实习总结(微生物学)

实习总结（微生物学）

学院：资源环境学院

班别：08植保微生物1班

第五组：刘璐黄亚琴王衬娟李卓林冯文俊指导老师：王新荣王振中卓侃阮小蕾何艺郡实习日期：2010 年5 月4 日~ 2010 年5 月17 日

目录

水中（矿泉水）细菌总数的测定03 土壤中放线菌的分离纯化和菌落形态观察05 糯米甜酒的酿制10 刘璐的实习心得与感想11 黄亚琴的实习总结14 王衬娟实习感想16 冯文俊的实习心得18 第五组微生物学实习心得20

水中（矿泉水）细菌总数的测定

【摘要】：水是一种宝贵的自然资源,既是地球上的生命之源,也是人类的生命之源。水也是微生物广泛分布的第二个天然理想的环境. 水质中含有大量的细菌,进行水质的微生物学检测,实验室一般是检测水中细菌菌落总数。本文主要通过平板菌落计数法对矿泉水中细菌总数进行测定，结果表明目前市场上出售的矿泉水符合我国饮用水标准。

【前言】：水是生命之源，人的生存离不开水环境，水质的好坏对人民生活起着至关重要的作用，而判断水质的标准，微生物在水中的数量，种类是必不可少的。由于矿泉水在我们生活中经常饮用，因此我们选择矿泉水作为我们的水样来测定水中细菌的总数。细菌总数是指1ml水样在普通营养琼脂培养基中，37℃经过24h培养后，所生长的菌落数。良好的饮用水细菌总数应＜100CFU/ml，而＞500CFU/ml则不适宜饮用，而矿泉水的细菌总数应＜50CFU/ml。我国饮用水卫生标准（GB5749—85）规定每毫升水样细菌总数37℃培养24小时不得大于100个，每毫升矿泉水水样细菌总数37℃培养24小时不得大于50个。众所周知,水体中细菌总数往往同水体受有机物污染的程度呈正相关,它是评价水质污染程度的重要指标之一（张清敏等，2005）。水中细菌总数可说明被有机物污染的程度，细菌数越多，有机物质含量越大。本实验采用的是平板菌落计数技术测定水中细菌总数。

一、实验材料

1瓶矿泉水、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、1ml灭菌吸管、灭菌培养皿、无菌操作台、封口膜

二、实验原理:

水中细菌总数的测定有多种方法：倾注法、涂布法和双层培养法。本实验采用倾注法，即将1mL 水样加入平板内，再倒入融化的培养基，立即混匀，冷却凝固后倒置培养。其优点是：(1)通用；(2)较易使菌落均匀分布，计数容易；(3)取样量大，结果重现性好。倾注法缺点是：(1)该法不利于严格好氧菌的繁殖生长，分布在培养基内的部分细胞所形成的菌落较小，甚至无法形成菌落，(2)加上有些活菌受热损伤，使检测到的细菌总数偏低（徐飞等，2007）。

三、实验步骤

1.用灭菌吸管吸取1ml水样，注入灭菌培养皿中。(每个人做一个培养皿，共5个)

2.分别倾注约15ml已溶化并冷却到45℃左右的牛肉膏蛋白胨培养基，并立即放在平整的桌面上，作平面旋转摇动，使水样与培养基充分混匀。

3.另取一灭菌培养皿，不加水样，倾注牛肉膏蛋白胨培养基15ml,做空白对照。

4.培养基凝固后，倒置于37℃，培养24小时或者更长的时间，于第二天、第三天。第六天分别进行菌落计数。5个平板的平均菌落数，即为1ml 水样的细菌总数。

四、结果与分析讨论

结果分析与讨论：

在培养6天后，5个培养基中有4个均长了1个菌落，另外一个没有长菌落，从而计数出矿泉水中细菌总数为0.8 CFU/ml 。但是，在对照平板上，长出了一个细菌，说明在倒平板时，该培养皿被污染了。

1.从实验结果来看，矿泉水中细菌总数很少，符合每毫升矿泉水水样细菌总数37℃培养24小时不得大于50个的卫生标准。

2.实验结果中菌落数目偏小，有可能是在到平板时，牛肉膏蛋白胨培养基温度太高，将有些细菌杀死了。

3.在空白对照平板上出现了一个菌落，说明该培养基被污染了，有可能是在培养基在盖盖子的时候，有杂菌进入。

【参考文献】：

1.张清敏,李洪远,王兰. 环境生物学实验技术[M]. 北京:化学工业出版社,2005∶80.

