现代薄层色谱(平面色谱)技术

现代色谱技术在药物分析中的应用

现代色谱技术在药物分析中的应用 色谱法是一种高效能的物理分离技术，它利用混合物中的各组分在互不相容的两相（固定相和流动相）之间的分配差异而使混合物得到分离的一种方法。 从1903年Tswet发表了吸附色谱分离植物色素的论文至今，色谱技术已近百年的发展历史。特别是60年度现代液相色谱技术的问世，使其在生命科学、药物化学、食品卫生、环境化学等诸多领域得到了广泛的应用。经过30多年的发展，现代高效液相色谱技术得到了不断的完善和改进，在输液泵、检测器、色谱柱及数据控制和处理系统等方面采用了许多专利技术，使泵的稳定性和重复性、检测器的灵敏度和检出能力、色谱柱的分离效能和应用范围及数据处理软件的智能化得到了很大的提高。 近年来多种高新技术的引用，各类色谱仪器在性能、结构和技术参数等各方面都有了极大的提高。目前比较成熟的色谱仪器主要是气相色谱和高效液相色谱两大类。下面将对应用于药物分析中的几种液相色谱进行逐一的介绍。 1.高效液相色谱 高效液相色谱法(High performance liquid chromatography，简称HPLC)是在20世纪70年代在经典液相柱色谱的基础上结合气相色谱的理论与技术而发展起来的一种重要的分离分析方法。它具有高效、快速、高灵敏度、色谱柱可以反复使用、分离出的组分易收集、

适用范围广等优点，在药物的分析中发挥着重要的作用。HPLC在药物的分析中的应用主要是鉴别、有关物质的检查、有效成分及含量的测定。 在HPLC法中，药物组分的保留时间与其结构和性质有着直接的关系，不同的药物由于结构和性质的差异在色谱图上的出峰顺序不同，是定性的重要参数，可用于药物的鉴别。如在中国药典收载的药物利福平的鉴别项下规定：在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致 由于HPLC分离效能及灵敏度高，在药物的杂质检查中被广泛应用，主要用于药物中有关物质的检查。“有关物质”是指药物中存在的合成原料，中间体，副产物，降解产物等物质，这些物质的结构和性质与药物相似，含量很低，只有采用色谱的方法才能将其分离并检测。用HPLC检测药物杂质主要有以下几种方法： （1）峰面积归一化法 此法主要用于没有杂质对照品时杂质的限量检查。当选用紫外一可见检测器时，因各组分的最大吸收波长、吸收系数难以完全相同，要确定的检测波长下也很难保证所有物质都被检出，故此法只用于粗略考察供试品中的杂质含量。除另有规定外，一般不用于微量杂质的检查。 （2）不加校正因子的主成分自身对照法 此法用于没有杂质对照品时杂质的限量检查，不能给出所含杂质的真实限度。采用这种方法时，应先确定杂质的最大吸收波长，而且

色谱分析习题及答案

第九章色谱分析 一填空 1.调整保留时间是减去（死时间）的保留时间。 2.色谱分析方法是一种利用各组分在固定相与流动相中受到的（作 用力不同）而将待分析样品中的各组分依次分离，然后顺序检测各组分含量的分离分析方法。 3.色谱分析的特点（分离效率高）（分析速度快）（检测灵敏度高）（样 品用量少）不足之处为（对未知物的定性分析较困难） 4.物质定性分析的方法为（紫外）（红外）（核磁）（质谱） 5.分配系数K为（组分在固定相中的浓度与在流动相中浓度的比值） 6.分配比k是指（平衡时组分在固定相和流动相的质量比）。 二选择 1.相对保留值是指某组分2与某组分1的___A__。 A. 调整保留值之比， B. 死时间之比， C. 保留时间之比， D. 保留体积之比 2.色谱法分离混合物的可能性决定于试样混合物在固定相中_D__的差别。 A. 沸点差， B. 温度差， C. 吸光度， D. 分配系数。 3.选择固定液时，一般根据__C__原则。 A. 沸点高低， B. 熔点高低， C. 相似相溶， D. 化学稳定性。

4.进行色谱分析时，进样时间过长会导致半峰宽___B__。 A. 没有变化， B. 变宽， C. 变窄， D. 不成线性 5分配系数与下列哪些因素有关_D__ A.与温度有关； B.与柱压有关； C.与气、液相体积有关； D.与组分、固定液的热力学性质有关 6、对柱效能n，下列哪些说法正确_ AB___ A. 柱长愈长，柱效能大； B.塔板高度增大，柱效能减小； C.指定色谱柱对所有物质柱效能相同； D.组分能否分离取决于n值的大小。 三判断 1. 描述色谱柱效能的指标是有效塔板数。（√ ） 2。在色谱法中，对目标化合物的定量可以用峰面积，也可以用峰高。（√ ） 3、在色谱图中，如果未知组分的保留值与标准样品的保留值完全相同，则它们是同一种化合物。（╳） 4、在色谱中，各组分的分配系数差别愈大，则各组分分离的可能性也愈大。（√ ） 5、半峰宽是指峰底宽度的一半。（× ） 6基线是在正常操作条件下,仅由流动相所产生的响应信号的曲线。（√） 四简答 1、色谱定性的依据是什么，主要有哪些定性方法。

