烟草中提取烟碱
实验三、从烟草中提取烟碱
内容：P93-96和P42-44 一、实验目的（明确）
1、 学习从烟草中提取烟碱的基本原理和方法。
2、 初步了解烟碱的一般性质。
3、 掌握水蒸汽蒸馏的操作技术。 二、实验原理（介绍）
烟草中含有多种生物碱，除主要成分烟碱（约含2 ~ 8 %）
外，还含有去甲烟碱、假木烟碱和多种微量的生物碱。烟碱
又名尼古丁，是由吡啶和吡咯两种杂环组成的含氮碱，其结构式如右图：
烟碱能与HCl 结合生成烟碱盐酸盐（弱碱强酸盐）而溶于水中，在此提取液中加入强碱NaOH 后，可使烟碱游离出来。
+ HCl →
游离烟碱在100℃左右具有一定的蒸气压。因此，可利用水蒸气
N
N
CH 3
N N
CH 3
N N CH 3
蒸馏法分离提取。
由烟碱的结构可知，烟碱具有碱性，它不仅可以使红色石蕊变蓝，
还可以使酚酞试剂变红，并可以被KMnO4溶液氧化生成烟酸，与生物
碱试剂作用产生沉淀。
附：水蒸气蒸馏原理（见书P46）
三、实验仪器与试剂（要求学生认真检查）
1. 仪器
长颈圆底烧瓶（250 mL）圆底烧瓶（100 mL）直形冷凝管电
热套玻璃棒试管止水夹
蒸汽导管（导入、导出）烧杯（100 mL）球形冷凝
管接液管 T形管滴管洒精灯
锥形瓶（100 mL）量筒（100 mL）
2.试剂
烟叶（或烟丝） HCl溶液10 % NaOH 40 % KMnO4 % 酚酞 % Na2CO3 5 %
苦味酸（饱和）
3. 其它
红色石蕊试纸沸石
四、实验内容（简单介绍）
1、烟碱的提取
取一支烟，拨去外纸，将烟丝置于100 mL圆底烧瓶内，加入20 mL10％HCl溶液，安装好回流装置，回流20 min。（如图3. a）将反应化合物冷却至室温，在不断搅拌下慢慢滴加40％NaOH溶液，使之呈明显碱性（用红色石蕊试纸检验）。
按图3. b安装好水蒸汽蒸馏装置。通入冷却水后，用电热套加热水蒸汽发生器，当有大量水蒸汽产生时，关闭T形管上的止水夹。
收集约10 mL提取液后，先打开止水夹，再停止加热[2]。待体系稍冷却，关闭冷却水。
2、烟碱的性质检验
（1）碱性试验：取10滴烟碱提取液，加入1滴%酚酞试剂，振摇并观察现象。另取1滴烟碱提取液在红色石蕊试纸上，观察试纸的颜色变化。解释上述现象。
（2）氧化反应：取20滴烟碱提取液加入1滴％KMnO4溶液和3滴5％Na2CO3溶液，摇动试管，于酒精灯上微热，观察颜色是否变化，有无沉淀生成。
（3）与生物碱的反应：取10滴烟碱提取液，逐滴加入饱和苦味酸，边加边摇动，观察有无黄色沉淀生成。
图 3. a 回流图3. b水蒸气蒸馏
五、注意事项（强调）
1、电热套温度控制。
2、水蒸汽蒸馏装置的搭建（万用夹朝向松紧、气密性、防堵塞）
和拆卸。
3、注释[1] 水蒸汽蒸馏提取烟碱时，中和至混合物呈明显碱性是实验成败的关键，否则烟碱不能被蒸出。[2] 水蒸气蒸馏过程中，热源要稳定，否则会产生倒吸现象。（加热至有大量水蒸汽产生时才关闭止水夹。）停止加热前一定要先将螺丝打开，再移去热源，以防倒吸。
六、结果与分析P15
实验内样品试剂实验现象实验原理结论
六、思考题（提问）
1、与普通蒸馏相比，水蒸汽蒸馏有何特点在什么情况下采用水蒸汽蒸馏的方法进行分离提取P46-47
答：特点：在不溶或难溶于水但有一定蒸气压的有机物中通入水蒸气，使有机物在低于100℃温度下，随着水蒸气一起蒸馏出来。
适用情况：(1) 含有大量树脂状或不挥发性杂质，采用普通蒸馏或萃取等方法都难以分离的混合物。(2) 从较多固体反应物中分离出被吸附的液体。(3) 某些在常压下蒸馏可与杂质分离，但其本身易被破坏的高沸点有机物。(4) 从某些天然物中提取有效成分。
使用水蒸汽蒸馏提纯的有机物应具备下列条件：不溶或难溶于水；与水长时间煮沸不发生化学反应；在100C左右时，待提纯物应具有一定的蒸汽压（一般不少于 kPa）。
2、停止水蒸汽蒸馏时，为什么要先打开螺丝夹，再停止加热P48
注释[1] P171注释[2]
答：停止水蒸汽蒸馏时，先打开螺丝夹，再停止加热，以免发生倒吸。
3、水蒸汽蒸馏提取烟碱时，为什么要用NaOH中和至明显碱性
P170
答：在提取液中加入NaOH中和至明显碱性，目的是让烟碱盐酸盐完全与NaOH反应而使烟碱游离出来，否则烟碱不能被蒸出。
4、安全管为什么不能抵至水蒸汽发生器的底部
答：安全管是用来调节水蒸汽发生器内部的压力，如果抵至发生器的底部，则系统发生阻塞，无法与大气完全相通，不能起到安全的作用。
5、蒸馏过程中若发现水从安全管顶端喷出或发生倒吸现象，应如
何处理P48注释[1]
答：蒸馏过程中若发现水从安全管顶端喷出或发生倒吸现象，应立即打开螺丝夹，然后移去热源，排除不良现象后再继续加热。七、布置预习内容：
实验烟草中提取烟碱
实验三、从烟草中提取烟碱 内容：P93-96和P42-44 一、实验目的（明确） 1、 学习从烟草中提取烟碱的基本原理和方法。 2、 初步了解烟碱的一般性质。 3、 掌握水蒸汽蒸馏的操作技术。 二、实验原理（介绍） 烟草中含有多种生物碱，除主要成分烟碱（约含2 ~ 8 %）外，还含有去甲烟碱、假木烟碱和多种微量的生物碱。烟碱又名尼古丁，是由吡啶和吡咯两种杂环组成的含氮碱，其结构式如右图： 烟碱能与HCl 结合生成烟碱盐酸盐（弱碱强酸盐）而溶于水中，在此提取液中加入强碱NaOH 后，可使烟碱游离出来。 + HCl → 游离烟碱在100℃左右具有一定的蒸气压。因此，可利用水蒸气蒸馏法分离提取。 由烟碱的结构可知，烟碱具有碱性，它不仅可以使红色石蕊变蓝，还可以使酚酞试剂变红，并可以被KMnO 4溶液氧化生成烟酸，与生物碱试剂作用 产生沉淀。 附：水蒸气蒸馏原理（见书P46） 三、实验仪器与试剂（要求学生认真检查） 1. 仪器 长颈圆底烧瓶（250 mL ） 圆底烧瓶（100 mL ） 直形冷凝管 电热套 玻璃棒 试管 止水夹 蒸汽导管（导入、导出） 烧杯（100 mL ） 球形冷凝管 接液管 T 形管 滴管 洒精灯 锥形瓶（100 mL ） 量筒（100 mL ） N N CH 3
