快速学会做药敏试验
快速学会做药敏试验
一、药敏实验在临床诊断中应用意义：
1、在畜牧产业中，各种细菌性疾病很容易给养殖业造成经
济损失，使用抗生素防治细菌性疾病成为经常性工作。但在养殖过程中不科学的、盲目的滥用抗生素，造成细菌产生耐药性问题正变得越来越突出，使抗菌药的疗效降低，疗程延长，还使死亡率升高和治疗费用增加，给养殖业带来巨大经济损失。2、耐药菌株还可能将耐药性基因由动物转移给人类，对人类健康造成潜在威胁。如何避免滥用抗生素，药敏试验在临床诊断中的应用就显得重要了。3、药敏实验可以
相对快速有效地检测病原菌对各种抗菌药的敏感性，指导临床合理用药、灵活选药。可以在本地区容易买到的药品中选出最敏感的药物，既能缩短病程，又能避免盲目用药，减少费用。4、因为药敏实验在动物体外进行，操作相对简单，
成本相对较低，既经济又快速有效，可以对流行病学调查进行监控，控制和预防耐药菌株的流行，在生产中具有非常重要现实意义。二、药敏试验的步骤：1、琼脂平板制备按照
营养琼脂干粉说明来进行稀释，稀释后琼脂放在微波炉里进行加热，加热后琼脂移至超净工作台中，静置待温度降至50℃（手指能接受的最高温度）左右时，开始倒平板，内径225px 平皿每个平皿倒入约10ml琼脂液，倒入后迅速混匀铺满平
皿底部。
2、药液制备：按药品使用说明书上的配料或饮水浓度配置按1g需加多少毫升水或配多少毫克饲料，就相当于配制药液所加蒸馏水的毫升数。如10g药物可配50kg饲料，其换算方法为：1g本品加5000ml蒸馏水。此溶液液即为用于做药敏试验的药液。
3、药敏纸片制备：要用质量较好的定性滤纸，用普通的打孔器打成直径6mm的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的小瓶或小平皿中，以单层牛皮纸扎口或包扎。经15磅15-20分钟高压灭菌后，置于37℃温箱或烘箱中一天，使完全干燥。按每张纸片饱和吸水量为0.01ml计，在上述含有50片纸片的小瓶内加入药液0.5ml，不时翻动，使滤纸片将药液均匀吸净，一般浸泡30分钟即可。同时在记录药物名称，于37℃温箱过夜。在温箱或烘箱中的时间不宜过长，以免某些抗生素失效。青霉素、金霉素宜在低温下真空干燥。干燥后即密封。切勿受潮，置阴暗干燥处或家用冰箱中保存，有效期4-6个月。
4、病料接种取新鲜病料组织于超净工作台中或酒精灯旁，剪取新鲜组织断面无菌涂抹到营养琼脂板上，涂布整个琼脂平板表面，反复涂布几次，保证涂布均匀。
5、贴药敏纸片用无菌镊子将纸片放于固体培养基表面并轻压，使纸片与培养基表面完全接触。为了能准确观察结果，要求药敏纸片均匀分布于培养基上，位置安排适中，防止出现抑制圈重叠。
一般各纸片中心相距应大于24mm，可在平皿中央贴一片，外周等距离贴7－9片。记住每种药敏纸片的名称。
6、温箱培养贴完药敏纸片的平皿倒放在37℃恒温箱中培养24小时以上。三、药敏实验结果观察
四、药敏实验选药原则1、在选择高敏药物时还应考虑药物的吸收途径。因为药敏试验是药液直接和细菌接触，而在给畜禽用药时，必须通过机体的吸收才能使药物发挥疗效，所以在给畜禽用药时，高敏药物一定要配合适宜的给药方法，并予以足够剂量、足够疗程，才会取得好的治疗效果。2、药敏试验结果仅为临床选择高敏药物的参考。因动物机体及环境等因素影响，药物的药敏试验与临床治疗效果的符合率一般为70－80%，所以也不能过分地依赖药敏试验。如发现疗效不显著应及时换药。3、药敏试验确定的首选药物不是一成不变。随着药物使用频率的增加及新特药的不断出现，细菌对原先的高敏感药物可能不再敏感。因此，定期进行药敏试验了解本场细菌对抗菌药的敏感性情况是很有必要的。
4、窄谱抗生素能解决的问题不选广谱抗生素，一种抗生素可达到治疗作用时，不要用两种药物联合应用。必须应用两种抗生素时，应选择联合应用具有协同作用的药物。
5、避开已经使用过的药物或其同类药物，发病期间已用过的药物或同类药物一般不用。五、药敏片的制作药敏片一般可以由厂家提供，也可以自己制作，制作药敏片直接选用各药厂的
成品药来做。制作药敏片设备和器皿：需要恒温箱、平皿（直径90mm或更大一点的都行）、烧杯、蒸馏水、滤纸、打孔器。具体的操作步骤：1、将滤纸用打孔器打好适量直径为
6mm的小圆纸片。2、将所需培养皿或玻璃小瓶、玻璃棒、微量吸管、镊子、滤纸、滤纸片等进行高压灭菌，一般121℃，0.15帕斯卡，15~20min。3、在烘干箱或恒温箱内37～60℃，放置12～24小时直至烘干。4、将要选的药用蒸馏水按药品使用治疗量的比例配制成药液，按5ml药液30~40个小圆纸片浸泡。5、将浸泡好的药敏片用镊子夹出，放到另一干燥
平皿中，注意药敏做的多时，放湿药敏片不要完全重叠地放。这样会使有的药敏片在干燥过程中所沾的药量不一，影响您对药的评价。因为有的药不溶，药厂会加一些助溶剂，干燥过程中有的药会析出。这时药敏片叠放位置会影响所沾的药量的。6、将盛湿药敏片的平皿放到恒温箱中，温度37℃，放置12～24小时，不同的药干的时间也可能不一样，所以
自己需要视情况而定。在这个过程中要注意勤翻一下药敏片，尽量不要让它们沾在一起。7、药敏片的储藏：将烘干的药
敏片分装，标上药名和日期，储存要注意防潮。短期可4℃冷藏保存3～6个月，长期要-20℃冷冻保存。六、培养基的制备：兽医临床上一般用营养琼脂培养基。将成品营养琼脂培养基粉按说明取适量，加蒸馏水溶解，放入高压灭菌锅，121℃灭菌15～20min，冷却到50℃左右，倾注到已灭过菌
的培养皿中，厚度约5～6mm，冷却凝固后使用或放入4℃冰箱中备用。七、接种细菌：在对病死畜禽解剖时，切取一小块肝、脾等器官，使用新鲜创面在培养基上涂满，操作时就避免感染其他杂菌。八、粘贴药敏纸片：将镊子于酒精灯火焰上灭菌后略停，取药敏片贴到培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻轻按压几下药敏纸片。每个培养皿所用药敏纸片的数量和分布可根据培养皿的大小
