探究斐林试剂和双缩脲试剂的使用条件

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探究斐林试剂和双缩脲试剂的使用条件

作者：郭卫华

来源：《中学生物学》2016年第01期

人教版高中生物必修1的“生物组织中还原糖、蛋白质的鉴定”实验对“斐林试剂”和“双缩脲试剂”的使用作了要求：①斐林试剂鉴定还原糖时，必须将甲液和乙液混合均匀后使用，切勿分别加入生物组织样液中进行检测。②双缩脲试剂鉴定蛋白质时，先向蛋白稀释液中加入

A液（1 mL），均匀，再加入B液3～4滴。针对平时学生实验时反映出的很多问题，笔者进行了探索，旨在探究剂的使用条件，改进实验，确保实验顺利完成。

1 实验目的

尝试探究斐林试剂、双缩脲试剂的使用条件，进一步将本实验完善，为日后教学工作的

改进奠定基础。

2 实验原理

可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O 沉淀。

葡萄糖+Cu（OH）2葡萄糖酸+Cu2O↓（砖红色）+H2O;

蛋白质+双缩脲试剂→紫色。

蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。

3 材料、试剂、器具

实验材料：新鲜去皮的梨汁、生豆浆、熟豆浆。

实验试剂：斐林试剂（甲液：质量浓度0.1g/mL NaOH溶液;乙液：质量浓度0.05 g/mL CuSO4溶液）、双缩脲试剂（A液：质量浓度0.1 g/mL NaOH溶液;B液：质量浓度0.01 g/mL CuSO4溶液）、质量分数8%的盐酸、蒸馏水等。

器具：试管、试管架、试管夹、烧杯、量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、打火机等。

4 方法步骤及现象（表1、表2）