2.试剂 烟叶（或烟丝） HCl溶液10 % NaOH 40 % KMnO4 0.1 % 酚酞 0.1 % Na2CO3 5 % 苦味酸（饱和） 3. 其它 红色石蕊试纸沸石 四、实验内容（简单介绍） 1、烟碱的提取 取一支烟，拨去外纸，将烟丝置于100 mL圆底烧瓶内，加入20 mL10％HCl溶液，安装好回流装置，回流20 min。（如图3. a） 将反应化合物冷却至室温，在不断搅拌下慢慢滴加40％NaOH溶液，使之呈明显碱性（用红色石蕊试纸检验）。 按图3. b安装好水蒸汽蒸馏装置。通入冷却水后，用电热套加热水蒸汽发生器，当有大量水蒸汽产生时，关闭T形管上的止水夹。 收集约10 mL提取液后，先打开止水夹，再停止加热[2]。待体系稍冷却，关闭冷却水。 2、烟碱的性质检验 （1）碱性试验：取10滴烟碱提取液，加入1滴0.1%酚酞试剂，振摇并观察现象。另取1滴烟碱提取液在红色石蕊试纸上，观察试纸的颜色变化。解释上述现象。 （2）氧化反应：取20滴烟碱提取液加入1滴0.1％KMnO4溶液和3滴5％Na2CO3溶液，摇动试管，于酒精灯上微热，观察颜色是否变化，有无沉淀生成。 （3）与生物碱的反应：取10滴烟碱提取液，逐滴加入饱和苦味酸，边加边摇动，观察有无黄色沉淀生成。 图3. a 回流图3. b水蒸气蒸馏 五、注意事项（强调）
烟草分级
第一章概述 第一节烟叶分级的重要性 一、烟叶分级的目的 对烟叶内在质量的优劣进行等级划分，充分发挥农业资源，达到烟叶以质论价，优质优价。 二、以外观质量因素（外观质量）评价内在质量 三、烟叶分级的重要性 1、有利于合理利用国家资源，物尽其用，充分发挥资源的经济效益。 2、满足卷烟工业的需要。 3、有利于贯彻以质论价，优质优价的价格政策。 4、有利于促进烟叶生产的发展，提高烟农的经济收入。 5、有利于商业经营和对外贸易。 6、合理分级，有利于烟叶副产品的开发利用。 第二节国标的作用及组成 一、国标的作用 1、质量导向作用。 2、对烟草农业生产（栽培）起引导作用。即市场需要什么样的烟叶就生产什么。 3、对卷烟制品质量起规范作用。即卷烟原料对卷烟制品起规范作用。 4、协调国家、烟草企业、烟农三者利益。国家得到税收，企业得到利润，烟农等到收益，要通过落实国标来实现。 5、连接国际市场的纽带作用。与国际接轨，利于创汇。 二、国标的组成 1、文字标准：即国标对每一个等级所做的文字规定。每一个等级包涵了级别代号和相应的分级因素。文字标准是国标的核心，实物样品制订以文字标准为依据。 2、实物样品：即按国标的文字标准制作的实物样品。 3、名词术语：即国标中所作用的概念、术语等。 4、分组：分组分级的前奏，是烟叶分级过程中的重要环节。 5、分级因素及档次：界定烟叶等级的重要依据。 6、验收规格：国标中对水分、纯度允差、砂土率、杂色、微带青、青黄、扎把等指标的规定。 7、检验方法：样品抽取，水分、砂土率等的检验方法。 8、烟叶包装、运输、保管：国标中对烟叶包装、运输、保管的具体规定。 第三节烤烟分级标准的发展历史 三、现行烤烟国标的研究制订过程 ?（一）我国15级标准与国外的差距 ?改革开放以后，为实现与国际接轨，对比了当时的标准与国外先进标准，主要的差距有： ?1、部位分得过粗; ?2、对上等烟颜色、光泽要求偏严; ?3、没按颜色、性质、用途分组; ?4、不利于扩大出口; ?5、分级少，等级数目少，级差大，价差也大，收购时等级矛盾突出，难保收购秩序。
烟草的研究现状
烟草的研究现状 1.烟草的简介 烟草属茄科烟草属，一年生草本植物，起源于美洲，是印第安人最早种植并吸食的一种植物。1492年哥伦布发现美洲新大陆时将烟草带回欧洲，1560年法国驻葡萄牙大使尼古特亲自栽种了烟草，在以后的20年间，烟草很快遍布全球，是世界性栽培的嗜好类工业原料作物。烟草叶片含烟碱(nicotine，尼古丁)，采收后经过调制、分级和加工处理，用于制卷烟、雪茄烟、斗烟、旱烟、水烟、嚼烟和鼻烟等[1]。烟草原产于亚热带，现在广泛种植于北纬60°至南纬45°间的广大区域，目前共发现有66个种，大都原产于热带或亚热带。其中有44个种原产中南美洲，20个种原产大洋洲。烟草属中大多为草本，少数是乔木或灌木状，有一年生的，也有多年生的。在烟草的种中，大多数是野生的，只有普通烟草（又称红花烟草）和黄花烟草等有经济价值而进行了人工栽培，还有少数种，如花烟草、美花烟草和粉蓝烟草等因花色美丽而作为观赏植物来栽培[2]。 2.烟草的主要成分 烟草的化学成分极为复杂，按化学组成可分为碳水化合物、含氮化合物、有机酸、萜烯、多酚等。 (一)碳水化合物 烟草中碳水化合物主要为糖类，有单糖、寡糖和多糖。单糖含量是烟叶质量的重要标志，通常品质好的烤烟其烟叶中含有丰富的单糖，而寡糖的含量较少。多糖以淀粉、纤维素、果胶的形式存在于烟草中，含量较高。我国烤烟烟叶含有相当丰富的单糖，一般含量在10％～25 %。 (二)含氮化合物 烟叶含氮化合物主要有蛋白质、氨基酸和酰胺化合物、含氮杂环化合物、烟草生物碱等。蛋白质是烟草植物体的主要营养成分之一，一般含5％～15％。蛋白质燃烧产生臭气，因此烟叶含蛋白质过多会使烟气质量低劣，影响烟叶等级。烟草中含有少量的氨基酸、酰胺，在燃烧以及烟叶加工过程中均产生氨，影响烟草的吸食质量。烟叶中另一种含氮化合物为烟草生物碱，是烟草有别于其他植物的主要标志，其主要成分为烟碱，即尼古丁，约占烟草全豁生物碱的95％以上。烟草生物碱及其盐类具有强烈的水化作用，在酸性条件下随水蒸气挥发，挥发出的游离态烟碱影响烟叶的吸食质量，易使成品吸味辛辣、呛喉。 烟草之所以能成为人类最普遍的嗜好品，主要是由于它含有烟碱，适量的烟碱可使人兴奋，而且如长时间吸烟，身体会逐渐习惯体内保持一定浓度的烟碱，如果低于该浓度，吸烟者通常出现烦躁、恶心等不适症状，并产生强烈的吸烟欲望，渐渐形成烟瘾。烟碱毒性较大，吸入过量会引起头痛、呕吐等中毒症状甚至死亡，对心脏也有很大的毒害作用。 (三)有机酸 烟叶中的有机酸包括挥发性、非挥发性(氨基酸除外)利部分高级脂肪酸，以非挥发性有机酸中的二元酸和三元酸含量相对较高，主要有苹果酸、枸橼酸、琥珀酸、草酸和丙二酸，占5％～18％。这些非挥发性酸对卷烟烟气的香气无明显直接作用，但可以调节卷烟的pH值，醇化烟气，增加烟气浓度，使烟味甜润、舒适。 (四)萜烯类、多酚类化合物
