡。 慢性型病例多由急性型转变而来。病猪多表现为多发性关节炎，表现一肢或几肢关节肿胀，疼痛，高度跛行，甚至不能站立，严重的可瘫痪。病程可达2～3周。 脑膜炎型以脑膜炎为主要症状。多发生于哺乳仔猪和断奶仔猪，主要表现为神经症状，如运动失调、盲目走动、转圈、空嚼、磨牙、仰卧，后躯麻痹，侧卧于地、四肢呈游泳状划动。病程短的几小时，长的1～5天，致死率极高。病程长的表现呈多发性关节炎。 淋巴结脓肿型该型是由猪链球菌经口、鼻及皮肤损伤感染而引起。多见于断奶仔猪和育肥猪。主要表现为在颌下、咽部、耳下、颈部等部位的淋巴结化脓和形成脓肿。病程3～5周。 6、猪链球菌病死猪有哪些主要的剖检病变？ 答:败血型最急性型病例表现为口鼻流出红色泡沫液体，气管、支气管呈树枝状充血，常充满泡沫液体，肺充血肿胀。急性病例表现为耳、胸、腹下部和四肢内侧皮肤有一定数量的出血
链球菌和葡萄球菌分离鉴定
青岛农业大学 兽医微生物学课程论文 题目：链球菌和葡萄球菌分离鉴定 姓名： 学院：动物科技学院 班级：马业科学1201 学号： 2012 任课教师：温建新 二0一四年四月十二日
链球菌和葡萄球菌分离鉴定 班 2012 指导教师温建新 摘要：为了鉴别致病性葡萄球菌和链球菌，我们将用过氧化氢试验，甘露醇试验，凝固酶试验等方法进行鉴别，并根据他们的不同性质出现不同的结果，得出菌的种类。 关键词：葡萄球菌；链球菌 引言：葡萄球菌是一群革兰氏染色阳性球菌【1】，因常常堆聚成葡萄串状而得名。多数葡萄球菌为非致病菌，少数可致病。代表种有金黄色葡萄球菌。白色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌等。典型的葡萄球菌为圆形或卵圆形，常葡萄状排列，革兰氏染色阳性，无鞭毛，无荚膜，不产生芽胞，呈球形或稍呈椭圆形，直径1.0um左右，排列成葡萄状。葡萄球菌无鞭毛，不能运动。无芽胞，除少数菌株外一般不形成荚膜。易被常用的碱性染料着色，其衰老、死亡或被白细胞吞噬后，以及耐药的某些菌株可被染成革兰氏阴性。营养要求不高，在普通培养基上生长良好，在含有血液和葡萄糖的培养基中生长更佳，需氧或兼性厌氧，少数专性厌氧【2】., 多数葡萄球菌能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产生气。致病性菌株能分解甘露醇. 链球菌是一类球形的革兰氏阳性细菌【2】，属于厚壁菌门的一个属。这些细菌细胞分裂时总是沿一个轴，所以通常成对或者链状的。因为这些特征，他们被称作“链球菌” . 球形或卵圆形，直径0.6～1.0um，多数呈链状排列，短者4～8个细菌组成，长者有20～30个细菌组成。链的长短与菌种及生长环境有关，在液体培养基中形成链状排列比在固体培养基中形成的链长。幼龄菌大多可见到透明质酸形成的荚膜，如延长培养时间，荚膜可被细菌自身产生的透明质酸酶分解而消失。无芽胞，无鞭毛，有菌毛样结构，含M蛋白，革兰氏染色阳性。能发酵简单的糖类，产酸不产气, 需氧或兼性厌氧，有些为厌氧菌。营养要求较高。【1】普通培养基中需加有血液、血清、葡萄糖等才能生长。血琼脂平板上形成灰白色、有乳光、表面光滑、边缘整齐、直径0.5—0.75mm的细小菌落，不同菌株有不同溶血现象。肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌均产生α溶血环【3】。
高致病性猪蓝耳病活疫苗(JXA1-R
高致病性猪蓝耳病活疫苗（JXA1-R株）在广东小范围试用效果良好 高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异毒株引起的一种急性高致死性传染病。2006年5～12月，该病在我国南方部分地区暴发流行，给养猪业造成极大损失。农业部随后组织专家开展流行病学、病原学和活疫苗研制等科技攻关，证实疫情主要由猪繁殖与呼吸综合征变异病毒引起。2008年以来疫情得到有效遏制。为进一步巩固防控成果，保障养猪业健康发展，今年7月，农业部兽医局决定在广东等6省，对广东大华农动物保健品股份有限公司、中牧实业股份有限公司成都药械厂、吉林元亨生物技术有限公司、扬州威克生物工程有限公司生产的高致病性猪蓝耳病活疫苗（JXA1-R株），进行小范围试用和效果评价试验。