药物筛选完全解决方案

药物筛选完全解决方案
Wherever researchers are looking for new drugs, you will find Molecular Devices
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临床研究
快速索引
药物筛选简介………………………..3 药 物 筛 选 流 程………………………4 药物筛选主要靶点…………………..4 GPCR 药物筛选………………….....5 激酶药物筛选……………………….12 离子通道药物筛选…………………..18 膜转运体……………………………..25 MD 技术平台………………………..28
药物筛选简介
药物筛选是现代药物开发流程中检验和获取具有特定生理活性化合物的一个步骤，系指通 过规范化的实验手段从大量化合物或新化合物中选择对某一特定作用靶点具有较高活性化合物 的过程。是临床新药开发的必经过程。 一个新药的从研发到临床使用历时十年以上，耗资 10 亿美金。平均而言，每一百万个化合 物中最终能被 FDA 批准上市的只有一个， 而上市的药物中， 也只有 30%的药物能够获得的利润， 收回其研发成本。 制药公司年收入的 20% 用在新药的研发上， 全球每年在新药上的投资超过 300 亿美金。在先导化合物的后续筛选过程中，40% 到 60%的先导化合物在后续的 ADME/T（药物 吸收、分布、代谢、分泌和毒性检测）中被淘汰。72% 的药物研发费用被浪费在：日益增长的 临床耗费、体内无法预测的调控环境以及药物的副作用方面。因此，选出优良品质的先导化合 物是药物筛选的一个至关重要的过程。各制药公司在药物开发的早期都会收集尽可能多的关于 靶点、待测化合物性质、以及现有筛选方法手段优劣性的信息，以确保尽快剔出阴性化合物， 拿到优良品质的先导化合物，降低药物筛选的成本。 MD 公司一直致力于新产品的开发和革新， 为四类主要靶点的药物筛选提供了从仪器到试剂 的完整地解决方案，为优良先导化合物的筛选提供了有力保障。
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药物筛选流程：
筛选过程 （2-10年） 筛选不同阶段的获得 成功的化合物总量 >10,000 250
MD 系统
鉴定先导化合物 临床前期：实验动物试验 临床一期：20-40健康志愿 者测试，确定安全性和剂 临床二期：100-300名病人志愿者 测试，观察药物效应和副作用。
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临床三期：3000-5000名病人志愿者， 用于观测长期使用的不良效应。 FDA 检测/批准 其他的上市后检测
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Year
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药物筛选的主要靶点
FDA 批准的前十大类药物分类示意图
将这些靶点归类，
GPCR 受体 离子通道 膜转运体 激酶
四个靶点占靶点总量的 70%以上，组成目 前药筛领域的四大主要靶点。
13.4%
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GPCR 筛选方案
GPCR 药物筛选简介
GPCR 受体超家族总共有 600-1000 种蛋白，是目前已知的具有治疗前景的最大的一类分子作用 靶蛋白。目前的药物筛选中有 40%是针对 GPCRs 的筛选，且市售的药物中有超过 50%的药物是通过 GPCR 发挥药效的。GPCR 已经成为药物筛选的第一大类靶点。 GPCR 即与 G 蛋白偶联受体，G 蛋白（GTP 结合蛋白）包含三个亚基：Gα、β和γ，形成三聚体。 当细胞外配体与 GPCR 结合，GPCR 构象改变， 激活 G 蛋白，GTP 磷酸化 Gα亚基，Gα亚基从三聚体 解离， 与β和γ亚基分离。Gα亚基进入胞浆进而激活下游效应器 AC（磷脂酶 C）和 PLC（腺苷酰 环化酶）并产生生物学效应。βγ亚基也能够激活其他通路，如通过磷脂酶 A2 激活心肌细胞 K+通 道等，产生生物学效应。但通常所讲的 G 蛋白一般是指α亚基。