仪器分析第十九章习题及答案

仪器分析第二十章习题及答案 1. 进行纸色谱时，滤纸所起的作用是 D 。 A．固定相B．展开剂 C．吸附剂D．惰性载体 2. 试样中A、B两组分在薄层色谱中分离，首先取决于 C 。 A. 薄层有效塔板数的多少 B. 薄层展开的方向 C. 组分在两相间分配系数的差别 D. 薄层板的长短 3. 在薄层色谱中，以硅胶为固定相，有机溶剂为流动相，迁移速度快的组分是 B 。 A．极性大的组分B．极性小的组分 C．挥发性大的组分D．挥发性小的组分 4. 在平面色谱中跑在距点样原点最远的组分是 A 。 A.比移值最大的组分 B.比移值小的组分 C.分配系数大的组分 D.相对挥发度小的组分 5. 纸色谱法分离糖类，应选用的展开剂是 D 。 A.烃类 B.卤烃 C.醛类 D.醇类 6. 平面色谱中被分离组分与展开剂分子的类型越相似，组分与展开剂分子之间的 C 。 A.作用力越小，比移值越小 B.作用力越小，比移值越大 C.作用力越大，比移值越大 D.作用力越大，比移值越小 7. 某组分在以丙酮作展开剂进行吸附薄层色谱分析时，R f值太小，欲提高该组分的R f值，应选择的展开剂是 A 。 A.乙醇 B.氯仿 C.环己烷 D.乙醚 8.配伍选择题 A不加粘合剂的硅胶 B. 加有煅石膏的硅胶 C. 加有煅石膏和荧光剂的硅胶 D. 不加粘合剂，但加有荧光剂的硅胶 1. 硅胶GF254+365 2. 硅胶H 3. 硅胶H254 4. 硅胶G 答案[CADB] 9. 展开剂的极性，固定相的极性，称为正相薄层色谱；展开剂的极性，固定相的极性，称为反相薄层色谱。 答案[较小；较大；较大；较小] 10. 在薄层色谱中定性参数R f值的数值在之间， 答案[0～1]

平面色谱法习题答案

平面色谱法 思考题和习题 1．在薄层色谱中，以硅胶为固定相，氯仿为流动相时，试样中某些组分R f值太大，若改为氯仿－甲醇(2:1)时，则试样中各组分的R f值会变得更大，还是变小为什么 以硅胶为固定相的为吸附薄层色谱，应以吸附机制来解释。试样中某些组分R f值太大，若改为氯仿－甲醇(2:1)时，则试样中各组分的R f值会变得更大，其原因主要是甲醇极性强，与组分竞争硅胶表面的吸附位点，降低了硅胶对组分的吸附能力，至使R f值变得更大。 此时应加入适量极性小的溶剂如环已烷以降低展开剂的极性；或通过增加硅胶的吸附活性使R f变小。 2．在硅胶薄层板A上，以苯－甲醇(1:3)为展开剂，某物质的R f值为，在硅胶板B上，用相同的展开剂，此物质的R f值降为，问A、B两种板，哪一种板的活度大以硅胶为固定相的为吸附薄层色谱，用B板展开时，试样中组分的R f值变小，其原因是B板硅胶的吸附活性大使R f变小。因此可看出B板的活度大。 3、在一定的薄层色谱条件下，已知A、B、C三组分的分配系数顺序分别为K A ﹤ K B ﹤K C 。三组分在相同条件下R f值顺序如何 分配系数越大，保留时间越长，R f值越小，因此三组分在相同条件下R f值顺 序R fA﹥R fB﹥R fC﹥ 4．试推测下列化合物在硅胶薄层板上，以石油醚－苯（4:1）为流动相，六种染料的R f值次序，并说明理由。

极性次序的排列则根据这些分子的分子结构，它们均具有偶氮苯基本母核，根据取代基的极性大小，很易排出次序。苏丹红、苏丹黄及对羟基偶氮苯均带有羟基官能团，但苏丹红、苏丹黄上的氢原子易与相邻氮原子形成分子内氢键，而使它们的极性大大下降至对氨基偶氮苯之后，苏丹红极性大于苏丹黄，则因苏丹红的共轭体系比苏丹黄长。 根据吸附色谱溶质在薄层板上移行次序是极性小的组分R f 大。六种染料的极性次序为：偶氮苯<对甲氧基偶氮苯<苏丹黄<苏丹红<对氨基偶氮苯<对羟基偶氮苯。所以在薄层板上R f 值的次序正好同上相反，偶氮苯极性最小，R f 值最大，而对羟基偶氮苯极性最大而R f 值最小。 5．已知化合物A 在薄层板上从原点迁移7.6cm ，溶剂前沿距原点16.2cm ，(a)计算化合物A 的R f 值。(b)在相同的薄层系统中，溶剂前沿距原点14.3cm ，化合物A 的斑点应在此薄层板上何处，6.72cm) ) (7.647.03.14'47.02 .166.700cm R l l l l R f f =?=?='=== 6．在某分配薄层色谱中，流动相、固定相和载体的体积比为V m ：V s :V g =::，若溶质在固定相和流动相中的分配系数为，计算它的R f 值和k 。 ， 15.033 .010.05.087.033.010.05.011110=?===?+=+== m s m s f V V K k V V K l l R

张新祥《仪器分析》色谱习题解1.doc

思考题和习题 8.1.在仪器分析技术中，色谱的独特优点是什么？ 答案要点：色谱可以用一次进样实现同时分离和分析。 82为什么说色谱对化学乃至整个科学技术的发展起了重要的作用？ 答案要点：因为各种色谱技术帮助科学家发现了很多自然界存在的化合物，色谱用于牛产过程监控对提高产品质量至关重要，色谱用于环境、药物分析和临床检验等领域, 都推动了化学乃至整个科学的发展。 8.3.色谱主要有哪些分支？ 答案要点：根据不同的分类方法，色谱可以分为不同的分支，女2 （1）按照分离机理的物理化学性质可分为吸附色谱、分配色谱、离子色谱（IC）、排阻色谱（SEC）、络合色谱和亲和色谱等。 （2）按照分离介质的几何形状可分为柱色谱和平面色谱。 （3）按照流动相的物理状态可分为气相色谱（GC）、液相色谱（LC）和超临界流体色谱（SFC）o 8.4.试比较气相色谱和液相色谱的异同。 答案要点：从下面5个方面进行比较 ①流动相 ②固定相 ③分析对象 ④检测技术 ⑤制备分离 8.5.简述色谱与电泳的区别。 答案要点：从下面3个方面进行比较 ①分离机理