我省的试验结果表明，4个厂家的活疫苗免疫效果总体比较理想，免疫安全性较好，但也存在一定的差异。 一、小范围试验情况 试验用的高致病性猪蓝耳病活疫苗，由上述4个厂家提供。试验前，撕掉疫苗标签，分别用A、B、C、D编号代替进行盲样试验。为顺利开展这项试验工作，我所（中心）组织制定了《广东省高致病性猪蓝耳病活疫苗使用和效果评价方案》，选择惠州、江门市的9个猪场的560头猪，组成12个试验组，分本底调查、试验评估两个阶段进行。 （一）本底调查阶段（6月30日至7月18日）。 试验前，对参试猪场的饲养规模、猪的品种、饲养管理、猪群健康状况、蓝耳病疫苗免疫背景、疫病发生状况等进行调查摸底，并对参试猪进行血清学检测。结果显示，9个参试猪场存栏生猪50～13225头，猪群生长状况良好，未发生猪蓝耳病等疫病，其中，有7个猪场的能繁母猪和3个猪场的仔猪曾注射猪蓝耳病普通株弱毒疫苗。参试猪的猪蓝耳病抗体阳性率在0～92%之间，有4个场6份血清样品检出猪蓝耳病普通株病毒，但均未检出高致性猪蓝耳病病毒。 （二）试验评估阶段（7月20日至9月20日）。 1.小范围免疫试验。为符合养猪生产实际情况，每种疫苗分别选择管理水平有一定差异的1个场规模较大和1个规模较小的猪场进行一次性免疫试验。每场接种50头猪，其中，25头作为免疫对照，25头跟踪采样并用法国LSI公司试剂监测免疫效果。结果显示，4个厂家活疫苗的抗 —1—
猪链球菌病怎么治疗
猪链球菌病怎么治疗 猪链球菌病由溶血性链球菌感染引起，临床表现为急性出血性败血症、脑膜炎、心内膜炎、肺炎、关节炎、脓肿。该病是国家规定的二类动物疫病，秋冬季节散发，危害严重，养殖户应及早做好防治准备工作。 预防措施免疫接种皮下或肌肉注射猪链球菌氢氧化铝菌苗5毫升（浓缩苗3毫升），免疫期4个月~6个月。皮下或肌肉注射猪链球菌弱毒菌1毫升，免疫期为6个月。 药物预防四环素、土霉素、金霉素任选一种，按每吨饲料600克~800克添加，连用7天。或每吨饲料添加阿莫西林200克、磺胺—5甲氧嘧啶300克~400克，连用7天。或者每吨饲料添加500克~700克11%林可霉素预混剂、磺胺嘧啶200克~400克、三甲氧苄胺嘧啶40克~80克，连用7天~10天。也可使用新亚药业的混感附混康进行预防治疗。 治疗办法链球菌抵抗力不强，对多种药物敏感，可以使用青霉素、氨基苷类抗生素（如卡那霉素、庆大霉素）、四环素类抗生素（如金霉素、土霉素、四环素）、大环内脂类抗生素（如红霉素、螺旋霉素）、磺胺类药物进行治疗。 需连续用药5天以上的治疗方案：①肌注青霉素，每头每次40万单位~100万单位，每天2次~3次。②肌注庆大霉素，每千克体重1毫克~2毫克，每日2次。③肌注庆增安注射液，每千克体重毫升，
每日2次。④新霉素，每千克体重2毫克~5毫克，分2次肌肉注射。 需连续用药3天以上的治疗方案：①％恩诺沙星注射液，每千克体重毫升，肌肉注射，每日2次。②％诺氟沙星注射液，每千克体重毫升，肌肉注射，每日2次。③乙基环丙沙星，每千克体重用毫克~10毫克，每12小时注射1次。严格消毒使用一般消毒剂，如5%~10%生石灰乳、1%~2%烧碱、30%草木灰水等均有良好的消毒效果，也可使用过氧乙酸、菌毒杀等新型消毒剂。病猪猪身以及被病猪污染过的栏舍地面、通道、用具、运动场等都要进行严格消毒。
猪链球菌培训试题及答案
传染病防治知识培训试题 单位姓名成绩 一、选择题 1、以下不属于人感染猪链球菌病临床表现的是（）A畏寒、发热、头痛、头昏、全身不适、乏力、腹痛、腹泻 B 外周血白细胞计数正常或降低，中性粒细胞比例升高 C 重症病例迅速进展为中毒性休克综合征 D 部分病例表现为脑膜炎，恶心、呕吐，重者可出现昏迷 2、有关人感染猪链球菌病的潜伏期说法错误的是（）A平均常见潜伏期2-3天 B最短潜伏期可数小时 C最长潜伏期7天 D常见潜伏期2－10天 3、人感染猪链球菌病的病原菌是（） A猪溶血性链球菌2型 B猪溶血性链球菌1型 C猪链球菌1型和2型混合感染 D以上都不对 4、人感染猪链球菌病的高危人群有（） A屠宰工及尸/肉加工者 B生猪贩运者饲养人员 C其他接触病死畜人群