确定，一般采用中央贴一片，周围等距离贴5至6片。九、培养细菌：将贴上药敏纸片的培养基置于37℃恒温培养箱中培养12～18h，观察抑菌圈大小，判定结果。在涂有细菌的琼脂平板上，抗菌药物在琼脂内向四周扩散，其浓度呈梯度递减，因此在纸片周围一定距离内的细菌生长受到抑制，形成抑菌圈。按抑菌圈直径大小判定敏感度高低，一般抑菌圈直径在20mm以上为极敏，15～20mm为高敏，10～15mm 为中敏，10mm以下为低敏，无抑菌圈为不敏。十、指导用药：做药敏试验之后，应选择高敏药物进行治疗，也可选用两种药物协助使用，以减少耐药菌株。因为药液必须通过机体吸收才能达到一定效果，所以选用高敏药物同时，还应考虑药物的吸收途径，配合适宜的给药方法，才能达到更好的治疗效果。十一、注意事项：为了使试验结果安全可靠，要注意以下几个影响药敏结果的因素：①同一平板上细菌接种量应恒定，如太多，抑菌圈变小；②药物的浓度和总量直接
影响抑菌圈的大小，需严格按治疗量配制，且用吸水性好的药敏片均匀吸附；③一般培养细菌的条件为37℃，12～18h，有些抗菌药扩散慢如多粘菌素，可将已放好抗菌药的平板先4℃冰箱内2-4小时，使抗菌药预扩散，然后再放37℃温箱中培养；④整个过程要保证无菌操作。
药敏试验实验报告
药敏试验： 用药敏实验进行药物敏感度的测定，以便准确有效的利用药物进行治疗。目前，临床微生物实验室进行药敏试验的方法主要有纸片扩散法，稀释法（包括琼脂和肉汤稀释法），抗生素浓度梯度法（E-test 法），和自动化仪器等。 简介： 体外抗菌药物敏感性试验简称药敏试验（AST），是指在体外测定药物抑菌或杀菌能力的试验。 根据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)近期推荐的标准，对非苛氧菌（肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、和其他非肠科杆菌、葡萄球菌属细菌、肠球菌属细菌）和苛氧菌（嗜血杆菌属细菌、淋病奈瑟菌、肺炎链球菌和其他链球菌）选择常规药敏试验的首选药物（A 组抗生素）或临床使用的主要抗生素（B组抗生素）进行药敏试验。 抗菌药对细菌性传染病的控制起到了非常重要的作用，但由于养殖过程中不科学的、盲目的滥用抗菌药，很多致病性细菌产生了耐药性，使得抗菌药对细菌性疾病的控制效果越来越差，不但造成药物浪费，而且还延误病情，给养殖户造成了很大的经济损失。 随着新型致病菌的不断出现，抗菌药的防治效果越来越差。并且各种致病菌对不同的抗菌药物的敏感性不同，同一细菌的不同菌株对不同抗菌药物的敏感性也有差异。长期以来，各种致病菌耐药性的产生使各种常用抗菌药物往往失去药效，以及不能很好的掌握药物对细菌的敏感度，所以一个正确的结果，可供临床医师选用抗菌药物的参
考，并提高疗效。农业部动物检疫所青岛易邦生物工程有限公司动物疫病诊疗中心总结出几套适合基层进行药敏试验的操作方法，现简单介绍如下。 实验步骤： 实验材料 普通营养琼脂培养基：可去生化试剂店购买，做不同细菌的药敏试验可选择不同的培养基，如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦糠凯培养基。做沙门氏菌可选择血清培养基。 药敏试纸：购买或自制（详见实验准备） 细菌：待做药敏试验的细菌 仪器：接种环、酒精灯、打孔器、牛津杯、移液器、滴头 实验准备 2.1 药敏片的准备：购买或自制 2.1.1 制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。经15磅15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。 2.1.2 抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。
抗高血压药物论文
临床上常用的抗高血压药物的种类，各类药物的特点及抗高血压药物应用原则 【摘要】抗高血压药物种类繁多，而各类药物都有其独特作用和适应证。如何结合高血压的病理生理特点恰当地选择降压药物，仍是一大难题。在临床中，要掌握抗高血压药的用药原则，采取科学的选药策略和合理的应用措施，为高血压患者提供科学合理的用药指导。 【关键词】抗高血压药物合理应用临床 高血压可以引起患者心、脑、肾等器官的损害，并与糖、脂代谢紊乱和糖尿病有密切关系，明显降低患者的生活质量，严重时甚至危及生命。如何结合高血压的病理生理特点恰当地选择降压药物，仍是一大难题。因此，控制血压、合理应用抗高血压药具有重要的临床意义。 常用抗高血压药的分类 利尿剂：利尿剂又分为酚噻嗪类、袢利尿剂、醛固酮受体拮抗剂。其中酚噻嗪类药用于充血性心力衰竭、老年高血压、单纯收缩期高血压；强制性禁忌证为痛风；可能禁忌证为妊娠。袢利尿剂用于肾功能不全，充血性心力衰竭。醛固酮受体拮抗剂用于充血性心力衰竭，心梗后；强制性禁忌证为肾功能衰竭，高血钾症。 β受体阻滞剂：β受体阻滞剂用于心绞痛、心梗后、快速心率失常、充血性心力衰竭；强制性禁忌证为Ⅰ-Ⅱ度房室阻滞、哮喘、慢性阻塞性肺疾病；可能禁忌证为周围血管病糖耐量减低经常运动者。 二氢吡啶类钙通道阻滞剂：用于周围血管病、妊娠及老年单纯收缩期高血压、心绞痛；可能禁忌证为快速心律失常。而维拉帕米、地尔硫卓用于心绞痛、颈动脉粥样硬化、室上性心动过速；强制性禁忌证为Ⅱ-Ⅲ度房室传导阻滞、充血性心力衰竭；可能禁忌证为充血性心衰。 α受体阻滞剂：用于前列腺增生、高血脂症；强制性禁忌证为体位性低血压；可能禁忌证为充血性心衰。 血管紧张素转换酶抑制剂：用于充血性心力衰竭、心梗死后左室功能不全，非糖尿病肾病/1型糖尿病肾病、尿蛋白：强制性禁忌证为妊娠、高血钾、双侧肾动脉狭窄。 血管紧张素Ⅱ受体阻断剂：用于2型糖尿病肾病、蛋白尿、糖尿病微量白蛋白尿、左室肥厚、ACEI所致的咳嗽；强制性禁忌证为妊娠、双侧肾动脉狭窄。 合理应用抗高血压药的原则 持之以恒原则：使用降压药治疗，虽然能控制高血压，但不能治愈。因此，需要长期治疗。特别是除临界高血压、轻度高血压、阵发性高血压、继发性高血压外，凡有药物治疗指征者，均应终身治疗。在血压降到所要求的水平后，药量及服药次数应减至最小有效量，长期坚持治疗有利于减少并发症及死亡率。 个体化原则：临床医师要尽力针对病因和发病机制选药，区别对待，使血压保持在理想水平。治疗高血压应根据患者的年龄、性别、种族、同时患有的疾病和接受的治疗等，选用不同的药物及剂量，使治疗个体化，让患者得到最佳的抗高血压治疗，逆转靶器官损伤，维持和改善患者的生活质量，降低心血管事件的发生率［1］。 合理联合用药原则：联合治疗具有安全有效降压、减少不利效应、更好保护靶器官、提高依从性的优点，但要避免同一类药物间的重复给药。现临床辅助用药中的抗栓治疗重复给药现象较为普遍，如阿司匹林+川芎嗪、川芎嗪+脉络宁等，也应引起高度重视［2］。 循序渐进原则：采用药物降压治疗，一般宜从小剂量开始，不宜操之过急，避免降压过快、过剧，以免造成重要器官灌流不足而引起的不良反应。
