从人组织样本制备单细胞悬液文献美天旎官方网站客户反馈

gentleMACS实验操作步骤中文

gentleMACS?操作步骤 1.背景信息 在许多实验中，需要用到单细胞悬液，如用MACS?技术分选细胞时，要想获得高纯度和回收率的话，单细胞悬液就很重要。德国美天旎生物技术有限公司开发的gentleMACS?分离器能够提供优化的程序，用于从不同的组织中获取单细胞悬液。这些组织包括小鼠脾脏，肝脏，肺脏，脑组织等。使用C管，能够在一个密闭的系统中进行全自动的组织分离，可以保证组织操作的无菌，以及能够同时处理2个组织样本。 2. 分离小鼠脾脏的操作步骤

2.1 需要的试剂和仪器 ●gentleMACS 分离器 ●gentleMACS C 管(# 130-093-237) ●细胞滤器，如30 μm n尼龙滤网（Pre-Separation Filters# 130-041-407) ●缓冲液: PBS缓冲液, pH 7.2,含0.5% 牛血清白蛋白(BSA), 和2 mMEDTA (不推荐使用含Ca2+ or Mg2+的缓冲液) 2.2 步骤 ▲如制备的单细胞悬液用于细胞培养，所有的步骤必须在无菌条件下获得。▲一只小鼠脾脏的重量约为80–120 mg (BALB母鼠, 6–7 周龄). 1. 将小鼠脾脏转移到gentleMACS C 管中，按照脾脏的数量加入缓冲液: 1–2 个小鼠脾脏: 3 mL 3–4个小鼠脾脏: 6 mL 5–6 个小鼠脾脏: 9 mL 2. 拧紧C管盖子，倒置在gentleMACS 分离器上 ▲注意: 必须确保组织块在转子区域 3. 开机，选择合适的分离程序： 1–2 个小鼠脾脏: m_spleen_01. 3–6个小鼠脾脏: m_spleen_04. 4. 运行gentleMACS 程序m_spleen_01. 或m_spleen_04. 5. 程序结束后，从gentleMACS 分离器中取出C管 6. (可选) 以300×g 室温下离心2分钟。 7. 去除分离的组织块，将细胞悬液通过一个预分选滤器（1-2个脾脏），该预分选滤器放置于15mL管子中。或者将细胞悬液通过一个细胞过滤网（3-6个小鼠脾脏），该滤网放置于50mL试管中。 8.用5 mL 缓冲液洗涤预分选滤器（Pre-Separation Filter）或者细胞滤器 9. 弃去预选滤器或细胞滤器，室温下以300g离心10分钟，完全去上清。 10.用合适体积的缓冲液重悬细胞，用于后续应用。

美天旎公司磁珠分选产品

美天旎公司磁珠分选产 品 标准化管理处编码[BBX968T-XBB8968-NNJ668-MM9N]

美天旎公司MACS(磁珠分选)相关产品 一、MACS微珠（MicroBeads） MACS微珠是一种与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒，用于目的细胞或者去除细胞的磁性标记。微珠直径约有50nm，比细胞小200多倍，体积为细胞的百万分之一，光学显微镜下不可见。微珠由多聚糖和氧化铁组成，无毒性，对细胞无损伤，可以生物降解。MACS微珠与流式细胞仪兼容，不会影响细胞的光散射特性；磁性标记只占用2 0－30％的结合位点，不影响细胞的荧光抗体标记。此外，MACS微珠可以最大限度地避免细胞活化；无需解离磁珠，可以直接进行后续实验：如流式细胞仪分析或分选、细胞培养、分子生物学研究、回输给人或者动物。 MACS微珠主要有三种：直标微珠、间标微珠、多选微珠。其中间标微珠有抗免疫球蛋白微珠、抗生物素微珠或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠。多选微珠是专门为分选细胞亚群而研制的一种微珠。这种微珠通过特殊的方式与抗体偶联，在第一次阳性分选完成后，与细胞结合的多选微珠可以被解离试剂剪切下来，阳性分选的细胞可以进行再次阳性分选或者去除分选。 MACS技术分选的CD8阳性T细胞（箭头所示为磁性结合在细胞表面的微珠） 二、MACS分选柱（Separation Column） MACS分选柱是一类填充有不同规格铁珠的塑料容器，铁珠表面有亲水包被，因此不会损伤细胞。在磁场外MACS分选柱不带有磁性，但是当置于一个永久性磁场—MACS分选器中时，分选柱内的铁珠可以使分选器的磁场增强1000倍，足以滞留仅标记有极少量微珠的目的细胞；磁性标记细胞从分选柱中通过时可以受到均匀的磁力作用，从而提高分选纯度和回收率。手动操作在30分钟内可完成，自动分选仅需分钟，得到的细胞可立即用于后续实验。此外，大多数MACS分选柱都是无菌包装，一次性使用，可以满足细胞培养所需的无菌条件。 三、MACS分选器（MACS Separators） MACS分选器由永久性磁铁和支架构成。与分选柱一起组成高强度的梯度磁场。根据应用范围分为研究用和临床应用的MACS分选器，根据操作方式分为手动和自动分选器。