2.徐飞,王开元,江迎春. 水中细菌总数测定方法的优化研究[J]. 研究·创新,2007.1

土壤中放线菌的分离纯化和菌落形态观察

【摘要】：土壤中存在各做微生物，本实验从土壤微生物群体中分离纯化得到放线菌，主要是通过制备土壤稀释液、涂布或是划线、培养、挑菌、再培养的步骤，最后进行菌落形态的观察。

【前言】：我们知道,人类在地球上生生不息的繁衍,无论是原始时代,还是现代社会,都是土壤为我们提供了最基本的食物来源,所以肥沃的土壤已成为庄稼丰收的重要保证。而土肥沃与否,与土壤中的微生物有着密切的关系,土壤中的微生物已成为土壤肥力的一个重要指标（赵涛，2003)。土壤微生物（放线菌、霉菌等）大部分对作物生长发育是有益的，它们对土壤的形成发育、物质循环和肥力演变等均有重大影响，对作物来讲是影响其生长发育的重要环境条件之一。在土壤中放线菌是以需氧性异养状态生活，它们的主要活动是分解土壤中的纤维素、木质素和果胶类物质等，通过这些作用来改善土壤的养分状况，便于作物直接吸收利用土壤养分。在酸性的土壤中，以霉菌的活动为主，而在中性和微碱性的土壤中，则是以放线菌的活动为主。本实验对土壤中的放线菌进行分离和纯化，从而得到较为纯净的放线菌，以便进行菌落形态的观察。

（一）高氏1号培养基的制备

一、培养基配方如下：

可溶性淀粉10g

KNO30.5g

NaCl 0.25g

KNO3 0.5g

K2HPO4?3H2O 0.25g

MgSO4?7H2O 0.25g

FeSO4?7H2O 10g

琼脂。 10g

水 500ml

二、实验仪器和其他用品：

试管，三角烧瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，天平，牛角匙，高压蒸汽灭菌锅，pH试纸，橡皮塞，记号笔，报纸，棉绳等。

实验步骤：

1.称量和溶化：按配方先称取可溶性淀粉，放入小烧杯中，并用少量冷水将淀粉调成糊状，再加入少于所需水量的沸水中，继续加热，使可溶性淀粉完全溶化。再称取其他各成分依次逐一溶化。对微量成分FeSO4·7H2O可先配成高浓度的贮备液后再加入，方法是先在100ml水中加入1g的FeSO4·7H2O配成0．01g/ml，再在1000ml培养基中加入1ml的0．01g/ml的贮备液即可。待所有药品完全溶解后，将琼脂放入已溶的药品中，再加热溶化，最后补足所损失的水分。

2.调pH：在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH，如果偏酸，用滴管向培养基中滴加入1mol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH，直至pH达7.6.反之，用1mol/L HCl进行调节。

3.过滤：趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利于某些实验结果的观察.一般无特殊要求情况下，这一步是可以省去的。

4.分装：按实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或者三角烧瓶内: 分装试管，其装量不超过管高的1/5，灭菌后制斜面。分装三角瓶的量以不超过三角瓶容积的一半为宜。

5. 加塞：培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶上塞上胶塞，以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染，并保证有良好的通气性能。

6.包扎：加塞后，将全部试管用棉绳捆好，再在胶塞外包一层报纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道棉绳扎好.用记号笔注明培养基名称，组别，配制日期.三角烧瓶加塞后，外包报纸，用棉绳以活结形式扎好，使用容易解开，同样用记号笔注明培养基名称，组别，配制日期。

7.灭菌:将将内层锅取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜，放回内层锅，并装入培养基，加盖，并将盖上的排气软管插入内层锅的排气槽内，加热，0.103MPa，121℃并同时打开排气，使水沸腾以排除锅内的冷空气，待冷空气完全排尽后，关上排气，让锅内的温度随蒸气压力增加而逐渐上升；当锅内压力升到所需压力时，维持压力至所需时间。20min后，切断电源或者关闭煤气，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至“0”时，打开排气，旋送螺铨，打开盖子，取出。将取出的灭菌培养基放入37°C温箱培养。24h，经过检查，若无菌生长，既可待用。

8.搁置斜面:将灭菌的试管培养基冷至50℃左右，将试管口端搁置在玻棒或其它合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。（二）土壤中放线菌的分离纯化和菌落形态观察

一、实验材料

土壤、90mL的灭菌水，9mL的灭菌水、高氏一号培养基、灭菌移液管、无菌玻璃涂棒、接种环、酒精灯、封口膜

二、实验原理

土壤是微生物生存的大本营，所含微生物无论是数量还是种类都是极其丰富的。因此，土壤是微生物多样性的重要场所，是发掘微生物资源的重要基地，人们可以从中分离、纯化获得许多有价值的菌株。土壤中放线菌的数量大体为106～107个（张黎明等，2003）。通过平板分离法来分离纯化土壤中的微生物，主要有平板划线分离法和稀释涂布法。

三、实验步骤

1.将所需要用的实验用具放入无菌工作台上，用紫外灯照射20min。

2.制备土壤稀释液：称取10g土样，在无菌工作台中将土壤放入盛有90mL 无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中，振摇20min使土壤与水充分混合，使细胞分散。用一支1mL无菌移液管吸取1mL土壤悬液加入盛有9mL无菌水的试管中，震荡，使之充分混匀，此为10-1稀释液，以此类推制成10-2、10-3、10-4、10-5这几种稀释度的土壤溶液。

