什么叫Rh阳性、Rh阴性,Rh血型如何鉴定

什么叫Rh阳性性与Rh阴性?Rh血型如何鉴定?

1940年有人用恒河猴血的红细胞免疫豚鼠和家兔，所获得免疫血清，这种血清不但能够凝集叵河猴的红细胞，而且能凝集一分人的红细胞，因此，这些人的红细胞与恒河猴红细胞上有一共同的抗原，并从猴子Rhesus的字头，而称为Rh抗原。凡红细胞上有此抗原的，称Rh性。无此抗原的称Rh阴性，常用大写CDE代替替Rh阳性，小写cde代表Rh阴性，因为D抗原是引起Rh血型系统输血反应的主要抗原，临床上常以含D抗原的血型作为Rh阳性，无D抗原者作为Rh阴性。

Rh是一个独立血型系统。抗原是由C、D、E、C、d、e、6个因子组成(其中的d因子尚未发现，仅为假设因子)，由于因子组合：不同而显出不同的血型。鉴定Rh血型时，分别用抗C、抗c、抗D、抗d、抗E及抗e血清进行试验，然后再得出被检查的Rh血型的表现式。

Rh有完全抗体和不完全抗体之分，所以Rh血型系统不同于ABO血型系统鉴定。除了用盐水凝集法外，还应用胶体介质法，木瓜酶，菠萝酶等方法检查。

白继文，王长印编,检验医学问答=Question and Answer of laboratory Technological Medicine,中华医学会检验学会吉林省辽源市分会,1983.04,第359页

血型鉴定

ABO、Rh及MNSs血型鉴定用抗体研究进展来源：本站原创作者：陈琦1张嘉敏2李厚达1朱自严2（1．扬州大学医学院生理教研室，江苏扬州 225001； 2．上…发布时间：2009-12-2 红细胞血型系统非常复杂，ABO血型之后，目前已发现了29个血型系统，700余种血型抗原。血型抗原的正确鉴别在保证输血安全、调查人种分布、建立稀有血型库及许多疾病的诊断、分型甚至治疗方面都有极其重要的作用［1］。抗原的鉴别有赖于相应抗体的获得。血型鉴定用抗体的制备也经历了多克隆、单克隆及基因工程抗体3个发展阶段。现将ABO、Rh及MNSs血型鉴定用抗体研究进展综述如下。 1 ABO血型鉴定用抗体 1.1ABO抗血清人源抗血清即多克隆抗体是人体内天然存在的或免疫反应检测到的抗体，ABO血型抗血清属于天然抗体，于出生后2—8个月开始产生，8—10岁达高峰。将通过全血制备的抗血清用于ABO血型的鉴定，方法简单、血凝明显、特异性强，长期以来一直是国内外血型检测机构及医院使用的ABO定型试剂。但它们存在的突出问题是：需耗费大量血液、不能做到标准化、难以规模化生产［2］。基于以上原因，科学家们一直希望找到可代替人抗血清用于ABO血型鉴定的理想试剂。杂交瘤技术问世，使这一愿望成为现实。 1.2ABO mAbs 1975年杂交瘤技术发明以后，Voak(1980)和Sachs (1981)等先后建立了能分泌抗 A和抗 B mAbs的杂交瘤细胞株，并将其成功用于ABO系统的血型鉴定。此后，其发展十分迅速，各国均建成了多株能稳定分泌抗 A、抗 B mAbs的瘤株细胞，为保证不同来源的ABO血型mAbs定型试剂质量的稳定性、结果判断的统一性及使用有效性，1987年，国际输血协会(ISBT)在第一届“红细胞及相关抗原单克隆抗体国际专题会议”中，对ABO 血型mAbs制品的生产、使用提出了明确的质量标准和规范［3］。2000年，我国也出台了相应的政策法规，加强了质量管理与监督。目前高效价、质量稳定的ABO血型mAbs定型试剂，已完全取代抗血清，广泛用于ABO血型的临床鉴定［4］。值得注意的是：用mAbs 进行ABO血型鉴定时会有漏检、假阳性、假阴性现象的发生，对此，国内外文献均有报道。1996年，Garatty等［5］报道了1例使用mAbs定型试剂，误将含获得性B抗原的A型患者错定为AB型，导致患者因错输AB型血死亡的病例；国内孙爱农等［6］也有类似发现。究其原因，主要是因为不同个体的红细胞A、B抗原，尤其是亚型决定簇的结构和数量存在不均一性，1个mAb只识别1个抗原结合位点，因此用单一mAb制品进行复杂血型鉴定时，可能导致误判。因此专家建议：可将抗原结合部位不同的mAbs混合组成检测试剂盒，进行复杂血型的鉴定，以确保输血治疗的安全性。 1.3基因工程抗体近年来，基因工程抗体的制备成为抗体工程的重要发展方向。Siegel 等［7］用噬菌体抗体库技术获得了针对ABO血型抗原的Fab和ScFv抗体，国内王长军等［8］也制备出A抗原的ScFv抗体。与mAbs相比，这些基因工程抗 A、抗 B在反应亲合力和效价等方面均未达到临床使用的要求，因此，有关这方面的研究进展不大。 2 Rh血型鉴定用抗体在Rh血型系统中，常见的有D、C、E、c、e5种抗原，其中D抗原性最强，因此，一般制备的Rh抗体以抗 D为主。 2.1Rh抗血清与ABO血型系统不同，Rh阴性个体血清中没有天然的Rh抗体。只有在接受了Rh阳性血后，Rh抗体才能产生。传统的Rh抗体以Rh阴性志愿者为主要来源，即