D以上都是 5、对人感染猪链球菌病患者进行病原学检测时采集的标本不包括（） A血液B脑脊液C鼻咽拭子D组织标本 6、根据实验室检测，猪链球菌对下列哪种抗生素不敏感（） A万古霉素B氨苄西林C亚胺培南D链霉素 二、是非题 1、人感染猪链球菌病是一种新出现的传染病，之前我国乃至全世界都没有该病病例发生（） 2、我国将猪链球菌病列为一类动物疫病（） 3、人感染猪链球菌病的主要传染源为猪，未发现人传染人的直接证据（） 4、人感染猪链球菌病主要通过主要经过破损皮肤传播，食入没有煮烂熟透的病死猪肉也可感染。（） 三、问答题 1、简述猪链球菌病的诊断要点。 2、猪链球菌病的预防控制措施有哪些？
答案 一、选择题BDADCD 二、是非题××√√ 三、问答题 1、综合病例的流行病学史、临床表现和实验室检测结果，排除其它明确病因的可进行诊断。诊断要点包括： ①流行病学史：当地一般有猪等家畜疫情存在，病例发病前7天内有与病（死）猪等家畜的接触史，如宰杀、洗切、销售等。 ②疑似病例：流行病学史结合急起畏寒、发热，外周血白细胞计数升高，中性粒细胞比例升高。 ③临床诊断：流行病学史结合中毒性休克综合征和/或脑膜炎。 ④确诊病例：全血或尸检标本等无菌部位的标本纯培养后，经鉴定为猪链球菌。 2、主要采取以控制传染源（病、死猪等家畜）、切断人与病（死）猪等家畜接触为主的综合性防治措施。 ①在有家畜猪链球菌疫情的地区强化疫情监测，各级各类医疗机构的医务人员发现符合疑似病例、临床病例诊断的立即向当地疾病预防控制机构报告。疾控机构接到报告后立即开展流行病学调查，同时按照突发公共卫生事件报告程序进行报告。
猪链球菌病防治中的若干问题
猪链球菌病防治中的若干问题 张家峥1程根生1牛林山2李召展1田盛林1 1、(河南省许昌市畜牧兽医工作站河南许昌461000) 2、(河南省许昌市家畜改良站，河南许昌461000) 猪链球菌病(Swine streptococosis；SS)是由不同荚膜型的链球菌引起猪的不同临床类型传染病的总称，它发生于世界各养猪的国家，是猪的一种常见病、多发病，有时可造成猪的严重发病和大量死亡。近来四川等地猪发生猪链球菌病并传染于人，还造成人员的严重死亡，从而更加引起了人们的关注甚至恐惧。我国近些年猪链球菌病危害性加剧并感染多人发病死亡的一些问题，除与猪链球菌本身的某些生物特性有关外，还与人们对本病的重视不够或存在某些认识方面的差距，以及与我国社会整体的疫病防制水平落后等均有直接关系。现就相关的主要问题做一简述。 1 概况 猪链球菌病在近些年已成为我国猪细菌性传染病的首要疾病，但发现和确定此病的存在和危害已有60多年的历史。该病最早是1945年由Bryante首次报道了在母猪和仔猪发生败血性流行，我国于1949年由吴硕显发现在上海郊区的散发病例，1963年在广西，继之在广东、福建、四川、安徽、江苏等许多省的部分地区均有较大面积的流行，死亡率很高，至上世纪70年代之后，发病加剧。经采取了免疫注射和药物预防的措施后，对控制本病的发生和流行取得了一定成效。但由于我国养猪数量巨大，地域广阔，饲养环境条件较差，所以本病仍在不少地区或场、群，散发以至严重地方流行。20世纪90年代，在我国少数地区暴发的猪链球菌病，经流行病学和实验室检验，它与原来发生的C群β溶血性链球菌病有某些差别，而且用我国生产并在实践中使用，免疫效果较好的猪链球菌活疫苗，免疫后不能产生保护，
猪链球菌病的症状、诊断与防治
猪链球菌病的症状、诊断与防治 为了使农民朋友更全面地了解猪链球菌病，从而进行有效地防治，特做以下介绍。 一、临床症状 败血症型。一般发生在流行初期，突然发病，体温升至41～42℃，在数小时至1天内死亡。急性病例，常见精神沉郁，体温41℃左右，呈稽留热，减食或不食，心跳加快，眼结膜潮红，流泪，有浆液性鼻液，呼吸浅而快。部分病猪在发病的后期，耳尖、四肢下端、腹下可见有紫红色或出血性红斑，有跛行病程2～4天。 脑膜炎型。多发于哺乳仔猪和保育仔猪，与水肿病的症状相似。发病初期患猪体温升高，食欲废绝，便秘，有浆液性或粘液性鼻液，继而出现神经症状，转圈，空嚼，磨牙，直至后躯麻痹，共济失调，侧卧于地，四肢作游泳状，颈部强直，角弓反张，甚至昏迷死亡。