miltenyi biotec(德国美天旎生物公司)CD133相关专利产品

CD133是近年在干细胞领域研究较为活跃的细胞膜糖蛋白之一,常表达于未成熟的造血干细胞或祖细胞,新近有报道认为它在脑肿瘤、前列腺癌、小鼠的Lewis肺癌、B16黑色素瘤的干细胞中均有表达,已被认为是这些肿瘤干细胞的标志之一。miltenyi biotec（德国美天旎）拥有CD133全系列的全球专利。 美天旎部分CD133： 一.CD133的分子结构 人CD133抗原为5次跨膜糖蛋白，目前发现的同源性抗原有CD133_1和CD133_2，其基因分别定位在人类的4号和2号染色体上，分析CD133的基因结构发现，CD133_1基因至少含有27个外显子，CD133_2基因比CD133_1基因少1个27 bp的4号外显子。CD133_1抗原cDNA全长为3 794 bp，其中5′端有37 bp的非翻译区，3′端有1 159 bp的UTR，中间为2 598 bp的开放阅读框，编码865个氨基酸的蛋白。转录起始密码子ATG位于38bp 处，ATG之后还有一编码19个氨基酸的信号肽序列,终止密码子位于第2 763位,第3 906核苷酸处有一长20 bp的polyA序列。CD133_1与CD133_2的相对分子质量分别为120 KD 和112 KD，CD133_2由含856个氨基酸的肽链组成，比CD133_1少9个位于E1区的氨基酸[2]。在发现人CD133的同年，在小鼠中也发现了CD133_1的同源性抗原并命名为Prominin_1，二者具有60％的相似结构，之后，成功克隆出Prominin_2，与Prominin_1和人CD133分别有29％和26％的相似结构，认为是Prominin_1的同源性抗原。CD133的功能目前尚不清楚，存在于C端的酪氨酸暗示它可能是通过酪氨酸残基磷酸化作用而发挥级联效应的生长因子受体。

【原创】全球知名试剂公司(史上最全)

【原创】全球知名试剂公司（史上最全） 原创 2017-06-29 找试剂网 找试剂网美国ProliantProliant 是世界上最大最有经验的动物源蛋白生 81,400 年。 500个小鼠单克隆抗体的能力，他们的目标是：人类基因组中的每一个表达基因都至少有一种抗体。美国NovusNovus位于美国科罗拉多州，是一家着名的抗体公司。公司的愿景是提供优质的产品，完善的客户服务以帮助客户快速找到最适合的抗体产品。通过全球代理商和网络提供10000多种研究级抗体，涉及生命科学的各个领域。美国BDBD是世界上最大的生产和销

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生物学和细胞生物学研究的产品，包括抗体和可溶性Fas ELISA试剂盒。CSTCell SignalingTechnology(CST)是最知名的和老牌的信号转导公司之一，专注于信号转导产品的提供和研究。产品具有种类多、质量好、价格低、引用文献多等优点，是您进行信号转导研究不可多得的帮手！其中磷酸化抗体做的尤为突出！Zymed LaboratoriesZymedLaboratories公司位 大家庭 Zymed 公司符合4500 品。 Pierce主 12 和多抗及其生物素标记物,ELISA试剂盒和新型抗体。主要以小包装的细胞因子受广大研究生客户喜爱。CaymanCayman向世界科学工作者提供多研究领域的生化和免疫试剂。包括：肿瘤、氧化氮、神经学、凋亡、氧化性损伤、内分泌学等等。他们有用于检测的特色试剂盒，如：类花生酸类物质、游离的生物标志、环核苷、激素及氧化氮等。另外，Cayman提供多种高质

美天旎细胞治疗全线-130723

细胞治疗概述

生物治疗 造血系统再生医疗 干细胞移植干细胞分选 被动去T、B 移植物处理免疫治疗T细胞 （CD3）去除 B细胞（CD19） 去除DC治疗NK治疗CIK治疗Ag 特异性T细胞 去除肿瘤细胞去T、B Treg(CD4/CD25) 去除 自体异体 活化Ｔ,Ｂ 的去除 T去除 CD6 T 去除 （BMT） TCR α/β去除 CD45RA（na?ve T 细胞去除） 病毒感染 Treg治疗