ABO 血型鉴定操作规程

1.0 原理 ABO 血型鉴定操作规程 2.0 3.0 4.0 5.0 5.1 5.2 6.0 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 7.0 7.1 根据红细胞上和血清（或血浆）中有无 A 抗原和（或）B 抗原及其抗体，将血型分为 A 型、 B 型、AB 型及 O 型。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型鉴定 ABO 血型。正定型正定是指用已知抗-A、抗-B 血清来检测受检红细胞上有无相应的 A 抗原和（或） B 抗原；反定型反定是指用已知 A1型、B 型红细胞来检测受检血清（或血浆）中有无相应的抗-A 和（或）抗-B。原始样品要求 5 mL 静脉全血。样品容器和添加剂真空试管，EDTA.K2抗凝/普通试管，不抗凝。检测环境要求温度：18℃～27℃，湿度：30%～70%。所需材料和设备设备普通离心机、免疫血液学离心机、显微镜、恒温水箱、定时器。材料抗-A、抗-B 血清、ABO 标准抗原红细胞试剂、移液器、加样吸头、生理盐水（NS）、干净空试管。检测操作过程将受检标本以 1000g 离心 5min，使标本血浆/血清与红细胞分离，吸取红细胞，用 NS 洗涤三次后，配成 3%～5%红细胞悬液。取 6 支小试管，分别标记“-A”、“-B”、“自身”、“Ac”、“Bc”、“Oc”。在“-A”、“-B”管中分别加入抗-A 和抗-B 血清各 50 L ，其余管加入受检血浆/血清各100 L 。在“-A”、“-B”、“自身”管中加入受检者 3%～5%红细胞悬液各 50 L ，摇匀。在“Ac”、“Bc”、“Oc”管中分别加入 A1、B、O 红细胞试剂各 50 L ，摇匀。 1000g 离心 15sec，轻轻悬浮红细胞，观察结果并记录。根据实验需要，除室温下观察结果外，另可增加在 4℃、37℃下观察结果。结果判断凝集强度判断标准见表 1。表1 凝集强度判断标准表

血型鉴定

ABO血型试验(正反定型) 一原理利用红细胞凝集试验，通过正反定型准确鉴定ABO血型。二试剂和材料 1．抗-A（B型血），抗-B（A型血）及抗-A+B（O型血）分型血清。2．5%A、B及O型试剂红细胞盐水悬液。 3．受检者血清。 4．受检者5%红细胞盐水悬液。三操作（玻片法） 1．取清洁玻片一张，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B和抗-A+B，分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A+B分型血清1滴于方格内，再加受检者2%红细胞悬液1滴，混合。 2．另取清洁玻片一张，用蜡笔划成方格，标明A细胞、B细胞和O细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。 3．将玻片轻轻转动，使血清与细胞充分混匀，连续约15min，以肉眼观察有无凝集反应。也可用低倍镜观察结果。四结果判定：见表1 表1 ABO血型正反定型结果五注意事项 1．试管、滴管和玻片必需清洁干燥，防止溶血。 2．操作中应先加血清后加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。 3．为防止冷凝集现象的干扰，一般在室温内进行试验。

4．标准抗血清必须符合标准，不要长期放在室温，以免污染和孳长细菌，等渗生理盐水必须等渗、新鲜、无微生物孳生。 5．观察结果要仔细，微弱凝集、或肉眼观察未凝集的标本，要用显微镜观察。注意特异性凝集与继发性血液凝固、串钱状形成和异物的区别。六血型鉴定中常见的假阳性反应 1．红细胞串钱形成：红细胞相互重叠，连接成串，象一串重叠的钱币，称为串钱形成，又称假凝集。可见于血浆蛋白紊乱、血沉加快的各种病例或实验中温度过高，作用时间过长，致水分蒸发，血清浓缩。可在观察结果前，再加等渗盐水1滴，彻底混匀，串钱状红细胞因血液稀释而散开。也可用高倍镜仔细观察凝集块的形态和用洗涤后和红细胞配制悬液。 2．寒冷凝集：在较低温度出现的凝集称为寒冷凝集。多数正常人的血清在0~2oC 时能凝集本人的红细胞，又称自家凝集。这种凝集是可逆的，在0-2oC时作用最强，20oC时可消失。但在支原体肺炎、自免溶贫、肝硬化、系统性红斑狼疮等患者血清中，可以出现高效价的病理性自身冷凝集抗体，能与本人及其它各型人的红细胞发生凝集。其最适反应温度是低温，一般在25-30oC凝集作用即减弱。克服方法：被检红细胞在配制悬液前，先用37oC等渗生理盐水洗涤，必要时试验操作可在37oC条件下进行，或在37oC水浴中反复观察几次，报告时要注明有寒冷凝集现象。七血型鉴定中常见的假阴性反应 1.标准血清效价太低亲和力不强: 抗血清保存方法不当或贮藏时间过长而致效价减弱是最常见原因。 2.被检红细胞敏感度过低: 如新生儿红细胞抗原形成不足,老年人红细胞敏感性下降,或红细胞标本贮藏时间过久(红细胞敏感性在血块中下降相对较快),易将A亚型错定为O型。 3.红细胞悬液过浓或过淡: 抗原抗体比例适当时反应最明显。如红细胞悬液液过浓时,标准血清中的抗体全部被吸收,呈后带现象,以致凝集不明显或不凝集。红细胞浓度太淡,抗体浓度相对增高,呈前带现象而不易凝集,或凝集很弱,未被发现。克服方法: 按规定配制红细胞悬液,悬液太浓时可多加1滴血清,转动玻片,增加红细胞接触的机会.微弱凝集必须用显微镜观察。 4.溶血反应: 红细胞抗原与相对应的免疫抗体相遇,在补体存在时就可发生溶血。溶血反应与凝集反应在血型鉴定上意义相同,都是抗原抗体反应。克服方法: 玻片法看结果时,片底最好衬以白纸,溶血时液滴边缘呈透明红色,试验前后两次镜下观察,可发现红细胞减少或消失。作血型发现溶血,要换好的等渗盐水和洗涤后红细胞重新配制悬液来作血型鉴定。

