Carazzi苏木素染色液

Carazzi苏木素染色液
Carazzi苏木素染色液

Carazzi苏木素染色液

简介:

苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。

Leagene Carazzi苏木素染色液主要由苏木素、硫酸铝钾等组成,属于明矾苏木素液的一种,染色液中苏木精含量量小,无氧化膜形成,对细胞核染色很清晰,不着染胞质和纤维成分,属进行性染色,故染色后不需盐酸乙醇分化。该染液类似于Mayer苏木素染色液,可以对糖原进行特染,对酶组化和免疫组化等染色后复染细胞核,尤其适用于在经过特殊染色后不能经酸处理时对细胞核的复染。此时所用时间较短(通常8~10min),染完后即可进行蓝化,不必分化。

染色原理:

1、细胞核染色的原理:

苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA 双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。

2、细胞浆染色的原理:

伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH值密切相关。当染液的pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。

3、分化作用:

染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。经苏木素染色后,必须用盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。

4、返蓝作用:

分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,故分化之后,立即用

水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。

组成:

操作步骤(仅供参考):

1、 根据实验具体需求和所染组织或者细胞适量染色。

2、 无需盐酸乙醇分化,染色时间一般8~10min 。退行性染色时需15~30min ,进行性染色需8~15min ,一般控制在10min 即可。

注意事项:

1、 切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。

2、 盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便彻底清洗酸。

3、 冷冻切片染色时间尽量要短。

4、 蓝化液常使用0.2~1%氨水或Scott 促蓝液或0.1~1%碳酸锂溶液。

5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期: 12个月有效。

相关:

编号 名称 DH0008 DH0008 Storage Carazzi 苏木素染色液 100ml 500ml 4℃ 避光

使用说明书 1份 编号 名称 DC0032 Masson 三色染色液 DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA) DH0006

苏木素伊红(HE)染色液 IH0142

PBS 磷酸盐缓冲液(0.01mol/L,pH7.2-7.4) PW0053

Western 抗体洗脱液(碱性) TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)

软骨染色液(番红O法)步骤及注意事项

软骨染色液(番红O法)步骤及注意事项 货号:G2540 规格:100ml 有效期:12个月有效 产品简介: 软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成,软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种,例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。 番红0软骨染色的原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色。番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料,其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团(硫酸软骨素或硫酸角质素)结合。 自备材料: 10%福尔马林固定液、脱钙液、蒸馏水、Weigert铁苏木素、系列乙醇等。 操作步骤(仅供参考): 1.标本的处理:10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。 2.常规脱蜡至水。 3.入新鲜配制的Weigert染液染色3-5min。 4.酸性乙醇分化液分化15s。 5.蒸馏水洗10min。 6.(可选)在固绿染色液内浸染5min,蒸馏水洗1min。 7.入Safranin O stain内浸染1-2min,蒸馏水洗1min。 8.分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。

9.二甲苯透明,光学树脂封固。 染色结果: 软骨基质深红色 软骨细胞核蓝色 软骨细胞浆红色 细胞核灰黑色 注意事项: 1.需要显示细胞核时,尽量采用铁苏木素染色,其着色力强色调浓,一般的苏木素着色力不强。 2.Weigert苏木素染液不可预先配制后放置,配制好后一般24h失去染色能力。 3.切片在Safranin O stain中染色不宜过长,否则易导致背景的深红色不易分化掉。 4.Safranin O stain染色后,不宜在低浓度乙醇脱水,否则易褪色。 5.95%乙醇脱水时间不宜过长。 6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

苏木素-伊红染色液 (混合型)

苏木素-伊红染色液(H-E)说明书 【产品名称】 苏木素-伊红染色液(H-E) 【型号】 混合型 【包装规格】 货号:DH0003 单瓶包装规格分别为:50ml、100ml、250ml、500ml、5000ml。 【预期用途】 主要用于对细胞组织进行染色。 【检验原理】 苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色,简称HE染色,是病理学常规制片中最基本的染色方法,应用极其广泛,苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法,在病理诊断、教学与科研中广泛应用,具有重要价值,细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强;细胞浆则相反,它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后,细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色,细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色,红细胞则呈橙红色,本染色液系将苏木素和伊红混合成一种溶液,染色后可不分化即可达到常规HE染色效果。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 苏木素-伊红染色液(H-E)混合型苏木色精伊红 【储存条件及有效期】 5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为18个月,在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完,每次用后及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。 【样本要求】 涂片和切片必须充分固定,石蜡切片要充分脱蜡。 【检验方法】 l、石蜡切片于二甲苯I、II中各脱蜡若干分钟; 2、经无水乙醇和95%乙醇各约若干分钟,经80%乙醇若干分钟,自来水冲洗若干分钟; 3、苏木素-伊红染色液(H-E)(混合型)染色若干分钟; 4、自来水冲洗返蓝若干分钟;亦可用碳酸锂水溶液返蓝若干分钟,自来水洗若干分钟; 5、95%乙醇I、II中各调色约若干分钟,时间不宜过长; 6、无水乙醇I、II中各脱水若干分钟,二甲苯I、II中各透明I、II中各透明若干分钟; 7、封片胶封片,镜检。 【检验结果的解释】 细胞核呈蓝紫色,细胞质、间质、各种纤维呈不同程度的红色。 【检验方法的局限性】 仅供细胞和组织形态学观察染色使用。 【产品性能指标】 pH值(25℃±1℃)应为2.4±0.5。 【注意事项】 1、温度较低时染色液不易着色,可适当延长染色时间。