从烟草中提取烟碱
从烟草中提取烟碱 主要仪器与试剂 仪器：烧杯，微型布氏漏斗，抽滤瓶，分液漏斗，圆底烧瓶，锥形瓶。试剂：干燥烟叶2g，5% NaOH溶液20mL，乙醚15mL，饱和苦味酸甲醇溶液，甲醇 1、碱处理。在25mL烧杯中加入2g干燥碎烟叶和2mL 5% NaOH溶液，搅拌10min，然后用带尼龙滤布的布氏滤斗抽滤（1），并用干净的玻塞挤压烟叶以挤出碱提取液。接着用4mL水洗涤烟叶，再次抽滤挤压，将洗涤水合并至碱提取液中。 2、醚萃取。将黑褐色滤液移入25mL分液漏斗中，用15mL乙醚分三次萃取。萃取时应轻旋液体，勿振荡漏斗以免形成乳浊液导致分层困难。上层醚相从漏斗上口倒入25mL圆底烧瓶中（2）。 3、蒸去乙醚。合并醚萃取液，在水浴上蒸去乙醚（3），并用水泵将溶剂抽干。 4、重新溶解。残留物中加入2滴水和1mL甲醇，使残渣溶解，然后将溶液通过放有玻璃毛的短颈漏斗滤入25mL烧杯中，并用1mL甲醇涮洗烧瓶和玻璃毛，合并至烧杯中（4）。 5、制备衍生物。在搅拌下往烧杯中加入2mL饱和苦味酸盐的甲醇溶液，立即有浅黄色的二苦味酸烟碱盐沉淀析出。用玻砂漏斗过滤，干燥称重，测定熔点，并计算所提取的烟碱的百分产量。此操作所得二苦味酸烟碱盐熔点：217~220℃。 6、重结晶。用刮刀将粗产物移入10mL锥形瓶中，加入4mL 50%乙
醇-水（V/V）溶液，加热溶解，室温下静置冷却，析出亮黄色长形棱状结晶。抽滤，烘干，称重，测熔点。纯二苦味酸烟碱盐的熔点为222~223℃。 注释（1）滤纸在碱液中会很快溶胀并失去作用。此处宜采用尼龙滤布挤压过滤。（2）在分液漏斗中进行乙醚萃取时，应注意不时放气，减低乙醚蒸气在漏斗内的压力。此时可一手握紧上口旋塞，让漏斗倾斜下支管口朝上，另一只手打开分液旋塞放气，或者在垂直放置时打开上口旋塞放气。在分离液层时，应小心使醚层与夹杂在中间的出现在漏斗尖底部的少量黑色乳状液相分离。上层液从上口倒出，下层液从下口放出。（3）乙醚易燃。在蒸馏乙醚时应用水浴加热，不能直火加热。同时开窗通风，避免外泄的乙醚蒸气富集遇火点引燃，酿成火灾！（4）烟碱毒性极强，其蒸气或其盐溶液吸入或渗入人体可使人中毒死亡。高浓度的烟碱液操作时务必小心。若不慎手上沾上烟碱提取液，应及时用水冲洗后用肥皂擦洗。
烟草转化方法及各类培养基配方
表1 烟草转化中使用培养基 Table.1 List of the culture mediums in genetic transformation of tobacco 培养基 Culture medium 成分 ingredients pH值 pH 继代培养基 Subculture medium MS 5.8 共生培养基（To） Symbiotic culture medium MS+2.25mg/L6-BA+0.3mg/LNAA 5.8 筛选培养基（To＋） Sifting medium MS+2.25mg/L6-BA+0.3mg/LNAA+400mg/Lcef+100mg/Lkam 5.8 壮芽培养基（P8＋） Budding selection medium MS+0.1mg/L6-BA+0.01mg/LNAA+400mg/Lcef+100mg/Lkam 5.8 生根培养基（1/2MS＋） Rooting medium 1/2MS+400mg/Lcef+100mg/Lkam 5.8 注：cef：头孢霉素，kam：卡那霉素； Note: cef: cefotaxime；kan: Kanamycin MS基础培养基配方：（1L的配方）1/2 MS基础培养基配方：（1L的配方）MS 大量：50ml MS 大量：25ml MS 微量：5ml MS 微量：2.5ml MS 铁盐：5ml MS 铁盐：5ml MS 有机：5ml MS 有机：5ml 糖：30g 糖：30g 琼脂：7.5g 琼脂：7.5g 6-BA母液浓度：0.5mg/ml NAA母液浓度： 0.5mg/ml Cef（头孢霉素）母液浓度：200mg/ml Kam（卡那霉素）母液浓度：100mg/ml 注意：高温会导致Cef（头孢霉素）和Kam（卡那霉素）分解，因此需要在培养 基灭菌冷却后再在超净工作台内加入。 LB培养液配方：（1L的配方） NaCl 10g （10g/L） 胰蛋白胨（TRYPTONE）10g （10g/L） 酵母提取物（YEAST EXTRACT）5g （5g/L） LB固体培养基在液体配方的基础上1L加13g琼脂粉。
烟草主要酚类物质研究进展
烟草主要酚类物质研究进展 张秋芳1,刘奕平2,刘波1, 谢小丹2，林培章2，史怀1,黄素芳1 (1福建省农科院生物技术研究所,福建福州 350003；2福建中烟工业公司)摘要：酚类物质是影响烟草生长发育及其采后制品品质的重要物质之一。文章着重从烟草酚 类物质对烟叶品质形成的影响、烟草酚类物质的代谢、调节和积累以及影响烟叶酚类物质代谢 和转化的因子等方面，综述烟草酚类物质的研究进展，提出了进一步研究的重点，以及当前福 建省开展烤烟酚类物质的生化变化及其调控技术研究的重要意义。 关键词：烟草；酚类物质；生理代谢；调控技术；品质 Research advance of polyphenols in tobacco ZHANG Qiu-fang1，LIU Yi-ping2，LIU Bo 1，XIE Xiao-dan2，LIN Pei-zhang2，SHI Huai1，HUANG Su-fang1 (1 Biotechnology Institute，Fujian Academy of Agricultural Sciences，Fuzhou，Fujian 350003，China; 2 Fujian Tobacco Industry Company，Fuzhou，Fujian 350003，China) Abstract: Polyphenols are important substance which affect the growth of the tobacco