益气温阳活血方对心肌梗死模型大鼠骨髓干细胞的动员作用和左室重构的影响
益气温阳活血方对心肌梗死模型大鼠骨髓干细胞的动员作用和左室重构的影响（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）
作者：杨庆有,陆曙,龚少愚,孙慧茹
【摘要】目的对比观察益气温阳活血方和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对心肌梗死模型大鼠骨髓干细胞的动员作用和左室重构的影响。方法结扎冠脉前降支造模,检测模型鼠造模当天、第5天和第10天外周循环血干细胞数,计算治疗第8周大鼠心脏重量指数、室壁变薄率和膨胀指数。结果中药组外周血干细胞数在造模5 d后显著升高(P0.001)；停药5 d后,仍高于西药组(P0.001)。中药组心脏重量指数下降(P0.001),室壁变薄率升高,膨胀指数显著下降(分别为P0.05,P0.001)。结论益气温阳活血方具有良好的动员骨髓干细胞作用,其动员作用较G-CSF持久；在防治心室重构方面有优于G-CSF 的趋势。
【关键词】心肌梗死；骨髓干细胞；左室重构；益气温阳活血方Abstract：Objective To contrast and observe the bone marrow stem mobilization induced by Yiqi Wenyang Huoxuefang and
G-CSF, and the influence to left ventricle reconstruction. Methods Model rat was made by ligate LAD, quantity of circulation stem cells (CSC) at the first, fifth and tenth day was detected. After be treated 8 weeks, the heart index, the expansion index and the thinning ratio were calculated. Results The quantity of CSC of Chinese herbs group increased at the fifth day (P0.001). After withdrawal medicine 5 days, it is higher than medicine group (P0.001). The heart index and the EI decreased remarkable (respectively P0.001 and P0.001), and TR elevated (P0.05). Conclusions Yiqi Wenyang Huoxuefang has a good mobilization effect on bone marrow stem cell, and is better than CSF. It has a better effect in inhibiting the left ventricle reconstruction of heart than CSF.
Key words：marrow stem cell；reconstruction of left ventricle；Yiqi Wenyang Huoxuefang
目前人们认识到：心肌细胞的丢失是心肌梗死后心衰发生的主要因素,心肌细胞数量的减少与病理性的心室重构导致心功能恶化是心衰发生发展的基本机制。如何促进梗死区内心肌细胞再生和减少梗死邻近细胞的凋亡、防止心室重构,成为防治心梗后心力衰竭发生及降低心梗后远期死亡率的关键。本实验对比观察了益气温阳活血方和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对骨髓干细胞的动员作用及其干预左室重构的作用。
1 实验材料
1.1 药物
基因重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)购于山东格兰百克制药有限公司。益气温阳活血方由人参10 g,黄芪15 g,制附子5 g,毛冬青30 g,益母草10 g组成,购自广州中医药大学第一附属医院。上述中药常规煎煮后离心,取上清液,水浴浓缩成1 mL(含原药材1 g),4 ℃保存备用。
1.2 仪器
L-200型电子分析天平(SHZMADZU Corporation KYO to JAPAN Altra),流式细胞仪(Beckman Counter.U.S.A),BI- 2000图像分析系统(成都泰盟科技有限公司),切片机(日本樱花株式会社),HH.W21.Cr42型恒温水浴箱(广东汕头医用设备厂),TDL-5A型飞鸽牌离心机(上海安亭科学仪器厂)等。
2 实验方法
2.1 动物分组和造模
纯种SPF级SD大鼠40只,4周龄,雌雄各半,体重(180±10)g,广州中医药大学实验动物中心提供。40只大鼠先随机分出10只作为正常空白组,余下30只参照文献[1]方法结扎冠脉前降支造模。造模后用卡西欧计算器给出的随机号随机分为3组：模型组、G-CSF 诱导组(西药组)、益气温阳活血方诱导组(中药组),每组10只。
2.2 治疗方法
造模当天开始治疗。正常空白组：正常喂养,不作治疗；模型组：皮下注射生理盐水0.2 mL,生理盐水5 mL灌胃；西药组：生理盐水5 mL灌胃,皮下注射rhG-CSF 10 μg/(kg·d)[约0.2 mL/(鼠·d)]；中药组：皮下注射生理盐水0.2 mL,中药煎剂5 mL灌胃。均为每日1次,连续5 d。
2.3 检测指标
2.3.1 骨髓干细胞动员的观察
造模后24 h、治疗第5天和第10天,眼眶取血,流式细胞仪检测血液中CD34＋细胞数量,按下式计算表达CD34＋的细胞数量[2]。骨髓干细胞数=(测得CD34＋数/测得微球数)×(微球总量/样本体积)。
2.3.2 左室重构的观察
治疗第8周,各组大鼠称重,麻醉后取出心脏,冰盐水冲洗后吸干水分,称取心脏重量,计算心脏重量指数。心脏指数=心脏重量(mg)/体重(g)。
剪除双侧心房及右心室,沿左心室长轴由心尖到心底部切成两半,以10%甲醛固定,乙醇脱水,石蜡包埋。每隔100 μm切取2 μm厚的全心脏长轴面切片1张,共切6片。冲洗后,HE染色,用BI-2000型图像分析系统进行图像分析,逐片测量下列参数：梗死区横断面积(IA)、梗死区室壁厚度(IT)、室间隔厚度(ST)、左室壁横断面积(LVA)、左室腔横断面积(LVCA)和左室腔周长。按下式计算膨胀指数
(Expansion Index,EI)和变薄率(Thining Ratio,TR)。EI=(LVCA/LVA)×(ST/IT)；TR=6张切片梗死区厚度之和/6张切片室间隔厚度之和。
2.4 统计学方法
数据均采用SPSS11.0软件包进行统计处理,以x±s表示,先行正态检验和方差齐性检验,再行单因素方差分析和t检验。
3 结果