3.涂布：点着酒精灯，用无菌移液管吸取0.2mL土壤稀释液于高氏一号培养基中央位置，拿起在火焰旁，用无菌玻璃涂棒在培养基表面轻轻地涂布均匀，其方法是将菌液先沿一条直线轻轻地来回推动，使之分布均匀，然后改变方向90度沿另一垂直线来回推动，平板内边缘处改变方向用涂棒再涂布几次，室温下静置5~10min。本实验10-4、10-5采用涂布的方法，各做两个培养基的。

4.划线：先将接种环在酒精灯火焰上烤上一会，等接种环冷却后，在接近酒精灯火焰处，左手那皿底，右手拿接种环，挑取土壤悬液一环在平板上划线，要连续划线，划好后，室温下静置几分钟。本实验10-3采用划线的方法，做两个培养基的。

5.将静置好的培养基用封口膜将口封好，并贴上标签。（标签上必须有实验人的名字、实验项目、土壤浓度和日期等）

6.将高氏一号培养基的平板倒置放于37度恒温箱中培养3~5天。

7.挑菌落：将培养后长出的单个菌落分别挑取少许菌苔接种到装有高氏一号培养基的斜面上，将斜面放置在37度恒温箱中培养，待长出菌苔后，检查其特征是否一致。本实验共做5个。

四、实验结果

将土壤稀释液接种到高氏一号培养基上，五天后发现所有培养基上都没有长出放线菌。为了让实验继续进行下去，我们利用已有的培养基上培养出的放线菌种进行纯化，即将放线菌接种到高氏一号的斜面上。培养四天后，斜面上长出大量的放线菌，其形态为：表面质地致密、丝绒状、干燥不透明的干粉状孢子。

五、实验结果分析

利用已有放线菌种纯化后的结果比较理想，菌落形态很正常，但是实验中我们组出现的最大问题在于我们接种后的培养基上没有长出放线菌，经分析，认为可能原因是

1、土壤采样不当，其中没有放线菌，所以培养不出放线菌；

2、进行涂布时涂布棒在酒精灯上灼烧后未冷却至适当温度就进行涂布，导致放线菌因温度过高而被烫死；

3、所制作的高氏一号培养基成分比例不当；

4、划线时，接种环上没有挑到菌落，以致培养不出放线菌的菌落；

5、进行稀释时，没有将试管充分摇匀，以致吸取的0.2ml的土壤稀释液中没有带有放线菌。

6、可能是土壤中的放线菌太少了，稀释后在试管中基本上没有了，所以培养不出放线菌。

所以，以后在进行实验时，注重实验中的每一个细节，严格按照实验步骤中所说的来做，否则的话就可能导致实验的失败。

【参考文献】：

1. 赵涛. 土壤中的微生物[J].生物学通报，2003：38-11.

2. 张黎明,冯亚敏,朱铁军,郎玉良,刘兆军,王兴华. 大豆根系土壤中微生物的初步研[J].吉林林业科技， 2003（1）：32-1.

糯米甜酒的酿制

一、实验目的：

学习和掌握酵母菌发酵糖产生酒精和酒曲发酵糯米配制糯米甜酒的方法。

二、实验原理：

以糯米经甜酒发酵制成的甜酒是我国的传统发酵食品。糯米经过蒸煮糊化，利用酒药中的根霉和米曲霉等微生物将原料中的淀粉糖化，将蛋白质水解成氨基酸，酵母菌利用糖化产物生长繁殖，并通过酵解途径将糖转化成酒精，从而赋予天就特有的香气、风味和丰富的营养。

三、实验材料和用具：

安琪甜酒曲、矿泉水、糯米、蔬果塑料保鲜箱。

四、操作步骤：

1．甜酒培养基制作：称取约500g糯米。用水淘洗干净后，加水量为米水比1：1，加热煮熟成饭，即为甜酒培养基。

2．接种：糯米冷却至35℃以下，加入约4g的甜酒曲并喷洒一些清水拌匀，然后装入到干净的蔬果塑料保鲜箱中。装饭量约为容器的l/3，中央挖洞，饭面上再撒一些酒曲，盖好盖子，置25～30℃下培养发酵。

3．培养发酵：当渗出液达到一定量时把洞填平，让其继续发酵。

4．产品处理：培养发酵至第7d取出，把酒槽滤去，汁液即为糯米甜酒原液，加入一定量的水。加热煮沸便是糯米甜酒，即可品尝。

五、注意事项：

酿制糯米甜酒时糯米饭一定要煮熟煮透，不能太硬或夹生；米饭一定要凉透至35℃以下才能拌酒曲，否则会影响正常发酵。

六、实验结果与分析：

结果：发酵1d之后，可见糯米饭面长满一层根霉菌；发酵2d后可闻到酒香味，并且开始渗出清液；3d天后渗出液越来越多。糯米甜酒外观呈白色浑浊状液体，味道带有酒香味而且夹带一点酸味，口味香甜醇美。