CTL：细胞毒性T淋巴细胞，白细胞的亚群，为一种特异T细胞，专门分泌各种细胞因子参与免疫作用。对某些病毒、肿瘤细胞等抗原物质具有杀伤作用。淋巴细胞在体外通过靶细胞抗原和淋巴因子的诱导，分化扩增成具有强大杀伤力的CTL细胞 LAK：淋巴因子激活的杀伤细胞。将外周血淋巴细胞在体外经高剂量淋巴因子IL-2激活3～5天而扩增为具有广谱抗瘤作用的杀伤细胞 TIL：肿瘤浸润淋巴细胞（TIL），它是一种新型的抗肿瘤效应细胞，具有高效、特异、副作用小等优点。经测试TIL细胞的抗肿瘤效果是LAK的50~100倍，TIL中绝大多数细胞CD3+ CD3AK：LAK细胞的培养液中加入CD3单克隆抗体可以将这些细胞的肿瘤杀伤活性提高十几倍，扩增的数量也大幅提高。 CIK

CD8+T 特异性T细胞疗法 CD4+T自体辅助性T细胞疗法 ACTL：ACTL靶向性抗肿瘤细胞免疫技术，是将无致病性的腺相关病毒(AAV)通过基因重组技术改建为携带特定肿瘤相关抗原决定簇基因的重组腺相关病毒(rAAV)，感染患者的外周血单核细胞，经细胞因子诱导，单核细胞转化为具有强大抗原提呈功能的树突状细胞。 获得的DC可刺激产生有效杀伤肿瘤细胞的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。所产生的CTL具有肿瘤抗原特异性，即靶向性。经rAAV感染的DC刺激产生的CTL 仅针对某种或数种肿瘤相关抗原阳性的肿瘤细胞具有杀伤作用，对抗原阴性的细胞无作用。ACTL无明显毒副作用，并可逆转肿瘤细胞对抗激素和生物靶向药物治疗产生的耐药性，这是该技术的显著特点。

免疫磁珠

德国美天旎Miltenyi细胞分选磁珠CD90(Thy1.2)MicroBeads小鼠CD90(Thy1.2)微珠用于从淋巴和非淋巴组织单细胞悬液或外周血中分选或去除小鼠T细胞。CD90表达于胸腺细胞、外周T细胞、一些上皮内T 细胞上，在骨髓早期造血干细胞上有低水平表达。在小鼠中CD90识别的T细胞群与表达CD3的细胞群基本相同。应用：CD90微珠分选的T细胞可用于分析小鼠肺纤维化模型中细胞因子的表达，或者将野生型和基因敲除小鼠的T细胞过继性转移至免疫缺陷小鼠体内，研究其细胞因子的表达。另外，CD90微珠还可用于分选肿瘤浸润性T细胞，研究其免疫治疗潜能或者功能特性。分选柱：阳性分选：MS、LS、XS或autoMACSTM分选柱。去除分选：LD、CS、D或autoMACS分选柱。 有关磁珠的知识： MACS磁珠是一种与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒，用于目的细胞或者去除细胞的磁性标记。磁珠直径约有50nm，比细胞小200多倍，体积为细胞的百万分之一，光学显微镜下不可见。磁珠由多聚糖和氧化铁组成，无毒性，对细胞无损伤，可以生物降解。MACS微珠与流式细胞仪兼容，不会影响细胞的光散射特性；磁性标记只占用20－30％的结合位点，不影响细胞的荧光抗体标记。此外，MACS磁珠可以最大限度地避免细胞活化；无需解离磁珠，可以直接进行后续实验：如流式细胞仪分析或分选、细胞培养、分子生物学研究、回输给人或者动物。 MACS磁珠主要有三种：直标磁珠、间标磁珠、多选磁珠。其中间标磁珠有抗免疫球蛋白磁珠、抗生物素磁珠或链霉亲和素磁珠、抗荧光素磁珠。多选磁珠是专门为分选细胞亚群而研制的一种磁珠。这种磁珠通过特殊的方式与抗体偶联，在第一次阳性分选完成后，与细胞结合的多选磁珠可以被解离试剂剪切下来，阳性分选的细胞可以进行再次阳性分选或者去除分选。