(见表1～表3)表1 各组大鼠不同时段循环干细胞数(略)注：与正常空白组比较,*P0.01；与模型组比较,#P0.05,##P0.001；与西药组比较,△P0.001(下同)。表2 造模8周后各组大鼠心脏重量和心脏重量指数(略)表3 造模8周后各组大鼠室壁变薄率和膨胀指数(略)
4 讨论
心肌梗死后骨髓干细胞动员能自行迁移到心肌损伤部位,在心脏微环境中横向分化为心肌细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞。而且骨髓干细胞分化来的心肌细胞能与周围宿主心肌细胞形成有效的电-机械偶联[3],从而参与坏死心肌组织再生,改善心功能,实现心肌在结构和功能上的整合。然而,一般情况下进入到外周循环血中并迁移到心梗区域的骨髓干细胞数极少,对坏死心肌组织的修复作用极为有限。因此,采用骨髓干细胞动员剂将骨髓干细胞“驱赶”到外周血,增加外周血干细胞数量,则有可能促进心肌组织的修复。大量研究证实急性心梗后经动员的骨髓干细胞参与了梗死灶的组织修复和血管重
建。
常用的动员剂有G-CSF、血管内皮生长因子(VEGF)、基质源性生长因子-l(SDF-l)等。进一步的研究还发现,这些动员剂多有发热、乏力、皮疹、胃肠道反应等不良反应,发生最多也最为严重的是“骨痛”,临床应用受到一定的限制[4]。
目前,国内外还没有应用中药动员骨髓干细胞治疗心肌梗死的研究。本实验将益气温阳活血方对骨髓干细胞的动员作用与目前研究中普遍采用的G-CSF做了对比研究,结果显示：治疗5 d后中、西药组外周血干细胞增长了10倍,与Dulua[5]的研究结果相符合。中药组循环干细胞数量少于西药组,但二者之间无统计学差异,说明中药也具有良好的动员干细胞作用；停药5 d后,中药组外周血干细胞数虽有下降,但仍维持在一个较高水平,与西药组相比差异显著。提示中药动员干细胞作用较持久,这可能是中药组防治左室重构作用优于G-CSF组的原因之一。
动员自体骨髓干细胞迁移入缺血心肌中,骨髓干细胞将发生“环境依赖性分化”,分化成心肌样细胞、血管平滑肌细胞及内皮细胞。相应地,在骨髓干细胞聚集的区域也形成一个特殊环境,原有受损的心肌细胞将发生“环境依赖性变化”,可能不发生或只是轻微玻璃样变性和凋亡的发生,心肌发生瘢痕化程度也较轻,也就是说,骨髓干细胞被动员并迁移入缺血心肌后从2个方面了防止了心肌细胞数量的减少。
本实验从宏观上观察到益气温阳活血方对心肌梗死模型大
鼠左室重构具有良好的干预作用,其具体作用机理还不清楚,可能与下列情况有关。①药物动员的骨髓干细胞在心肌微环境中分化为心肌细胞,直接增加了心肌细胞数量,替代坏死心肌发挥功能；②定向迁移到损伤心肌处的干细胞形成局部微环境,减少了梗死相邻区域心肌细胞的凋亡,间接增加了心肌细胞数量；③可能通过分化为血管组织改善血供,最终抑制了梗死区室壁的变薄、延展,减少了存活心肌的代偿性肥大,抑制了心室重构。从实验结果看,中药组防治左室重构的作用有优于西药组的趋势,提示研究应用中药动员骨髓干细胞防治心肌梗死后心衰具有良好的前景。
【参考文献】
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益气温阳活血利水法治疗慢性肺源性心脏病急性发作疗效观察_袁锋
137 第11卷 第11期 2009 年 11 月 辽宁中医药大学学报 JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM Vol. 11 No. 11 Nov . ，2009 慢性肺源性心脏病（简称肺心病）是指胸廓或肺动脉慢性病变所致肺循环阻力增加，肺动脉高压而引起右心室肥厚、扩大或右心衰的心脏病。常因肺部感染而急性发作。笔者从2007年2月—2009年2月，采用益气温阳、活血利水中药治疗慢性肺源性心脏病急性发作34例，取得良好疗效，现报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 66例慢性肺源性心脏病急性发作 患者均为住院病例，均符合1980年全国第三次肺心病会议制定的诊断标准，将病人随机分成两组，其中治疗组34例，男20例，女14例，平均年龄70.2岁，病程3~24年，平均16年；对照组32例，其中男19例，女13例，平均年龄68.4岁，病程4~20年，平均15年。两组病人年龄、性别、病情程度、临床表现等经 统计学处理， 差异无显著性意义（P >0.05）,具有可比性。 1.2 治疗方法 对照组:常规应用低流量给氧，解除支气管痉挛，抗感染、利尿及强心，扩血管、血管紧张素转换酶抑制剂，纠正水、电解质及酸碱平衡失调等综合治疗。治疗组:在对照组治疗基 础上，加用益气温阳、活血利水中药。方药组成：党参20g，制附子12g,炙黄芪30g，赤芍15g，当归10g，白术15g，茯苓皮15g，大腹皮15g，瓜蒌15g，葶苈子15g,川芎10g。热痰者去制附子加鱼腥草20g，黄芩15g；寒痰者加半夏12g，干姜6g；热喘者去制附子加麻黄10g，杏仁10g，生石膏15g，甘草10g；寒喘症者加苏子15g，肉桂10g。汤剂每日1剂，水煎2次，共取300mL 分2次服用，15天为1个疗程。 1.3 观察指标 治疗1个疗程后观察临床症状咳嗽咳痰改善、肺部炎症消退、水肿减退程度、呼吸困难纠正、心力衰竭纠正及治疗前后血流变学变化情况等。 1.4 统计学处理 计量资料采用均数+标准差（x — ±s ） 表示，并进行t 检验；计数资料用卡方检验。2 结 果 2.1 疗效标准 根据《现代内科治疗学》肺心病急 发综合疗效判断标准[1]。显效：（1）咳痰为白色泡沫黏痰，易咯出，两肺偶闻罗音，肺部炎症大部分吸收；（2）水肿减退程度＞Ⅰ度；（3）心力衰竭改善级别达Ⅱ度；（4）呼吸困难改善：可在病区缓慢活动， 益气温阳 活血利水法治疗慢性肺源性心脏病急性发作疗效观察 袁 锋 （南丹县中医院，广西 南丹 547200） 摘 要：目的：观察益气温阳、活血利水法治疗慢性肺源性心脏病急性发作的疗效。方法：选择临床确诊的慢 性肺源性心脏病急性发作病人66例，随机分为治疗组、对照组；对照组32例采用常规治疗，治疗组34例在常规治疗的基础上加用益气温阳、活血利水中药治疗。结果：治疗组取得较好的疗效，经本组临床观察表明，治疗组的总有效率94.1 %，只采用常规治疗的对照组总有效率为84.3 %，两组相比有显著性差异（P <0.05），同时治疗组各种生命体征临床症状变化优于对照组，血液流变学各种指标也有明显好转。结论：益气温阳、活血利水法对慢性肺源性心脏病急性发作有较好的疗效，临床值得推广应用。 关键词：益气温阳；活血利水；慢性肺源性心脏病急性发作；临床观察 中图分类号：R541.5 文献标识码：B 文章编号：1673-842X (2009) 11- 0137- 02收稿日期：2009-06-15 作者简介：袁锋（1972-），男，广西凤山人，主治医师，研究方向：中西医心脑血管疾病诊治。 