血型鉴定操作规程

血型鉴定操作规程一．玻片法（仅适用于正定型） 1 .原理： 1.1根据红细胞上有无A抗原或（和）B抗原，可以将红细胞血型分为A型、B型、AB型和O型。根据抗-A和抗-B抗体与对应红细胞的凝集反应，可以鉴定ABO血型。 1.2根据抗-D抗体与对应红细胞抗原的凝集反应，区分RhD阳性和RhD阳性。 2 .标本采集：用EDTA抗凝管采集被检对象静脉血，充分混匀，确保抗凝充分。紧急情况下可以使用抗凝动脉血。婴幼儿及其他不便于真空管采血的患者，如不进行反定型试验可采集末梢血。 3. 标本运送与储存：采集好的标本与申请单同期尽快（一般2小时内）送往输血科。标本采集后和检测后，应置于2~8℃环境下。检测后的标本应至少保存7天，以备结果查对。 4 .仪器与材料：抗-A/B血型定型试剂（单克隆抗体）、RhD（IgM）血型定型试剂（单克隆抗体）、载玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。 5. 操作步骤： 5.1用标记笔在载玻片上划分成A、B、D三个区域； 5.2在标记好的玻片上分别加1滴抗-A、抗-B和抗-D血型定型试

剂； 5.3再各加1滴10%患者红细胞悬液（该红细胞悬液可以是盐水悬液，也可以是悬浮于自身血浆或血清中的红细胞）； 5.4用干净的搅拌棒将红细胞悬液和试剂充分混合，并把混合物均匀涂开，使其覆盖大约直径20mm的面积； 5.5缓慢连倾斜摇动玻片1-2min，观察结果并记录。 6. 结果判定： 6.1凝集或发生溶血为阳性结果； 6.2细胞混匀2min后仍呈悬液状态的为阴性结果； 6.3对结果有怀疑，应用试管法或微柱凝胶法重复实验。二、纸板法 1 .原理： 1.1根据红细胞上有无A抗原或（和）B抗原，可以将红细胞血型分为A型、B型、AB型和O型。根据抗-A和抗-B抗体与对应红细胞的凝集反应，可以鉴定ABO血型正定型。A1细胞上含有A和A1抗原，B细胞上含有B抗原。用已知的A、B细胞检测被检者血清中有无相应的抗-A或抗-B抗体，即反定型。综合正反定型结果确定受检标本ABO血型。 1.2根据抗-D抗体与对应红细胞抗原的凝集反应，区分RhD阳性和RhD阳性。 2 .标本采集：用EDTA抗凝管采集被检对象静脉血，充分混匀，确保抗凝充分。

微柱凝胶法血型鉴定操作规程精选版

微柱凝胶法血型鉴定操作规程 Document serial number【KKGB-LBS98YT-BS8CB-BSUT-BST108】

微柱凝胶法 1标本：EDTA-K2 抗凝血2.0ml 2原理： 2.1人红细胞抗原与相应抗体发生特异性免疫反应（其本质为血凝反应）； 2.2检测系统是在微柱中（载体）装有的介质凝胶； 2.3凝胶间隙具有分子筛作用。凝集的红细胞（结合的）被留在微柱上面成带状或凝集颗粒散布凝胶中间。未凝集的红细胞（即未结合、游离的）通过离心后沉入微柱的底部； 2.4微柱凝胶中所含的特异性单克隆抗A、抗B试剂检测红细胞上相应的血型抗原，从而鉴定红细胞的血型。 3操作： 3.1在A1孔悬空加入50ul标准A1红细胞，在B孔悬空加入50ul标准B红细胞，再在两孔中各加入50ul样品血浆。 3.2在A、B、D、C、E、Ctrl六个孔内分别悬空加入5%病人红细胞悬液10ul 3.3将卡放到戴安娜专用离心机中离心9分钟 3.4离心结束后在白色背景前观察结果 4结果判断： A孔阳性B孔阴性为A型;A孔阴性B孔阳性为B型;

5.注意事项 5.1严格按操作规程操作，认真核对标本并作好标记。 5.2应先加红细胞悬液，然后再加血浆。 5.3为了防止冷凝集现象的干扰，一般应在室温下进行试验。 5.4严格控制离心速度和时间，防止假阳性或假阴性结果。 5.5未用的微柱凝胶免疫检测卡应入室温保存，用完后放4℃冰箱保存1周。 5.6判断结果后应仔细核对，记录，避免笔误。 6.方法评价卡式法定型使用安全，操作简单，结果稳定可靠，灵敏度高，重复性好，但费用昂贵，需要特殊的仪器设备。

1.ABO血型鉴定操作规程复习课程

ABO血型鉴定操作规程 1.目的:定性鉴定患者ABO血型 2.适用范围:适用于献血员筛查、临床检测和血液制品检测 3.方法及原理: 根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。A 型红细胞膜上含有A抗原，B型红细胞膜上含有B抗原，AB型红细胞膜上含有A、B抗原，抗A、抗B试剂是分别针对A抗原和B抗原的特异性抗体。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。可用已知的抗A、抗B试剂血清鉴定红细胞上有无对应的A抗原/B抗原（正定型），采用已知A型红细胞和B行红细胞来测定血清中有无相应的抗-A或/ 和抗-B抗体（反定型），必须从正定型和反定型两项试验来确定样本的ABO血型。 4.试剂与设备 4.1试剂抗-A、抗-B定型试剂（单克隆抗体）；0.9%生理盐水；2%—5%A、B和O型试剂红细胞悬液 4.2试剂组成试剂1：抗A分型试剂（蓝色），效价1：128，2℃-8℃避光保存，室温放置不宜过久。试剂2：抗B分型试剂（黄色），效价1：128，2℃-8℃避光保存，室温放置不宜过久。试剂3：5％A、B及O型红细胞盐水悬液，自制。配制方法：分别采取已知A、 B、O三种血型的红细胞，经盐水洗涤3次，以压积红细胞配成不同浓度的红细胞悬液。红细胞悬液的配制悬液浓度（％）压积红细胞（滴）盐水（滴） 2 5 10 20 1 1 1 1 2ml（40） 0.8ml（16） 0.4ml（8） 0.2ml（4）为了防止红细胞悬液敏感性不一致，可随机采取3个或以上的健康成人血液，按A、B、O型分别混合后，按上法制备。 4.3设备透明光洁试管、显微镜、血清学专用水平离心机 5.样本采集与处理: 5.1标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血和血清。 5.2标本要求：