微生物抗菌素敏感试验
抗菌素敏感试验 一、实验目的 1、掌握药敏试验（K-B纸片琼脂扩散法）方法、原理及结果判读 2、掌握抗酸染色方法及结果判定 二、实验原理 1、抗菌药物分类： （1）β-内酰胺类：青霉素类和头孢菌素类（硫酶素类、单内酰环类、β-内酰酶抑制剂、甲氧青霉素类) （2）氨基糖甙类：链霉素、庆大霉素、卡那霉素、妥布霉素、丁胺卡那霉素、新霉素、核糖霉素、小诺霉素、阿奇霉素 （3）大环内脂类：红霉素、白霉素、乙酰螺旋霉素、麦迪霉素、交沙霉素 （4）四环素类：四环素、土霉素、金霉素、强力霉素 （5）氯霉素类：氯霉素、甲砜霉素 （6）作用于G+细菌的其它抗生素：林可霉素、氯林可霉素、万古霉素、杆菌肽 （7）作用于G-菌的其它抗生素：多粘菌素、磷霉素、、环丝氨酸、利福平、抗真菌抗生素、灰黄霉素 （8）抗肿瘤抗生素：丝裂霉素、放线菌素D、博莱霉素、阿霉素 （9）具有免疫抑制作用的抗生素：环孢霉素 2、抗菌药物敏感试验(antimicrobial susceptibility testing in vitro ) 1）抑菌试验：体外测定抗菌药物抑制细菌生长能力的试验 （1）纸片扩散法（disc diffusion test） K-B纸片琼脂扩散法原理:将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上。纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后不断地向纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制,从而形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关。（2）稀释法（dilusion test） a.将被检菌株接种于一组含有不同稀释度抗菌药物的培养基内 b.37℃18-24小时后，抗菌药物能抑制被检菌肉眼可见生长的最低浓度（MIC）即该菌 对该抗菌药物的敏感度 c.MIC50 MIC90 d.根据MIC和常用剂量时该药所能达到的血药浓度来划定细菌对各种药物的敏感度或 耐药的界限（break point,折点) （3）E试验法（E test） 2）杀菌实验 3）联合药敏试验 4）检测细菌所产生的抗生素灭活酶试验 3、药物敏感性分级 1）敏感（S）
药敏试验方法
一、纸片扩散法 该法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加，抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的周围形成浓度梯度。同时，纸片周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长，二抑菌范围外的菌株则可以生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈，不同的抑菌药物的抑菌圈直径因受药物在琼脂中扩散速度的影响而可能不同，抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度，并与该药物对测试菌的MIC呈负相关。 二、稀释法 稀释法药敏试验可用于定量测试抗菌药物对某一细菌的体外活性，分为琼脂稀释法和肉汤稀释法。实验时，抗菌药物的浓度通常经过倍比（lg2）稀释，能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度成为最小抑菌浓度（MIC），一个特定抗菌药物的测试浓度范围应该包含能够检测细菌的解释性折点（敏感、中介和耐药）的浓度，同时也应该包含质控参考菌株的MIC. 2.1 琼脂稀释法首先制备含抗菌药物的琼脂稀释平板。再接种待测菌株，然后是结果判读。 2.2 肉汤稀释法 三、抗生素浓度梯度法 四、自动化仪器法 一、实验材料 普通营养琼脂培养基：可去生化试剂店购买，做不同细菌的药敏试验可选择不同的培养基，如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦糠凯培养基。做沙门氏菌可选择血清培养基。 药敏试纸：购买或自制（详见实验准备）
细菌：待做药敏试验的细菌 仪器：接种环、酒精灯、打孔器、牛津杯、移液器、滴头 二、实验准备 2.1 药敏片的准备：购买或自制 2.1.1 制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。经15磅15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。 2.1.2 抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。 2.2 药液的制备（用于商品药的试验）：按商品药的使用治疗量的比例配制药液；如商品药百病消按其说明量治疗量0.01%饮水，可按这个比例配制药液，可取10毫克加入10毫升的水中混匀。此稀释液即为用于做药敏试验的药液。 三、实验操作方法 3.1 药敏片法 3.1.1 在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。（另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。要求涂布均匀致密） 3.1.2 将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停，取药敏片贴到平皿培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按几下药敏片。为了使能准确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上；一般可在平皿中央贴一片，外周可等距离贴若干片（外周一般可贴七片），每种药敏片的名称要记住。 3.1.3 将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。 3.2 牛津杯法 3.2.1 在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，