Clinical Observation of Yiqiwenyang Huoxue Lishui on Chronic Pulmonary Heart Disease with Acute Onset YUAN Feng （Nandan Hospital of Chinese Medicine, Nandan 547200, Guangxi, China）Abstract： Objective ：Observed Yiqiwenyang, Huoxue lishui, the treatment of chronic pulmonary heart disease the efficacy of acute attack. Methods ：Select clinical diagnosis of Chronic Heart indeed source of acute onset 66 patients, randomized, in contrast to the treatment group; in contrast with conventional law 32 group treatment, 34 in group treatment conventional treatment on the basis for the benefit, Yang temperature live blood Chinese medicine, water treatment. Results ：Yiqiwenyang has a good effect，Clinical observations show that by this treatment group, the total effective rate was 94.1%, conventional therapy group the control group, the total effective rate was 84.3%, compared the two groups there was significant difference (P <0.05), while the treatment group variety of vital signs changes in clinical symptoms significantly better than the control group, blood rheology indicators have improved markedly. Conclusion : Yiqiwenyang, Huoxue lishui of the acute attack of chronic pulmonary heart disease have better efficacy, clinical worth popularizing. Key words： Yiqiwenyang ; Huoxue lishui; exacerbation of chronic pulmonary heart disease ; Clinical observations
大鼠心肌梗死模型图解
大鼠心肌梗死模型制作图解 庄瑜制作 南京市第一医院 南京医科大学附属南京第一医院南京市心血管病医院心胸外科 https://www.360docs.net/doc/c06092164.html,/
制作前准备 1．器械：动物呼吸机，开胸制作心梗模型，维持呼吸至关重要。虽然据说某些牛人可以不用呼吸机，但是我想这是经验积累的结果，开始时必然要用；况且需要看此说明的人应该没有牛到这个程度。当然，如果你经费异常充足，不在乎死亡成千上万的大鼠也可以。 显微器械，最主要的是针持，大鼠胸腔、心脏均很小，常规器械无法进入胸腔缝扎。其他手术器械以眼科器械为主。 2．动物：应选择成年健康大鼠，耐受性较好。最重要的是要充分利用每一只动物，包括死亡的大鼠。许多人都知道制作大鼠模型需要多练习，但是练习不是买一大批大鼠，不停地缝扎，然后不停地扔掉死的大鼠；当然，制作心梗模型死亡一些大鼠是很正常的事情。练习的前提是对大鼠解剖及操作过程的熟悉，如果可能的话，最好先找一份大鼠的解剖图谱，熟悉手术区域的解剖结构；同时研究实验流程，熟悉每一个实验步骤。大鼠死亡后，不要急着扔掉，利用它练习每一个你不熟悉的操作步骤，直到熟练为止。 3．实验者：实验者必须具有一种平和的、耐得住寂寞的心态，制作模型需要时间，尤其是早期，需要耐心、仔细的摸索；必须对每一个步骤进行认真地研究。最熟练的制作者做一只大鼠模型也需要30到40分钟的时间，加上准备及扫尾的时间，制作十只模型就需要一天的时间，如果你废寝忘食多用用功也可能做到15只左右，这样一天下来腰酸背痛是必然的，你能坚持多久？不熟练的话，一只就要两、三个小时；同时还要看着大鼠在你的手中死亡，这是很揪心的事情。因此，实验者必须具备良好的心态，急于求成、难耐寂寞者不适合做此实验。 本人系气管切开插管，缝扎LAD制作模型。亦有人经口插管，液氮冷冻制作模型；不在本人讨论范围之内，哪位有经验的话可以传上来，一起讨论。最后祝各位早日成功！！
心肌梗死动物模型具体方法及步骤
心肌梗死动物模型具体方法及步骤 原型物种人 来源结扎冠状动脉左前降支（LAD）导致心梗 模式动物品系SPF级SD大鼠，健康，3-4W，雌雄各半，体重为180g-200g。 实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。 实验周期72h 建模方法心肌梗死是指心肌的缺血性坏死，是一种急性及严重的心脏状态。心脏作为血液循环动力中心这一功能的实现，需要冠状动脉不断提供的血流供应，当冠状动脉发生病变而狭窄或堵塞，使得冠状动脉的血流急剧减少或中断，便会使相应的心肌出现严重而持久地急性缺血，心肌无法得到足够氧气，最终导致心肌不可逆的缺血性坏死，心脏的收缩和舒张功能降低，机体供血不足，严重者最终导致机体死亡。 1. 大鼠用3%戊巴比妥钠（30mg/kg），腹腔注射麻醉，用小动物剃毛器剃除大鼠胸部及腋下毛发（充分暴露手术区），用碘酒和75％乙醇术区消毒。 2.气管插管：麻醉后，夹趾检测无反应即可进行MI手术。打开外置光源、显微镜开关，打开呼吸机，设置好各参数（呼吸比2：1，潮气量6-8 mL，频率70 次/min），将气管插管沿声门插入气管，取下大鼠接上呼吸机，观察大鼠呼吸状况，胸廓起伏与呼吸机频率一致表示插管成功，即可进行MI手术。 3. 大鼠采用右侧卧位，用眼科剪在左前肢腋下，用显微剪于三、四肋间打开胸腔
充分暴露心脏，显微直镊轻轻夹起少量心包并于左心耳下撕开少许心包，充分暴露左冠状动脉前降支（LAD）或所在区域。 4. 结扎冠状动脉：于显微镜下找到LAD走向或可能所在位置,持针器持取5-0带针缝合线，于左心耳根部下方肺动脉圆锥旁以5-0 无创缝合线穿过左冠状动脉前降支( LAD)，以完全阻断LAD血流。 5.关胸：结扎完成后，5-0缝线完全缝合胸腔开口（保证无缝隙、无错位）关闭胸腔，由内向外逐层缝合各层肌肉和皮肤。 6.术后管理：术后密切关注大鼠状态，有无呼吸异常等。待大鼠自然苏醒后将大鼠从呼吸机上取下并取下气管插管，正常饲养。 应用用于心血管疾病研究 1. 心脏功能评价由Laplace定理可知：S=Pr/2h，P为心室内压，r为心腔内径，h为心壁厚度。在心脏压力负荷过重的情况下，为适应心脏做功增加，室壁厚度增加，左室室壁应力增加，提高心脏收缩功能起到早期代偿的机制；但持续的压力超负荷，可促进心肌肥厚，导致心肌细胞的坏死及凋亡，心脏的收缩和/或舒张功能受到损害，最终发展为慢性心力衰竭甚或心源性猝死。可通过超声或血流动力学检测来评价心功能。超声图像，测量左室舒张末期及收缩末期内径(LVIDd、LVIDs)，同时系统将会自动计算出相应的射血分数（EF%）及左室短轴缩短率（FS%）。 2. TTC染色测量梗死面积 迅速取下心脏，清洁并挤压心脏蘸干血渍，4°C生理盐水冲洗干净后蘸干，于-