部分猪出现多发性关节炎、关节肿大，病程5～10天。 关节炎型。患猪体温升高，被毛粗乱，呈现关节炎病状，表现一肢或肢关节肿胀，高度跛行，甚至不能起立。病程2～3周。小部分哺乳仔猪也可发生，常常因抢不上吃奶而逐渐消瘦。 化脓性淋巴结炎型。病猪淋巴肿胀，坚硬，有热痛感，采食、咀嚼、吞咽和呼吸较为困难，多见于颌下淋巴结化脓性炎症，咽喉、耳下、颈部等淋巴结也可发生。一般不引起死亡，病程为3～5周。病猪经治疗后肿胀部分中央变软，皮肤坏死，破溃流脓，并逐渐痊愈。 二、解剖病变特点 病猪死后血液凝固不良呈污秽色。心冠脂肪水肿，心内外膜有出血点或出血斑；心包、胸腔积液，呈黄色，有时积液中有纤维蛋白；鼻黏膜、喉头、气管、黏膜充血或出血，有泡沫状物；肺充血、水肿；肝瘀血肿大，呈暗紫色，有时呈黄色；脾瘀血肿大，呈暗黄色，病程稍长的多为黄色；膀胱皱缩，少尿或无尿，全身淋巴结出血肿大或水肿，有的淋巴结周围结缔组织水肿或呈胶冻样；胃和小肠黏膜有不同程度的出血，肠系膜水肿；神经症状严重的脑膜充血、出血，严重的甚至脑膜出血或脑膜下积液。 三、诊断 根据本病流行病学特点，临床症状及病理变化特征一般可以作出初步诊断。但由于本病的临床表现和病理剖检变化比较复杂，容易与败血性和慢性猪丹毒，急性猪瘟等一些败血性及脑膜炎等疾病混淆，故应以实验室诊断为依据。 涂片镜检：取病死猪脾脏、淋巴结制成触片或取心血制成涂片，经革兰氏染色镜检，可见单个、成双、短链球状排列的革兰氏阳性球菌。 分离培养：取心血、肝、脾等病料无菌接种于绵羊鲜血琼脂平板、肉汤、厌气肉汤培养基，染色37℃恒温培养24小时，在血斜面出现灰白、圆形小菌落。肉汤均匀混浊、管底呈絮状沉淀。培养物涂片镜检，菌落涂片可见大量成对和3～5个排列短链球菌。肉汤涂片可见3～5个、十几个乃至几十个置长链状排列球菌，均呈革兰氏阳性着色。 动物接种试验：用小鼠或小兔数只皮下注射前述病料乳剂(病料肝、脾、脑与无菌生理盐水1：10研磨而成)，每只0.2毫升，小鼠(兔)于24～72小时死亡。取死亡鼠(兔)肝、脾、心血分别制片，均见成双短链状革兰氏阳性球菌。 四、治疗及预防 1、病猪立即隔离。圈舍、用具用3%苛性钠溶液、0.3%过氧乙酸、菌毒灭交替喷雾消毒，粪便污物堆积发酵。 2、对病死猪进行深埋或焚烧。
猪链球菌病及防治方法
猪链球菌病及防治方法 猪链球菌病是由多种致病性猪链球菌感染引起的一种人畜共患病。其中猪是主要传染源。该病在人类中不常见，但普遍易感，主要表现为发热和严重的毒血症状。早期诊断及时治疗后，多数患者可以治愈，但部分患者会留下后遗症。 猪链球菌病的危害 猪链球菌在猪中有较高的流行性，在人类不常见，但病情很严重。人群普遍易感，尤其是屠夫、屠场工人及农民发病率高。其它人群如运输、清理病/死猪的人如司机等也易感染猪链球菌引起发病。屠宰厂工人咽部可以带菌，他们可表现为健康状态，但具有潜在危险。该病首先在猪群中暴发流行，随后屠宰者及与处理病、死猪有关者等发病，特别是现代集约型养猪更易流行该病。发病时间相对集中在6～8月的高温季节。人感染猪链球菌的病例早在1968年荷兰和丹麦即有报道，随后瑞典、法国、英国、比利时、意大利、德国、新西兰、加拿大及我国等也有病例报道，目前全球已报告有450余例猪链球菌感染病例，主要在北欧和南亚一些养殖和食用猪肉的国家和地区。1998年，我国江苏南通地区发生的猪链球菌疫情，25例患病，其中16例表现为中毒性休克综合征（13例死亡），9例表现为脑膜炎（1例死亡）。据卫生部通报，2005年6月～8月，四川省累计报告人感染猪链球菌病例204例，其中死亡38例，治愈出院166例。病例分布在资阳、内江、成都等12个市，37个县，131个乡镇，195个村。其实在广大的农村，每年都有散发病例，由于诊断水平不够、或鉴定不出病原菌，治疗不及时死亡的病例时有发生。