药敏试验操作小结
药敏试验操作 录入时间:2011-4-21 13:46:47 来源：中华检验医学网 实验步骤 一、实验材料 普通营养琼脂培养基：可去生化试剂店购买，做不同细菌的药敏试验可选择不同的培养基，如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦康凯培养基。做沙门氏菌可选择血清培养基。 药敏试纸：购买或自制（详见实验准备） 细菌：待做药敏试验的细菌 仪器：接种环、酒精灯、打孔器、牛津杯、移液器、滴头 二、实验准备 2.1 药敏片的准备：购买或自制 2.1.1 制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。经15磅15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。 2.1.2 抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。 2.2 药液的制备（用于商品药的试验）：按商品药的使用治疗量的比例配制药液；如商品药百病消按其说明量治疗量0.01%饮水，可按这个比例配制药液，可取10毫克加入10毫升的水中混匀。此稀释液即为用于做药敏试验的药液。 三、实验操作方法
3.1 药敏片法 3.1.1 在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。（另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。要求涂布均匀致密） 3.1.2 将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停，取药敏片贴到平皿培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按几下药敏片。为了使能准确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上；一般可在平皿中央贴一片，外周可等距离贴若干片（外周一般可贴七片），每种药敏片的名称要记住。 3.1.3 将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。 3.2 牛津杯法 3.2.1 在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。（另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。要求涂布均匀致密。） 3.2.2 以无菌操作将灭菌的不锈钢小管（内径6nm、外径8nm、高10nm的圆形小管，管的两端要光滑，也可用玻璃管、瓷管），放置在培养基上，轻轻加压，使其与培养基接触无空隙，并在小管处标记各种药物名称。每个平板可放4-6支小管。待分钟后，分别向各小管中滴加一定数量的各种药液，勿使其外溢。置37℃培养8-18小时，观察结果。 3.2.3 将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。 3.3 打孔法： 该法较简单，成本低，易操作，比较适用于商品药物的检测。 3.3.1 在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。（另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表
降 压 药
降压药 降压药：又称抗高血压药。是一类能够降低外周血管阻力，使动脉血压下降，用于治疗高血压的药物。 服用降压药的目的： 合理应用降压药，不仅能控制血压，改善症状，延缓动脉粥样硬化的行成和发展，并能防止和减少心脑血管等并发症发生，从而提高病人生活质量，降低病死率，延长寿命。 目前常用的降压药物可归纳为五大类：利尿剂、β受体阻滞剂、钙通道阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）、血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂（ARB）。 各类药物介绍： 1.利尿剂：噻嗪类、袢利尿剂（主要用于肾功能不全）、保钾利尿剂（肾功能不全者禁用）（三者疗效相仿，噻嗪类多用） 降压作用：主要通过排钠，减少细胞外容量，降低外周血管阻力。 特点：起效平稳、缓慢，持续时间相对长，作用持久，服药2~3周后达到高峰，能增强其他降压药疗效，并防止其他药物引起的水钠潴留，长期应用不易发生耐药性。 适应症：轻、中度高血压，在盐敏感性高血压、合并肥胖或糖尿病、更年期女性、老年人 不利作用：低血钾症，影响血脂、血糖和血尿酸代谢（往往发生于大剂量时）
禁忌症：痛风患者禁用 2.β受体阻滞剂：常用的有美托洛尔、比索洛尔、阿替洛尔等 特点：起效较迅速、强力，不仅降低静息血压，而且能抑制体力应激和运动状态下血压急剧升高。 适应症：各种不同严重程度的高血压，尤其是心率较快的中、青年患者或合并心绞痛患者，对老年人疗效相对较差。 注意：长期使用不能突然停药，以免诱发或加重心绞痛。 不良反应：心动过缓、乏力、四肢发冷。 禁忌症：急性心力衰竭、支气管哮喘、病态窦房结综合征、房室传导阻滞和外周血管病患者禁用。 3.钙通道阻滞剂：常用的有非洛地平、氨氯地平、硝苯地平等 特点：起效迅速，降压疗效和降压幅度相对较强；降压时不减少心、脑、肾的血流；疗效个体差异性较小，除心力衰竭外较少有治疗禁忌症，长期控制血压的能力和服药依从性较好。 较其他种类降压药，具有以下优势：老年患者有较好的降压疗效，高钠摄入不影响降压疗效，非甾体类抗炎症药物不干扰降压作用；嗜酒的患者也有显著降压效果；可用于合并糖尿病、冠心病或外周血管病患者；长期治疗还具有抗动脉粥样硬化作用。 不良反应：开始治疗阶段可引起心率增快、面部潮红、头痛、下肢水肿等，尤其使用短效制剂时。 4.血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）：常用的有卡托普利、依那普利、贝那普利、赖诺普利等。 特点：降压起效缓慢，逐渐增强，在3~4周时达到最大作用，限制钠盐摄入或联合使用利尿剂可使起效迅速和作用增强。具有改善胰岛素抵抗和减少尿蛋白作用，特别适用于伴有心力衰竭、心肌梗死后、糖耐量减退或糖尿病肾病的高血压患者。可防止或逆转高血压患者的血管壁增厚、心肌肥大和心室重构。增加肾血流量，保护肾脏。 不良反应：刺激性干咳和血管性水肿，停药后可消失。 禁忌症：高血钾症、妊娠妇女和双侧肾动脉狭窄患者禁用。
