影响试管苗生根的因素

影响试管苗生根的因素
影响试管苗生根的因素

影响试管苗生根的因素

试管苗生根是组织培养快速繁殖的重要环节。只有当组培苗有了很好的根系时才能保证移栽成活。试管苗的生根受很多因素的影响,在实际生根时可以通过调节很多因素来使其容易生根。影响试管苗生根的因素主要有:

(1) 植物材料

各种植物种植成活的难易程度不同。同样的,不同的植物、不同的品种、同一植物的不同部位和不同年龄对生根都有决定性的影响。生根难易还与母株所处的生理状态有关,因为取材季节和所处环境条件均有影响。

一般的,试管苗生根和歼插苗生根是一样的,即歼插生根容易的植物,试管苗生根也容易;歼插生根困难的植物,试管苗生根也困难。比如,月季等歼插生根比较容易,试管苗也比较容易。

不同植物生根的规律是:成年的比幼年的生根难,木本植物比草本植物生根难。试管苗一般都比较幼嫩,但是有些试管苗在培养瓶中生长时间长,茎木化程度比较高,这类苗不容易生根。生长旺盛幼嫩的试管苗容易诱导生根。

(2) 基本培养基

试管苗生根是一个从异养状态进入自养状态的一个变化。月商刑眼系来吸收营养和水分是植物体的一种本能。

在培养基中有高浓度的营养元素,特别是糖能满足的情况下,试管苗产生依赖性而不易生根,所以减少培养基中的营养成分和糖的含量即可刺激生根。试管

苗生根大多数使用低浓度的M骊养基,其中经常使用1/2MS和1/3MS培养基。不

同植物对培养基的要求也不同。在无籽西瓜生根中,降低无机盐浓度,有利丁生

根,而且根多而粗壮,发根也快,加铁盐则更好。糖的浓度一般用2%,有些植

物在无糖培养基上也能生根。

培养基中的其他成分也和生根有关,有机成分中的维生素B,维生素B6,维

生素B12都有利丁生根。培养基的pH值对试管苗的生根也有一定的影响。因此需要求一定的pH值范围,一般在5.0 —6.0。据报道,pH值显著影响小萝卜幼苗切后侧根的形成,pH为3.8时,侧根原基为为每平方厘米60条,pH为5.8 时则降为每平■方厘米18条。水稻离体种子根生长,随pH值由3.3升高至5.8 而加快。

(3) 植物生长调节物质

生长素有促进生长的作用,它一方面使细胞壁疏松,增加可塑性,促进了细胞的纵向伸长;另一方面生长素乂促进了蛋白质等物质的合成,从而增加了原

生质体的量。

生长素中主要有口引噪乙酸(IAA)、蔡乙酸(NAA)和口引噪丁酸(IBA)。这三种生长素一般都能有效促进生根。但不同种类的植物对生长素的种类和浓度的要求也不同。使用不同种类的生长素,不但影响生根的数量,而且影响生根的质量。一般用IAA诱导生成的根比较细长,NA醐导生成的根比较短粗,而旧A诱导的根则介丁二者之间。生根与生长素的浓度有关,生长素浓度越高,根越向短粗方向发展,进一步增加生长素的浓度,超过一定极限,则引起愈伤组织化,影响根的形成和生长。

植物生长调节物质的使用方法有2种:一种是将适宜浓度的生长素预先加入

到培养基中,然后将无根的试管苗接种上使其诱导生根;另一种是在无菌条件下将

五根苗的茎段剪下来,用一定浓度的无菌生根溶液浸泡1~2小时后,再接种到不含

激素的培养基中培养生根。

(4) 培养条件

温度

试管苗在试管内生根,或在试管外生根,都要求一定的适宜温度,一般在16C — 25 C ,过高过低均不利于生根。不同植物最适生根温度不同。据报道,草莓继代培养芽的再生是32C,生根是28 C最好,16C时根长增加5mn^8mm 根数为5条,而28 C时根长可增加11mni产生19条根。温度对马铃薯块茎离体培养物发根也有影响,发根最适温度高于分枝的最适温度。

光照

光照强度和光照时间对发根的影响十分复杂,结果不一。一般认为生根不需

要光照。例如,试管苗转入生根培养基后,先进行一周左右的暗培养,再转入正常关照培养,有利于根的形成。但是暗培养影响上部植物的生长,不利于培养壮苗。若在生根培养基中加入0.1%-0.3%的活性炭,不仅使生根处于较暗的条件下,而且还能吸附一些有蠹物质,使根不易褐变,有利于根的形成和生长。

影响安祖花生根的因素有一下几方面:

(1) 转入生根培养基的芽苗的高度

一般实验中都是将长度大于1.0cm的生长健壮的芽苗切成单苗接种于生根培养基上培养。而在丛状芽继代培养过程中发现在同一种培养基上,无菌苗高的易生根,当高度在3.0cm以上时,生根率最高达85.4%;在2.0cm以下时,诱导生根率较少,仅53.5%。