猪链球菌病的发病原因 猪是主要传染源，尤其是病猪和带菌猪是本病的主要传染源，其次是羊、马、鹿、鸟、家禽（如鸭、鸡）等。猪体内猪链球菌的带菌率约为20%－40%左右，在正常情况下不引起疾病。如果细菌产生毒力变异，引起猪发病，病死猪体内的细菌和毒素再传染给人类，引起人发病。到目前为止未发现人作为传染源引起人发病。 猪链球菌的自然感染部位是猪的上呼吸道（特别是扁桃体和鼻腔）、生殖道、消化道。主要是通过开放性伤口传播，如人皮肤或粘膜的创口接触病死猪的血液和体液引起发病，所以屠夫、屠场工发病率比较高。在部分患者因吃了不洁的凉拌病/死猪肉或吃生的猪肉丸子、洗切加工处理病/死猪肉引起发病，加工冷冻猪肉也可引起散发病例。部分患者也可以通过呼吸道传播。在猪与猪之间通过呼吸道和密切接触传播，但还没有证据提示通过猪呼吸道传播人。
实验 金黄色葡萄球菌的分离和鉴定
实验题目金黄色葡萄球菌的分离和鉴定 一、实验目的 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因而，食品受其污染的机会很多。近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生难题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒，占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占到45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。为控制金黄色葡萄球菌的对人的危害，我们要分离出它们并研究。 二、实验原理 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8um左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH7.4,干燥环境下可存活数周。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1—2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10—15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，V—P反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。对碱性染料敏感，十万分之一的龙胆紫液即可抑制其生长。 三、实验材料和设备 1.培养基 牛肉膏蛋白胨培养基（13%NaCl）：牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠130g，琼脂15g，蒸 馏水1000ml，121℃灭菌20min后倒平板。 肉汤培养基：酵母膏5g，蛋白胨10g，氯化钠10g，蒸馏水1000ml，121℃灭菌20min。 甲苯胺兰-DNA平板 2.试剂 磺胺类药物、革兰氏染液 3.仪器和设备 显微镜、超净工作台、水浴锅、培养皿、锥形瓶、移液器、灭菌锅、培养箱、试管、载玻片、接菌环。 四、实验方法 金黄色葡萄球菌的分离： 1.称取5g土样，在无菌条件下放入灭菌的锥形瓶中，加入50ml蒸馏水，再加入200ul 磺胺类药物，振荡10min，使土样充分混匀。利用金黄色葡萄球菌对磺胺类药物敏感性低的特性，杀死其他细菌。 2.从上述锥形瓶中取5ml上清液放入一只干净的试管中，30℃，200rpm，24h。 3.取培养好的菌液，按梯度稀释法稀释土壤悬液，依次制备成100、1000、10000、100000倍悬液后，分别取200ul涂布于牛肉膏蛋白胨培养基平板上，置于37℃培养箱中培养24h。利用高盐培养基抑制其他细菌的生长，从而分离金黄色葡萄球菌。 金黄色葡萄球菌的鉴定： 1.菌落形态：菌落较小，较湿，较透明，边缘整齐，隆起。
猪链球菌病