Ehrlich苏木素染色液

北京吉美生物技术有限公司 Ehrlich苏木素染色液 产品简介: 苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素成熟的方法有自然氧化法、化学氧化法。自然氧化是指暴露于光和空气中,这个过程比较缓慢,约需3~6个月不等,但生成物染色能力可维持很长时间。EhrlichE和Delafield苏木素就属于这种。Ehrlich苏木素作为一种良好的核染色液,也可用于黏蛋白染色如软骨的黏液多糖,骨和软骨的染色也推荐使用Ehrlich苏木素染液。 Jimei Ehrlich苏木素染液非常稳定,成熟后密封可保存2年。对核染色质染得很清晰细致,染色时间也稍长,约15~20min。适用于教学和科研上的制片染色,用此染色液对冷冻切片染色则不理想。 染色原理 1、细胞核染色的原理: 苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA 双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 2、细胞浆染色的原理: 伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH值密切相关。当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。 3、分化作用: 染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。 4、返蓝作用: 分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来不浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。

改良Lillie-Mayer苏木素染色液

仅供科研版本号:070505 改良Lillie-Mayer苏木素染色液 【产品组成】 【保存条件】 室温,避光,12个月 【产品概述】 苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易不带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。 改良Lillie-Mayer苏木素染色液无毒,无氧化膜,细胞核染色质着色深而细微,临床上常替代Harris 苏木素染色液。对细胞核染色很清晰,不着染胞质和纤维成分,属进行性染色,故染色后可以不用盐酸乙醇分化,染色时间约5~8min,如果是充分氧化后可染色3~5min。常用于糖原等特染、酶组化和免疫组化等染色后复染细胞核作对照染色,尤其适用于经过特殊染色后不能经酸处理时对细胞核的复染。在特殊染色中,常不天青石蓝B液联合染色,使细胞核染色后不被后续的酸性染料所褪色。 【染色原理】 1、细胞核染色的原理: 苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易不带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 2、细胞浆染色的原理: 伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色不染液的pH值密切相关。当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,不胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。 3、分化作用: 染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织不色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核不细胞浆染色的分明。 4、返蓝作用: 分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏

Masson 三色染色液染色步骤及注意事项

Masson三色染色液染色步骤及注意事项 号:G1340 规格:7×50ml/7×100ml 有效期:12个月有效 产品简介: 结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维:胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而,淡绿或苯胺蓝的分子量很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色或蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 Masson试剂盒的特点:◆染色稳定;◆分化时间短,1-2秒;◆色彩清楚鲜艳;◆使用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;◆所染切片保存时间长且不易褪色。 产品组成: 规格 名称 7×50ml7×100ml Storage 试剂(A):Weigert 铁苏木素染色液A1:Weigert染液A25ml50ml RT避光A2:Weigert染液B25ml50ml RT 临用时,取A1、A2等量混合,成为Weigert铁苏木素染色液,不可预先配制后放置。试剂(B):酸性乙醇分化液50ml100ml RT 试剂(C):Masson蓝化液50ml100ml RT 试剂(D):丽春红品红染色液50ml100ml RT避光

试剂(E):弱酸溶液50ml100ml RT 试剂(F):磷钼酸溶液50ml100ml RT避光 试剂(G):苯胺蓝染色液50ml100ml RT避光 使用说明书1份 自备材料: 固定液:选用甲醛升汞或甲醛盐溶液、蒸馏水、系列乙醇、二甲苯、染缸 操作步骤(仅供参考): 1、切片常规脱蜡至水。 2、用配制好的Weigert铁苏木素染色液染色5min-10min。 3、酸性乙醇分化液分化5-15s,水洗。 4、Masson蓝化液返蓝3-5min,水洗。 5、蒸馏水洗1min。 6、丽春红品红染色液染色5-10min。 7、在上述操作过程中按蒸馏水:弱酸溶液=2:1比例配置弱酸工作液,用弱酸工 作液洗1min。 8、磷钼酸溶液洗1-2min 9、用配置好的弱酸工作液洗1min。 10、直接放入苯胺蓝染色液中染色1-2min。 11、用配置好的弱酸工作液洗1min。 12、95%乙醇快速脱水。 13、无水乙醇脱水3次,每次5-10s。 14、二甲苯透明3次,每次1-2min。