②流动相的驱动力 ③检测方式 86什么是经典色谱法？柱层析和现代柱色谱的主要区别是什么？ 答案要点：色谱法有经典色谱法和现代色谱法Z分，所谓经典色谱法是相对于现代色谱法而言的，主要是指高效液相色谱（HPLC）出现以前的常压液相色谱技术，包括经典柱色谱和常规薄层色谱以及纸色谱。因为HPLC和GC也都是柱色谱，我们这里将经典柱色谱称为柱层析。它与现代柱色谱（主要是指HPLC）的主要区别在于驱动流动相的压力高低以及固定相的粒度大小。表现在分析结果上则是柱效的高低和分析时间的长短。表现在仪器上则是自动化程度的高低。 8.7.平面色谱包括哪些方法？各有什么特点？ 答案要点：平面色谱包括固定相的儿何形状为平面的薄层色谱（TLC）和纸色谱（PC）, 前者采用涂布在惰性板（如玻璃）上的多孔I占I体吸附剂为I占I定相，后者则是采用纸为固定相。平面色谱的规模可以是分析型，也可以是半制备和制备型。平面形状的固定相有儿个优点，比如操作简单、应用灵活、同时可以平行分析多个样品、展开方式多种多样, 述可以采用各种选择性检测方法。而分析成本仅是一般柱色谱的三分之一。缺点是分离效率有限，影响分析结果的因素很多，故需要有丰富的经验和高的操作技巧。 8.8.简述薄层色谱的分类方法。 答案要点：按照流动相的驱动力可分为经典TLC和强制流薄层色谱（FFTLC）,后者还可分为。超压薄层色谱（OTLC）、高速薄层色谱（HSTLC）、离心薄层色谱（CTLC）或旋转薄层色谱（RTLC）。 根据分离机理，TLC可以分为分配、吸附、离子交换和体积排阻几种类型。根据固定相和流动相的相对极性，有正相薄层色谱（吸附剂的极性大于洗脱液的极性）和反相薄层色谱（吸附剂的极性小于洗脱液的极性）之分。根据仪器操作的自动化程度又可分为在线分析和离线分析两类。 8.9.影响薄层色谱分离的主要因素是什么？ 答案要点： （1）固定相 （2）溶剂系统

现代液相色谱技术进展概述

现代液相色谱技术进展概述 搜药在线 色谱法最初仅仅是作为一种分离手段，是根据混合物中不同组分在流动相和固定相间具有不同的分配系数,当两相作相对运动时，这些组分在两相间进行反复多次的分配，从而得到分离。直到五十年代，人们才开始把这种分离手段与检测系统连接起来，成为一种独特的分析方法，是几十年来分析化学中最富活力的领域之一，也是生命科学和制备化学中广泛应用的一种手段。 色谱的发明者，俄国植物学家M.S.Tswett，是在研究植物色素的过程中，于1906年创立这种简易的分离技术，奠定了传统色谱法基础。从此之后，化学家、生物化学家和生理学家们在制备高纯化合物、分离和鉴定复杂混合物时便有了一条崭新的有效途径。自从有了这种手段，使许多过去被认为是单一的物质，判明却是多种化合物的混合物；许多化学反应的过程依靠这种方法而得以探讨；终于使许多复杂混合物，例如维生素、药物、色素、氨基酸等得到离析；这种方法甚至帮助科学家们了解了一些长期模糊不清的自然现象，诸如植物与动物的营养、激素对人和动物的生理特性、维生素在动植物体中的分布等等问题。Tswett 的实验意义很大，尽管他于1907年在德国柏林植物学会议上反复强调色谱技术，但并没有受到当时科学界的重视。经过二十五年后，德籍奥地利化学家R.Kuhn 等利用他的方法在纤维状氧化铝和碳酸钙的吸附柱上将过去一个世纪以来公认为单一的结晶状胡萝卜素分离成a 和b 两个同分异构体，并由所取得的纯胡萝卜素确定出了其分子式。另外他还发现了八种新的类胡萝卜素，并把它们制成纯品，进行了结构分析。同年，他又把注意力集中在维生素的研究上。在确定了维生素A 的结构以后，于1933年从35000升脱脂牛奶中分离出一克核黄素（即维生素B2），制得结晶，并测定了它的结构。此外，他还用色谱法从蛋黄中分离出了叶黄素；还曾把腌鱼腐败细菌中所含的红色类胡萝卜素确定离析出来并制成结晶。Kuhn正是由于在维生素和胡萝卜素的离析与结构分析中取得了重大研究成果而获得了1938年诺贝尔化学奖，也正因为他的出色工作使色谱法名声大振，迅速为各国科学家们所注目，广泛被采用起来。 1 液相色谱固定相 1.1 正相色谱八十年代初，人们使用的正相色谱固定相硅胶和吡啶硫氰酸镍盐的络合物晶体能与芳香族化合物形成包合物用于分离芳香族含氮异构体和胆甾醇晶体。已有人[1]将焦炭吸附剂作为填料和键合硅胶作过比较并研究其热力学机理。具有离子化或非离子化功能团的大孔聚合物也开始应用于液相色谱，这些聚合物在整个酸碱范围内稳定，其中一个缺点是当溶剂改变时，它们会热胀冷缩，但是其主要的分析方面用途，即从水中收集痕量研究化合物是没有问题的，通过适当的处理装入色谱柱，一些物质出现过度的峰带变宽，而另一些则出现尖、窄的峰带和高分离度，在强碱性大孔树脂中120分钟内可分离100 种尿液中紫外吸收物质[2]。有人将各种链长度的碳氢配位体键合到硅胶上，根据链长短效应研究保留值的影响，也有过类似的报道，将C22 键合相以及制备键合相担体各种条件作过比较，其键长度和吸附自由能成线性关系。一般地，碱溶液会破坏硅胶，烷基胺比季铵盐更

《现代色谱分析》第02章在线测试(满分)