Gα的不同亚型 Gαs、Gαi 和 Gαq 激活后会产生不同的生物学效应，其中 Gas-偶联受体激活 腺苷酰环化酶 (AC) 导致 cAMP 增加；Gai-偶联受体激活腺苷酰环化酶 (AC) 导致 cAMP 降低；Gaq 偶联受体激活磷脂酶 C (PLC)，产生 IP3，IP3 能使细胞内 Ca2+增加（见上图） 。 由于 Gαs、Gαi 和 Gαq 激活后会产生不同的生物产物，因此通过 Gα的不同亚型 Gαs、Gαi 和 Gαq 激活后会产生的生物学产物的检测， 可达到筛选 GPCRs 的目的。目前是市场上对 GPCRs 的 筛选方法众多， 包括同位素标记法、荧光标记法、抗体标记法等等。通过不懈的努力，Molecular Devices 也为 GPCRs 为靶点的药物筛选做出了独有的贡献。
Molecular Devices 为 GPCR 提供的解决方案
● 通过 Gq 通路检测的方法：
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1， 细胞内钙离子浓度变化荧光检测法
GPCR 信号通过 Gq 会使细胞内钙释放，因此通过钙离子敏感荧光探针检测细胞内钙释放，即可 检测通过 Gq 途径信号转导的 GPCRs。 MD 公司的 FlexStation3、FLIPR 能够配合使用高效高信噪比钙试剂盒：Calcium 3、Calcium 4 和 Calcium 5 Assay Kit，FLIPR 以每小时获取 3 万个以上的数据点的通量实现 GPCRs 的高通量筛 选。试剂盒的原理如下：
Background Agonist/Antagonist is
significantly reduced by masking the extracellular
R-L Complex
Ca++
Active Gq
Intracellular mediators
Ca++
Increase in cytosolic Ca2+ can be detected by FLIPR using calcium sensitive dye
Ca++
Ca++
该试剂盒内包含钙离子敏感的荧光指示剂和 Mask dye。在细胞外溶液中，荧光指示剂的荧光信 号被 Mask dye 所掩盖。在细胞孵育过程中，细胞膜上的酯酶切除指示剂分子的 AM 部分，从而使该 分子不能再反向通过细胞膜回到细胞外溶液中。Mask dye 不能通过细胞膜，留在细胞外液中掩盖 背景荧光信号。当细胞内钙离子浓度变化时，钙敏感指示剂的荧光信号也将会发生变化。 应用实例： 使用 Calcium 4 Kit 试剂盒， 在内源性表达 M1 受体的 CHO 细胞上测定激动剂 Carbachol 诱导的 钙离子浓度变化。
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以上为软件界面截屏图。运用 ScreenWorks?系统软件可实现从数据获取到完成统计分析一体化。
2，HTRF IP1 检测法
HTRF 是 CisBio 公司的一检测平台，TR-FRET 法是利用荧光素供体和受体之间的能量转移现象 实现对分子结合状态的检测手段。HTRF 是一种使用抗体的检测方法，因此检测方法更加灵活。 GPCR 的 Gq 激活后会诱导产生 PLC，PLC 的代谢产物为 IP1，通过 HTRF 的方法，使游离 IP1 与 标记 IP1 竞争性结合于抗体，能够阻断 FRET 过程，从而检测 IP1 分子，并实现 GPCRs 的筛选。 具有 HTRF 功能的酶标仪 SpectraMax M5e 和 FlexStation 3 能够实现 IP1 分子的快速高通量检测。
IP1 standard curve
EC50 = 358 nM Z’ = 0.84
CHO-M1 cell-based assay
EC50 = 0.64 uM Z’ = 0.91
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● 通过 Gi 和 Gs 进行信号通路检测的方法： 1，通过 LiveWare Cell Lines 检测细胞内钙离子浓度变化
超过 60% GPCRs 是通过 Gi 和 Gs 诱导 下游信号通路来发挥其生物学作用， Gi 和 Gs 通过 cAMP 发挥作用， 不会使 细胞内的钙离子发生变化。为解决这 一 问 题 ， Molecular Devices 推 出 LiveWare 细胞系。 LiveWare 细胞白表 达 G 蛋白嵌合体。这种嵌合体包含 Gq 蛋白复合体的α亚基，其 5 碳末端氨 基酸被替换为其他 G 蛋白（如 Gαs， Gαi，Gαo，或 Gαz）的碳末端，这 些氨基酸负责将受体与其 G 蛋白耦 合。因此，这类嵌合体即能在 GPCR 与 配体结合时激活，也能诱导下游的细胞内钙离子释放，引起细胞内钙离子浓度变化。将这些具有特 定非 Gq 嵌合体与相应的 GPCR 受体共表达，会使这些受体被激活后产生细胞内钙离子变化的效应。 这样即可实现对无法造成细胞内钙离子变化的 GPCRs 的筛选。 通过 LiveWare 细胞配合 FLIPR 高通量筛选设备和高效高信噪比 Calcium 试剂盒，以每小时获 取 3 万个以上的数据点的通量实现 GPCRs 的高通量筛选。FlexStation 3 实现 GPCRs 的中、低通量 筛选。