分析：静止培养使发酵过程处于低氧条件下，能够在更大程度上进行发酵。发酵的正常进行，依赖于发酵过程的温度控制，需控制在35℃以下，这是应用

酒曲进行发酵的的最适温度，温度过高或过低都会影响发酵的正常进行。

实习心得与感想

（08植保微生物1班刘璐第五组）

2010年5月4号下午到2010年5月7号我们植保微生物1班进行了集中将近一周的微生物学实习，在实习期间，除了在实验室里面做实验，观察实验，我们还分别在5月6号上午和5月7号上午参观了珠江啤酒厂和广东省微生物研究所。这是我们的第一次实习，做了三个主要的实验，也进行了外出参观学习，下面我就本周的实习谈下自己的感想与心得。

一、珠江啤酒厂

5月6号上午，在阮小蕾老师的带领下，我们坐上了去珠江啤酒厂的包车，一路上，大家都挺兴奋的，虽说都有喝过啤酒，但是看啤酒的生产内容还是第一次。又由于我们所学专业和啤酒发酵有关联，因此，在激动的同时我们也充满了期待的心情。

到了珠江啤酒厂后，由相关负责人先给我们在演播厅放了一个关于啤酒历史与生产、珠江啤酒厂历史的宣传片，宣传片中图文生动形象，内容丰富，让我们对啤酒的历史与生产有了一定的认识，并且对接下来的参观也有了很大的期待。在观看完啤酒生产的视频后，我们跟随负责人来到了啤酒的生产车间参观并学习啤酒的生产流程。在负责人详细的讲解与实地参观后，我了解到啤酒的生产过程大致分为这四个阶段：糖化、发酵、过滤、罐装四个部分。先把发芽的大麦在滚筒碾碎机中碾碎，注入热水混合，旋转入麦芽汁桶;在酿造罐中，再煮沸麦芽汁并添加啤酒花，通常要煮一个半小时到三个小时。然后，过滤掉啤酒花沉淀，再用离心法分离掉沉淀的蛋白质，冷却至发酵温度，麦芽汁输送至初级发酵罐中，在那里加入一定量的新鲜酵母。大多数情况下，发酵过程要持续五至十天，然后“清”啤酒被注入后熟罐，在那里需要进一步净化和老化一至二周。拉格啤酒通常要经历更长时间的发酵期；二周的初级发酵，二周的二级发酵以及一到六个月的后熟。熟啤酒离开啤酒厂之前，经过过滤和罐装，并加入二氧化碳，最后成为我们见到的啤酒。

参观完啤酒生产车间与罐装流水线后，我们真的很惊叹科学技术的发展，那一瓶瓶看似简单的啤酒要经过那么多道工序才能生产出来，生产过程中也要控制

好很多方面的因素，这样才能保证啤酒质量的合格。在生产过程中，大麦与酵母是很重要的两个方面，质量好的大麦对啤酒的质量来说是一大保证，而酵母就像一个魔术师，将麦芽和大米中的糖分发酵成啤酒，产生酒精、二氧化碳和其他微量发酵产物。看来微生物真的在啤酒生产中有很大的功劳呢！整个生产的流程，在这里都很有序地进行，规模之大，机器之先进，人员分工之明确，这些无疑使得这个集团在社会中立足脚跟，给人们提供更优质的生活。

二、参观广东省微生物研究所

5月7号上午，我们在卓侃老师的带领下，参观了广东省微生物研究所。到了研究所后，我们由两个老师带领，参观分为两个阶段进行。

首先我们参观了广东省微生物应用新技术公共实验室，在参观过程中，老师给我们详细介绍了实验室中的各个仪器，大大开阔了我们的眼界，让我们了解到原来还有这么精密的仪器。超速冷冻离心机、微量离心机、自动发酵装置、分液泵等等很多仪器都是第一次见到，这些仪器的精密也保证了实验结果的精密。实验室中的水管中的水都是由管道输送的，输送过程中就进行了过滤纯化的作用，也保证了实验的精密性。在最后，老师带领我们观看了电子显微镜下一些细菌的图片，这是我第一次亲眼看到电子显微镜下的图像，虽然我没有亲自使用，但已经切身的体会到电子显微镜的分辨本领远远高于光学显微镜了。