细菌药物敏感试验实验报告
细菌药物敏感试验实验报告 药物敏感性试验的基本原则 1药敏试验检测获得性耐药，不必测试天然耐药： 天然耐药是细菌菌种固有的特征，耐药基因一般位于染色体，可以长期稳定遗传，表现为对某类或某种药物的天然耐药。天然耐药信息一般由基础医学和临床文献提供。部分天然耐药，体外试验条件下可能无法检测出来，因而导致假敏感，如果报告将成为极重要错误，严重误导临床。常见菌种对各类药物的天然耐药见文献。实验室全体人员应熟知这些信息，可将其发给临床学习和参考。 2药敏试验测试的前提条件： 实验室应具备相应检测的人员能力、客观条件、结果解释依据。标本处理、菌株分离鉴定、药敏试验操作等环节规范、标准、结果可信；具备对结果的解释能力，能够提供临床会诊服务。临床常规工作，分离株(可能)有临床意义而非定植或污染时，才可进行药敏试验。 错误示例：来自痰标本的溶血葡萄球菌，未作标本质量评估和半定量培养，进行药敏试验；来自粪便标本肠球菌属进行药敏试验等。 3测试结果应准确： 实验室应遵照CLSI文件或相关规范建立本医院药敏试验的质量管理
体系。质控菌株、频率、质控范围符合相关要求；定期参加实验室室间比对项目。建议保留菌株，以便复核。 具体的专业要求 1标本类型 临床微生物学的一大特点是标本种类繁多，而不同药物在这些部位的分布不同。标本的规范采集、质量保证、立即运送和有效保藏有赖于临床、实验室以及相关各方的密切合作。在规范临床送检的前提下，实验室进行药敏试验和报告药敏结果时，应首先考虑标本的特殊性。实际工作中需重点考虑的标本如下。 1．脑脊髓液： 正常和疾病状态不能穿透血脑屏障的药物，常规不应报告。报告审核时，对于分离自脑脊髓液的菌，下列药物不能报告：仅有口服剂型的抗菌药物、一、二代头孢菌素(除外静脉用头孢呋辛)、头霉素类、克林霉素、大环内酯类、四环素类和喹诺酮类。
药敏试验方法
药敏试验方法： 默认分类 2009-05-06 22:37 阅读285 评论0 字号：大中小 K-B法： 1 从孵育了16-24小时的琼脂平板上（血平板），挑出单个菌落，直接用生理盐水制成0.5麦氏单 位。 2 在15分钟内，用无菌棉拭子蘸取调好的菌液，在液面上方管壁处旋转并用力挤压几次，以从中挤 出过多的菌液。 3 用棉拭子在无菌的M-H培养基表面化线接种，再重复操作两次，每次将平板转动60度，每次接 种都应保证接种物均匀分布，最后用棉拭子涂抹平板的边缘。 4 将确定好的药敏纸片分贴到平板表面。每个纸片都应压一下，以保证与平板表面完全接触。每个 纸片中心间距24mm。纸片一旦与平板接触，不应再移动。 5 贴完纸片后，应在15分钟内放入35度孵箱。嗜血杆菌属，链球菌属放入3%-5%的CO2烛缸。 6 孵育24小时以后，测量各药敏纸片抑菌圈直径，与NCCLS手册比较，作出结果判断。 说明：细菌药敏结果的判断以NCCLS为标准，所以药敏试验的每一步都应严格按照NCCLS操作，否则将失去意义。链球菌、奈瑟菌属、流感嗜血杆菌、除铜绿假单孢菌和不动杆菌外的假单孢菌属不用K- B法. 肺炎链球菌胶乳凝集测定法 1 在一干净玻片上分别滴两滴生理盐水。 2 从冰箱取出鉴定试剂(Slidex pneumo-kit)于室温。 ·3 在其中一滴生理盐水上滴加R1试剂，在另外一滴上滴加R2试剂，用搅拌棒混匀。 4 轻轻晃动玻片2分钟，观察结果。 5 2分钟内，如R1出现凝集为阳性；如R1和R2均未出现凝集为阴性。 注：R3为阳性对照。 药敏纸片的选择 1、革兰阴性杆菌（肠杆菌科）
头孢噻肟（CTX）头孢唑林（CZ）头孢他定（CAZ） 氨苄西林（AM）哌拉西林（PIP）阿米卡星（AN） 头孢噻吩（CF）环丙沙星（CIP）头孢呋辛（CXM） 庆大霉素（GM）头孢噻肟/棒酸（CTX/CA） 头孢他定/克拉维酸（CAZ/CA）羧苄青霉素（CB） 奥格门丁（AMX/CA）哌拉西林/三唑巴坦（PIP/TZ）亚安培南头孢匹肟（FEP）头孢克罗（CEC） 2、铜绿假单孢菌/不动杆菌 妥布霉素（TM）阿米卡星（AN）安曲南（AZT） 头孢哌酮（CFP）哌拉西林（PIP）头孢匹肟 头孢噻肟（CTX）环丙沙星（CIP）头孢他定（CAZ） 左旋氧氟沙星（OFL）亚安培南哌拉西林/三唑巴坦 3、金黄色葡萄球菌 苯唑西林（OX）青霉素G（P）头孢唑林（CZ）阿米卡星（AN）红霉素（E）头孢噻肟（CTX）环丙沙星（CIP） 万古霉素奥格门丁（AMX/CA）哌拉西林/三唑巴坦 头孢噻吩（CF） 4 、肠球菌 氨苄西林（AM）万古霉素环丙沙星（CIP） 庆大霉素（GM）红霉素（E）氧氟沙星（OFL） 5、除肺炎链球菌外链球菌 氨苄西林（AM）头孢噻肟（CTX）万古霉素 红霉素（E）氧氟沙星（OFL）克林霉素(CM) 肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌和大肠杆菌ESBLs的检测
药敏实验流程
药敏实验流程Last revision on 21 December 2020
药敏实验1.目的 提供细菌对抗菌药物的敏感试验的标准采集与操作方法，选择敏感药物用于临床。 2.范围 适用于实验室分离菌及常见菌的抗菌药物敏感试验。 3.采样对接人 服务专家针对病死猪进行解剖根据临床症状采集相应的病料。 4.设备和材料 无菌剪刀、无菌手术刀、无菌试管、无菌生理盐水、无菌平皿、三角烧瓶、酒精灯、接种环、打火机、75%酒精棉球、一次性手套、营养琼脂培养基、M-H琼脂培养基或特殊培养基、标准麦氏比浊管、药敏纸片、待测病料、记号笔、眼科镊子、2ml或5ml一次性注射器、试管架、超净工作台、恒温培养箱、带刻度直尺。 5.采样及送样操作 采集：病料新鲜度→无菌操作采样→有目的进行采样→保证组织完整性→独立存放到封口袋中并做好标记。 运输：采集好病料放入保温箱（泡沫纸箱+冰袋）中，冷藏即可，不可冷冻。 要求有样品编号、样品名称、样品来源、样品数量、初步诊结果抽样日期及周龄、检测项目等内容。 采样数量 猪一般采集3-5头， 6.细菌分离