王昀运用温阳益气活血法治疗心血管疾病经验
王昀运用温阳益气活血法治疗心血管疾病经 验 作者：李颖,李文娟,丁慧,王昀 【关键词】名医经验；王昀；温阳益气活血；心血管疾病；心悸；胸痹；喘证 王昀主任医师为上海市第十人民医院主任医师、上海中医药大学兼职教授,曾主持过黑龙江省教育厅、上海市卫生局中医药基金项目、国家重点基础研究发展计划项目、国家“十一五”科技支撑计划项目、上海市科学技术委员会科研计划项目等多项课题的研究,并发表学术论文近30篇,临证近30载,学验俱丰。王师临床擅长心血管疾病的诊治,尤其运用温阳益气活血法治疗冠心病、心力衰竭、心肌炎及心律失常等疾病,每获良效。现举隅如下。 1 病因病机探讨 王师认为,心血管疾病多为本虚标实、虚实夹杂之疾病。因心居阳位,主持血脉,血赖气以推动,赖阳以温通。气虚推动无力,则血脉迟涩；阳弱温运不及,则血脉凝滞,血瘀络阻而发病。心阳如日照当空,驱寒化饮,消除凝瘀；心阳不足,阴寒内生,痰瘀互结,阻滞心络,亦会发病。正如《金匮要略》所云：“夫脉当取太过不及,阳微阴弦,即胸痹而
痛,所以然者,责其极虚也。今阳虚知在上焦,所以胸痹、心痛者,以其阴弦故也。”针对其上焦阳气不足,胸阳不振,下焦阴寒内盛,阴乘阳位,胸阳痹阻,脉络不通的病机,当以调和阴阳、扶正驱邪为治则,以温阳益气、活血化瘀为心血管疾病的重要治法之一。 2 治法举要 王师认为,“心病宜温”。阳气为人一身主宰,得之则明,失之则不明；若心阳不振或心阳虚衰,则无以温煦,心脉失养,而见虚证。运用温阳益气活血法,使阳气得以温补及宣通,阳气充盛,畅通运行,脏腑生理功能可正常发挥,通过振奋阳气,增强机体抗病能力,祛散病邪,疏通经络,达到改善症状、治愈疾病之目的。王师临床喜用附子、麻黄、黄芪、生蒲黄等温阳益气活血之品。其中附子辛甘温煦,有峻补元阳、益火消阴之效,善走十二经脉,振奋阳气,行气分又入血分；麻黄散表寒而通阳；黄芪补气益气；川芎行气活血。临床根据患者病情辨证运用,可使胸阳展、阴寒散、心脉通。 3 典型病例 3.1 心悸 案例1：患者,女,58岁,2008年9月10日初诊。患者有病毒
常见大鼠心肌梗塞模型建立方法对比
常见大鼠心肌梗塞模型建立方法对比 心肌梗塞是危害人类健康的主要疾病之一，主要是由于某支冠状动脉持续缺血，其所支配的心肌发生不可逆转坏死而形成的病理过程。90%以上的心肌梗塞是由于冠状动脉粥样硬化病变基础上血栓形成而引起的，较少见于冠状动脉痉挛，少数由栓塞、炎症、畸形等造成管腔狭窄闭塞，使心肌严重而持久缺血达1小时以上即可发生心肌坏死。心肌梗塞的发生常有一些诱因，包括过劳、情绪激动、大出血、休克、脱水、外科手术或严重心律失常等。美国每年约有150万人发生心肌梗塞。而在中国，近年来心肌梗塞发生率呈明显上升趋势，每年新发至少50万名患者，现存至少200万名患者。 为了更好地筛选有效治疗心肌梗塞的药物并研究心肌梗塞的发病机理，实验人员常以大鼠、兔和实验用小型猪来建立标准化的心肌梗塞模型。相对于其他动物，大鼠有许多优势： 1.大鼠的品系纯正，组内差异较少； 2.大鼠饲养成本低，造模前后管理较容易； 3.大鼠的冠脉系统侧支循环比较少，结扎后易出现一个比较固定的缺血区，能很大程度上提高造模的成功率； 4.大鼠心肌梗塞模型手术较小，单人就能操作。 下面我们将就较常见的几种大鼠心梗造模方法来进行一一详细介绍。 a.传统冠状动脉结扎法 冠状动脉结扎是最常选用的大鼠心肌梗塞造模方法，其具体操作步骤为：将大鼠用氯氨酮麻醉后接上小动物呼吸机，经左侧第4肋间剪开皮肤，钝性分离肌肉组织，打开胸腔并剪开心包膜，挤压出心脏，在左心耳与肺动脉圆锥之间穿线，结扎左冠状动脉前降支（于分支的起点处约1～2mm），用Ⅱ导生理记录仪记录心电
图，心电图ST段弓背抬高示心肌梗塞造模成功。然后迅速将心脏放回胸腔，随即缝合胸腔及皮肤。假手术组（阴性对照组）除不结扎冠状动脉外，其余操作与手术动物相同，术后给予庆大霉素局部处理。 b.异丙肾上腺素注射法 除冠状动脉结扎法之外，药物注射法也常用于大鼠的心肌梗塞模型的建立。将大鼠用1%的戊巴比妥钠20～25mg/kg体重给予大鼠腹腔注射麻醉，直接按5mg/kg 体重，皮下注射4%异丙基肾上腺素（ISO），或直接将药物注入腹腔均可造模，每天注射1次，连续注射2-8天，可造成心梗、心衰、冠状动脉痉挛。一般在注射后4-8周发病。 c.反复冷冻法 沿大鼠胸骨左缘前外侧第4肋间进入胸腔打开，充分暴露心脏，用浸过液氮的直径6mm铜棒充分接触左室游离壁，持续时间5s/次，随即闭合胸腔，待自主呼吸恢复正常后，按分组情况再次原位反复共3、5次或8次进行心肌冷冻损伤。 这三种大鼠的心肌梗塞模型的建立方法各有优缺点，通过对这三种方法所建立疾病类型、手术实验技术要求、实验室仪器要求、术后死亡率及造模稳定性等方面的对比，我们对比总结了这三种造模方法(如表1所示)。 表1.三种心肌梗塞造模方法对比 模型类型造模类型实验技能要求仪器要求死亡率造模稳定性 冠状动脉前降支结扎法急性心梗高需要小动物 呼吸机 较高高 冷冻法急性心梗较高需要小动物 呼吸机 较高低 药物注射法慢性心梗低无要求低较高从上表可见，冠状动脉前降支结扎法与冷冻法类似，均会造成大鼠的急性心肌
益气温阳活血利水中药治疗冠心病心力衰竭的效果
龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/c06092164.html, 益气温阳活血利水中药治疗冠心病心力衰竭的效果 作者：孙凤文 来源：《中西医结合心血管病电子杂志》2018年第27期 【摘要】目的分析益气温阳活血利水中药治疗冠心病心力衰竭的效果。方法选取2016年12月～2018年2月我院收治的冠心病心力衰竭患者80例作为研究对象，将其随机分为两组，各40例。对照组采用利尿、强心、降脂、血管紧张素转换酶抑制剂等常规西医治疗，观察组接受常规西医及益气温阳活血利水中药治疗。结果观察组总有效率为95%高于对照组的 77.5%，差异有统计学意义（P 【关键词】益气温阳活血利水中药；冠心病；心力衰竭 【中图分类号】R259 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095.6681.2018.27..02 心力衰竭是各类心脏病发展到终末期常见症状，也是致患者死亡的主要原因。