HE(苏木素-伊红)染色试剂盒使用说明书

HE(苏木素-伊红)染色试剂盒使用说明书 货号:L9406 规格:10ml/100ml 保存:本试剂盒常温保存,复检期至少1年。 注意:环境温度低时,分化液可能会结晶析出,将分化液37℃水浴融化后即可,不影响使用。 产品说明: 苏木精-伊红染色法( Hematoxylin-Eosin staining ),简称HE染色法,切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。 染色过程需要优化,着色情况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,很多 细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在 老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。 本产品所包含试剂均为工作液,可直接使用。 操作说明: 石蜡组织切片的HE染色(以下步骤仅供参考)。 1.取材组织块,经固定后,常规石蜡包埋,切片。 2.切片用二甲苯脱蜡,经各级乙醇至水洗:二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%乙 醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇1min→蒸馏水洗2min。 3.苏木素染液染色5-20min(可以根据染色结果和要求调整时间),自来水冲洗。 4.分化液分化30s。 5.自来水浸泡15min或温水(约50℃)5min。 6.置伊红染液2min。 7.自来水冲洗。 8.常规脱水,透明,封片:95%乙醇(I)1min→95%乙醇(Ⅱ)1min→100%乙醇(I)1min→100%乙醇(Ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3:1)1min→二甲苯(I)1min→二甲苯(Ⅱ)1min →中性树脂封固,镜下观察。 冰冻切片不用脱蜡,可固定后直接染色,其方法与石蜡切片相同。

马松三色染色液

马松三色染色液 【产品名称】 Masson三色染色液 【包装规格】 货号:DC0032 套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒 【预期用途】 主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。 【检验原理】 马松染色又称,Masson三色染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、Weigert铁苏木素A液苏木素 2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁 3、酸性乙醇分化液乙醇 4、蓝化液碳酸盐 5、丽春红品红染色液丽春红、品红 6、乙酸溶液乙酸 7、磷钼酸溶液磷钼酸 8、苯胺蓝染色液苯胺蓝 【储存条件及有效期】 5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。 【样本要求】 组织片充分固定和脱蜡。 【检验方法】 1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋; 2、切片常规脱蜡至水; 3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗; 4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟; 5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟; 6、丽春红品红染色液染色,流水稍冲洗; 7、按蒸馏水和乙酸溶液按比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片; 8、磷钼酸溶液处理,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗); 9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗); 10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制); 11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水3次,二甲苯透明,中性树胶封固。

苏木素染色原理

苏木素(Hematoxylin)和伊红( Eosin)染色,简称HE 染色,是病理学常规制片中最基本的染色方法,应用机器广泛。苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶,是一种碱性染色剂,它在被氧化后生成苏木素,同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用,能够使细胞核染色。在病理诊断、教学和科研工作中,常用HE 染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。对于确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE 染色组织切片的基础上进行的。在HE 染色的组织切片中,细胞核呈蓝色,细胞浆呈红色,二者形成鲜明的对比,易于观察分析。苏木素伊红染色试剂盒中,苏木素染色液采用进口的高纯度苏木精、硫酸铝钾、甘油等组成,不含氧.化.汞、甲醇等有害物质,对细胞核染色效果好。其特点:长期保存,不易产生沉淀和金属; 应用范围广,可以用于人、动物、畜牧、水产等领域,可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等;苏木素染色液可以重复使用。 染色原理: 1、细胞核染色的原理: 苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA 双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷

的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 2、细胞浆染色的原理: 伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH 值密切相关。当染液的pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。 3、分化作用: 染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE 染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。 4、返蓝作用: 分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后