(2) 植物生长调节剂

三种生长素(IAA、NAA旧A)对安祖花的生根均有促进作用,其生根作用的效应依次为IAA、旧A、NAA IAA在0.2?1.0 mg/L的范围内生根效果最好;旧A在0.2?1.0 mg/L的范围内效果最好;NAA在0.1?0.4 mg/L的范围内效果最好。不定芽真根发生率随着IAA浓度增大而增大。IAA, IBA, NAAP」于生根的适宜浓度分别为1.0 mg/L、1.0 mg/L、0.4 mg/L,生根率分别为91 %, 70 %, 63 %。IAA为1.0 mg/L 在培养约2周后有根长出;当旧A的浓度为1.0 mg/L、当NAA勺浓度为0.4 mg/L时培养20 d后才有根长出。

高浓度生长素不利于根发生。生长素浓度过大,则外植体会分化出较多的愈伤组织,使根条数降低,不利于生根,而且较高的生长素浓度会使苗木生长表现茎叶白化等异常现象。

因此,安祖花组织培养中理想的生根培养基是1/2 MS+IAA1.0 mg/L。另外,由于IAA不稳定,受热容易分解,组织培养中需要过滤灭菌,操作麻烦,不适宜大规模生产。用培养基:1/2 MS+1.0mg/L旧A生根时,试管苗生根率可达70 % 因此在实际生产中,应用旧A进行安祖花不定芽生根培养也是可行的。

(3) 培养条件

因为安祖花原产在南美洲热带地区,喜高温多湿的环境,因此,要求温度在20 C -30 C,相对湿度也较高,在80恕上。

影响试管苗生根的因素

影响试管苗生根的因素 试管苗生根是组织培养快速繁殖的重要环节。只有当组培苗有了很好的根系时才能保证移栽成活。试管苗的生根受很多因素的影响,在实际生根时可以通过调节很多因素来使其容易生根。影响试管苗生根的因素主要有: (1)植物材料 各种植物种植成活的难易程度不同。同样的,不同的植物、不同的品种、同一植物的不同部位和不同年龄对生根都有决定性的影响。生根难易还与母株所处的生理状态有关,因为取材季节和所处环境条件均有影响。 一般的,试管苗生根和扦插苗生根是一样的,即扦插生根容易的植物,试管苗生根也容易;扦插生根困难的植物,试管苗生根也困难。比如,月季等扦插生根比较容易,试管苗也比较容易。 不同植物生根的规律是:成年的比幼年的生根难,木本植物比草本植物生根难。试管苗一般都比较幼嫩,但是有些试管苗在培养瓶中生长时间长,茎木化程度比较高,这类苗不容易生根。生长旺盛幼嫩的试管苗容易诱导生根。(2)基本培养基 养和水分是植物体的一种本能。 在培养基中有高浓度的营养元素,特别是糖能满足的情况下,试管苗产生依赖性而不易生根,所以减少培养基中的营养成分和糖的含量即可刺激生根。试管苗生根大多数使用低浓度的MS培养基,其中经常使用1/2MS和1/3MS培养基。不同植物对培养基的要求也不同。在无籽西瓜生根中,降低无机盐浓度,有利于生根,而且根多而粗壮,发根也快,加铁盐则更好。糖的浓度一般用2%,有些植物在无糖培养基上也能生根。 培养基中的其他成分也和生根有关,有机成分中的维生素B 1,维生素B 6 ,维 生素B 12 都有利于生根。培养基的pH 值对试管苗的生根也有一定的影响。因此需要求一定的 pH值范围,一般在 5.0—6.0。据报道,pH值显著影响小萝卜幼苗切后侧根的形成,pH为 3.8时,侧根原基为为每平方厘米 60条,pH为 5.8时则降为每平方厘米 18 条。水稻离体种子根生长,随 pH值由 3.3 升高至5.8而加快。 (3)植物生长调节物质 生长素有促进生长的作用,它一方面使细胞壁疏松,增加可塑性,促进了细胞的纵向伸长;另一方面生长素又促进了蛋白质等物质的合成,从而增加了原生质体的量。 生长素中主要有吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)和吲哚丁酸(IBA)。这三种生长素一般都能有效促进生根。但不同种类的植物对生长素的种类和浓度的要求也不同。使用不同种类的生长素,不但影响生根的数量,而且影响生根的质量。一般用IAA诱导生成的根比较细长,NAA诱导生成的根比较短粗,而IBA诱导的根则介于二者之间。生根与生长素的浓度有关,生长素浓度越高,根越向短粗方向发展,进一步增加生长素的浓度,超过一定极限,则引起愈伤组织化,影响根的形成和生长。 植物生长调节物质的使用方法有2种:一种是将适宜浓度的生长素预先加入到培养基中,然后将无根的试管苗接种上使其诱导生根;另一种是在无菌条件下将五根苗的茎段剪下来,用一定浓度的无菌生根溶液浸泡1~2小时后,再接种