and their product quality. The progresses in the research on polyphenols in tobacco, such as metabolism, regulation and accumulation, were summaried in this paper. The effect of polyphenols on the quality of the tobacco, the impaction factors of its metabolism and transformation and so on , were also mentioned. The emphasized fields for the future and the importance of the studies on the biochemical alteration to tobacco polyphenols in Fujian Province were also put forward. Key words: Tobacco；Polyphenols；Physiological metabolism；Regulation technology； Quality 由烟草体内三大物质(糖类、脂类、蛋白质)之间的代谢形成的酚类物质(包括酚及其衍生物) [1]，是影响烤烟生长发育及其采后制品品质的重要物质之一，在烟草生长发育、调制特性、烟叶色泽、烟气香吃味和烟气生理强度等方面都起着重要作用，是研究和衡量烟草品质不可忽视的一个重要因素[2]。已发现的烟草多酚类化合物，包括单宁类、香豆素类、黄酮类、花色素类、简单酚衍生物等；主要的酚类化合物有：绿原酸、芸香苷、莨菪灵和7-羟-6-甲氧基香豆素[3]，绿原酸(咖啡单宁)和芸香苷约占烟草中酚类物质含量的80%以上[4]。 已有的研究表明，多酚类物质的含量与烟叶等级是相一致的，即：高等级烟叶多酚含量高[5]，等级较好的烟叶中，其绿原酸和芸香苷的含量也较高[3]，低等级烟叶多酚含量低[5]。不同来源烟草中，多酚类物质含量变化范围较宽，一般占烟叶重量的0.52~6.04%[4]。烤烟中绿原酸的含量通常在3%以上，芸香苷的变化范围为0.05%~1.6%，平均为0.4%[6]。本文拟从酚类物质对烟叶品质形成的影响开始，着重论述烟草酚类物质的代谢、调节和积累以及影响烟叶酚类物质代谢和转化的因子等方面的研究进展，提出进一步研究的重点与意义。 1 酚类物质对烟叶品质的影响 1.1酚类物质对烟叶颜色的影响 酚类物质对烟草质量的影响，最显著的是对烟叶颜色的影响[5]。酚类物质在氧的存在下均被多酚氧化酶氧化，氧化之后聚合形成结构极其复杂的褐色物质，使烟叶的颜色加深，此即酶催化下的棕色化反应[5]。烟叶发生的棕色化反应，会产生过深的颜色或不同程度的杂色。这不仅影响烟叶的外观质量，而且内部化学成分也大都消耗过度，有利品质的成分减少，比例不协调，内在质量一般也较差。一旦烟叶颜色完全变褐，其酚类物质含量会减少85%，烟叶的芳香吸味因此而变得很差，杂气加重[7]。此外，酶促棕色化反应还会导致糖类等内含物质的大量消耗，使烟叶叶片变薄，重量减轻，弹性变差，破碎度加大，燃烧力减弱，使用价值降低[8]。调制后的干烟叶在贮存、陈化及发酵过程中，随着烟叶 基金项目：福建省自然科学基金资助项目（编号：B0410024） 作者简介：张秋芳(1973-)，女，硕士，主要研究方向：土壤与植物营养及生理生化等方面。
(实验)烟草中提取烟碱
(实验)烟草中提取烟碱
实验三、从烟草中提取烟碱 内容：P93-96和P42-44 一、实验目的（明确） 1、 学习从烟草中提取烟碱的基本原理和方法。 2、 初步了解烟碱的一般性质。 3、 掌握水蒸汽蒸馏的操作技术。 二、实验原理（介绍） 烟草中含有多种生物碱，除主要成分烟碱（约含2 ~ 8 %）外，还含有去甲烟碱、 假木烟碱和多种微量的生物碱。烟碱又名尼古丁，是由吡啶和吡咯两种杂环组成的含氮碱，其结构式如右图： 烟碱能与HCl 结合生成烟碱盐酸盐（弱碱强酸盐）而溶于水中，在此提取液中加入强碱NaOH 后，可使烟碱游离出来。 + HCl → 游离烟碱在100℃左右具有一定的蒸气压。因此，可利用水蒸气蒸馏法分离提取。 N N CH 3 N N CH 3 N N CH 3
由烟碱的结构可知，烟碱具有碱性，它不仅可以使红色石蕊变蓝，还可以使酚酞试剂变红，并可以被KMnO4溶液氧化生成烟酸，与生物碱试剂作用产生沉淀。 附：水蒸气蒸馏原理（见书P46） 三、实验仪器与试剂（要求学生认真检查） 1. 仪器 长颈圆底烧瓶（250 mL）圆底烧瓶（100 mL）直形冷凝管电热套玻璃棒试 管止水夹 蒸汽导管（导入、导出）烧杯（100 mL）球形冷凝管接液管T形管滴 管洒精灯 锥形瓶（100 mL）量筒（100 mL） 2.试剂 烟叶（或烟丝）HCl溶液10 % NaOH 40 % KMnO40.1 % 酚酞0.1 % Na2CO3 5 % 苦味酸（饱和） 3. 其它 红色石蕊试纸沸石 四、实验内容（简单介绍） 1、烟碱的提取 取一支烟，拨去外纸，将烟丝置于100 mL 圆底烧瓶内，加入20 mL10％HCl溶液，安装好回流装置，回流20 min。（如图3. a） 将反应化合物冷却至室温，在不断搅拌下慢慢滴加40％NaOH溶液，使之呈明显碱性（用红色石蕊试纸检验）。 按图3. b安装好水蒸汽蒸馏装置。通入冷却水后，用电热套加热水蒸汽发生器，当有大量水蒸汽产生时，关闭T形管上的止水夹。
烟叶提取物