巴氏染色原理及操作步骤

巴氏染色原理及操作步骤 巴氏染色法是脱落细胞染色中最好的染色方法。苏木素染液,细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的双螺旋结构中,两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素精碱性染料以离子或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。分化:苏木素染色之后,用水洗去未结合在细胞上的染液,但是在细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用分化液1%盐酸酒精脱去,才能保证细胞核和细胞浆染色的分明,把这个过程称为染色的分化作用。因酸能破坏苏木素的醌型结构,使色素与组织解离,分化不可过度。蓝化:分化之后苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,在碱性条件下处于蓝色离子状态,而呈蓝色,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木精染上的细胞核变呈蓝色,称蓝化作用,一般多用自来水浸洗即可变蓝,也可用温水(50度温水最佳)变蓝。EA50染液的酸碱度对于巴氏染色的成功起着关键作用,EA50染液由伊红、亮绿、等染料配成。伊红、亮绿、橘黄等属于酸性染料,在溶解媒中其发色团是负离子部分,发色团可与蛋白质中带正电的氨基结合,从而是胞浆显蓝色、绿色、橘黄色或红色,但蛋白质所带正负电荷的多少是随溶液的PH值而改变的,在偏碱环境中,蛋白质的羧基游离增多(带负电),在偏酸环境中蛋白质氨基游离增多(带正电),磷钨酸在染色过程中,不但作为媒染剂可增加染料的着色力,同时磷钨酸与碳酸锂还是一对弱酸弱碱,实际上是一对缓冲剂,可中和分化及蓝化时可能留下的少量酸或碱,保证染色达到理想效果,其适用于上皮细胞及间皮组织的标本,是阴道脱落细胞检查中最常用的染色方法,该染色法不但具有显示细胞核结构清晰、分色明显、透明度好、胞浆受色鲜艳等特点。 巴氏染色法将胞核染为深蓝色;鳞状上皮底层、中层及表层角化前细胞胞质染绿色,表层不全角化细胞胞质染粉红色,完全角化细胞胞质呈桔黄色;细菌:灰色;滴虫:淡蓝灰色;黏液:淡蓝色或粉红色;中性粒细胞和淋巴细胞、吞噬细胞胞质均为蓝色;红细胞染粉红色;高分化鳞癌细胞可染成粉红色或桔黄色;腺癌胞质呈灰蓝色。

常用染色剂及配制

常用染色剂及配制 供组织学诊断用的优秀常规染色剂,不仅须使细胞核和细胞浆有选择性着染,也要使结缔组织着色。苏木素-伊红染色的切片适当分色,可使这些结构得以区分,胞核表现为蓝色,胞浆和结缔组织纤维呈各种色调的粉红,因此这是一种最常用的常规染色剂。 一、苏木素-伊红染色的基本原理 苏木素是最早用于生物学上的天然染色剂之一,百余年来,一直是生物学实验室最常用的组织学中细胞核的染料,它是从苏木树的树心中提炼出来的,为浅褐色结晶或淡黄褐色的粉末状物。易溶于乙醇、甘油,也可溶于热水。苏木素本身没有染色能力,它经过氧化后,能产生具有染色能力的苏木红,苏木红又称为氧化苏木素或苏木因。 苏木素变成苏木红的过程叫作“成熟”。成熟的方法一般有两种:一种是把配制好的苏木素液在开口瓶中放置两个月以上,让其在日光和空气中的氧的作用下使之氧化。故一般地盛苏木素的瓶子放在向阳处,时间愈长,染色的效果愈好。常配制一大瓶,备长期使用。另一种方法是在苏木素液中加入氧化剂,如磺酸钠,过锰酸钾,氧化汞,双氧水等。用这种方法成熟与用第一种方法者不同的是,它放置时间愈长,染色的效果愈低。这是因为苏木红被继续氧化可生成无色的化合物,故一次不宜配制过多,还应放置40C冰箱内避光保存以延长使用时间。它的优点是配制后即可使用。 成熟的苏木素对组织并无亲和力,须加入含金属离子的媒染剂,才能达到染色的目的。一般用于明矾苏木素的媒染剂为钾明矾或氨明矾。主要是利用明矾中的铝离子和苏木红结合形成的铝沉淀色素为紫蓝色,对染色质有很大的亲和力,水和酒精都不能使其褪色。用于铁苏木素的媒染剂是三价铁离子,苏木红的铁沉淀色素为黑蓝色,不溶于水,因此,故不能配制大量含媒染剂的混合液,一般用时现配,或在染色过程中,先用铁明矾媒染,然后再染苏木素,如磷钨酸苏木素染色即是。 常规苏木素染色的对比染色是用伊红,也有采用焰红,因为焰红比伊红色泽更鲜明,此外还有采用橘黄G,比布里希猩红,波尔多红等作为对比染色。 苏木素-伊红染色,在组织病理学中,是一种日常使用最为广泛的常规染色方法。一张优质的染色切片,可以清晰地观察到各种不同的组织结构以此作为病理诊断的确切依据。再根据此染色切片所见,分别进行不同的特殊染色。 二、染液的配制 在实验室内常用的苏木素染液有以下几种,不同的仅是染色时间以及比较每种染色方法彼此的优缺点,不过各有优劣。 (一)苏木素染液的配制方法如下 1.Harris氏苏木素液 甲液:苏木素1g 无水酒精10ml 乙液:硫酸铝钾20g 蒸馏水200ml 丙液:一氧化汞0.5g 经典的配制方法是,先将甲液加热溶解后,密封待用,再将乙液加热溶解至沸,去火,待溶液仍处于小沸腾状态时再将甲液徐徐倾入其中,全部混合后,再使溶液在短时间内加热至沸腾,去火,最后,将氧化汞缓慢倾入溶液中(氧化汞一定要慢慢少量分次加入,切忌急躁。因氧化汞倒入后,溶液会迅速膨胀易沸出容器外而发生危险。)此时液体变为深紫色,待氧化汞全部放入后,再将溶液加温至沸腾片刻,立即将溶液放入流动的冷水中,并缓缓地连续摇晃至溶液完全冷却为止。隔夜后过滤,加入冰醋酸(按5%比例)混匀,再过滤后保存于

