真菌培养常用培养基
[沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂,沙堡弱培养基,SDA]
(一)组成
葡萄糖40.0g
蛋白胨10.0g
琼脂12.0~15.0g
蒸馏水1000ml
(二)制法
上述混合后加入200mg氯霉素,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)目的
是常用的分离或保存菌种的培养基。
[沙氏液基,SDB]
(一)组成
葡萄糖40.0g
蛋白胨10.0g
蒸馏水1000ml
(二)制法
上述混合后加入200mg氯霉素,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,SDA with antibiotic]
(一)组成
葡萄糖40.0g
蛋白胨10.0g
琼脂12.0~15.0g
蒸馏水1000ml
(二)制法
上述混合后加入200mg氯霉素。250mg放线菌酮,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,modified SDA]
(一)组成
葡萄糖20.0g
蛋白胨10.0g
琼脂12.0~15.0g
蒸馏水1000ml
(二)制法
上述混合后121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)目的
保存菌种培养基。
[马铃薯葡萄糖琼脂,PDA]
(一)组成
马铃薯200.0g
葡萄糖20.0g
琼脂12.0~15.0g
(二)制法
先将马铃薯洗净去皮切片,加水180ml,煮沸30分钟后过滤,再加葡萄糖、琼脂,将过滤液补足到1000ml,121摄氏度灭菌后备用。
(三)用途
此培养基是培养真菌较好的培养基,同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。
[玉米吐温80琼脂,CMA with T w80]
(一)组成
玉米粉40.0g
琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
吐温80 10ml
(二)制法
先将玉米粉混于水中,65摄氏度水浴一小时,过滤,再补足水量,然后加入琼脂和吐温80,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)用途
用于观察白念珠菌厚壁孢子及假菌丝;红色毛癣菌在此培养基产色素较好。
[米饭培养基rice grain medium]
(一)组成
大米300.0g
蒸馏水1000ml
(二)制法
将3g大米放入试管中,加入10ml蒸馏水,高压121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)用途
用于区分奥杜盎小孢子菌和犬小孢子菌,前者在米饭培养基上生长差,犬小孢子菌生长良好,产生黄色素和典型大分生孢子。
[麦芽浸汁琼脂,MA]
(一)组成
麦芽浸膏25.0g
琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
(二)制法
上述混合后,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)用途
用于观察酵母产生子囊孢子。
[脑心浸膏琼脂。BHI]
(一)组成
脑心浸膏35.0g
琼脂15.0g
(二)制法
上述混合后,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)用途
双相真菌可在该培养基上呈酵母相。
[皮肤癣菌鉴定培养基,DTM]
(一)组成
葡萄糖10.0g
蛋白胨10.0g
琼脂15.0g
酚红0.2g
0.8N盐酸 6.0g
放线菌酮0.5g
庆大霉素0.1g
氯霉素0.125g
蒸馏水1000ml
(二)制法
将葡萄糖、蛋白胨和琼脂混于1000ml水中,加入40ml酚红并震荡(酚红0.5g溶于15ml 0.1NaOH中加水至100ml),然后加入6ml0.8N HCL并震荡;放线菌酮0.5g溶于2ml丙酮中,倒入培养基中;庆大霉素及氯霉素溶于2ml水中,然后加入培养基。121摄氏度15分钟灭菌后备用。
(三)用途
分离和鉴定皮肤癣菌。
[尿素培养基,Christensen urea agar]
(一)组成
A溶液:
葡萄糖 1.0g
蛋白胨 1.0g
NaCl 5.0g
KH2PO4 2.0g
尿素20.0g
酚红0.012g
蒸馏水100ml
B溶液:
琼脂15.0g
蒸馏水900ml
(二)制法
将A溶液混匀,过滤灭菌;加热溶解B液,然后121摄氏度15分钟灭菌后。将B液冷却至50摄氏度后与A液混合后分装。
(三)用途
用于鉴定须癣毛癣菌和隐球菌,可使橘红色培养基变成紫红色。
[察氏培养基,CZA]
(一)组成
硝酸钠(NaNO3) 3.0g
磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.0g
硫酸镁(MgSO4.7H2O)0.5g
氯化钾(KCl)0.5g
硫酸亚铁(FeSO4.7H2O)0.01g
葡萄糖30.0g
琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
(二)制法
将以上成分依次混入1000ml水中,加热直到完全溶解,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)用途
分离和鉴定青霉、曲霉。
[咖啡酸琼脂,CAA]
(一)组成
硫酸铵(NH4)2SO4 5.0g
磷酸二氢钾(KH2PO4)0.8g
硫酸镁(MgSO4.3H2O)0.7g
咖啡酸0.18g
枸橼酸铁0.002g
酵母浸膏 2.0g
葡萄糖 5.0g
琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
(二)制法
将以上成分依次混入1000ml水中,枸橼酸铁先配成原液,然后加入。高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)用途