烟碱和茄尼醇提取工艺简介 1．1材料 废烟叶，由福建龙岩烟草生产基地提供．烟碱、茄尼醇标准品，购自山东安隆医药生物工程有限公司，纯度分别为98％和97．7％． 1．2方法 1)烟碱与茄尼醇的提取与纯化方法．取一定量的废烟叶，压成碎片．加入硫酸水溶液提取烟碱，离心，分别收集烟碱提取液与烟叶渣．烟碱粗提物经732阳离子交换树脂富集、汽提蒸馏、石油醚萃取等方法纯化，即获得高纯度烟碱．将上述烟叶渣用丙酮提取，获得茄尼醇粗提物．粗提物经皂化、石油醚一水萃取后，再经大孔树脂柱层析分离、结晶，即获得高纯度茄尼醇． 2)烟碱的分析方法．采用鞣酸显色法进行烟碱的定性分析．采用液相色谱法进行烟碱的定量分析(HPLC SHIMADZU，色谱柱Nova—Pak C18 3．9 mm x 150 mm，流动相磷酸氢二钠缓冲液(pH3．8，三乙胺含量为0．2％)：甲醇=95：5，检测波长259 nm)． 3)茄尼醇的分析方法．采用薄层色谱法进行茄尼醇的定性和半定量分析(展开剂：石油醚：乙酸乙酯=4：1)．采用液相色谱法进行茄尼醇的定量分析(HPLC SHIMADZU，色谱柱Nova —Pak C18 3．9 turn×150 mm。流动相：甲醇：乙腈=95：5，检测波长210 rim)．2．1废烟叶中烟碱与茄尼醇的含量测定 取废烟叶10 g，用200 mL含0．5％硫酸的新鲜硫酸水溶液，在30℃条件下提取3 h．重复提取4次．第1次提取，烟碱提取率可达95．2％．提取2次废烟叶中烟碱提取率达到99．9％．第3次提取时，所得烟碱量小于1 mg，可认为提取2次废烟叶中烟碱已经被基本提尽．取同一批废烟叶10 g，加入100 mL丙酮，表1烟碱与茄尼醇的含量测定【10 g 废烟叶)在50℃条件下提取5 h．重复提取4次．2次提Tab．1 Determination of content of solanesol and取，茄尼醇提取率达到94．3％．第4次提取时，提取液中茄尼醇浓度小于检测极限．烟碱与茄尼醇的含量测定数据见表1．本实验所用废烟叶原料的含水量为8．1％，烟碱与茄尼醇的含量分别为3．34％与1．23％． 2．2.1烟碱提取条件的优化 烟碱为强极性碱性物质，可采用水为溶剂进行提取．利用硫酸水溶液进行烟碱提取，有利于提高烟碱提取率．对影响烟碱提取率的主要目素(提取液中硫酸用量、提取温度、提取时间、液固比及提取次数)进行了优化研究．经优化的提取条件为：硫酸用量0．5％，30℃，提取时间2 h，液固比20：1，提取次数1次． 在该条件下重复实验3次，烟叶烟碱的平均提取率为94．与％，提取物中烟碱含量约为10％一12％(干重)． 2．2．2烟碱的汽提蒸馏 汽提蒸馏不仅可以去除色素，还可以去除其它可溶性杂质．在蒸馏之前，需向洗脱液中加入适量强碱溶液(调pHl3以上)，以保证蒸馏过程中烟碱始终以分子状态存在．采用鞣酸显色法快速判定蒸馏结束时间，若蒸出液遇鞣酸无明显白色沉淀出现，则可停止蒸馏。得率98.2%以上。蒸出液中烟碱含量可达95%以上（干重）。 2.2.3蒸出液有机溶剂萃取 邮寄溶剂萃取的目的是实现烟碱与水的分离。对蒸出液进行真空浓缩，得到烟碱浸膏。再加入高浓度氢氧化钠溶液，使烟碱处于中性分子状态，这时用等体积石油醚萃取2次，烟碱的萃取率达到95%以上。 2.2.4真空回收溶剂获得烟碱 由于烟碱挥发性很强，真空回收溶剂获得烟碱的过程中，部分烟碱将随溶剂蒸出，但该部分烟碱可随溶剂重复使用，烟碱损失率小于5％．石油醚蒸出后，最终获得无色或淡黄色的烟
(实验)烟草中提取烟碱之令狐文艳创作
实验三、从烟草中提取烟碱 令狐文艳 内容：P93-96和P42-44 一、实验目的（明确） 1、学习从烟草中提取烟碱的基本原理和方法。 2、初步了解烟碱的一般性质。 3、掌握水蒸汽蒸馏的操作技术。 二、实验原理（介绍） 烟草中含有多种生物碱，除主要成分烟碱（约含 2 ~ 8 %）外，还含有去甲烟碱、假木烟碱和多种微量的生物碱。烟碱又名尼古丁，是由吡啶和吡咯两种杂环组成的含氮碱，其结构式如右图： 烟碱能与HCl 结合生成烟碱盐酸盐（弱碱强酸盐）而溶于水中，在此提取液中加入强碱NaOH 后，可使烟碱游离出来。 + HCl → 游离烟碱在100℃左右具有一定的蒸气压。因此，可利用水蒸气蒸馏法分离提取。 由烟碱的结构可知，烟碱具有碱性，它不仅可以使红色石蕊变蓝，还可以使酚酞试剂变红，并可以被KMnO 4溶液氧化生成烟酸，与生物碱试剂作用产生沉淀。 附：水蒸气蒸馏原理（见书P46） N N CH 3
三、实验仪器与试剂（要求学生认真检查） 1. 仪器 长颈圆底烧瓶（250 mL）圆底烧瓶（100 mL）直形 冷凝管电热套玻璃棒试管止水夹 蒸汽导管（导入、导出）烧杯（100 mL）球形冷凝管 接液管 T形管滴管洒精灯 锥形瓶（100 mL）量筒（100 mL） 2.试剂 烟叶（或烟丝）HCl溶液10 % NaOH 40 % KMnO40.1% 酚酞 0.1% Na2CO35 % 苦味酸（饱和） 3. 其它 红色石蕊试纸沸石 四、实验内容（简单介绍） 1、烟碱的提取 取一支烟，拨去外纸，将烟丝置于100 mL圆底烧瓶内， 加入20 mL10％HCl溶液，安装好回流装置，回流20 min。 （如图3. a） 将反应化合物冷却至室温，在不断搅拌下慢慢滴加40％NaOH溶液，使之呈明显碱性（用红色石蕊试纸检验）。 按图 3. b安装好水蒸汽蒸馏装置。通入冷却水后，用电 热套加热水蒸汽发生器，当有大量水蒸汽产生时，关闭T形管 上的止水夹。 收集约10 mL提取液后，先打开止水夹，再停止加热[2]。 待体系稍冷却，关闭冷却水。 2、烟碱的性质检验 （1）碱性试验：取10滴烟碱提取液，加入1滴0.1%酚酞 试剂，振摇并观察现象。另取1滴烟碱提取液在红色石蕊试纸 上，观察试纸的颜色变化。解释上述现象。 （2）氧化反应：取20滴烟碱提取液加入1滴0.1％KMnO4
烟草化学成分分析讲义