HE染色原理

苏木精-伊红染色方法 苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)染色方法,简称HE染色方法,是细胞与组织学最广泛的染色方法。 一、HE染色的基本原理 (一)细胞核染色的原理 细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的双螺旋结构中,两边链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 (二)细胞浆染色的原理 细胞浆内主要成分是蛋白质,为两性化合物、细胞浆的染色与pH 值有密切关系,当pH调到蛋白质等电点4.7-5.0时,胞浆对外不显电性,此时酸或碱性染料不易染色。当pH调到6.7-6.8时,大于蛋白质的等电点pH值,表现酸性电离,而带负电荷的阴离子,可被带正电荷的染料染我以,现时胞核也被染色,核和胞浆难以区分。因此必须把pH调至胞浆等电点以下,在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷(阳离子),就可被带负电荷(阴离子)的染料染色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷(阳离子)结合而使细胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织,嗜伊红颗料等被感染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。(三)、二甲苯的作用

烤片后切片进入二甲苯是脱蜡的作用。组织处理和染色后进入二甲苯是透明作用。组织处理的透明是为了石蜡能进入到细胞中去,染色后透明是为了使细胞的折光率与玻璃相同,以便显微镜观察。(四)、酒精的作用 酒精用于苏木精染色前由高浓度至低浓度是为了洗脱用于脱蜡的二甲苯。 伊红染色以后的酒精由低浓度至高浓度酒精逐渐过度是为了彻底脱去组织中的水份。 (五)、水洗的作用 在脱蜡经酒精处理之后,水洗切片,是为了苏木精染液能更好的进入细胞核中去,使细胞核染色均匀。 染色之后的水洗作用是为洗去未与切片结合的染液。 分化以后的水洗则是为了除去分化液和脱下的染料,中止分化作用。 在伊红染色之后也可以水洗,是为了减少伊红染液进入脱水的酒精中。 (六)分化和蓝化作用 1、分化作用 苏木精染色之后,先用水洗去未结合在切片中的染液。然后用分化液1%盐酸酒精脱去细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附 的染料,这个过程称为染色的分化作用。 2、蓝化作用

Weil铁明矾苏木素染色液使用说明

Weil铁明矾苏木素染色液使用说明 货号:G3272 规格:2×50ml/2×100ml 保存:RT避光,有效期12个月。 产品内容: 规格 2×50ml2×100ml Storage 名称 试剂A:Weil苏木素A50ml100ml RT避光 试剂B:Weil苏木素B50ml100ml RT 取A、B等量混合即为Weil苏木素染色液,不宜提前配制。 产品说明: 髓鞘(Myelin Sheath)是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜,即髓鞘由髓鞘细胞和细胞膜组成,是神经膜细胞的质膜沿着轴索的轴心螺旋缠绕形成的多层脂双层结构,髓鞘上有郎飞氏结,可使神经冲动跳跃传递。 Weil铁明矾苏木素染色液可以显示病理情况下髓鞘是否完整、变性、坏死程度及修复情况,对神经组织的病理诊断和研究均有意义,例如神经纤维受损时,髓鞘可出现膨胀、曲折成球形、断裂或脱鞘完全消失等改变。 操作步骤(仅供参考): 1、石蜡切片,脱蜡至水洗。 2、蒸馏水冲洗。 3、入配制好的Weil苏木素染色液,置于温箱或水浴锅染色20min。

4、蒸馏水冲洗。 5、用明矾溶液分化,并镜下控制区分正常髓鞘与灰质或变性区域。 6、蒸馏水冲洗。 7、Weil分化液中完成分色(清除背景)。 8、蒸馏水冲洗。 9、滴加Weil蓝化液处理,充分水洗。 10、常规脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。 染色结果: 髓鞘黑色 背景无色 注意事项: 1、此试剂盒简便快速,明矾分化这一步很关键,需在镜下观察分化程度。 2、固定液以10%的福尔马林为佳。 3、置于温箱或水浴锅染色时,应注意防止染色液挥发。 4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作

马松染色液

Masson三色染色液说明书 【产品名称】 Masson三色染色液 【包装规格】 货号:DC0032 套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒 【预期用途】 主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。 【检验原理】 Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、Weigert铁苏木素A液苏木素 2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁 3、酸性乙醇分化液乙醇 4、蓝化液碳酸盐 5、丽春红品红染色液丽春红、品红 6、乙酸溶液乙酸 7、磷钼酸溶液磷钼酸 8、苯胺蓝染色液苯胺蓝 【储存条件及有效期】 5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。 【样本要求】 组织片充分固定和脱蜡。 【检验方法】 1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋; 2、切片常规脱蜡至水; 3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗; 4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟; 5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟; 6、丽春红品红染色液染色数分钟,流水稍冲洗; 7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片; 8、磷钼酸溶液处理后,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗); 9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗); 10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制); 11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水数次后,二甲苯透明,中性树胶封固。 【检验结果的解释】