《现代色谱分析》第02章在线测试（满分） 《现代色谱分析》第02章在线测试剩余时间：57:28 答题须知：1、本卷满分20分。 2、答完题后，请一定要单击下面的“交卷”按钮交卷，否则无法记录本试卷的成绩。 3、在交卷之前，不要刷新本网页，否则你的答题结果将会被清空。 恭喜，交卷操作成功完成！你本次进行的《现代色谱分析》第02章在线测试的得分为20分（满分20分），本次成绩已入库。若对成绩不满意，可重新再测，取最高分。 测试结果如下： ? 1.1 [单选] [对] 纸色谱法与薄层色谱法常用正丁醇-醋酸-水（4:1:5，V/V）作为展开剂，正确的操作方法是：（）? 1.2 [单选] [对] 理论塔板数增加一倍，分离度增加的倍数是（） ? 1.3 [单选] [对] 以硅胶为固定相的薄层色谱按作用机制属于（） ? 1.4 [单选] [对] 色谱系统的分离度应为（） ? 1.5 [单选] [对] 描述组分在流动相与固定相间的“平衡”关系的参数是（） ? 2.1 [多选] [对] 衡量区域宽度的方法有（） ? 2.2 [多选] [对] 不正常的色谱峰有（） ? 2.3 [多选] [对] 塔片理论在解释色谱流出曲线上较成功的是（） ? 2.4 [多选] [对] 影响分离度R的因素有（） ? 2.5 [多选] [对] 可增加相对保留值的参数是（） ? 3.1 [判断] [对] 描述相邻两组分分离好坏的指标可用分离度表示（） ? 3.2 [判断] [对] 反映色谱柱柱型特性的参数是保留值（） ? 3.3 [判断] [对] 对某一组分来说，在一定柱长下，色谱峰的宽或窄主要决定于组分在色谱柱中的分配比（）? 3.4 [判断] [对] fs＜0.95为拖尾峰（） ? 3.5 [判断] [对] n影响峰的宽窄（） 第一题、单项选择题（每题1分，5道题共5分） 1、纸色谱法与薄层色谱法常用正丁醇-醋酸-水（4:1:5，V/V）作为展开剂，正确的操作方法是：（B ） A、三种溶剂混合后直接用作展开剂 B、三种溶剂混合、静置分层后，取上层作展开剂 C、三种溶剂混合、静置分层后，取下层作展开剂 D、依次用三种溶剂作展开剂 2、理论塔板数增加一倍，分离度增加的倍数是（B ） A、1 B、1.4 C、1.5 D、2 3、以硅胶为固定相的薄层色谱按作用机制属于（A ） A、吸附色谱 B、离子交换色谱 C、分子排阻色谱 D、亲合色谱

平面色谱法

平面色谱法 【真题模拟与解析】 一、A 型题（最佳选择题） 1. 进行纸色谱时，滤纸所起的作用是 。 A ．固定相 B ．展开剂 C ．吸附剂 D ．惰性载体 纸色谱法的固定相为纸纤维上吸附的水分，流动相为有机溶剂，纸色谱分离原理属于分配色谱的范畴。 答案[D] 2. 试样中A 、B 两组分在薄层色谱中分离，首先取决于 。 A. 薄层有效塔板数的多少 B. 薄层展开的方向 C. 组分在两相间分配系数的差别 D. 薄层板的长短 由方程：m s f 11V /KV R += 得：m s 1m s 21 f 2 f f 1111ΔV /V K V /V K R R R +-+=-= 同一薄板V s /V m 相同，欲使0Δ1 f 2 f f ≠-=R R R ，只有21K K ≠。 答案[C] 3. 在薄层色谱中，以硅胶为固定相，有机溶剂为流动相，迁移速度快的组分是 。

A．极性大的组分B．极性小的组分 C．挥发性大的组分D．挥发性小的组分 在吸附薄层色谱中，通常根据被分离组分的极性进行分离，组分的极性越大，硅胶吸附组分的能力越强，迁移速度越慢，比移值越小。 答案[B] 4. 在平面色谱中跑在距点样原点最远的组分是。 A.比移值最大的组分 B.比移值小的组分 C.分配系数大的组分 D.相对挥发度小的组分 答案[A] 5. 纸色谱法分离糖类，应选用的展开剂是。 A.烃类 B.卤烃 C.醛类 D.醇类 纸色谱中化合物在两相中的分配系数与化合物的分子结构及流动相种类和极性有关。糖类化合物分子结构中含有羟基，常用的展开剂是含水的有机溶剂，如水饱和的正丁醇、正戊醇等。 答案[D] 6. 平面色谱中可用来衡量展开剂选择性的是。 A.比移值 B.相对比移值 C.分配系数 D.分离度 相对比移值是指在一定条件下，两个被测组分的

色谱分析习题及答案(绝对精华)