不知道分选柱该如何选择

不知道分选柱该如何选择？给你方案！ 美天旎的分选柱分几类，如MS、LS、LD级autoMACS column 等，那么，这些有什么区别呢，您在实验中又该如何去选择适合您的分选柱呢？ 首先，让我们来认识一下分选柱： 美天旎的分选柱（Column）是MACS技术的核心，其特点如下： ?填充有不同规格的铁珠，可分选或者去除10^7-10^10细胞； ?表面亲水包被，不损伤细胞，同时保证流速； ?可以将磁场放大1000-10000倍，因此只需极少的细胞表位被识别即可被磁场捕获，从而为后续实验预留足够抗原表位，如磁珠分选后的细胞无需切除磁珠即可直接染流式抗体，而不受影响。 我们知道，美天旎的MACS分选策略有阳性分选、去除分选，那我们就按两种分选策略来分析如何选择恰当的分选柱： 一、阳性分选 1、要分选的细胞数量： 如下图所示：MS柱容纳的最大细胞上样量是2×10^8细胞（既包含阳性细胞又包含阴性细胞），而其能捕获的阳性细胞最多是10^7。

2、目的细胞是常见细胞还是稀有细胞 为了在分选稀有细胞（表达频率〈5%）时得到较更高的纯度，您可以使用两个分选柱：用一根分选柱进行一次分选后，阳性成份再过一次新的分选柱。 3、大体积的细胞 另外，如果您要分选的目的细胞是体积较大的特殊细胞，如原生动物细胞、人皮肤郎罕式细胞、鼻咽癌细胞、心肌细胞等，那推荐您使用Large cell column。因为大细胞柱的铁珠间隙足够大，容许这些特殊的大体积细胞顺利通过。 二、去除分选 去除分选中需要考虑以下几个因素： 1您使用MACS isolation kits 或MACS microbeads吗？ 2 抗原表达强还是弱呢？ 3 您需要更高的纯度还是回收率呢？ 4 您需要分选多少细胞？ 根据这几个因素，您可以按下图的标识来选择合适的去除分选柱。

如何处理成理想的单细胞悬液

有了美天旎，我反手就是一批理想的单细胞悬液！ 对大家来说，实体组织处理成单细胞悬液最难的是什么？ 目前，把实体组织样本处理成单细胞悬液，最长用的两大方法： 物理法：简单粗暴！可以用剪刀剪、昂贵的研磨器磨，但是在实际工作过程中，我们会发现这种方法目前并不是万能的，有些组织（比如：骨骼神经皮肤等）还是需要配合酶消化。 酶消化法：就涉及到选择什么酶，用多少浓度，消化多少时间，如何中止等等细节，考虑这些问题也耗费了我们大量的时间和精力。 但是有了美天旎全自动组织处理器，情况就不一样了！ 仪器全称是：GentleMACS Octo Dissociator with Heaters 中文名称是：全自动八通道加热组织处理器 使用Gentle能够能够温和、高效的解离实体组织，如肝脏、肺脏、脑、肿瘤、拟胚体、骨骼肌、神经组织、脐带、皮肤等，得到完美的单细胞悬液！50多种程序供您选择！ #样本制备#小助手一：组织解离试剂盒 预先滴定好浓度的酶溶液及酶解时间，即用型组织解离试剂盒让您的实验更高效、可重复性更高；同时，酶溶液已经实验验证，可以很好地保护细胞表面抗原，因此得到的单细胞活力高、表位完整，不影响下游流式等实验。

现有肿瘤组织解离试剂盒、新生鼠心脏解离试剂盒、骨骼肌、皮肤、脑、神经球等近30种组织解离试剂盒，常见组织均可找到相应的解离试剂盒。 #样本制备#小助手二：细胞滤器 用于去除组织解离后的细胞团块和碎片；三种规格（30μm，70μm和100μm）；有排气槽的设计，因此不会出现液体俘获和溢出，适用于不同规格的试管和分选柱。 #样本制备#小助手三：混悬仪 ?自带充电电池，运行不依附电源插头，能独立的运行于各种环境中：既能使用在普通的 实验台上，也能穿梭于冰箱与孵箱之间（2 –42℃）！ ?使用灵活：配有不同的试管架，可放置不同规格的管子：0.5 –50 mL。 ?转速可调：机器自设三种旋转速度，间隔时间亦可调，可以温和、缓慢的旋转，有利于 脆弱样本的混悬。