然后，我们由另一位老师带领，参观了虫草培养室、微生物菌种保藏中心、大型真菌标本馆等研究室。没参观虫草培养室之前，我一直认为虫草是自然生产的，没想到现在已经可以人工在大米培养基上面繁殖生长了。真的很感叹人类的探索精神与科研精神，可以人工培养那么贵重的药用植物，并使它们越来越大众化。参观完菌种保藏中心后，我了解到这个菌种保藏中心是华南地区最大、最专业的微生物菌种保藏中心，保藏有应用于科研、教学、生产等各个方面的大量菌株，已经为国内多家大专院校、科研单位和生产企业提供菌种服务，为国家发展农业经济做出了积极的贡献。参观完菌种这一部分内容后，我觉得菌种在我们生活中已经起到越来越重要的作用，将菌种更好的保存起来也成为菌种研究中一项重要的内容。

三、本周实验

1.水中（矿泉水）细菌总数的测定

在这个实验中，我们组采用的是矿泉水作为我们的实验材料，主要内容是：将1ml的水样加入到灭菌的培养皿中，然后倾倒熔化好的牛肉膏蛋白胨培养基，待冷却凝固后封口、标记，放入恒温箱中进行培养。每个人均做一个培养皿，整个小组做了一个对照。并于一天后、两天后、六天后分别取出进行观察，观察细菌的形态，并对细菌进行计数。六天后，我们的结果为细菌总数为4个，细菌总数很少，说明矿泉水中的细菌很少，这也表明我们所饮用的矿泉水的符合卫生标准。

2.土壤中放线菌的分离纯化和形态观察

我们小组在学校树木园进行土壤的采样，然后称取10g土样加入到90ml无菌水中进行充分地溶解。用一支1mL无菌移液管吸取1mL土壤悬液加入盛有9mL 无菌水的试管中，震荡，使之充分混匀，此为10-1稀释液，以此类推制成10-2、10-3、10-4、10-5这几种稀释度的土壤溶液。分别取0.2ml的稀释度为10-3、10-4、10-5的土壤稀释液滴入高氏一号培养基的正中央，采用涂布或是划线的方法，最后封口、标记，放入恒温箱中培养，几天后观察菌落的生长状况。最后进行转接纯化。由于实验中出现一些问题，我们组的培养基中没有长放线菌。说明我们的实验中可能某个过程出现问题了。比如说：土壤采样不当，其中没有放线菌，所以培养不出放线菌；进行涂布时涂布棒在酒精灯上灼烧后未冷却至适当温度就进行涂布，导致放线菌因温度过高而被烫死；所制作的高氏一号培养基成分比例不当等方面的因素。

在后期放线菌的分离纯化实验中，我们利用已有的培养基上培养出的放线菌种进行纯化，即将放线菌接种到高氏一号的斜面上。培养四天后，斜面上长出大量的放线菌，其形态为：表面质地致密、丝绒状、干燥不透明的干粉状孢子。本次划线纯化实验很成功，我们也掌握了在试管中划线接种的方法。

3.米酒的制作

米酒的制作是在大家宿舍里面的做的，虽然貌似制作地方没有实验室那么正式，但是大家还是在很认真的制作。米酒的制作过程主要是：先煮糯米饭，要求饭硬而不夹生，太软太烂会影响米酒质量。然后要把饭摊凉，把米饭松散，再加入酒曲，在米饭中搅拌均匀，并将米饭压紧，封上保鲜膜并盖上盖子，大约发

酵36小时，将容器盖打开，加满凉开水，再盖上盖后，放入冰箱，即停止发酵。

在制作米酒的过程中，通过查找资料，我发现在米酒制作过程中，发酵温度很重要，并且一定要密封好，拌酒曲的时候，米酒一定要凉下来，只有每个步骤都严谨操作，我们才能制作出好的米酒。

总体来说，本周实习我们大家都很认真努力，虽然有些实验的结果不是很令人满意，但我们也深刻的考虑了下产生这种结果的原因，让我们获得了更多的经验。参观实习也开阔了我们的眼界丰富了我们的知识。有了这周实习的经验，相信我们在以后实验与学习的过程中，会更加熟练与认真，也很感谢老师给我们这次实习的机会，让我们学到这么多的知识，有更多的收获。

实习总结

（08植保微生物1班黄亚琴第五组）

此次微生物学的实习，可以说是我们进入大学以来的第一次实习。实习给人的感觉是很轻松，因为我们不用上其他的任何课程，只需专注于与实习有关的内容。当然，最重要的是，实习是一次系统地实践过程，是对理论课的一种很好的补充和扩展，其目的是要求我们能够从具体的实验和参观中学到一些课本以外的知识，比如视野的拓展、实验的技能、团队协作能力的培养等等。

本次实习的内容主要有以下六个方面：

培养基的制作

我们组主要是制作了牛肉膏蛋白胨培养基和高氏一号培养基，制作的过程很简单，即根据各个培养基固有的配方依次将原料加入水中，煮沸直至全部融化，当然，这两个培养基都是固体培养基，在制作的过程中需加入琼脂作为凝固剂。制作好后，就进行分装，分装在三角瓶和试管中，以为实习接下来内容做好准备。