心力衰竭与冠心病发生有一定联系，在祖国中医学方面，冠心病心力衰竭归属“心悸”、“喘证”、“水肿”范畴，最早《内经》中就提出：“心胀者，烦心短气，卧不安”；“心痹者，脉不通，烦则心下鼓，上气而喘”，以此心力衰竭为“心胀”、“心痹”表现，而机体心气虚、血瘀水停、心阳虚是 该病发病机制[1]。因此笔者提出益气温阳活血利水中药治疗，对其结果分析如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取2016年12月～2018年2月我院收治的冠心病心力衰竭患者80例作为研究对象，患者符合世界卫生组织[2]中冠心病诊断标准；患者自愿参加本次研究；将其随机分为两组，各40例。其中，对照组男27例、女13例，年龄45～75岁，平均年龄（52.79±5.68）岁，心功能（NYHA）分级：Ⅲ级者24例，Ⅳ级者16例；观察组男28例、女12例，年龄45～75岁，平均年龄（53.14±6.01）岁，心功能（NYHA）分级：Ⅲ级者25例，Ⅳ级者15例。两组患者年龄、性别、心功能分级等一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05）。 1.2 方法 1.2.1 对照组患者经常规西医治疗，分别为利尿、强心、降脂，选用血管紧张素转换酶抑 制剂、β受体阻滞剂等药物治疗，期间注意卧床休息，饮食限盐。 1.2.2 观察组患者在常规治疗基础上，行益气温阳活血利水中药治疗，基本方：党参、黄 芪各30 g，当归、白术各15 g，泽泻、茯苓各20 g，川芎、陈皮各12 g，桂枝10 g，炙甘草5
中医“活血利水三法”辩治心力衰竭
中医“活血利水三法”辩治心力衰竭 充血性心力衰竭是各种心脏病发展的严重阶段，严重影响患者的生活质量，已至成为当今各 种心脏病死亡的主要原因，因此积极防治是当务之急。 祖国医学的历代医学文献无充血性心力衰竭名称记载，根据其症状及体征应属祖国医学的“心悸”、“喘证”、“水肿”、“痰饮”、“癥积”等范畴。[1]古人认为本病总的病理变化为心肾亏虚，心阳不振，瘀血阻滞，水液蓄留的气、血、水之病变。 西医治疗慢性心衰以“利尿剂、β受体阻断剂、ACEI/ARB”为“黄金三角”，[2]一切治疗也都是 以充分利尿为基础。基于以上，本人在多年的临证工作中，结合临床实践在对本病的辨证论 治上，在中医治疗心衰利水方面积累了一些经验，有了一定体会，并略有寓见。 一、益气温阳，活血利水法 适用于气阳两虚、瘀血水停证。 主证：心悸气促，胸闷胸痛，口唇紫绀，咳嗽吐白粘痰或吐泡沫样痰，或痰中带血丝，畏寒 肢冷，出冷汗，面色晦暗或苍白，大便溏薄。舌体胖大，舌质暗有瘀斑或瘀点，舌苔白，脉 细弱或结代。 处方：人参12克、黄芪30克、制附子12克、干姜6克、桃仁12克、泽兰30克、茯苓皮 30克、桑白皮12克、大腹皮12克、车前子30克、炒葶苈子20克、大枣5枚。 本方为四逆加人参汤合葶苈大枣泻肺汤加味。 根据充血性心力衰竭的临床表现，审其病因病机，气阳亏虚、水瘀内停是本病病理机铺的根 本所在。主要病理特征是气虚阳虚为本，瘀血水饮为标，虚实挟杂之为患。故治疗本病应以 扶正祛邪，标本兼顾，用益气温阳、活血利水以为治。 本方扶正祛邪并施，治标与治本兼顾，益气与温阳共用，化瘀与利水同治，共奏祛邪安正之 目的。气阳两虚、水瘀内停是充血性心力衰竭最常见的证型，本方是作者治疗心衰常应用的 一张有效方剂。 二、益气养阴，活血利水法 适用于气阴两虚，瘀血水停证。 主证：心悸气短，胸痛咯血，烦躁不安，口干舌燥，颧红盗汗，咳嗽痰少不易吐出，倦怠乏力，夜寐欠安，大便干结，舌体瘦小，舌质红有裂纹，或舌有瘀斑、瘀点，舌苔少或无苔， 脉细数或细弱或结、代。 处方：西洋参10克、麦冬30克、五味子9克、生地20g、黄芪30克、沙参15克、桃仁12克、泽兰30克、猪苓30克、桑白皮12克、炒葶苈子30克、大枣5枚。 本方为生脉散合葶苈大枣泻肺汤加味。 在气阴亏虚、水瘀内停的基础上，或阳虚及阴；或过用温阳之品耗伤阴液；或过用利水药物 导致阴津亏虚；或气虚阳虚不能固摄，汗出过多阴液损伤。另外，因纠正心衰反复使用利尿剂；或长期应用利尿剂而未能及时补充液体，加之患者胃肠功能减弱吸收减少；或因呕吐腹 泻水分丧失等，均能导致阴津亏损，以致形成气阴两虚、水瘀内阻的病理。因此治以益气养阴、活血利水之疗法。 三、和胃降逆，开结除痞，活血利水法
适用于Langendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死动物模型的建立
2007年1月 第17卷 第1期 中国比较医学杂志 CHINESE JOURNA L OF COMPARATIVE ME DICINE January,2007 V ol.17 N o.1 研究报告 适用于Langendorff离体心脏灌流大鼠心肌梗死 动物模型的建立 汪进益,范慧敏,刘中民 (同济大学附属东方医院心胸外科,上海 200120) 【摘要】 目的 建立适用于Langendor ff离体心脏灌流大鼠心肌梗死的动物模型,为评价干细胞移植对急性心肌梗死后的心功能变化提供基础。方法 选用S prague-Dawley(S D)大鼠16只,结扎其左冠状动脉前降支中远1Π3处,在结扎前后通过MPA多导生理记录仪连续描记心电图;4周后再次开胸进行Langendor ff离体心脏灌流测定左室心功能和心肌组织病理学检查;另选仅开关胸后存活的10只S D大鼠作为对照组。结果 造模成功率为62150% (10Π16);心电图动态监测在冠脉结扎后出现ST-T抬高的融合波,30min后可见病理性Q波;4周后Langendor ff离体心脏灌流装置系统检测显示左室收缩压峰值(LVSP)、左室内压等容相最大上升及下降速率(+dpΠdtmax,-dpΠdtmax)等指标较对照组降低,左室舒张末压峰值(LVE DP)则反之;病理组织切片可见结扎区域心肌纤维排列紊乱、坏死心肌被纤维组织取代。结论 通过结扎左冠脉前降支的方法,4周后能够形成稳定的适用于Langendor ff离体心脏灌流的心肌梗死动物模型,该模型能应用于干细胞移植对心脏功能影响的研究。 【关键词】 Langendor ff灌流;离体心脏;心肌梗死;大鼠;模型,动物 【中图分类号】Q95-33 【文献标识码】A 【文章编号】167127856(2007)0120022204 Establishment of Langendorff Perfusion of the Isolated H eart after Acute Myocardial I nfarction Model in R ats W ANGJin-yi,FAN Hui-min,LI U Zhong-min (Department of Cardiovascular and Thoracic Surgery of East H ospital A ffiliated T ongji University,Shanghai200120,China)【Abstract】 Objective T o create a standard rat m odel of Langendor ff per fusion of the is olated heart after