在无菌操作条件下，将待测病料（含有典型临床症状部分）用平板划线分离法接种于普通营养琼脂培养基或特殊培养基上（血琼脂、SS琼脂、麦康凯琼脂、BP琼脂等），于37℃±1℃恒温培养箱中培养18-24h 后备用。 细菌在培养基上生长特点 制作待检菌液 在超净工作台内挑取培养18-24h普通营养琼脂平板上的菌落，悬于含3ml无菌生理盐水的试管中。混匀后与比浊管比浊，调整浊度至麦氏标准（相当于1-2*10 cfu/ml）。 接种细菌 在超净工作台内用无菌棉拭子蘸取菌液，在管壁上挤压去掉多余的菌液，均匀涂抹整个平板表面，最后沿平板内缘涂抹一周（用接种环密集划线法也可以）。 贴药敏片 将涂抹均匀的培养皿底部用记号笔做好标记，眼科镊子在酒精灯上灼烧灭菌待冷却后，镊取各种购买或自制的药敏片，分别贴于相应的位置上，用镊子轻轻按压纸片使药敏纸片与培养基表面密贴；药敏纸片应在培养基表面均匀分布，各纸片中心距离大于24mm，纸片距边缘距离大于 15mm，这样一个直径90mm的培养皿可贴7个药敏纸片。 培养 最后将贴好药敏纸片的平板倒置放于37℃±1℃恒温培养箱培养16-18h后取出观察结果。 8结果观察与判定 抑菌圈直径观察
高血压如何灵活使用各种降压药物
加量？减量？活学活用玩转降压药之用法技能原创2015-10-13陈阿丹丹临床用药 降压治疗的策略方法也可以用一句口诀「连长找小兵（联长早小并）」来归纳总结。 即联合治疗，长期治疗及应用长效制剂，早发现、早诊断、早治疗、早达标，小剂量开始，治疗并发症，平稳降压。 那么这些降压策略该如何实施呢？ 治疗目标 根据2013 ESH/ESC 高血压治疗指南： 1. 第1 目标血压＜150/90 mmHg，在第1 目标达到后，应达到第2 目标血压＜140/90 mmHg 或更低（即在保证重要脏器灌注的情况下，缓慢、平稳降压）。 许多老年患者需要应用 2 种以上的药物才能达到目标血压。 当SBP 比目标值高20 mmHg，DBP 比目标值高10 mmHg 时，联合药物治疗应作为一线用药。 2. 合并糖尿病、肾脏疾病、心血管疾病或者器官损伤的患者，在保证重要脏器血流灌注的情况下，通常认为血压控制目标为＜130/80 mmHg。
但新指南认为获益情况与＜140/90 mmHg 相比无明显获益，所以＜140/90 mmHg 仍然是此类患者的目标血压值。 降压药剂量调整 降压治疗方案通常在应用4-6 周达到其最大降压效果，服药后 1 周时血压下降的幅度是该药可达到的最大降压幅度的一半。 采用标准剂量下，各类降压药降压幅度平均10-20/5-10 mmHg。 血压不达标时，可以换药或加量吗？ 下面有一些降压药调整的规则： 1. 起始单药，达到最大剂量再加第2 种药物。 单药治疗未达标，增加至最大推荐剂量，仍未达标增加第 2 种药物。 两种药物均达最大剂量还未达标，小剂量增加第 3 种药物，并增加剂量直至血压达标。 2. 单药起始，未达标小剂量联合2 种药物，并调整2 个药物的剂量。 如两药均达最大剂量，血压仍未达标，增加第 3 种药物，并逐渐增加剂量直至血压达标。
南方医科大学微生物实验报告
2016年南方医科大学医学微生物学实验报告 日期 2016年5月22号 一、实验目的 1、掌握培养基制备的原则和一般方法。 2、掌握病原菌的分离与培养方法。 3、掌握油镜的正确使用、细菌涂片标本的制备、革兰氏染色法，熟悉细菌基本形态。 4、熟悉几种常用的细菌生化反应的名称、原理、方法、结果分析及用途。 5、掌握血浆凝固酶试验的原理、方法及用途。 6、熟悉药物敏感性试验方法的种类、原理及应用，掌握纸片扩散法。 7、掌握玻片凝集试验的原理、方法、结果观察与判断。 二、实验器材 1、天平、称量纸、干粉培养基、锥形瓶、量筒、15支试管、试管架、试管筐、5ml 刻 度吸管、平皿、洗耳球、酒精灯 2、脓汁标本1支，粪便标本1支；伊红美兰平板2个，营养琼脂平板2个，伊红美蓝 平板2个，接种环，酒精灯 3、斜面4支、细菌分离培养物（上次实验平板） 题目 脓汁和粪便标本中病原菌的检测 成绩 实验者 作者：马浩楠 3140020007 参与者名字：马浩楠 丁超 王尧鑫 桂文茁 年级专业 2014级医学影像专业 指导老师 罗军
4、斜面培养物4支，营养肉汤4支，生理盐水2支，镜油瓶、拭镜纸1套，吸水纸1 本，载玻片4张，染色瓶，染色架 5、斜面培养物4支，营养肉汤培养物（菌液）4支，半固体琼脂4支，营养琼脂平板4 个，糖发酵管1套，抗菌素纸片1套，眼科镊子2把 6、半固体培养物4支，药敏试验培养物4个，微量发酵管培养物1套。 三、方法与步骤 1、培养基的制备： 培养基称量干粉培 养基(g) 水量(ml) 煮沸(次）分装(ml) 备注 营养琼脂11.4 300 3瓶，500ml 瓶，平板 营养琼脂 2.7 70 3 5 14支×3，中试管，斜面 营养肉汤 1.3 60 1 3 20支×2，小试管，肉汤 半固体琼脂 1.7 60 3 4 14支×3，小试管，高层 （1）营养琼脂培养基的制备：称量11.4g琼脂，置于三角烧瓶中，加入300ml蒸馏水，分2瓶装，用于倒平板。 （2）营养琼脂培养基的制备（用于制作斜面）：称量2.9g琼脂，置于三角烧瓶中，加入75ml蒸馏水，放在电炉上，先后煮沸3次，分15支中试管装，每支试管5ml。 （3）肉汤培养基的制备（用于制作液体培养基）：称量1.1g琼脂，置于三角烧瓶中，加入50ml蒸馏水，放在电炉上，煮沸1次，分15支小试管装，每支试管5ml。 （4）半固体琼脂培养基的制备：称量1.7g琼脂，置于三角烧瓶中，加入60ml蒸馏水，放在电炉上，先后煮沸3次，分15支中试管装，每支试管4ml。 2、细菌的分离培养 平板划线分离法
药敏试验操作方法