水中（矿泉水）细菌总数的测定

我们组分配到的任务是测定矿泉水中的细菌总数。主要是将1ml的水样加入到灭菌的培养皿中，然后倾倒熔化好的牛肉膏蛋白胨培养基，待冷却凝固后封口、标记，放入恒温箱中进行培养。一段时间后取出进行观察，观察细菌的形态，并对细菌进行计数。我们的结果表明我们所饮用的矿泉水是符合卫生标准的。

土壤中放线菌的分离纯化和菌落形态观察

本组在学校树木园进行土壤的采样，然后称取10g土样加入到90ml无菌水中进行充分地溶解。用一支1mL无菌移液管吸取1mL土壤悬液加入盛有9mL无菌水的试管中，震荡，使之充分混匀，此为10-1稀释液，以此类推制成10-2、10-3、10-4、10-5这几种稀释度的土壤溶液。分别取0.2ml的稀释度为10-3、10-4、10-5的土壤稀释液滴入高氏一号培养基的正中央，采用涂布或是划线的方法，最后封口、标记，放入恒温箱中培养，几天后观察菌落的生长状况。最后进行转接纯化。由于实验中出现一些问题，我们组的培养基中没有长放线菌。

珠江啤酒集团参观

先是观看了一段视频，介绍了啤酒产业的历史、发展及前景，让我们了解了啤酒的文化历史背景以及制作的过程。然后我们参观了珠江啤酒集团的生产车间，大致地明白了啤酒的酿造过程:首先把发芽的大麦在滚筒碾碎机中碾碎，注入热水混合，旋转入麦芽汁桶;在酿造罐中，再煮沸麦芽汁并添加啤酒花，通常要煮一个半小时到三个小时。然后，过滤掉啤酒花沉淀，再用离心法分离掉沉淀的蛋白质，冷却至发酵温度，麦芽汁输送至初级发酵罐中，在那里加入一定量的新鲜酵母。大多数情况下，发酵过程要持续五至十天，然后“清”啤酒被注入后熟罐，在那里需要进一步净化和老化一至二周。拉格啤酒通常要经历更长时间的发酵期；二周的初级发酵，二周的二级发酵以及一到六个月的后熟。熟啤酒离开啤酒厂之前，经过过滤和罐装，并加入二氧化碳，最后成为我们见到的啤酒。整个生产的流程，在这里都很有序地进行，规模之大，机器之先进，人员分工之明确，这些无疑使得这个集团在社会中立足脚跟，给人们提供更优质的生活。

广东省微生物研究所的参观

参观分两个大的部分，一是实验大楼中各种仪器的参观，二是真菌标本馆的参观。比起我们学校实验室里的仪器，这里的实验仪器可谓是令人眼花缭乱，震荡室、离心室、显微镜室等等。其中给我留下最深印象的是那些超高速离心机，速度可达每分几万转，可想而知，那离心效果是多么好。另外我还发现，所有用于作为实验溶剂或其他作用的水都是经过管道输送，其间进行了过滤纯化的过程，可见该实验室对实验标准的严格。还有很多我们都叫不出名字的仪器，不禁感叹未知的世界还等着我们去探索。对于真菌标本馆的参观，我了解到这里是华南地

区最大的，极具特色的菌物标本馆，现已被认定为广州市科普教育基地。参观的过程中，我看到了人工栽培的北虫草的培植过程，了解了菌种的分离纯化过程及其被提取出后的各种用途，同时，我还在电子显微镜下看到了灵芝孢子的形态。感受最深的，就是认识到菌类可以在人们的饮食和健康中起到很重要的作用，比如很多可以都具有重要的药用价值。

米酒的自制

将糯米蒸熟成米饭（不要太硬）后凉至不烫手的温度；将米饭铲出一些到用来发酵米酒的容器里，平铺一层；将捻成粉后的酒曲，均匀地撒一些在那层米饭上；再铲出一些米饭平铺在刚才的酒曲粉上，再铺上一层米饭……就这样，一层米饭、一层酒曲的铺上；将容器盖盖严，放在适宜的温度下；大约发酵36小时，将容器盖打开加满凉开水以终止发酵，再盖上盖后，放入冰箱。

以上是整个一周实习的内容，不管是从实验操作还是课外知识方面都有不少收获，在我们组五个成员的共同努力和协作下完满地完成了任务，虽然其中有失败的地方，但我相信我们会在以后的学习中不断改正错误，争取更大的进步。

实习感想

（08植保微生物1班王衬娟第五组）

第十周，我们的微生物课进行了实习。这是我们大学以来第一次的全班实习，觉得很开心，当然，我从中也学到了许多东西。

珠江啤酒厂之行

星期四早上，我们一行人在阮老师的带领下来到了珠江啤酒厂参观。刚来到那珠江啤酒厂的博物馆的门口就觉得这很有感觉。进去参观前，我们看了一部短片，是关于啤酒的发展史的，这让我这个外行人更加了解啤酒了，知道了大麦是啤酒的原料，水是其血液，酒花是其灵魂，酵母是其精灵。这四样东西对啤酒来讲是必不可少的。因为有了这四样东西加上时间的加工，才会有啤酒的鲜甜可口。