acute my ocardial in farction(AMI)by silk suture ligation for the research of stem cell.Method 16adult S prague-Dawley(S D)rats in m odel group were established by ligating the middle-distal1Π3segment of left anterior discending artery with8～0sutures to shut the blood supply of my ocardium.E lectrocardiogram(ECG)were per formed both before the ligating and after the ligated by MPA system.The cardiac function were observed by langendor ff per fusion of the is olated heart methods and histogram study with HE stain was carried out4weeks late to see whether there were any tisse necrosis and its extension.10adult S D rats without ligating coronary artery in control group.R esults The rate of establishing m odel success fully was62150%(10Π16).A fter ligation of left anterior discending artery,ECG displayed ST elevated continuously immediately and pathologic Q wave after ligating30min.Pathologic section suggested my ofibers chaotically arranged,necro-my ocardium were superseded by fibrous tissue.Meanwhile,The cardiac function indicated by these parametes of LVSP,LVE DP and±dpΠdtmax descend markedly after ligating4weeks late.Conclusion S ilk surure ligating is a g oog method in creating a standard rat m odel of Langendor ff per fusion of the heart in4weeks after AMI,and the animal m odel w ould be conducive to the basic study on the treatment of stem cell for AMI. 【K ey w ords】 Langendor ff per fusion;Is olated heart;My ocardial in farction;Rats;M odels,animals [基金项目]国家自然科学基金资助项目(30471719)。 [作者简介]汪进益(1974-),男,博士,研究方向:离子通道与外科疾病、顽固性心衰的外科治疗及分子心脏病学。 [通讯作者]刘中民。E-mail:zhongm in-liu@https://www.360docs.net/doc/c06092164.html,
益气温阳活血方对心肌梗死模型大鼠骨髓干细胞的动员作用和左室重构的影响
益气温阳活血方对心肌梗死模型大鼠骨髓干细胞的动员作用和左室重构的影响（作者:___________单位: ___________邮编: ___________） 作者：杨庆有,陆曙,龚少愚,孙慧茹 【摘要】目的对比观察益气温阳活血方和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对心肌梗死模型大鼠骨髓干细胞的动员作用和左室重构的影响。方法结扎冠脉前降支造模,检测模型鼠造模当天、第5天和第10天外周循环血干细胞数,计算治疗第8周大鼠心脏重量指数、室壁变薄率和膨胀指数。结果中药组外周血干细胞数在造模5 d后显著升高(P0.001)；停药5 d后,仍高于西药组(P0.001)。中药组心脏重量指数下降(P0.001),室壁变薄率升高,膨胀指数显著下降(分别为P0.05,P0.001)。结论益气温阳活血方具有良好的动员骨髓干细胞作用,其动员作用较G-CSF持久；在防治心室重构方面有优于G-CSF 的趋势。 【关键词】心肌梗死；骨髓干细胞；左室重构；益气温阳活血方Abstract：Objective To contrast and observe the bone marrow stem mobilization induced by Yiqi Wenyang Huoxuefang and
G-CSF, and the influence to left ventricle reconstruction. Methods Model rat was made by ligate LAD, quantity of circulation stem cells (CSC) at the first, fifth and tenth day was detected. After be treated 8 weeks, the heart index, the expansion index and the thinning ratio were calculated. Results The quantity of CSC of Chinese herbs group increased at the fifth day (P0.001). After withdrawal medicine 5 days, it is higher than medicine group (P0.001). The heart index and the EI decreased remarkable (respectively P0.001 and P0.001), and TR elevated (P0.05). Conclusions Yiqi Wenyang Huoxuefang has a good mobilization effect on bone marrow stem cell, and is better than CSF. It has a better effect in inhibiting the left ventricle reconstruction of heart than CSF. Key words：marrow stem cell；reconstruction of left ventricle；Yiqi Wenyang Huoxuefang 目前人们认识到：心肌细胞的丢失是心肌梗死后心衰发生的主要因素,心肌细胞数量的减少与病理性的心室重构导致心功能恶化是心衰发生发展的基本机制。如何促进梗死区内心肌细胞再生和减少梗死邻近细胞的凋亡、防止心室重构,成为防治心梗后心力衰竭发生及降低心梗后远期死亡率的关键。本实验对比观察了益气温阳活血方和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对骨髓干细胞的动员作用及其干预左室重构的作用。