Cole氏苏木素染色液(常规染色)使用介绍

Cole氏苏木素染色液(常规染色) 产品说明: 苏木素是组织化学和免疫组织化学中最常用的染料之一,可以广泛用于组织切片或培养细胞的染色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色等配合使用。可以在苏木素染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色,也可以在免疫组化染色后再进行苏木素复染。染色步骤简单,操作时间短。苏木素染色后细胞核呈现蓝色。 使?说明: 1、样品处理 a)对于石蜡切片:二甲苯中脱蜡5-10 分钟。换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10 分钟。无水乙醇5 分钟。90% 乙醇2 分钟。70%乙醇 2 分钟,蒸馏水2 分钟, b)对于冰冻切片:蒸馏水2 分钟, c)对于培养细胞:用4%多聚甲醛固定10 分钟以上,蒸馏水洗涤2 分钟,换用新鲜的蒸馏水,再洗涤 2 分钟。 2、苏木素(HE)染色对于上述处理好的样品,用苏木素染色5-10 分钟(可以根据染色结果和要求调整时间),用自来水洗去残留的染色液,约10 分钟。蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。 3、脱水、透明、封片或进行其它染色 a)脱水、透明、封片:95%乙醇脱水2 分钟,换用新鲜的95%乙醇再脱水2 分钟;二甲苯透明 5 分钟,换用新鲜的二甲苯,再透明 5 分钟,用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察,细胞核呈蓝色。 b)进行其它染色:如果进行免疫荧光染色或荧光染料染色,在苏木素染色后,70%乙醇洗涤2 次,每次 2 分钟。再用PBS 或生理盐水或TBS 或TBST 等用

于荧光染色的溶液浸泡 5 分钟。然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。 注意事项: 1、第一次使用本试剂时建议先取1-2 个样品做预实验。样品数量很多时,可使用染色架和染色缸,以便于操作。 2、本产品亦可反复使用多次,但染色效果会逐渐降低。 3、染色过程推荐浅染,通常只需能够分辨细胞核即可,颜色过深有可能影响细胞质颜色。 4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 产地:国产 提示:本品仅用于科研实验,不能用作医疗及临床诊断。 保存:室温避光储存,有效期至少12 个月。 关键词:Mayer'苏木素染液(免疫组化) Mayer'苏木素染液(免疫组化)相关染色产品:

由苏木素氧化原理谈苏木素染液配制过程中的几个问题

由苏木素氧化原理谈苏木素染液配制过程中的几个问题 一、苏木素的氧化反应产物 苏木素 ↓ 氧化苏木素(为需要的产物,染色的成分。氧化分子中一个羟基成为羰基,形成共轭π键) ↓ 过氧化苏木素(其余的羟基进一步被氧化,共轭π键破坏,发色团破坏,失去颜色) 二、苏木素染液配制选用的氧化剂种类、氧化剂使用剂量。 氧化还原半反应和标准电极电位值越大,得电子的能力越强,氧化力越强。 氧化能力弱的氧化剂反应速度慢,升高反应体系的温度以加快反应速度, 越强的氧化剂的反应速度越快,须控制反应体系的温度使反应速度减慢。 2、不同氧化剂的使用剂量 根据苏木素氧化反应式可以计算出氧化1克纯苏木素所需要的不同氧化剂量(理论值)。 C16H14O6 + HgO → C16H12O6 + Hg↓+ H2O 摩尔质量302.28 216.61 质量1g 0.72g 6C16H14O6 + 2NaIO3 → 6C16H12O6 + I2 +6 H2O + 2Na+ 摩尔质量302.28×6 197.9×2 质量1g 0.2g 4C16H14O6 + KMnO4 → 4C16H12O6 + 4H2O + Mn2+ + K+