ABO血型鉴定操作规程-9页文档资料

ABO血型鉴定操作规程 111.01.0.0.0 原理原理原理原理根据红细胞上和血清（或血浆）中有无A 抗原和（或）B 抗原及其抗体，将血型分为 A 型、 B 型、AB 型及 O 型。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型鉴定 ABO 血型。正定型正定型正定型是指用已知抗正定型 -A、抗-B血清来检测受检红细胞上有无相应的A 抗原和（或） B 抗原；反定型反定型是指用已知反定型反定型 A1 型、B 型红细胞来检测受检血清（或血浆）中有无相应的抗-A和（或）抗-B。 222.02.0.0.0 原始样品要求原始样品要求原始样品要求原始样品要求 5 mL静脉全血。 333.03.0.0.0 样品容器和添加剂样品容器和添加剂样品容器和添加剂样品容器和添加剂真空试管，EDTA.K2 抗凝/普通试管，不抗凝。 444.04.0.0.0 检测环境要求检测环境要求检测环境要求检测环境要求温度：18℃～27℃，湿度：30%～70%。 555.05.0.0.0 所需材料和设备所需材料和设备所需材料和设备所需材料和设备

5.1 设备普通离心机、免疫血液学离心机、显微镜、恒温水箱、定时器。 5.2 材料抗-A、抗-B 血清、ABO 标准抗原红细胞试剂、移液器、加样吸头、生理盐水（NS）、干净空试管。 666.06.0.0.0 检测操作过程检测操作过程检测操作过程检测操作过程 6.1 将受检标本以 1000g离心5min，使标本血浆/血清与红细胞分离，吸取红细胞，用 NS 洗涤三次后，配成 3%～5%红细胞悬液。 6.2 取 6 支小试管，分别标记“-A”、“-B”、“自身”、“Ac”、“Bc”、“Oc”。 6.3 在“-A”、“-B”管中分别加入抗-A 和抗-B 血清各 50μL ，其余管加入受检血浆/血清各 100μL 。 6.4 在“-A”、“-B”、“自身”管中加入受检者 3%～5%红细胞悬液各 50μL ，摇匀。 6.5 在“Ac”、“Bc”、“Oc”管中分别加入A1、B、O红细胞试剂各 50μL ，摇匀。 6.6 1000g离心15sec，轻轻悬浮红细胞，观察结果并记录。 6.7 根据实验需要，除室温下观察结果外，另可增加在4℃、37℃下观察结果。

RH血型简介(新)

Rh血型简介 1、什么是Rh血型？人类红细胞血型由多达二十多种的血型系统组成，ABO和Rh血型是与人类输血关系最为密切的两个血型系统。当一个人的红细胞上存在一种D抗原时，则称为Rh阳性，用Rh （+）表示;当缺乏D抗原时为Rh阴性，用Rh（-）表示。这样就使已发现的红细胞A、B、O、AB四种主要血型的人，又都分别一分为二地被划分为Rh阳性和Rh阴性。 2、Rh（-）属稀有血型吗？ Rh（-）的分布因种族不同而差异很大，在白种人中的比例较高，约百分之十五，中国人群中，新疆维吾尔等少数民族Rh（-）的分布为百分之五；蒙古族人接近百分之一;汉族所占的比例极少，仅千分之三，属稀有血型，如果同时考虑ABO和Rh血型系统，在汉族人群中寻找AB型Rh（一）同型人的机会不到万分之三。因此，Rh（-）实属稀有血型。 3、Rh血型是如何遗传的？当子代获得来自父母的RhD基因时，其表现型为Rh（+），如果子代没有获得来自父母任一方的RhD基因，则表现为Rh（-）。如果父母双亲中有一人是Rh（-），其子女为Rh（-）的机会即增大，反之机会减少。 4、Rh（-）有何意义？无论是Rh（-）者还是Rh（+）者其差别仅仅是血型的不同，都属健康人群。但Rh（-）血型具有非常重要的临床意义。因为Rh血型不合的输血有可能危及病人的生命。母子Rh 血型不合的妊娠，有可能发生死胎、早产、新生儿溶血病。如果Rh（-）的人输入Rh（+）的血液后（特别是多次输血），在其血清中可出现Rh抗体，若以后再输入Rh（+）血，即可发生溶血性输血反应；如果Rh（-）妇女怀孕Rh（+）胎儿时，若胎儿的红细胞进入母体，也可刺激母体产生Rh抗体，即使第一次输血，也可发生溶血性输血反应。而当连续两次妊娠，母婴Rh血型不合时，则有可能出现新生儿溶血病，导致婴儿的严重伤害。 5、Rh（-）者如何自我保护？请您记住这条原则：血液只能同型相输，即A型Rh（-）患者只能输A型Rh（-）血，B型Rh（-）的只能输B型Rh（-）血，假如您生病或手术需要输血时，您一定要将您是Rh （-）血型的情况告知医生，以便医生及早与血液中心联系，组织您所需要的Rh（-）血源。假如您是未育女性，请您做好计划生育以避免人工流产。若您已有流产或输血史，妊娠期务必到血液中心血型室进行产前新生儿溶血病的相关预测检查，分娩时要做特别说明，以防今后新生儿溶血病的发生。 6、您知道血型工作者已经为您做了哪些工作吗？紧急情况时能否及时向Rh（-）患者供应同型血液是一件生命悠关的大事，血液中心的血型工作者以保障每一位Rh（-）患者的输血安全为已任，常年不懈地对数以十万计的供血人群进行Rh（-）血型筛选，一旦筛选到Rh（-）血，这袋血就立即做上特殊的标记并保存在4℃冰箱中、以备急需。为节约用血，开发已有资源，本血液中心现已开展稀有血型红细胞-80℃深低温保存，使每一袋在随机献血者中发现确认的Rh（-）阴性血都能发挥最大作用。 7、Rh（-）者输血供应有保障吗？尽管输血工作者防患于未然已竭尽全力，但紧急情况时Rh（-）者可能缺乏同型血而危及生命的潜在危险依然存在。其实，消除这一困扰的方法很简单：即所有Rh（-）者同舟共济，在随时作为可能的受血者的同时，也随时作为一名高尚的献血者，这样您和所有的Rh （-）者的生命都将得到保障。