色谱分析综合体 填空： 1. 氢火焰离子化检测器和热导池检测器分别属于_质量型__和___温度__型检测器。气相色谱仪的心脏是_色谱柱___。 2. 固定液一般是按照__相似相溶___原理选择；在用极性固定液分离极性组分时，分子间作用力主要是__诱导力____，极性愈大，保留时间就愈___长__。 3. 固定液通常是高沸点的有机化合物，这主要是为了保证固定液在使用温度下有____较好的热稳定性____，防止___发生不可逆的化学反应____。 5. 与填充柱相比，毛细管色谱柱的相比β较大，有利于实现快速分析。但其柱容量_较小_。 6. 在HPLC仪中，为了克服流动相流经色谱柱时受到的阻力，要安装_耐高压的六通阀___。 7. 气相色谱分析中，载气仅起输送作用；而液相色谱分析中，流动相还要直接参加__实际的分配过程__，要想提高高效液相色谱的柱效，最有效的途径是__使用小粒径填料_。 8. 欲分离位置异构体化合物，宜采用的高效液相色谱的分离模式是__梯度洗脱___。 9、色谱法中，将填入玻璃管内静止不动的一相称为固定相，自上而下运动的一相称为流动相，装有固定相的柱子称为 色谱柱。 10、液相色谱检测器一般可用紫外可见分光光度检测器，荧光检测器；气相色谱检测器可用热导检测器，氢火焰离子检测器，电子俘获检测器等。 色谱学分析基础： 1、色谱塔板理论的假设？ 答、(1) 在每一个平衡过程间隔内,平衡可以迅速达到；(2) 将载气看作成脉动（间歇）过程；(3) 试样沿色谱柱方向的扩散可忽略； (4) 每次分配的分配系数相同。(5)所有的物质在开始时全部进入零号塔板 2、色谱定性的方法都有哪些？ 答、(1) 用保留时间定性(2) 用相对值保留定性(3) 用保留指数定性(4)用化学反应配合色谱定性 (5)用不同类型的检测器定性⑹色谱和各种光谱或波谱联用 3、内标法定量分析时，内标物选择应满足那些条件？ 答：①试样中不含有该物质②与被测组分性质比较接近③不与试样发生化学反应④出峰位置应位于被测组分接近，且无组分峰影响 4、色谱分析中，固定相的选择原则是什么？ 固定相的选择：气－液色谱，应根据“相似相溶”的原则 5、色谱定量分析中为什么要用校正因子？在什么情况下可以不用? 答：各种化合物在不同的检测器上都有不同的应答值，所以尽管往色谱仪中注入相同质量的物质，但得到峰面积却不一样，因此峰面积定量时就必须把由色谱仪上得到的峰面积乘上一个系数，得到此成分的质量，在实际分析中，常用某物质做标准，得到一个相对的校正系数，就叫‘相对校正因子’ 试样中不是所有组分 6、总结色谱法的优点。 答：色谱法特点（1）分离效率高（2）灵敏度高（3）分析速度快（4）应用范围广⑸样品用量少⑹分离和测定一次完成⑺易于自动化，可在工业流程中使用 7、色谱流出曲线可解决的问题有哪些？ 8、根据你所学知识，填写下表。 色谱分析法基本原理应用领域分析对象缺点 气相色谱法 液相色谱法 气相色谱 1. 气相色谱的基本设备包括那几部分,各有什么作用? 载气系统去除载气中的水、有机物等杂质 进样装置： 色谱柱：色谱仪的核心部件 检测系统 2．试以塔极高度H做指标讨论气相色谱操作条件的选择。 3. 试述速率方程式中A、B、C三项的物理意义。 答：A、涡流扩散项B、纵向扩散项C、传质阻力项 4. 为什么可用分辨率R作为色谱柱的总分离效能指标。 5. 能否根据理论塔板数来判断分离的可能性？为什么？ 6. 对载体和固定液的要求分别是什么? 答：载体要求:①具有化学惰性②好的热稳定性③有一定的机械强度④有适当的比表面，表面无深沟，以便是固定液成为均匀的薄膜，要有较大的空隙率，以便减小柱压降。对固定液的要求：应对被分离试样中的各组分具有不同的溶解能力，较好的热稳定性，并且不与被分离组分发生不可逆的化学反应。 7. 试比较红色担体和白色担体的性能,它们各使用在哪些方面? 答；红色担体适宜分析非极性化合物；白色单体适宜分析极性化合物； 8. 固定液可分为哪几类？为什么这样划分？如何选择固定液。 答：固定液按分子作用力分为①不易极化非极性固定液②易极化非极性固定液③难成氢键的极性固定液④受质子的极性固定液按极性分类用典型化合物在固定液上的保留性能来表征 固定液的选择原则：①“相似相容”原则，②固定液和被分离物分子之间的特殊作用力，③利用混合物固定液④利用协同效应选择固定液 9. 色谱定性的依据是什么，主要有哪些定性方法。

现代环境分析技术(DOC)

《现代环境分析技术》 1、气相色谱法的基本原理、流程及相关的基本概念。 基本原理 2、气相色谱仪的基本构成和工作原理。 气相色谱是对气体物质或可以在一定温度下转化为气体的物质进行检测分析。由于物质的物性不同，其试样中各组分在气相和固定液液相间的分配系数不同，当汽化后的试样被载气带入色谱柱中运行时，组分就在其中的两相间进行反复多次分配，由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同，虽然载气流速相同，各组分在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定时间的流动后，便彼此分离，按顺序离开色谱柱进入检测器，产生的讯号经放大后，在记录器上描绘出各组份的色谱峰。根据出峰位置，确定组分的名称，根据峰面积确定浓度大小。这就是气象色谱仪的工作原理 各种型号的气相色谱仪都包括六个基本单元。 即：(1) 载气及其流速控制系统； (2) 进样系统； (3) 色谱柱系统； (4) 检测器系统； (5) 记录器系统； (6)温控系统。 在刑侦检验技术工作中常用的检测器有：火焰离子化简测器 (FID) 、氮磷检测器 (NPD) 、火焰光度检测器 (FPD) 、电子浦获检测器 (ECD) 等

3、气相色谱分析法定性、定量分析方法。定性分析方法包括： (1)保留值定性法。固定相及操作条件恒定时，每种组分都有恒定的保留值。在相同的条件下，测定标准物质和未知样品的保留值，当未知样品中出现与标准物质保留值相同的色谱峰时，则未知物中可能含有此种物质。 (2)峰高定性法取两份未知样品，在其中一份中加入已知纯物质，然后在相同实验条件下，分别测定两份样品的色谱图，对比色谱图，如果某一组分峰高增加，则未知样品中可能含有已知纯物质 (3)与质谱、红外光谱联用定性上述两种方法适用于确定未知样品中是否含有某一组分。如果对未知样品的组分全然不知时，可采用气相色谱与质谱、红外光谱联用的方法进行测定。气相色谱有很强的分离能力，而质谱、红外光谱可以测定未知物的结构，如果再接上计算机，对数据进行快速处理和检索就更方便。 定量分析方法有：归一化法，外标法，内标法。 4、气相色谱最佳实验条件选择的原则、方法。