MACS磁珠分选

MACS磁珠分选 免疫磁珠法分离细胞原理 免疫磁珠法分离细胞是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合，在外加磁场中，通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中，无该种表面抗原的细胞由于不能与连接着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性，不在磁场中停留，从而使细胞得以分离。 一、磁性细胞标记方式 应用MACS技术进行磁性细胞分选最重要的一点是高质量的标记。要尽可能地增强阳性细胞的标记，并减弱背景染色。有两种基本的磁性标记方式：直接标记和间接标记。 1、直接磁性细胞标记（Direct magnetic cell labeling） （磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞）直接标记是最快速、最特异的磁性标记方法。目前有多种分选人、小鼠、大鼠以及非人类灵长类细胞的MACS直标微珠可供选用。 2、间接磁性细胞标记（Indirect magnetic cell labeling） （磁珠结合不需要的细胞，游离于磁场的细胞为所需细胞）间接磁性细胞标记需要联合使用单克隆或者多克隆抗体和MACS间标微珠。未结合抗体、生物素化抗体或者荧光素标记抗体均可作为一抗标记细胞，再使用抗免疫球蛋白微珠、抗生物素或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠作为二抗磁性标记细胞。 几乎针对任何种系任何细胞的任何一种单抗或多抗，均可用于间接标记。间接标记主要在如下情况时选用：当没有直标磁珠时；需要用几种抗体的混合物同时分选或去除多种类型的细胞；间接标记有放大作用，因此可在磁性分选抗原表达弱的目的细胞时使用；使用自备抗体或者配体的磁珠分选中。（一般而言，阴性分离法的磁珠用量比阳性分离法的大，阳性分离法用行更多。） 二、MACS分选策略 有两种基本的分选策略 阳性分选和去除分选。复合分选策略是将两种基本分选策略相结合或者联合使用多选微珠，从而实现细胞亚群的分选。 1、阳性分选策略（Positive selection strategy） 阳性分选中，目的细胞被磁性标记后，作为阳性标记组分直接分选出来。分选后的细胞不必去除MACS微珠，可立即用于培养

德国美天旎LS柱说明书

Contents 1. Description 1.1 Background 1.2 Technical specifications 1.3 Product applications 1.4 Reagent and instrument requirements 2. Use of LS Columns 2.1 Preparation of LS Columns 2.2 Magnetic separation using LS Columns 1. Description Components LS Columns (# 130-042-401): 25 LS Columns and plungers, sterile packed or LS Columns plus tubes (# 130-041-306): 25 LS Columns and plungers (# 130-042-401), sterile packed, and 75×13 mL tubes for LS Columns (# 130-091-596), sterile packed as 3×25 tubes. Storage Store columns dry and protected from light. The expiration date is indicated on the box label. Do not use after this date. 1.1 Background The patented MACS? Column Technology is based on the use of MACS MicroBeads, MACS Columns and MACS Separators. LS Columns have been developed for the gentle isolation of MicroBead labeled cells. As MACS MicroBeads are extremely small, superparamagnetic particles, a high-gradient magnetic field is required to retain the labeled cells. LS Columns contain an optimized matrix to generate this strong magnetic field when placed in a permanent magnet such as the MidiMACS? Separator, QuadroMACS? Separator, VarioMACS?Separator, SuperMACS? Separator or SuperMACS? II Separator. LS Columns contain a hydrophilic coating which allows rapid filling. This coating is washed out by rinsing the LS Column with buffer before separation. After incubation with MACS MicroBeads, the cell suspension is loaded onto the LS Column. The unlabeled cells run through while the magnetically labeled cells are retained on the LS Column. The retained material is washed with buffer to remove unlabeled material. After removal of the LS Column from the magnetic field, the magnetically retained cells can be eluted as the positively selected cell fraction, using the plunger supplied with the LS Column. 1.2 Technical specifications ●Column capacity: 1×10? magnetically labeled cells from up to 2×10? total cells. ▲ Note: Column capacity may decrease when separating cells larger than lymphocytes. ●Recommended sample size for leukocytes: 10?–10? labeled cells in 10?–2×10? total cells. ●Typical enrichment rate: 50-fold to up to 1,000-fold, depending on the strength and specificity of the magnetic labeling. Up to 10,000-fold enrichment can be achieved by separation over two sequential columns. ●Columns are "flow stop" and do not run dry. ●Void volume: 400 μL. Reservoir volume: 8 mL. ●Typical flow rate for PBS (phosphate-buffered saline) containing 0.5% BSA (bovine serum albumin): 1.3–2.0 mL/min. ●LS Columns are for single use only. 1.3 Product applications LS Columns have been developed for positive selection of human and animal cells, especially rare cells, out of a heterogeneous cell suspension in combination with a MACS Separator. LS Columns can also be used for depletion of cells which strongly express the magnetically labeled surface antigen. They can also be used to separate other biological material such as plant cells, bacteria, viruses, protozoa, cell organelles etc. ▲ Do not use LS Columns in combination with magnetic particles other than MACS MicroBeads. Magnetic forces in the column are very high and may damage biological material if other beads are used. ▲ LS Columns are not suitable for particles larger than 30 μm. To remove clumps and to prevent aggregates in the sample, resuspend material carefully and pass through 30 μm nylon mesh (Pre-Separation Filters, # 130-041-407) before separation. ▲ Samples or buffers with high viscosity might cause reduced column flow or column clogging. 1.4 Reagent and instrument requirements ● Buffer: Prepare a solution containing phosphate-buffered saline (PBS), pH 7.2, 0.5% bovine serum albumin (BSA), and 2 mM EDTA by diluting MACS BSA Stock Solution (# 130-091-376) 1:20 with autoMACS? Rinsing Solution (# 130-091-222). Keep buffer cold (2?8 °C). Degas buffer before use, as air bubbles could block the column. ▲ Note: The recommended buffer is PBS supplemented with EDTA and BSA. The suitability of other buffers has to be tested experimentally. ▲ Note: Use degassed buffer only! Degas buffer by applying vacuum, preferentially with buffer at room temperature. Excessive gas in running buffer will form bubbles in the matrix during separation. This may lead to clogging of the column and decrease the quality of separation. ●MACS MicroBeads for magnetic labeling of cells. ●MidiMACS Separator, QuadroMACS Separator, VarioMACS Separator, SuperMACS Separator or SuperMACS II Separator. ●LS Column Adapter (# 130-090-544) for use with VarioMACS Separator or SuperMACS Separator, or Adapter for MS, LS and LD Columns for use with SuperMACS II Separator. ●MACS Acrylic Tube Rack (# 130-041-406) or MACS 15 mL Tube Rack (# 130-091-052). ●(Optional) Pre-Separation Filters (# 130-041-407) to remove cell clumps. LS Columns LS Columns Order no. 130-042-401 LS Columns plus tubes Order no. 130-041-306 140-000-127.08 Miltenyi Biotec GmbH Friedrich-Ebert-Stra?e 68, 51429 Bergisch Gladbach, Germany Phone +49 2204 8306-0, Fax +49 2204 85197 macs@miltenyibiotec.de https://www.360docs.net/doc/c211983487.html, Miltenyi Biotec Inc. 2303 Lindbergh Street, Auburn, CA 95602, USA Phone 800 FOR MACS, +1 530 888 8871, Fax +1 530 888 8925 macs@https://www.360docs.net/doc/c211983487.html, page 1/2