ABO血型鉴定操作规程

ABO血型鉴定操作规程 1.目的：为准确鉴定ABO血型 2.要求：要求全科人员熟练掌握原理及操作，对有疑问的结果能够做出解释及妥善解决。 3.原理：根据红细胞上有无A抗原和/或B抗原，将血型分为A型、B型、O型和AB型四种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO 血型。正定型是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原和/或B抗原；反定型是用已知的A型红细胞和B型红细胞来测定血清中有无相应的抗A和/或抗B。反定型中使用O细胞是为了检测抗A、抗B以外的不规则抗体。 4.试剂和材料 4.1 A、抗B分型血清，效价1：128以上 4.2 2%~5%A、B、O标准红细胞。 4.3 受检者血样 5.方法．（试管法） 5.1 取洁净小试管2支，分别标明抗A、抗B，分别滴加抗A、抗B分型血清1滴于试管底部，再分别加入受检者2%~5%红细胞1滴，混合。 5.2 另取洁净小试管3支，标明A C、B C、O C，各加入受检者血清2滴

于试管底部，再分别加入A、B和O型2%~5%标准红细胞1滴，混匀。 5.3 以1000g离心15秒，将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，以肉眼观察有无凝集或溶血现象。观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，这将有助于A、B亚型、类B、或CisAB的发现。★ 6.结果判断：血型抗A血清抗B血清 A细胞 B细胞 O细胞 A + - - + - B - + + - - O - - + + - AB + + - - - 7.正反定型不一致的原因：有技术问题或红细胞和血清本身问题，常见者有以下数种： 7 1 分型血清效价太低，亲和力不强。 7.2 红细胞悬液浓度过高或过低，抗原抗体比例不适当（出现前带或后带现象），使反应不明显误判为阴性反应 7.3 受检者红细胞上抗原位点过少（如亚型）或抗原性减弱（见于白血病或恶性肿瘤）以及类B或CisAB等。 7.4 受检者血清蛋白紊乱（高球蛋白血病）或实验时温度过高，常引起红细胞呈缗钱状排列。 7.5 受检者血清中缺乏应有的抗A或抗B抗体，如丙种球蛋白缺乏

Rh血型鉴定操作规程

抗D血型鉴定操作规程 1.目的：定性鉴定患者Rh（D）血型 2.适用范围：适用于献血员筛查、临床检测和血液制品检测。 3.方法及原理; 该系统主要有五种抗血清，即抗D、抗C、抗c、抗E、抗e。.用五种抗Rh标准血清来检查红细胞抗原，有18种表现型。在临床输血中，一般只做D抗原的鉴定，凡被鉴红细胞和抗D血清凝集者为Rh阳性，不凝集者为Rh阴性。其它Rh抗原鉴定和D抗原一样只是加相应的抗血清既可。其鉴定方法，由抗血清的性质而定。如盐水抗体用盐水法，lgG抗体用聚凝胺，抗人球蛋白等方法。 4.试剂及设备: 4.1 RhD血型定型试剂、0.9%氯化钠 4.2 离心机、显微镜、恒温水浴箱 5.样本的采集与处理: 5.1标本种类：新抽取的EDTA-K2抗凝血2ml。 5.2标本储存： 2℃-8℃保存。 5.3标本运输：室温运输 5.4.标本拒收标准：细菌污染、溶血标本不能作测定。 6.操作步骤： 6.1试管法 6.1.1取1支标记的干净试管，加入2滴抗D定型试剂。6.1.2再加1滴3-5%的被检红细胞悬液于试管中，摇匀。6.1.3离心，3000-3400r/min15秒。 6.1.4检查是否有溶血（溶血可能是阳性结果，也可能是细菌污染），然后轻轻摇晃使细胞再悬浮起来。 6.1.5观察凝集状况，并立即记录，必要时可借助显微镜。 6.1.6若是阴性结果，需37℃孵育15分钟，然后再离心观察结果，结果若呈阴性需进一步确认是否为弱D。

6.2玻片法 6.2.1取一标记的干净玻片，在其表面滴加1滴抗D血型定型试剂，在滴加1滴35-50%的待测红细胞悬液。 6.2.2持续地、轻柔地上下倾斜载玻片，使待测红细胞悬液与该试剂在约2cm直径范围内充分混匀2分钟。 6.2.3肉眼观察载玻片上是否出现红细胞凝集。 6.2.4记录结果 6.2.5若是阴性结果，需用室温盐水试管法复核。 8.干扰因素: 8.1假阳性因素 8.1.1试剂中存在具有其他特异性抗体（指不完全D抗体），因此对疑难抗原定型时，建议用不同来源的抗血清同时做两份试验。因为使用两份特异性相同的抗血清得到不一致的结果时，就会使检验人员意识到有进一步试验的必要。 8.1.2多凝集红细胞与任何人血清都会发生凝集。 8.1.3当用未经洗涤的红细胞做试验时，标本中的自由凝集素和异常蛋白质可能引起假阳性结果。 8.1.4试剂瓶可能被细菌、外来物质或其他抗血清所污染. 8.2假阴性因素