第十九章 平面色谱法

第十九章 平面色谱法 第一节 内容和要求 1．基本内容 本章内容包括平面色谱分类；平面色谱参数：比移值和相对比移值、分配系数和保留因子、分离度和分离数，比移值与分配系数（保留因子）的关系；薄层色谱法的基本原理及类型，吸附薄层色谱中吸附剂和展开剂及其选择，薄层色谱操作步骤及定性定量分析；高效薄层色谱法；薄层扫描法；纸色谱法。 2．基本要求 本章要求掌握薄层色谱和纸色谱的基本原理，常用的固定相和流动相，比移值和相对比移值、分配系数和保留因子、分离度和分离数，比移值与分配系数（保留因子）的关系。吸附色谱中固定相和流动相的选择。熟悉平面色谱法分类，薄层色谱中薄层板的种类，薄层色谱操作步骤，显色方法，影响薄层色谱比移值的因素，面效参数与分离参数，定性、定量分析方法。了解各种类型色谱的操作方法，薄层扫描法，高效薄层色谱法，应用与示例。 第二节 要点和难点 （一）平面色谱的基本术语和公式 1. 定性参数：比移值（R f ）与相对比移值（R r ） 0f L L R = (s) (i)(s) f (i) f r L L R R R == 2.R f 与分配系数（K ）和保留因子（k ）的关系 m s f 11V /KV R += f 11R k =+ 3.面效参数：理论塔板数（n ）与塔板高度（H ） 2)(16W L n = n L H 0= 4.分离参数：分离度（R ）与分离数（SN ）

)(2)()(2212112W W d W W L L R +=+-= 1)()(12 10210-+=W W L SN （二）主要平面色谱类型 色谱类型 分离原理 载体 固定相 流动相 R f 顺序 吸附薄层色谱 吸附 硅胶 有机溶剂 极性小的R f 值大 正相薄层色谱 分配 硅胶 水 有机溶剂 极性小的R f 值大 反相薄层色谱 分配 硅胶 硅胶键合相 水-有机溶剂 极性小的R f 值小 纸色谱 分配 滤纸 水 水-有机溶剂 极性小的R f 值大 （三）吸附薄层色谱条件的选择 被测组分的极性大，吸附剂的活度小，流动相极性大；被测组分的极性小，吸附剂的活度大，流动相极性小。 1．被分离物质的极性与结构的关系 （1）基本母核相同，基团极性愈大，分子极性愈强；极性基团数目增加，分子极性增强。常见的取代基极性大小顺序：烷烃<烯烃<醚类<硝基化合物<二甲胺<脂类<酮类<醛类<硫醇<胺类<酰胺<醇类<酚类<羧酸类。 （2）分子双键愈多，共轭度愈大，吸附性愈大。 （3）空间排列影响极性，如能产生分子内氢键的分子极性下降。 2．吸附剂的活度选择 被分离物质的极性大，吸附剂活度要小，以免吸附太牢，不易洗脱；被分离物质的极性小，则吸附剂的活度要大，以免不被吸附，而无法分离。可改变活化温度和时间来控制吸附剂的活度。 3．展开剂的极性 单一溶剂的极性顺序：石油醚<环己烷<二硫化碳<四氯化碳<三氯乙烷<苯、甲苯<二氯甲烷<氯仿<乙醚<乙酸乙酯<丙酮 <正丙醇<乙醇<甲醇<吡啶<酸<水。 4．混合溶剂选择的一般规则 先用单一的中等极性展开剂试验，得出合适的极性。再改用二元展开剂，调节比例达到预期的极性，得

《现代色谱分析》第02章在线测试.doc

B 、VR C 、R C A 、n = 5. 45 (tR/wl/2) 2 C B 、n = 5. 5(tR/wl/2)2 E C 、n = 5. 54 (tR/wl/2) 2 C D 、n=4.55(tR/wl/2)2 5、描述组分在流动相与固定相间的“平衡”关系的参数是（） A 、tR E I)、k 第..题、多项选择题（每题2分，5道题共10分） 1、衡量区域宽度的方法有（） 17 A 、标准差 《现代色谱分析》笫02章在线测 《现代色谱分析》第02章:在线测剩余时间:59:18 答题须知：1、本卷满分20 2、答完题后，请一定要单击F 面的“交卷”按钮交卷，否则无法记荥本试卷的成 3、在交卷之前，不要刷新本网页，否则你的答题结果将会被清 第一题、单项选择题（每题1分，5道题共5 1、组分在固定相定的质量为mA （g ）,在流动相中的质量为mB （g ）,而该组分在固定相中的浓度为CA （g/nd ） ,在流动相中的浓度为CB （g/ml ）, 则此组分的分配系数是：（） C A > inA/mB C B 、niB/mA C c 、mA/ (niA+mB) ￡ I)、CA/CB 2、容量因子的表示式为 C A 、 Cs/Cm C B 、 Cm/Cs E C 、 Ws/Wm C I)、Wm/Ws 3、色谱系统的分离度应为（） C A 、应等于2. 5 C B 、应大于3.0 区C 、应大于1.5 C I ）、应小于1.5 4、理论塔板数的计算公式是 1 7 B 、峰底宽

C、半峰宽 厂D、峰局 2、用于描述相平衡的参数是（） 厂A、峰宽 厂B、流速 1 C、分配系数 17 D、容量因子 3、衡量柱效高低的色谱参数有（） 17 A、峰宽 17 B、n 匠C、II 厂D、流速 4、影响气相传质过程的因素是（） "A、填充物粒度 1 B、载气的相对分子质量 「C、弯曲因子 17 I）、扩散系数 5、可增加相对保留值的参数是（） 'A、降低柱温 [7 1 B、固定相种类 「C、流动相种类 r D、升高柱温 第三题、判断题（每题1分，5道题共5分） 1、不被固定相吸附或溶解的组分,从进样开始到柱后出现最大值时所需要的时间为死时间（） E正确C错误