摩尔质量302.28×4 158.03 质量1g 0.13g 注意:这是理论值,在实际配制染液时,氧化剂的使用量要减少至理论值的1/2量为宜。 理由: (1)、我们使用的氧化剂品质多为分析纯的,含量比较保证,而苏木素为天然染料,含量不是很保证,所以氧化剂需减少用量。 (2)、配制染液时应刻意保留1/3量的苏木素不被氧化,使之在使用过程中再被氧化,令染液耐用。 三、媒染剂的使用 氧化苏木素羰基中的氧原子最外层轨道含有孤对电子,能与Al3+++、Fe3+++等金属离子形成外轨型配合物。氧化苏木素通过金属离子与细胞核内DNA双链外侧磷酸基上带有孤对电子的氧原子形成配位键而使细胞核内的DNA着色。媒染剂的使用不但大大提高了氧化苏木素对DNA 的上染率,也加强了染液的水洗牢度。 媒染剂一般为二价或三价金属的盐或氢氧化物。 常用于苏木素染液配制的媒染剂为KAl(SO4)2·12H2O、FeK(SO4)2·12H2O、NH4Fe(SO4)2·12H2O等,也可以用其他的如Al2(SO4)3·18H2O、AlCl3·6 H2O、 FeCl3·6 H2O等可电离Al3+++ 或Fe3+++的盐作为媒染剂。 四、乙酸的使用 冰乙酸的作用是降低苏木素染液的PH值,增强DNA着色的特异性,减少蛋白质的非特异性着色。 蛋白质分子具有游离的氨基端与羧基端,为两性分子。溶液的PH值高于蛋白质的等电点时,蛋白质羧基端电离时负电,与氧化苏木素的Al3+++ 结合,引起蛋白质的非特异性染色。当溶液的PH值低于蛋白质的等电点时,蛋白质的羧基端不电离,而氨基端以阳离子形式存在,与Al3+++相斥,氧化苏木素不能 与蛋白质结合,减少蛋白质的非特异性染色。 五、苏木精染液常见问题的原因分析及解决方法 1、苏木精染液表面“氧化膜”与沉淀的形成 苏木精染液表面的氧化苏木精与空气中的氧气接触而进一步氧化,氧化苏木精3位羟基被氧化成羰基,羰基氧原子的孤对电子充分暴露在外,更容易进入Al3+++ 的杂化空轨道形成配位键,使过氧化物形成聚合物。苏木素染液表层过氧化物氧聚合物成片层样,形成“氧化膜”,溶液内部的过氧化物聚合物形成沉淀。 解决办法: (1)、避免氧化反应过度引起过氧化苏木精增多。 (2)染液加入丙三醇:丙三醇俗称甘油,丙三醇1、2、3位均连有一个羟基(极性基团),羟基中的H原子带部分正电荷,与氧化苏木精分子中的羟基上的O 原子(带部分正电荷)形成氢键。丙三醇分子占据了氧化苏木精的羟基旁的位置形成“空间阻隔效应”,有效阻断了Al3+++ 与O原子形成配位键,使氧化苏木精分子不能聚合,减少了沉淀和“氧化膜”的产生。 2、苏木精染液染色能力下降过快。 苏木精染液染色能力下降的原因: (1)苏木精染液在使用过程中,因染液中的氧化苏木精浓度逐步降低导致的染色颜色变淡,此属正常现象。 (2)染液中的氧化苏木精进一步被氧化成过氧化物,过失去染色能力。 根据化学反应平衡原理及化学反应速率理论,苏木精染液配制时,反应物浓度逐渐下降,生成物浓度逐渐增加,氧化反应达到了初步的平衡。但在反应体系

Weil铁明矾苏木素染色液使用说明书

Weil铁明矾苏木素染色液使用说明书 货号:G3272 规格:2×50ml/2×100ml 保存:RT避光,有效期12个月。 产品内容: 名称 2×50ml2×100ml Storage 规格 试剂A:Weil苏木素A50ml100ml RT避光 试剂B:Weil苏木素B50ml100ml RT 取A、B等量混合即为Weil苏木素染色液,不宜提前配制。 产品说明: 髓鞘(Myelin Sheath)是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜,即髓鞘由髓鞘细胞和细胞膜组成,是神经膜细胞的质膜沿着轴索的轴心螺旋缠绕形成的多层脂双层结构,髓鞘上有郎飞氏结,可使神经冲动跳跃传递。 Weil铁明矾苏木素染色液可以显示病理情况下髓鞘是否完整、变性、坏死程度及修复情况,对神经组织的病理诊断和研究均有意义,例如神经纤维受损时,髓鞘可出现膨胀、曲折成球形、断裂或脱鞘完全消失等改变。 注意: 明矾溶液、分化液、蓝化液均需自备,初次操作我们更推荐G3270试剂盒,该试剂盒已配备所有染色用试剂,节省您的时间。 操作步骤(仅供参考): 1、石蜡切片,脱蜡至水洗。 2、蒸馏水冲洗。 3、入配制好的Weil苏木素染色液,置于温箱或水浴锅染色20min。 4、蒸馏水冲洗。 第1页,共2页