【原创】全球知名试剂公司(史上最全)

精心整理 【原创】全球知名试剂公司（史上最全） 原创 2017-06-29 找试剂网 找试剂网美国ProliantProliant 是世界上最大最有经验的动物源蛋白生产81,400年。克隆抗体的生产效率并降低其生产的成本。Abnova 具有每个月开发500个小鼠单克隆抗体的能力，他们的目标是：人类基因组中的每一个表达基因都至少有一种抗体。美国NovusNovus 位于美国科罗拉多州，是一家著名的抗体公司。公司的愿景是提供优质的产品，完善的客户服务以帮助客户快速找到最适合的抗体产品。通过全球代理商和网络提供10000多种研

究级抗体，涉及生命科学的各个领域。美国BDBD是世界上最大的生产和销售医疗设备、医疗系统和试剂的医疗技术公司之一。公司于1897年在纽约成立，总部位于美国新泽西州的富兰克林湖，业务遍及全球。公司的业务可分为BD医疗、BD诊断、BD生物科学三大类，生产销售包括医用耗材、实验室仪器、抗体、试剂、诊断等产品。公司的服务对象包括医疗 1976 种之多）及相关的多达250余种单克隆、多克隆抗体；细胞凋亡、Caspase 及胶原酶系列以及细胞因子类等热点领域。MBLMBL,成立于1969年，是日本第一家抗体生产商。公司早期致力于研究生产血浆蛋白质抗体,是抗体研究、发展和生产的先锋者。现在，公司提供3000多种细胞骨架、致癌基因产品和信号转导蛋白质抗体。近年来，MBL大力引进重组DNA细胞

和细胞融合技术来开发用于疾病诊断和疗效观察的诊断试剂。另外，公司开发了大量分子生物学和细胞生物学研究的产品，包括抗体和可溶性FasELISA试剂盒。CSTCellSignalingTechnology(CST)是最知名的和老牌的信号转导公司之一，专注于信号转导产品的提供和研究。产品具有种类多、质量好、价格低、引用文献多等优点，是您进行信号转导研究不可多得的 大 司。 4500 品。 Pierce 12年来, 干形式提供,以方便运输和储存.目前公司正在扩大产品线,生产抗原亲和多抗及其生物素标记物,ELISA试剂盒和新型抗体。主要以小包装的细胞因子受广大研究生客户喜爱。CaymanCayman向世界科学工作者提供多研究领域的生化和免疫试剂。包括：肿瘤、氧化氮、神经学、凋亡、氧化性损伤、内分泌学等等。他们有用于检测的特色试剂盒，如：类花生酸类物质、游