ABO血型鉴定操作规程

主题内容ABO血型鉴定操作规程生效日期：2010/10/23 第页共5页 1 目的指导工作人员进行ABO血型实验。 2 适用范围血型检验岗位工作人员 3 职责负责送检标本ABO血型的检测工作。 4 【原理】 ABO血型鉴定,是根据IgM类特异性血型抗体与红细胞膜上特异性抗原结合能出现凝集反应的原理，用已知IgM类特异性标准抗A和抗B血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原。同时用已知标准A型红细胞和B型红细胞来测定血清中有无相应的天然IgM类抗A或/和抗B。【标本】 1．静脉抗凝或不抗凝血1.5～2.0ml。【器材】载玻片、滴管、小试管、台式离心机或微柱凝胶离心机、玻璃棒、蜡笔或记号笔、显微镜等。【试剂】 1.1 抗-A、抗-B试剂 1.2 5%和10%A、B及O型试剂红细胞盐水悬液 1.3 受检者血清 1.4 受检者5%和10%红细胞盐水悬液 1.5 10mm×60mm透明的玻璃试管或塑料试管【操作步骤】 2.1 试管法 2.1.1查抗原：取洁净小试管2支，分别标明抗-A、抗-B，用滴管加入抗-A 和抗-B分型血清各 2滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴，混匀。 2.1.2查抗体：取洁净小试管3支，分别标明A型、B型和O型细胞。用滴管分别加入受检者血清2滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B、O型5%试剂红细胞悬液1滴，混匀。 2.1.3立即1000rpm离心(离心时间为离心机校准时间)。 2.1.4轻轻摇动试管,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(或溶血)现象,如肉眼观察不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜下观察有无凝集。

血型系统

表2 基因型与红细胞的抗原关系 ABO血型由A、B和O三个等位基因控制遗传。其中A和B基因是显性基因，O基因是隐性基因。染色体上基因内容的组合（基因型或遗传型）与红细胞上表现的抗原（表型）关系如表2所示。 O型红细胞上虽然没有A和B抗原，但有H抗原。H抗原也是A和B抗原的基础。ABH抗原不但表现在红细胞上，而且可以在体液中游离存在。80％的人在唾液中含有ABH抗原，这种人称为分泌型者；在唾液中没有ABH抗原的人称为非分泌型者。分泌能力也受遗传的控制。 ABO血型系统与其他血型系统不同，具有“天然”的抗体，例如，A型者有抗B抗体，B型者有抗A抗体，O型者有抗A抗B抗体。这种抗体是因出生后接受自然环境中具有同样特异性的抗原性物质的隐性免疫作用而产生的。血型的调查和建档对于了解种族关系用处很大。 2、Rh血型系统表3 Rh血型系统的抗原和抗体 Rh血型系统是人类重要血型系统之一。卡尔·兰德施泰纳和A·S·威纳（1940年）用恒河猴（Rhesus Macacus）的红细胞免疫豚鼠和家兔，所得免疫血清能凝集85％的白种人红细胞。他们认为呈阳性反应的红细胞里含有与恒河猴红细胞共同的抗原，于是取Rhesus一词的前两个字母，命名其为Rh抗原。有Rh抗原的人称为Rh阳性，反之为Rh阴性。Rh血型系统比较复杂，目前有两种不同命名法，即威纳命名法和费希尔命名法（表3）。一般多采用费希尔命名法，因为它简单明了，容易理解。R·A·费希尔认为Rh血型受3对等位基因的遗传控制，它们决定C和c、D和d、E和e六个抗原。在一个决定Rh血型的染色体上，三对等位基因的排列形式可有8种基因组合，因而子代可有36种遗传型，例如CDe／cde就是Rh遗传型之一。分子和分母分别代表来自父方和母方（或母方和父方）的染色体。大写字母代表“Rh+”基因，小写字母代表“Rh-”基因。除CDE为完全阳性基因外，其他一些基因组合总是既有阳性基因、也有阴性基因。通常所见的由Rh血型引起的免疫反应中，绝大多数是由D抗原（即威纳的Rh+）与其相应的抗体所致，因此，临床上常只以D抗原的存在与否来表示R h阳性或阴性。一个人的红细胞如与D抗体发生反应，表明有D抗原，就称为Rh阳性；反之，如不与D抗体发生反应，表明没有D抗原，就称为Rh阴性。三、应用价值血型不仅在输血上有重要意义，而且在人种学、遗传学、法医学、移植免疫、疾病抵抗力（或易感性）等方面都有应用价值，在输血前，一定要检查病人（受血者）

ABO血型鉴定的方法步骤与注意事项

一.原理根据红细胞上有或无A抗原或B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是用已知抗—A和抗—B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或B抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗—A或抗—B。二.试剂和材料 1．抗—A(B型血)、抗—B(A型血)及抗—A十B(O型血)分型血清（制备方法见本节附注） 2．5％A、B及O型试剂红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注；3．受检者血清； 4．受检者5％红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注。三.方法 1．试管法 (1)取洁净小试管3支，分别标明抗—A、抗—B和抗—A十B，用滴管分别加抗—A、抗—B和抗—A十B。分型血清各l滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者5％红细胞盐水悬液1滴，混和。 (2)另取洁净小试管3支，分别标明A、B和O细胞。用滴管分别加入受检者血清l滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和O型5％试剂红细胞悬液l滴，混和。 (3)立即以1000r／min离心1min。 (4)将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有

无凝集(或溶血)现象。如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。 (5)观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。 (6)凝集强度判断标准 2.玻片法（1）取清洁玻片1张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B和抗-A十B，分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清 l滴于标明的方格内，再各加受检者2％红细胞悬液1滴，混和。 (2)另取洁净玻片一张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明A 细胞、B细胞和O细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。

ABO血型鉴定的方法步骤与注意事项

ABO血型鉴定的方法步骤与注意事项一.原理根据红细胞上有或无A抗原或B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是用已知抗—A和抗—B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或B抗原；所谓反定型，是用已知A 细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗—A或抗—B。二.试剂和材料 1．抗—A(B型血)、抗—B(A型血)及抗—A十B(O型血)分型血清（制备方法见本节附注） 2．5％A、B及O型试剂红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注；3．受检者血清； 4．受检者5％红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注。三.方法 1．试管法 (1)取洁净小试管3支，分别标明抗—A、抗—B和抗—A十B，用滴管分别加抗—A、抗—B和抗—A十B。分型血清各l滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者5％红细胞盐水悬液1滴，混和。 (2)另取洁净小试管3支，分别标明A、B和O细胞。用滴管分别加入受检者血清l滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和O型5％试剂红细胞悬液l滴，混和。 (3)立即以1000r／min离心1min。