5、用明矾溶液分化,并镜下控制区分正常髓鞘与灰质或变性区域。 6、蒸馏水冲洗。 7、Weil分化液中完成分色(清除背景)。 8、蒸馏水冲洗。 9、滴加Weil蓝化液处理,充分水洗。 10、常规脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。 染色结果: 髓鞘黑色 背景无色 注意事项: 1、此试剂盒简便快速,明矾分化这一步很关键,需在镜下观察分化程度。 2、固定液以10%的福尔马林为佳。 3、置于温箱或水浴锅染色时,应注意防止染色液挥发。 4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作 第2页,共2页

天狼星红染色液(试剂盒)操作步骤及注意事项

天狼星红染色液(试剂盒)操作步骤及注意事项 货号:G1470 规格:2×50ml/2×100ml 有效期:12个月 产品内容: 2×50ml2×100ml Storage 规格 名称 试剂(A):weigert铁苏木素溶液A1:Weigert染液A25ml50ml4℃避光 A2:Weigert染液B25ml50ml4℃避光临用时,取A1、A2按1:1等量混合均匀后使用,现配现用。 试剂(B):天狼星红染色液50ml100ml4℃避光产品简介: 胶原纤维(Collagen Fiber)是结缔组织中分布最广含量最多的一种纤维,广泛分布于各种脏器,其中皮肤、巩膜、肌腱最丰富。Ⅰ型胶原纤维主要是骨、皮肤、肌腱纤维;Ⅱ型胶原纤维主要是软骨胶原;Ⅲ型胶原纤维主要在胚胎组织、成人血管、胃肠道;Ⅳ胶原纤维主要在基膜中。天狼星红与其衬染液都是强酸性染料,易与胶原分子中的碱性基团结合,吸附牢固。偏振光镜检测,胶原纤维有正的单轴双折光性的属性,与天狼星红复合染色液结合后,可增强双折射,提高分辨率,从而区分两型胶原纤维。 天狼星红染色液主要由weigert铁苏木素染色液、天狼星红染色液组成,主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中,在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色,肌纤维被染成黄色,在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维,但所用抗体昂贵,操作费

时,而采用天狼星红染色试剂便宜,操作简单。 自备材料: 1.10%的福尔马林固定液 2.普通光学显微镜或偏振光显微镜 操作步骤(仅供参考): 1.组织固定于10%福尔马林固定液,常规脱水包埋。 2.切片厚度6μm,常规脱蜡至水。 3.weigert铁苏木素染色液染色10-20min。 4.酸性分化液分化数秒(可省略)。 5.自来水洗5-10min,蒸馏水洗一次。 6.天狼星红染色液滴染1h。 7.流水稍微冲洗,去除切片表面染液。 8.常规脱水透明,中性树胶封固。 染色结果: 普通光学显微镜: 胶原纤维红色 细胞核蓝色 肌纤维黄色 偏振光显微镜: Ⅰ型胶原纤维强橙黄色或亮红色 Ⅲ型胶原纤维绿色

苏木精苏木素染色液溶液配制方法

华越洋苏木素(苏木精) 染色液的配制 各类溶液的配制方法如下: 1) Harry`s苏木素苏木素1g 无水酒精10ml 硫酸铝钾20g蒸馏水200ml氧化汞冰醋酸8ml分别用无水酒精溶解苏木素,蒸馏水加热溶解硫酸铝钾,然后两液混合并煮沸,加入氧化汞,继续加热和搅拌至溶液为深紫色,立即冷却,恢复至室温后过滤备用。 (2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素无水酒精20ml硫酸铝钾5g蒸馏水 330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸10ml 分别用无水酒精溶解苏木素,蒸馏水溶解硫酸铝钾,然后两液混合后,依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。 (3) Mayer`s苏木素苏木素100mg 蒸馏水100ml碘酸钠20mg硫酸铝铵5g柠檬酸100ml水合氯醛5g用蒸馏水溶解苏木素后,依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛,过滤后备 (4)Ehrlich氏苏木素(1886) 苏木素1g 无水酒精50ml 甘油50ml 硫酸铝钾 蒸馏水50ml 冰醋酸5ml 将苏木素溶于无水酒精里,硫酸铝钾溶于蒸馏水中,然后所有的试剂都加在一起,充分搅拌均匀后,放于窗台上阳光充足的地,让其慢慢氧化成熟,大约需四个星期,才可使用。该液量种很好的细胞核染色液,用它染后,细胞核染色清晰,不易过染。对于用酸脱钙组织细胞核的染色,该试剂优于其它各种苏木素。这种自然氧化成熟的苏木素,可长期使用,不会变质。但染色时间较长,需要20分钟以上。 如需急用而苏木素又未成熟时,该液可加入20-30mg的碘酸钠,以促使其迅速氧化成熟,但这试剂配成后,就不是原来的苏木素,不能长期使用,但起码可用半年左右。 (5)Weigert氏铁苏木素 A液:苏木素1g 无水酒精100ml 将苏木素溶于酒精,让其慢慢氧化成熟,约四周以后,便可以使用,或者用成熟的10%

相关文档
最新文档