CliniMACS介绍

美天旎细胞治疗平台CliniMACS系统简介 第一部分、德国美天旎生物技术有限公司及MACS细胞分离技术介绍第二部分、CliniMACS系统在临床细胞治疗中的应用 一、CliniMACS细胞分选仪及其配件介绍 二、CliniMACS CD34系统的安全性 德国美天旎生物技术有限公司 上海市仙霞路319号 远东国际广场A栋2301室200051电话：（86 21）62351005 传真：（86 21）62350953 服务热线：800 820 2606 北京市东城区朝阳门内大街 银河SOHO D座50723室100010 电话：（86 10）64107101 传真：（86 10）64100990 https://www.360docs.net/doc/c211983487.html,

第一部分德国美天旎生物技术有限公司及MACS细胞分离技术介绍 德国美天旎生物技术有限公司（Miltenyi Biotec GmbH）是一个以细胞分选技术为主、拥有多样化产品的生物技术公司。开发研制并销售世界上最先进的细胞分选、细胞生物学、相关分子生物学产品和技术，尤其在干细胞分选、DC细胞分选与分析、细胞因子分泌细胞分选与分析、免疫治疗、再生医学方面占有极大的优势，CD133、BDCA-2（CD303）、BDCA-4（CD304）单抗为我公司专利产品。 我公司总部位于德国科隆，在科隆和德国北部罗斯托克均有cGMP生产机构。我们的产品有免疫磁珠、特异性细胞及蛋白质或者DNA/RNA分选用的MACS分选设备、单克隆抗体、无菌溶液、基础和特殊培养基、血液/血浆治疗用的生物学吸附剂、LIFE18血浆分离机、流式细胞仪及相关耗材。 MACS技术已成为细胞分选的标准方法，从实验室到临床，从小规模到大规模，从常见细胞到稀有细胞和复杂的细胞亚群，从人类和小鼠细胞到其它种系的细胞，MACS技术提供了可在每个实验室进行高品质细胞分选的方法。 MACS技术原理 MACS技术为德国美天旎生物技术有限公司的专利产品，是一种集合了免疫学、细胞生物学、磁力学等知识于一体的高度特异性细胞分选技术，其高度特异性来自抗体对抗原的特异性识别。主要组成成分为MACS微珠、MACS分选柱和MACS分选器。MACS微珠是与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒。MACS分选柱置于一个永久性磁场—MACS分选器中，可以将磁力增强1000倍，足以滞留仅标记极少量微珠的目的细胞。用缓冲液冲洗分选柱，所有未标记的细胞被冲洗掉。分选柱离开磁场，即可获得被标记的细胞组分。所有的操作在2.5~30分钟内即可完成，得到的细胞可立即用于后继实验。 MACS技术优点 1、稳定、高质量的分选——使用MACS技术，可获得高纯度（90-99%)、高回收率的分选细胞群。 2、对细胞无损伤——50nm微珠和MACS分选柱均无毒性，对细胞无损伤，可以纯化有活力和功能活性的细胞而不影响其活性。 3、操作简便、快速——MACS技术操作简单，消毒方便。磁珠孵育时间很短，仅需15分钟。手动分选可在30分钟内完成，autoMACS分选可在2.5-10分钟之内完成。 4、从实验室到临床——MACS技术可以实现从105到1011个细胞分选。如果使用频率高，可选用autoMACS；密闭系统内无菌分选细胞，可选用CliniMACS。 5、分选后细胞适用于后续实验——流式细胞术、显微镜分析和分子生物学研究显示MACS分选对细胞没有任何影响。分选后细胞适用于细胞培养和体内实验。此外，分选得到的标记和未标记细胞组分均可回收利用。 6、从细胞到分子分选——MACS技术不仅可以分选各种细胞，还可以分选转染细胞、亚细胞物质、蛋白质、DNA、RNA及mRNA。 MACS分选策略 有两种基本的分选策略：阳性分选和去除分选。复合分选策略是将两种基本分选策略相结合或者联合使用多选微珠，从而实现细胞亚群的分选。 1、阳性分选策略（Positive selection strategy） 阳性分选中，目的细胞被磁性标记后，作为阳性标记组分直接分选出来。分选后的细胞不必去除MACS 微珠，可立即用于培养或者后续操作。该方法可以将磁性标记的靶细胞富集10000倍。阳性分选策略优点：纯度高，回收率高，操作迅速、简便。