心肌梗死动物模型研究的最新进展
[文章编号] 100723949(2005)1320120113203 ?文献综述? 心肌梗死动物模型研究的最新进展 孙慧君1, 范江霖2 (1.大连医科大学药理学教研室,辽宁省大连市116027;2.日本筑波大学基础医学系心血管病研究室,日本筑波市30528575) [关键词] 病理学与病理生理学; 心肌梗死动物模型; 综述; 冠状动脉粥样硬化; 不稳定斑块; 家族性高 脂血症[摘 要] 心肌梗死是发达国家的主要致死因素之一,在我国随着生活习惯的改变及胆固醇摄取量的增加而增加。但对心肌梗死的研究及治疗因为没有合适的动物模型一直受到很大的限制。心肌梗死动物模型的研制及开发不但可以研究心肌梗死的发病机制以预防心肌梗死的发生,也将为制定新的治疗方案用于治疗心肌梗死提供理论依据。本文将回顾这一方面的国际进展情况,特别是将我们最近研制成功的自发型心肌梗死家兔模型作一重点介绍。此种家兔血中胆固醇水平明显升高,心电图发现心肌梗死的典型征象。病理组织学分析表明,此种家兔心肌梗死病变为陈旧性心肌梗死病变伴急性梗死病变,与人类心肌梗死相似。导致心肌梗死病变部位的冠状动脉呈严重的粥样硬化,狭窄程度达90%以上,且有些斑块为不稳定性斑块。这些结果表明此种家兔可以作为人类心肌梗死的一种合适动物模型。[中图分类号] R363[文献标识码] A [收稿日期] 2003207218 [修回日期] 2004212216[作者简介] 孙慧君,医学博士,副教授,主要研究方向为心血管药理学,现工作于大连医科大学药理学教研室,E 2mail 为sunhuijun @https://www.360docs.net/doc/c06092164.html, 。范江霖,医学博士,教授,博士研究生导师,主要研究方向为心血管病理学,现工作于日本筑波大学基础医学系,E 2mail 为j 2lfan @md.tsukuba.ac.jp. 心肌梗死是发达国家的主要致死因素之一,在我国也随着生活习惯的改变及胆固醇摄取量的增加而不断增加。研究心肌梗死发生的机制,不但可以预防心肌梗死的发生,也将为制定新的治疗方案用于治疗心肌梗死提供理论依据。但心肌梗死的研究及治疗由于没有合适的动物模型一直受到很大限制。因此就迫切地需要研制出一种与人类心肌梗死非常相似的动物模型。至目前为止,已有许多动物模型被报道,本文将回顾这一方面的研究进展情况,特别是将我们最近研制成功的自发型心肌梗死家兔模型作一重点介绍。 1 已报道的心肌梗死动物模型 已经报道的心肌梗死动物模型可以根据动物种类及制造方法不同分为以下几种:首先是小鼠心肌梗死模型。小鼠体型较小,容易造成转基因或基因敲除,目前已有报道载脂蛋白E 基因敲除小鼠在同时敲除内皮素1受体,或NO 分解酶及清道夫受体时会出现类似心肌梗死病变123。此种小鼠的特点是具有严重的高脂血症及动脉粥样硬化。但小鼠的脂代谢类型与人类不同,另外,小鼠体形较小,使得一些外科手术及治疗措施的研究无法进行及运用,也是这种模型的缺点。其次是用大鼠、家兔、羊、犬及猪等中大型动物建立的心肌梗死动物模型。其主要方法是人工阻塞左冠状动脉,使动物造成急性或慢性心肌缺血及梗死;包括冠状动脉结扎或夹闭术4211及冠状动脉阻塞术12215。此种模型实验周期短,可以观察梗死后再灌注对心肌细胞的损伤。但此种动物模 型手术操作过程复杂,创伤大,心肌周围组织的切开也影响心肌梗死后的重建。另外,此种动物模型并无血脂升高及冠状动脉粥样硬化病变,因此,与人类由冠状动脉粥样硬化引起的心肌梗死差别较大,临床相关性较小。猪、羊及犬体形较大,饲养条件苛刻也是用这些大动物研制心肌梗死模型的缺点。用结扎羊无名动脉及其对角分支方法建立起来的心肌梗死模型,与上述结扎冠状动脉方法建立起来的模型具有相同的特点16。也有报道用血管造影术在家兔旋动脉处放置导致血栓形成的环的方法,以建立起胸腔闭合型心肌梗死动物模型17,避免了手术创伤及心肌周围组织切开对梗死后重建的影响。也有人用剖开犬的左冠状动脉放置血管夹的方法,通过产生人工狭窄建立心肌梗死模型,此种模型的优点是可以精确控制狭窄的程度18。用化学药物诱导方法建立大鼠心肌梗死模型的方法也曾有报道,与冠状动脉阻塞方法类似19。Nakamura 20曾报道过用猪(G ottingen male miniature swine )建立的心肌梗死模型与人类由冠状动脉痉 挛引起的变异型心肌梗死极其相似,方法是对病灶部位进行内皮细胞剥脱,中度高脂血症及X 线辐射。此种模型心肌梗死的发生机制主要是由痉挛部位中膜平滑肌细胞在组胺及5羟色胺作用下产生的过度收缩引起的,内膜依赖性的舒张障碍作用较小。综上所述,虽然有很多上述心肌梗死模型报道,但据我们所知,至目前为止,与人类心肌梗死模型极其相似的自发性心肌梗死模型特别是由冠状动脉粥样硬化引起的心肌梗死模型还未曾建立起来,本文将重点介绍由我们实验室新近研制成功的自发性心肌梗死家兔模型。 2 自发性心肌梗死动物模型的创建 日本神户大学Watanabe 等21人在1980年首次报道了遗传性高脂血症(Watanabe 2heritable hyperlipidemic rabbit , WHHL )家兔。此种家兔具有先天性LDL 受体缺损的特点 3 11CN 4321262/R 中国动脉硬化杂志2005年第13卷第1期
益气温阳活血利水中药治疗冠心病心力衰竭的效果