2，CatchPoint? cAMP 检测法
GPCRs 信号通过 Gi 或 Gs 会导致细胞内 cAMP 水平的上升或下降，检测 cAMP 的水平也能够实现 对 GPCRs 的筛选。 Molecular Devices 推出的 CatchPoint? cAMP 试剂盒是一款专门检测细胞裂解液 cAMP 水平的 试剂盒试剂盒内包含被荧光 HRP 标记的 cAMP 标准品。当细胞裂解液中 cAMP 增加，会会竟争性降低 标准的连接 HRP 的 cAMP 和抗体结合得几率（如下图） ，从而使荧光信号减弱，达到检测 cAMP 的目 的。实验结果可用具荧光功能的酶标仪，如 SpectraMax M5 来检测。原理如下：
Bottom Read
Top Read
左 图 是 使 用 SpectraMax M5 和 SoftMax Pro 所作的 Camp 的校正曲线
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● 通过 Gq, Gi, 和 Gs 进行信号通路检测的方法：
Molecular Devices 也推出一些独特的解决方法，适用于筛选所有 GPCRs。
1，CellKey?检测法
当 GPCR 激活，Gq, Gi, 和 Gs 会使细胞内钙离子浓度和 cAMP 水平发生改变，这些变化都会使 细胞内肌动蛋白聚合、张力纤维形成，而使单层细胞的电阻值发生变化。 CellKey?系统能够检测单层细胞结合刺激物或配体造成的细胞阻抗的变化，因此能够间接检测 GPCR 的活性。原理如下：
Cellkey
应用实例：
Muscarinic M1 (transfected, Gq) Serotonin 5HT1B (endogenous, Gi) Prostanoid EP4 (endogenous, Gs)
2，通过形态学对所有类型 GPCRs 进行筛选
Molecular Devices 推 出 独 有 的 Transfluor 检测法 Transfluor 平台是通过形态学特征， 使用高内涵筛选（HCS）的方法能够检 测所有类型 GPCRs 活性的方法。该法 基 于 在 GPCR 内 化 和 脱 敏 过 程 中 β -Arrestin-GFP 分布变化来检测 GPCR 活性。该检测法不依赖于信号转导通 路和 GPCR 的类型（Gi, Go, Gs, Gq） ， 能够检测包含检测困难的 GPCR 类型
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在内的几乎所有 GPCRs， 包括孤儿受体。 原理如图所示。 细胞稳定表达 GFP 标记的蛋白β-Arrestin。 当 GPCR 受体与配体结合后，会启动受体的脱敏过程。GRK 使 GPCR 受体磷酸化，β-Arrestin 进而 与磷酸化了的 GPCR 受体相结合，促使受体内化，聚集， ，在细胞内形成荧光斑点和颗粒。这些形态 学的变化可用荧光显微镜或高内涵系统观察分析。 MD 的高内涵筛选系统 ImageXpress 系列产品能够通过检测 GPCR 脱敏和循环形成的 GPCR 受体 斑点和囊泡，实现高通量的进行 GPCR 药物的筛选,为 GPCR 提供全套解决方案。
应用实例 当 GPCR 激活时，β-抑制 蛋白从胞浆转移到细胞 膜，结合受体并使其内陷 形成斑点和内体小泡。分 别将异丙肾上腺素和普萘 洛尔进行倍比稀释（浓度 如表） ，并将其加入斑点和 小泡形成细胞（普萘洛尔 组在加入 10uL 175nM 的 异丙肾上腺素进行刺激后 加入） ，将 细胞固定后 用 DAPI 进行细胞核染色， 用 ImageXpress 进行 20X 成 像 扫 描 并 使 用 AcuityXpress 注释多孔板 内的复合物和浓度，进行 曲 线 拟 合 获 得 EC50 和 IC50。
对照
受刺激后形成 Pits
受刺激后形成 Vesicles
斑点形成量效曲线
囊泡形成量效曲线
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综上所述，对于每一类型的 GPCRs, Molecular Devices 都推出了自己独有的解决方案，包括仪 器和试剂。这些解决方案都深受广大客户的欢迎，部分方法被认为是这一领域的革新技术。 总结 如下：