试管苗生根

试管苗生根 录入时间:2009-6-15 9:08:16 来源:百度 -------------------------------------------------------------------------------- 试管苗生根 离体繁殖产生大量的芽、嫩梢、原球茎,需进一步诱导生根,才能得到完整的植株。生根属试管繁殖的第三个阶段,其后栽入土中。这是最后一道微繁工序,也是能否进行大量生产和实际应用的又一重要问题,同时也是商品化生产出售产品,取得效益的最终关节,应给予高度重视。试管繁殖往往诱导产生大量的丛生芽或丛生茎、原球茎,再转入生根培养基中生根或直接栽入基质中,进一步长大成苗。试管苗的生根可分为试管内生根和试管外生根两种方式。 1、试管内生根 植物离体培养根的发生都来自不定根。根原基的形成和生长素有关,根原基的伸长和生长则可以在没有外源生长素下实现。一般从诱导至开始出现不定根时间,快的只需3d—4d,慢的则要3周—4周。植物组织培养中,关于根的发生规律研究的还不够,尤其是在木本植物培养中,往往芽易诱导并且生长良好,而根则难发生(例如牡丹),故应当加强这方面的研究。影响植物离体培养中生根的因素很多,有离体材料自身的生理生化状态,也有外部的多种因素。 (1)植物材料不同植物、不同基因型、同一植株不同部位和不同年龄对分化根都有决定性的影响。生根难易还与母株所处的生理状态有关,因为取材季节和所处环境条件均有影响。所以试管内若不生根,不要完全从培养中去找原因,也应在取材时考虑。不同植物生根的一般规律是:木本植物比草本植物难,成年树比幼年树难,乔木比灌木难。 (2)基本培养基大多数使用低浓度的MS培养基,其中不少使用1/2MS和1/3MS培养基。如许智宏等在无籽西瓜生根中,用不同浓度的MS培养基(用MS、1/2MS和1/2MS无机盐加铁盐)进行生根对此,结果降低无机盐浓度,有利于生根,而且根多而粗壮,发根也快,加铁盐则更好。水仙的小鳞茎在1/2MS培养基下才生根。矿质元素对生根的影响也有一些报道。大量元素中有人认为NH 多可能不利于发根,生根需要磷和钾元素,但不宜太多;而Ca2+多数报道有利于根的形成和生长。糖的浓度,生根培养时通常使用的是蔗糖,其浓度多数采用低浓度,一般在1%—3%。如桉树的不定枝发根最适蔗糖浓度为0.25%,马铃薯发根为1%。但也有些植物在高浓度时生根较好,李明军等(1998)在怀山药试管繁殖中发现3%—9%的蔗糖浓度均能诱导生根,但6%时根粗而发达。 (3)植物生长调节剂生根培养中使用激素的情况,据报道单用一种生长素的占51.5%,生长素加激动素占20.1%。按外植体类型归类统计,愈伤组织分化根时,使用萘乙酸最多,浓度在0.02—6.0,以1.0—2.0为多。使用吲哚乙酸+激动素的浓度范围分别为0.1—4.0和0.01—1.0,而以1.0—4.0和0.01—0.02居多数。而胚轴、茎段、插枝、花梗等材料分化根时,使用吲哚丁酸居首位,浓度为0.2—10,以1.0为多。可见生根培养多数使用生长素,大都以吲哚丁酸、吲哚乙酸、萘乙酸单独用或配合使用,或与低浓度激动素配合使用。萘乙酸与细胞分裂素配合时摩尔比在(20—30):1为好。由此可见,在不定根形成中,植物激动起着决定性作用,生长素都能促进生根。一般赤霉素、细胞分裂素、乙烯通常不利于发根,如与生长素配合,一般浓度宜低于生长素浓度。脱落酸(ABA)可能有助于发根。植物生长延缓剂如多效唑(MET)对不定根的形成也有良好的作用,在诱导生根中所使用的浓度一般为0.1—4.0(李明军,1995)。 (4)植物生长调节剂的使用方法通常的使用方法是将植物生长调节剂剂预先加入到培养基中,然后再接种材料使其诱导生根。近年来为促进试管苗的生根,改变了这种做法,而将需生根材料先在一定浓度植物生长调节剂中浸泡或培养一定时间,然后转入无植物生长调节剂培养基中培养,能显著提高生根率。如将苹果新梢预先在吲哚乙酸溶液中浸泡1h,这样比预先加到培养基中效果要好。又如将栗的新梢基部1cm处在1.0浓度的IBA溶液中浸泡2min,然后转入1/2硝酸盐的MS培养基上,可使生根率高达90%,每茎生根数为12.3条。再如将桃新梢浸入100BA溶液中浸2h 后,再转入除去激素、蔗糖和水解乳蛋白的1/2MS培养基上,可诱导生根。 (5)其他物质有些材料报道培养基中加入一些其他物质,有利于生根。 (6)继代培养许多作者报道,新梢生根能力随继代时间增长而生根能力增加。如杜鹃茎尖培养,随培养次数的增加,小插条生根数量逐渐增加,第四代最高,最后达百分之百的生根。

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