接下来工作人员带领我们参观了他们的工作间，那是十分的厉害啊，有监控室，全程观看他们的生产情况，若是有什么特发事故，他们可以第一时间知道。

这就是大规模公司在社会上得以立足的厉害之处啊！而且他们还把生产啤酒所产的热量收集起来再加以利用，用在饭堂和其他用得着的地方，这真是既环保又节约成本啊。再来我们看了大麦被压的地方，那是十分热的地方，但那又充满了大麦的香味，没见过大麦的我可以一闻大麦的香味真是感到很幸运。接着就是到他们的糖化间，没看见什么，但还是觉得不可思议。而啤酒制作最重要的发酵过程就是在大罐子中进行的，珠江啤酒厂的发酵过程是十五天，比以前的发酵（三个月）快了许多。这就是技术的进步，这也证明了我国的技术是上乘的。最后的一道工序装瓶了。我们在隔着玻璃看见的是一箱一箱的啤酒被机械化地装进纸箱和塑料箱中，真的很有规模。跟着我们参观了啤酒博物馆，在那解说员跟我们说了啤酒的历史，看见了古时候制作啤酒的器皿，真的很有感觉。还有游戏玩呢。最后还可以免费喝啤酒，真好！

这珠江啤酒厂之行收获很大，

我知道了啤酒的生产过程，这其中最重要的是酵母，这我们学习的微生物，他为我们创造出美味的啤酒，在让我对微生物有了更进一步的了解，让我更有动力去学习它，以后造福人类。

广东省微生物研究所之行

周五早上我们去广东省微生物所参观，但因为我个人坚持己见，最后迟到了十几分钟，让同学们在等我们，真的感到很愧疚。

到那后我们分成了两组，我们组先去参观重点实验室，在参观过程中我看见了许多仪器，都是跟研究微生物有关的，真的很多，看见了那的研究人员，一个念头突然冒出来：要、能成为其中一员的话那真好。但毕竟那只是一个想法而已，要实现是要很努力的。实验室内的器材真的种类繁多，这真不愧是省的重点实验室。

接下来我们到真菌标本馆参观，那所拥有的真菌种类繁多，那的老师在研究菌种之间的相互作用，老师告诉我们，微生物的突变率很大，到第四代时，已经变得没有以前的好了，所以研究很繁琐，而培养菌种的是使用米饭，这成本低又好的原料。所里还研究菌种代谢产物，看看那是不是有可能的药用价值。最后我们还品尝了用虫草和鸡熬成的汤以及灵芝孢子粉茶，这灵芝孢子是一种对化疗很有用的保养品。

这微生物所之行真的很受益，我决定以后要好好学习微生物知识，用我的微薄之力为社会贡献自己的一份力量。

实验

实验中我们组做的不是太好，这其中的原因很多，我觉得我以后的实验要严格按照实验步骤进行，要以严谨的态度对待每一次实验，在失败后要找出原因，以后改正，这样才会有进步。老师说的很对：实验中你对得起它，它就对得起你。在这实习过程我中收获很多，要感谢老师的教导和同学们的包容。要好好学习，努力向上。

实习心得

——参观广州珠江啤酒厂和广东省微生物研究所

（08植保微生物1班冯文俊第五组）

在这学期的实习周，我们班参观了广州珠江啤酒厂和广东省微生物研究所。两次参观令我受益匪浅！

广州珠江啤酒厂是一家以啤酒业为主体、以啤酒配套和相关产业为辅助的大型现代化企业，以150万吨的生产能力成为全球单厂最大的啤酒酿造中心之一。广州珠江啤酒厂的各项消耗指标、循环经济和清洁生产均处于国内外行业领先水平，烟囱实现“无烟”排放，污水经处理后可以养鱼、产生的沼气已用于发电，是广东省工业第一家、我国啤酒行业第一家通过清洁生产审核验收的企业。它秉承了“酿造至纯，让生活更真”的企业使命，立足中国，放眼世界，加快企业发展步伐，努力实现“以‘五个领先（技术领先、质量领先、管理领先、规模领先和效益领先）’打造具有国际竞争力的啤酒企业”的宏伟目标。在了解其企业概况及企业文化后，心里不由自主地向往以后能在像广州珠江啤酒厂一样的实力宏厚、活力十足的企业工作。