(4)将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有无凝集(或溶血)现象。如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。 (5)观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。 (6)凝集强度判断标准 2.玻片法（1）取清洁玻片1张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B和抗-A十B，分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清l滴于标明的方格内，再各加受检者2％红细胞悬液1滴，混和。(2)另取洁净玻片一张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明A细胞、B细胞和O细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴

ABO血型鉴定操作规程

成都市青白江区人民医院对象：全院职工医疗药事制度文件名称：ABO血型鉴定（4.19.2.1）编写日期：2014.1 修订日期：2017.4 执行日期：2017.4 注：①本文件仅供本院人员使用，未经同意，不得翻印②本文件最终解释权归输血科 ABO血型鉴定【原理】人类ABO血型系统包括四种主要的表现型：A、B、O和AB。ABO血型由红细胞上A 和B抗原的有或无决定，ABO系统还以血清中存在自然发生的规则抗体为特点，即血清中含有针对自身红细胞所缺的A或B 抗原产生的同种凝集素（也称为“天然抗体”）。人类红细胞上A和B 抗原的有或无与血浆中抗A和抗B抗体的产生存在着相反的互补关系。例如O型个体红细胞上缺少A和B抗原，其血清中含有抗A和抗B抗体。利用红细胞凝集试验，通过正反定型可以准确鉴定ABO血型。所谓正定型，也称红细胞定型试验，是指用标准抗A和抗B试剂来测定红细胞上的A抗原和B抗原；所谓反定型，也称血清定型试验，是指用标准A型和B型红细胞来测定血清中有无相应的抗A和抗B抗体。“天然抗体”的免疫原可能是肠道及环境中的细菌，例如在大肠埃希菌的脂多糖外壳中含有ABO类似结构。 1.试管法试管法是ABO定型试验的经典方法。【样本】抗凝或不抗凝的样本均可用于ABO鉴定试验。红细胞可悬浮在自身血清、血浆或盐水中，也可以洗涤后悬浮于盐水中。通常情况下，试管法正定型被检样本与反定型中试剂红细胞悬液浓度皆为2%～5%。【试剂】（1）抗A血清（2）抗B血清（3）2%～5%的A型、B型红细胞盐水悬液 1（4）如果需要，可增加抗A,B试剂和A血型红细胞. 2【操作】

（1）正定型：检测红细胞上的A或B 抗原。①加1滴抗A到一支洁净试管中并标记；②加1滴抗 B到一支洁净试管中并标记；③如果需要，可选做加1滴抗A,B在第3支试管，并标记；④向每一支试管滴加1滴2%～5%的待检红细胞悬液；⑤轻轻混匀，按照校准速度和时间离心，通常（900～1000）×g离心15秒；⑥轻轻重悬细胞扣，检查凝集情况；⑦观察、解释、记录试验结果，并与血清（血浆）试验结果对照（2）反定型：检测血清或血浆中的抗体。①取2支洁净试管，分别标记A和B，分别向其中滴加2～13滴血清或血浆；②加1滴A试剂红细胞到标记A的试管； ③加1滴B型试剂红细胞到标记B的试管；11④如果需要，加1滴A试剂红细胞到一支已加入2～3滴血清或血浆的试管中，并做好标记；⑤轻轻混匀，2按照校准速度和时间离心，通常（900～1000）×g离心15秒；⑥检测是否有溶血现象，然后轻轻重悬细胞扣，检查凝集情况；⑦观察、解释、记录试验结果，并与红细胞试验结果对照。成都市青白江区人民医院【结果判定】（1）细胞试验中的凝集以及血清或血浆试验中的溶血或凝集均为阳性结果（2）细胞扣重悬后表现为均匀的细胞悬液是阴性结果（3）凝集强度判断标准参见表1-5-1 （4）ABO定型的血清或血浆试验以及红细胞试验的解释见表1-5-2 （5）如果红细胞定型试验与血清定型试验结果不一致，应通过进一步试验解决，然后才给出ABO 血型结果（6）混合视野凝集的情况，应进一步找出原因：例如是否混合血样标本，近期有无输血史，是否白血病急性期或者ABO亚型等表1-5-1凝集强度判读 4 + = 红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。 3 + = 红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。 2 + = 红细胞凝块分散成许多小块，见到游离红细胞。 1 + = 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。

rh血型鉴定阳性是什么意思

rh血型鉴定阳性是什么意思 rh血型鉴定阳性是什么意思？凡人体血液红细胞含D抗原（又称Rh抗原）为Rh阳性，否则为阴性。这样就使已发现的红细胞A、B、O及AB四种主要血型的人，又都分别一分为二地被划分为Rh阳性和阴性两种。RH阴性血型只占千分之三属于稀有血型。让我们通过下文来了解一下rh血型鉴定阳性是什么意思吧。 Rh血型系统，其中含有6种抗原，即C、c、D、d、E、e。凡人体血液红细胞含D抗原（又称Rh抗原）为Rh阳性，否则为阴性。这样就使已发现的红细胞A、B、O及AB四种主要血型的人，又都分别一分为二地被划分为Rh阳性和阴性两种。Rh血型无天然抗体，其抗体多由输血（Rh阴性者被输入Rh阳性血液）或妊娠（Rh阴性母亲孕育着Rh阳性胎儿）免疫生成，具有重要临床意义。一旦形成抗体，如再输入Rh阳性血液，可发生严重输血反应。再孕育Rh阳性胎儿可发生新生儿溶血症。凡是人体血液红细胞上有Rh抗原（又称D抗原）的，称为Rh阳性。Rh阳性血型在我国汉族及大多数民族人中约占99.7%，个别少数民族约为90%。RH阴性者不能接受RH阳性者血液，因为RH阳性血液中的抗原将刺激RH阴性人体产生RH抗体。如果