一、概念 猪链球菌病是由多种不同群的致病性链球菌引起的一种人畜共患的急性、热性传染病。是一种多型性疾病，主要表现为急性出血性败血症、心内膜炎、脑膜炎、关节炎、哺乳仔猪下痢和孕猪流产等 二、病原 链球菌(stroptococcus)属于G+ 球菌,种类很多，现已分离出35个菌株，分为32个荚膜型，其中9—14亚型可引起仔猪发病。 生物学性状: （一）形态染色 球形或卵圆形，直径0.6～1.0um，呈链状排列，短者4～8个细菌组成，长者有20～30个细菌组成。幼龄培养物大多可见到透明质酸形成的荚膜。无芽胞，无鞭毛，革兰氏染色阳性。（但在陈旧培养基或脓液标本中常呈阴性） （二）培养特性 需氧或兼性厌氧，有些为厌氧菌。营养要求较高，普通培养基中需加有血液、血清、葡萄糖等才能生长。最适温度37℃，最适PH7.4～7.6，血琼脂平板上形成灰白、光滑、圆形突起小菌落，不同菌株有不同溶血现象。 (三)、生化反应 能发醇简单的糖类，产酸不产气。一般不分解菊糖，不被胆汗或1%去氧胆酸钠所溶解。这两种特性用来鉴定甲型溶血型链球菌和肺炎球菌。（四）抗原结构 主要有三种： 1．核蛋白抗原:或称P抗原，无特异性，各种链球菌均同，与葡萄球菌有交叉。 2．群特异性抗原：多糖抗原或称C抗原系统族特异性抗原，是细菌壁的组成成份。对人致病的90%属于A族，其次为B族，其它族少见。 3．型特异性抗原：蛋白质抗原或称表面抗M、R、T、S等四种不同性制质的抗原组份，具有型特异性。是链球菌细胞壁的蛋白质抗原，位于C抗原外层，同族链球菌可根据表面抗原不同进行分型，如A族链状菌可据此分为60多型。 （五）分类 1．根据对红细胞的溶血能力 （1）甲型溶血性链球菌（α-Hemolytic streptococcus）,菌落周围有1～2mm宽的草绿溶血环，称甲型溶血或α溶血。这类链球菌亦称草绿色链球菌（Streptococcus viridans）。此类链球菌为条件致病菌。 （2）乙型溶血性链球菌（β-Hemolytic streptococcus）菌落周围形成一个2～4mm 宽，界限分明、完全透明的溶血环，完全溶血，称乙型溶血或β溶血。这类细菌又称溶血性链球菌(Streptoccus hemolyticus)，致病力强，引起多种疾病。 （3）丙型链球菌（γ-Streptococcus），不产生溶血素，菌落周围无溶血环，故又称不溶血性链球菌(Streptococcus non-hemolytics)，一般不致病。 2．根据抗原结构分类 按C抗原不同可分类A、B、C、D、E、F、G、H、K、L、M、N、O、P、Q、R、S、T 等18个族。对人致病的大多属于A族。A族又称为化脓性链球菌（Pyogenic streptococcus）。 3．根据对氧需求分类又可分为需氧、兼性厌氧和厌氧三大类链球菌。（六）抵抗力
猪链球菌病的病原及防治
龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/ae15130746.html, 猪链球菌病的病原及防治 作者：文新吾 来源：《畜牧兽医科学》2018年第04期 摘要：猪链球菌病是由链球菌引起的一种传染性疾病。本文主要对猪链球菌病的病原进行简单的分析，并介绍了链球菌病的临床症状及防治措施，以为猪链球菌病的诊治提供一定参考价值。 关键词：猪；链球菌病；病原；防治措施 中图分类号：S858.28 文献标识码：B doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2018.04.142 1 猪链球菌病的病原分析 猪链球菌病的病原为猪链球菌，链球菌是一种呈链状排列的革兰氏阳性球菌，有荚膜，长短不一，性状呈现为圆形或卵圆形。接种于血平板培养基上培养，可见溶血环的形成。荚膜抗原的血清型多达35种以上。通常能够致病的血清型是1～9型。其中血清型2是毒力最强，发病率最高的血清型。致病性链球菌能过产生多种酶和毒素，例如红疹毒素、溶血素、链激酶、透明质酸酶等。猪链球菌在环境中的抵抗力较弱，对干燥和高温敏感，60℃的环境下30 min 即可将其消灭，常用的消毒药物都能够将其杀灭。链球菌在自然界中广泛存在，能够感染人、猪、马、羊和禽等多种动物。猪链球菌能够使猪发生急性败血性以及局部淋巴结化脓性病症。也能够感染人类，是其出现脑膜炎、败血症、心内膜炎等病症。在自然条件下，猪只通过上呼吸道、生殖道和消化道感染链球菌，尤其是扁桃体和鼻腔，是感染发生率最高的器官。发病不分年龄，各个年龄段的猪只都能够发病，但不同年龄感染后表现的症状不同，其中仔猪感染患病主要表现为败血症型和脑膜脑炎型，成年猪感染患病主要表現为化脓性淋巴结炎型。