烟草化学成分分析讲义 任课教师：保志娟 第一章：绪论 第一节烟草质量与烟草化学成分 一、烟草质量（综合概念）烟草质量是一个综合概念，主要包括：外观质量、 内在质量、物理特性、化学成分、安全性。 1、外观质量是指人体感官直接感触和识别的烟叶外观特性，即人体感官可以作出判定的烟叶外观质量因素，是以眼观、手摸、鼻闻等经验性感觉判定，是烟叶分级的主要依据。 2、内在质量是指烟叶燃烧时，吸烟者对香气、吃味的综合感受，包括香气、吃味、劲头、杂气、刺激性、余味等。评吸是鉴定内在质量的重要手段。 3、物理特性是指烟叶的外部形态和物理性能，包括烟叶的填充性、抗碎性、吸湿性、燃烧性、弹性等。 4、化学成分包括烟叶化学成分和烟气化学成分。烟草品种特征由烟草的化学 成分决定，任何影响烟草化学成分的因素（包括烟草品种、种植、加工等）都会改变烟草的品种特征。因此对烟草化学成分的研究对于指导烟草的工农业生产具有重要意义。 5、安全性是指化学农药残毒和卷烟烟气中的有害物质状况等。（焦油、烟碱、亚硝酸盐、亚硝胺、CO、NO、NH2、HCN等） 小结： 优质烟叶和烟制品：具有完美的外观特征、优良的内在品质（即香气和吃味）、完善的物理特性、协调的化学成分、无毒无害相对安全。烟叶和烟制品的质量概念具有地域性、时间性和适应性。 二、烟叶化学成分与烟草质量的关系 烟草化学成分的结构、性质和含量，是烟草化学研究的基础。烟草内在化学成分是烟叶品质的“内在”标准，烟叶外观特征是内在化学成分的具体体现。（一）烟叶化学成分与外观质量的关系 1. 颜色与光泽 烟叶的颜色是鉴别烟叶外观品质的重要因素之一。一般情况下，烟叶中总氮量、烟碱含量和石油醚提取物含量较高时，烟叶的颜色较深。同时，一些化学成分的变化也直接影响烟叶颜色与光泽。 （1）烟叶生长过程产生的色素。如质体色素中的叶绿素、胡萝卜素和叶黄素，这些色素在烟叶调制过程中绝大部分被分解。新鲜烟叶中色素的组成及总量随着烟草的品种类型和生长阶段的不同而变化。 （2）烟叶调制过程中形成的多酚类化合物。如芸香苷、绿原酸等在过氧化酶的作用下与蛋白质、氨基酸等反应生成的深色物质。——酶参与的棕色化反应。
不同品种烤烟鲜叶表面提取物的主要成分分析
2011-06，32（3）中国烟草科学 Chinese Tobacco Science 51 不同品种烤烟鲜叶表面提取物的主要成分分析 朱显灵1，潘文杰2，陈懿2，陈伟2，李章海1，张纪利1，徐增汉1，李洪勋2 (1.中国科学技术大学烟草与健康研究中心，合肥 230051；2.贵州省烟草科学研究所，贵阳 550023) 摘要：选择贵州省4个主要烟草品种，分下、中、上3个部位采收成熟鲜叶，用二氯甲烷提取叶表面物质进行分析检测。结果表明，烤烟鲜烟叶表面提取物主要包括烟碱、酮类、萜烯类和烷烃类。烟碱含量最高，酮类含量甚微。萜烯类物质是烟草叶表面提取物的主要成分，主要是西柏烷类，包括西柏烷、西柏三烯一醇和西柏三烯二醇。西柏三烯二醇含量高于西柏三烯一醇，β-西柏三烯醇二醇含量较α-西柏三烯醇二醇稍多。烷烃类主要是三十烷以上的高级烷烃，含量较多。不同品种鲜叶表面提取物总量存在明显差异，南江3号最低，K326次低，贵烟201较高，云烟85最高。 关键词：烤烟；鲜叶；叶表面提取物；萜烯类 中图分类号：S572.02文章编号：1007-5119（2011）03-0051-06 DOI：10.3969/j.issn.1007-5119.2011.03.011 Analysis of Major Cuticular Components from Green Leaf of Different Flue-cured Tobacco Varieties ZHU Xianling1, PAN Wenjie2, CHEN Yi2, CHEN Wei2, LI Zhanghai1, ZHANG Jili1, XU Zenghan1, LI Hongxun2 (1. Research Center of Tobacco and Health, University of Science and Technology of China, Hefei 230051, China; 2. Guizhou Tobacco Science Research Institute, Guiyang 550023, China) Abstract:The major cuticular components from green leaves of three plant positions from four flue-cured tobacco varieties grown in Guizhou were analyzed after extracted with methylene chloride. The result showed that the major cuticular components of green leaves were nicotine, ketones, terpenes and hydrocarbons. Among which, nicotine was the highest and ketones were the least. Terpenes were the main cuticular components from green tobacco leaves, majority of them were cembrenoids, including cembrenoid, cembratriene-ol and cembratriene-diol. There was more cembratriene-diol than cembratriene-ol, as was more β-cembratriene-diol than α-cembratriene-diol. There were good amount of hydrocarbons; most of them were triacontanic high hydrocarbons. There was considerable difference of major cuticular components among varieties. From low to high, four varieties ranked as Nanjiang 3 to K326 to Guiyan 201 to Yunyan 85. Keywords: flue-cured tobacco; green leaf; cuticular component; terpene 烟草腺毛分泌物被认为对烟草品质和香吃味有良好的贡献，不同烟草类型和品种叶表面腺毛密度、分泌物性质和数量存在着明显的差异[1-3]。