真菌培养常用培养基

[沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂,沙堡弱培养基,SDA]

(一)组成

葡萄糖40.0g

蛋白胨10.0g

琼脂12.0~15.0g

蒸馏水1000ml

(二)制法

上述混合后加入200mg氯霉素,121摄氏度10分钟灭菌后备用。

(三)目的

是常用的分离或保存菌种的培养基。

[沙氏液基,SDB]

(一)组成

葡萄糖40.0g

蛋白胨10.0g

蒸馏水1000ml

(二)制法

上述混合后加入200mg氯霉素,121摄氏度10分钟灭菌后备用。

[加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,SDA with antibiotic]

(一)组成

葡萄糖40.0g

蛋白胨10.0g

琼脂12.0~15.0g

蒸馏水1000ml

(二)制法

上述混合后加入200mg氯霉素。250mg放线菌酮,121摄氏度10分钟灭菌后备用。

[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,modified SDA]

(一)组成

葡萄糖20.0g

蛋白胨10.0g

琼脂12.0~15.0g

蒸馏水1000ml

(二)制法

上述混合后121摄氏度10分钟灭菌后备用。

(三)目的

保存菌种培养基。

[马铃薯葡萄糖琼脂,PDA]

(一)组成

马铃薯200.0g

葡萄糖20.0g

琼脂12.0~15.0g

(二)制法

先将马铃薯洗净去皮切片,加水180ml,煮沸30分钟后过滤,再加葡萄糖、琼脂,将过滤液补足到1000ml,121摄氏度灭菌后备用。

(三)用途

此培养基是培养真菌较好的培养基,同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。

[玉米吐温80琼脂,CMA with T w80]

(一)组成

玉米粉40.0g

琼脂15.0g

蒸馏水1000ml

吐温80 10ml

(二)制法

先将玉米粉混于水中,65摄氏度水浴一小时,过滤,再补足水量,然后加入琼脂和吐温80,121摄氏度10分钟灭菌后备用。

(三)用途

用于观察白念珠菌厚壁孢子及假菌丝;红色毛癣菌在此培养基产色素较好。

[米饭培养基rice grain medium]

(一)组成

大米300.0g

蒸馏水1000ml

(二)制法

将3g大米放入试管中,加入10ml蒸馏水,高压121摄氏度10分钟灭菌后备用。

(三)用途

用于区分奥杜盎小孢子菌和犬小孢子菌,前者在米饭培养基上生长差,犬小孢子菌生长良好,产生黄色素和典型大分生孢子。

[麦芽浸汁琼脂,MA]

(一)组成

麦芽浸膏25.0g

琼脂15.0g

蒸馏水1000ml

(二)制法

上述混合后,121摄氏度10分钟灭菌后备用。

(三)用途

用于观察酵母产生子囊孢子。

[脑心浸膏琼脂。BHI]

(一)组成

脑心浸膏35.0g

琼脂15.0g

(二)制法

上述混合后,121摄氏度10分钟灭菌后备用。

(三)用途

双相真菌可在该培养基上呈酵母相。

[皮肤癣菌鉴定培养基,DTM]

(一)组成

葡萄糖10.0g

蛋白胨10.0g

琼脂15.0g

酚红0.2g

0.8N盐酸 6.0g

放线菌酮0.5g

庆大霉素0.1g

氯霉素0.125g

蒸馏水1000ml

(二)制法

将葡萄糖、蛋白胨和琼脂混于1000ml水中,加入40ml酚红并震荡(酚红0.5g溶于15ml 0.1NaOH中加水至100ml),然后加入6ml0.8N HCL并震荡;放线菌酮0.5g溶于2ml丙酮中,倒入培养基中;庆大霉素及氯霉素溶于2ml水中,然后加入培养基。121摄氏度15分钟灭菌后备用。

(三)用途

分离和鉴定皮肤癣菌。

[尿素培养基,Christensen urea agar]

(一)组成

A溶液:

葡萄糖 1.0g

蛋白胨 1.0g

NaCl 5.0g

KH2PO4 2.0g

尿素20.0g

酚红0.012g

蒸馏水100ml

B溶液:

琼脂15.0g

蒸馏水900ml

(二)制法

将A溶液混匀,过滤灭菌;加热溶解B液,然后121摄氏度15分钟灭菌后。将B液冷却至50摄氏度后与A液混合后分装。

(三)用途

用于鉴定须癣毛癣菌和隐球菌,可使橘红色培养基变成紫红色。

[察氏培养基,CZA]

(一)组成

硝酸钠(NaNO3) 3.0g

磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.0g

硫酸镁(MgSO4.7H2O)0.5g

氯化钾(KCl)0.5g

硫酸亚铁(FeSO4.7H2O)0.01g

葡萄糖30.0g

琼脂15.0g

蒸馏水1000ml

(二)制法

将以上成分依次混入1000ml水中,加热直到完全溶解,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。

(三)用途

分离和鉴定青霉、曲霉。

[咖啡酸琼脂,CAA]

(一)组成

硫酸铵(NH4)2SO4 5.0g

磷酸二氢钾(KH2PO4)0.8g

硫酸镁(MgSO4.3H2O)0.7g

咖啡酸0.18g

枸橼酸铁0.002g

酵母浸膏 2.0g

葡萄糖 5.0g

琼脂15.0g

蒸馏水1000ml

(二)制法

将以上成分依次混入1000ml水中,枸橼酸铁先配成原液,然后加入。高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。