益气温阳活血利水中药治疗冠心病心力衰竭的效果 目的分析益气温阳活血利水中药治疗冠心病心力衰竭的效果。方法选取2016年12月～2018年2月我院收治的冠心病心力衰竭患者80例作为研究对象，将其随机分为两组，各40例。对照组采用利尿、强心、降脂、血管紧张素转换酶抑制剂等常规西医治疗，观察组接受常规西医及益气温阳活血利水中药治疗。结果观察组总有效率为95%高于对照组的77.5%，差异有统计学意义（P＜0.05）；治疗后6 min步行距离：观察组高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论益气温阳活血利水中药治疗冠心病心力衰竭，具显著效果。 标签：益气温阳活血利水中药；冠心病；心力衰竭 心力衰竭是各类心脏病发展到终末期常见症状，也是致患者死亡的主要原因。心力衰竭与冠心病发生有一定联系，在祖国中医学方面，冠心病心力衰竭归属“心悸”、“喘证”、“水肿”范畴，最早《内经》中就提出：“心胀者，烦心短气，卧不安”；“心痹者，脉不通，烦则心下鼓，上气而喘”，以此心力衰竭为“心胀”、“心痹”表现，而机体心气虚、血瘀水停、心阳虚是该病发病机制[1]。因此笔者提出益气温阳活血利水中药治疗，对其结果分析如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取2016年12月～2018年2月我院收治的冠心病心力衰竭患者80例作为研究对象，患者符合世界卫生组织[2]中冠心病诊断标准；患者自愿参加本次研究；将其随机分为两组，各40例。其中，对照组男27例、女13例，年龄45～75岁，平均年龄（52.79±5.68）岁，心功能（NYHA）分级：Ⅲ级者24例，Ⅳ级者16例；观察组男28例、女12例，年龄45～75岁，平均年龄（53.14±6.01）岁，心功能（NYHA）分级：Ⅲ级者25例，Ⅳ级者15例。两组患者年龄、性别、心功能分级等一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05）。 1.2 方法 1.2.1 对照组患者经常规西医治疗，分别为利尿、强心、降脂，选用血管紧张素转换酶抑制剂、β受体阻滞剂等药物治疗，期间注意卧床休息，饮食限盐。 1.2.2 观察组患者在常规治疗基础上，行益气温阳活血利水中药治疗，基本方：党参、黄芪各30 g，当归、白术各15 g，泽泻、茯苓各20 g，川芎、陈皮各12 g，桂枝10 g，炙甘草5 g。辨证论治：心脾两虚者加龙眼、远志、茯神、酸枣仁；血虚者加熟地、阿胶、白芍。取上述药方为一剂，每日用水煎煮，取药汁300 mL，分早晚两次服用，连续用药2周。 1.3 观察指标
大鼠心肌梗死模型研究进展
大鼠心肌梗死模型研究进展 发表时间：2016-05-24T11:39:08.117Z 来源：《健康世界》2015年12期作者：徐陶锐1 李保2（通讯作者）王家璞1 闫文婷1 [导读] 山西医科大学山西省心血管病医院心肌梗死是现临床的多发病，是由于冠状动脉发生了闭塞，导致心肌缺血从而引起心肌细胞发生死亡。 1山西医科大学山西太原 030001 2山西省心血管病医院山西太原 030001心肌梗死是现临床的多发病，是由于冠状动脉发生了闭塞，导致心肌缺血从而引起心肌细胞发生死亡，已经成为中老年人群死亡的主要病因之一。心肌梗死动物模型是研究梗死性心脏病病理机制和相关治疗药物疗效评价的一个重要手段。目前心肌梗死的临床治疗有很多种方法，譬如药物治疗、细胞技术等。这些治疗方法在临床使用之前都要进行大量的动物实验，只有在动物实验出现了治疗的效果才能进而在临床应用。其中大鼠心肌梗死模型是研究心肌梗死病理生理变化的重要模型，它能够客观的反应治疗效果以及在心肌梗死过程中心电活动、室壁运动的变化，对临床进一步揭示心肌梗死的发病机理及对心肌缺血损伤防治具有重要的理论意义和实用价值。本文章就大鼠心肌梗死模型的建立进行一个简单的叙述。 1.结扎法 1.1麻醉方法的选择 大鼠的麻醉方法常见的有腹腔注射、静脉注射、吸入麻醉等方法，在实验中所用的麻醉药物常见的有水合氯醛、戊巴比妥钠、乙醚等。其中戊巴比妥钠或水合氯醛通过腹腔注射给药可以达到理想的麻醉效果【1】，它的优点是给药途径便利、麻醉起效快、麻醉深度适中，但在麻醉时要对麻醉剂量的选择要非常谨慎，应当按公斤体重来计算，从低剂量开始给药，譬如10%的水合氯醛按照0.3ml/100g为起始量，5~10min起效。麻醉太浅，大鼠容易清醒发生挣扎，不利于手术操作；麻醉太深，则术后大鼠不易清醒，呼吸道分泌物过多堵塞气道，会导致大鼠难以恢复正常的自主呼吸【2】，拔呼吸机插管较困难，容易导致实验大鼠的肺水肿、感染、呼吸肌麻痹等，会大大增加大鼠围手术期死亡率。 1.2建立气道的方法 有研究表明，在建立AMI模型过程中可以不进行气管插管，但要在短时间内迅速开胸并进行结扎，手术难度较大。这个方法在实际操作过程中有许多很难克服的技术弊端：操作难度大、围术期存活率低。现如今AMI模型制作时多采用小动物呼吸机维持呼吸，比较常用的大鼠气管插管方法有经口气管插管和气管切开插管。经口气管插管所造成的创伤较小，术后对大鼠的呼吸功能影响也比较小，但需要操作者有较高的操作技术。若一次插管不成功，操作者进行反复尝试，或者在插管时所用力度过大均可造成喉头黏膜急性水肿，最终导致窒息死亡。因此新手在使用这个方法时会增加大鼠死亡率。目前针对此法已有一些改良方法，增加了插管的成功率【3】。气管切开插管和经口气管插管相比较有以下优点，手术视野较好，非常直观，具有较高的成功率，但是在气管切开时非常容易损伤到血管，导致血管出血过多，这样可以造成术后呼吸道分泌物增多，气管容易塌陷，如果清理不及时将会导致大鼠发生窒息死亡。上述两种方法各有优劣，只要熟练操作死亡率并无明显差异。 1.3开胸体位及方法 在造模过程中大鼠的体位多为背位固定，于第4~5肋间开胸，挤压右侧胸壁将心脏挤出或用小匙将心脏舀出【4】。还有一些人在操作时将肋骨剪断，用手挤压胸腔或腹腔将心脏从胸腔内挤出，结扎冠脉后再将心脏放回，同时抽出胸腔内的气体，这种方法在操作过程中非常容易导致心脏和大血管在受到外力的牵拉下而发生变形，可增加恶性心律失常的发生率，同时对胸腔内空气的排空以及剪断的肋骨容易对肺部造成进一步的损伤，增加术后大鼠的死亡率【5】。近年来，有研究表明有部分操作者在造模过程中让大鼠保持右侧卧位固定，用眼科剪沿肋骨方向作斜行切口，并不剪断肋骨及肌肉组织，所造成的创伤较轻，在使用开胸器暴露心脏的过程变的非常容易，术后可保持大鼠胸部的正常结构，不影响呼吸功能，有利于其存活【4，6，7】。 1.4冠脉结扎部位 观察大鼠心脏解剖图可知，左冠状动脉前降支位于心肌组织中，肉眼观察不易分辨。在暴露心脏后，肉眼可观察到左冠状静脉主干位于心脏表面走形，它与左冠状动脉前降支相互伴行，位于于左心耳和肺动脉圆锥之间，可作为定位标志。结扎冠脉位置的高低对心梗模型的存活率有着至关重要的作用。结扎位置较低时，可能会导致模型建立不成功，心梗面积小，对实验的稳定性有一定的影响；结扎位置较高时，模型成功率高，但动物死亡率也明显提高【8】。 1.5术后护理 术后的护理是非常重要的，对大鼠的呼吸和温度进行有效的管理可以减低手术的死亡率。造模后，放回鼠笼单独饲养，保温灯照射，待大鼠完全清醒后转至普通鼠笼中，置于空调房内正常饲养。术后连续肌注青霉素钠5d（40万U/d）防止切口感染。 2.药物法 药物法制作心梗模型，常用是异丙基肾上腺素和垂体后叶素，它们可导致血管发生强烈的收缩，导致冠状动脉痉挛，从而形成血栓导致心肌梗死。这个造模方法操作简单，但是对冠状动脉选择性较差，容易引起心肌弥漫性损伤，不能对梗死区域进行有效的固定，所以不能进行一些定量的研究。 3.血栓法 通过血栓法来制作心肌梗死模型的操作方法有很多，譬如电刺激法、机械损伤法等。其中电刺激法是这些方法中使用较多的一种。在操作过程中，术者将电极放置于左冠状动脉前降支的开口处，增大电流强度，通过刺激冠脉血管外膜导致损伤形成，进而形成血栓发生堵塞，最终导致心肌梗死形成。电刺激法能够准确定位所需要堵塞的血管，造成的梗死区域较固定，同时对大鼠的损伤较小，比较真实的模拟了心肌梗死的发生过程。 4.高脂饮食法