20世纪50年代以来，国内外科研人员对烟草腺毛形态、密度及其分泌物进行了大量的研究。采用各种方法提取烟草鲜叶和干叶表面提取物，运用气相色谱（GC）和质谱（MS）分析，鉴定出烟草腺毛中主要含有类西柏烷和类赖百当二萜、糖脂、表面蜡和一些微量组分[4-14]。众多研究表明，影响烟草腺毛特征及其分泌物特点的主要因素是遗传构成。Burk 等[15]指出具有非腺型或简单腺毛的烟草并不产生大量的二萜烯、蔗糖酯、脂肪醇和蜡脂。Severson等[16]指出，不同类型的烟草腺毛分泌物存在明显差异。烤烟和白肋烟主要含有α-西柏三烯二醇和β-西柏三烯二醇、脂肪醇及烃类化合物，而香料烟不仅含有以上成分，还含有顺-冷杉醇、赖百 基金项目：贵州省烟草专卖局（公司）科技重大专项“贵州省特色优质烟叶研究开发”（200704） 作者简介：朱显灵，博士，副研究员，主要研究方向为烟草栽培生理生态及烟草科技政策与管理。E-mail：xlzhu@https://www.360docs.net/doc/9c3888388.html, 收稿日期：2009-11-29
烟碱的提取与提纯
烟碱的提取 粗提取：水蒸气蒸馏法提取烟碱 一、实验部分 1、仪器和药品 仪器: 2000ｍＬ、1000ｍＬ短颈圆底烧瓶，安全管，玻璃导管,乳胶管，T 形管，蒸馏头，冷凝管，真空尾接管，锥形瓶，50ml 烧杯 药品及材料：烟沫，10%HCl，４0%NaOH，红色石蕊试纸，酚酞试剂，０.５%高锰酸钾，５％碳酸钠 ２、预处理装置 （以实际实验为准） 取烟沫30.00g放入1000mL圆底烧瓶内, 加入10%H C L300mL，摇匀， 装上球形冷凝管回流40min。 ３、提取装置 待冷却后，用40%NaOH 中和至明显碱性( 充分搅拌，pH大约为12，大约加125mL) 。安装装置，进行
水蒸气蒸馏。蒸馏大约45min后，嗅到尾接管那气味明显变淡，停止蒸馏。大概接收到70mL提取液。 二、性质实验 1、取得到的粗盐20滴于烧杯中，加2滴高锰酸钾，看到溶液有紫红色变为棕色到变得更深，再加6滴碳酸钠溶液，微热有褐色的沉淀产生。 2、用酚酞检验，变红。 3、用红色石蕊试纸检验，变蓝。 烟碱的提纯：萃取 一、用氯仿萃取 1、用粗提取液与氯仿 5:1的比例在分液漏斗中进行两次萃取，下层液体从下口流出用烧瓶装。 2、蒸除氯仿 3、再用减压蒸馏收集121-123℃的馏分，得到无色油状液体。
二、用乙醚萃取（50mL提取液） 1、将粗提取液用90mL乙醚分三次萃取，萃取时应轻旋液体，勿振荡漏斗以免形成乳浊液导致分层困难；萃取过程中要经常放气，取上层醚相 2、合并醚萃取液。 烟碱含量的测定 一、蒸除乙醚 1在通风厨内、室温下直接蒸除掉乙醚 2 用分光光度计测量烟碱的含量 参比溶液的配置 ⑴经资料显示最大吸收波长为420nm，标准烟碱溶液的吸收曲线公式为：y=0.1764+2.2918x, y为吸光度，x为烟碱的浓度（mg/ml）. ⑵样液2.0ml，加pH5.0柠檬酸-磷酸二钠缓冲溶液2.0ml，饱和甲基橙溶液2.0ml,摇匀后加入20ml氯仿，振荡2-3min,静置3-5min,分离出下层萃取液后立即用分光光度计测量. 二、回收氯仿 用简易蒸馏装置冷凝回收氯仿
影响烟草烟碱含量的因素
影响烟草烟碱含量的因素 摘要：通过对影响烟草中烟碱含量的因素分析及对这些影响因素的进一步探讨， 阐述了烟碱的特性和生理作用，提出了增加烟碱含量、提高烟草品质的有效措施。本文综述了国内外有关农艺措施对烟叶烟碱含量的影响研究进展，为烟叶生产中控制烟碱含量提供一定的理论基础。 关键词：烟草烟碱栽培措施烟叶生产 烟碱是烟草植株所特有的生物碱，占烟草栽培品种生物碱总量的90-95%[1-2]。人们抽烟的目的就是吸食烟草中的烟碱，从中获得一种生理上的满足。过低时烟气平淡，吸食者不易满足，过高时烟味浓烈，而且不利于健康。因此，烟碱是衡量烟草品质的重要因素。近年来，我国部分烟区烟叶外观质量接近国际水平，但烟叶化学成分不协调，主要问题之一是烟碱含量偏高，烤烟烟碱含量高达3%～4%，白肋烟烟碱含量高达6%，造成的烟叶可用性低。为生产高品质的烟叶就要求对烟碱形成的相关因素进行深入研究。本文主要对国内外有关影响烟碱含量的报道进行综合分析，为生产中采取有效的降低烟碱含量的调控措施提供理论依据。 一、品种（遗传因素） 通过对白肋烟种质资源的研究发现，其中部烟叶的烟碱含量分布在2.278%－6.98%之间。经研究表明烟草鲜叶烟碱含量的高低受多基因控制，属于数量性状，它的遗传取决于多个具有累加效应的基因，其遗传力较小，受环境因素影响较大，在后代选择该性状效果不理想。现在我们已筛选出了部分烟碱含量较低的资源材料，通过选配杂交组合可望在杂交后代群体中选择到烟碱含量适宜的新品种。 二、施肥
由于氮元素是合成烟碱主要元素之一，减少土壤中氮的含量及降低氮肥含量可降低烟叶烟碱含量。 氮素在烟株生长发育过程中起着重要的作用[3]，随施氮量增加，烟叶中烟碱含量也呈增加趋势，两者之间存在极显著的正相关[4-6]。左天觉[7]认为，在栽培上，施氮量对烟草生长和烟碱的积累影响最大。徐晓燕[8]等人对烤烟品种云烟85的研究表明，不同形态的氮肥对烟碱积累的影响也不同，三种形态的氮肥中，尿素施用后，烟碱积累最高，硝铵次之，硝酸钾处理的烟碱积累最低，比施用尿素低27%，表明施用NO3-N烟草积累烟碱少。 生物有机肥，具有增进土壤肥力、改善土壤微生物环境、提高肥料利用率、增强烟株抗病能力、无毒无害、无环境污染等优点。彭华伟[9]研究表明，施用生物有机肥可以促进烟碱的提前积累，会对下部叶烟碱含量产生有利影响，使上部叶的烟碱的积累增加，但增加不大，有机氮含量为50%的生物有机肥的烟叶由于烟碱积累提前，因此烟叶中的烟碱含量较其他处理高。 钾是公认的品质元素，单施氮肥所产生的对品质的不利影响常可以通过施用钾肥而得到不同程度的克服。许多研究结果表明，增加钾肥的施用量能够降低烟叶中的烟碱含量[10]，这主要是由于施钾量的增加导致生物学产量增加而形成的稀释效应[11]。但是Leggett等人的研究结果表明，钾对全氮、总生物碱的含量没有显著的影响，但显著地降低了蛋白质和α-氨基酸的含量[12]。 