循环肿瘤细胞(CTC)的富集与检测

循环肿瘤细胞(CTC)的富集与检测 上海优宁维生物科技有限公司 1896年，澳大利亚学者Ashworth在一例转移性肿瘤患者血液中首次观察到从实体肿瘤中脱离并进入血液循环的肿瘤细胞，率先提出了循环肿瘤细胞（CTC）的概念。多数肿瘤几乎都会通过血液传播到身体的其他器官，癌细胞远端转移是导致肿瘤患者死亡的主要原因，因此早期发现血液中的肿瘤细胞，对于患者预后判断、疗效评价和个体化治疗有着重要的指导作用。 随着研究的深入，研究人员鉴定出了更多的癌细胞生物标记物，如人类表皮生长因子受体2(HER2+)、表皮生长因子受体（EGFR）、类肝素酶（HPSE）和Notch1等。之前报道称这四种生物标记物与癌细胞迁移相关，结合这四种标记物就能够特异的标记扩散的癌细胞，并确定最终这些癌细胞所转移的位置。 大量实验证明循环肿瘤细胞的出现与乳腺癌患者的临床分期、及预后均密切相关。循环肿瘤细胞检测作为一种简单的血液检测，可随时捕捉并评估循环肿瘤细胞以确定转移性乳腺癌患者的预后。大量研究已经证实，CTCs检测将有助于乳腺癌复发转移监控、判断患者预后、指导术后辅助治疗等。与淋巴结、骨髓相比，外周血标本易获得、创伤性小、可反复采集，是临床上常规检测较为理想的标本来源，大大提高了这一方法的应用价值。 而且CTCs不仅是肿瘤预后和预测指标，也有可能成为药效学的生物标志物。比如在药物治疗后1-2周，通过CTC的检测，临床医师就可以观察循环细胞数量

的改变即可预测治疗效果，效果不好的以及时调整方案，不必让患者停留在无效治疗中甚至死亡。 目前，美天旎公司为您提供富集和检测CTC的多种产品，如autoMACS Pro全自动磁性细胞分选仪、手动磁珠分选设备及CTC富集磁珠，让您的CTC研究更便利和高效。 MACS分选用于肿瘤细胞的富集，有两种策略： ?阳性分选：CK/CD326、ErbB-2、CD30或其它肿瘤特异性标志优点：特异，受操作和其它非特异性颗粒影响小 缺点：不同类型的肿瘤细胞表达不同的标记物，选择某种标志时 不是所有肿瘤均表达 ?去除分选：CD45磁珠去除白细胞，富集肿瘤细胞 优点：覆盖面广，可以函概所有肿瘤 缺点：阴性成分中含有多种其它细胞和颗粒 针对不同类型的肿瘤细胞，我们提供各种肿瘤细胞富集和检测试剂盒：

美天旎公司磁珠分选产品

美天旎公司MACS(磁珠分选)相关产品 一、MACS微珠（MicroBeads） MACS微珠是一种与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒，用于目的细胞或者去除细胞的磁性标记。微珠直径约有50nm，比细胞小200多倍，体积为细胞的百万分之一，光学显微镜下不可见。微珠由多聚糖和氧化铁组成，无毒性，对细胞无损伤，可以生物降解。MACS微珠与流式细胞仪兼容，不会影响细胞的光散射特性；磁性标记只占用20－30％的结合位点，不影响细胞的荧光抗体标记。此外，MACS微珠可以最大限度地避免细胞活化；无需解离磁珠，可以直接进行后续实验：如流式细胞仪分析或分选、细胞培养、分子生物学研究、回输给人或者动物。 MACS微珠主要有三种：直标微珠、间标微珠、多选微珠。其中间标微珠有抗免疫球蛋白微珠、抗生物素微珠或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠。多选微珠是专门为分选细胞亚群而研制的一种微珠。这种微珠通过特殊的方式与抗体偶联，在第一次阳性分选完成后，与细胞结合的多选微珠可以被解离试剂剪切下来，阳性分选的细胞可以进行再次阳性分选或者去除分选。 MACS技术分选的CD8阳性T细胞（箭头所示为磁性结合在细胞表面的微珠） 二、MACS分选柱（Separation Column） MACS分选柱是一类填充有不同规格铁珠的塑料容器，铁珠表面有亲水包被，因此不会损伤细胞。在磁场外MACS分选柱不带有磁性，但是当置于一个永久性磁场—MACS分选器中时，分选柱内的铁珠可以使分选器的磁场增强1000倍，足以滞留仅标记有极少量微珠的目的细胞；磁性标记细胞从分选柱中通过时可以受到均匀的磁力作用，从而提高分选纯度和回收率。手动操作在30分钟内可完成，自动分选仅需2.5-10分钟，得到的细胞可立即用于后续实验。此外，大多数MACS分选柱都是无菌包装，一次性使用，可以满足细胞培养所需的无菌条件。 三、MACS分选器（MACS Separators） MACS分选器由永久性磁铁和支架构成。与分选柱一起组成高强度的梯度磁场。根据应用范围分为研究用和临床应用的MACS分选器，根据操作方式分为手动和自动分选器。 1、MiniMACS分选器和OctoMACS分选器