现代色谱

现代色谱分析 1、色谱流出曲线图能说明哪些问题? ①根据色谱峰的个数，可判断样品中所含组分的最少个数。 ②根据色谱峰的保留值（峰位），可进行定性分析。 ③根据色谱峰的面积或峰高，可进行定量分析。 ④色谱峰的区域宽度，是评价色谱柱分离效能的依据。 ⑤色谱峰两峰间的距离，是评价固定相（或流动相）选择是否合适的依据。 2.根据Van Deemter议程式, HPLC提高柱效的方法有哪些?或 HPLC法降低板高的主要途径有哪些？ ①采用粒径小、窄粒度分布的球形固定相，首选化学键合相，用匀浆法装柱。 ②采用低粘度流动相，低流速（1mL／min） ③柱温一般以25~30℃为宜。太低，则使流动相的黏度增加，温度高易产生气泡。用不含有机溶剂的水溶液为流动相的色谱法（如IEC、IC）可按需升温。 3.什么是正相色谱?什么是反相色谱?HPLC常用反相色谱,它最常用的固定相和流动相是什么? 各适用于分离哪些化合物？ ①正相色谱：流动相极性小于固定相极性的液-液色谱法。 反相色谱：流动相极性大于固定相极性的液-液色谱法。 ②反相固定相：C18、C8 流动相：甲醇、乙腈、水 ③适用于分离非极性和极性较弱的化合物。 4. 一个好的检测器应具备什么条件?HPLC中可使用的检测器有哪些?你在实验中用过哪些检测器,它们有何特点(包括使用中应注意的问题, 适用于何种物质的检测)?属于哪种类型? 灵敏度高、噪音低、线性范围宽、重复性好、适用化合物的种类广泛等性能。HPLC中可使用的检测器:紫外检测器、荧光检测器、电化学检测器、蒸发光散射检测器、化学发光检测器。 紫外检测器特点：①灵敏度高，噪声低。②不破坏样品，能与其他检测器串联，可用于制备色谱。③对温度及流动相流速波动不敏感，可用于梯度淋洗。④属浓度型检测器。 紫外检测器的应用范围：主要用于检测具有π-π或p-π共轭结构的化合物。如芳烃与稠环芳烃、芳香基取代物、芳香氨基酸、核酸、甾体激素、羧酸与羰基化合物等。

色谱分析习题及参考答案

色谱分析习题及参考答案 一、填空题 1、调整保留时间是减去的保留时间。 2、气相色谱仪由五个部分组成，它们是 3、在气相色谱中，常以和来评价色谱柱效能，有时也用 表示柱效能。 4、色谱检测器按响应时间分类可分为型和型两种，前者的色谱图为曲线，后者的色谱图为曲线。 5、高效液相色谱是以为流动相，一般叫做，流动相的选择对分离影响很大。 6、通过色谱柱的和之比叫阻滞因子，用符号表示。 7、层析色谱中常用比移值表示。由于比移值Rf重现性较差，通常用做对照。他表示与移行距离之比。 8、高效液相色谱固定相设计的原则是、以达到减少谱带变宽的目的。 二、选择题 1、色谱法分离混合物的可能性决定于试样混合物在固定相中______的差别。 A. 沸点差， B. 温度差， C. 吸光度， D. 分配系数。 2、选择固定液时，一般根据_____原则。 A. 沸点高低， B. 熔点高低， C. 相似相溶， D. 化学稳定性。 3、相对保留值是指某组分2与某组分1的_______。 A. 调整保留值之比， B. 死时间之比， C. 保留时间之比， D. 保留体积之比。 4、气相色谱定量分析时______要求进样量特别准确。 A.内标法； B.外标法； C.面积归一法。 5、理论塔板数反映了 ______。 A.分离度； B. 分配系数； C．保留值； D．柱的效能。 6、下列气相色谱仪的检测器中，属于质量型检测器的是 A．热导池和氢焰离子化检测器； B．火焰光度和氢焰离子化检测器； C．热导池和电子捕获检测器； D．火焰光度和电子捕获检测器。 7、在气-液色谱中，为了改变色谱柱的选择性，主要可进行如下哪种（些）操作？（） A. 改变固定相的种类 B. 改变载气的种类和流速 C. 改变色谱柱的柱温 D. （A）和（C） 8、进行色谱分析时，进样时间过长会导致半峰宽______。 A. 没有变化， B. 变宽， C. 变窄， D. 不成线性 9、在气液色谱中，色谱柱的使用上限温度取决于 _____ A.样品中沸点最高组分的沸点， B.样品中各组分沸点的平均值。 C.固定液的沸点。 D.固定液的最高使用温度 10 、分配系数与下列哪些因素有关_____ A.与温度有关； B.与柱压有关； C.与气、液相体积有关； D.与组分、固定液的热力学性质有关。 11、对柱效能n，下列哪些说法正确_ ____ A. 柱长愈长，柱效能大； B.塔板高度增大，柱效能减小； C.指定色谱柱对所有物质柱效能相同； D.组分能否分离取决于n值的大小。 12、在气相色谱中，当两组分不能完全分离时，是由于（） A 色谱柱的理论塔板数少 B 色谱柱的选择性差 C 色谱柱的分辨率底 D 色谱柱的分配比小 E 色谱柱的理论塔板高度大

《现代色谱分析》第01章在线测试

恭喜，交卷操作成功完成！你本次进行的《现代色谱分析》第01章在线测试的得分为19分（满分2 0分），本次成绩已入库。若对成绩不满意，可重新再测，取最高分。 测试结果如下： ? 1.1 [单选] [对] 吸附色谱法应包含的方法有（） ? 1.2 [单选] [对] 分配色谱法应包含的方法有（） ? 1.3 [单选] [错] 毛细管电色谱所依靠的驱动力为（） ? 1.4 [单选] [对] GLC、LLC均应归属于（）、 ? 1.5 [单选] [对] 能将分离分析一次完成的方法是（） ? 2.1 [多选] [对] 按流动相的状态分类，色谱法可分为（） ? 2.2 [多选] [对] 按固定相的状态分类，色谱法可分为（） ? 2.3 [多选] [对] 按操作形成分类，色谱法可分为（） ? 2.4 [多选] [对] 下列分离技术中，只有分离功能，没有分析功能的是（） ? 2.5 [多选] [对] 属吸附色谱范畴的是（） ? 3.1 [判断] [对] 薄层色谱属于液相色谱的范畴。（） ? 3.2 [判断] [对] 凝胶色谱是按分子尺寸大小进行分离的方法。（） ? 3.3 [判断] [对] 色谱仪有分析型和制备型。（） ? 3.4 [判断] [对] 色谱法对分析对象的鉴别力是较强的。（） ? 3.5 [判断] [对] 色谱法是用于分离有色物质的技术。（） A B C D 、分配色谱法应包含的方法有（ A B C D 、毛细管电色谱所依靠的驱动力为（