患病猪、经治愈康复的猪，隐性带毒猪都能够患病。猪链球菌病发病不受季节限制，四季都有发病的可能，但在5～11月时发病率较高，呈地方性流行趋势。猪链球菌病的潜伏期通常为1～3 d，有些病例潜伏期略长，对哺乳仔猪的危害最重，能够带来较高的发病率和病死率，其次是中猪，大猪中很少感染较少 [1]。 2 猪链球菌病的临床症状 猪链球菌病的临床症状根据表现不同可分为败血症型、脑膜炎型、关节炎型和化脓性淋巴结炎型几种发病类型[2]。 2.1 败血症型病例 败血症型病例的发病急、传播速度快，根据病情程度还可以分为最急性型和急性型。该病在开始流行时通常表现为最急性型发病。在还未见任何明显症状时就已经迅速死亡；部分病例
猪链球菌病的症状与防治
猪链球菌病的症状与防治 摘要 猪链球菌病是由C、D、E及L群链球菌引起的猪的多种疾病的总称。自然感染的部位是上呼吸道、消化道和伤口。表现为急性出血性败血症、心内膜炎、脑膜炎、关节炎、哺乳仔猪下痢和孕猪流产等。本病流行无明显季节性。但有夏、秋季多发，潮湿闷热的天气多发的特点。有时甚至可呈地方性爆发，发病率和死亡率都很高，给规模化养猪造成严重的损失。 关键词 猪链球菌病；症状；治疗 1．症状 1．1急性败血型 本型为C群链球菌、类马链球菌、D群链球菌和L群链球菌在血中增殖引起全身症状的急性、热性、败血性传染病。5-11月份多发。最急性型不出现症状即死亡。急性型体温升高至41-43℃，废食、震颤，耳、颈下、腹部出现紫斑，如不及时治疗死亡率很高。此类型多发生于架子猪、育肥猪和怀孕母猪，是本病中危害最严重的类型。 1．2心内膜炎型 本型不容易生前发现和诊断，多发于仔猪，突然死亡或呼吸困难，皮肤苍白或体表发绀，很快死亡。往往与脑膜炎型并发。 1．3脑膜炎型 除体温升高、拒食外，出现神经症状。磨牙、转圈、头向上仰、运动失调，后期四肢划水样动作，最后昏迷死亡。 1．4关节炎型 通常先出现于1-3日龄的幼猪，仔猪也可发生。表现为跛行和关节肿大，呈高度跛行，不能站立，体温升高，被毛粗乱。由于抢不上吃奶而逐渐消?。 1．5化浓性淋巴结类型 颌下淋巴结化脓性炎症为常见，咽、耳下、颈部等淋巴结也可发生。肿胀、硬固、热痛，可影响采食，一般不引起死亡。 2．诊断 2．1根据流行特点，典型症状及剖检变化，常可作出初步诊断。为了确诊应进一步作细菌检查，可采取病猪或死猪的脓汁、血、脑、肝、脾等组织作抹片，染色、镜检，如发现呈链状排列的革兰氏阳性球菌，即可确诊。条件许可还可以进行分离培养和动物试验。 2．2本病应该注意与猪瘟、猪丹毒和猪肺疫相区别。 3．防治 防治猪的链球菌病应着眼于减少应激因素，不使猪过度拥挤，加强通风。保持猪舍和场地环境
猪链球菌病的种类及防控措施
39 猪链球菌病的种类及防控措施 林斌 (福建省武夷山市兴田镇畜牧兽医站354305) 摘要:猪链球菌病是养猪生产过程中的常见病,呈世界流行,表现类型多样,我国最常见的为败血症型、脑膜炎型和淋巴脓肿型三种,感染猪表现全身症状、神经症状和淋巴结化脓症状;预防本病必须加强猪场的消毒,推荐使用戊二醛癸甲溴铵复合消毒剂,猪群中发现病猪时一定要对全群进行紧急药物防控,加强管理和科学使用兽药能降低本病发生率。 关键词:猪;链球菌;防控 猪链球菌病由链球菌感染所引起,几乎所有养猪的国家和 地区都有本病的发生[1]。我国最早由吴硕显在上海郊区发现并开 始报道,之后在全国蔓延,南方地区发病较北方严重,尤其是广西、四川、福建、江苏、广东、湖南等省发病率较高,对我国养猪业危害很大。为了能帮助大家更好地防控本病,下面笔者重点就本病的种类及防控措施和大家进行一下交流。 1链球菌病的种类 虽然猪链球菌病类型很多,但临床常见的主要有三种,分别为败血症型、脑膜炎型和淋巴脓肿型,这三种病例能占到临床的90%以上。 1.1败血症型 败血症型是由C 群马链球菌兽疫亚种及类马链球菌感染所引起,潜伏期为1~3d ,长的可达一周,根据临床发病缓急程度,本型可分为最急性型、急性型和慢性型三种。 最急性型发病急,病程一般不到1d ,多突发死亡,临死前无明显的表现,部分猪体温急性升高,采食量下降,呼吸困难,卧地不起,死亡率80%以上。