GPCR 筛选解决方案：
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激酶筛选方案
激酶药物筛选简介
十年前当人类基因组刚刚发布的时候，在成千上万的蛋白库中理论预测可能为激酶的蛋白大概 500 种以上。在已公认的药物靶点中， 蛋白激酶已成为药物发现领域中第 二大类药物筛选靶点。 激酶包括蛋白激酶、磷酸酶和磷酸 二酯酶。蛋白激酶是通过共价调节 的方式将磷酸基团转移到其他蛋白 上发挥功能的，它们是激酶药筛靶 点分子中的最大一类。蛋白激酶表 达和功能失调会导致癌症和其他疾 病。蛋白磷酸酶和磷酸二酯酶则是 信号转导通路中的关键调控因子， 在癌症、神经退化、糖尿病和其他 疾病中它们的调控都是紊乱的。
传统研究激酶、磷酸酶和磷酸二酯酶活性的实验方法有两种： 一是通过放射性同位素标记，另一种是高特异性的抗体标 记；前者存在安全和废弃处理的问题，而后者则有昂贵和费 时的问题。
激酶信号图
Molecular Devices 公司激酶提供的解决方案
为了解决这些现存问题，Molecular Devices 推出了专利的 IMAP?技术，一种基于磷酸基团检测的非放射性和均相分析 方法。IMAP 技术不基于特异抗体技术，因而它是一种通用 技术平台，可应用于任何激酶、磷酸酶和磷酸二酯酶的检测。 IMAP 提供了一个应用于激酶、磷酸酶和磷酸二酯酶筛选的 完整的实验体系，也成为了准确分析激酶、磷酸酶和磷酸二 酯酶的通用平台技术。 酶反应混合体系是由以下两个组分组成： 1）荧光标记的底物+酶+反应 buffer； IMAP ?Technology 2）IMAP 结合体系，其特异结合磷酸化的底物，并终止酶 反应； 底物与 IMAP 珠子的结合作用可以由荧光偏振（FP） 和时间分辨荧光共振（TR-FRET）来检测。
IMAP Reagent Kits
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另外，为了帮助研究者来选择合适的激酶底物，Molecular Devices 还开发了 IMAP Substrate Finder Kits 可以快速准确地在 384 微孔板中检测一种或几种激酶相对于多种多肽底物的活性。
目前，IMAP 技术已经应用到的激酶分布图
TKL TK STE GYC
CMGC CK1
AGC
CAMK
IMAP 技术原理:时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）和荧光偏振（FP） 1、 IMAP TR-FRET 检测原理： 激酶与荧光标记的多肽或蛋白底物 反应后，加入亲和溶液，在此体系中， 纳米粒子珠会再共价连接上一个铽元素 标记的供体分子(Tb)-Donor；当磷酸化 的底物多肽或蛋白分子结合到这个纳米 粒子上，磷酸化的底物小分子就会与粒 子珠上的铽元素标记分子(Tb)-Donor 靠 近，因而就会在(Tb)-Donor 和磷酸化底 物小分子间产生 TR-FRET 效应， 通过检 测这个效应来检测酶活性。 蛋白酶酶和磷酸酶
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磷酸二酯酶
2、 IMAP FP 检测原理： 在激酶与荧光标记多肽底物反应 后，加入亲和溶液，磷酸化的小分子 多肽底物就会结合到大分子的包含三 价金属离子的纳米珠子上，从而降低 了小分子底物分子的自旋速度，因而 也就增加了其偏振化程度。
激酶和磷酸酶
磷酸二酯酶
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3、 IMAP Substrate Finder 原理 在一块 384 孔板上包含 50 种以上已经经过验证的多肽底物（Substract）, 每一底物至少有四个 重复，方便客户用于筛选不同的参数。试剂盒附有 Substrate，方便客户分析核对数据。
IMAP Substrate Finder可让研究者在几小时内
筛选数以十计的感兴趣激酶的底物分子
酪氨酸激酶类 底物发现试剂盒
丝氨酸、苏氨酸激酶类 （STE/CMGC/CK1/TKL） 底物发现试剂盒
丝氨酸、苏氨酸激酶 类（CAMK/AGC） 底物发现试剂盒