鉴定新生隐球菌和其他隐球菌。前者成为黑色或深棕色。
[高盐培养基,Takashio medium]
(一)组成
磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.0g
硫酸镁(MgSO4.7H2O) 1.0g
葡萄糖 2.0g
蛋白胨 1.0g
琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
(二)制法
将以上成分依次混入1000ml水中,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)用途
用于观察皮肤癣菌的有性时期。
[子囊孢子培养基,ascospore agar]
(一)组成
醋酸钾10.0g
酵母浸膏 2.5g
葡萄糖 1.0g
琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
(二)制法
将以上成分依次混入1000ml水中,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)用途
鉴定产子囊孢子的真菌。
[酵母浸膏磷酸盐培养基,yeast extract phosphate agar]
(一)组成
A液:
酵母浸膏 1.0g
琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
B液:
磷酸二氢钾(KH2PO4) 6.0g
磷酸二氢钠(NaH2PO4) 4.0g
蒸馏水30ml
C液:
氢氧化铵(NH4OH) 1.0g
(二)制法
先将A液混匀,将B液PH调节至6,然后取2ml加入A液,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用,每次用时加入少许氢氧化铵。
(三)用途
鉴定和培养组织胞浆菌,和皮炎芽生菌。
[石蕊牛乳培养基,litmus milk agar]
(一)组成
脱脂奶粉100.0g
石蕊750.0g
酵母浸膏 5.0g
葡萄糖 3.0g
蒸馏水1000ml
(二)制法
混合上述物质,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)用途
用于鉴定放线菌。
[Bennett琼脂]
(一)组成
酵母浸膏 1.0g
牛肉浸膏 1.0g
酪蛋白氨基酸 2.0g
葡萄糖10.0g
琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
(二)用途
用于需氧放线菌产生孢子。
[诺卡菌鉴定培养基,identification agar for Nocardia]
(一)组成
1、液化明胶脑心浸汁25.0g
明胶120.0g
蒸馏水1000ml
(PH 7.4~7.6)
2、水解淀粉淀粉 2.0g
葡萄糖 6.0g
蛋白胨10.0g
琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
3、水解酪蛋白
A液:脱脂奶粉10.0g
蒸馏水90ml
B液:琼脂 3.0g
蒸馏水17ml
分别高压,然后混匀。
4、酪氨酸(黄嘌呤)琼脂营养琼脂23.0g
酪氨酸(黄嘌呤) 5.0(4.0)g
水1000ml 5、营养琼脂牛肉浸膏 3.0g
蛋白胨 5.0g
琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
(二)制法
高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用
(三)用途
用于鉴定诺卡菌和链丝菌。
[合成毛霉琼脂,synthetic agar for Mucor]
(一)组成
磷酸二氢钾(KH2PO4)0.5g
硫酸镁(MgSO4.7H2O)0.25g
葡萄糖40.0g
天门冬酰胺 2.0g
硫胺0.5g
琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
(二)制法
将以上成分依次混入1000ml水中,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)用途
鉴定接合菌。
[无碳源培养基,yeast nitrogen base]
(一)组成
硫酸铵(NH4)2SO4 5.0g
磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.0g
硫酸镁(MgSO4.7H2O)0.5g
酵母浸膏0.2g
琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
(二)制法
将以上成分依次混入1000ml水中,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)用途
糖同化试验基础培养基。先转种菌种在培养基上,3天后重复转种一次。将菌悬液与上述培养基混合后制成平皿。将含20%的糖滤片置于平皿中,观察同化现象。先用蔡氏滤液过滤糖溶液。
[Leeming和Notman培养基]
(一)组成
蛋白胨10.0g
葡萄糖 5.0g
酵母浸膏 1.0g
牛胆盐 4.0g
甘油 1.0g
单硬脂酸甘油酯0.5g
吐温60 0.5ml
全脂牛奶10.0g
橄榄油20.0ml
琼脂12.0g
放线菌酮0.5g
氯霉素0.05g
蒸馏水1000ml
(二)用途
用于培养马拉色菌。
[七叶苷琼脂,esculin agar]
(一)组成
Leeming和Notman培养基加入0.2%枸橼酸铁和0.1%七叶苷。(二)用途
用于鉴定马拉色菌。
[橄榄油培养基,olive oil medium for Malassizia sp.]
(一)组成
蛋白胨10.0g
葡萄糖40.0g
酵母浸膏0.1g
单硬脂酸甘油酯 2.5g
吐温80 2.0ml
橄榄油40.0ml
琼脂18.0g
放线菌酮0.5g
氯霉素0.05g
蒸馏水1000ml
(二)用途
用于培养马拉色菌。其中如果没有橄榄油,也可以用菜籽油代替。