A、色谱力 B、电场力 C、色谱与电场力 D、都不是 4、GLC、LLC均应归属于（）、 A、吸附色谱 B、分配色谱 C、亲合色谱 D、毛细管电色谱 5、能将分离分析一次完成的方法是（） A、蒸馏法 B、萃取法 C、离心法 D、色谱法 第二题、多项选择题（每题2分，5道题共10分） 1、按流动相的状态分类，色谱法可分为（） A、GC B、LC C、SFC D、重结晶 2、按固定相的状态分类，色谱法可分为（） A、GSC B、GLC C、LLC D、LSC 3、按操作形成分类，色谱法可分为（） A、柱色谱法 B、平面色谱法 C、逆流分配法 D、体积排阻法 4、下列分离技术中，只有分离功能，没有分析功能的是（）

郑大远程教育《现代色谱分析》在线练习参考答案

郑大远程教育《现代色谱分析》在线练习参考答案 你当前正在学习《现代色谱分析》课程01版，本课程共4学分，分6个教学章。考试形式：撰写论文；考试级别：远程教育学院。 本课程你已通过考试，并取得了学分。成绩是：89 《现代色谱分析》第01章在线测试的得分为 20分 恭喜，交卷操作成功完成！你本次进行的《现代色谱分析》第01章在线测试的得分为20分（满分2 0分），本次成绩已入库。若对成绩不满意，可重新再测，取最高分。 测试结果如下： ? 1.1 [单选] [对] 气相色谱应归属的范畴是（A ） ? 1.2 [单选] [对] 毛细管电色谱所依靠的驱动力为（B ） ? 1.3 [单选] [对] GLC、LLC均应归属于（ B）、 ? 1.4 [单选] [对] 能将分离分析一次完成的方法是（D ） ? 1.5 [单选] [对] 1952年获诺贝尔化学奖的学者是（ B） ? 2.1 [多选] [对] 按流动相的状态分类，色谱法可分为（ ABC） ? 2.2 [多选] [对] 按操作形成分类，色谱法可分为（ABC ） ? 2.3 [多选] [对] 属分配色谱范畴的是（AB ） ? 2.4 [多选] [对] 属吸附色谱范畴的是（ CD） ? 2.5 [多选] [对] 制备型色谱仪主要用于（AB ） ? 3.1 [判断] [对] 薄层色谱属于液相色谱的范畴。（V ） ? 3.2 [判断] [对] 离子交换色谱和离子色谱的原理是一样的。（ X） ? 3.3 [判断] [对] 色谱法对分析对象的鉴别力是较强的。（X ） ? 3.4 [判断] [对] 亲和色谱用于分离纯化生化样品。（V ） ? 3.5 [判断] [对] 色谱法是用于分离有色物质的技术。（X ） 《现代色谱分析》第02章在线测试的得分为 20分 恭喜，交卷操作成功完成！你本次进行的《现代色谱分析》第02章在线测试的得分为20分（满分2 0分），因未超过库中记录的成绩18分，本次成绩未入库。若对成绩不满意，可重新再测，取最高分。 测试结果如下： ? 1.1 [单选] [对] 分离度增加一倍，柱长增加的倍数是（D ） ? 1.2 [单选] [对] 容量因子的表示式为 C ? 1.3 [单选] [对] 两组分的保留时间分别为8.0和10.0min，峰宽分别为2.8和3.2mm，记录纸速为5.0mm/min，则两峰的分离度为（B ） ? 1.4 [单选] [对] 描述组分在流动相与固定相间的“平衡”关系的参数是（ D） ? 1.5 [单选] [对] 色谱的定性参数有（ D） ? 2.1 [多选] [对] 描述色谱流出曲线的基线情况，可用的参数是（AB ） ? 2.2 [多选] [对] GC中纵向扩散项受影响的因素有（ABC ）

现代色谱理论

第二章现代色谱理论 色谱法(Chromatography)是一种分离分析方法。它是利用各物质在两相中具有不同的分配系数，当两相作相对运动时，这些物质在两相中进行多次反复的分配来达到分离的目的。 俄国植物学家M.Tswett于1906年首先提出色谱法。 色谱法分类 流动相名称固定相名称 气体气相色谱固体气固色谱 液体气液色谱液体液相色谱固体吸附剂液固色谱 液体液液色谱 键合固定相键合相色谱 多孔固体尺寸排阻色谱 离子交换剂离子交换色谱 纸纤维中的水纸色谱 固体吸附剂薄层色谱 超临界流体超临界流体色谱类似LC 超临界流体色谱 按分离机理： 吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 凝胶色谱法或尺寸排阻色谱（选择渗透） 亲和色谱法 第一节色谱法中常用参数 一、色谱流出曲线 1保留值

22 1ln 22σ=W σ4=b W 死时间t 0 保留时间t R 调整保留时间t’R ：t’R =t R -t O 死体积，保留体积，调整保留体积 2 区域宽度 半峰宽 峰底宽 标准偏差σ：0.607倍峰高处的色谱峰宽度的一半 3 容量因子ｋ’ 一定的温度、压力条件下，分配达平衡时，组分在两相中的总量之比称分配比k ′，又称容量因子。 k ′与K （分配系数）的关系为： 相对保留值 ： 4 柱效率 塔板理论 理论塔板数可按下式计算： 有效塔板数ｎeff 有效塔板高 m s W W K ==组分在流动相中的总量组分在固定相中的总量'β''K V V K V W V W c c K s m s m m s m s ====βK V V K k m s =='')1()2(')1(')2(')1()2(1,2R R V V k k K K ===αn L H =22122121)(54.5)(54.5)(54.5W d W V W t n R R R ===2 22)(16)(16)(16b R b R b R W d W V W t n ===