中、微量元素对烟碱含量也有一定的影响。N.Rosa阐述了Mg与烟碱含量呈负相关关系[13]；T.C.TSo等研究指出，Cu能增加烟碱的含量，而Mo可能会降低烟碱含量。缺乏或过量的Fe、Cu、Mn会使烟碱含量降低[14]。 三、根系 由于烟碱是在根部合成的，根系越多越发达烟碱含量就越高，深栽高起垄比平栽浅起垄具有更发达的根系，平栽浅起垄生产的烟叶烟碱含量较低。 四、留叶数 留叶数越多能有效地使烟株把有限的养分用于地上部的生长，根系生长相应受到抑制，留叶数多能有效稀释根部合成的烟碱总量。近几年来的研究表明，留叶数以24-26片为宜。 五、栽培密度 种植密度对烟碱的影响主要是通过田间小气候的变化来实现的。上官克攀[15]等在东南烟区对几个烤烟品种的研究结果表明，在其他栽培条件相同的情况下，从1025株/666.7m2提到1480株/666.7m2后，叶片烟碱含量降低，上部叶烟碱含量降幅较大，中、下部叶烟碱含量降幅较小；种植密度与新K326上部叶的总烟碱含量呈显著的负相关，即密度越高总烟碱含量越低。这主要是因为随种植密度的增大，烟田光线减弱，湿度增大，通风效果差，而且随种植密度的提高，烟
【CN109966370A】一种烟草活性组分、提取方法及其应用【专利】
(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910167594.8 (22)申请日 2019.03.06 (71)申请人 贵州省烟草科学研究院 地址 550081 贵州省贵阳市观山湖区龙滩 坝路29号 申请人 贵州贵安精准医学研究院股份有限 公司 (72)发明人 杨慧 苏贤坤 王丰 曹军 陈梅 张时山 (51)Int.Cl. A61K 36/81(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 31/04(2006.01) A61P 31/10(2006.01) (54)发明名称 一种烟草活性组分、提取方法及其应用 (57)摘要 本发明提供了一种烟草活性组分、提取方法 及其应用，属于烟草产品加工提取技术领域。本 发明通过对烟草原料进行预处理，并针对预处理 后的烟草原料依次进行常温提取、高温提取、甲 醇提取三次操作，且使用高极性溶剂纯化水、甲 醇作为提取溶剂，通过采用不同提取溶剂不同提 取条件，可以保证将烟草原料中的烟草活性组分 实现充分提取，提高烟草活性组分的提取含量。 实验发现该目的组分具有抗菌、抗肿瘤功能，并 且是低毒性产品。故具有抗菌、抗癌药物开发潜 力， 为新药研发提供理论依据。权利要求书1页 说明书7页 附图3页CN 109966370 A 2019.07.05 C N 109966370 A
权 利 要 求 书1/1页CN 109966370 A 1.一种烟草活性组分的提取方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)预处理：对烟草原料进行烘干处理，以及将烘干处理后的烟草原料进行超微粉碎处理，得到烟草超微粉； (2)常温水提：在烟草超微粉中加入提取溶剂，在常温条件下进行提取操作；对提取操作后的烟草超微粉进行离心处理，并收集离心处理后的沉淀物；步骤(2)中的提取溶剂为纯化水； (3)高温水提：在步骤(2)中收集的沉淀物中加入提取溶剂，在90-100℃的提取温度下进行浓缩提取操作；对浓缩提取操作后得到的浓缩提取液进行降温处理、离心处理，并收集离心处理后的沉淀物；步骤(3)中的提取溶剂为纯化水； (4)甲醇提取：在步骤(3)中得到的沉淀物中加入提取溶剂，在0-4℃的提取温度下进行浸提提取操作，对浸渍提取物进行离心处理，并收集离心处理后的上清，将收集的上清进行旋转蒸发浓缩烘干处理，得到烟草活性组分；步骤(4)中的提取溶剂为85-100％的甲醇。 2.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于， 步骤(1)中的烘干处理是将烟草原料放置在烘箱中进行烘干，使得烘干处理后的烟草原料的含水量小于5％，烘干温度为50-60℃，烘制时间为4-8h； 和/或，步骤(1)中的超微粉碎处理是将烘干处理后的烟草原料，使用50-80目筛网的粉碎机进行粉碎处理，并对粉碎处理后的烟草原料，使用200-400目筛网的粉碎机进行粉碎处理，得到所述烟草超微粉。 3.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于， 步骤(2)中加入提取溶剂的质量是所述烟草超微粉的质量的2-4倍； 和/或，步骤(2)中的提取操作是指将所述烟草超微粉和提取溶剂置于提取罐中，提取时间为0.5-3h； 和/或，步骤(2)中的离心处理是指：离心温度为8-12℃，离心时间为0.5-1.5h，转速为3000-6000rpm/min。 4.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于， 步骤(3)中加入提取溶剂的质量是沉淀物的质量的1.2-2.4倍； 和/或，步骤(3)中的浓缩提取操作的提取时间为0.5-1.5h； 和/或，步骤(3)中的离心处理是指将降温处理后的所述浓缩提取液置于离心瓶中，离心温度为8-12℃，离心时间为0.5-1.5h，转速为3000-6000rpm/min。 5.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于， 步骤(4)中加入提取溶剂的质量是沉淀物的质量的1.5-2.5倍； 和/或，步骤(4)中的浸渍提取操作是指每隔0.5h搅拌一次，提取时间为12-24h； 和/或，步骤(4)中的离心处理是指将所述浸渍提取物置于离心瓶中，离心温度为：3-5℃，离心时间为0.5-1.5h，转速为3000-6000rpm/min； 和/或，步骤(4)中的浓缩烘干处理的温度为60-70℃。 6.根据权利要求1-5中任一所述提取方法提取到的烟草活性组分。 7.根据权利要求6所述烟草活性组分在制备抗菌药物中的应用。 8.根据权利要求6所述烟草活性组分在制备抗癌药物中的应用。 2