--临床化学诊断酶学

第五章诊断酶学

本章考点：

1.血清酶

（1）分类、生理变异与病理生理机制

（2）酶活性与酶质量测定方法及其评价

（3）同工酶及其亚型测定的临床意义

2.血清酶活性检测技术

（1）酶活性概念和表示方法

（2）酶活性测定方法分类、原理、优缺点及应用

（3）影响酶作用的因素

（4）工具酶的概念、代谢物测定中常用的指示反应

3.常用血清酶及同工酶测定的参考值及临床意义

（1）肌酸激酶及同工酶和其亚型

（2）乳酸脱氢酶及同工酶

（3）氨基转移酶及同工酶

（4）碱性磷酸酶及同工酶

（5）谷氨酰基转移酶及同工酶

（6）淀粉酶及同工酶

（7）酸性磷酸酶及同工酶

4.代谢物酶法测定

第一节血清酶

一、血清酶的分类

根据酶的来源及其在血清中发挥催化功能的情况，可将血清酶分为两大类。

（一）血浆特异酶

在血浆中发挥特定催化作用的酶。如凝血酶、胆碱酯酶（CHE）、脂蛋白脂肪酶、铜氧化酶等。

它们大多数在肝内合成，在血浆中的浓度甚至超过器官细胞内浓度。有的可以作为肝功能试验的一部分。

血浆特异酶活性的改变，除了反映血液功能外，还反映来源器官的功能。

（有少部分酶在细胞合成后分泌到血液中行使其功能，如凝血因子及有关的纤溶因子。它们以酶原状态分泌人血，在一定的条件下被激活，引起相应的生理或病理变化。）

（二）非血浆特异酶

在血浆中浓度很低，且无功能，分为两种。

1.分泌酶：

来源于消化腺或其他外分泌腺的酶。如α-淀粉酶（AMY）、前列腺酸性磷酸酶（ACP）、脂肪酶（LPS）、胃蛋白酶原、胰蛋白酶原、ALP等。

正常体液中外分泌酶活性低而稳定，不发生催化作用。

在血液中的浓度和其分泌腺体的功能活动和疾病有关，来源增加或排泄受阻时，血浆中此类酶活性增高。例如，急性胰腺炎时，血淀粉酶就会升高。

2.代谢酶：（细胞酶）

在细胞内发挥催化功能的酶。正常时这些酶存在于组织细胞中，血浆中酶活性很低。细胞内、外浓度差异悬殊。

当酶来源的组织细胞发生病变，细胞膜通透性增加或细胞坏死时，细胞内酶大量进入血浆，导致血浆酶活性显著增高。其下降的临床意义很少。

这一类酶临床应用较多，如转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶等，它们在肝病、心脏疾病时都可能出现变化。

二、血清酶生理变异及其病理生理机制

（一）血清酶生理变异

除病理因素外，有不少生理因素可以影响血清酶测定数值，这些变化无临床病理意义。

1.性别：大多数酶无性别差异，只有少数酶如CK和GGT存在明显差异，CK和GGT都是男性高于女性，因此不能以一个参考值作为判断标准。

2.年龄：不少酶在儿童期和成人时活性不同，例如新生儿的CK和LD活性常为成人的2～3倍，以后逐渐降低，到一定年龄和成人一样。变化最明显的酶是和骨的生长发育有密切关系的碱性磷酸酶。有些酶在进入老年期也可能有变化，如ALP和GGT到老年时可能有轻度升高。

3.进食：多数酶不受进食影响，但酗酒可引起GGT明显升高。

4.运动：剧烈运动可引起血清中多种酶升高，升高程度和运动量、运动时间以及是否经常运动有关。升高的酶多为肌肉中含量丰富的酶，如CK、LD、AST等。

5.妊娠与分娩：妊娠时有许多生理变化，也可出现一些酶升高，如妊娠时ALP（因有胎盘ALP同工酶）升高，分娩时可能有CK、CK-BB、LD升高。

（二）血清酶病理改变机制

疾病时，影响血清酶的因素很多，主要机制如下：

1.酶合成异常：

血浆特异酶大多数是在肝合成，当肝功能障碍时酶浓度常下降。如血清胆碱酯酶活性在有肝功能障碍时可下降。

由于酶基因变异也可引起特定酶减少或消失，如肝-豆状核综合征患者血中铜氧化酶活性可明显下降。如有骨细胞增生时，血中ALP可上升。

此外恶性肿瘤，应用某些药物，也可引起相应的血清酶变化。

2.细胞酶的释放：

是疾病时大多数血清酶增高的主要机制，影响细胞酶释放的主要原因有：

（1）细胞内、外酶浓度的差异：

非血浆特异酶在细胞内、外浓度可差千倍以上，只要有少量细胞受损伤，酶从细胞中释出，就可使血液中酶明显升高；

（2）酶在细胞内的定位和存在的形式：

胞质中游离的酶如ALT、LD最容易释放人血，而在亚细胞结构中的酶则较难释放出来，特别是线粒体酶，如肝细胞中的AST常需细胞出现坏死病变时才能释放人血；

（3）酶蛋白分子量的大小：

酶释放的速度大约和分子量成反比，此因素对酶在血液出现时间的影响大于对酶浓度高低的影响，例如LD分子量大于CK，而当有心肌梗死时，LD在血液中升高的时间就晚于CK。

3.酶在细胞外间隙的分布和运送：

细胞中酶有三种途径进入血液：

①血管内皮细胞和血细胞的酶直接进入血液；

②酶可同时进入血液和组织间隙，后者再入血；

③酶大部分进入组织间隙后再入血。

这些因素都会影响酶进入血液的时间和升高的程度。

4.血液中酶的清除：

不同疾病和不同的酶从血液中清除的时间和机制不同，同一疾病不同酶恢复正常的时间也不一样，这和酶的半寿期以及一些其他因素有关。

习题1.下列哪种酶是血浆特异酶

A.胆碱酯酶

B.脂肪酶

C.转氨酶

D.乳酸脱氢酶

E.淀粉酶

『正确答案』A

习题2.细胞酶的释放量不受下列哪个因素的影响

A.各种酶的测定波长及反应速率

B.细胞内外酶浓度的差异

C.酶的相对分子量

D.酶的组织分布

E.酶在细胞内的定位和存在形式

『正确答案』A

第二节血清酶活性检测技术

一、酶活性测定的基本知识

酶测定包括酶量测定和酶活性测定。

酶在体液中含量极微，仅为ng/L水平，测定酶量十分困难。因此临床上大都采用酶活性测定，以酶活性间接表示酶量。

（一）酶活性的概念与表示法

1.概念：

酶活性指酶催化反应的能力即酶促反应速度。反应速度是指在规定条件下单位时间内底物的减少量或产物的生成量。

2.表示方法：

酶活性的大小通常以酶单位数表示。

（1）酶的国际单位

在实验规定的条件下（温度、最适pH、最适底物浓度时），在1分钟内催化1μmol底物发生反应所需的酶量为1个酶活力国际单位（U）。

（2）Katal（催量）：

即每秒钟转化1个摩尔底物（mol /s）的酶量。