IMAP Substrate Finder 实验流程 IMAP? Assays仪器兼容性 为了简化分析实验设计和达到最佳实验效果，MD已将IMAP Assay Kits在FlexStation? 3 和 SpectraMax? M4/ M5/M5e，Paradigm系统， 以及FilterMax F3, F5上进行了优化，此试剂盒有大体 积装适用于高通量筛选和小体积装适用于低通量应用。 应用实例： 实例一：鞘氨醇脂肪酸激酶的IMAP?（TR-FRET）筛选平台研究 鞘氨醇脂肪酸激酶实验分析不仅是采用IMAP TR-FRET第一类激酶家族，也建立了一个非常重要的 高通量药物筛选靶位。
三种底物鞘氨醇水平- 鞘氨醇激酶 1 浓度变化曲线
三种底物鞘氨醇水平- 鞘氨醇激酶 2 浓度变化曲线
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鞘氨醇激酶1和2 - ATP 的依赖
鞘氨醇激酶1 -ATP 浓度效应曲线
鞘氨醇激酶2 -ATP 浓度效应曲线
鞘氨醇脂肪酸激酶的IMAP?（TR-FRET）筛选平台实验总结： ? 低背景 ? 底物浓度灵活 ? 不需抗体 ? 比率计算 ? 低化合物干扰 ? 高灵敏度 ? 通用平台 ? 高通量兼容
实例二：蛋白激酶的IMAP?（FP）筛选平台研究
Syk络氨酸激酶的IMAP-FP分析与免疫 荧光偏振（FPIA）分析对比，两图中： 60%激酶抑制： S/N值AB
底物-3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1（PDK1） 浓度效应曲线，四种体系： 1）活性 PDK + 失活SGK 底物 2）仅活性SGK 底物 3）仅失活SGK 底物 4）仅活性 PDK
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蛋白激酶 PKCα和 CDK5/p35 针对不同底物的稀释效应曲线研究
蛋白激酶的IMAP?（FP）筛选平台实验总结： ? 可广泛应用于各种激酶的药物筛选（多样的底物选择和< 1μM 及 >300 μM的ATP浓度 范围） ? 与免疫荧光偏振相比较具有更大的信号检测范围 ? 可作为激酶级联效应研究，使得处于非活性状态下的激酶抑制物鉴定成为可能 ? 荧光标记的蛋白可作为激酶底物
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离子通道筛选方案
离子通道药物筛选简介
离子通道是一类由基因编码， 位于细胞膜上的跨膜蛋白， 是各种无机离子跨膜被动运输 的通路。现已有 406 种编码离子通道的人类基因 被鉴定出来，可分为 100 类左右。离子通道广泛 分布于每一种或细胞上。细胞膜上离子通道的结 构和功能正常是维持生命过程的基础，因基因突 变或药物作用而导致的离子通道结构改变和功能 障碍与一系列疾病的发生和发展有关，被称作离 子通道病。近年来，以离子通道为靶点的药物开 发也越来越受关注，称为药物筛选的第三大靶点。
离子通道相关疾病 目标分子 药物安全性评估 非目标分子
另一方面，在药物早期的安全性筛选过程中，对 hERG 通道的毒副作用检测已经变成必 需的步骤。hERG 通道产生的电流是心室复极中最重要的电流。 通道被药物抑制后直接导致 Long QT 综合症，很可能演变成尖端扭转型室性心动过速，心室纤颤，直至猝死。 目前发 现几乎所有的临床药物所至的 LQT 或者 TdP 都作用于 hERG，且导致 hERG 抑制的药物在化 学结构上没有明显的共性，从而很难预测，仅有通过实验的方式给予解决。2004 年, ICH 和美国 FDA 都颁布关于非临床检测 Ikr (其中主要是 hERG)的规章，要求药物上市时必须提 供作用于离子通道的电流变化数据，否则新药不得用于临床。为此,新的早期药物安全评测 方式需要引入制药研发过程中，以便及早发现候选化合物潜在的心脏毒性,尽可能减少新药 研发的投资与风险。 目前，除膜片钳制外能用于离子通道大规模药物筛选的方法主要有： Radioligand binding assay Fluorescent dye probes: 如 calcium-sensing dye 和 voltage-sensing dyes Ion flux assay : 包括 Radioactive ion flux assay 和 AAS，一种用非放射性元素做离子示踪
剂的方法。
膜片钳技术
Molecular Devices 公司离子通道提供的解决方案
20 多年来，MD 公司为离子通道的药物筛选作出了杰出的贡献，从科学仪器到相关的试 剂，通过多年的不懈努力， MD 的系列产品为以离子通道为靶点的药物开发提供了完整的解 决方案。MD 公司的 FLIPR 用于检测使用荧光染料标记的细胞内钙和膜电位敏感的荧光染料