药敏试验操作方法 药敏试验根据美国临床标准委员会（NCCLS）推荐的K-B琼脂法进行，药敏纸片选择中国生物制品鉴定所药敏纸片，试验所选择药物必须包括下列抗生素：氨苄西林（AMP），阿莫西林/克拉维酸（AMC），头孢噻吩（CFT），头孢噻肟（CTX），庆大霉素（GEN），萘啶酸（NAL），诺氟沙星（NOR），四环素（TBT），利福平（RFA），复方新喏明（SMZ）。 1 操作方法： (1)将待检菌接种于普通营养琼脂平板，37℃培养16～18小时，然后挑取普通营养琼脂平板上的纯培养菌落，悬于3ml生理盐水中，混匀后与菌液比浊管比浊。以有黑字的白纸为背景，调整浊度与比浊管（0.5麦氏单位）相同。 (2)用无菌棉拭子蘸取菌液，在管壁上挤压去掉多余菌液。用棉拭子涂布整个M-H培养基表面，反复几次，每次将平板旋转60度，最后沿周边绕两圈，保证涂均匀。 (3)待平板上的水分被琼脂完全吸收后再贴纸片。用无菌镊子取药敏纸片贴在平板表面，纸片一贴就不可再拿起。每个平板贴5张纸片，每张纸片间距不少于24mm，纸片中心距平皿边缘不少于15mm。在菌接种后15分钟内贴完纸片。 (4)将平板反转，孵育18～24小时后取出，用游标卡尺测量抑菌圈直径，从平板背面测量最接近的整数毫米数并记录（附表5）。抑菌环的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限。有的菌株可出现蔓延生长，进入抑菌环，磺胺药在抑菌环内出现轻微生长，这些都不作为抑菌环的边缘。结果判断依据鉴定所药敏纸片判定标准。 2 注意事项： (1)制备MH琼脂平板应用直径90mm平皿，在水平的实验台上倾注。琼脂厚为4±0.5mm（约25-30ml培养基），琼脂凝固后塑料包装放4℃保存，在5日内用完，使用前应在37℃培养箱烤干平皿表面水滴。倾注平皿前应用pH计测pH值是否正确(pH应为7.3)。pH过低会导致氨基糖苷类，大环内酯类失效，而青霉素活力增强。 (2) 药敏纸片长期储存应于－20℃，日常使用的小量纸片可放在4℃，但应至于含干燥剂的密封容器内。使用时从低温取出后,放置平衡到室温后才可打开，用完后应立即将纸片放回冰箱内的密封容器内。过期纸片不能使用, 应弃去。 (3) 不稳定药物如亚胺培南, 头孢克洛, 克拉维酸复合药等, 应冷冻保存, 最好在-40 ℃以下。 (4) 保证质控菌株不变异的简便方法，将新得到的冻干菌株接种含血的M-H平板复活。然后每株细菌接种10支高层琼脂管，放置冰箱保存。每月取出一支，传出细菌供常规用。待用剩至最后一支，可传种在M-H平板上，再接种一批高层琼脂管备用。如此可保证原始菌种永不接触抗菌素。
糖尿病合并高血压的可能机制和降压药选择策略
糖尿病合并高血压的可能机制和降压药选择策略 发表时间：2018-07-31T16:15:38.827Z 来源：《医药前沿》2018年7月第21期作者：张洁 [导读] 分析糖尿病合并高血压的可能机制，评价降压药物选择指导干预的价值 张洁 （华东医院药剂科上海 200040） 【摘要】目的：分析糖尿病合并高血压的可能机制，评价降压药物选择指导干预的价值。方法：在2017年1月—3月，在门诊接待糖尿病合并高血压复查对象184例，通过沟通，了解患者的既往用药情况，分析降压药物处方合理性。结果：治疗后，SDP、DBP、24hSBPCV、24h DBPCV低于治疗前，差异具有统计学意义（P＜0.05）。干预后6个月后，水肿、头晕头痛、合计不良反应发生率低于干预前6个月，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：糖尿病合并高血压可能与糖尿病所致的血管损伤、血压调节相关因子表达有关，降压药物选择需要考虑用药机制、不良反应发生风险。 【关键词】糖尿病；高血压；发病机制；降压药 【中图分类号】R587.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）21-0099-02 糖尿病与高血压均为社区常见病，可致多靶器官损害。糖尿病的发病年龄一般高于高血压，糖尿病合并高血压风险较高，合并率约为30%～40%[1]。为进一步提升糖尿病合并高血压患者降压药物合理应用水平，医院尝试加强用药干预，取得较好的效果。 1.资料及方法 1.1 一般资料 在2017年1月—3月，在门诊接待糖尿病合并高血压复查对象184例，其中男110例、女74例，年龄（59.6±9.4）岁。高血压病程（5.1±1.3）年。糖尿病病程（8.5±1.4）年。纳入标准：（1）2型糖尿病合并原发性高血压病，2型糖尿病病史更长；（2）未合并慢性心力衰竭等其他重大疾病；（3）尚未达到长期使用胰岛素的适应症；（4）未出现并发症急性期；（5）知情同意。排除标准：（1）无法获得随访；（2）非本地社区居民；（3）认知精神障碍；（4）达到减重手术适应症需求；（5）恶性高血压；（6）无法获得随访。 1.2 方法 1.2.1用药合理性评价分析降压药物的合理性。了解不良反应发生情况。点评发现，当前主要用药为CCB、ARB、BB，少部分对象还使用ACEI、利尿剂、α阻断剂、SPC、中成药，联合用药以CCB＋ARP为主，约占30～40%，其次为CCB＋ACEIα。约1/3的对象未按照推荐的要求用药。发现用药不合理情况仍然比较突出，主要为不良反应发生率较高，不合理的应用特别是α受体阻断剂以及β受体阻断剂所致的体位性低血压发生率较高。 1.2.2用药改进 （1）从起效机制选择用药：需要坚持个体化用药的原则，灵活的应用一线药物，联合用药以苯磺酸氨氯地平＋缬沙坦为主，避免使用可能增加肾脏代谢负担的药物，如ACEI、ARB。 （2）从用药的安全选药：糖尿病患者容易出现水肿，避免使用钙离子通道剂量，容易出现心血管反应。除此之外，糖尿病患者还容易出现肾功能障碍、心脏损伤、高尿酸血症，需要进行筛查，合理用药。如2型糖尿病容易出现高尿酸血症，噻嗪类利尿剂会加重高尿酸血症，需慎用。对于合并运动功能障碍、体位更换频繁的对象，使用α受体阻断剂、β受体阻断剂、神经节阻断剂更容易出现体位性血压波动，需慎用。 （3）疗效反馈用药：更改处方后4周复查疗效不佳，考虑患者不敏感，可能存在潜在的耐药基因，则需要调整用药。 1.3 观察指标 两组对象6个月后随访，对比干预前、6个月后的8：00—9：00坐位收缩压（SBP）与舒张压（DBP）、24h收缩压变异系数（24hSBPCV）、24h舒张压变异系数（24h DBPCV）。6个月降压药物不良反应发生情况。 1.4 统计学处理 采用SPSS20.0软件进行统计学处理，血压水平服从正态分布，采用（x-±s）表示，干预前、6个月比较采用t检验，不良反应发生情况比较采用χ2检验，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。 2.结果 2.1 血压水平 治疗后，SDP、DBP、24hSBPCV、24h DBPCV低于治疗前，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1。
实验11-抗生素的抑菌试验