急性型发病较最急性缓,病初同样表现体温上升,通常在40℃~42℃之间,稽留不退,病猪停止采食,饮水量增加,眼结膜潮红,精神不振,对外界刺激不敏感。后期鼻镜干燥,呼吸困难,咳嗽,鼻液呈浆液性或脓性。耳根、腹部和四肢末端的皮肤呈紫红色,伴有出血点。急性型病程一般为3~7d ,大多猪最终因心力衰竭而死。慢性型大多为急性型耐过的猪经转化而来,以多发性关节炎为主要表现,可发生于四肢,也可单独发生于一肢,关节部位肿胀,猪表现剧烈的疼痛反应,无法长时间走路或站立,长期卧地不起,对采食和饮水间接造成影响,最后因体质衰竭而死亡。 1.2脑膜炎型 脑膜炎型链球菌病主要由C 群链球菌感染所引起,由于致病菌侵入大脑皮层,对脑灰质造成功能性和器质性的病变,感染猪表现神经症状。感染初期,脑膜仅为功能性病变,病猪体温上升,采食量下降,粪便秘结,鼻液黏稠,随着疾病的发展,感染猪开始表现神经症状,走路不稳,共济失调,原地转圈,不自主磨牙和空嚼。病猪如果受到外界刺激,比如声音刺激、驱赶刺激等,可迅速表现尖叫,全身肌肉颤抖,四肢如游泳状,口吐白沫。急性发作的病猪一般在症状出现后的2d 之内死亡,死亡率可达80%以上。慢性型病程长,多以关节炎表现为主,感染猪消瘦,生长发育 不良,抵抗力低下,容易继发感染。 1.3淋巴脓肿型 本型多由E 群链球菌感染所造成,临床主要以下颌淋巴结、颈淋巴结和咽部淋巴结感染为主要特征。脓细胞实质为死亡的中性粒淋巴细胞,当链球菌感染后,在形成菌血症的条件下,病原菌随血液流动到达淋巴结。淋巴节中有大量的淋巴细胞,特别是其中的嗜中性淋巴细胞,能将病原识别,在趋化性的引导下主动向炎症区域游走,这些细胞可将链球菌识别并吞噬,之后自己 逐渐死亡,转化为脓细胞,从而造成淋巴结脓肿。感染猪主要表现体温升高,食欲减退,下颌淋巴结、颈淋巴结、腘淋巴结等全身淋巴结化脓肿大等。 2防控措施 链球菌在自然界的抵抗力并不强,对绝大多数种类的消毒剂都敏感,疫区猪场加强猪场的消毒能快速控制疫病的蔓延,非疫区猪场通过定期消毒能确保环境得到有效净化[2]。戊二醛癸甲溴铵是我们临床推荐的消毒剂,由戊二醛和癸甲溴铵两种成分复方组成,杀菌谱非常广泛。戊二醛为醛类消毒药品,除了致病性链球菌之外,对其他细菌的繁殖体和芽孢,以及病毒和真菌类病原也具有杀灭作用。癸甲溴铵为双长链的表面活性剂,其季铵阳离子能主动吸引胞膜为负电荷的细菌,并覆盖在其表面,阻碍细菌的繁殖和代谢,引发细胞膜通透性增强,协同戊二醛更易进入细菌内部,对代谢酶的活性产生影响。可用于车辆、人员、办公区域以及设备器械的消毒,对人员安全。常规环境消毒可按1∶ 2000倍稀释全场喷洒,疫病流行期间浓度可加倍至1∶:1000,日常养殖器械设备、笼具、用具的消毒可按照1∶3000倍稀释后浸泡即可。使用时一定要注意,由于癸甲溴铵为阳离子表面活性剂, 禁止与阴离子表面活性剂配合使用,以免产生功效相抵。 除了加强消毒外,猪场在紧急情况下也可采取药物防控的方法。所谓的紧急情况,是指猪群中发现可疑猪后,经临床和实验室结合诊断,确定为链球菌感染的,除了将病猪隔离外,需要对同群的其他猪紧急给药预防[3]。常用的对链球菌敏感的药物有复方阿莫西林、头孢喹肟、头孢噻呋、氟苯尼考、氨苄西林、恩诺沙星以及磺胺类药物等。需要注意的是,脑膜炎型链球菌感染时,需要选择能透过血脑屏障的药物品类,首选磺胺类和头孢类药物。除此之外,猪场还应加强管理,定期对人员进行培训,猪舍在夏季做好通风降温,冬季做好保温工作,尽量减少外来人员的来访,药物一定选择正规厂家的有二维码追溯监管的药物品类。耐药性是本病难以防控的关键因素之一,临床用药时一定严格按照规定的药物剂量使用,不随意延长用药时间,不随意加大剂量,从而延长药物的使用期限。 参考文献 [1]陈翔翔.猪链球菌病的研究概况[J].福建畜牧兽医,2011,(4):16-18. [2]王晓红.猪链球菌病的临床特征和防治策略[J].今日畜牧兽医,2018,(4):73. [3]吕永强,闫惠芳.猪链球菌病的发病原因及防治措施[J].畜牧与饲料科学,2011,(8):104-105. 作者简介:林斌(1976.11-)男,福建建瓯人,助理兽医师,中专,主要从事畜牧兽医方面的工作