参观广州珠江啤酒厂最精彩的部分当然是它生产珠江啤酒的整个生产流程：①选择优质的啤酒原料麦芽进行粉碎，粉碎对糖化的生化反应，对麦汁的组成

成分，对麦汁过滤速度及原料利用率起到很大的促进作用。

②将粉碎后的大米加到糊化锅中，加入温水，在一定温度下制成液化完全的醪

液，再加入糖化锅中与麦芽一起糖化。

③糖化结束后，将糖化醪泵送到过滤机，把麦芽汁与麦槽分离出来，得到澄清

的麦芽汁。

④麦芽汁输送到麦汁煮沸锅中，加入酒花并加热煮沸1个多小时，使麦汁的成

分稳定并使酒花的香味、苦味及各种有效成分溶于麦芽汁中。

⑤麦汁计入冷却器中冷却，冷却至10℃左右以便接种啤酒酵母进行发酵。

⑥加入酵母，发酵。麦芽汁经过冷却后，加入啤酒酵母和无菌空气，输送到发

酵罐中，开始发酵。

⑦硅藻过滤。发酵液成熟后，经过离心及多重过滤，才可以进行灌装。

⑧包装成品。

其生产流程是相当的精彩的，里面涵括了相当多的关于《微生物学》的知识。认真了解后，促使我对微生物产生更浓厚的兴趣，而且慢慢越发感觉到，我以后应该像广州珠江啤酒厂一样，活用微生物来造福人类社会。

另外，我们接着参观了广东省微生物研究所。广东省微生物研究所的科技业务工作主要有科技创新、公正性监督检测和成果转化及产业化三个方面。其重点领域为微生物的基因工程及应用研究、微生物的育种和发酵工程、环境微生物及污染物的治理、微生物检测与诊断及防治、微生物资源多样性研究与前期开发五个方面。目前所内已形成环境微生物学、资源微生物学、分析微生物学和霉腐微生物等四个优势学科。

广东省微生物研究所是我理想的工作单位，但是，这么优秀的单位接收本科生的门槛是比较高的。以后大四真正实习工作的时候，我很愿意选择广东省微生物研究所，因为在里面我很多的专业知识都可以发挥作用。然而，形势也是严峻的。它要求我更加刻苦学好专业知识，为工作打好夯实的基础。

这次实习给了我很大的启发：像广州珠江啤酒厂和广东省微生物研究所一样，优秀的企业接收的是优秀一流的人才，鉴于目前严峻的就业形势，我应该从现在开始，努力学习专业知识，培养自己各方面的能力，为以后进入一流企业准备筹码。

第五组微生物学实习心得

（组员：刘璐黄亚琴王衬娟李卓林冯文俊）

2010年5月4号下午到2010年5月7号我们植保微生物1班进行了集中将近一周的微生物学实习实习。5月11号和5月13号，我们小组继续进行了我们小组未完成的实习内容。在实习期间，我们除了在实验室里面做实验，观察实验，我们还分别在5月6号上午和5月7号上午参观了珠江啤酒厂和广东省微生物研究所。这是我们的第一次实习，做了三个个主要的实验，也进行了外出参观学习，本次实习是一次系统地实践过程，是对理论课的一种很好的补充和扩展，其目的是要求我们能够从具体的实验和参观中学到一些课本以外的知识，比如视野的拓展、实验的技能、团队协作能力的培养等等。

本次实习的内容主要有以下三大方面：

一、参观珠江啤酒厂

5月6号上午，在阮小蕾老师的带领下，我们坐上了去珠江啤酒厂的包车，一路上，大家都挺兴奋的，虽说都有喝过啤酒，但是看啤酒的生产内容还是第一次。又由于我们所学专业和啤酒发酵有关联，因此，在激动的同时我们也充满了期待的心情。

到了珠江啤酒厂后，由相关负责人先给我们在演播厅放了一个关于啤酒历史与生产、珠江啤酒厂历史的宣传片，宣传片中图文生动形象，内容丰富，让我们对啤酒的历史与生产有了一定的认识，并且对接下来的参观也有了很大的期待。在观看完啤酒生产的视频后，我们跟随负责人来到了啤酒的生产车间参观并学习啤酒的生产流程。在负责人详细的讲解与实地参观后，我了解到啤酒的生产过程大致分为这四个阶段：糖化、发酵、过滤、罐装四个部分。先把发芽的大麦在滚筒碾碎机中碾碎，注入热水混合，旋转入麦芽汁桶;在酿造罐中，再煮沸麦芽汁并添加啤酒花，通常要煮一个半小时到三个小时。然后，过滤掉啤酒花沉淀，再用离心法分离掉沉淀的蛋白质，冷却至发酵温度，麦芽汁输送至初级发酵罐中，在那里加入一定量的新鲜酵母。大多数情况下，发酵过程要持续五至十天，然后“清”啤酒被注入后熟罐，在那里需要进一步净化和老化一至二周。拉格啤酒通常要经历更长时间的发酵期；二周的初级发酵，二周的二级发酵以及一到六个月的后熟。熟啤酒离开啤酒厂之前，经过过滤和罐装，并加入二氧化碳，最后成为