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实时变化，被各大公司广为使用。
1，荧光染料标记法
1）钙敏感荧光染料 一些离子通道对钙离子通透，当被激活时，会引起细胞内钙离子浓度增高。因此使用钙 敏感的荧光染料标记细胞内钙离子， 实时监控细胞内钙离子浓度变化， 可间接检测离子通道 的活动。 目前，Molecular Devices 推出荧光 Calcium 4 Kit 和 Calcium 5 Kit 免洗试剂盒，实验步 骤简单，操作方便，且用于孵育的染料无需洗脱，受到广大客户欢迎。Molecular Devices 的仪器 FLIPR 和 Flexstation 3 可用来实时监测钙离子的荧光信号变化。 2）电压敏感荧光染料 静息状态下，细胞膜两侧存在电位差，处于极化状态。当离子通道活动时，带电离子通 过离子通道，改变膜两侧的电位差。根据这一原理，Molecular Devices 推出电压敏感染料 免洗试剂盒。借助检测细胞膜两侧荧光信号的变化间接反应离子通道的活动。同样， Molecular Devices 的仪器 FLIPR 和 Flexstation 3 可用来实时监测荧光信号变化。 试剂盒的原理如下：将细胞孵育于电压敏感的荧光指示剂和 Mask dye 中，荧光指示剂 附着于细胞膜外侧，并为 Mask dye 所掩盖。当细胞膜上的离子通道打开或由其他原因导致 细胞的去极化时，荧光指示剂移至细胞膜内侧，但 Masking dye 不能进入细胞，荧光指示剂 的荧光释放，因此可以检测到荧光信号。
应用实例：使用 FLIPR membrane potential red kit，在 CHO 细胞上测定 KCl 诱导的去极 化
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以上实用荧光染料标记，用 FLIPR 来检测荧光信号变化的方法，间接测量离子通道的 活动，具有通量高，成本低的特点，每天可获得的数据点达 150,000 个，因此是对较大化合 物库进行初级筛选的首选方法。
2． 膜片钳技术筛选离子通道
- 膜片钳技术被称为研究离子通道的“金标准”
美国 MD 公司研制的 AXON 系列膜片钳放大器一直深受广大学者的欢迎和喜爱， 其销量一 直排在同行业产品的最前列。MD 公司也是最早开始研制全自动膜片钳系统的公司之一。在 全自动膜片钳的研制和开发中，MD 公司也同样一直走在行业的最前列。目前已经投入市场 的全自动膜片钳系统有 Ionworks Quattro、 Ionworks Bararcucud 和 PatchXpress。 Molecular Devices 公司全自动膜片钳技术原理 全自动膜片钳系统使用平面电极技术。 平面电极的设计原理来自于传统膜片钳系统的玻璃微 电极。在传统的膜片钳实验中，实验人员使用尖端直径 1~ 2 μM 的玻璃微电极接触细胞表 面，与细胞形成紧密封接，再打破细胞膜，形成全细胞记录模式。如果将电极尖端旋转（如 下图） ，使其与细胞接触的部位移至细胞底部，并将电极后端无限拉伸，就形成了平面电极。 平面电极技术摒弃了玻璃微电极，以电极芯片上直径 1~ 2 μM 的小孔来代替玻璃微电极的 尖端，从而使同时平行记录多个细胞得以实现。平面电极配以多通道膜片钳放大器，自动化 的给药灌流系统和其他一些外部设备，就组成了全自动膜片钳系统。
传统膜片钳 微电极
旋转
拉伸
平面电极
传统膜片钳记录模式图
全自动膜片钳记录模式图
1）,利用 PatchXpress 7000 A 研究离子通道 PatchXpress 7000A 全自动平行膜片钳系统实现了 GΩ封接，是真正使用全细胞膜片钳方法
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直接记录离子通道活动的全自动系统。其通量最高为 16， 一次实验可同时记录 16 个细胞。 可以研究电压门控离子通道和配体门控离子通道。 是一套既可以用来做药物筛选， 又可以用 来进行常规基础研究的膜片钳实验系统。 应用实例： （1）利用 PatchXpress 研究 Nav1.5 通道的电生理学特征。
Nav1.5 通道的典型电流波形图。上图，原始图； 下图，漏减处理后的电流波形图；插图，电压刺激模 式。 细胞膜电位钳制在-120 mV，去极化梯度：-70 mV ~ +80 mV
（2）利用 PatchXpress 研究 GABAA 受体的活动
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