再次输入RH阳性血液，即可导致溶血性输血反应。但是，RH阳性者可以接受RH阴性者的血液 rh血型鉴定阳性是什么意思？看了上文，想必你已经知道答案了吧。rh血型鉴定阳性是多人数群体，这就不用担心会像rh血型鉴定阴性的人群，RH(D)血型鉴定阳性是有别于ABO血型系统的一种血型，血型的系统是很多的，并不只有ABO一种的，RH血型也是比较常见的一种，有阳性与阴性两类。

ABO血型鉴定操作规程

ABO血型鉴定操作规程 1. 原理根据红细胞上和血清（或血浆）中有无A 抗原和（或）B 抗原及其抗体，将血型分为 A 型、B 型、AB 型及O 型。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型鉴定ABO 血型。正定型是指用已知抗正定型-A、抗-B血清来检测受检红细胞上有无相应的A 抗原和（或）B 抗原；反定型是指用已知反定型A1 型、B 型红细胞来检测受检血清（或血浆）中有无相应的抗-A和（或）抗-B。 2. 原始样品要求 5 mL静脉全血。 3. 样品容器和添加剂样品容器和添加剂样品容器和添加剂样品容器和添加剂真空试管，EDTA.K2 抗凝/普通试管，不抗凝。 4. 检测环境要求检测环境要求检测环境要求检测环境要求温度：18℃～27℃，湿度：30%～70%。 5. 所需材料和设备所需材料和设备所需材料和设备所需材料和设备 5.1 设备普通离心机、免疫血液学离心机、显微镜、恒温水箱、定时器。 5.2 材料抗-A、抗-B 血清、ABO 标准抗原红细胞试剂、移液器、加样吸头、生理盐水（NS）、干净空试管。

6. 检测操作过程检测操作过程检测操作过程检测操作过程 6.1 将受检标本以1000g离心5min，使标本血浆/血清与红细胞分离，吸取红细胞，用NS洗涤三次后，配成3%～5%红细胞悬液。 6.2 取6 支小试管，分别标记“-A”、“-B”、“自身”、“Ac”、“Bc”、“Oc”。 6.3 在“-A”、“-B”管中分别加入抗-A 和抗-B 血清各50μL ，其余管加入受检血浆/血清各 100μL 。 6.4 在“-A”、“-B”、“自身”管中加入受检者3%～5%红细胞悬液各50μL ，摇匀。 6.5 在“Ac”、“Bc”、“Oc”管中分别加入A1、B、O红细胞试剂各50μL ，摇匀。 6.6 1000g离心15sec，轻轻悬浮红细胞，观察结果并记录。6.7 根据实验需要，除室温下观察结果外，另可增加在4℃、37℃下观察结果。 7. 结果判断结果判断结果判断结果判断 7.1 凝集强度判断标准见表1。凝集强度判断标准 4+ 红细胞凝集成一大块，液体背景透明，无游离红细胞 3+ 数个大凝集块，液体背景透明，无游离红细胞 2+ 有很多小凝集块，液体背景透明，无游离红细胞

血型鉴定操作规程

血型鉴定操作规程 Document number：BGCG-0857-BTDO-0089-2022

血型鉴定操作规程一．玻片法（仅适用于正定型） 1 .原理：根据红细胞上有无A抗原或（和）B抗原，可以将红细胞血型分为A型、B型、AB型和O型。根据抗-A和抗-B抗体与对应红细胞的凝集反应，可以鉴定ABO血型。根据抗-D抗体与对应红细胞抗原的凝集反应，区分RhD阳性和RhD 阳性。 2 .标本采集：用EDTA抗凝管采集被检对象静脉血，充分混匀，确保抗凝充分。紧急情况下可以使用抗凝动脉血。婴幼儿及其他不便于真空管采血的患者，如不进行反定型试验可采集末梢血。 3. 标本运送与储存：采集好的标本与申请单同期尽快（一般2小时内）送往输血科。标本采集后和检测后，应置于2~8℃环境下。检测后的标本应至少保存7天，以备结果查对。 4 .仪器与材料：抗-A/B血型定型试剂（单克隆抗体）、RhD（IgM）血型定型试剂（单克隆抗体）、载玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。 5. 操作步骤：用标记笔在载玻片上划分成A、B、D三个区域；在标记好的玻片上分别加1滴抗-A、抗-B和抗-D血型定型试剂；

再各加1滴10%患者红细胞悬液（该红细胞悬液可以是盐水悬液，也可以是悬浮于自身血浆或血清中的红细胞）；用干净的搅拌棒将红细胞悬液和试剂充分混合，并把混合物均匀涂开，使其覆盖大约直径20mm的面积；缓慢连倾斜摇动玻片1-2min，观察结果并记录。 6. 结果判定：凝集或发生溶血为阳性结果；细胞混匀2min后仍呈悬液状态的为阴性结果；对结果有怀疑，应用试管法或微柱凝胶法重复实验。二、纸板法 1 .原理：根据红细胞上有无A抗原或（和）B抗原，可以将红细胞血型分为A型、B型、AB型和O型。根据抗-A和抗-B抗体与对应红细胞的凝集反应，可以鉴定ABO血型正定型。A1细胞上含有A和A1抗原，B细胞上含有B抗原。用已知的A、B细胞检测被检者血清中有无相应的抗-A或抗-B 抗体，即反定型。综合正反定型结果确定受检标本ABO血型。根据抗-D抗体与对应红细胞抗原的凝集反应，区分RhD阳性和RhD 阳性。 2 .标本采集：用EDTA抗凝管采集被检对象静脉血，充分混匀，确保抗凝充分。紧急情况下可以使用抗凝动脉血。婴幼儿及其他不便于真空管采血的患者，可采集末梢血。