(三)用途

鉴定新生隐球菌和其他隐球菌。前者成为黑色或深棕色。

[高盐培养基,Takashio medium]

(一)组成

磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.0g

硫酸镁(MgSO4.7H2O) 1.0g

葡萄糖 2.0g

蛋白胨 1.0g

琼脂15.0g

蒸馏水1000ml

(二)制法

将以上成分依次混入1000ml水中,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。

(三)用途

用于观察皮肤癣菌的有性时期。

[子囊孢子培养基,ascospore agar]

(一)组成

醋酸钾10.0g

酵母浸膏 2.5g

葡萄糖 1.0g

琼脂15.0g

蒸馏水1000ml

(二)制法

将以上成分依次混入1000ml水中,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。

(三)用途

鉴定产子囊孢子的真菌。

[酵母浸膏磷酸盐培养基,yeast extract phosphate agar]

(一)组成

A液:

酵母浸膏 1.0g

琼脂15.0g

蒸馏水1000ml

B液:

磷酸二氢钾(KH2PO4) 6.0g

磷酸二氢钠(NaH2PO4) 4.0g

蒸馏水30ml

C液:

氢氧化铵(NH4OH) 1.0g

(二)制法

先将A液混匀,将B液PH调节至6,然后取2ml加入A液,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用,每次用时加入少许氢氧化铵。

(三)用途

鉴定和培养组织胞浆菌,和皮炎芽生菌。

[石蕊牛乳培养基,litmus milk agar]

(一)组成

脱脂奶粉100.0g

石蕊750.0g

酵母浸膏 5.0g

葡萄糖 3.0g

蒸馏水1000ml

(二)制法

混合上述物质,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。

(三)用途

用于鉴定放线菌。

[Bennett琼脂]

(一)组成

酵母浸膏 1.0g

牛肉浸膏 1.0g

酪蛋白氨基酸 2.0g

葡萄糖10.0g

琼脂15.0g

蒸馏水1000ml

(二)用途

用于需氧放线菌产生孢子。

[诺卡菌鉴定培养基,identification agar for Nocardia]

(一)组成

1、液化明胶脑心浸汁25.0g

明胶120.0g

蒸馏水1000ml

(PH 7.4~7.6)

2、水解淀粉淀粉 2.0g

葡萄糖 6.0g

蛋白胨10.0g

琼脂15.0g

蒸馏水1000ml

3、水解酪蛋白

A液:脱脂奶粉10.0g

蒸馏水90ml

B液:琼脂 3.0g

蒸馏水17ml

分别高压,然后混匀。

4、酪氨酸(黄嘌呤)琼脂营养琼脂23.0g

酪氨酸(黄嘌呤) 5.0(4.0)g

水1000ml 5、营养琼脂牛肉浸膏 3.0g

蛋白胨 5.0g

琼脂15.0g

蒸馏水1000ml

(二)制法

高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用

(三)用途

用于鉴定诺卡菌和链丝菌。

[合成毛霉琼脂,synthetic agar for Mucor]

(一)组成

磷酸二氢钾(KH2PO4)0.5g

硫酸镁(MgSO4.7H2O)0.25g

葡萄糖40.0g

天门冬酰胺 2.0g

硫胺0.5g

琼脂15.0g

蒸馏水1000ml

(二)制法

将以上成分依次混入1000ml水中,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。

(三)用途

鉴定接合菌。

[无碳源培养基,yeast nitrogen base]

(一)组成

硫酸铵(NH4)2SO4 5.0g

磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.0g

硫酸镁(MgSO4.7H2O)0.5g

酵母浸膏0.2g

琼脂15.0g

蒸馏水1000ml

(二)制法

将以上成分依次混入1000ml水中,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。

(三)用途

糖同化试验基础培养基。先转种菌种在培养基上,3天后重复转种一次。将菌悬液与上述培养基混合后制成平皿。将含20%的糖滤片置于平皿中,观察同化现象。先用蔡氏滤液过滤糖溶液。

[Leeming和Notman培养基]

(一)组成

蛋白胨10.0g

葡萄糖 5.0g

酵母浸膏 1.0g

牛胆盐 4.0g

甘油 1.0g

单硬脂酸甘油酯0.5g

吐温60 0.5ml

全脂牛奶10.0g

橄榄油20.0ml

琼脂12.0g

放线菌酮0.5g

氯霉素0.05g

蒸馏水1000ml

(二)用途

用于培养马拉色菌。

[七叶苷琼脂,esculin agar]

(一)组成

Leeming和Notman培养基加入0.2%枸橼酸铁和0.1%七叶苷。(二)用途

用于鉴定马拉色菌。

[橄榄油培养基,olive oil medium for Malassizia sp.]

(一)组成

蛋白胨10.0g

葡萄糖40.0g

酵母浸膏0.1g

单硬脂酸甘油酯 2.5g

吐温80 2.0ml

橄榄油40.0ml

琼脂18.0g

放线菌酮0.5g

氯霉素0.05g

蒸馏水1000ml

(二)用途

用于培养马拉色菌。其中如果没有橄榄油,也可以用菜籽油代替。

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