实验十一抗生素的抑菌试验 一目的要求 1、掌握纸片法测定抗生素抗菌作用的基本方法 2、了解抗生素的抗菌谱 二实验原理 抗生素是某些植物与微生物生长到对数期前后所产生的次生代谢产物，其在低浓度下可其它微生物生长具抑制作用或杀死作用的物质。抗生素对敏感微生物的作用机理分为抑制细胞壁的形成、破坏细胞膜的功能、干扰蛋白质合成及阻碍核酸的合成。 由于不同微生物对不同抗生素的敏感性不一样，抗生素的作用对象就有一定的范围，这种作用范围成为抗生素的抗菌谱，作用对象广的抗生素称为广谱抗生素，作用对象少的抗生素称为窄谱抗生素。而且当某种抗生素长时间用于敏感微生物生长后，即使同一种菌的不同菌株对不同药物的敏感性也常发生改变，甚至出现耐药菌株，亦即产生抗性菌株，则抗生素将失去对抗性菌株生长的抵制，只以采用新的抗生素才可能控制抗性菌株的生长与繁殖，因而不断开发新的抗生素是保健人类身体健康的重要工作。新抗生素产生菌的分离筛选应通过拮抗菌发酵，然后以发酵产物进行抗菌活性实验，根据实验结果而获得产新抗生素的菌株。微生物代谢产物的抗菌活性常以管碟法与纸法进行检测，根据透明抑菌圈的有无与大小作为依据。 三实验器材 1、菌种枯草杆菌、大肠杆菌。 2、培养基MH（Mueller-Hintion）琼脂。 3、试剂青霉素、链霉素。 四方法步骤 1、无菌滤纸片以孔径6mm打孔器将滤纸打为圆形纸片，放入培养皿内，121℃蒸汽湿热灭菌，100℃烘干2h。 2、抗生素溶液制备将取适量青霉素、链霉素，以无菌水溶解。 3、指示菌悬浮液的制备枯草杆菌、大肠杆菌斜面菌种分别以无菌水洗下菌苔细胞，到入无菌三角瓶内，制备适宜浓度的细胞悬浮液。 4、混菌平板制备取批示菌细胞悬浮液1mL加入无菌培养皿内，再加入温度为43~45℃的PDA培养基或牛肉膏蛋白胨琼脂培养基20mL，立即振荡使细胞与培养基混合均匀，静置冷凝。 5、平板加抗生素溶液将滤纸片在抗生素溶液中充分浸泡2min以上，然后将纸片放于混菌平板上，每皿呈三角形放3点，每点贴放纸片2张。 6、培养与观察将平板放于33℃左右的温度培养，每24h测量一次透明抑菌圈直径，共测量3次。
特殊细菌药敏试验规范化操作系列
特殊细菌药敏试验的规范化操作 一、目前我国细菌药敏试验现状 20年以来，我国在卫生部和各地临床检验中心和检验学会的共同努力下引进CLSI药敏系列标准，使全国微生物实验室能在同一标准下进行质量控制活动。当前，微生物实验室对常见临床分离细菌的药物敏感试验的水平已有了显著的提高，但对特殊细菌的药敏试验的各个环节的规范操作还不能得到普及，对目前还无折点的细菌能否做药敏试验，以及如何判断细菌的药物敏感和耐药，仍然概念模糊，有待进一步规范和普及。 目前常见错误做法： （一）铜绿假单孢菌的药敏判断标准用于其他非发酵细菌；嗜血杆菌的标准用于卡他莫拉菌等的错误做法时有发生。 （二）借用同属细菌敏感标准 （三）借用同类抗生素的敏感标准 二、各菌属的药物敏感性报告及试验方法的CLSI药敏标准 （一）“嗜麦芽”菌属药敏报告标准 1.CLSI对“嗜麦芽”纸片药敏判断标准 药物名称纸片含量ug/片耐药 R 中介I 敏感S 米诺环素30 ≤1415-18 ≥19 左氧氟沙星 5 ≤1314-16 ≥17 复方新诺明 1.25/23.75 ≤1011-15 ≥16 2.CLSI对“嗜麦芽”稀释法判断标准 药物名称S I R 替卡西林/棒酸≤16/232/2-64/2 128/2 头孢他定≤816 ≥32 米诺环素≤48 ≥16 左氟沙星 2 4 ≥8 复方新诺明≤2/38- 4/76 氯霉素≤816 ≥32（二）无折点细菌的药物敏感试验报告 1. 其他药物的敏感性报告: CLSI推荐的药物可以报告MIC值和敏感度（S、I、R），临床需要的其他药物的药敏试验报告可以直接报告MIC值但不报告S、I、R。 2. 不要用认为相近细菌的折点代替报告S、I、R，这会误导医生用药。
药敏试验方法1
药敏试验方法： K-B法： 1 从孵育了16-24小时的琼脂平板上（血平板），挑出单个菌落，直接用生理盐水制成0.5麦氏单位。 2 在15分钟内，用无菌棉拭子蘸取调好的菌液，在液面上方管壁处旋转并用力挤压几次，以从中挤出过多的菌液。 3 用棉拭子在无菌的M-H培养基表面化线接种，再重复操作两次，每次将平板转动60度，每次接种都应保证接种物均匀分布，最后用棉拭子涂抹平板的边缘。 4 将确定好的药敏纸片分贴到平板表面。每个纸片都应压一下，以保证与平板表面完全接触。每个纸片中心间距24mm。纸片一旦与平板接触，不应再移动。 5 贴完纸片后，应在15分钟内放入35度孵箱。嗜血杆菌属，链球菌属放入3%-5%的CO2烛缸。 6 孵育24小时以后，测量各药敏纸片抑菌圈直径，与NCCLS手册比较，作出结果判断。 说明：细菌药敏结果的判断以NCCLS为标准，所以药敏试验的每一步都应严格按照NCCLS操作，否则将失去意义。链球菌、奈瑟菌属、流感嗜血杆菌、除铜绿假单孢菌和不动杆菌外的假单孢菌属不用K-B法. 肺炎链球菌胶乳凝集测定法 1 在一干净玻片上分别滴两滴生理盐水。 2 从冰箱取出鉴定试剂(Slidexpneumo-kit)于室温。 3 在其中一滴生理盐水上滴加R1试剂，在另外一滴上滴加R2试剂，用搅拌棒混匀。 4 轻轻晃动玻片2分钟，观察结果。 5 2分钟内，如R1出现凝集为阳性；如R1和R2均未出现凝集为阴性。 注：R3为阳性对照。 药敏纸片的选择 1、革兰阴性杆菌（肠杆菌科） 头孢噻肟（CTX）头孢唑林（CZ）头孢他定（CAZ） 氨苄西林（AM）哌拉西林（PIP）阿米卡星（AN） 头孢噻吩（CF）环丙沙星（CIP）头孢呋辛（CXM） 庆大霉素（GM）头孢噻肟/棒酸（CTX/CA） 头孢他定/克拉维酸（CAZ/CA）羧苄青霉素（CB） 奥格门丁（AMX/CA）哌拉西林/三唑巴坦（PIP/TZ） 亚安培南头孢匹肟（FEP）头孢克罗（CEC） 2、铜绿假单孢菌/不动杆菌 妥布霉素（TM）阿米卡星（AN）安曲南（AZT） 头孢哌酮（CFP）哌拉西林（PIP）头孢匹肟 头孢噻肟（CTX）环丙沙星（CIP）头孢他定（CAZ） 左旋氧氟沙星（OFL）亚安培南哌拉西林/三唑巴坦 3、金黄色葡萄球菌 苯唑西林（OX）青霉素G（P）头孢唑林（CZ）阿米卡星（AN） 红霉素（E）头孢噻肟（CTX）环丙沙星（CIP） 万古霉素奥格门丁（AMX/CA）哌拉西林/三唑巴坦 头孢噻吩（CF） 4 、肠球菌 氨苄西林（AM）万古霉素环丙沙星（CIP） 庆大霉素（GM）红霉素（E）氧氟沙星（OFL） 5、除肺炎链球菌外链球菌 氨苄西林（AM）头孢噻肟（CTX）万古霉素